细胞自噬在甲氨蝶呤耐药绒癌中的保护性作用

细胞自噬在甲氨蝶呤耐药绒癌中的保护性作用
沈芸;赵静;肖长纪;向阳
【期刊名称】《现代妇产科进展》
【年(卷),期】2013(22)11
【摘要】目的:通过检测耐药绒癌细胞内自噬的变化,以及评估抑制自噬或敲除自噬相关基因后细胞凋亡情况,探讨细胞自噬在耐药绒癌中的作用。

方法:以人绒毛膜上
皮癌JEG-3细胞及本课题组前期构建的甲氨蝶呤(MTX)耐药绒癌JEG-3/MTXR细胞为研究对象。

采用透射电镜、免疫荧光法观察MTX处理后细胞内自噬的变
化;Western blot法检测自噬相关蛋白LC3、Beclin-1的表达变化。

RNA干扰法
沉默自噬相关基因LC3后,采用Western blot法和Annexin-Ⅴ/PI双染法流式细
胞仪检测MTX作用后JEG-3/MTXR耐药绒癌细胞凋亡的变化。

结果:透射电镜和
荧光显微镜下均可观察到MTX处理后JEG-3、JEG-3/MTXR细胞内自噬小体的产生;IC30浓度MTX处理后,两种细胞内自噬相关蛋白LC3、Beclin-1表达水平上调。

相同浓度MTX处理后,JEG-3细胞内LC3、Beclin-1表达下调。

沉默自噬相关基
因LC3后,沉默LC3联合MTX组的JEG-3/MTXR和JEG-3细胞内凋亡相关蛋白caspase-9表达上调,凋亡率显著增多。

结论:MTX可诱导耐药绒癌产生保护性自噬。

【总页数】5页(P884-887)
【关键词】绒癌;耐药;自噬;甲氨蝶呤
【作者】沈芸;赵静;肖长纪;向阳
【作者单位】国家人口计生委科学技术研究所;中国医学科学院北京协和医院妇产
科
【正文语种】中文
【中图分类】R737.33
【相关文献】
1.保护性自噬对吉祥草皂苷RCE-4诱导的人宫颈癌Ca Ski细胞凋亡的抑制作用[J], 王桂萍;付雪娇;邹坤;张秀;陈剑锋
2.自噬在紫杉醇诱导人卵巢癌顺铂耐药细胞死亡中的作用 [J], 苑博;康劲松;杨晓春;项喜艳;陆玉熊;周家文
3.转录因子c-Jun对甲氨蝶呤耐药绒毛膜癌细胞内自噬标志蛋白LC3的调节作用[J], 沈芸;向阳;肖长纪;赵静
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