2023-2024学年高中生物浙科版选修3第1章 基因工程单元测试(含答案解析)
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2023-2024学年浙科版高中生物单元测试
学校 __________ 班级 __________ 姓名 __________ 考号 __________
注意事项
1.答题前填写好自己的姓名、班级、考号等信息;
2.请将答案正确填写在答题卡上;
一、多选题(本大题共计6小题每题3分共计18分)
1.下图是培育抗除草剂玉米的技术路线图含有内含子的报告基因只能在真核生物中正
确表达其产物能催化无色物质K呈现蓝色转化过程中愈伤组织表面常残留农杆菌会
导致未转化的愈伤组织可能在含除草剂的培养基中生长下列相关叙述错误的是()
A. 过程①用两种限制酶就可防止酶切产物自身环化
B. 过程②用\ Ca^2+处理可提高转化成功率
C. 过程③应在培养基中加入除草剂和物质K
D. 筛选得到的A是无农杆菌附着的转化愈伤组织
【答案】A, D
【解析】解 A.若过程①使用两种限制酶且这两种限制酶切割产生的粘性末端不同才
可以防止酶切产物自身环化 A错误
B.过程②用 Ca^2+处理可增大农杆菌细胞膜的通透性从而提高转化成功率 B正确
CD.过程③培养基中加入除草剂筛选出来的是无农杆菌附着的转化愈伤组织、农杆菌
附着的转化愈伤组织、农杆菌附着的未转化愈伤组织加入K物质筛选出来的是无农杆
菌附着的转化愈伤组织和农杆菌附着的转化愈伤组织 C正确 D错误
故选 AD
2.新型冠状病毒(2019−nCOV)的检测可以采用实时荧光RT−PCR (逆转录聚合酶链式反应)的方法RT−PCR的具体过程如图下列叙述错误的是()
A. PCR体系中一定要添加从受体细胞中提取的DNA聚合酶
B. 过程Ⅱ拟对单链cDNA进行n次循环的扩增理论上需要\ 2^n-2个引物B
C. 该技术用于对某些微量RNA病毒的检测可提高检测的灵敏度
D. PCR技术是利用DNA的热变性原理由PCR仪自动控制DNA的解聚与结合
【答案】A, B
【解析】解 A.PCR体系中需要的是耐高温的DNA聚合酶不是从受体细胞中提取的DNA 聚合酶 A错误
B.过程Ⅱ拟对单链cDNA进行n次循环的扩增根据DNA分子半保留复制特点可知该过程理论上至少需要 2^n-1个引物B 因为PCR扩增DNA片段过程最高经过n次扩增形成的DNA分子数是 2^n个其中只有2条单链不含有引物 B错误
C.利用实时荧光RT-PCR技术对某些微量RNA病毒进行检测时可提高检测的灵敏度是因为增加了待测RNA逆转录产生的DNA的数量(或浓度)便于检测 C正确
D.PCR反应过程包括高温变性、低温复性、中温延伸所以PCR技术是利用DNA的热变性原理由PCR仪自动控制DNA的解聚与结合 D正确
故选 AB
3.下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点下列说法正确的是()
A. 一个图1所示的质粒分子经SmaⅠ切割后含有4个游离的磷酸基团
B. 用图1中的质粒和图2中的目的基因构建重组质粒不能使用SmaⅠ切割
C. 图2中为防止酶切后单个含目的基因的DNA片段自身连接成环状不能使用EcoRⅠ
D. 为了获取重组质粒最好用BamHⅠ和HindⅢ同时切割质粒和外源DNA
【答案】B, C, D
【解析】解 A.质粒切割前是双链环状DNA分子所有磷酸基团参与形成磷酸二酯键故不含游离的磷酸基团.从图1可以看出质粒上只含有一个SmaⅠ的切点因此被该酶切割后质粒变为线性双链DNA分子因每条链上含有一个游离的磷酸基团因此切割后含有两个游离的磷酸基团 A错误
B.基因表达载体必须具备目的基因、启动子、终止子、标记基因图中质粒的标记基因为抗生素抗性基因而Sma Ⅰ的切割位点就在该基因上因此用质粒和外源DNA构建重组质粒不能使用Sma Ⅰ切割 B正确
C.由于同种限制酶切割形成的黏性末端相同图2中为防止酶切后单个含目的基因的DNA片段自身连接成环状不能使用EcoRⅠ C正确
D.使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA 各自会有不同黏性末端能防止自身环化 D正确
故选 BCD
4.农杆菌Ti质粒上的T-DNA可以转移并随机插入到被侵染植物的染色体DNA中研究者将下图中被侵染植物的DNA片段连接成环并以此环为模板进行PCR 扩增出T-DNA 插入位置两侧的未知序列以此可确定T-DNA插入的具体位置下列说法不正确的是()
注子链从引物的 3^\prime 端开始延伸
A. PCR扩增依据的是DNA分子双链复制的原理
B. 进行PCR扩增需要的酶有解旋酶和热稳定DNA聚合酶
C. 利用图中的引物②、③组合可扩增出两侧的未知序列
D. 通过与受体细胞的基因组序列比对可确定T-DNA的插入位置
【答案】B, C
【解析】解 A.PCR扩增依据的是DNA分子双链复制的原理 A正确
B.进行PCR扩增需要的酶是热稳定DNA聚合酶 B错误
C.由题可知用DNA连接酶将两端的黏性末端连接成环以此为模板再利用图中的引物
①、④组合可扩增出T-DNA插入位置两侧的未知序列 C错误
D.通过与受体细胞的基因组序列比对可确定T-DNA的插入位置 D正确
故选 BC
5.基因编辑是指将外源DNA片段导入到染色体DNA特定位点或删除基因内部特定片段是一种对生物体基因组特定目标基因进行修饰的技术下图是对某生物B基因进行基因编辑的过程该过程中用SgRNA指引核酸内切酶Cas9结合到特定的靶位点下列相关叙述错误的是()
A. SgRNA的全部碱基序列与靶基因序列完全互补
B. 核酸内切酶Cas9可断裂核苷酸之间的磷酸二酯键
C. 根据上述处理前后生物体的功能变化可推测B基因的功能
D. 使用该项基因编辑技术来预防人的某些疾病时可以无需审批
【答案】A, D
【解析】解 A.据图分析可知 SgRNA的部分碱基序列与靶基因序列互补 A错误
B.核酸内切酶Cas9可断裂核苷酸之间的磷酸二酯键 B正确
C.通过破坏B基因后观察生物体的功能变化可推测B基因的功能 C正确
D.使用该项基因编辑技术来预防人的某些疾病时需要审批 D错误
故选 AD
6.2020年诺贝尔化学奖授予新型基因编辑技术CRISPR/Cas9 研究发现很多细菌的细胞里有一种适应力免疫系统叫做CRISPR 它可以使细菌侦测到病毒DNA并消灭它在病毒感染细菌后细菌通过一种向导RNA把Cas9蛋白引导到外源DNA并与之结合而后利用Cas9蛋白的DNA内切酶活性将病毒DNA剪断从而阻断病毒在细菌体内的繁殖图示利用改造后的CRISPR/Cas9技术研究人员能高精度修改动物、植物和微生物的DNA 下列分析正确的是()
A. 向导RNA与目标DNA片段结合时遵循碱基互补配对原则
B. 利用该技术进行基因编辑时只能切除原有DNA片段不能插入新的DNA片段
C. 通过CRISPR/Cas9技术可以敲除突变的基因而达到根除致病基因的目的
D. Cas9蛋白剪切DNA片段的精确性随着向导RNA长度的延长而增加
【答案】A, C, D
【解析】解 A.向导RNA与目标DNA片段结合时遵循碱基互补配对原则 A正确
B.利用该技术进行基因编辑时既能切除原有DNA片段又能插入新的DNA片段 B错误
C.通过CRISPR/Cas9技术可以敲除突变的基因而达到根除致病基因的目的 C正确
D.向导RNA与目标DNA结合的前提条件是RNA序列与DNA序列精准结合如果向导RNA过短则基因组中能与之结合的DNA序列就会越多出现Cas9结合剪切多个基因的现象因此Cas9蛋白剪切DNA片段的精确性随着向导RNA长度的延长而增加 D正确
故选 ACD
二、选择题(本大题共计12小题每题3分共计36分)
7.下面是四种不同质粒的示意图其中ori为复制必需的序列 amp为氨苄青霉素抗性基因 tet为四环素抗性基因箭头表示限制酶的酶切位点下列有关叙述正确的是()
A. 基因amp和tet是一对等位基因常作为基因工程中的标记基因
B. 质粒是指细菌细胞中能自我复制的小型环状DNA和动植物病毒的DNA
C. 限制酶的作用部位是DNA分子上两个特定的核苷酸之间的磷酸二酯键
D. 用质粒4将目的基因导入大肠杆菌该菌不能在含青霉素的培养基上生长
【答案】C
【解析】解 A.基因amp和tet在同一个DNA分子上不是一对等位基因 A错误
B.质粒指细菌细胞中能自我复制的小型环状的DNA 动植物病毒的DNA不属于质粒 B错误
C.限制性内切酶的作用部位是DNA分子中特定的两个核苷酸之间的磷酸二酯键 C正确
D.重组质粒4中氨苄青霉素抗性基因完好四环素抗性基因被破坏因此用质粒4将目的基因导入大肠杆菌该菌能在含青霉素的培养基上生长 D错误
故选 C
8.关于基因工程的叙述错误的是()
A. 利用体外DNA重组技术定向改造生物的遗传性状
B. 在细胞水平上设计施工需要限制酶、DNA连接酶和运载体
C. 打破物种界限获得人们需要的生物类型或生物产品
D. 抗虫烟草的培育种植降低了生产成本减少了环境污染
【答案】B
【解析】
解 A.基因工程是指按照人类的愿望将不同生物的遗传物质在体外人工剪切并和载体重组后转入细胞内进行扩增并表达产生所需蛋白质的技术可定向改造生物的遗传性状 A 正确
B.基因工程是在分子水平上设计施工的 B错误
C.基因工程可在不同生物间进行故可打破物种界限获得人们需要的生物类型或生物产品 C正确
D.抗虫烟草的培育种植减少了农药的使用降低了生产成本减少了环境污染 D正确
故选 B
9.若某种限制酶的识别序列是CCTAGG 它在A和G之间切断DNA 如图表示用该酶处理某基因后产生的片段下列有关叙述正确的是()
A. 该正常基因中有4个CCTAGG序列
B. 产生的DNA片段可用DNA连接酶连接起来
C. 用该酶处理得到图示基因片段要水解3个磷酸二酯键
D. 若该基因某处有一个CCTAGC突变为CCTAGG(实为碱基对改变)用该酶处理后将产生5个片段
【答案】D
【解析】解 A.由图可知该基因经酶切后形成4个DNA片段因此该正常基因中有3个CCTAGG序列 A错误
B.DNA连接酶是在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键故产生的DNA片段可用DNA连接酶连接起来 B错误
C.DNA分子是两条链用该酶处理得到图示基因片段要水解6个磷酸二酯键 C错误
D.若该基因某处有一个CCTAGC突变为CCTAGG 则有4个切点用该酶处理后将产生5个片段 D正确
故选 D
10.依据人的胰高血糖素基因制成DNA探针对样品进行检测不能与探针形成杂交分子的是()
A. 胰岛A细胞的DNA
B. 胰岛B细胞的DNA
C. 胰岛A细胞的mRNA
D. 胰岛B细胞的mRNA
【答案】D
【解析】解 A.胰岛A细胞中都含有全套遗传物质也包括胰高血糖素基因则用胰高血糖素基因探针能与胰岛A细胞中解旋后的DNA单链发生碱基互补配对形成杂交分子 A正确
B.在同一个人所有的体细胞都是有同一个受精卵经过有丝分裂来的胰岛B细胞含有胰高血糖素基因用胰高血糖素基因探针能与胰岛B细胞中解旋后的DNA单链发生碱基互
补配对形成杂交分子 B正确
C.胰岛A细胞由于基因选择性表达胰高血糖素基因表达会产生相应的mRNA 进行碱基互补配对形成杂交分子 C正确
D.胰岛B细胞中虽然也含有胰高血糖素基因但是胰高血糖素基因不能在胰岛B细胞中表达则形成的mRNA也不能与探针进行杂交 D错误
故选 D
11.玉米中赖氨酸含量比较低的原因是赖氨酸合成过程中的两种关键酶——天冬氨酸激酶和二氢吡啶二羧酸合成酶的活性受细胞内氨基酸浓度的影响较大赖氨酸达到一定浓度时会抑制这两种酶的活性为了提高玉米中的赖氨酸含量兴趣小组提出的下列方法不可行的是()
A. 用紫外线处理玉米愈伤组织筛选有利突变体
B. 将富含赖氨酸的蛋白质编码基因导入玉米细胞
C. 通过基因定点突变技术修饰天冬氨酸激酶和二氢吡啶二羧酸合成酶基因的个别碱基
D. 利用蛋白质工程直接改造天冬氨酸激酶和二氢吡啶二羧酸合成酶的空间结构
【答案】D
【解析】解 A.愈伤组织具有旺盛的分裂能力用紫外线对组织培养中的愈伤组织进行照射可以提高基因突变的频率加快植物突变体的出现 A正确
B.将富含赖氨酸的蛋白质编码基因导入玉米细胞可以提高玉米中的赖氯酸含量 B正确
C.玉米中赖氨酸的含量比较低原因是赖氨酸合成过程中的两个关键酶(天冬氨酸激酶和二氢吡啶二羧酸合成酶)的活性受细胞内赖氨酸浓度的影响较大当赖氨酸浓度达到一定量时就会抑制这两个酶的活性如果我们将天冬氨酸激酶的第352位的苏氨酸变成异亮氨酸将二氢吡啶二羧酸合成酶中104位的天冬酰胺变成异亮氨酸就可以使玉米叶片和种子中的游离赖氨酸分别提高5倍和2倍因此增加玉米细胞中赖氨酸含量的方法可以是修饰天冬氨酸激酶基因和二氢吡啶二羧酸合成酶基因的个别碱基 C正确
D.蛋白质的功能与其高级结构密切相关而蛋白质的高级结构又非常复杂所以直接对蛋白质改造非常困难且即使改造成功也不能遗传 D错误
故选 D
12.下列说法错误的是( )
A. 科学家通过对胰岛素的改造已经使其成为速效型药品
B. 我们可以将蛋白质工程应用于微电子方面
C. 用蛋白质工程方法制成的电子元件具有体积小耗电少和效率高的特点
D. 蛋白质工程成功的例子不多主要是因为蛋白质种类太少原料不足
【答案】D
【解析】蛋白质工程是一项难度很大的工程目前成功的例子不多主要是因为蛋白质发挥功能必须依赖正确的高级结构这种高级结
构十分复杂目前科学家对大多数蛋白质的高级结构了解还不是很够这就制约了其发展蛋白质的种类是非常繁多的原料
也十分不足故D正确
13.下列关于基因工程应用的叙述正确的是()
A. 基因治疗就是把缺陷基因诱变成正常基因
B. 原核基因不能导入真核生物细胞内
C. 一种基因探针能检测水体中的各种病毒
D. 基因诊断的基本原理是DNA分子杂交
【答案】D
【解析】解 A.基因治疗是指把正常基因导入病人体内有缺陷的细胞中弥补或置换缺陷
基因 A错误
B.原核基因可以导入真核生物细胞内 B错误
C.一种基因探针只能检测水体中的一种病毒具有特异性 C错误
D.基因诊断的基本原理是DNA分子杂交 D正确
故选 D
14.天然的玫瑰没有蓝色花这是由于缺少控制蓝色色素合成的基因B 而开蓝色花的矮牵
牛中存在序列已知的基因B.现用基因工程技术培育蓝玫瑰下列操作正确的是()
A. 提取矮牵牛蓝色花的mRNA 经逆转录获得互补的DNA 再扩增基因B
B. 利用限制性核酸内切酶从开蓝色花矮牵牛的基因文库中获取基因B
C. 利用DNA聚合酶将基因B与质粒连接后导入玫瑰细胞
D. 将基因B直接导入大肠杆菌然后感染并将入玫瑰细胞
【答案】A
【解析】解 A、是可行方案的前半部分后面应该包括把扩增到的基因B克隆到双元载
体转基因到玫瑰花细胞的操作 A正确
B、如果已经从基因文库中筛选出含有基因B的克隆可以用限制性核酸内切酶酶切获
取基因B片段实际上对序列未知的情况下这样得到的序列比逆转录后扩增更少突变
能更准确得到基因B的序列基因文库的序列含有内含子虽然都是植物但不一定有相
同的转录后加工系统而且含有内含子的序列往往长很多不利于完成后面的克隆表达实
验操作 B错误
C 、通常用T4\, DNA连接酶将基因B与质粒连接利用DNA聚合酶来连接是不行的但
如果把答案中的连接理解为重组克隆现在是有办法用DNA聚合酶克隆的但用这种方
法一般是转到有修复缺刻功能细菌直接转玫瑰细胞不行 C错误
D、基因B如果已经拿到并克隆到载体上也应该转化大肠杆菌后通过三亲本杂交或二
亲本杂交把基因转入农杆菌或直接把DNA分子转入农杆菌.因为大肠杆菌不能完成感染并把基因转入玫瑰细胞 D错误.
故选 A
15.基因工程的操作步骤正确的操作顺序是()
①使目的基因与运载体相结合②将目的基因导入受体细胞③检测目的基因的表达是
否符合特定性要求④提取目的基因
A. ③②④①
B. ②④①③
C. ④①②③
D. ③④①②
【答案】C
【解析】基因工程的操作步骤是提取目的基因使目的基因与运载体相结合将目的基因导入受体细胞检测目的基因的表达是否符合特定性要求 C正确 A、B、D错误
16.某环状DNA分子共含2000个碱基其中腺嘌呤占30% 用限制性核酸内切酶
BamHⅠ(识别序列为G↓GATCC)完全切割该DNA分子后产生2个片段则下列有关叙述
中正确的是()
A. 一个该DNA分子含有2个BamHⅠ的识别序列
B. 该DNA分子被BamHⅠ切割后产生的末端是平末端
C. 限制性核酸内切酶BamHⅠ对该DNA分子有4个切点产生4个末端
D. 一个该DNA分子经BamHI完全切割后产生的核酸片段共含有8个游离的磷酸基团
【答案】A
【解析】环状DNA被限制BamHⅠ切割后产生2个片段说明DNA分子中含有2个BamHI的识别序列被BamHⅠ切割后会产生4个粘性末端
该环状DNA分子能被BamHI切成两个DNA分子片段说明该DNA分子中含有2个BamHI的识别序列 A正确 BamHⅠ的识别序列为G↓GATCC 可见其切割后形成的是黏性末端不是平末端 B错误该DNA分子含有2个BamHI的识别序列和切割位点用该酶切割后能形成产生4个黏性末端 C错误该环状DNA分子被BamHI切成两个DNA分子片段每个片段含有2个游离的磷酸基团所以共有4个游离的磷酸基团 D错误故选A
17.下列关于蛋白质工程和基因工程的比较错误的是()
A. 基因工程原则上只能生产自然界中已存在的蛋白质而蛋白质工程可以对现有蛋白质进行改造从而制造一种新的蛋白质
B. 蛋白质工程是在基因工程的基础上发展起来的蛋白质工程最终还是要通过基因修饰或基因合成来完成
C. 基因工程产生的变异是可遗传的蛋白质工程产生的变异是不可遗传的
D. 基因工程和蛋白质工程都遵循中心法则
【答案】C
【解析】解 A.基因工程原则上只能生产自然界已存在的蛋白质而蛋白质工程可以通过对基因改造实现对现有蛋白质改造从而制造一种新的蛋白质 A正确
B.蛋白质工程是在基因工程基础上延伸出来的第二代基因工程蛋白质工程不是对蛋白质分子的直接改造而是通过修改基因或创造合成新基因来改变生物的遗传和表达性状合成新的蛋白质 B正确
C.蛋白质工程的实质是改造基因基因工程和蛋白质工程产生的变异都是可遗传的 C错误
D.基因工程遵循中心法则蛋白质工程也遵循中心法则 D正确
故选 C
18.合成自然界不存在的蛋白质应首先设计()
A. 蛋白质结构
B. RNA结构
C. 氨基酸序列
D. 基因结构
【答案】A
【解析】解合成自然界不存在的蛋白质属于蛋白质工程应根据蛋白质功能从设计蛋白质结构入手然后通过基因修饰或基因合成对现有蛋白质进行改造或制造出一种新的蛋白质.
故选 A.
三、解答题(本大题共计6小题每题10分共计60分)
19.(1)要构建重组人乳铁蛋白基因、重组人溶菌酶基因表达的载体需在目的基因的上游和下游分别引入________
19.(2)在造血稻米的培育过程中研究人员利用水稻外植体经脱分化形成愈伤组织愈伤组织是由具有________能力的________细胞组成若对水稻使用________法导入重组质粒则需要在愈伤组织中加入适量的酚类化合物目的是 ________以促进转化对于筛选后获得的转基因植株自交若某植株所结种子中具有重组人血清白蛋白的占________ 则判断该植株为T-DNA单拷贝插入(只插入了一个目的基因)
19.(3)某些重组蛋白的使用不会发生药物引发的免疫排斥反应方法是通过设法除去该蛋白基因中与抗原决定有关的DNA序列而使该药物不含有________ 不对相应蛋白质直接进行改造而对其基因进行改造的原因是________
【答案】(1)启动子和终止子
【解析】(1)要构建重组人乳铁蛋白基因、重组人溶菌酶基因表达的载体需在目的基因的上游和下游分别引入启动子和终止子从而
保证目的基因正常的转录过程
【答案】(2)分生, 薄壁, 农杆菌转化, 吸引农杆菌移向愈伤组织, 3/4
【解析】(2)在造血稻米的培育过程中研究人员利用水稻外植体经脱分化形成愈伤组织愈伤组织是由具有分生能力的薄壁细胞组成
的这些细胞的全能性较高若对水稻使用农杆菌转化法导入重组质粒则需要在愈伤组织中加入适量的酚类化合物这些酚
类化合物能吸引农杆菌移向愈伤组织以促进转化对于筛选后获得的转基因植株自交若该植株为T-DNA单拷贝插入(只插入
了一个目的基因)则相当于该植株为杂合子则其自交所结种子中具有重组人血清白蛋白的占3/4
【答案】(3)(引起免疫排斥的)抗原, 蛋白质是由基因决定的(对蛋白质的结构进行设计改造必须通过基因来完成)
【解析】(3)某些重组蛋白的使用不会发生药物引发的免疫排斥反应方法是通过设法除去该蛋白基因中与抗原决定有关的DNA序列而
使该药物不含有(引起免疫排斥的)抗原进而无法使机体发生相应的免疫反应该方法没有对相应蛋白质直接进行改造而对
其基因进行改造的原因是蛋白质是由基因控制合成的对基因的改造过程实现了对该基因控制合成的所有蛋白质的改造
20.(1)基因表达载体除了目的基因外还必须有启动子、________以及________等启动子是RNA聚合酶________的部位有了它才能驱动基因转录出mRNA
20.(2)一般将GDNF基因的表达载体导入大鼠神经干细胞的方法是________
20.(3)构建含GDNF 基因的表达载体时需选择图1中的________限制酶进行酶切20.(4)经酶切后的载体和GDNF基因进行连接连接产物经筛选得到的载体主要有3种单个载体自连、GDNF基因与载体正向连接、GDNF基因与载体反向连接(如图1所示)为鉴定这3种连接方式选择HPaⅠ酶和BamHⅠ酶对筛选得到的载体进行双酶切并对酶切后的DNA片段进行电泳分析结果如图2所示图中第________泳道显示所鉴定的载体是正向连接的如果换用HPaⅠ酶和XhoⅠ酶进行双酶切能否鉴定出载体与目的基因是正向连接还是反向连接 ________(填“能”或“否”)用这两种酶完全酶切的结果中DNA片段最长的是________ 最短的是________
20.(5)将正向连接的表达载体导入神经干细胞后为了检测GDNF基因是否成功表达可用相应的________与提取的蛋白质杂交检测目的基因是否转录出mRNA的方法(技术)是________
【答案】(1)终止子, 标记基因, 识别和结合
【解析】解(1)基因表达载体除了目的基因外还必须有启动子、终止子以及标记基因等启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位有了它才能驱动基因转录出mRNA
【答案】(2)显微注射法
【解析】(2)一般将GDNF基因的表达载体导入大鼠神经干细胞的方法是显微注射法【答案】(3)XhoⅠ
【解析】(3)由图可知目的基因两端及载体DNA分子中均有XhoⅠ酶识别的核苷酸序列故构建基因表达载体时应用XhoⅠ酶切割DNA分子。