烟草子房注射法转基因试验
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烟草子房注射法转基因试验
烟草子房注射法转基因试验
邹颉1,余婧1,付强1,李世升2*
【摘要】[摘要] 为了快速获得转基因烟草,对烟株子房注射处于对数生长期的含有外源基因的根癌农杆菌菌液。
结果表明:通过初步的50 mg/L Kana抗性筛选及PCR检测,烟草子房注射法能成功获取转入的外源基因得到转基因烟草。
烟草子房注射法与烟草叶盘转化法等常规转基因方法相比,子房注射法简化了试验过程,缩短了试验周期,提高了试验效率。
【期刊名称】贵州农业科学
【年(卷),期】2013(000)012
【总页数】3
【关键词】[关键词] 转基因;根癌农杆菌;烟草;子房注射
植物基因工程技术已在烟草等作物品种改良及模式植物研究上得到广泛应用。
近几十年来,植物转基因技术已经有了长足的发展,这些技术的成功运用对于基础科学的研究和农业生物技术的发展有着极大的促进作用[1-3]。
目前的转基因技术主要分为两大类,一类是直接将基因导入到植物体内并整合,如早些年的化学诱导法(PEG法)、电激法,新发展起来的基因枪法(通过将目的基因片段和重金属颗粒包被整合,直接通过基因枪轰击植物分生组织获得转基因植物材料)[4-6]。
另一类是以根癌脓杆菌作为介导的遗传转化方法,此方法在目前的应用最为广泛。
根癌农杆菌拥有一套独特的Ti质粒系统,与现有的经过改造的双元载体系统相结合能够方便地将目的基因转入到植物基因组中[7-8]。
通过农杆菌浸染进行转基因是一个相对复杂而繁琐的工作,在此过程中,愈伤的产生以及愈伤分化成整体植株的过程需要相当精确的操作技巧;此外,不同的植物转。