超广谱β-内酰胺酶的监测及临床应用
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目前临床上 ＥＳＢＬａ主要 由肠杆菌科细 菌产生 ，尤 以肺炎克 雷伯 菌、大肠埃 希菌 为代表１７１，但 近年来 阴沟肠杆 菌 、铜绿假单 胞菌所 占比例也有所增加 。为 了解西安地 区某 医院产 ＥＳＢＬｓ菌
的发生 率和耐药情 况 ，控 制 ＥＳＢＬｓ院 内的交叉感染 ，笔者对 ２００７年 １月至 ２００８年 １２月 该院临床标本 中 ２ ２０６株革 兰阴 性杆菌 中所分离 出来 的 ３４３株产 ＥＳＢＬｓ菌进行 回顾性分析 ，以 期更好地了解该院 ＥＳＢＬｓ产生菌株 的流行状况及耐药情况 ，指 导临床合理用药。 １ 材 料 与方 法 １．１ 材 料 １．１．１ 菌 株来源 所 有检测菌株 均来 源于 ２００７年 １月至 ２００８ 年 １２月西安地 区某 医院住 院及 门诊患者送检 的痰 、咽拭子 、血 液 、尿 液及分泌物等标本 中分离出来的 ２ ２０６株革兰阴性杆菌 。 共分离到产 ＥＳＢＬｓ菌 ３４３株。
的菌苔 ，充分混匀 ，将此 菌液分装 于已灭菌 的螺旋小瓶 中 ，或用 胶塞密封 ，贴上标签 ，置 于 ４℃的冰箱 中保 存。此法制作 简单 ， 不需要特殊设备 ，且不需要经常移种 ，而且可 以保存数年 ，但要 注意保存的时候需要将其直立放置 。所 以此方法适合 实验 室菌 种 的长期保存。
Ｖｏ１．２７ ２Ｏ０９ Ｎ０．２０
超 广谱 ｐ一内 酰胺 酶 的监 测 及 临床 应 用
冯秋 菊 ，李秋玲 －，殷 彦 ２
（１．西安市卫生学校 ，陕西 西安 ７１００５４；２．西安铁路职工 中等专业学校 ，陕西 西安 ７ａ茵株的现状 ，以期指导 临床合理用药。方法 对西安地 区某医院 ２００７年 １月至 ２００８年 １２片啦
床标本 中 ２ ２０６株 革 兰阴性杆 菌 中分 离 出来的 ３４３株产 ＥＳＢＬａ茵 ，采 用纸片扩散 法、筛选法、确 定法及 双纸片协 同法进行
试验 ，以琼脂扩散法做 药物敏感性试验。结果 产 ＥＳＢＬｓ茵的总阳性率 为 １５．５％。其 中，大肠埃希茵 占５２．８％。肺 炎克雷伯 茵
占 １４．９％，阴沟肠杆 茵 占 １２－３％，铜绿假单胞 茵占 ９．０％，枸橼酸杆 菌占 ５．８％，不动杆 菌 占５．２％。它们 均对第三代 头孢 菌素和
（８）冷冻真空 干燥保存 法：将待存细菌分纯后 ，用准备好 的 牛奶 保护剂洗下 菌苔 ，把菌悬 液滴入菌 种管后 ，在管 口抽取少 许棉花塞 人管内细颈处，放入冰箱中以＿４０ Ｃ的温度速冻 ４０ ｒａｉｎ， 再放 入准备好并 混有盐 的冰 中，接上 真空泵 ，真空抽 干后呈 粉 末状 ，火焰封 口，贴 上标 签 ，保存于 －４Ｏ℃的冰箱 中。 该 法是 目 前保 存菌种 的最佳方法 ，此方 法主要 用于保存 抵抗力差 、对 营 养要求 比较高、容易死亡的菌种。例 如：肺炎链球菌 、奈瑟菌属 、
单环 ｐ一酰胺 类抗 生素呈现 高度耐 药性 ，对亚胺培 南的耐 药菌株极 少见 ，但对氨基糖苷 类、氟喹诺 酮类、磺胺 类抗 生素存在 着
交叉耐药 ，对 头孢西丁的敏感性 可达 ７５．Ｏ％。结论 产 ＥＳＢＬａ，茵的产 生是 细茵对第三代 头孢 菌素 、单环 １３一内酰胺 类抗 生素
耐药的重要机 制，应重视其监测及荮物敏 感性 试验 。治疗由产 ＥＳＢＬａ茵所引起 的感 染。应选择 亚胺培 南、头孢 西丁、含 １３一内
百 日咳鲍特菌 、流感 嗜血杆菌等 ，这些菌种如果用血斜 面 、半 固 体 、血 清斜面等方法保存 ，则需要 １－２周传代移种一次 ，否则培 养基一经干燥 ，营养成分 消耗减少 ，细菌就会死亡。而且因移种 太频繁 ，细菌变异 的几率会增 高。此法具有如下几个 突出的优 点 ：① 适用范围广 。除少数不产生孢子 只产生菌丝体 的丝 状真 菌不宜采用此方法保 存外 ，其他各大类微生物如细菌 、放线菌 、 酵母菌 、丝状真菌及病毒均可采用此方法保存 。② 保存期长 ，可 达 １５年 ，成活率高。③不易变性 、不易污染。④便于携带运输 ， 易实现商品化生产。其 缺点是 ：保存 时需要专用仪器 ，一般实验 室难 以配备 ，而且过 程复杂 ，操作难度大 ，需 要较长时间才能完 成 。所 以此方法适合于有条件的实验室对菌种 的长期保存。
酰胺 酶抑 制剂的复合制剂 以及 药敏试验敏感的 药物才有 效。
关键 词：超广谱 Ｂ一内酰胺酶 ；抗生素 ；耐 药性 ；大肠杆 菌；肺 炎克雷伯 茵
中图分类 号：Ｇ４２４．３１
文献标识码 ：Ｂ
文章编号 ：１６７１—１２４６（２００９）２０－－０１３５－０３
超广谱 Ｂ一内酰胺酶 （Ｅｘｔｅｎｄｅｄ—ｓｐｅｃｔｒｕｍ １３－１ａｃｔａｍａｓｅｓ，ＥＳ－ Ｂｈ）是指革兰 阴性杆菌 中由质粒介导 的能赋予细菌对第三代 头孢菌素类 和单环 Ｂ一酰胺类抗 生素及青霉 素类 抗生素耐药能 力 的一类酶 ，同时也存在着对氨基 糖苷类 、氟喹诺 酮类 和磺 胺类抗生素的交叉耐药 。由于其可 以通过结合、转化 、转导等多 种形 式使 耐药基 因在细菌 间扩散闻，从而造 成严重 的医院暴发 性感染及 院外耐药 菌株 的传播 。因此 ，产 ＥＳＢＬａ菌感染 已成 为 目前医学界广泛关 注的重要感染 问题之一 。
参考文献 ： 【１】吴茂 红 ，吴 时耕 ．菌 种 的保存方 法介 绍 ．江西 医学检 验 ，２００４，２２ （６）：５４５． 【２】胡海林 ，郭维植．细菌实验菌种的保存和管理 福建 医药杂志 ，２０００，２２ （１）：１８２． 【３】黄银欢 ，钟云 ，黄润明．２种 教学菌种保存方法的 比较叨．卫生职业教 育 ，２００６，２４（１５）：１０５． ［４】叶迎春 ，赵 世鸿 ，凌 体淑 ．３种 菌种保存 方法 比较叨．中国误诊 学杂 志 ，２００４，４（３）：３８６．Ａ
（７）湿牛奶冷冻 法：将各 种细菌 接种 于各 自生长 良好 的平 板培养基 上 ，经 分纯后经 ３７￣Ｃ１８—２４ ｈ的培养后 ，用 准备好 的 保护剂牛奶洗下菌苔 ，然后用无菌毛细滴管 吸取菌悬液滴入菌 种管球部，每管球部约有—半的菌液 。之后火焰封 口，保存于＿２Ｏ℃ 的冰箱 中［４１。此方法操作 比较简便 ，不需要特殊设备 ，不需要花 费很 多时间 ，而且菌种保存时 间大 约为 ３年 ，不易变性 ，也不 容 易污染。所以此方法适合对实验室菌种较 长时 间的保存。
的发生 率和耐药情 况 ，控 制 ＥＳＢＬｓ院 内的交叉感染 ，笔者对 ２００７年 １月至 ２００８年 １２月 该院临床标本 中 ２ ２０６株革 兰阴 性杆菌 中所分离 出来 的 ３４３株产 ＥＳＢＬｓ菌进行 回顾性分析 ，以 期更好地了解该院 ＥＳＢＬｓ产生菌株 的流行状况及耐药情况 ，指 导临床合理用药。 １ 材 料 与方 法 １．１ 材 料 １．１．１ 菌 株来源 所 有检测菌株 均来 源于 ２００７年 １月至 ２００８ 年 １２月西安地 区某 医院住 院及 门诊患者送检 的痰 、咽拭子 、血 液 、尿 液及分泌物等标本 中分离出来的 ２ ２０６株革兰阴性杆菌 。 共分离到产 ＥＳＢＬｓ菌 ３４３株。
的菌苔 ，充分混匀 ，将此 菌液分装 于已灭菌 的螺旋小瓶 中 ，或用 胶塞密封 ，贴上标签 ，置 于 ４℃的冰箱 中保 存。此法制作 简单 ， 不需要特殊设备 ，且不需要经常移种 ，而且可 以保存数年 ，但要 注意保存的时候需要将其直立放置 。所 以此方法适合 实验 室菌 种 的长期保存。
Ｖｏ１．２７ ２Ｏ０９ Ｎ０．２０
超 广谱 ｐ一内 酰胺 酶 的监 测 及 临床 应 用
冯秋 菊 ，李秋玲 －，殷 彦 ２
（１．西安市卫生学校 ，陕西 西安 ７１００５４；２．西安铁路职工 中等专业学校 ，陕西 西安 ７ａ茵株的现状 ，以期指导 临床合理用药。方法 对西安地 区某医院 ２００７年 １月至 ２００８年 １２片啦
床标本 中 ２ ２０６株 革 兰阴性杆 菌 中分 离 出来的 ３４３株产 ＥＳＢＬａ茵 ，采 用纸片扩散 法、筛选法、确 定法及 双纸片协 同法进行
试验 ，以琼脂扩散法做 药物敏感性试验。结果 产 ＥＳＢＬｓ茵的总阳性率 为 １５．５％。其 中，大肠埃希茵 占５２．８％。肺 炎克雷伯 茵
占 １４．９％，阴沟肠杆 茵 占 １２－３％，铜绿假单胞 茵占 ９．０％，枸橼酸杆 菌占 ５．８％，不动杆 菌 占５．２％。它们 均对第三代 头孢 菌素和
（８）冷冻真空 干燥保存 法：将待存细菌分纯后 ，用准备好 的 牛奶 保护剂洗下 菌苔 ，把菌悬 液滴入菌 种管后 ，在管 口抽取少 许棉花塞 人管内细颈处，放入冰箱中以＿４０ Ｃ的温度速冻 ４０ ｒａｉｎ， 再放 入准备好并 混有盐 的冰 中，接上 真空泵 ，真空抽 干后呈 粉 末状 ，火焰封 口，贴 上标 签 ，保存于 －４Ｏ℃的冰箱 中。 该 法是 目 前保 存菌种 的最佳方法 ，此方 法主要 用于保存 抵抗力差 、对 营 养要求 比较高、容易死亡的菌种。例 如：肺炎链球菌 、奈瑟菌属 、
单环 ｐ一酰胺 类抗 生素呈现 高度耐 药性 ，对亚胺培 南的耐 药菌株极 少见 ，但对氨基糖苷 类、氟喹诺 酮类、磺胺 类抗 生素存在 着
交叉耐药 ，对 头孢西丁的敏感性 可达 ７５．Ｏ％。结论 产 ＥＳＢＬａ，茵的产 生是 细茵对第三代 头孢 菌素 、单环 １３一内酰胺 类抗 生素
耐药的重要机 制，应重视其监测及荮物敏 感性 试验 。治疗由产 ＥＳＢＬａ茵所引起 的感 染。应选择 亚胺培 南、头孢 西丁、含 １３一内
百 日咳鲍特菌 、流感 嗜血杆菌等 ，这些菌种如果用血斜 面 、半 固 体 、血 清斜面等方法保存 ，则需要 １－２周传代移种一次 ，否则培 养基一经干燥 ，营养成分 消耗减少 ，细菌就会死亡。而且因移种 太频繁 ，细菌变异 的几率会增 高。此法具有如下几个 突出的优 点 ：① 适用范围广 。除少数不产生孢子 只产生菌丝体 的丝 状真 菌不宜采用此方法保 存外 ，其他各大类微生物如细菌 、放线菌 、 酵母菌 、丝状真菌及病毒均可采用此方法保存 。② 保存期长 ，可 达 １５年 ，成活率高。③不易变性 、不易污染。④便于携带运输 ， 易实现商品化生产。其 缺点是 ：保存 时需要专用仪器 ，一般实验 室难 以配备 ，而且过 程复杂 ，操作难度大 ，需 要较长时间才能完 成 。所 以此方法适合于有条件的实验室对菌种 的长期保存。
酰胺 酶抑 制剂的复合制剂 以及 药敏试验敏感的 药物才有 效。
关键 词：超广谱 Ｂ一内酰胺酶 ；抗生素 ；耐 药性 ；大肠杆 菌；肺 炎克雷伯 茵
中图分类 号：Ｇ４２４．３１
文献标识码 ：Ｂ
文章编号 ：１６７１—１２４６（２００９）２０－－０１３５－０３
超广谱 Ｂ一内酰胺酶 （Ｅｘｔｅｎｄｅｄ—ｓｐｅｃｔｒｕｍ １３－１ａｃｔａｍａｓｅｓ，ＥＳ－ Ｂｈ）是指革兰 阴性杆菌 中由质粒介导 的能赋予细菌对第三代 头孢菌素类 和单环 Ｂ一酰胺类抗 生素及青霉 素类 抗生素耐药能 力 的一类酶 ，同时也存在着对氨基 糖苷类 、氟喹诺 酮类 和磺 胺类抗生素的交叉耐药 。由于其可 以通过结合、转化 、转导等多 种形 式使 耐药基 因在细菌 间扩散闻，从而造 成严重 的医院暴发 性感染及 院外耐药 菌株 的传播 。因此 ，产 ＥＳＢＬａ菌感染 已成 为 目前医学界广泛关 注的重要感染 问题之一 。
参考文献 ： 【１】吴茂 红 ，吴 时耕 ．菌 种 的保存方 法介 绍 ．江西 医学检 验 ，２００４，２２ （６）：５４５． 【２】胡海林 ，郭维植．细菌实验菌种的保存和管理 福建 医药杂志 ，２０００，２２ （１）：１８２． 【３】黄银欢 ，钟云 ，黄润明．２种 教学菌种保存方法的 比较叨．卫生职业教 育 ，２００６，２４（１５）：１０５． ［４】叶迎春 ，赵 世鸿 ，凌 体淑 ．３种 菌种保存 方法 比较叨．中国误诊 学杂 志 ，２００４，４（３）：３８６．Ａ
（７）湿牛奶冷冻 法：将各 种细菌 接种 于各 自生长 良好 的平 板培养基 上 ，经 分纯后经 ３７￣Ｃ１８—２４ ｈ的培养后 ，用 准备好 的 保护剂牛奶洗下菌苔 ，然后用无菌毛细滴管 吸取菌悬液滴入菌 种管球部，每管球部约有—半的菌液 。之后火焰封 口，保存于＿２Ｏ℃ 的冰箱 中［４１。此方法操作 比较简便 ，不需要特殊设备 ，不需要花 费很 多时间 ，而且菌种保存时 间大 约为 ３年 ，不易变性 ，也不 容 易污染。所以此方法适合对实验室菌种较 长时 间的保存。