尿微量白蛋白(U-ALB)免疫比浊定量QuikRead仪器法)作业指导书

尿微量白蛋白（U-ALB）免疫比浊定量QuikRead仪器法)作业指导书
1.实验原理
QuikRead U-ALB是一种以微粒子包被的抗人白蛋白血清为基础的免疫比浊试验。

存在于样本中的白蛋白和微粒子反应，溶液中浊度的最终变化通过QuikRead仪器被测定。

尿样本被加入缓冲液中在同一比浊杯中进行分析测定。

试剂被预先定标，特定批号的标准曲线被记录在试剂盒提供的磁卡当中。

QuikRead U-ALB和使用比浊法获得的结果相关性良好。

2. 标本采集
2.1 标本采集前病人准备：无需特殊准备
2.2 标本种类：夜尿或随机尿
2.3 标本要求：QuikRead U-ALB试剂盒直接用尿样本（未稀释的样本）进行检测。

尿样本中不建议添加防腐剂。

夜尿样本的采集：采集的夜尿样本，要求至少采集6小时的夜尿。

记录采集尿样本的时间和尿量。

白蛋白的排泄率可根据以下公式计算：
总尿量（ml）*QuikRead U-ALB浓度值（mg/l）/采集时间（min）
=尿微量白蛋白的排泄率（ug/min）
随机尿样本：在随机尿样本中，使用首次晨尿样本可获得十分可靠的结果。

贮存样本在测试以前要求尿样本达到室温。

3. 标本储存：尿样本2-8℃可贮存14天。

尿样本不应当被冰冻保存。

4. 标本运输：室温运输
5. 标本拒收标准：细菌污染、乳糜尿
6. 试剂
6.1 试剂名称：QuikRead U-ALB 试剂
6.2 试剂生产厂家：Orion coporation Orion Diagnostica
6.3 包装规格：50Test/kit
6.4 试剂盒组成：
6.5试剂储存条件及有效期：试剂2-8℃贮存。

缓冲液可在室温下（2-25℃）贮存。

试剂的稳定性可达到试剂盒上印的有效期。

7. 仪器设备
7.1仪器名称：QuikRead 分析仪
7.2仪器厂家：基恩科技有限公司
7.3仪器型号：QuikRead 型
7.4仪器通道选择：采取两个发光二极管：654μm,950μm;吸收范围：0.0-2.5
7.5仪器校准程序：每个试剂盒有一个已知的校正数据，它记录在磁卡上，用以确定分析曲线，让磁卡通过仪器上读卡器，该数据信息就能送入QuikRead仪器之中，然后仪器就处于等待使用状态。

8. 操作步骤
8.1 Read the card (阅读磁卡)：将磁卡在仪器的阅读槽中刷过，磁卡的磁带面向自己。

8.2 Ready for use U-ALB （准备进行U-ALB测定）
8.3 Measuring blank
8.3.1 使用QuikRead分液器加1ml缓冲液到比浊管中。

8.3.2 用毛细吸管加20μl不稀释的尿样本到比浊管中。

（参照注意事项）
8.3.3 将U-ALB试剂帽盖于比浊管上拧紧。

轻轻混匀（不能颠倒）。

不要按压试剂帽的内侧部分。

不要触摸比浊管下部的光洁部分（光学测定部分）。

8.3.4 把比浊管插入到仪器的检测孔中
8.4 Blank measure（测定空白）：仪器测定样品空白。

这最多需要30秒时间。

在检测孔中读空白期间不要触摸比浊管。

8.5 Add reagent（加试剂）
8.5.1 按下试剂帽的内侧部分（例如，可以用手指或者一支笔来按）。

如此将使U-ALB干粉试剂加到比浊管中。

8.5.2 从检测孔中拿出比浊管，快速地颠倒混匀。

比浊管中的溶液变成白色混合物。

8.6 Shake the cuvette（混匀试管）：屏幕显示：告诉你需要多长时间来混匀比浊管（6秒时间）。

移动的一串点表示你混匀的速度。

8.7 Insert the cuvette for measurement （插入比浊管进行测定）：混匀结束后仪器发出三次短暂的嘟嘟声，立即放置比浊管于仪器的检测孔中。

假如比浊管没有放置检测孔中，三秒钟后试验将作废。

注意1：不要触摸比浊管下部的光洁部分（光学测定部分）注意2：假如比浊管没有在规定的时间内放置于检测孔中仪器将显示信息“cuvette inserted too late(比浊管插入太晚)”
8.8 Measuring120s （测定120s）：仪器在2分钟内测定出
尿微量白蛋白的浓度。

结果显示在屏幕上，单位是mg/l.在实验完成之前屏幕上显示实验所需的最多剩余时间。

注意1：在结果没有出来并记录下来之前，不要将比浊管从测定孔中拿出来。

如果拿出来的话会立刻中断测定。

注意2：检查试剂帽的底部塑料物是否脱落在比浊管的下部。

如果在比浊管的下部存在试剂帽的底部塑料物，这可能干扰检测过程。

9. 结果判断与分析：QuikRead 在5-150mg/l之间直接从仪器屏幕给出数字值。

10. 质量控制：定期使用U-ALB 质控液（Cat.No.67881）。

QuikRead U-ALB质控液的瓶子上标有U-ALB的靶值。

11. 计算：直接读取屏幕上显示的数字结果即可。

12 参考值范围：
夜尿样本：<20μg/min；随机尿样本：<20mg/L
13. 临床意义：尿微量白蛋白升高是糖尿病、高血压病并发肾病的早期的危险指标。

肾病是糖尿病最普遍的并发症之一，国际上认为糖尿病病人应当监控早期肾病（1）。

由于微量白蛋白提示早期肾病，因此糖尿病病人每年应当进行多次尿白蛋白的检测。

微量白蛋白尿的及时检测十分重要因为时期
干预能阻止甚至逆转肾病的进程。

由于高血压病人可能发展成为微量白蛋白尿，因此定期检测尿白蛋白浓度对他们也十分有益（2）。

微量白蛋白尿被定义为夜尿样本中白蛋白的排泄率为20-200ug/min或者随机尿样本中白蛋白的浓度为20-200mg/L。

在3-6个月期间三次尿样本中至少有二次阳性被诊断为微量白蛋白尿（3）。

14. 操作性能
14.1方法成熟、结果可靠、操作简便、报告快速（3分钟内出结果）、采样方便（20μl尿液）、定量测试（5-150mg/L）、尿蛋白在40g/L范围内不会出现抗原过剩无须尿蛋白化学检测预筛。

14.2 回收率：90%-107%（126mg/L）
14.3 检测极限：<5mg/L
15. 超出范围结果处理
15.1 仪器设有一套抗原过剩检测系统，因此白蛋白浓度超过150mg/L和达到40000mg/L时仪器显示“>150mg/L”。

15.2 较高的浓度如果需要更精确的值时，必需稀释样品并重新进行测定。

例如：使用0.9%NaCl对比较高浓度的尿样本进行1：5（1+4）
或者1：25（1+24）预稀释，测定稀释的尿样本结果乘以稀释比例。

例如：
稀释比例1：5 稀释比例1：25 1）吸取250μl原尿1）吸取100μl 原尿
2）加入0.9%NaCl1ml 2）加入0.9%NaCl2400μl
3）混匀稀释的尿样本3）混匀稀释的尿样本
4）和测定原尿样本相同4）和测定原尿
样本相同的方法进行分析的方法进行分
析
5）最后尿微量白蛋白的5）最后尿微量白蛋白的结果乘以 5 结果乘以25
16. 方法局限性
16.1试剂中含有<0.1%叠氮钠作为防腐剂。

叠氮物会和金属
反应生成易爆炸的化合物，因此，如有溢出应用水清洗掉。

16.2白蛋白试剂帽中含有<0.1%叠氮钠作为防腐剂。

如果吸入、吞下或者经皮肤接触进入人体对人体是有害的。

17. 当检验系统（仪器）不能工作时，所采取的补救措施：当检验系统（仪器）不能工作时，可联系仪器厂家，进行紧急修理，如一时不能修好，如别的实验室有同类仪器可到别的仪器上先测，如别的实验室无同类仪器，申请厂家送一台能正常工作的仪器代替。

18. 参考文献
18.1 Viberti GC, Mongensen CE, Passa P, et al. St Vincent declaration,1994:Guideline for the prevention of diabetic renal failure.
18.2 Bigazzi R, Bianchi S, Baldari D and Campese V. Microalbuminuria predicts cardiovascular events and renal insufficiency in patients with essential hypertension. J Hypertension,1998;16,1325-1333.
18.3 Mogensen CE, Keane WF, Bennett PH, et al. Prevention of diabetic renal disease with special reference
to ncet,1995;346,1080-1084
19. 注意事项
19.1本试剂只使用于体外测定使用。

19.2不要用过期的试剂。

19.3 质控液中含有来源于人体的材料，已经过测定，HIV、HCV、HBsAg呈阴性，所有材料在56℃1小时已失去活性，但仍当它为传染源处理。

19.4 所有的试剂在使用前必须达到室温。

使用未稀释的样本。

19.5 分液器可准确分液1ml。

将分液器装到缓冲液瓶上并拧紧。

先分几次缓冲液确定分液器功能完好，已分出的缓冲液丢弃不用。

瓶中的缓冲液有多余的以用于可能需要的分液器功能的检查。

缓缓的将分液器的活塞压到底，避免剧烈地压活塞。

压一次分出1ml缓冲液。

为了避免污染，分液器只能用于QuikRead.
19.6 试剂帽中含有白蛋白试剂不能暴露接触水分。

不用的时候应仔细地盖紧铝盖。

19.7 磁卡不能弯折或者接触液体或者强磁体。

19.8 不能混用不同批号的试剂和磁卡。

19.9 QuikRead U-ALB 试剂帽标记有绿颜色以区别于其他分
析试剂。

19.10 建议所有使用过的试剂和材料丢弃前经过高压灭菌（121℃1小时）处理。