斑马鱼心脏标志基因TNC多克隆抗体的制备及表达研究

斑马鱼心脏标志基因TNC多克隆抗体的制备及表达研究张湘涛;吴秀山;万永奇;夏机良;张义;袁婺洲;王跃群;李永青;邓云;莫小阳;江志钢
【期刊名称】《激光生物学报》
【年(卷),期】2010(019)005
【摘要】TNC是心脏发育的标志基因,但该基因在斑马鱼中的表达尚未研究.斑马鱼TNC基因基因的开放阅读框含有5132 bp,编码1710个氨基酸,采用生物信息学结合PCR的方法获得了斑马鱼TNC基因的片段.将所得的PCR片段插入原核表达载体pGEX-4T-1中,并将重组质粒(pGEX-4T-1-TNC)转化大肠杆菌B1221;通过IPTG诱导表达GST-TNC融合蛋白,通过尿素洗涤沉淀蛋白并切胶回收纯化融合蛋白,免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体.Western blot和免疫组化分析表明,制备的抗体具有良好的高效价性和特异性.利用该抗体进行斑马鱼胚胎抗体染色分析表明,TNC蛋白在心脏组织中特异表达.
【总页数】5页(P654-658)
【作者】张湘涛;吴秀山;万永奇;夏机良;张义;袁婺洲;王跃群;李永青;邓云;莫小阳;江志钢
【作者单位】湖南师范大学蛋白质化学及鱼类发育生物学教育部重点实验室,心脏发育研究中心,湖南,长沙,410081;湖南师范大学蛋白质化学及鱼类发育生物学教育部重点实验室,心脏发育研究中心,湖南,长沙,410081;湖南师范大学蛋白质化学及鱼类发育生物学教育部重点实验室,心脏发育研究中心,湖南,长沙,410081;湖南师范大学蛋白质化学及鱼类发育生物学教育部重点实验室,心脏发育研究中心,湖南,长沙,410081;湖南师范大学蛋白质化学及鱼类发育生物学教育部重点实验室,心脏发
育研究中心,湖南,长沙,410081;湖南师范大学蛋白质化学及鱼类发育生物学教育部重点实验室,心脏发育研究中心,湖南,长沙,410081;湖南师范大学蛋白质化学及鱼类发育生物学教育部重点实验室,心脏发育研究中心,湖南,长沙,410081;湖南师范大学蛋白质化学及鱼类发育生物学教育部重点实验室,心脏发育研究中心,湖南,长
沙,410081;湖南师范大学蛋白质化学及鱼类发育生物学教育部重点实验室,心脏发育研究中心,湖南,长沙,410081;湖南师范大学蛋白质化学及鱼类发育生物学教育部重点实验室,心脏发育研究中心,湖南,长沙,410081;湖南师范大学蛋白质化学及鱼类发育生物学教育部重点实验室,心脏发育研究中心,湖南,长沙,410081
【正文语种】中文
【中图分类】Q78
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