复方丹参制剂中丹参、三七合提工艺优选

JOURNAL OF CHENGDE MEDICAL COLLEGE Vol.34 N o.6 2017
基础医学
复方丹参制剂中丹参、三七合提工艺优选+
刘沛，胡梅娟，谭静静，刘翠哲八
(承德医学院中药研究所/河北省中药研究与开发重点实验室，承德医学院，河北承德067000)【摘要】0的:优选复方丹参制剂中丹参、三七合提工艺。

方法:以丹参素、丹参酮n A、三七皂苷民为指标成分，采用四因素三水平以34)的正交试验优选丹参与三七合提的工艺。

结果：丹参、三七合提最佳工艺为8倍量70% 乙醇超声提取3次，每次60m in，合并滤液，抽滤;滤渣加10倍量水超声提取2次，每次30m in，合并水液，醇沉至含 醇量50%，抽滤;滤液与醇提液合并，回收乙醇，冷冻干燥。

结铪:本研究确定的复方丹参制剂中丹参、三七的提 取工艺稳定简便，丹参和三七中有效成分的提取率均较高。

扶键词】复方丹参制剂;丹参;三七;合提工艺;正交试验
【中图分类号】R283 【文献标识码】A【文章编号】1004-6879(2017) 06-045卜03
0PT E M IZ A110N O F CO-EXTRACTING TECH NO LO G Y O F SA L W A M ILIIO R R H IZA A N D PANAX
N O TO G INSENG IN CO M PO UND DANSH EN PREPARATION
LIU Pei, H U M ei-juan, TAN Jing-jing, et al
(Institute o f C hinese M ateria M edica/H ebei K ey Laboratory o f R esearch and E xploitation o f T raditional
Chinese M edicine, Chengde M edical College, H ebei Chengde 067000, China)
【A B ST R A C T】Objective:To optim ize the extraction process o f Salvia m iltionhiza and Panax notoginseng in C o n fo u n d
D anshen preparatioa M ethods: Four factors and three levels 1^(34) orthogonal test w as used to optim ize the co-extracting
technology o f Salvia m iltionhiza and Panax notoginseng by taking Danshensu, tanshinone IIA and notoginsenoside as index conqx)nent Results: The optim al co-extracting technology o f S alvia m iltiorrhiza and Panax notoginseng w as: 8 tim es o f 70% ethanol ultrasonic extraction o f 3 tim es, each tim e 60m in, m erged filtrate and filtering; the residue w as ultrasonically extracted 2 tim es w ith 10 tim es o f w ater, each tim e 30min; m erged the w ater solution, alcohol precipitation to the alcohol content o f 50% and filtering; m erged the filtrate and alcohol extract, recycled ethanol and froze drying. C onclusions: The co-extracting technology o f Salvia m iltionbiza and Panax notoginseng in C onpound D anshen preparation in this study is stable and single, and the extraction efficiency is feirly high.
【K E Y W O R D S】C om pound D anshen preparation; Salvia m iltionbiza; Panax notoginseng; C o-extraction technology;
O rthogonal test
丹参的主要有效成分包括脂溶性成分和維性成分，三七的主要有效成分是皂苷类[1'复方制剂中丹参、三七 有效成分含量的高低，直接关系制剂疗效的好坏。

历版中 国药典复方丹参方中，复方丹参滴丸是将丹参和三七用水 合煎，复方丹参气雾剂是册参和三七分别娜找后混娜剂，其它复方丹参制剂如复方丹参片、复方丹参颗粒 *
*河北省高校重点学科建设项目资助
△通讯作者等都是将丹参提取浓缩成浸膏或干膏后与三七粉直接混 勻制剂。

若只用水煎则影响離賊分雛出;若将三七直撕碎后规则勳賴用量;m i w p三七单独提取, 则忽略了二者之间在提取^中的相互作用。

有文献报道，丹参与三七合提，在一定程能勸册参有贼分雛
取率，抑制三七的溶出，且a现有新物质产生气为此，本研 究对丹参、三七的合提工艺进行了筛选，以期提高二者有
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效成分的賴，为进一步研究复方丹参方制剂及其綱作用提供基础。

1仪器纖与雜
Agilent Technologies 1200 Series高效液相色谱仪：四滴，Agilent DAD检测器，在线脱气装置，自动进样器，柱温箱和Agilent ChemstationX作站(美国Agilent公司)；CHRIST实验室型冻干机(北京博励行仪器有限公司)；K Q Z200DE型数控超声仪(昆山市超声仪器有限公司)。

丹 参为属植物丹参脚涵万讲）的予燥根及根 基，三七为五加科植物三七(Sunt,.
C6e o)的干燥根，均购于北京同仁堂药店承德分店，由承德医学院中药研究所赵春颖教授鉴定。

丹参素钠、丹参 酮 IIA、三七皂苷民对照品(110855-200809、11076-200518、110745-200312,中国药品生物制品检定所,含量均>98%); 甲醇、乙腈为色谱纯(天津市协和昊鹏色谱科技有限公司)，冰醋酸、碟酸为分析纯(天津市北方天医化学试剂厂)，水为重蒸水。

2方法与结果
2.1丹参、三七合提方法称取丹参5g、三七3g置100m l 锥形瓶中，先用醇液超声提取,过滤得醇提液备用;滤渣加10^量水超声2次，每次30m in,过滤得水提液,合并水 提液醇沉至含醇量50%,过滤，与先前醇提液合并,回收乙 醇，冷冻干燥。

采用高效液相色谱法测定丹参素、丹参酮 IIA和三七皂苷民的賴[M]。

2.2正交试验优选醇提工艺选取提取时间(A)、提取 次数⑶、乙醇浓度(C)和溶剂量(D)四个因素，以丹参素、丹参酮n A和三七皂苷民的含量为指标，选用说)正交表按2.1的方法安排试验进行考察。

因素水平表见表1,正 交试验结果见截。

表1因素水平表
提取时间(m in)m m乙鼸度(%)_饊1301608
26027010
39038012
根据正交试验结果(表2):丹参素极差R大小顺序为 A>C>B>D,说明提取时间对丹参素的影响最大，最佳搭配为A2B3C2D2;丹参酮n A极差R大小顺序为C >A> D>B,说明乙醇浓度对丹参酮n A影响最大，最佳搭配 为，三七皂苷比极差R大小顺序为B>A>C >D，说明提取次数对三七皂苷民影响最大，最佳搭配为A iB f jD i。

表2正交果
因素指标(mg/g)
A B C D丹参素丹参酮三七皂
DA苷 R, 11111 2.200 1.617 4.461 21222 1.613 2.026 4.794 31333 1.907 2.1518.000 42123 1.399 1.934 5.266 52231 1.611 1.825 5.870 62312 1.236 1.375 5.829 73132 1.924 1.028 5.614 83213 1.583 1.068 6.712 933210.971 2.0147.071 K1 4.720 4.523 4.019 4.782
丹参素
K2 5.246 4.807 5.773 4.973
K3 4.478 5.110 4.889 4.589
R0.4910.4500.4860.038
K1 5.794 4.579 4.060 5.456
丹参酮K2 5.134 4.919 5.974 4.429
n A K3 4.110 5.540 5.004 5.153
R0.5610.3200.6380.342
K117.255 15.34117.00217.402
三七皂K215.965 17.37617.13120.237
苷民K319.397 20.900 19.48418.978
R 1.611 1.8530.8270.747
方差分析结果(表3)显示:提取时间、提取次数、乙醇 浓度对丹参素含量具有显著影响，溶剂倍数对其影响不大，各个因素对丹参酮IIA和三七皂苷民的含量影响均不大。

综合考虑丹参素、丹参酮nA和三七皂苷r i的含量均狡高，且结合时间与资源的节约,确定最佳醇提工艺为A2B3C2D1,即采用啦量70%乙醇超声提取3|欠，每次60min。

表3方差分析表
方差来源离差平方和方差自由度F P
A0.420.212150.85<0.01
丹参素
B0.330.172119.19<0.01
C0.380.192135.31<0.01
error0.000•⑴2 1.0
丹参酮n
A
A0.4800.2402 1.000
B0.1580.07920.330
error0.6110.3052 1.272
D0.1860.09320.387
=七皂苷
A 2.176 1.5882 1.482
Ri
B 5.273 2.6362 2.158
C 1.3010.65120.533
error 1.1430.22620.310
/-1H).10(2,2)=9.00 ^1H,.05(2,2)=19.0 ^1H,.01(2,2)=99.0
2.3工艺验证试验称取丹参5g、三七3g置100ml锥形 瓶中，共3份，按照优选的最佳工艺进行提取,测定丹参素、丹参酮n A和三七皂苷民的含量。

结果显示，繼的最佳
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提取工艺稳定性良好，可用于对丹参、三七合提。

见表4:
朝工艺獅$3«§果
丹参素(mg/g：)丹参酮n A(mg/g)三七皂苷Ri(mg/g)
1 1.546 2.0058.243
2 1.527 1.9848.017
3 1.547 1.9878.125
均值 1.540 1.9928.128
3 i掀
复方丹参方中有丹参、三七和冰片三味药，冰片为挥
发性结晶成分，不用娜。

娜研究多针对丹参、三描行，
且多[者^^为主。

本研赃#^S T lu fP®麵的
基础上，采用超声法将丹参和三七进行合提，为保证丹参中
月總性成分和雜性成分的娜率，包括了醇提
和水提两齡。

并且，本研縣用政搬并
对健的最佳艺进行了麵，结果显示工魏定，丹
参和三七中有效成分的提取高。

【参考文《1
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(收稿日期:2G17-03-03)
Vol.34 N o.6 2017
丝胶对大鼠IN S-1细胞Bcl-2蛋白表达的影响#
孙一婵，王丹丹，李东哲,刘美晓，王小杰A，陈志宏八
(承德医学院，河■德〇67_
摘要】8蝣.•探W S茧g核卜鼠INS-1细蛋白表的影响。

方:INS-1细胞分为正常对照组、链脲佐菌素(STZ)损伤组和丝胶处理组。

正常对照组细胞用不含药物的完全培养基培养;STZ损伤组细 胞用完全培养基配制的STZ溶液(10mmol/L)培养24h;丝胶处理组细胞用完全培养基配制的同时含STZ (10mm〇]/L)和丝胶(300 n g/ml)的溶液培养24h。

采用Western Blotting法检测各组INS-1细胞Bd-2蛋白的表 达情况。

结杲:与正常对照组相比,STZ损伤组INS-1细胞Bcl-2蛋白的表达明显降低(F<0.05);与STZ损伤组 比较，丝胶处理组细胞Bd-2蛋白的表达明显升高(P<0.05)j铪:丝胶可能通过上调Bd-2蛋白的表达抑制P 细胞凋亡。

戌键词】丝胶;INS-1细胞;Bd-2蛋白
E FFE C T S O
F S E R IO N O N EX PR ESSIO N O F B C I^2 PR O T EIN IN RATS5INSU C ELLS
S U N^-ch an, W ANG Dan-dan, L I Dong-zhe, et al
(Chengde M edical College, H ebei Chengde 067000, China)
[A B STR A C T]O bjectiye:To investigate the eflFects o f sericin on expression o f B cl-2 protein in rats5 INS-1 cells. M ethods: *
*国家自然科学基金资助項目（81441133)，河北省自然科学基金资助項目（H2013406096),河北潘教育厅青年基金項目
(QN20131089),河北省高校重点发展学科“人体解剖与组织胚胎学”建设项目资助
△通讯作者• 453 •。