bFGF滴眼治疗丝裂霉素C致角膜损伤的实验研究

bFGF滴眼治疗丝裂霉素C致角膜损伤的实验研究
万生兰苏永发魏群张迁（甘肃省兰州石化总医院眼科 730060）
摘要目的探讨丝裂霉素C造成角膜损伤后碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）对角膜修复过程的影响。

方法将直径为6.0mm的双层纱布片在0.04%的MMC溶液中浸透后，置于兔眼角膜中央3min，制作成MMC致角膜损伤动物模型，随机分为治疗组和对照组。

治疗组应用贝复舒滴眼液和氧氟沙星眼药水点眼，对照组仅用氧氟沙星眼药水点眼，荧光素钠角膜染色后，于手持裂隙灯显微镜下观察角膜上皮愈合情况及角膜新生血管情况。

每周检查3次，持续2周，判断疗效。

结果治疗组与对照组比较，角膜上皮愈合情况有显著性差异（χ2=6.583，P＜0.05），角膜新生血管情况亦有显著性差异（χ2=6.788，P＜0.01）。

结论 bFGF对丝裂霉素C所致角膜损伤有显著疗效，能缩短病程，减少角膜新生血管形成。

关键词碱性成纤维细胞生长因子丝裂霉素C 角膜药物损伤
碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor, bFGF，贝复舒）是哺乳动物和人体组织中存在的一种微量蛋白质，是一种多功能细胞生长因子。

实验和临床研究表明，bFGF具有促进角膜组织修复的作用[1]。

丝裂霉素C（MMC）是一种抗癌抗生素，被眼科临床医生较广泛地用于抗纤维增生。

其作用于角膜时，可导致角膜上皮损害、剥脱，甚至基质浑浊、溃疡等。

本实验在兔角膜局部MMC 损伤后滴用bFGF眼液，观察其对角膜修复过程的影响。

1 材料和方法
1.1 实验材料
1.1.1 主要仪器及材料手持裂隙灯显微镜，荧光素钠试纸条，贝复舒滴眼液，丝裂霉素C。

1.2.2 实验动物健康新西兰大白兔16只（从兰州大学医学实验动物中心购买），体重1.8～2.5kg，雌雄不限。

1.2 实验方法
1.2.1 角膜MMC损伤模型制作氯氨酮（100mg/2ml）与氯丙嗪(50mg/2ml)等体积混合后，按2 ml /kg肌肉注射麻醉，1%丁卡因眼表面麻醉，将直径为6.0 mm的双层纱布片在0.04% MMC溶液中浸透后，置于兔眼角膜中央3 min，即用50ml生理盐水充分冲洗眼表面。

1.2.2 分组16只兔随机选一眼为治疗组（用红汞做标记），另一眼为对照组，每组16只眼。

治疗组应用贝复舒（bFGF)滴眼液和氧氟沙星眼药水滴眼，每日4次。

对照组仅用氧氟沙星眼药水滴眼，每日4次。

1.3 观察方法
1.3.1 肉眼观察伤眼畏光、流泪、充血程度，有无异常分泌物。

1.3.2 裂隙灯显微镜观察荧光素钠角膜染色后，于手持裂隙灯显微镜下观察角膜上皮愈合情况，并注意有无新生血管，每周检查3次，持续2周，判断疗效。

1.4 疗效判断标准（1）痊愈：刺激症状消失，结膜无充血，角膜创面愈合，上皮修复，荧光素钠染色阴性。

（2）有效：刺激症状及结膜充血明显减轻，角膜创面部分愈合，上皮部分修复，荧光素钠染色着色范围减少或基本消失。

（3）无效：刺激症状无缓解，结膜仍充血，角膜荧光素钠染色阳性。

1.5 统计学方法实验所得数据采用χ2检验，统计软件采用SPSS软件包。

2 结果
2.1 角膜创面愈合情况治疗组均见效，其中痊愈11眼（68.75%），有效5眼（31.25%）。

对照组痊愈5眼（31.25%），有效7眼（4
3.75%），无效4眼（25.0%）。

治疗组疗效显著高于对照组，χ2=6.583，P＜0.05（表1）。

表1 两组兔角膜损伤愈合情况（眼数）
组别n 痊愈有效无效
治疗组16 11 5 0
对照组16 5 7 4
2.2 角膜新生血管形成情况治疗组出现角膜新生血管2眼（12.5%），对照组出现角膜新生血管9眼（56.25%），两组有显著性差异，χ2=6.788，P＜0.01（表2）。

表2 两组兔角膜新生血管形成情况（眼数）
组别n 有新生血管无新生血管
治疗组16 2 14
对照组16 9 7
3 讨论
bFGF是存在于哺乳动物和人体中的一种微量蛋白，可促进细胞分裂，调节细胞代谢。

其作用于角膜，可促进角膜3种细胞增生、扩大和移行[2～4]。

实验和临床研究表明，贝复舒对外伤、炎症、酸碱等引起的角膜损伤，均有一定促进修复作用[5，6]。

对于抗代谢药
物引起角膜损害的疗效尚缺乏研究。

MMC是眼科临床常用的一种抗代谢药物，具有烷化作用，通过与DNA的双链交叉联结，抑制DNA的复制，也能使部分DNA断裂，从而阻止细胞分化和复制[7]。

由于其具有抗纤维增生作用，被眼科临床医生较广泛地用于翼状胬肉、青光眼、泪道阻塞，甚至LASIK 术中。

但是MMC作为一种非细胞周期性细胞毒性药物，直接作用于眼球，在提高手术成功率地同时，对眼部组织有一定影响。

当MMC 在角膜面蓄积，达到一定浓度，剂量及接触时间，会导致角膜上皮损害、剥脱，甚至基质混浊、溃疡形成等。

随着MMC在临床上的广泛应用，有关MMC引起角膜损害等并发症的报告逐渐增多[8，9]。

为防治MMC造成角膜损害的并发症，寻求一种对抗代谢药物造成角膜损害疗效可靠的药物，显得十分必要。

本实验通过对MMC致兔角膜损害，运用bFGF滴眼治疗，发现bFGF对MMC所致角膜损害有显著疗效。

贝复舒滴眼液（bFGF）的主要成分是基因重组的碱性成纤维细胞生长因子，这是一种多功能细胞生长因子，对中胚层和神经外胚层源细胞具有广泛的生物学活性，具有改善组织营养，刺激细胞再生，加强组织修复等作用[10]。

它是角膜组织的正常生理成分，在正常角膜组织全层中都有分布，正常状态下主要以无或低活性形式存在于细胞间质中。

本实验中bFGF组与对照组比较，不但疗效显著，能减轻症状，缩短病程，而且能减少角膜新生血管形成，维持角膜透明性，改善角膜愈合质量。

贝复舒滴眼液（bFGF）促进MMC致角膜损伤修复的机制可能为：（1）贝复舒滴眼液（bFGF）的基质是人工泪液成分聚乙烯醇，可在眼表面形成保护性液态膜，从而润滑角膜，延长泪膜破裂时间及减少眼睑对角膜上皮的机械摩擦作用。

（2）作为一种多功能细胞生长因子，通过与靶细胞上的bFGF受体结合，促进细胞生长分化、分裂增生[11]。

其对角膜上皮细胞、角膜基质成纤维细胞及角膜内皮细胞均有促进增生或移行作用，从而有效地促进了角膜损伤的修复。

（3）正常角膜透明无血管，MMC等病因损伤后的炎性产物和缺氧，可诱发角膜新生血管形成。

本实验中，对照组用氧氟沙星眼药水滴眼，只起到抗感染作用，对角膜组织没有修复作用，完全靠自身生长修复，故病程较长，易产生新生血管。

治疗组联合应用贝复舒滴眼液（bFGF），加速了角膜组织的再生修复，缩短了角膜损伤愈合时间，有效地阻止了角膜缘新生血管的侵入。

本实验结果揭示，bFGF对MMC造成的角膜损伤疗效显著，能缩短病程，减少角膜新生血管的形成，为抗代谢药物引起的角膜损伤提供了治疗途径。

但临床医生在使用MMC时，仍应注意掌握适应症、药物浓度、剂量、时间，以免造成不必要的甚至不可逆的损伤。

参考文献
1?/span>洪善云.中国新药杂志，2002，11（9）：733
2 Pancholi S,Tullo A,Khaliq A,et al. Graefes Arch Clin Exp Ophthalmol,1998,236:1-8
3 Schilling-Sch A,Pleyer U,Hartmann C,et al.Exp Eye Res,2000,71:583-589
4 David T,Rieck P,Renard G,et al.Cornea,1995,14:227-234
5 李永平，冯官光，林建贤，等.眼外伤职业眼病杂志，1998，20（5）：402-404
6 周蔚.眼外伤职业眼病杂志，2005，27（5）：364-365
7 李建军，张铁民.国外医学眼科分册，1998，22（1）：22
8 王大博，王净华，纪淑兴.中国实用眼科杂志，2000，20：130-132
9 余清，黄琼球，朱君玲，等.眼外伤职业眼病杂志，2003，25（2）：129-130
10 Bennett NT,Schultz GS.Am J Surg,1993,165-728
11 Rieck P,Assouline M ,Savoldelli M ,et al.Exp Eye Res,1992,54:987-998。