谷氨酸棒杆菌中苯酚羟化酶的鉴定及功能研究

谷氨酸棒杆菌中苯酚羟化酶的鉴定及功能研究
杨志方;肖潇;司美茹;成娟丽;沈锡辉;王瑶
【期刊名称】《西北农林科技大学学报（自然科学版）》
【年(卷),期】2015(043)012
【摘要】[目的]鉴定谷氨酸棒状杆菌中ncgl2588基因编码的苯酚羟化酶,并验证其在苯酚降解中的作用.[方法]构建谷氨酸棒状杆菌ncgl 2588基因缺失突变株,比较突变株和野生型菌株利用苯酚能力的差异;同时将ncgl2588基因克隆到表达质粒pET28a中并转化人大肠杆菌BL21(DE3),利用IPTG诱导重组菌株原核表达,纯化并测定重组蛋白对苯酚的羟化作用.[结果]成功构建了谷氨酸棒状杆菌ncgl 2588基因缺失突变株,其在以苯酚为惟一碳源和能源的培养基中不能生长,而野生型谷氨酸棒状杆菌能正常生长;pET28a-ncgl 2588重组质粒在大肠杆菌BL21 (DE3)中成功表达分子质量为73 ku的目的蛋白,此蛋白酶活为0.37 mmo l/(min·mg);在以苯酚为惟一碳源和能源培养谷氨酸棒状杆菌时,苯酚羟化酶得到最高表达,用其他芳香族化合物培养则苯酚羟化酶表达较少;进化树分析发现,谷氨酸棒状杆菌中的苯酚羟化酶与酵母Trichosporon cutaneum中的苯酚羟化酶序列同源性高达43％,远远高于与细菌中苯酚羟化酶的同源性.[结论]谷氨酸棒状杆菌中的ncgl 2588基因编码苯酚羟化酶,且该酶为可诱导酶,在苯酚降解中发挥着重要作用.
【总页数】8页(P191-198)
【作者】杨志方;肖潇;司美茹;成娟丽;沈锡辉;王瑶
【作者单位】西北农林科技大学生命科学学院,陕西杨凌712100;西北农林科技大学生命科学学院,陕西杨凌712100;西北农林科技大学生命科学学院,陕西杨凌
712100;西北农林科技大学生命科学学院,陕西杨凌712100;运城学院生命科学系,山西运城044000;西北农林科技大学生命科学学院,陕西杨凌712100;西北农林科技大学生命科学学院,陕西杨凌712100
【正文语种】中文
【中图分类】Q936
【相关文献】
1.谷氨酸棒杆菌S9114中谷氨酸脱氢酶破碎条件的研究 [J], 王燕;杨平平;宋香;段作营;毛忠贵
2.谷氨酸棒杆菌海藻糖合成酶基因的克隆及功能鉴定 [J], 韦宇拓;朱绮霞;罗兆飞;陈发忠;汪嵘;黄日波
3.谷氨酸棒杆菌海藻糖合成酶基因的克隆及功能鉴定 [J], 韦宇拓;朱绮霞;罗兆飞;陈发忠;汪嵘;黄日波
4.His-pull down联合质谱鉴定谷氨酸棒杆菌中乙酰羟酸合酶IlvN的相互作用蛋白 [J], 侯正杰; 张权威; 莫晓琳; 夏利; 谭淼; 孙全伟; 马倩; 陈宁
5.谷氨酸棒杆菌GPAT功能基因鉴定与分析 [J], 刘翠翠;李友元;王永红
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。