血脂康胶囊中主成份的提取分离与测定

血脂康胶囊中主成份的提取分离与测定
陈丽洁;王振菊
【摘要】研究血脂康胶囊中主成份的分离与测定,将胶囊中红曲成分中的洛伐他汀与化学品洛伐他汀进行分离,并确定分离条件:料液比1:50乙醇、3 s内震荡5次、迅速过滤,复配药物对分离方法进行验证,确定该分离方法可靠有效,测定出一粒胶囊中洛伐他汀的总含量为31.47 mg,其中红曲中洛伐他汀含量为17.14 mg,化学品洛伐他汀为14.33 mg.分析血脂康中功能成分洛伐他汀的组成及含量,为服药者科学合理用药提供基础数据.%Separation and determination of main components in xuexuekang capsule,Lovastatin and lovastatin in the red kojic rice components of the capsule were separated, and the separation conditions were determined. The material liquid was compared to the 1︰50 ethanol,5 times concussion in 3 s, with rapid filtration, and the separation method was verified by the compound medicine. It was determined that the separation method was reliable and effective,the total content of lovastatin in one capsule was determined to be 31.47 mg, in which the lovastatin content in monascus was 17.14 mg, and the chemical lovastatin was 14.33 mg. The composition and content of lovastatin and the functional component of Xuezhikang were analyzed to provide basic data for the scientific and rational drug use of the drug users.
【期刊名称】《广州化工》
【年(卷),期】2018(046)009
【总页数】3页(P58-60)
【关键词】血脂康;主成份;分离;测定
【作者】陈丽洁;王振菊
【作者单位】巴音郭楞职业技术学院,新疆库尔勒 841000;巴音郭楞职业技术学院,新疆库尔勒 841000
【正文语种】中文
【中图分类】TQ91
血脂康胶囊是降血脂、预防动脉粥样硬化的中药制剂。

其降血脂主要有效成分为洛伐他汀(lovastatin)[1],对血脂康中红曲成分洛伐他汀与化学品洛伐他汀进行分离提取并测定其含量,对控制质量确保临床疗效具有重要意义。

用无水乙醇提取,以紫外分光光度法测定,检验结果准确,较好地解决了原料红曲及其制剂中洛伐他汀含量测定问题。

1 主要仪器与试剂
洛伐他汀标准品；洛伐他汀胶囊；血脂康胶囊；红曲样品A；红曲样品B；无水乙醇。

UV765紫外-可见分光光度计；DF-101S恒温加热磁力搅拌器；DGG-101-1电热鼓风干燥箱；SBH-III循环水式多用真空泵。

2 实验方法
2.1 洛伐他汀标准溶液的配制
洛伐他汀标准溶液的配制[2]:准确称取10 mg洛伐他汀标准品,将其放在小烧杯中,用少量的72%乙醇溶解,然后定容于容量瓶中(100 mL),配制成浓度为0.10 mg/mL 的标准溶液,摇匀,存放在4℃冰箱中密封保存。

2.2 洛伐他汀最佳吸收波长的测定
实验测定最佳吸收波长选择处于稳定值的251 nm,测定时的稳定性较好,重现性好。

2.3 洛伐他汀稳定时间
实验每隔一段时间,重复测定,记录数据发现洛伐他汀标准溶液不受光照因素影响,稳定性良好。

2.4 标准曲线的绘制
于251 nm波长处测吸光度A值,并绘制工作曲线。

线性回归方程为
A=10.28571C,该方程的线性相关性系数R=0.99990,洛伐他汀标准品在0.01～
0.06 mg/mL范围内与吸光度呈现良好的线性关系。

2.5 血脂康胶囊中他汀类成分定性分析及总含量测定
本实验从安全性、可食用性考虑,选取乙醇作为提取溶剂,称取血脂康粉末0.1000 g,加入浓度为72%的乙醇溶液(料液比为1∶50),在磁力搅拌下回流提取2.5 h,过滤,
滤液转移至50 mL容量瓶中,用72%乙醇定容,摇匀备用。

取四个容量瓶,标号为1、2、3、4,分别加入上述滤液5 mL,以及洛伐他汀标准溶液
0、1、2、3 mL加入至10 mL容量瓶,定容,摇匀备用。

(1)取1号溶液在200～300 nm波长范围内,进行紫外光谱扫描与洛伐他汀的标准
溶液光谱图进行对比,以确定药物中有效成分是否为洛伐他汀。

(2)取上述加入标准溶液后的溶液,在最佳波长下测定吸光度,绘制标准加入曲线,计算得到第一次提取出洛伐他汀的质量m1。

(3)将滤纸上物质转移至圆底烧瓶中,按照上述提取方法分别进行第二次、第三次连
续提取,通过计算得到质量分别为m2,m3。

根据公式(1)计算血脂康药物中洛伐他
汀总质量。

总质量计算公式:
式中:m0——洛伐他汀总质量,mg
m1、 m2、 m3——三次提取测定的质量,mg
2.6 血脂康胶囊中红曲成分与化学成分他汀的分离方法的确定
(1)不同浓度乙醇对红曲中洛伐他汀提取量的影响
称取不同红曲样品0.1000 g,加入到5 mL不同浓度的乙醇溶液,3 s内震荡5次,将溶液迅速过滤,滤液移至25 mL容量瓶中,用乙醇溶液定容,摇匀并静置[3]。

准确移取定容后溶液3 mL,转移至10 mL容量瓶中,用相应的乙醇定容,摇匀并静置后,在最佳波长下测定吸光度。

根据吸光度的值,确定红曲中洛伐他汀溶解量随乙醇浓度变化的关系,确定提取所需的适宜浓度。

(2)提取时间的确定
①称取市售的洛伐他汀胶囊药品,按照料液比1∶50加入一定量的无水乙醇,提取不同时间,用标准加入法测定各个提取时间下提取出的洛伐他汀含量,确定提取时间。

②称取红曲样品0.1000 g,加入5 mL无水乙醇,提取不同时间,根据吸光度的变化确定最佳提取时间。

③提取时振荡频率的确定
精确称取红曲米样品0.1 g,加入5 mL无水乙醇,在3 s内震荡不同的次数,滤液抽滤后定容,并测定滤液吸光度。

2.7 分离方法的验证
称取不同比例洛伐他汀胶囊粉末与红曲米样品A进行混合,总质量为0.1000 g,在混合药品中加入5 mL乙醇溶液,3 s内震荡数次,滤液转移至容量瓶中,用无水乙醇定容,摇匀,备用[4]。

在最佳吸收波长下测定吸光度,并绘制标准加入曲线,计算提取含量。

计算复配药物的提取理论值。

将测量值与理论值进行对比,进行误差分析,判断分离方法可行性。

复配药物洛伐他汀理论值计算公式为
式中:m*——提取理论值,mg
m——加入红曲质量,g
m1——红曲中洛伐他汀总含量,mg/g
m2——复配药物中加入洛伐他汀胶囊总质量,g
α——该试验条件下无水乙醇对红曲中洛伐他汀的提取率,13.98%
2.8 血脂康胶囊中化学成分洛伐他汀的提取与测定
取一粒血脂康胶囊粉末,在80目筛上轻轻研磨,使其全部通过,加入5 mL无水乙醇溶液,3 s内震荡数次,滤液转移至25 mL容量瓶中,并用无水乙醇洗涤抽滤瓶数次,滤液转移至容量瓶中,用无水乙醇定容,摇匀,备用。

滤渣留做红曲中洛伐他汀提取和测定用[5]。

取四个10 mL容量瓶,分别加入上述滤液1 mL,标准溶液各0 mL、1 mL、2 mL、3 mL,用无水乙醇定容,静置3 min后,在最佳吸收波长下测定吸光度,绘制标准加入曲线,计算提取含量。

2.9 血脂康胶囊的红曲成分中洛伐他汀的测定
取“2.8”操作所得滤渣,用相应提取和测定方法进行试验并计算。

红曲中洛伐他汀的质量计算公式为:
式中:M——红曲中洛伐他汀质量,mg
m*——血脂康中洛伐他汀总质量,mg
m1——利用标准加入法测定提取出的洛伐他汀质
量,mg
α——该试验条件下无水乙醇对红曲中洛伐他汀的
提取率,%
洛伐他汀含量计算公式:
式中:ω——洛伐他汀质量分数,%
M——洛伐他汀质量,mg
G——称取测试样品的质量,mg
3 结果
3.1 血脂康中有效成分的定性分析
根据试验方法,得到光谱图,由紫外光谱数据判断,血脂康胶囊提取物中在229 nm,238 nm,246 nm处有明显的吸收峰,与洛伐他汀标准物的三个出峰位置大致相同。

因此可以判断血脂康胶囊中含有洛伐他汀成分。

血脂康胶囊药物中基础成分复杂。

因此,洛伐他汀的测定采用标准加入法。

3.2 标准加入法确定血脂康中洛伐他丁总含量
利用标准加入法测定洛伐他汀含量,绘制标准加入曲线,令标准加入曲线的吸光度值为0,计算得到结果的绝对值即为提取液洛伐他汀含量。

标准加入方程为:
利用标准加入法计算方法,通过计算得到0.1 g血脂康胶囊含有洛伐他汀10.49 mg,因此一粒血脂康胶囊中洛伐他汀总含量为31.47 mg。

3.3 影响红曲成分和化学品洛伐他汀成分分离的因素
(1)不同浓度乙醇对红曲内洛伐他汀的提取效果
浓度增大整个溶解曲线呈现先变大后减小的趋势。

当乙醇浓度大于95%时,溶解曲线不断平缓,为保证分离顺利进行,应选择使洛伐他汀溶解量较小的乙醇浓度,因此本实验选择无水乙醇作为分离溶剂[6]。

(2)无水乙醇对化学品洛伐他汀溶解效果确定
洛伐他汀易溶于乙醇的性质,化学品洛伐他汀在无水乙醇中较短时间内全部溶解,其
中提取时间为3 s时吸光度为0.5393,10 s时吸光度为0.5389,120 s时吸光度为0.5402,随着时间增大,提取效果并无明显提高,考虑经济因素选择提取时间为3 s。

(3)无水乙醇对红曲洛伐他汀溶解效果确定
随着溶解时间的增加,红曲在无水乙醇中的溶解度逐渐增大,2 s时吸光度为
0.0889,3 s时吸光度为0.1127,5 s时吸光度为0.1500,3～5 s变化较大,故选用2 s。

(4)震荡频率的确定
震荡次数为2次时吸光度为0.0924,3次时吸光度为0.1128,4次时吸光度为
0.1130,5次时吸光度为0.1132,8次时吸光度为0.1133,由数据可以得到当振荡次
数大于4次时,提取液吸光度基本稳定,因此选择3 s内震荡5次为实验的提取条件[7]。

应用正交实验法,确定最佳分离条件:按照料液比1∶50,使用无水乙醇三秒钟内震荡
5次。

该条件下可以将游离态化学品洛伐他汀全部溶出。

3.4 最佳分离条件下红曲成分中洛伐他汀的提取率
试验表明,利用无水乙醇对红曲进行快速提取,提取量主要取决于红曲的粒度,乙醇与红曲的接触面积,与红曲种类无关。

最佳条件下使用无水乙醇对红曲中的洛伐他汀
以13.98%的比例溶解出来。

即可根据该提取率,建立分离条件:按照料液比1∶50
加入一定量的无水乙醇,3 s内震荡5次,迅速过滤。

3.5 分离方法验证结果
(1)洛伐他汀胶囊粉末标准曲线法,与说明书给出含量比较
取一粒市售的洛伐他汀胶囊粉末,按照料液比1∶50加入一定量的无水乙醇,3 s震
荡5次,抽滤并洗涤,定容至50 mL容量瓶,取0.50 mL待测液于10 mL容量瓶
中,251 nm下测定A值,带入洛伐他汀标准曲线回归方程,计算洛伐他汀含量,与说
明书比较,结果见表1。

表1 洛伐他汀胶囊中含洛伐他汀质量Table 1 Lovastatin quality in lovastatin capsule10.2056 19.99 2 0.2057 20.00 20.00 3 0.2055 19.98
由实验结果可知,根据提取条件,一粒胶囊中洛伐他汀含量为19.99 mg,与说明书中理论值20.00 mg接近,绝对误差小于0.01 mg,测定方法可靠。

(2)复配药物对分离方法的验证
验证分离方法的可靠性,结果表明试验相对误差在-0.11%～0.31%之间,该分离方法对化学品洛伐他汀与红曲中洛伐他汀的分离可靠,可以用来分离测定血脂康药物中红曲中洛伐他汀含量。

3.6 血脂康胶囊中化学成分他汀及红曲成分的测定
对血脂康药物进行分离,并测定滤液吸光度,得到数据见表2。

表2 标准加入法测定血脂康胶囊分离溶液的吸光度Table 2 Determination the absorbance of the solution in standard addition method1 0.4738 0.5021 0.5309 0.5588 16.70 2 0.4744 0.5026 0.5312 0.5601 16.60
两次试验结果取平均值,带入公式(3),计算可以得到血脂康胶囊中红曲所含有的洛伐他汀质量为17.14 mg,由于血脂康胶囊洛伐他汀主要存在于红曲中,除此之外,还有化学合成的洛伐他汀添加成分,两部分总含量为31.47 mg,因此,洛伐他汀化学品的添加成分为14.33 mg。

4 结论
定性分析血脂康中的洛伐他汀成分,并提取测定洛伐他汀总含量:一粒血脂康胶囊中含31.47 mg洛伐他汀。

确定了红曲成分洛伐他汀与化学品洛伐他汀的分离方法:按照料液比1∶50,使用无水乙醇三秒钟内震荡5次。

并验证了方法的可靠性。

测定出血脂康胶囊中红曲所含有的洛伐他汀含量为17.14 mg,洛伐他汀化学品的添加成分为14.33 mg。

参考文献
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