HPLC法测血清奥氮平浓度(一)

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HPLC法同时测定人血浆中多塞平,氯氮平浓度

减少 ,血浆中其他物质对测定结果的干扰小。用本文建立的方法 ,对临床应用胺碘酮的病人进行血药
浓度测定 ,共 26例次 ,未达到有效血药浓度的有 6例 ,占 23. 1% ,达到血药浓度但未到中毒浓度的为 18例 ,占 69. 2% ,达到中毒浓度的为 2 例 ,占 7. 7%。其中达到中毒浓度的两例患者 ,胃肠道反应严重 ,严重心动过缓 ,及心电图表现为 Q 2T 间期延长 ,有文献证实其不良反应的发生率呈明显的剂量相关性 [5 ] ,因此对其血药浓度测定有助于避免其不良反应的发生。
HPLC法同时测定人血浆中多塞平、氯氮平浓度
毛名扬 ,李顺炜 ,李国忠
(安徽省铜陵市人民医院药剂科 ,安徽铜陵 244000)
摘要 :目的建立血浆中多塞平 ( doxep in, DXP) 、氯氮平 ( clozap ine, CZP)的 HPLC检测方法。方法采用日本分光 JASCO1500 系列高效液相色谱仪 , Kromasil C18柱 (150 mm ×4. 6 mm , 5μm ) ,以地西泮 ( diazepam , DZP)为内标 ,流动相组成为甲醇 2乙睛 2水 2 四甲基乙二胺 2冰醋酸 (50∶50∶100∶2∶1. 5) ,流速为 0. 8 m l·m in - 1 ,紫外检测波长 254 nm ,灵敏度 AuFs = 0. 02。结果血浆中两组分和内标均能很好地分离 ,无明显的干扰峰。线性良好 ,日内、日间 RSD < 8 %。结论本法操作简便、结果可靠 ,适用于药物监测和中毒分析。关键词 :多塞平 ;氯氮平 ;地西泮 ; HPLC
23血浆样品处理方法于空白试管中加入内标液2加入5ml乙醚继续震荡3min静置2min取有机相于45水浴上缓慢用n2吹干残渣用100l流动相溶解涡旋混合24色谱行为在本实验条件下血浆样品中各组分均能明显干扰峰10rain内出峰完全

反相高效液相色谱法测定人血清中奥氮平浓度

９４
１，
４
ｍｏｉｈｓｏｓｓｎｆｐｏｐａｕｅ（Ｈ：６８，ｏｔｉｉｇ０５ｔｉｔｙａｎ）ｂｌｐａｅｃｎｉｔｇｏｈｓｈｔｂｆｒｐｅｉ．６ｃｎａｎｎ、％ｒｈｌｍｉｅ一ｍｅｈｎｌ（０：０／）ｔｅｆｗｒｔｗｓ１０ｍＬ／ｎｅｔａｏ６４．１／Ｖ；ｏａｅａ．ｈｌｍｉ
６
３２＾
８
Ａｓｒｃ：ｂｅｔｅＴｅｅｐａＲｂｔａｔＯｊｃｉｏｄｖｌＰ—ＨＬｅｈｄｆｈｅｒｉａｏｆｏａｚｐｎｏｃｎｒｔｎｉｓｒｍ．ｔｏｓＴｅａａｆｄｖｏＰＣｍｔｏｏｔｅｄｔｍｎｔｎｏｌｎａｉｅｃｎｅｔｉｎｅｕＭｅｈｄｈｌｌｉｒｅｉａｏｋｉｅ
维普资讯
Ａ
临床医药
２０年第１卷第２期０７６１
组
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反相高效液相色谱法测定人血清中奥氮平浓度
唐亚芳，宋伟明，吴柳松
（江省宁波市康宁医院药剂科，江宁波３５０）浙浙１２１
摘要：目的建立测定血清中奥氯平浓度的反相高效液相色谱（Ｐ—ＨＬ）。法血清碱化后用乙醚提取，用ＲＲＰＣ法方采Ｐ—ＨＬＰＣ法检测，色谱柱为ＨｐｒｉＯＳ柱（５ｍｘ．ｍ，．ｍ）流动相为磷酸盐缓冲液（Ｈ：６８，ｙｅｌＤｓ１０ｍ６ｍ２５４，ｐ．６内含０５三乙胺）．％一甲醇（０：０／，速４６，）流

高效液相色谱法测定奥氮平的含量

高效液相色谱法测定奥氮平的含量黄坤;郭庆东;谢芳;王增明;郭嘉;梅兴国【摘要】为了建立一种高效液相色谱法测定奥氮平及其口崩片的含量,采用Venusil ASB C18色谱柱(4.6 mm× 150 mm,5μm)进行分析,流动相为缓冲液(pH=2.5):乙腈=45:55(体积比)；检测波长为259 nm;柱温为25℃；流速为1.5 mL·min-1；进样量为20μL.结果表明:奥氮平在20.33 ～203.30μg·mL-1范围内线性关系良好(r=0.999 8),平均回收率为100.12％(RSD =0.33％),检测限为1ng；该方法灵敏快速、重复性好、专属性强,可用于非经典抗精神病药奥氮平及其口崩片的含量测定.%To establish a high performance liquid chromatography method for determining the content of olanzapine and in orally disintegrating tablets, the best HPLC conditions were set as follows; a Venusi l ASB C18 (4.6 mm× 150 mm,5μm) column, mobile phase of buffer solution (pH=2.5) - acetonitrile ( 45: 55 ), ultraviolet absorption detector of 259 nm, column temperature of 25 ℃, flow rate of 1.5 mL·min-1, injection volume of 20 μL. The results show that th e linearity of olanzapine is in the range of 20. 33 to 203.30μg·mL-1 (r =0.9998), the average recovery is 100.12% with relative standard deviation( RSD) of 0.33% , the limit of detection(LOD) is 1 ng. The method is sensitive, quick, repeatable, and thus it can be provided for determining the content of olanzapine and in orally disintegrating tablets.【期刊名称】《武汉工程大学学报》【年(卷),期】2012(034)004【总页数】5页(P11-14,68)【关键词】高效液相色谱法;奥氮平;口崩片;含量测定【作者】黄坤;郭庆东;谢芳;王增明;郭嘉;梅兴国【作者单位】武汉工程大学绿色化工过程教育部重点实验室,湖北武汉430074;军事医学科学院毒物药物研究所,北京100850;军事医学科学院毒物药物研究所,北京100850;武汉工程大学绿色化工过程教育部重点实验室,湖北武汉430074;军事医学科学院毒物药物研究所,北京100850;武汉工程大学绿色化工过程教育部重点实验室,湖北武汉430074;军事医学科学院毒物药物研究所,北京100850;武汉工程大学绿色化工过程教育部重点实验室,湖北武汉430074;军事医学科学院毒物药物研究所,北京100850【正文语种】中文【中图分类】R9170 引言奥氮平(olanzapine)是美国礼来公司研究开发的非经典抗精神病药，为噻吩苯二氮类多巴胺(DA)和5-羟色胺(5-HT)拮抗剂，它能选择性作用于中脑边缘多巴胺通路，改善脑内多种神经通路功能，主要用于治疗精神分裂症、精神病性障碍和情感障碍等[1].临床试验表明奥氮平能有效改善精神病理学的各个方面，疗效卓越且副作用轻微，尤其是锥体外系副反应(EPS)和迟发性运动障碍(TD)发生率很低[2]，因此目前奥氮平正成为治疗精神病性障碍的生力军.口崩片作为一种新型片剂，具有服用简单方便、在口腔中能迅速崩解或溶解、吸收起效快以及能避免肝脏首过效应等优点[3]；由于其在精神疾病治疗方面有着独特的实用性，将抗精神病药奥氮平制备成口崩片，能提高患者药物治疗的依从性，减少护理工作的负担[4].关于奥氮平药代动力学的报道常见于文献[5-8]，但关于其含量及有关物质测定的报道不多[9-10]，同时中国药典也未收录该药，因此缺乏相应的药品标准.本文在参照最新美国药典的基础上建立了奥氮平原料药及片剂含量测定的高效液相色谱法，同时应用于相应的质量和稳定性研究.实验结果表明方法灵敏度高、重复性好、专属性强，适合奥氮平及其片剂的含量测定和有关物质检查.1 实验部分1.1 仪器与试药Agilent 1200高效液相色谱仪(Degasser G1322A，Quat pump G1311A，ALS G1329A，TCC G1316A，VWD G1314D，美国Agilent公司)；Venusil ASBC18色谱柱(4.6 mm×150 mm，5 μm，北京艾杰尔科技有限公司)；分析天平(Sartorius BT125D型，德国赛多利斯公司)；超声清洗仪(KS-120D型，新芝仪器厂).奥氮平对照品(中国食品药品检定研究院，批号：100948-200801)，奥氮平原料药(军事医学科学院毒物药物研究所合成，批号20110831、20110930、20111010)，奥氮平口崩片(自制，批号20111120、20111210、20111217)，乙腈、甲醇为色谱纯，磷酸、磷酸二氢钠、十二烷基硫酸钠为分析纯，水为双蒸水.1.2 实验方法1.2.1色谱条件色谱柱：Venusil ASB C18色谱柱(4.6 mm×150 mm，5 μm)；流动相：缓冲液(含质量分数为0.69%磷酸二氢钠和质量分数为1.2%十二烷基硫酸钠，磷酸调节pH值为2.5)-乙腈(45：55)；检测波长：259 nm；柱温：25 ℃；流速：1.5 mL·min-1；进样量：20 μL.1.2.2 溶液的配制对照品溶液：精密称取奥氮平对照品，流动相溶解、定容制成质量浓度为100 μg·mL-1的溶液，作为对照品溶液.奥氮平溶液：精密称取奥氮平原料药适量，配制方法同对照品溶液，作为原料药溶液.供试品溶液：取奥氮平口崩片20片，称重，研细至粉末；精密称取适量(相当于奥氮平30.00 mg)，流动相溶解后用0.45 μm的有机滤膜过滤.流动相将续滤液稀释成100 μg·mL-1的溶液，作为供试品溶液.1.2.3 专属性试验酸破坏：取片剂研细粉末，流动相配制成0.5 mg·mL-1的溶液，加入0.5 mol·L-1HCl溶液适量，室温放置1 d，0.5 mol·L-1NaOH溶液中和后滤过，续滤液作为酸破坏样品溶液.碱破坏：取片剂研细粉末，流动相配制成0.5 mg·mL-1的溶液，加入0.1 mol·L-1NaOH溶液适量，室温放置2 d，0.1 mol·L-1HCl溶液中和后滤过，续滤液作为碱破坏样品溶液.氧化破坏：取片剂研细粉末，流动相配制成0.5 mg·mL-1的溶液，加入30%的双氧水适量，室温放置5 d后滤过，续滤液作为氧化破坏样品溶液.高温破坏：取片剂研细粉末，于60 ℃条件下放置1 d，流动相稀释定容制成浓度为100 μg·mL-1的溶液，滤过，续滤液作为高温破坏样品溶液.光照破坏：取片剂研细粉末，于4 500 lx强光条件下照射5 d，流动相稀释定容制成浓度为100 μg·mL-1的溶液，滤过，续滤液作为光照破坏样品溶液.分别取奥氮平溶液、流动相、各种破坏样品溶液以及空白辅料溶液，按“2.1”项下的色谱条件测定各溶液，记录色谱图至主峰保留时间的3倍.1.2.4 线性关系精密称取奥氮平原料药，流动相溶解、稀释制备成浓度为20.33、50.83、81.32、101.65、121.98、152.48、203.30 μg·mL-1的系列标准溶液.按“2.1”项下的色谱条件测定各溶液，记录峰面积.以峰面积对浓度进行线性回归，计算标准方程及相关系数.1.2.5 重复性取奥氮平原料药和20111217批的片剂，按“2.2”项下的方法制备原料药溶液和高、中、低9份供试品溶液，按“2.1”项下的色谱条件测定，计算以标示量为基准的片剂含量及其RSD.1.2.6 中间精密度更换测定时间、高效液相色谱检测仪器和操作人员进行含量测定，具体试验方案同“2.5.1”.1.2.7 回收率分别精密称取奥氮平原料药约8.00、10.00、12.00 mg，置于100 mL容量瓶中，加入处方量辅料，按“2.2”项下供试品溶液的制备方法制备回收率试验溶液.分别取该溶液及奥氮平原料药溶液，按“2.1”项下的色谱条件测定，记录峰面积.按外标法计算方法的回收率及其RSD.1.2.8 溶液稳定性取奥氮平片剂研细粉末，按“2.2”项下供试品溶液的制备方法制备稳定性试验溶液.将其置于室温条件下，分别于0、1、2、4、6、8、12、24 h取该溶液，按“2.1”项下的色谱条件测定，记录峰面积.计算峰面积的RSD，考察24 h内溶液的稳定性.1.2.9 检测限与定量限取“2.2”项下对照品溶液，用流动相逐步稀释，按“2.1”项下的色谱条件测定，按S/N=2计算检测限，按S/N=10计算定量限.1.2.10 含量测定与有关物质检查含量测定：分别取“2.2”项下的对照品溶液、原料药溶液和供试品溶液，按“2.1”项下的色谱条件测定，记录峰面积，按外标法计算原料药和片剂的含量.有关物质检查：取奥氮平原料药和片剂研碎粉末，按“2.2”项下原料药溶液和供试品溶液的配制方法制备成浓度为500 μg·mL-1供试品溶液.精密量取供试品溶液用流动相稀释成质量浓度为7.5 μg·mL-1的对照溶液.按“2.1”项下的色谱条件测定各溶液，记录供试品溶液的色谱图至主峰保留时间的3倍，计算杂质峰面积的总和(不包含溶剂峰和辅料峰)，用主成分自身对照法计算原料药和片剂的有关物质含量.2 结果与讨论2.1 结果2.1.1 专属性试验表明在此色谱条件下，辅料与流动相对测定无干扰，主药能与破坏产生的降解产物有效分离(R>1.5)，方法的专属性良好，结果见图1.2.1.2 线性回归得标准方程：Y=84.465X-92.104，R=0.999 8(n=7)；表明质量浓度在20.33～203.3 μg·mL-1范围内，峰面积与质量浓度呈良好的线性关系.重复性试验测得片剂的平均含量为标示量的98.54%，RSD为0.61%，表明该方法重复性良好；中间精密度试验测得片剂的平均含量为标示量的98.07%，RSD为0.89%，证明该分析方法的中间精密度良好.图1 奥氮平与降解产物的HPLC色谱图Fig. 1 Chromatograms of olanzapine and degradation products 注：a. 空白辅料；b. 流动相；c. 奥氮平溶液；d. 酸降解；e. 碱降解；f. 氧化降解；g. 高温降解；h. 光照降解；1-奥氮平峰.2.1.3 回收率试验按外标法计算得到方法的平均回收率为100.12%，RSD为0.33%，表明方法准确度良好，结果见表1.表1 奥氮平回收率试验结果Table 1 Results of recovery test of olanzapine (n=2)样品实际质量浓度/(μg·mL-1)检测质量浓度/(μg·mL-1)回收率/%平均回收率/%RSD/%180.280.4100.30279.780.1100.46381.681.7100.184100.2100.6100. 40599.799.699.906102.3102.6100.337120.5120.499.938119.7118.999.379121.2121.5100.22100.120.332.1.4 稳定性试验测得峰面积的RSD为0.18%，说明在24 h内溶液的稳定性良好.检测限与定量限试验测得奥氮平的检测限为1 ng，定量限为5 ng，表明方法灵敏度高.2.1.5 含量测定结果表明三批原料药的含量均在98.0%～102.0%之间，三批片剂的含量均在标示量的90.0%～110.0%之间，原料药与片剂的含量符合美国药典要求.有关物质检查结果表明三批原料药的总杂质质量分数均小于0.4%，三批片剂的总杂质质量分数均小于1.5%，原料药与片剂的杂质质量分数符合美国药典要求.结果见表2.表2 奥氮平含量测定与有关物质检查试验结果Table 2 Results of determination of content of olanzapine and its impurities样品批号含量/%有关物质/%奥氮平原料药20110831201109302011101099.999.899.50.080.070.08奥氮平口崩片20111120201112102011121798.297.599.30.190.200.172.2 讨论a.本实验进行了相应的破坏性试验，结果表明奥氮平在酸、碱、氧化、高温和光照的条件下均有不同程度的降解；所产生的杂质均能与主药较好的分离，分离度大于1.5.同时试验结果表明在主药峰之后未出现其他杂质峰，因此在有关物质检查时可以适当缩短分析时间.b.本实验考察了不同的柱温(25～35 ℃)、不同流速(1～1.5 mL·min-1)、缓冲液与有机相不同配比(1∶1～1∶1.5)(体积比)的流动相系统，结果表明柱温为25 ℃、流动相为缓冲液(含质量分数0.69%磷酸二氢钠和质量分数1.2%十二烷基硫酸钠，pH值为2.5)-乙腈(45∶55)(体积比)、流速为1.5 mL·min-1时，柱效较高，保留时间为6.2 min，主药峰与杂质峰能够有效的分离.c.本实验还考察了另一种测定奥氮平的流动相体系：缓冲液(含质量分数0.68%磷酸二氢钾和质量分数1%三乙胺， pH值为6.0)-甲醇-乙腈.实验结果表明其分离效果与“3.2”项下所采用方法相差不大，“3.2”项下流动相体系更为简单，因此采用其作为奥氮平HPLC含量测定方法的流动相.3 结语本研究在综合相关参考文献和药典的基础上，建立了一种简单的测定非经典抗精神病药奥氮平及其片剂的HPLC法，方法学验证结果表明方法灵敏度高、重复性好、专属性强，适合药物的含量测定和有关物质检查.该方法曾用于奥氮平的处方优化和质量研究，结果表明该方法简单快捷，适合药物的相关分析.参考文献：[1] 李娜, 许秀峰. 奥氮平的药理学和临床应用[J]. 云南医药, 2004，25 (6): 521-522.[2] 崔炳喜. 奥氮平——新型抗精神病药[J]. 天津药学, 1999, 11 (4): 13-14.[3] 温中京, 戴建锋. 口腔崩解片的研究进展[J]. 海峡药学, 2010 , 22 (4): 22-24.[4] 寻知元. 药物干预与改善分裂症患者的依从性[J]. 国际精神病学杂志, 2007, 34 (1): 39-42.[5] Berna M, Ackermann B, Ruterbories K, et al. Determination of olanzapine in human blood by liquid chromatography-tandem mass spectrometry[J]. Journal of Chromatography B, 2002, 767 (1): 163-168. [6] D’Arrigo C, Migliardi G, Santoro V, et al. Determination of olanzapinein human plasma by reversed-phase high-performance liquid chromatography with ultraviolet detection[J]. Ther Drug Monit, 2006, 28 (3): 388-393.[7] 季慧芳，谢林，王建，等. 奥氮平血药浓度的测定及其人体药代动力学[J]. 中国药科大学学报, 2002, 33 (5): 397-400.[8] 唐亚芳，宋伟明，吴柳松. 反相高效液相色谱法测定人血清中奥氮平浓度[J]. 临床医药， 2007, 16 (21): 46-47.[9] Raggi M A, Casamenti G, Mandrioli R, et al. Quantitation of olanzapinein tablets by HPLC, CZE, derivative spectrometry and linear voltammetry[J]. Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 2000, 23 (6): 973-981.[10] Krishnaiah C, Vishnu M M, Kumar R, et al. Development of a stability-indicating UPLC method for determining olanzapine and its associated degradation products present in active pharmaceutical ingredients and pharmaceutical dosage forms[J]. Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 2011, 54 (4): 667-673.。

高效液相色谱法测定人体血液中氯氮平的含量

表１
样品测定结果
ｗｈｄＡｒＤｔｔＴｎＧｎｕｎｉＤｅａｅｃｒｇｙａｔｉｒｙｅｏａｅｏ
ａｄＨｏｎ，ｕｉＩｓｉｔｏｎＷｕｎｇＦｊｎｎｔｕｅｇｉｔ
ＲｓｒｔｅｒｃｒｏＭａｔ，ｅａｃｎＳｕｔｅｅｈｈｔｕｔｅｒ
００７．０ｘ．９＋０４５，００＝０８６ｙ．６＋０８６，；２；＝０５５．０ｘ９２０
ＨＬｗｔｐｏｄｄａａｄｔｔｉｄｓＰＣｉｈｔｉｅｙｅｏｓ－ｈｏｏｒｒｅｃｒｅｃｂｄＡｅｐｅｏｅｍｔｌａａａｄｒｅｒｅ．ｃｏｈｎｎ，ｅｙｃｎｍｔｎｓｅｉｔｈｉｎｅｔｎｙ
Ｓａｄｎ，５０６ｈｎｏｇ２７２．
结果与讨论（一）病人服药后按一定时间取血，精确加安定（内标）２０ｇ按上述方法处理，０ｎ，测定病人血
ＵｉＨＬｔｓａｔａｄｅｕｔｓｇＣｅｒｅｍａｒｈｎＰｏｐａｎｓｅｅｃｎｎｏｃｚｉａｏｅｉｔｅｅｅｔｃｏｔｔｌａｎｌｎｘｈｔｒｒｔｅｆｐｅｏｐｎｈｘａｓｅｆｍｔｎｓｏｉｄｓｉｄｔｓａｅｒｐｉｔｂｏｄｅｒｅｉｈｐｐｒｏａｅ＇ｌｓｃｂｎｉｗｔＹ－１１）ａｓｔｎｒｐａ，ｉｈＷＱＣ８（０ｍｓｉａｔｏｙｈｓａｅｍｔｎｌａｒ０２）ｓｉｐａ，ｉａａｅａｏｗｔ（／０ａｍｂｅｓｄｚｐｍｈ／ｅ８ｏｌｈｅａ

高效液相色谱法测定奥氮平的含量

摘要：了建立一种高效液相色谱法测定奥氮平及其口崩片的含量，用ＶｎｓＳ１为采ｅｕｉＡＢＣ８色谱柱ｌ
（．ｍ×１０ｍ５ｍ）行分析，动相为缓冲液（Ｈ＝２５：４６ｍ５ｍ，进流ｐ．）乙腈＝５５体积比）检测波长为４：５（；
高效液相色谱法测定奥氮平的含量
黄坤，庆东，芳，增１郭嘉，国郭２谢王明，２梅兴２
（．１武汉工程大学绿色化工过程教育部重点实验室，湖北武汉４０７；３０４
２军事医学科学院毒物药物研究所，京１０５）．北０８０
合奥氮平及其片剂的含量测定和有关物质检查１实验部分
１１仪器与试药．
发的非经典抗精神病药，噻吩苯二氮革类多巴为胺（Ａ）５羟色胺（一Ｔ拮抗剂，能选择性作Ｄ和一５Ｈ）它用于中脑边缘多巴胺通路，善脑内多种神经通改路功能，主要用于治疗精神分裂症、精神病性障碍
Ａｉｎ２０高效液相色谱仪（ｅａｓｒｇｌｔ１０ｅＤｇｓｅ
Ｇ３２Ｑａｐｍ３ＡＳＧ１２Ａ，Ｃ１２Ａ，ｕｔｕｐＧ１１Ａ，Ｌ３９ＴＣ１Ｇ３６ＶＧ３４１１Ａ，ＷＤ１１Ｄ，美国Ａｉｎ公司）ｇｅｔｌ；
氮平制备成口崩片，能提高患者药物治疗的依从性，少护理工作的负担．减

HPLC法测定人血浆中氯氮平浓度的效果分析

１材料与方法
冻保存的正常人肝素抗凝血浆自然熔融，混匀后将１ｍｌ取出
置于ｌＯｍｌ磨口试管中，用微量注射器吸取标准应用液５ｌ使用ＨＰＬＣ法进行药物浓度检查，操作简单，可以快速的完来，以及１ｍｏｌ／ＬＮａＯＨ（氢氧化钠）溶液２００准确加入其中，然后加入乙醚４ｍｌ，进行３０Ｓ的旋涡振荡，并进行５ｍｉｎ离心，离心速率为３０００ｒ／ａｒｉｎ，静止分层，将全部上清液倾取出来置于锥形离心管中，进行固相萃取。将离心管置于４０￣Ｃ水浴在
来，运用ＨＰＬＣ法对人血浆中氯氮平浓度进行检测。结果具有良好的线性关系的前提条件为血浆氯氮平的浓度在０．１０～２．００ｍｇ／Ｌ。最低检测限为５￣ｔｇ／Ｌ（ｒｓｎ＝３）。对照品血浆的回收率高浓度为（９２．１ ± ３．１）％，
氮气流下将洗脱液吹干。预先用１ｍｌ甲醇活化ＯＡＳＩＳ固相
萃取小柱，然后用１ｍｌ水对其进行洗涤后备用，用１００山甲醇溶解离心管中的残留物，用微量注射器吸取出２０山在色谱仪上进样ｆ流动相复溶和进样）。
低浓度为（１０５．８ ± ７．６）％，中间浓度为（９６．７ ± ８．２）％；日内和Ｅｔ间ＲＳＤ高浓度分别为０．５％、７．１％，低浓度
分别为７．４％、７．６％，中间浓度分别为４．６％、５．８％。结论

高效液相色谱法测定人血浆中奥氮平的浓度

浓度的标准溶液１０μ ０蘈于１ｍＬ空白血浆中，制得一系列不同浓度的奥氮平血浆，再加０２％抗坏血．５
为０２％，．５每毫升血浆中抗坏血酸的加入量为１０
μＬ加入抗坏血酸后的血浆可于－０２ ℃下长期保酸１μ ，０蘈以下按２３２项操作，．（）进样２ μ 测定。存。溶剂提取后，０蘈Ｌ在室温下用氮气吹干。
ＯＳ１ｍ × ．ｍｉ．径５蘭）动Ｄ（０ｍ４ｍ，５６．粒 μ ；相ｄｍ流
为Ｖ（０ｍｌ磷酸钠缓冲液，Ｈ７２：甲醇）５ｍｏＬ／ｐ．）Ｖ（：（Ｖ乙译）２１：的溶液；＝１：０检测波长为２０ｎ７ｍ；流速为１０ｍ／ｉ；．Ｌｍｎ柱温４０℃；灵敏度００５．０
奥平品，别配成３μ／，０蘥Ｌ３氮标准分制０蘥１ μ／，０Ｌ２ｇ０
μ／的血浆。蘥Ｌｇ将每种浓度的血浆分为５每份１份，
ｍ，．５Ｌ加０２％抗坏血酸１蘈，．（）０Ｌ按２３２项操作，当日测定，求得日内平均相对偏差为３８％（＝１）．６ｎ５。另配上述３种浓度的标准血浆各５ｍ，．５Ｌ加０２％抗坏血酸５蘈每日０μ ，分别取１Ｌ测定，５日ｍ连续测定，求得日间平均相对偏差为４１％（．２ｎ＝１）５。
μ／，检测限蘥Ｌ最低为３ｇＬ／。
３３回收率与精密度．分别配制含奥氮平标准品质量浓度为３０ｇＬ１０μ／，０ｇＬ的血浆各５份，／，２蘥Ｌ３０蘥／每份１
ｍ，．％Ｌ加０２抗坏血酸１μ ，．（项操作，５０蘈按２３２Ｌ）在
上述实验条件下分析，测得血浆中奥氮平的平均回收率为（７０ ± ．１％。９．２１）取空白血浆１Ｌ平均分成３每份中加入５ｍ，份，

hplc药物浓度检测步骤

hplc药物浓度检测步骤HPLC（高效液相色谱法）是一种广泛应用于药物分析领域的定量检测方法。

它通过将样品溶液注入进高效液相色谱仪内，利用不同化学成分在移动相和固定相之间的差异，实现对药物浓度的定量分析。

下面将介绍一般的HPLC药物浓度检测步骤。

1. 准备样品：首先，需要准备待测药物溶液。

根据药物的特性和浓度范围，决定溶剂的选择和配比。

一般来说，常用的溶剂有水、乙腈、甲醇等。

为了保证准确性和重复性，样品的制备过程中需要避光和严格控制温度。

2. 筛选固定相：根据药物的特性，选择适当的固定相。

固定相是一种固体材料，其表面经过了特殊处理，可以吸附样品中的目标分析物。

常用的固定相有C18柱、C8柱、糖柱等。

选择正确的固定相可以提高分离效果和分析的准确性。

3. 设定分离条件：在HPLC的操作过程中，需要设定适当的分离条件。

首先是移动相的配制，根据固定相的特性和目标分析物的极性，选择合适的溶剂组合和浓度比例。

然后是流速的设定，流速需要根据样品和固定相的性质来调整，以实现药物的充分分离和剂量测定。

4. 注射样品：将准备好的待测药物溶液加入HPLC装置的样品瓶中。

在注射之前，需要进行样品过滤，以保证样品中没有杂质或颗粒物。

然后使用自动注射器或手动注射器将样品注入进HPLC系统。

5. 数据采集和分析：在注射样品后，HPLC系统会自动开始运行。

通过荧光检测器或紫外可见光检测器等设备，检测样品在固定相上的吸光度或荧光发射度，得到药物浓度随时间的变化曲线。

通过计算峰面积或峰高，可以确定药物的浓度。

6. 结果分析与确认：根据HPLC测得的药物浓度曲线，可以计算出药物在样品中的浓度。

与标准品进行对照，确认测定结果的准确性。

同时，需要进行结果的统计分析，包括平均值、相对标准偏差等指标的计算。

如果结果符合预期，则可以确定样品中药物的浓度。

7. 记录与报告：在完成HPLC测定后，要将测定结果记录下来，并撰写检测报告。

报告应包括样品信息、HPLC分析方法、测定结果以及结果的解释和结论。

在线柱切换高效液相色谱法测定人血清中奥氮平、氯氮平和N-去甲氯氮平的浓度

在线柱切换高效液相色谱法测定人血清中奥氮平、氯氮平和N-去甲氯氮平的浓度邵红霞;万长亮【摘要】Objective:To establish a simple method for determining the concentration of olanzapine, clozapine and N-demethyl clozapine. Method:Simultaneous determination of olanzapine, clozapine and N-demethyl clozapine in plasma by on-line column-switching high-performance liquid chromatography with UV detector, and allows the injection of serum.Results:Olanzapine, clozapine and clozapine N-demethyl have good specificity, linearity, precision, recovery and stability in determination by HPLC.Conclusion: On-line column-switching high performance liquid chromatography is a simple, accurate method and suitable for olanzapine, clozapine and N-demethyl clozapine concentrations monitoring in plasma. this method allows the injection of serum, eliminating the tedious pretreatment, at the same time ensure the accuracy of detection.%目的：建立简单并能同时测定人血清中奥氮平、氯氮平及N-去甲氯氮平的血药浓度方法。

奥氮平中有关物质的HPLC法测定

工业技术80科技资讯 SCIENCE & TECHNOLOGY INFORMATIONDOI：10.16661/ki.1672-3791.2018.03.080奥氮平中有关物质的HPLC法测定①张琦（江苏医药职业学院江苏盐城 224005）摘要:建立了高效液相色谱法测定奥氮平中有关物质，使用C8色谱柱梯度洗脱；检测波长为220nm，结果显示奥氮平精密度良好，专属性良好，与有关物质分离完全，奥氮平及各杂质在范围内线性良好，回归线的相关系数R均大于0.9990，但奥氮平溶液在室温下放置有不稳定现象，需立即进样。

结论：该方法重复性好，结果准确，能更好地控制奥氮平中有关物质的含量。

关键词:奥氮平有关物质高效液相色谱仪中图分类号:TQ460 文献标识码:A 文章编号:1672-3791(2018)01(c)-0080-02①课题来源：电化学传感在医药制剂与检测上的应用(项目编号:20178108)。

作者简介：张琦(1988—),女,汉族,江苏盐城人,硕士研究生,助教,研究方向:龙血竭凝胶质量标准。

奥氮平：N HNSNNCH 3CH 3 起始物：NHN SNH 2CH 3杂质A ：SNH NN +O O -CH 3 杂质B ：N HH N SOCH 3图1 奥氮平及其主要杂质的结构式奥氮平化学名为2-甲基-4-（4-甲基-1-哌嗪基-）-10H-噻吩并[2，3-b][1，5]苯并二氮杂卓，是一种新型非典型抗精神病药，可有效改善精神分裂症状，安全性高，耐受性好，EPS发生率低[1-3]，已广泛用于治疗多种精神疾病。

美国药典35版增补1[4]中收录了“奥氮平”质量标准，其有关物质检查项下考察了奥氮平杂质A及奥氮平杂质B两个已知杂质（结构见图1），但考虑企业在奥氮平片合成的实际工艺过程中[5]，可能同时引入起始物：4-氨基-2-甲基-10H-噻吩并[2,3-b][1,5]苯并二氮杂盐酸盐。

笔者拟采用美国药典方法对三种已知杂质进行控制，建立HPLC梯度洗脱方法，测定奥氮平片中有关物质。

RP—HPLC法同时测定人血清中奥氮平和富马酸喹硫平浓度

RP—HPLC法同时测定人血清中奥氮平和富马酸喹硫平浓度目的：建立同时测定人血清中奥氮平、富马酸喹硫平浓度的高效液相色谱法。

方法：血清样品以乙醚进行提取并测定，Hypersil C18反相柱（150mm×46mm，5μm）为色谱柱，流动相为25mmol/L磷酸盐缓冲液（pH60，内含05%三乙胺）-乙腈（65∶35，V/V），流速为10mL/min，柱温为40℃，检测波长为254nm。

结果：奥氮平在100～2500μg、富马酸喹硫平在500～10000μg范围内峰面积与浓度呈良好线性关系；奥氮平、富马酸喹硫平的低、中、高3种浓度相对平均回收率分别为1033%、1008%、987% 和975%、982%、1011%，日内、日间RSD 均低于10% （n=5）。

奥氮平和富马酸喹硫平的检测限均为50μg/L。

结论：该方法灵敏、准确，可用于临床奥氮平和富马酸喹硫平的血药浓度监测。

标签：高效液相色谱法；奥氮平；喹硫平；血药浓度RP-HPLC Method for the Determination of Human Plasma of Olanzapine and Quetiapine ConcentrationLIU WeiCAO MinjuanSHANG XiangYAO ShuyongSuzhou Psychiatric Hospital，Suzhou 215000，ChinaObjective To establish a method for determination olanzapine and quetiapine in human serum by RP-HPLC.Methods The analytes were extracted after serum samples had been alkalinized. The HPLC separation of the analytes was performed on a reversed-phase Hypersil C18 column，using 25mmol·L-1 phosphat buffer （pH60，containing 05% triethylamine）-acetonitrile （65∶35，V/V）as mobile phase，with a flow-rate of 10mL·min-1 anda detective wavelength of 254nm.The temperature of the column was 40℃.Results The calibration curves were linear in the ranges of 100～2500μg·L-1 for olanzapine，500～10000μg·L-1 for quetiapine respectively. The relation of peak area and concentration showed linear in the range of the average recoveries of olanzapine and quetiapine at high，middle and low concentrations were 1033%、1008%、987% and 975%、982%、1011% respectively. The intra-day and inter-day variations RSD were less than 10% （n=5）. The minimum detectable concentration of both olanzapine and quetiapine were 50μg·L-1.Conclusion The method is accurate，sensitive and simple for routine therapeutic drug monitoring （TDM）and for the study of the pharmacokinetics of olanzapine and quetiapine.RP-HPLC ；Olanzapine ；Quetiapine ；Serum Drug Concentration奥氮平（Olanzapine）和富马酸喹硫平（Quetiapine Fumarate）均为新型非典型抗精神病药[1]。

高效液相色谱法测定人血清中氯氮平浓度

高效液相色谱法测定人血清中氯氮平浓度【摘要】目的建立测定人血清中氯氮平药物浓度的高效液相色谱法。

方法采用SHIMADZU高效液相色谱系统,ODS.柱,SPD-10A检测器,C-R6A记录仪,SK-I型快速混匀器,SB2200型超声波清洗器,BHw-I型电热恒温水箱,LC-10A 泵。

流速:1 ml/min;检测波长:254 nm;柱温:25 ℃;流动相:甲醇/水(66.6 ∶33.3),以乙醚为提取剂。

结果低、中、高浓度(100、200、400 μg/L)含药血清样品作日内、日间测定,回收率均＞90%,精密度RSD均＜5%。

【关键词】氯氮平;血清药物浓度;高效液相色谱法氯氮平是国内常用的第2代抗精神病药,于20世纪60年代中期试用于临床。

我国于20世纪70年代中期开始应用氯氮平。

到上世纪90年代,在某些精神病院,氯氮平的使用已上升到第一位。

氯氮平对精神病阳性和阴性症状均有良好的疗效,且抗精神病作用和镇静作用强,较少引起锥体外系反应(EPS)。

但随着精神科临床的广泛使用,其不良反应也随之增多[1]。

氯氮平一般不良反应如心动过速、低血压、镇静等随着治疗时间的延续会产生耐受性而逐渐减轻或消失。

其严重不良反应主要为粒细胞缺乏症和癫痫发作[2]。

它所引起的粒细胞缺乏可能因继发感染导致死亡,已引起临床重视。

氯氮平作为一种疗效相对突出,较易耐受,加之价格低廉,受到许多医生的青睐,但其存在的诸多不良反应,又使其备受争议。

通过密切监测血药浓度和血象,可以预测其疗效和不良反应的发生。

氯氮平血药浓度个体差异很大[3],对其进行监测,为临床合理用药提供可靠依据是完全必要,且非常重要的[3]。

尤其对于那些由于浓度低而疗效不好的患者是有帮助的。

1 仪器和试剂1.1 仪器采用SHIMADZU高效液相色谱系统,ODS.柱,SPD-10A检测器,C-R6A记录仪,SK-I型快速混匀器,SB2200型超声波清洗器,BHW2-I型电热恒温水箱,LC-10A泵。

HPLC法测定人血浆中奥氮平浓度

HPLC法测定人血浆中奥氮平浓度刘伟忠;黄伟侨;王广发;李国成;付燕【期刊名称】《海峡药学》【年(卷),期】2006(18)3【摘要】目的建立测定人血浆中奥氮平浓度的反相高效液相色谱法.方法以C18反相柱(150mm×4.6mm, 5μm)为色谱柱,流动相0.03mol·L-1醋酸铵-甲醇(35:65);流速:0.8 ml·min-1;柱温:40°C;检测波长: 275nm.以乙酸乙酯与二氯甲烷(80:20)为提取剂.结果奥氮平320.0, 80.0,10.0μg·L-13种浓度平均回收率分别为102.92%, 97.11%,98.20%,日内、日间差RSD均低于6%(n=5);最低检测浓度为5.0μg·L-1;线性范围为5.0～320.0μg·L-1.回归方程为:C=264.03F-1.21,r=0.9996(n=9).结论本法灵敏、准确、简单、快速,可用于临床血药浓度监测和药动学研究.【总页数】3页(P184-186)【作者】刘伟忠;黄伟侨;王广发;李国成;付燕【作者单位】广州市精神病医院国家药品临床研究基地,广州,510370;中山大学附属第一医院药学部,广州,510080;广州市精神病医院国家药品临床研究基地,广州,510370;中山大学附属第一医院药学部,广州,510080;广州市精神病医院国家药品临床研究基地,广州,510370【正文语种】中文【中图分类】R9【相关文献】1.UPLC-MS/MS法测定人血浆中奥氮平、利培酮和帕潘立酮的浓度 [J], 丰丽莼;杨博涵;王雪芹;郭强2.RP-HPLC法测定人血浆奥氮平浓度及其在健康志愿者的药代动力学研究 [J], 朱军;杨鸿;刘伟忠3.高效液相色谱法测定人血浆中奥氮平的浓度 [J], 肖红;谢世平;范剑雄;姚辉;韩钢4.HPLC法测定人血浆中莫西沙星浓度及其在MDR-TB治疗中的临床应用 [J], 张婷婷; 卢弢; 徐然5.高效液相色谱法测定人血浆中奥氮平的浓度 [J], 周本裕; 刘文清; 徐云庆; 蒋春香因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

HPLC法测定奥氮平片含量

HPLC法测定奥氮平片含量
袁月华
【期刊名称】《海峡药学》
【年(卷),期】2013(25)12
【摘要】目的建立高效液相色谱法测定奥氮平片剂含量的方法.方法.采用ultimate XB-C18(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱,以磷酸盐缓冲液-甲醇-乙腈(25:10:10)为流动相,流速为1.0mL·min-1,进样量20μL,检测波长为254nm.结果奥氮平浓度在4.28μg·mL-1～64.26μg·mL-1范围内线性关系良好(r=1.000);平均回收率为100.4%,RSD为0.47%(n=9).结论本法较为简便,精确.
【总页数】2页(P129-130)
【作者】袁月华
【作者单位】福建医科大学附属第一医院,福州,350005
【正文语种】中文
【中图分类】R927.2
【相关文献】
1.HPLC法测定复方胃蛋白酶颗粒中维生素B1的含量及含量均匀度 [J], 由鹏飞;梁翠荣;邢晟;巩丽萍;王玉团;郭常川;石峰
2.NP-HPLC与RP-HPLC两种方法测定制马钱子中士的宁含量 [J], 蔡锡潮;龚又明
3.HPLC-UV和HPLC-ELSD法测定蜜炙酸枣仁中酸枣仁皂苷A含量的比较 [J], 隋利强;黄礼书;陈喆明;
4.HPLC-UV和HPLC-ELSD法测定蜜炙酸枣仁中酸枣仁皂苷A含量的比较 [J],
隋利强;黄礼书;陈喆明
5.HPLC法测定银菊感冒胶囊中马来酸氯苯那敏的含量及含量均匀度 [J], 荀秀彪; 张顺平
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高效液相色谱法测定人血浆中奥氮平的浓度

高效液相色谱法测定人血浆中奥氮平的浓度肖红;谢世平;范剑雄;姚辉;韩钢【期刊名称】《色谱》【年(卷),期】2001(19)3【摘要】用高效液相色谱法测定了人血浆中奥氮平的浓度.色谱条件:采用岛津LC-6A型高效液相色谱仪;色谱柱为Zorbax ODS(150 mm×4.6mm i.d.,粒径5 μm);流动相为V(50mmol/L磷酸钠缓冲液,pH 7.2):V(甲醇):V(乙腈)=12:10:3的溶液;检测波长为270 nm;流速为1.0 mL/min;柱温40℃;灵敏度0.005 AUFS;纸速2 mm/min.实验结果显示,在上述条件下,该方法的线性范围为15μg/L～1200μg/L(r=0.9988),最低检测限为3μg/L,血浆中奥氮平的平均回收率为(97.02±3.11)%,测定结果的日内平均相对偏差为3.86%(n=15),日间平均相对偏差为4.12%(n=15).所建立的方法适用于奥氮平临床应用研究中的血药浓度的监测.【总页数】2页(P281-282)【作者】肖红;谢世平;范剑雄;姚辉;韩钢【作者单位】南京医科大学附属脑科医院,;南京医科大学附属脑科医院,;南京医科大学附属脑科医院,;南京医科大学附属脑科医院,;南京医科大学附属脑科医院,【正文语种】中文【中图分类】O658【相关文献】1.HPLC法测定人血浆中奥氮平浓度 [J], 刘伟忠;黄伟侨;王广发;李国成;付燕2.UPLC-MS/MS法测定人血浆中奥氮平、利培酮和帕潘立酮的浓度 [J], 丰丽莼;杨博涵;王雪芹;郭强3.高效液相色谱法测定人血浆中奥氮平的浓度 [J], 周本裕; 刘文清; 徐云庆; 蒋春香4.高效液相色谱法测定人血浆中米卡芬净浓度及其在重症患者中的应用 [J], 赵明明;陈亚南;路童;李国飞;肇丽梅5.高效液相色谱法测定不同时间人血浆中帕拉米韦的浓度及临床观察 [J], 赵晓娟;赵永红;王淑梅;李浩然;刘秀菊因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

奥氮平血药浓度的测定及其人体药代动力学

奥氮平血药浓度的测定及其人体药代动力学季慧芳;谢林;王建;张宇;后媛媛;刘晓东【期刊名称】《中国药科大学学报》【年(卷),期】2002(33)5【摘要】目的建立测定人血浆中奥氮平浓度的HPLC-UV方法,研究健康受试者口服奥氮平片后的药代动力学。

方法以阿米替林为内标,血浆样品加维生素C抗氧化,经碱化后用乙醚-环已烷进行萃取。

以0.01mol/L磷酸铵（pH4.0）-甲醇-乙腈（55:22.5:22.5）为流动相,采用Hypersil silica柱进行分离,紫外270nm处进行测定。

结果方法的专属性较好;低、中、高浓度（1.19,9.50,38.00ng/ml）的平均提取回收率分别为81.97,93.47和96.72。

该法在1.19～38.00 ng/ml浓度范围内呈线性关系,最低检测浓度为1.19ng/ml,日内、日间RSD分别小于9％和12％。

用此法测定了20名健康受试者单剂量po奥氮平片后的血药浓度经时变化过程。

结论该法灵敏度高,重现性好,操作简便,适用于临床药代动力学研究和血药浓度监测。

【总页数】4页(P397-400)【关键词】奥氮平;血药浓度;药代动力学;HPLC-UV【作者】季慧芳;谢林;王建;张宇;后媛媛;刘晓东【作者单位】中国药科大学药代研究中心【正文语种】中文【中图分类】R969.1;R971.【相关文献】1.异烟肼人体血药浓度测定及药代动力学研究 [J], 曾德贵;刘玉琴2.人体氢氯噻嗪血药浓度测定与药代动力学研究 [J], 王蓉;杨昆;谭洁;胡云芳;程俊霖;于翠霞;余潜;樊宏伟3.左氧氟沙星人体血药浓度测定及药代动力学分析 [J], 李涛4.左氧氟沙星人体血药浓度测定及药代动力学分析 [J], 李涛5.妥舒沙星人体血药浓度测定及药代动力学研究 [J], 黄诗前因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

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HPLC法测血清奥氮平浓度(一)
【摘要】用高效液相色谱法测定血清中奥氮平的药物浓度，方法简便、快速、灵敏、特异，适用于临床常规和研究应用。

【关键词】高效液相色谱法奥氮平
奥氮平为苯并异唑衍生物，是新一代的抗精神病药物，并已广泛应用于临床，因而在临床上误服、服毒自杀时有发生。

为了配合临床上的急救以及使给药方案更加合理化，我们建立了奥氮平的液相色谱定性定量的分析方法。

1材料和方法
高效液相色谱法在药物分析中的应用是近年来飞速发展的新技术。

目前，用HPLC法快速测定血中奥氮平浓度的方法国内报道甚少，我们在参考国外有关文献资料的基础上结合临床实际，试图在国内首先建立一个取样量少、分析周期短、灵敏度高的实验方法，以满足临床实际的需要。

1.1实验部分
1.1.1仪器及试剂
(1)仪器美国惠普HP1050高效液相色谱仪伴惠普HP1050紫外分光检测仪及色谱工作站。

色谱柱为200×4.6mm不锈钢柱，内充5μmSpherisorbC18(34/73)。

(2)标准物奥氮平标准对照品。

(3)溶剂甲醇；三氯乙酸CCl3COOH；乙酸乙酯CH3COOC2H5；四硼酸钠
Na2B4O7·10H2O；磷酸氢二钠Na2HPO4·12H2O；水为双重蒸馏水。

1.1.2试剂配制
（1）标准储备液用双重蒸馏水配成1mg/ml溶液，4℃保存。

（2）标准应用液用双重蒸馏水稀释成100μg/ml溶液，4℃保存。

（3）50mmol/LNa2HPO4缓冲液准确称取8.9535gNa2HPO4·12H2O于500ml容量瓶中加双蒸水至刻度。

（4）0.05mmol/L四硼酸钠溶液准确称取1.90685gNa2B4O7·10H2O于100ml容量瓶中加双蒸水至刻度。

（5）准确称取10gCCl3COOH于100ml容量瓶中加双蒸水至刻度。

（6）流动相取甲醇、双重蒸馏水按70:30的比例（v/v）配制，用前超声波脱气。

1.1.3实验方法
（1）色谱条件
分析柱：色谱柱：Spherisorb-C184.6×200mm。

流动相流速：1ml/min。

检测波长：276nm。

满量程吸光度：0.02。

记录仪纸速：4mm/min。

柱温：室温。

（2）病人标本收集和保存
病人服用固定剂量达稳态血药浓度后，于清晨服药前取肘或颈静脉血
2ml，及时分离出血清。

不能及时测定的血清密封后冰冻保存。