血涂片制备实验报告

一、实验目的
1. 掌握血涂片的制备方法；
2. 了解血液细胞的形态及数量；
3. 培养实验操作技能，提高显微镜观察分析能力。

二、实验原理
血液细胞经涂片、固定和染色后，可体现出不同发育阶段及病理生理改变的白细胞，在细胞体积、细胞质成分及酸碱性、细胞核染色质含量及空间排列状态的差异。

借助显微镜对上述差异进行总体分析，从而将各种白细胞区别开来。

成熟红细胞不含细胞核，细胞质的主要成分是血红蛋白，略呈碱性。

制成血涂片经瑞-吉染色后，
血红蛋白与染液中呈酸性的伊红结合而显桔红色或淡粉红色。

同时，红细胞的各种形态学特点也得以展现。

三、实验器材与试剂
1. 器材：载玻片、盖玻片、血液涂片器、显微镜、细胞计数板、酒精灯、滴管、
擦镜纸、剪刀、镊子、剪刀、烧杯、试管、试管架、显微镜载物台等。

2. 试剂：瑞氏染液、生理盐水、消毒酒精、双氧水、抗凝剂等。

四、实验步骤
1. 采血：用消毒酒精消毒耳垂或手指尖，待干。

用剪刀剪去耳垂或手指尖一小部
分皮肤，使血液自然流出。

如血流不畅，可用消毒棉轻轻挤压。

2. 制备血涂片：取一干净载玻片，用血液涂片器沾取少量血液，滴于载玻片中央。

用另一载玻片作为推片，将推片末端斜置于血液滴的左缘，成30°~40°角。

将推
片稍向后退，使之与血液滴接触，血即向推片末端的两边伸展，并在两载玻片之间的斜角中充满。

此时把推片向前推动，血随推片而行，即涂成血片。

血片的厚薄可由血滴大小、推片速度和两片间的角度大小来调节。

3. 干燥与固定：将制备好的血涂片置于空气中自然干燥，或用酒精灯轻微烘烤。

待干燥后，滴加适量瑞氏染液，染色5~10分钟。

然后用蒸馏水冲洗，待自然干燥。

4. 观察与计数：将染好的血涂片置于显微镜载物台上，用低倍镜观察细胞分布均匀、染色良好的区域。

选用合适的计数板，进行红细胞和白细胞计数。

五、实验结果与分析
1. 观察结果：通过显微镜观察，发现血涂片上红细胞呈椭圆形，无细胞核，细胞
质略呈碱性，经瑞-吉染色后显桔红色或淡粉红色。

白细胞分为粒细胞和淋巴细胞，粒细胞体积较大，细胞核呈圆形或椭圆形，细胞质呈颗粒状；淋巴细胞体积较小，细胞核呈圆形或椭圆形，细胞质较少。

2. 计数结果：根据计数板上的细胞数量，计算红细胞和白细胞数量。

红细胞数量
一般在4.0~5.0×10^12/L，白细胞数量一般在4.0~10.0×10^9/L。

六、实验总结
1. 通过本次实验，掌握了血涂片的制备方法，了解了血液细胞的形态及数量。

2. 提高了显微镜观察分析能力，为后续的临床医学研究奠定了基础。

3. 在实验过程中，应注意以下几点：
（1）采血部位要选择合适，避免出血不畅；
（2）涂片时，推片角度要适中，血滴大小要适中；
（3）染色时间要适中，避免染色过深或过浅；
（4）观察时，应选择细胞分布均匀、染色良好的区域进行计数。

七、实验拓展
1. 研究不同疾病状态下血液细胞的形态及数量变化；
2. 探讨血液细胞与疾病之间的关系；
3. 优化血涂片制备方法，提高实验结果的准确性。