葡萄皮色素提取工艺优化
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葡萄皮色素提取工艺优化
总体思路:葡萄皮→干燥→破碎→乙醇溶剂提取→离心过滤→滤液定容→吸光度测定→分析工艺优化
具体方案:
1. 葡萄皮色素的特征吸收光谱图
称取5.00g葡萄皮粉末于锥形烧瓶中,加入无水乙醇50ml。
置于60℃水浴锅中浸提1小时,将浸提液以3400r/min离心15min最后得到葡萄皮色素溶液在室温下测波长范围在200—800nm的吸光度,并绘制特征吸收光谱图。
从图中找出最适吸收波长,利用在该波长下进行单因素实验。
单因素实验
2.1提取温度的确定
准确称取葡萄皮粉末5份,每份1.0000g,分别置于250mL烧瓶中,乙醇体积分数为80%,加盐酸调节pH至3,按料液比1:50分别在40 ℃,50 ℃,60℃,70 ℃,80 ℃下热回流提取1h后以3400r/min离心15min取葡萄皮色素溶液于50ml烧杯中,然后定容至50mL,吸取0.1mL,加4mL蒸馏水稀释后,测其吸光度。
2.2提取时间的确定
准确称取葡萄皮粉末5份,每份1.0000g,分别置于250 mL烧瓶中,乙醇浓度为80%,加盐酸调pH为3,按料液比1:50,在60 ℃下分别热回流提取40,50,60,80,100,120 min。
分离与测定同上2.1。
2.3提取剂浓度的确定
准确称取葡萄皮粉末5份,每份1.0000g,分别置于250mL烧瓶中,然后分别加入20%,40%,60%,80%,100%体积分数的乙醇溶液,加盐酸调pH为3,按料液比1:50,在60℃下热回流提取1h。
分离与测定同上2.1。
2.4 料液比的确定
准确称取葡萄皮粉末5份,每份1.0000g,分别置于250 mL烧瓶中,乙醇浓度为80%,加盐酸调pH为3,按料液比1:10,1:20,1:30,1:40,1:50,在60 ℃下分别热回流提取1h。
分离与测定同上2.1。
3正交试验
在单因素试验基础上,选取合适的因素为考察因素,每个因素取3个水平设计4因素3水平正交试验,利用正交软件以提取液吸光度值为评价指标,确定葡萄色素最佳提取工艺。
4 验证试验
通过正交试验得出最佳提取温度、时间、乙醇浓度、料液比参数。
根据这些参数进行验证性实验,得出结论。
注意事项:
1.由于PH为3时显较强的酸性可能导致色素结构破坏,影响吸光值的测定。
可以在做单因素试验前做一组PH的副因素设计如下:
准确称取葡萄皮粉末5份,每份1.0000g,分别置于250mL烧瓶中,乙醇体积分数为60%,加盐酸分别调节pH为2.0,2.5,3.0,3.5,4.0,按料液比1:50,在60℃下热回流提取1 h后,将浸提液以3400r/min离心15min,然后定容至50mL,吸取0.1mL,加4mL蒸馏水稀释后,测其吸光度找出最适PH.
2. 侧吸光值时可能出现吸光值偏大或偏小可以适当调整葡萄色素溶液的浓度予以解决。
3.在用比色皿侧吸光值时由于多次反复使用可能造成污染。
所以每轮实验应用乙醇洗净。