中药PSORI-CM01颗粒联合温泉及煤焦油对寻常型银屑病患者血清细胞因子的影响

中药PSORI-CM01颗粒联合温泉及煤焦油对寻常型银屑病患
者血清细胞因子的影响
张仲昭;邓静文;张禁;闫玉红;王冬梅;甄伟;卢传坚
【摘要】目的探讨中药PSORI-CM01颗粒联合温泉及煤焦油对寻常型银屑病患者血清白细胞介素(IL)-2、IL-4、IL-6、IL-10、II-17、干扰素(IFN)-γ及肿瘤坏死因子(TNF)-α共7项细胞因子的影响.方法收集解放军一九五医院收治的寻常型银屑病患者20例,随机分为试验组和对照组,每组各10例,试验组给予PSORI-CM01颗粒联合温泉及煤焦油治疗,对照组给予颗粒安慰剂联合温泉及煤焦油治疗,治疗4周后观察临床疗效;采用流式液相多重蛋白定量技术对治疗前后血清IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-17、IFN-γ及TNF-α共7项细胞因子进行检测,并与10例健康血清进行对照.结果临床试验结果显示试验组患者有效率显著高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);实验结果显示试验组治疗后较治疗前血清IL-17水平显著上升,趋向于健康对照组水平,差异有统计学意义(P＜0.05);对照组治疗后较治疗前血清IFN-γ水平显著上升,趋向于健康对照组水平,差异有统计学意义(P＜0.05);IL-2,IL-4,IL-6,IL-10及TNF-α在本次实验中治疗前后差异无统计学意义(P＞0.05).结论本研究提示PSORI-CM01颗粒联合温泉及煤焦油疗效优于颗粒安慰剂联合温泉及煤焦油;PSORI-CM01颗粒联合温泉及煤焦油治疗寻常型银屑病的作用点有可能是在Th17通道;安慰剂联合温泉及煤焦油治疗寻常型银屑病的作用点有可能是在Th1通道.
【期刊名称】《中国中西医结合皮肤性病学杂志》
【年(卷),期】2019(018)004
【总页数】6页(P327-332)
【关键词】中药;PSORI-CM01颗粒;温泉;煤焦油;银屑病;细胞因子
【作者】张仲昭;邓静文;张禁;闫玉红;王冬梅;甄伟;卢传坚
【作者单位】广州中医药大学第二临床医学院,广东广州510120;广州中医药大学第二临床医学院,广东广州510120;解放军一九五医院,湖北咸宁437100;广州中医药大学第二临床医学院,广东广州510120;广州中医药大学第二临床医学院,广东广州510120;解放军一九五医院,湖北咸宁437100;广州中医药大学第二临床医学院,广东广州510120
【正文语种】中文
【中图分类】R275.9;R758.63
银屑病是一种慢性且会反复发作，以表皮细胞角化紊乱为特点的皮肤病，其确切发病机制迄今未明。

学界认为可能是角质形成细胞和失调的免疫细胞共同作用的结果[1]，白细胞介素（IL）-2、IL-4、IL-6、IL-17、干扰素（IFN）-γ 及肿瘤坏死因子（TNF）-α起致炎作用，进而介导银屑病的发病。

在动物模型中阻断IL-17使银屑病样皮损病理学得到改善[2]，TNF-α是治疗银屑病的关键靶点，使用抑制TNF-α的生物制剂，对于中重度银屑病有较好的疗效[3]。

IL-10通过其强大的抗炎作用、对T细胞和抗原递呈细胞的影响来实现对银屑病的保护作用[4]，与银屑病严重程度呈负相关。

PSORI-CM01颗粒（专利授权号：ZL200910091066.5）是在国医大师禤国维教授研究的银屑灵片（专利申请号：CN201510641176.X）基础上优化得到的，前期研究[5-7]显示其有效。

本研究临床试验部分采用随机双盲安慰剂对照的研究方法，通过预试验，对患者治疗前后血清细胞因子变化及临床
疗效进行分析，探究PSORI-CM01颗粒联合温泉及煤焦油对寻常型银屑病患者的影响。

1 资料与方法
1.1 一般资料
1.1.1 研究类型本研究临床试验部分属于随机双盲安慰剂对照试验。

1.1.2 研究对象①符合疾病诊断标准，诊断依据《现代皮肤病学》[8]，临床或病
理确诊为寻常型银屑病患者；②年龄18～65岁；③皮损程度达到中重度银屑病皮损面积与严重程度指数（PASI）＞10或体表皮损面积（BSA）＞10%，同时PASI＜30并且BSA＜30%；④可自行阅读和理解；⑤签署知情同意书。

1.1.3 临床资料收集解放军一九五医院2015年5月—2016年2月确诊为寻常型
银屑病患者20例。

试验组男 7例，女 3例；平均年龄（40.73±10.90）岁；病程中位数15（9，21）年。

对照组男7例，女3例；平均年龄（43.50±11.75）岁；病程中位数 11（7，24）年。

2组性别、年龄、病程差异无统计学意义（均P＞
0.05），有可比性。

1.1.4 干预措施患者随机分为试验组和对照组。

试验组患者给予PSORI-CM01颗
粒（肿节风、莪术、土茯苓、赤芍、乌梅、紫草、甘草，5.5 g/袋，委托江阴天江药业有限公司制作）冲服，1袋/次，2次/d；解放军一九五医院温泉泡浴30 min，水温调至38℃（春天）～40℃（冬天），泡浴中禁止搔抓、搓洗，出浴后温自来水淋浴5 min，1次/d；煤焦油搽剂（批号：广制字（2007）F15011号），浓度为6%，外涂银屑病皮损处，3次/d。

对照组患者给予颗粒安慰剂（主要成分是麦芽糖糊精等，在外观、味道、质量等方面尽量与PSORI-CM01颗粒一致，并符合卫生学要求；5.5 g/袋，委托江阴天江药业有限公司制作）冲服，1袋/次，2次/d；温泉及煤焦油治疗同试验组。

2组患者均治疗4周。

1.1.5 排除标准①皮损以点滴状为主，或皮损单独见于颜面、头皮、指甲、皱折、
龟头、黏膜、掌跖部位的患者；②妊娠、哺乳期或1年内计划妊娠者；③心理测量量表焦虑自评量表＞50分或抑郁自评量表＞53分，或合并精神疾病的患者；④合并有循环系统、呼吸系统、消化系统、泌尿系统、内分泌系统和造血系统等严重原发性疾病、常规用药无法控制的患者，合并肿瘤的患者，有严重感染、水、电解质及酸碱平衡紊乱的患者，合并有急性传染病的患者，合并有伤口的患者，合并有急性关节炎的患者，合并有营养不良的患者。

或实验室检查异常研究者判断不适合参与此试验的患者；⑤已知对本研究中所用药物过敏的患者；⑥正在参加其他药物临床试验者或1个月内参加过其他临床试验者；⑦2周内曾用糖皮质激素、维甲酸类等外用药物治疗者；4周内曾接受系统治疗或紫外光治疗者；12周内曾使用生物制剂治疗者；⑧银屑病关节型、有红皮病倾向的患者；⑨需进行西医系统治疗的患者。

1.2 方法
1.2.1 临床试验方法采用随机双盲安慰剂对照的研究方法，将寻常型银屑病患者进行初步筛选，符合纳入标准且不符合排除标准的患者签署知情同意书，随机分为试验组及对照组，入组进行PASI评分及血清留取，分别进行4周的干预措施，第4周治疗结束后进行PASI评分及血清留取。

广东省中医院伦理委员会批件号：
B2015-084-02；中国临床试验注册中心注册号：ChiCTR-IOR-15007615。

1.2.2 实验方法采用流式液相多重蛋白定量技术，使用BDTMCytometricBeadArray（CBA）（560484）及BDTMCytometricBeadArray（CBA）Human Soluble Protein Master Buffer Kit（558266）试剂，通过 BD FACS Calibur flow cytometer流式细胞仪检测血清中的 IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-17、IFN-γ 及 TNF-α。

1.2.3 血清采集治疗前后，所有研究对象均清晨空腹采集静脉血液5 mL，置于促凝胶分离管，凝血至少30 min，1 000 g离心10 min，吸取血清，放置于低温冰
箱-70℃冷冻保存待试验。

并招募10例健康人群，采集血清，进行对照。

1.3 疗效评价本研究采用PASI进行临床疗效评价[9]。

PASI-50：PASI评分减少
至基线的50%及以下。

临床疗效评价标准：①好转：达到PASI-50；②无效：未
达到PASI-50。

1.4 质量控制①制定随机对照试验实施的SOP；②对参与临床研究的人员统一进
行方法学和相关操作程序的培训，培训内容包括临床研究方案、临床诊断标准、治疗方案、PASI评分、病例报告表填写等；③随机抽取10%～20%的患者病例报告表与原始病历进行核对；④质量控制人员定期进行现场监查，在项目起始、末期分2次进行。

1.5 统计学方法采用PASW Statistics17.0进行统计分析。

计量资料如数据满足正态分布，采用均数±标准差（±s）表示其集中和离散趋势；如数据不满足正态分布，出现明显的偏态分布，则采用中位数和四分位数间距。

计数资料采用频数和百分比进行描述。

2组连续正态分布且方差齐的变量采用t检验进行比较，同一样本试验前后满足正态分布的定量资料的比较采用配对t检验。

计数资料比较则根据频数分布特点采用Fisher’s exact test。

检验水准α=0.05。

2 结果
2.1 CBA分析标准曲线把标准品的检测结果输入FCAP v4.0软件，进行标准曲线
的绘制，结果见图1～7。

图1 IL-17 CBA分析标准曲线
图2 IFN-γ CBA分析标准曲线
2.2 试验组细胞因子分析结果经过4周的治疗，试验组治疗后较治疗前血清IL-17水平显著上升，趋向于健康对照组水平，差异有统计学意义（P＜0.05），见表1。

图3 TNF-α CBA分析标准曲线
图4 IL-10 CBA分析标准曲线
图5 IL-6 CBA分析标准曲线
图6 IL-4 CBA分析标准曲线
图7 IL-2 CBA分析标准曲线
表1 试验组细胞因子分析结果（pg/mL，±s）注：治疗后与治疗前比较，*P＜0.05（P=0.042）；健康对照与治疗前比较，#P＜0.05（P=0.047）。

组别 IL-17 IFN-γ TNF-α IL-10 IL-6 IL-4 IL-2试验组治疗前8.62±2.91 0.80±0.56
0.84±1.82 0.49±0.39 5.26±7.29 0.55±0.15 19.97±40.20试验组治疗后
12.83±5.26* 1.30±0.92 1.59±3.83 0.40±0.30 2.77±3.42 0.48±0.11
10.20±19.76健康对照组11.59±3.31# 1.83±0.60 0.90±0.88 0.77±0.16
1.50±1.43 0.14±0.24 26.90±35.46
2.3 对照组细胞因子分析结果经过4周的治疗，对照组治疗后较治疗前血清IFN-γ水平显著上升，趋向于健康对照组水平，差异有统计学意义（P＜0.05），见表2。

表2 对照组细胞因子分析结果（pg/mL，±s）注：治疗后与治疗前比较，*P＜0.05（P=0.028）；健康对照与治疗前比较，#P＜0.05（P=0.027）。

组别 IL-17 IFN-γ TNF-α IL-10 IL-6 IL-4 IL-2对照组治疗前11.31±
3.65 1.18±0.61
4.67±9.03 0.75±0.68 2.92±
5.95 0.05±0.11 20.61±3
6.70对照组治疗后
13.03±6.29 2.11±0.97* 0.66±0.60 1.07±1.17 1.46±1.03 0.05±0.15
63.00±87.79健康对照组11.59±3.31 1.83±0.60# 0.90±0.88 0.77±0.16
1.50±1.43 0.14±0.24 26.90±35.46
2.4 临床疗效比较试验组患者的有效率显著高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），见表3。

表3 2组患者临床疗效比较例（%）注：与对照组比较，**P＜0.05（Fisher’s exact test，P=0.019）。

组别 n 好转无效有效率试验组 10 9（80） 1（10） 9（90）**对照组 10 3（30） 7（70） 3（30）
3 讨论
中医学称银屑病为“白疕”，国医大师禤国维教授认为本病从燥毒瘀立论，血瘀贯穿银屑病的始终[10]。

银屑灵片（由莪术、肿节风等组成）是禤国维教授通过数十年研究总结出来的经验方。

前期通过试验对处方优化为PSORI-CM01颗粒并进行深入研究。

PSORI-CM01颗粒方中莪术行气破血消斑为君药；肿节风清热凉血、
活血消斑，紫草凉血活血、解毒透疹，赤芍清热凉血、散瘀消斑，共为臣药；土茯苓除湿解毒，乌梅生津润燥，共为佐药；甘草调和诸药为使[11]，共奏活血祛瘀消斑，祛风除湿止痒之效。

温泉浴有清洁、抗炎、促角质合成、抗氧化和止痒的作用，能与化妆品合用，甚至替代化妆品，很少诱发炎症，因此能安全地用于各类皮肤包括极度敏感和化妆品不能耐受的皮肤。

中国人民解放军第一九五医院（广州军区皮肤病防治中心）位于湖北咸宁，当地地热温泉资源丰富，地热温泉[12]主要含氡及硫酸钙（含氡243.14 Bq×L-1，水温53℃，pH=7.5），属硫酸钙弱放射性氡温泉。

焦油类制剂用于治疗银屑病已经超过100年[13]，焦油治疗银屑病机制尚不
明确。

解放军一九五医院院内制剂煤焦油搽剂[批准文号为广制字（2007）
F15011号]，浓度为 6%，用于外涂治疗银屑病。

本试验运用随机双盲安慰剂对照试验并采用流式液相多重蛋白定量技术，对临床疗效及血清IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-17、IFN-γ 及 TNF-α 共7项细胞因子变
化进行研究，探讨PSORI-CM01颗粒联合温泉及煤焦油对寻常型银屑病患者的作用效果及机制。

临床试验结果显示，试验组患者的有效率显著高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），提示PSORI-CM01颗粒联合温泉及煤焦油疗效优于对
照组。

试验研究显示，经过4周治疗试验组治疗后较治疗前血清IL-17水平显著上升，趋向于健康对照组水平，治疗前后比较差异有统计学意义（P＜0.05）；对照组治疗后较治疗前血清IFN-γ水平显著上升，趋向于健康对照组水平，治疗前后
差异有统计学意义（P＜0.05）；IL-2，IL-4，IL-6，IL-10 及TNF-α在本次试验
中治疗前后差异无统计学意义（P＞0.05）。

提示PSORI-CM01颗粒联合温泉及
煤焦油治疗寻常型银屑病的作用点有可能是在Th17通道，皮肤局部的T淋巴细胞，特别是Th17淋巴细胞经治疗后迁移至外周血循环中，引起外周血循环的IL-17细胞因子升高，升高水平趋向于健康对照组水平，患者治疗前IL-17低于健康对照组，与禤美玲[14]对于银屑病细胞因子的研究相符。

而颗粒安慰剂联合温泉及煤焦油治疗寻常型银屑病的作用点有可能是在Th1通道，皮肤局部的T淋巴细胞，特别是Th1淋巴细胞经治疗后迁移至外周血循环中，引起外周血循环的IFN-γ细胞因子
升高，升高水平趋向于健康对照组水平。

IL-2，IL-4，IL-6，IL-10及TNF-α在本次试验中治疗前后差异无统计学意义可能与样本例数较少有关，需进行大样本试验进一步检测。

在银屑病发病过程中，T细胞自血管移出并在皮肤局部浸润是银屑病发生发展的基础，IFN-γ参与T细胞的活化、迁移以及在银屑病皮损局部的浸润；IFN-γ在角质形成细胞的增殖中发挥关键作用，当IFN-γ的作用被阻断时，角质形成细胞的增
殖减慢，由角质形成细胞分泌的细胞因子也相应减少；对照组温泉联合煤焦油疗法是通过外用疗法治疗银屑病，可能通过抑制IFN-γ的作用，进而治疗银屑病，作
用点较单一。

研究显示PSORI-CM01可显著抑制小鼠由IFN-γ和IL-17/IL-22激发的细胞核NF-kB p65的表达，因此PSORI-CM01可能是通过抑制皮肤内环境
的炎症来治疗银屑病[15]，与本研究结论相一致。

试验组在对照组基础上增加PSORICM01颗粒内服治疗，内外兼治，多作用点治疗，进而疗效优于对照组。

本研究对临床有指导意义，在下一步研究中，笔者将扩大样本量，进行更准确研究，为临床治疗提供更全面的依据。

【相关文献】
[1]Noqrales KE，Davidovici B，Krueger JG.New insights in the immunologic basis of psoriasis[J].Semin Cutan Med Surg，2010，29：3-9.
[2]Girolomoni G，Mrowietz U.Psoriasis：rationale for targeting interleukin-17[J].Br J Dermatol，2012，167：717-724.
[3]Papp KA，Poulin Y，Bissonnette R，et al.Assessment of the longterm safety and effecti veness of etanercept for the treatment of psoriasis in an adult population[J].J Am Acad Dermatol，2012，66：33-45.
[4]宋珺，郑捷.银屑病与白介素-10关系的进展[J].诊断学理论与实践，2007，6（1）：71-73.
[5] 卢传坚，吴晓霞，刘凤年.银屑灵对PCNA表达和角质形成细胞凋亡的影响[J].中药新药与临床
药理，2006，17（5）：329-331.
[6]卢传坚，闫玉红，赵瑞芝.银屑灵片对鼠尾鳞片表皮颗粒层形成的影响[J].中药新药与临床药理，2010，21（3）：231-233.
[7]闫玉红，卢传坚.银屑灵优化方治疗寻常型银屑病的临床探索性研究[J].中药新药与临床药理，2011，22（6）：691-693.
[8]杨国亮，王侠生.现代皮肤病学[M].上海：上海医科大学出版社，2005：508-509.
[9]Henseler T，Schmitt-Rau K.A comparison between BSA，PASI，PLASI and SAPASI as measures of disease severity and improvement by therapy in patients with psoriasis[J].Int
J Dermatol，2008，47：1 019-1 023.
[10]闫玉红，卢传坚，禤国维.寻常型银屑病核心病机探讨[J].辽宁中医杂志，2012，39（6）：1 013-1 015.
[11]闫玉红.银屑灵片处方优化的实验研究及临床探索性研究[D].广州中医药大学，2010.
[12]张禁，姜功平，范平.矿泉浴联合5%松馏油软膏治疗银屑病的疗效观察[J].中国皮肤性病学杂志，2010，24（2）：140-141.
[13]Menter A，Korman NJ，Elmets CA，et al.Guidelines of care for the management of psoriasis and psoriatic arthritis.Section 3.Guidelines of care for the management and treatment of psoriasis with topical therapies[J].J Am Acad Dermatol，2009，60：643-659.
[14]禤美玲.寻常型银屑病患者外周血中细胞因子的表达及其相关性研究[D].广州中医药大学，2011.
[15]Han L，Sun J，Lu CJ，et al.Formula PSORI-CM01 inhibits the inflammatory cytokine and chemokine release in keratinocytes via NF-κB expression[J].Int Immunopharmacol，2017，44：226-233.。