胃癌患者淋巴转移与RacGAP1及MCRS1在组织中表达的关系及意义
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２００６，２９（７）：４４４．
（收 稿 日期 ：２０１６—１１— ２４）
文 章编 号 ：１００７— ４２８７（２０１８）０１—００６３—０４
舢 咖
胃癌 患 者 淋 巴转 移 与 ＲａｃＧＡＰ１及 Ｍ ＣＲＳ１ 在 组 织 中表 达 的关 系 及 意 义
路 明 ，李艳 丽。，高 峰 。，王春 文
ｌｅｎｅｅ ａｎｄ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ ＥＪ］．Ｅｕｒ Ｒｅｓｐｉｒ Ｊ，２０ｌ４，４４（６）：
１６９７．
１－９３常 春 ，姚 婉 贞 ，陈 亚 红 ，等 ．慢 性 阻 塞 性 肺 疾 病 患 者 急性 加 重 期 血 清 降 钙 素原 水 平 的变 化 及 临 床 意 义 ＥＪ］．中华 结 核 与 呼 吸 杂 志 ，
一
６４ 一
Ｃｈｉｎ Ｊ Ｌａｂ Ｄｉａｇｎ，Ｊａｎｕａｒｙ，２０１８，Ｖｏｌ ２２，Ｎｏ．１
ｔｉｎ为 内 参 。 ＲＮＡ 提 取 试 剂 盒 、ＰＣＲ 反 应 试 剂 盒 和 ＲＮＡ 逆 转 录试 剂 盒 （上 海 普 洛 麦 格 生 物 产 品 有 限 公 司 ），ＲａｃＧＡＰ１及 ＭＣＲＳ１引 物 （上 海 生 工生 物 工 程 股份 有 限公 司 ）。扩 增 条 件 ：９４℃ ３０ Ｓ，４５℃ ３０ Ｓ，７２℃ ６０ Ｓ，４０循 环 后 ，７２ 。Ｃ ５ｒ ａｉｎ。将 ＰＣＲ 产 物 进行 电泳 ，置 于紫 外 灯下 ，采 用 Ｉｍａｇｅ Ｊ软件 分 析并 计算 ＲａｃＧＡＰ１ｍＲＮＡ 与 ＭＣＲＳｌｍＲＮＡ 的相 对 含 量 ，引物 序列见 表 １。
中 国实 验 诊 断 学 ２０１８年 １月 第 ２２卷 第 ｌ期
一一 一一一一一～一一 ．
ｍ咖 一 皲 一一
～ 一 №唧 ｛一圣 ＆岫Ⅲ ～ 一＝－萎ｌ 哺一 ～ —６３ 一
［７］Ｃｕｌｐｉｔｔ ＳＶ．Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｔｈｅｏｐｈｙｌｌｉｎｅ ｏｎ ｉｎｄｕｃｅｄ ｓｐｕｔｕｍ ｉｎｆｌａｍｍａｔｏ—
＊通 讯 作 者
拒绝 参与本 项研 究者 。本 研究 经 医院医学 伦理委 员 会批 准 ，组 织标 本 的取 得 均 获得 患 者 及 家属 签 署 的 知情 同意 书 。 １．２ 方 法 １．２．１ 免 疫 组 化 检 测 为 组 织 的 ＲａｃＧＡＰＩ 与 Ｍ ＣＲＳ１表 达 选 取 ２Ｏｌ４年 ５月 至 ２Ｏ１５年 ４月 来 我 院 就 诊 且 确 诊 为 胃癌 的 患 者 １２６例 为 研 究 对 象 。 所有 患者 均行 腹 腔 镜 下 胃癌 根治 术 （Ｄ２清 扫）。根 据术 后病 理结 果 ，按 是否 存 在 淋 巴结 转 移 ，分 为 ４５ 例淋 巴结 转移 组 和 ８１例无 淋 巴结转 移组 。两 组 的 一 般 情 况 具 有 可 比性 。 另 外 ，选 取 同 时 期 行 胃镜 检 查 ，结果 为正 常 胃黏 膜 的 １５例 为对 照 。组 织标本 的 取得 及检 测均 获得 患 者 或 家属 知 情 同 意 ，本 课 题 经 院 医学伦 理委 员会 同意 。 １．２．２ 逆 转 录聚合 酶链 反应 （ＲＴ－ＰＣＲ）取 “１．２．１” 项 下 胃组 织 ，用 无 菌 、无 ＲＮａｓｅ的 ＥＰ 管 ，加 入 Ｔｒ— ｉｚｏｌ裂解 液 １．０ ｍｌ，在 ４ ℃下将 标本 剪 成 小块 并 研 磨至 液体 澄清 ，移 至新 ＥＰ管 中 ，加 氯 仿 混 匀 ，高 速 离心 ３ ｍｉｎ，取 上层水 相 ０。５ ｍｌ，加 ０．５ ｍｌ异 丙 醇 ， 混匀 ，去 上 层 ，可 得 总 ＲＮＡ。 以 ＭＭＬＶ 逆 转 录 酶 与引 物行 ＲＴ－ＰＣＲ，互 补 脱 氧 核糖 核 酸 （ｅＤＮＡ）合 成体 系进行 逆 转 录 ：４２℃６０ ｍｉｎ，９５℃５ ｍｉｎ。检 测 ＲａｃＧＡＰｌｍＲＮＡ 与 ＭＣＲＳｌｍＲＮＡ 相对 表达 ，ｂ－ａｃ－
ｒｙ ｉｎｄｉｃｅｓ ａｎｄ ｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌ ｃｈｅｍ ｏｔａｘｉｓ ｉｎｃｈｒｏｎｉｃ ｏｂｓｔｒｕｃｔｉｖｅ ｐｕｌｍｏ—
ｎａｒｙ ｄｉｓｅａｓｅ［Ｊ］．Ａｍ．Ｊ Ｒｅｓｐｉｒ Ｃｒｉｔ Ｃａｒｅ Ｍｅｄ，２００２，１６５：１３７１． ［８］Ｓｉｎｇｈ Ｄ，Ｋｏｌｓｕｍ Ｕ．Ｅｏｓｉｎｏｐｈｉｌｉｃ ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ ｉｎ ＣＯＰＤ：ｐｒｅｖａ—
（１．吉 林 市 中心 医 院 基 本 外科 ，吉 林 吉 林 １３２０００；２．吉林 省疾 病 预 防控 制 中 心 ； ３．吉 林 大 学 白求 恩 第 一 医 院 ；４．吉林 大 学 中 日联 谊 医 院 ）
胃癌 （ＧＣ）为 我 国现 阶段 发 病 率 较 高 的 消化 道 恶 性肿 瘤 ，每年 有 超 过 １６万 人死 于 胃癌 口 ］。造 成 胃癌 患者死 亡 的主 要 原 因在 于淋 巴结 转 移 ，如何 早 期 预测 淋 巴结转 移 的 风 险对 于 个 体化 治疗 ，提 高患 者 生存 质量 及延 长患者 生存 期具 有一 定意 义 。研究 显 示 ＲａｃＧＣＴ 酶 活 性 蛋 白一１（ＲａｃＧＡＰ１）和 微 球 蛋 白 ｌ（ＭＣＲＳ１）在 肺 癌 和直 肠 癌 等 恶 性 肿 瘤 中存 在 高 表 达＿３．４ｌ。本文 探讨 ＲａｃＧＡＰｌ与 ＭＣＲＳ１在 淋 巴 转 移 胃癌组 织 中表达 及对 生存 时 间的影 响 。 １ 对 象 与 方 法 １．１ 研究 对象 选 取 ２Ｏ１４年 ５月一２０１５年 ４月来 我院就 诊且 确诊 为 胃癌 的 患 者 １２６例 为 研究 对 象 。 所 有 患者均 行腹 腔境 胃癌 根治 术 （Ｄ２清 扫 ），留取肿 瘤 组织 。所 有组 织 标本 均 为新 鲜 组 织 ，经 病 理学 检 查 确诊 为 胃癌 ，根据是 否存 在淋 巴结 转移 ，分 为淋 巴 结 转移 组 ４５例 和无淋 巴结 转移 组 ８１例 。两组 的一 般 情况 具有 可 比性 。另外 ，选 取 同时 期 行 胃镜 检 查 的 １５例 为 对 照组 ，结 果 为正 常 胃黏膜 。纳 入标 准 ： 均 经 过病理 检查 确诊 ，且均 为首 次确 诊 ；无 其他 肠道 疾 病 ；近期 未服 用影 响 ＲａｃＧＡＰ１与 ＭＣＲｓ１表达 的 药 物 。排 除标 准 ：年龄 ＜ １８周 岁 ；术前 接 受 放化 疗 ；
（收 稿 日期 ：２０１６—１１— ２４）
文 章编 号 ：１００７— ４２８７（２０１８）０１—００６３—０４
舢 咖
胃癌 患 者 淋 巴转 移 与 ＲａｃＧＡＰ１及 Ｍ ＣＲＳ１ 在 组 织 中表 达 的关 系 及 意 义
路 明 ，李艳 丽。，高 峰 。，王春 文
ｌｅｎｅｅ ａｎｄ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ ＥＪ］．Ｅｕｒ Ｒｅｓｐｉｒ Ｊ，２０ｌ４，４４（６）：
１６９７．
１－９３常 春 ，姚 婉 贞 ，陈 亚 红 ，等 ．慢 性 阻 塞 性 肺 疾 病 患 者 急性 加 重 期 血 清 降 钙 素原 水 平 的变 化 及 临 床 意 义 ＥＪ］．中华 结 核 与 呼 吸 杂 志 ，
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Ｃｈｉｎ Ｊ Ｌａｂ Ｄｉａｇｎ，Ｊａｎｕａｒｙ，２０１８，Ｖｏｌ ２２，Ｎｏ．１
ｔｉｎ为 内 参 。 ＲＮＡ 提 取 试 剂 盒 、ＰＣＲ 反 应 试 剂 盒 和 ＲＮＡ 逆 转 录试 剂 盒 （上 海 普 洛 麦 格 生 物 产 品 有 限 公 司 ），ＲａｃＧＡＰ１及 ＭＣＲＳ１引 物 （上 海 生 工生 物 工 程 股份 有 限公 司 ）。扩 增 条 件 ：９４℃ ３０ Ｓ，４５℃ ３０ Ｓ，７２℃ ６０ Ｓ，４０循 环 后 ，７２ 。Ｃ ５ｒ ａｉｎ。将 ＰＣＲ 产 物 进行 电泳 ，置 于紫 外 灯下 ，采 用 Ｉｍａｇｅ Ｊ软件 分 析并 计算 ＲａｃＧＡＰ１ｍＲＮＡ 与 ＭＣＲＳｌｍＲＮＡ 的相 对 含 量 ，引物 序列见 表 １。
中 国实 验 诊 断 学 ２０１８年 １月 第 ２２卷 第 ｌ期
一一 一一一一一～一一 ．
ｍ咖 一 皲 一一
～ 一 №唧 ｛一圣 ＆岫Ⅲ ～ 一＝－萎ｌ 哺一 ～ —６３ 一
［７］Ｃｕｌｐｉｔｔ ＳＶ．Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｔｈｅｏｐｈｙｌｌｉｎｅ ｏｎ ｉｎｄｕｃｅｄ ｓｐｕｔｕｍ ｉｎｆｌａｍｍａｔｏ—
＊通 讯 作 者
拒绝 参与本 项研 究者 。本 研究 经 医院医学 伦理委 员 会批 准 ，组 织标 本 的取 得 均 获得 患 者 及 家属 签 署 的 知情 同意 书 。 １．２ 方 法 １．２．１ 免 疫 组 化 检 测 为 组 织 的 ＲａｃＧＡＰＩ 与 Ｍ ＣＲＳ１表 达 选 取 ２Ｏｌ４年 ５月 至 ２Ｏ１５年 ４月 来 我 院 就 诊 且 确 诊 为 胃癌 的 患 者 １２６例 为 研 究 对 象 。 所有 患者 均行 腹 腔 镜 下 胃癌 根治 术 （Ｄ２清 扫）。根 据术 后病 理结 果 ，按 是否 存 在 淋 巴结 转 移 ，分 为 ４５ 例淋 巴结 转移 组 和 ８１例无 淋 巴结转 移组 。两 组 的 一 般 情 况 具 有 可 比性 。 另 外 ，选 取 同 时 期 行 胃镜 检 查 ，结果 为正 常 胃黏 膜 的 １５例 为对 照 。组 织标本 的 取得 及检 测均 获得 患 者 或 家属 知 情 同 意 ，本 课 题 经 院 医学伦 理委 员会 同意 。 １．２．２ 逆 转 录聚合 酶链 反应 （ＲＴ－ＰＣＲ）取 “１．２．１” 项 下 胃组 织 ，用 无 菌 、无 ＲＮａｓｅ的 ＥＰ 管 ，加 入 Ｔｒ— ｉｚｏｌ裂解 液 １．０ ｍｌ，在 ４ ℃下将 标本 剪 成 小块 并 研 磨至 液体 澄清 ，移 至新 ＥＰ管 中 ，加 氯 仿 混 匀 ，高 速 离心 ３ ｍｉｎ，取 上层水 相 ０。５ ｍｌ，加 ０．５ ｍｌ异 丙 醇 ， 混匀 ，去 上 层 ，可 得 总 ＲＮＡ。 以 ＭＭＬＶ 逆 转 录 酶 与引 物行 ＲＴ－ＰＣＲ，互 补 脱 氧 核糖 核 酸 （ｅＤＮＡ）合 成体 系进行 逆 转 录 ：４２℃６０ ｍｉｎ，９５℃５ ｍｉｎ。检 测 ＲａｃＧＡＰｌｍＲＮＡ 与 ＭＣＲＳｌｍＲＮＡ 相对 表达 ，ｂ－ａｃ－
ｒｙ ｉｎｄｉｃｅｓ ａｎｄ ｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌ ｃｈｅｍ ｏｔａｘｉｓ ｉｎｃｈｒｏｎｉｃ ｏｂｓｔｒｕｃｔｉｖｅ ｐｕｌｍｏ—
ｎａｒｙ ｄｉｓｅａｓｅ［Ｊ］．Ａｍ．Ｊ Ｒｅｓｐｉｒ Ｃｒｉｔ Ｃａｒｅ Ｍｅｄ，２００２，１６５：１３７１． ［８］Ｓｉｎｇｈ Ｄ，Ｋｏｌｓｕｍ Ｕ．Ｅｏｓｉｎｏｐｈｉｌｉｃ ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ ｉｎ ＣＯＰＤ：ｐｒｅｖａ—
（１．吉 林 市 中心 医 院 基 本 外科 ，吉 林 吉 林 １３２０００；２．吉林 省疾 病 预 防控 制 中 心 ； ３．吉 林 大 学 白求 恩 第 一 医 院 ；４．吉林 大 学 中 日联 谊 医 院 ）
胃癌 （ＧＣ）为 我 国现 阶段 发 病 率 较 高 的 消化 道 恶 性肿 瘤 ，每年 有 超 过 １６万 人死 于 胃癌 口 ］。造 成 胃癌 患者死 亡 的主 要 原 因在 于淋 巴结 转 移 ，如何 早 期 预测 淋 巴结转 移 的 风 险对 于 个 体化 治疗 ，提 高患 者 生存 质量 及延 长患者 生存 期具 有一 定意 义 。研究 显 示 ＲａｃＧＣＴ 酶 活 性 蛋 白一１（ＲａｃＧＡＰ１）和 微 球 蛋 白 ｌ（ＭＣＲＳ１）在 肺 癌 和直 肠 癌 等 恶 性 肿 瘤 中存 在 高 表 达＿３．４ｌ。本文 探讨 ＲａｃＧＡＰｌ与 ＭＣＲＳ１在 淋 巴 转 移 胃癌组 织 中表达 及对 生存 时 间的影 响 。 １ 对 象 与 方 法 １．１ 研究 对象 选 取 ２Ｏ１４年 ５月一２０１５年 ４月来 我院就 诊且 确诊 为 胃癌 的 患 者 １２６例 为 研究 对 象 。 所 有 患者均 行腹 腔境 胃癌 根治 术 （Ｄ２清 扫 ），留取肿 瘤 组织 。所 有组 织 标本 均 为新 鲜 组 织 ，经 病 理学 检 查 确诊 为 胃癌 ，根据是 否存 在淋 巴结 转移 ，分 为淋 巴 结 转移 组 ４５例 和无淋 巴结 转移 组 ８１例 。两组 的一 般 情况 具有 可 比性 。另外 ，选 取 同时 期 行 胃镜 检 查 的 １５例 为 对 照组 ，结 果 为正 常 胃黏膜 。纳 入标 准 ： 均 经 过病理 检查 确诊 ，且均 为首 次确 诊 ；无 其他 肠道 疾 病 ；近期 未服 用影 响 ＲａｃＧＡＰ１与 ＭＣＲｓ１表达 的 药 物 。排 除标 准 ：年龄 ＜ １８周 岁 ；术前 接 受 放化 疗 ；