石榴皮多糖开题报告
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毕业论文开题报告
课题名称石榴皮多糖的阴离子柱色谱纯化工艺研究
类别院系化学与化工学院
专业班
姓名
一、研究现状
多糖广泛存在于高等植物、藻类、微生物及动物体内,是自然界含量最丰富的生物聚合物,也是维持正常生命活动的四大基础物质之一。
20世纪60年代以来,人们逐渐发现多糖具有复杂的多方面的生物活性和功能,特别是对机
体免疫功能的作用,因此也引来越来越多学者的研究兴趣。
随之,罗汉果、枸杞、香菇、茶叶、洋葱、大蒜等各类粗多糖制品陆续被通过不同的技术方法分离纯化出来。
根据文献报道,当前多糖的分离纯化方法有:分步沉淀法、盐析法、季胺盐沉淀法、柱层析法、金属络合法、超过滤法等,而国外多采用LKB 柱色谱系统。
其中,柱层析法比较温和,不但能有效精细分离多糖组分,而且能较好的保持多糖的结构和生物活性。
石榴皮多糖,具有很强的抗氧化性和免疫调节功能。
对于它的化学研究,目前主要集中在提取工艺方面,进一步分离纯化、分子量以及结构的研究却鲜有报道。
二、研究目的及意义
石榴皮是我国传统的中草药,在医药保健、美容化妆、污水处理等行业和领域有很大的应用前景。
然而,目前临床上石榴皮的抑菌、抗病毒等功效是多种化学成份协同完成,而有这些功效的药物种类繁多,石榴皮在这一方面没有价格优势。
因此,开拓石榴皮深加工,对其单一组分进行挖掘和纯化是其价值得到提升的重要途径。
多糖作为石榴皮一类主要的化学成份,已成为一个研究热点,但得到的大都是粗制品。
鉴于此,本研究主要以脱蛋白后的石榴皮粗多糖为原料,采用柱层析法,用不同浓度梯度的盐溶液洗脱,来进行分离纯化,得到均一性多糖组份并探究最佳纯化过程,以期为石榴皮多糖后续的分子质量测定、结构解析以及石榴皮的综合利用提供依据。
三、研究方法及内容
1、方法:柱层析法
2、内容:
1、阴离子交换柱DEAE-52 Cellulose柱(纤维素柱)纯化
多糖样液上柱后,分别以蒸馏水、0.10、0.20、0.30、0.40、0.50 mol/LNaCl 溶液以及蒸馏水、0.05、0.10、0.25、0.50 mol/L NaHCO3溶液梯度洗脱,隔管检测A490(苯酚-硫酸法),收集各组分进行浓缩,分别记为PPG-I、PPG-II、PPG-III、PPG-IV以及PPG-V,透析,冻干。
2、Sephadex G-100(即葡聚糖凝胶柱)柱纯化
将经DEAE-52 Cellulose柱分离后收集到的含量较多组分,进一步经凝胶柱Sephadex G-100柱层析纯化,以0.1 mol/L NaCl溶液洗脱,隔管检测A490(苯酚-硫酸法),收集单一峰溶液,浓缩,透析后冻干,得到多糖纯品,用于后续的结构解析。
四、可行性分析
1、理论依据:本课题研究方法已被许多学者广泛的运用。
李晋等人经脱蛋白,脱色,DEAE-52纤维素柱层析纯
化得到精制的洋葱多糖;
李俊,陈海燕等人用Sevag法除蛋白质,再通过DEAE-
纤维素柱和Sephadex G-200柱分离纯化得到2个罗汉果多
糖组分;
潘松等人用DEAE-52纤维素柱和Sephadex G-200柱分
离纯化得到软枣弥胡桃多糖
2、硬件条件:咸阳师范学院化学与化工学院所提供的实验室具备本
研究方法所需的一切材料、仪器和试剂。
此外学校图书馆
图书、电子资源数据库均可方便查找相关文献资料
3、个人条件:本人在大学期间所学习掌握的专业知识和实验操作技
能可以保证实验顺利进行
五、特色与创新之处
获得了均一性的石榴皮多糖,确定了一整套分离纯化工艺,探究了最佳浓度梯度的洗脱剂,为石榴皮多糖的结构解析奠定了基础。
五、研究计划与预期实验结果
研究计划:
预期实验结果:
(1)获得了均一性的石榴皮多糖,确定了一整套分离纯化工艺,探究了最佳浓度梯度的洗脱剂;
(2)完成本科毕业论文1篇。
六、主要参考文献
[1]冯婷,何聪芬,赵华,等.植物多糖研究概况[J]. 北京工商大学学报, 2004 , 22( 5) : 1- 4.
[2]赵盈,张海生,康尹杰,等.石榴皮多糖的水浸提工艺优化[J].食品工业科技,2010, ( 6) : 232- 236.
[3]罗显仲,陶美华,廖毅俊,等.仙人掌茎多糖的分离纯化[J]. 湛江师范学院学报, 2004 , 25( 6) : 32- 36.
[4]朱德艳.植物多糖研究概况[J]. 北京工商大学学报, 2004 , 22( 5) : 1- 4.
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[1]冯婷,何聪芬,赵华,等.植物多糖研究概况[J]. 北京工商大学学报, 2004 , 22( 5) : 1- 4.。