江苏省张家港地区妊娠妇女红细胞叶酸水平调查

江苏省张家港地区妊娠妇女红细胞叶酸水平调查
孙建方;蔡新红;蒋冯霞;陈静
【摘要】目的分析张家港地区妇女妊娠早、中、晚各期红细胞叶酸水平,探讨红细胞叶酸水平在孕期的变化,全方位对孕妇孕期保健提供科学诊断依据.方法对2014年8月8日～2015年6月23日在张家港市妇幼保健所建卡的665例孕妇,采用Beckman Coulter Access2化学发光免疫测定方法,定量测定妊娠早、中、晚各期红细胞叶酸水平.结果妊娠早、中、晚期红细胞叶酸含量分别为
672.27±212.38,862.41±276.17和818.25±290.96 ng/ml,不同孕期间红细胞叶酸水平差异有统计学意义(t=-21.557,-14.696,5.260,均P<0.01).从检测数据来看,张家港市孕妇总体红细胞叶酸水平在正常范围,孕早期相对孕中、晚期稍低;孕早期20～30岁和大于30岁年龄段红细胞叶酸水平低于推荐值者占6.51％(43/661).结论张家港市孕妇红细胞叶酸水平处于相对可控范围,部分孕妇孕早期相对略低可能与主动补充叶酸的频率有关,不断提高补充叶酸依从性不容忽视.
【期刊名称】《现代检验医学杂志》
【年(卷),期】2018(033)005
【总页数】4页(P117-120)
【关键词】叶酸;红细胞叶酸;化学发光法;孕妇
【作者】孙建方;蔡新红;蒋冯霞;陈静
【作者单位】张家港市妇幼保健所,江苏张家港 215600;张家港市妇幼保健所,江苏张家港 215600;张家港市妇幼保健所,江苏张家港 215600;张家港市妇幼保健所,江苏张家港 215600
【正文语种】中文
【中图分类】R715.3
叶酸(folic acid)是机体正常细胞生长和DNA合成的一种重要必需维生素。

叶酸缺乏会导致巨幼细胞性贫血并最终引发严重的神经系统疾病[1～3]。

尤其预防孕早期妇女叶酸缺乏是胎儿神经管畸形(neural tube defects，NTDs)发生在围孕期不可
忽视的一项重要工作。

人体叶酸水平常用血浆叶酸、血清叶酸和红细胞叶酸来衡量。

血浆或血清叶酸易受到膳食习惯等因素影响，相关报道数据差距较大。

而红细胞叶酸与红细胞更新过程有关，能反映人体内叶酸的较长期变化状态和叶酸储备情况。

用红细胞叶酸含量作为评价预防NTDs及相关疾病的生物学指标已被国内外学者
认同[4，5]。

叶酸定量检测，目前有四类方法：微生物法、放射免疫法、高压液相色谱法和化学发光免疫测定法。

化学发光类免疫检测相对较新，且基本实现了全自动化，适宜医疗机构即时和规模化的大样本检测。

由于叶酸检测方法不尽相同，即便相同的仪器所给用户有用的参考值不一，造成可用以借鉴数据相差明显[5，6]，在国内尚缺乏统一比对数据情况下，我们严格实验室质量控制，对665例孕妇在
不同孕期进行了红细胞叶酸含量监测，以提供本地区孕妇注册并实施补充叶酸后的随机状态下红细胞叶酸数据的表达。

1 材料和方法
1.1 研究对象 2014年8月8日～2015年6月23日在张家港市妇幼保健所建卡
的665例孕妇，年龄17～44岁。

按年龄分组，<20岁4例，20～30岁523例，>30岁138例。

其中孕早期为9～12周，孕中期为13～27周，孕晚期为28～产前，分别行早孕、中孕、晚孕期各三次红细胞叶酸检测。

1.2 仪器和试剂 Beckman Coulter Access2全自动微粒子化学发光仪(贝克曼-库
尔特公司，美国) 及配套叶酸测定试剂盒(仪器配套试剂、质控品、标准品和定标液)。

严格按说明书操作，仪器经校准和每日室内质控通过后进行样本测试。

1.3 方法仪器经校准和每日室内质控通过后进行样本测试，严格按说明书操作。

空腹采集EDTA抗凝静脉全血标本3 ml，同时测定样本红细胞比积用于计算。

轻
轻颠倒全血样本数次使之充分混匀，取50 μl全血加入1 ml溶血剂中(制备溶血液)轻轻震荡使溶血样本均匀，室温环境下避光竖直存放至少90 min后，在1.5 h内上机完成测定溶血样本叶酸含量。

红细胞内叶酸浓度=溶血液叶酸浓度×21/红细
胞比积值。

每次检测前用试剂盒所带标准品校准工作曲线(r≥0.97)，并严格质量控制。

本方法试剂盒提供的红细胞叶酸正常参考值为140～836 ng/ml。

1.4 统计学分析所有数据用SPSS 18.0 软件包进行分析。

定性资料用率表示，组
间比较采用卡方检验。

P<0.05为差异有统计学意义。

红细胞叶酸定量水平以均值±标准差±s)表示。

2 结果
2.1 妊娠早、中、晚各期红细胞叶酸水平 665例孕妇早、中、晚期红细胞叶酸含
量分别为672.27±212.38(243～1 435)ng/ml，862.41±276.17l(210～1 711
ng/ml)ng/ml，818.25±290.96，(195～1 611 ng/ml) ng/ml。

张家港市妇保所建卡孕妇总体红细胞叶酸均数在正常范围，孕早期水平相对中晚期稍低；各孕期最低值均高于本方法试剂盒提供的正常参考值下限；各期超出参考值上限人数及比例分别为113例(17.0%)，353例(53.1%)，289例(43.5%)，各期无低于参考值下限人数；若采用文献[4]推荐值400 ng/ml衡量，孕早、中、晚期低于此文献推荐值人数及比例分别为43例(6.5%)，17例(2.6%)和32例(4.8%)。

2.2 不同年龄段妊娠妇女在孕早、中、晚期红细胞叶酸监测结果见表1。

统计分析显示，小于20岁年龄段孕妇各孕期监测数据全部大于推荐值400 ng/ml；20～
30岁年龄段和大于30岁年龄段孕妇各孕期监测数据低于推荐值的各有不同占比。

20～30岁年龄段523例孕妇，其中孕早期低于文献推荐值者占7.27% (38/523)，大于30岁年龄段低于推荐值者5例，占3.62%(5/138)，两个年龄段共有43例。

孕早期不同年龄段红细胞叶酸含量水平差异性分析显示，20～30岁年龄段与大于30岁年龄段组差异具有统计学显著性意义(t=-3.873，P<0.01)。

20～30岁年龄
段孕妇红细胞叶酸含量孕早期最低，孕晚期次之，孕中期相对最高，其中孕早期和孕中期、孕早期和孕晚期红细胞叶酸含量差异均有统计学显著性意义(t=-13.827，-9.944，P<0.01)；孕中期和孕晚期红细胞叶酸含量差异无统计学意义(t=2.551，P>0.05)。

138例大于30岁年龄段孕妇红细胞叶酸含量依次相同于20～30岁年
龄段，其中孕早期和孕中期、孕早期和孕晚期红细胞叶酸含量差异均有统计学显著性意义(t=-4.875，-3.574，均P<0.01)；孕中期和孕晚期红细胞叶酸含量差异无
统计学显著性意义(t=1.573，P>0.05)。

表1不同年龄段各孕期红细胞叶酸检测结果(单位：ng/ml)类别<20岁组(n=4)孕早期孕中期孕晚期 20～30岁组(n=523)孕早期孕中期孕晚期 >30岁组(n=138)孕早期孕中期孕晚期xs极小值极大值<400 ng/ml例数
597.80134.394597040769.40259.354961 1360677.40204.494969570
659.00207.502481 43538855.68275.362101 71111810.86292.981951 61127 734.47225.892651 3925896.25279.473051 5936856.99282.162771 4615
2.3 不同孕期红细胞叶酸水平数据配对分析结果见表2。

孕早期和孕晚期红细胞叶酸总体水平相对较低，孕中期最高。

不同孕期红细胞叶酸水平差异有统计学意义(P<0.01)。

3 讨论
孕早期是胎儿器官系统分化、胎盘形成的关键时期，细胞生长、分裂十分旺盛，
此时叶酸缺乏会造成胚胎发育过程中DNA甲基化模式紊乱，其代谢异常导致胎儿罹患唐氏综合征以及胎儿神经管畸形(NTDs)，包括无脑儿、脊柱裂等[7]。

表2不同孕期妇女红细胞叶酸含量配对差异分析(ng/ml)组别均值标准差均值标准误差分的95%置信区间下限上限tdfSig.(双侧)孕早期-孕中期孕早期-孕晚期孕中
期-孕晚期-190.539-145.92644.613228.107256.253218.8838.8399.9308.482-207.895-165.42427.959-173.183-126.42961.266-21.557-
14.6965.2606646646640.0000.0000.000
NTDs发生的时间在受精后16～30天，在神经管闭合完成阶段(停经28天内)，
红细胞叶酸可反映120天内机体叶酸状态，是较为理想的叶酸营养状况反映指标。

预防NTDs发生，是孕期广泛开展的红细胞叶酸检测的一个重要目的。

排除众多
的血浆和血清叶酸水平报道，较近的有关红细胞叶酸报道显示，北京海淀妇保院[5]，用微粒子化学发光法检测3 458例孕妇红细胞叶酸水平为
806.5±273.7ng/ml；北京安贞医院[8]电化学发光方法研究提示：30例补充叶酸60天以上的孕妇红细胞叶酸水平为911.23±198.19 ng/ml；云南计生研究所化学发光免疫测定[6]261例育龄妇女红细胞叶酸水平为529．79±205．44 ng/ml，
以预防NTDs推荐值为标准进行判断，则红细胞叶酸水平偏低率为
73.95%(193/261)。

我们检测665例红细胞叶酸总体均值为784.31 ng/ml，与以上数据均值粗略比较明显大于云南计生研究所检测结果，略低于北京两种方法的结果。

孕早期孕妇红细胞叶酸水平低于孕中期及孕晚期，尤其是在孕早期20～30岁、30岁以上两个年龄段有6.5%受检者低于推荐值情况，可能原因有：①非计划的怀孕，事先未做孕前的叶酸补充；②常规按时按量补充叶酸，不排除受检者是否存在叶酸代谢障碍的遗传风险[9，10]。

由于妊娠期机体对叶酸需求量增多，虽然通过
合理饮食可以改善体内叶酸水平，但是食物中叶酸活性受地域、饮食习惯、烹调方式及蔬菜种类的影响较大，所以妊娠妇女仅通过膳食补充是不够的[11]。

为保证围产期女性叶酸的摄入量，目前已有多个国家通过强制性叶酸补服来预防胎儿神经管畸形。

我国妇幼保健相关部门也在育龄妇女中推广增补叶酸，包括从准备怀孕前3
个月到整个孕期进行叶酸补充。

由于胎儿DNA的合成，胎盘、母体组织和红细胞增加都使孕妇对叶酸的需要量大大增加，所以即使胎儿的神经系统在孕早期已经发育完成，但孕中、后期的缺乏仍然会引起巨幼红细胞性贫血、先兆子痫、胎盘早剥等的发生。

但是，孕妇应在医生的指导下科学服用叶酸，曾有研究发现妇女过度增补叶酸可能增加多胎妊娠危险性，因此增补叶酸的安全性也一直是学术界关注的问题。

参考文献：
【相关文献】
[1] Donnelly J．Folic Acid[J]．Critical Reviews in Clinical Laboratory Sciences，2001，38(3)：183-223．
[2] Snow CF．Laboratory diagnosis of vitamin B12 and folate deficiency：A guide for the primary care physician[J]．Arch intern Med，1999，159(12)：1289-1298．
[3] Fairbanks VF，Klee G，Virgil F．Biochemical aspects of hematology[M]．3th Ed．Philadelphia：WB Saunders，1999：1642-1710．
[4] Daly LE，Kirke PN，Molloy A，et al．Folate levels and neural tube defects lmplications for prevention[J]．JAMA，1995，274(21)：1698-1702．
[5] 滕越，胡京苗，董珊，等．北京地区孕早期妇女红细胞叶酸水平及适宜叶酸补充时间剂量[J]．卫生研究，2017，46(4)：569-572，578．
Teng Y，Hu JM，Dong S，et al．Concentration of red blood cell folate and the analysis
of folic acid supplement optimum time and dose in first trimester[J]．Journal of Hygiene Research，2017，46(4)：569-572，578．
[6] 速存梅，叶汉风，王珏，等．育龄妇女血清叶酸及红细胞叶酸水平检测分析[J]．中华妇幼临床医学杂志(电子版)，2012，8(6)：589-592．
Su CM，Ye HF，Wang J，et al．Analysis of serum folic acid and red blood cell folic acid comcentration among childbearing aged[J]．Chin J Obstet Gynecol Pediatr(Electron Ed)，2012，8(6)：589-592．
[7] 廖亚平，李蕾娜，鲍明升，等．MTHFR，MTRR和M-TR基因多态性与唐氏综合征发生的相
关性研究[J]．激光生物学报，2010，19(3)：358-362．
Liao YP，Li LN，Bao MS，et al．Relationship between the polymorphisms in genes of
MTHFR，MTRR and MTR and the risk of delivering a child with Down’s
Syndrome[J]．Acta Laser Biology Sinica，2010，19(3)：358-362．
[8] 贺建勋，袁慧．电化学发光法测定红细胞叶酸水平的性能评价[J]．标记免疫分析与临床，2014，21(3)：315-317．
He JX，Yuan H．Determination of red cell folate concentrations with electrochemilumineseenee method[J]．Labeled Immunossays & Clin Med，2014，21(3)：315-317．
[9] 归巧娣，苍金荣，宫艳艳，等．西安地区育龄妇女MTHFRC677T基因型分布研究[J]．现代检
验医学杂志，2015，30(6)：36-41，45．
Gui QD，Cang JR，Gong YY，et al．Geographical distribution of MTHFRC677T gene among the gestational age womenin Xi’an[J]．Journal of Modern Laboratory Medicine，2015，30(6)：36-41，45．
[10] 王涛，高劲松，边旭明，等．红细胞叶酸水平及叶酸代谢相关基因多态性与不良妊娠结局的
相关性研究[J]．生殖医学杂志，2010，19(1)：48-52．
Wang T，Gao JS，Bian XM，et al．Study on the relationship of erythrocyte folate status，polymorphic variation in folate-related genes and adverse pregnancy
outcomes[J]．Journal of Reproductive Medicine，2010，19(1)：48-52．
[11] 孙红，王留娣．124例孕妇妊娠期血清叶酸水平动态观察[J]．上海预防医学，2002，14(2)：60-61．
Sun H，Wang LD．Observation on serum folic acid trend of 124 pregnant
women[J]．Shanghai Journal of Preventive Medicine，2002，14(2)：60-61．。