初始污染菌校正因子的测定报告

深圳市麦瑞科林科技有限公司
初始污染菌校正因子确认报告
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2010-06-03发布2010-06-10实施编制：审核：批准：
目录1 概述
2确认依据
4 确认过程
3．1洗脱液的制备
3．2 营养琼脂培养基的制备
3．3 接种
3．4 培养
3．5 菌落计数
5 校正因子的计算
6 确认结论
7 再确认
1 概述
公司制定的《初始污染菌检测作业指导书》是用于描述产品中的活微生物群体。

但准确地确定初始污染菌是不可能的，因此，在实践中，采用校正因子将活菌计数转换成产品中初始污染菌评估，此因子用于补偿洗脱效率。

2 确认依据
ISO 11737.1-2006医疗器械的灭菌微生物方法第1部分：产品上微生物总数的测定方法进行测定。

3 确认过程
3．1 洗脱液的制备：分别选取三支新制备的样品一次性使用采血针、宫颈采样拭子，在净化工作台上，用无菌剪刀将每支样品剪碎，称重，放入事先灭菌的具塞三角瓶中，加入约（样品重量×10）ml的pH7.0 氯化钠-蛋白胨灭菌洗脱液，加塞，充分震荡，使样品得到充分的洗脱，然后将洗脱液转移到另一个无菌的具塞三角瓶中，立即盖好备用。

3．2 营养琼脂培养基的制备：将市售的营养琼脂培养基产品按说明书要求进行配制，然后在121℃高压蒸气消毒器内灭菌15min，放入50℃左右的水浴中备用。

3．3 接种：在净化工作台上，用移液管吸取1ml上述制备的洗脱液注入经过灭菌的平皿内，将约15-20ml已融化的45℃左右的营养琼脂培养基倾注到平皿中，并立即旋摇平皿，使水样与培养基充分混匀。

同样方法每组洗脱液做12个平行试验，同时另用一个平皿只倾注1ml灭菌洗脱液于营养琼脂培养基内作为空白对照。

3．4 培养：待上述培养基冷却凝固后，翻转平皿，使低面朝上，置于36±1℃恒温箱中培养48±2h。

3．5 菌落计数：记录各平皿中的菌落数，取平均值，然后再乘以洗脱液总体积数（ml），即得到洗脱液中的全部菌落数。

重复3.1-3.5步，分别进行第二次、第三次、第四次、第五次洗脱，其中第五次洗脱为直接将四次洗脱后的产品接种于培养基内，将五次洗脱后所得的菌落数分别填入数据表1、表2。

5校正因子的计算
用第一次洗脱液得到的菌落数除以五次洗脱得到的总菌落数，得到第一次冲洗去除率，取三套样品的第一次冲洗去除率的平均值，平均值的倒数即为校正因子。

6确认结论
由表1、表2可知，照此检查方法和检查条件进行一次性使用采血针、宫颈采样拭子的校正因子的测定，其结果分别为1.34、1.24。

7 再确认
a）洗脱液的组分发生变化时，其校正因子应重新确认；
b）产品的组分或原灭菌工艺发生变化时，其校正因子应重新确认。

表2一次性宫颈采样拭子校正因子测定数据表
检测人/日期：刘晓琴2010-05-20 复核人/日期：朱德明2010-05-20。