化妆品微生物指标检验培训课件
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化妆品培训 PPT课件
微生物的有毒代谢产物可使人中毒。 即使污染的微生物被杀灭，其残存的菌 酶也会引起产品变质，变质时分解的某 些组分可对皮肤产生刺激作用。
因此化妆品的微生物污染不仅影响化妆 品的质量，而且影响产品的使用安全。 对化妆品进行微生物检验是十分必要的。
化妆品微生物指标
菌落总数 粪大肠菌群
绿脓杆菌 金黄色葡萄球菌
化妆品卫生规范 微生物标准及检验方法的修订
中国疾病预防控制中心 环境与健康相关产品安全所
陈西平
化妆品微生物污染
化妆品卫生微生物指标是评价化妆品成品 及原料中的微生物质量极其对人类健康和 化妆品质量影响的重要内容。
。 化妆品受微生物污染后可使化妆品的色、 形、气味等发生变化，品质下降。
致病菌的污染可导致人体健康损害，如化 脓性细菌污染可引起皮肤和眼部的感染。 当人体抵抗力低时，某些非病原菌或条件 致病菌也会引起感染。
检出样 检出 检出样 检出 检出样 检出 检出 检出 检出样 检出
品（份） 率
品（份）率
品（份）率
样品 率（%）品（份）率（%）
（%）
（%）
（%） （份）
护肤类 1324 72
5.44 25
1.89 0
0
0
0
0
0
面膜类 160 14
8.75 12
8.33 1
0.06 0
0
0
0
洁面沐 434 24
5.53 7
关于培养温度和时间： 由“37℃ 44±1℃培养48h” 统一改为
“36±1℃ 44±0.5℃培养48±2h”
统一了仪器名称 规范了表格数量值的写法。 将高压灭菌时所用的压力（1b或温度）改
成Kpa表示。
化妆品微生物检测培训
经培养后，在上述平板上观察有无典型菌落生长。耐热大肠菌群在伊红美蓝琼脂培养基上的典型菌落呈深紫黑色，圆形，边缘整齐，表面光滑湿润，常具有金属光泽。也有的呈紫黑色，不带或略带金属光泽，或粉紫色，中心较深的菌落，亦常为耐热大肠菌群，应注意挑选。
挑取上述可疑菌落，涂片作革兰氏染色镜检。
在蛋白胨水培养液中，加入靛基质试剂约0.5mL，观察靛基质反应。阳性者液面呈玫瑰红色；阴性反应液面呈试剂本色。
血浆凝固酶试验：吸取1:4新鲜血浆0.5mL，置于灭菌小试管中，加入待检菌24h±2h肉汤培养物0.5mL。混匀，置36℃±1℃恒温箱或恒温水浴中，每半小时观察一次，6h之内如呈现凝块即为阳性。同时以已知血浆凝固酶阳性和阴性菌株肉汤培养物及肉汤培养基各0.5mL，分别加入无菌1:4血浆0.5mL，混匀，作为对照。
6、霉菌和酵母菌：吸取1ml供试液（10-1）移入9ml无菌生理盐水中，混匀制成10-2稀释度菌液，再吸取1ml 10-2菌液移入9ml无菌生理盐水中，混匀制成10-3稀释度菌液；分别取1ml各稀释度菌液移入培养皿中，每个稀释度各用2个平皿，注入融化并冷至45℃±1℃左右的虎红培养基，充分摇匀。凝固后，翻转平板，置28℃±2℃培养5d，观察并记录。另取一个不加样品的灭菌空平皿，加入约15mL虎红培养基，待琼脂凝固后，翻转平皿，置28℃±2℃培养5d，为空白对照。
1.基本操作规范
①无菌操作
用于防止微生物进入人体组织或其它无菌范围的操作技术称为无菌操作。在各种生物实验中，为了防止微生物地生长和繁殖影响实验的进行，也要在无菌的环境下进行。
无菌操作原则：
1、环境要清洁，进行无菌操作前半小时，须停止清扫地面等工作。避免不必要的人群流动，防止尘埃飞扬。
2、在执行无菌操作时，必须明确物品的无菌区和非无菌区。
挑取上述可疑菌落，涂片作革兰氏染色镜检。
在蛋白胨水培养液中，加入靛基质试剂约0.5mL，观察靛基质反应。阳性者液面呈玫瑰红色；阴性反应液面呈试剂本色。
血浆凝固酶试验：吸取1:4新鲜血浆0.5mL，置于灭菌小试管中，加入待检菌24h±2h肉汤培养物0.5mL。混匀，置36℃±1℃恒温箱或恒温水浴中，每半小时观察一次，6h之内如呈现凝块即为阳性。同时以已知血浆凝固酶阳性和阴性菌株肉汤培养物及肉汤培养基各0.5mL，分别加入无菌1:4血浆0.5mL，混匀，作为对照。
6、霉菌和酵母菌：吸取1ml供试液（10-1）移入9ml无菌生理盐水中，混匀制成10-2稀释度菌液，再吸取1ml 10-2菌液移入9ml无菌生理盐水中，混匀制成10-3稀释度菌液；分别取1ml各稀释度菌液移入培养皿中，每个稀释度各用2个平皿，注入融化并冷至45℃±1℃左右的虎红培养基，充分摇匀。凝固后，翻转平板，置28℃±2℃培养5d，观察并记录。另取一个不加样品的灭菌空平皿，加入约15mL虎红培养基，待琼脂凝固后，翻转平皿，置28℃±2℃培养5d，为空白对照。
1.基本操作规范
①无菌操作
用于防止微生物进入人体组织或其它无菌范围的操作技术称为无菌操作。在各种生物实验中，为了防止微生物地生长和繁殖影响实验的进行，也要在无菌的环境下进行。
无菌操作原则：
1、环境要清洁，进行无菌操作前半小时，须停止清扫地面等工作。避免不必要的人群流动，防止尘埃飞扬。
2、在执行无菌操作时，必须明确物品的无菌区和非无菌区。
化妆品微生物 专业知识培训课件
1.菌落总数的测定
1g或1ml检样 卵磷脂吐温80营养琼脂培养基 37℃培养48h 判明样品被细菌污染的程度。 对样品进行卫生总评价的综合依据
化妆品微生物 专业知识 32
化妆品微生物 专业知识 33
2.霉菌和酵母菌数的测定
• 包括手部接触化妆品后将微生物带入；空气中的 微生物落入而被污染；一些美容美发店的化妆品 是共用的，更可造成交叉感染
化妆品微生物 专业知识
8
化妆品中微生物的污染的种类
• 污染化妆品的种类主要有细菌、霉菌和酵母菌
• 化妆品中常见的细菌主要以革兰氏阴性杆菌为主， 如埃希菌属、假单胞菌属、变形杆菌属、克雷伯 菌属等，也有葡萄球菌属、链球菌属和芽孢杆菌 属
品放置室温阴凉干燥处
化妆品微生物 专业知识 29
若只有一个样品做多种分析，宜先取部分样品作微生物检 验
若检出粪大肠菌群或其他致病菌，自报告发出起，菌种及 被检样品应保存一个月备查
化妆品微生物 专业知识 30
检测的内容
菌落总数的测定 霉菌和酵母菌总数的测定 特定菌的检验
化妆品微生物 专业知识 31
化★妆对化品妆卫品质生量物的影的响卫生意义
★对人体健康的危害
化妆品微生物 专业知识 14
对化妆品质量的影响—变质腐败
1.色泽变化：微生物代谢产物中的色素分泌
2.气味变化：①臭气—微生物生产繁殖产生的胺、硫化物
②酸气—微生物分解化妆品中的有机酸
3.外观变化：分层、变稀、渗水等—微生物中的酶将化妆品中的脂
使用XXX换肤霜后引起 的化妆品刺激性皮炎
使用XX去痘洗面奶后 引起的化妆品刺激性皮炎
化妆品微生物 专业知识 18
使用宝贝霜后引起的 化妆品过敏性皮炎
化妆品微生物检测培训
2、供检样品，应严格保持原有的包装状态。容器不 应有破裂,在检验前不得打开,防止样品被污染。 ①包装完好 ②验前不开封 ③不与污染源混放
样品采集要求
1、接到样品后,应立即登记,编写检验序号,并 按检验要求尽快检验。如不能及时检验,样品应 置于室温阴凉干燥处,不要冷藏或冷冻。
2、若只有一个样品而同时需做多种分析,如微 生物、毒理、化学等,则宜先取出部分样品做 微生物检验,再将剩余样品做其他分析。
感谢聆听！
菌落总数的测试
定义:化妆品检样经过处理,在 一定条件下培养后(如培养基成 分、培养温度、培养时间、pH 值、需氧性质等), 1g( 1mL )检 样中所含菌落的总数。所得结 果只包括一群本方法规定的条 件下生长的嗜中温的需氧数,并不表示实际样品 中的所有细菌总数。
样品采集要求
在检验过程中,从打开包装到全部检验操作结束， 均须防止微生物的再污染和扩散,所用器皿及材料 均应事先灭菌，全部操作应在符合生物安全要求 的实验室中进行。
供检样品制备
1、亲水性样品10-1检液: 10mL(g)样品+ 90mL灭菌生理盐水中
2、疏水样品10-1检液: 10mL(g)样品+ 10mL液体石蜡+ 10mL吐温80 + 70mL灭菌生理盐水中
化妆品微生物检测培训
化妆品微生物指标检验
微生物检验方法主要依据《化妆品安全技术规范》第五章
培
1、菌落总数检验
训
内
2、霉菌和酵母菌检验
容
3、微生物污染和控制
总则
1、本部分规定了化妆品微生物学检验的基本要求 2、适用于化妆品样品的采集、保存及供检样品制备
样品采集要求
1、所采集的样品,应具有代表性，一般视每批化妆品数 量大小，随机抽取相应数量的包装单位。检验时应从不 少于2个包装单位的取样中共取10g或10mL。包装量小于 20g的样品,，采样时可适当增加样品包装数量。
样品采集要求
1、接到样品后,应立即登记,编写检验序号,并 按检验要求尽快检验。如不能及时检验,样品应 置于室温阴凉干燥处,不要冷藏或冷冻。
2、若只有一个样品而同时需做多种分析,如微 生物、毒理、化学等,则宜先取出部分样品做 微生物检验,再将剩余样品做其他分析。
感谢聆听！
菌落总数的测试
定义:化妆品检样经过处理,在 一定条件下培养后(如培养基成 分、培养温度、培养时间、pH 值、需氧性质等), 1g( 1mL )检 样中所含菌落的总数。所得结 果只包括一群本方法规定的条 件下生长的嗜中温的需氧数,并不表示实际样品 中的所有细菌总数。
样品采集要求
在检验过程中,从打开包装到全部检验操作结束， 均须防止微生物的再污染和扩散,所用器皿及材料 均应事先灭菌，全部操作应在符合生物安全要求 的实验室中进行。
供检样品制备
1、亲水性样品10-1检液: 10mL(g)样品+ 90mL灭菌生理盐水中
2、疏水样品10-1检液: 10mL(g)样品+ 10mL液体石蜡+ 10mL吐温80 + 70mL灭菌生理盐水中
化妆品微生物检测培训
化妆品微生物指标检验
微生物检验方法主要依据《化妆品安全技术规范》第五章
培
1、菌落总数检验
训
内
2、霉菌和酵母菌检验
容
3、微生物污染和控制
总则
1、本部分规定了化妆品微生物学检验的基本要求 2、适用于化妆品样品的采集、保存及供检样品制备
样品采集要求
1、所采集的样品,应具有代表性，一般视每批化妆品数 量大小，随机抽取相应数量的包装单位。检验时应从不 少于2个包装单位的取样中共取10g或10mL。包装量小于 20g的样品,，采样时可适当增加样品包装数量。
2024版年度化妆品卫生规范微生物ppt课件
其他化妆品
如面霜、乳液等，根据产品特性和使用部位的不同，设定 相应的微生物指标要求。
2024/2/2
23
超标产品处理措施及建议
立即停售并召回
一旦发现产品微生物2/2
查找原因并整改
对超标原因进行深入调查，针对 原因采取有效的整改措施。
加强质量监控
加大对生产环节的监控力度，确 保产品符合卫生规范要求。
2024/2/2
推广绿色生产理念
未来化妆品生产将更加注重环保和可 持续发展，推广绿色生产理念，减少 生产过程中的微生物污染。
增强消费者安全意识
消费者将更加关注化妆品的安全性和 卫生质量，对产品的微生物安全性提 出更高要求。
32
THANKS
感谢观看
2024/2/2
33
限量标准差异 国内外化妆品微生物限量标准也存在差异，如总菌落数、 致病菌的种类和限量等。
20
05
化妆品卫生规范中微生物指标解读
2024/2/2
21
微生物指标设定原则及意义
保证产品质量安全
通过设定微生物指标，控制化妆品中的微生物污染，确保产品质量 安全。
维护消费者健康
微生物污染可能导致皮肤感染等健康问题，设定微生物指标有助于 维护消费者健康。
提高消费者安全意识
通过宣传教育等方式，提高消费 者对化妆品卫生安全的重视程度。
24
06
化妆品生产中微生物控制策略与实践
2024/2/2
25
原料选择与质量控制
2024/2/2
选用低微生物负荷的原料
优先选择经过严格筛选和处理的低微生物负荷原料，降低产品初 始微生物含量。
原料微生物检测
建立原料微生物检测制度，确保原料符合卫生标准，避免使用受污 染原料。
《化妆品微生物》课件
《化妆品微生物》ppt 课件
目录
• 化妆品微生物概述 • 化妆品微生物的检测与控制 • 常见化妆品微生物及其防治 • 化妆品微生物污染案例分析 • 化妆品微生物安全使用建议
化妆品微生物概述
01
化妆品中微生物的种类
01
02
03
细菌
常见的有痤疮丙酸杆菌、 棒状杆菌、葡萄球菌等， 可能引发皮肤感染和炎症 。
长繁殖速度。
化妆品微生物的卫生标准
国家标准
各国政府制定相应的化妆品微生 物卫生标准，对化妆品中的微生
物指标进行限制。
企业标准
企业根据自身生产条件和产品质量 要求，制定更为严格的微生物卫生 标准。
国际标准
国际标准化组织（ISO）等制定国际 标准，促进各国在化妆品微生物卫 生标准方面的统一和协调。
常见化妆品微生物
污染来源
生产环境湿度过高、包装容器污染、产品原材料污染
防治措施
控制生产环境湿度、定期对化妆品进行霉菌检测、选择无霉菌的包 装容器、加强产品原材料的卫生管理
酵母菌性化妆品污染及其防治
常见酵母菌
酿酒酵母、毕赤酵母等
污染来源
生产环境湿度过高、化妆品原材料污染、使用过程中污染
防治措施
控制生产环境湿度、加强化妆品原材料的卫生管理、定期对化妆 品进行酵母菌检测、避免使用过程中交叉污染
化妆品微生物安全
05
使用建议
注意化妆品的储存和使用方式
避免将化妆品放在潮 湿或阳光直射的地方 ，以免滋生细菌。
不要将不同种类的化 妆品混合使用，以免 产生化学反应或交叉 污染。
使用化妆品前要洗手 ，避免将细菌带入化 妆品中。
选择正规品牌和渠道购买化妆品
选择知名品牌的化妆品，避免 购买假冒伪劣产品。
目录
• 化妆品微生物概述 • 化妆品微生物的检测与控制 • 常见化妆品微生物及其防治 • 化妆品微生物污染案例分析 • 化妆品微生物安全使用建议
化妆品微生物概述
01
化妆品中微生物的种类
01
02
03
细菌
常见的有痤疮丙酸杆菌、 棒状杆菌、葡萄球菌等， 可能引发皮肤感染和炎症 。
长繁殖速度。
化妆品微生物的卫生标准
国家标准
各国政府制定相应的化妆品微生 物卫生标准，对化妆品中的微生
物指标进行限制。
企业标准
企业根据自身生产条件和产品质量 要求，制定更为严格的微生物卫生 标准。
国际标准
国际标准化组织（ISO）等制定国际 标准，促进各国在化妆品微生物卫 生标准方面的统一和协调。
常见化妆品微生物
污染来源
生产环境湿度过高、包装容器污染、产品原材料污染
防治措施
控制生产环境湿度、定期对化妆品进行霉菌检测、选择无霉菌的包 装容器、加强产品原材料的卫生管理
酵母菌性化妆品污染及其防治
常见酵母菌
酿酒酵母、毕赤酵母等
污染来源
生产环境湿度过高、化妆品原材料污染、使用过程中污染
防治措施
控制生产环境湿度、加强化妆品原材料的卫生管理、定期对化妆 品进行酵母菌检测、避免使用过程中交叉污染
化妆品微生物安全
05
使用建议
注意化妆品的储存和使用方式
避免将化妆品放在潮 湿或阳光直射的地方 ，以免滋生细菌。
不要将不同种类的化 妆品混合使用，以免 产生化学反应或交叉 污染。
使用化妆品前要洗手 ，避免将细菌带入化 妆品中。
选择正规品牌和渠道购买化妆品
选择知名品牌的化妆品，避免 购买假冒伪劣产品。
化妆品微生物检验培训30页PPT
化妆品微生物检验培训
6
、
露
凝
无
游
氛
，
天
高
风
景
澈
。
7、翩翩新 来燕，双双入我庐 ，先巢故尚在，相 将还旧居。
8
、
吁
嗟
身
后
名
，
于
我
若
浮
烟
。
9、 陶渊 明（ 约 365年 —427年 ），字 元亮， （又 一说名 潜，字 渊明 ）号五 柳先生 ，私 谥“靖 节”， 东晋 末期南 朝宋初 期诗 人、文 学家、 辞赋 家、散
10、倚源自南窗以寄
傲
，
审
容
膝
之
易
安
。
66、节制使快乐增加并使享受加强。 ——德 谟克利 特 67、今天应做的事没有做，明天再早也 是耽误 了。——裴斯 泰洛齐 68、决定一个人的一生，以及整个命运 的，只 是一瞬 之间。 ——歌 德 69、懒人无法享受休息之乐。——拉布 克 70、浪费时间是一桩大罪过。——卢梭
文 家 。汉 族 ，东 晋 浔阳 柴桑 人 （今 江西 九江 ） 。曾 做过 几 年小 官， 后辞 官 回家 ，从 此 隐居 ，田 园生 活 是陶 渊明 诗 的主 要题 材， 相 关作 品有 《饮 酒 》 、 《 归 园 田 居 》 、 《 桃花 源 记 》 、 《 五 柳先 生 传 》 、 《 归 去来 兮 辞 》 等 。
化妆品中的微生物ppt课件
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15
3.氧气：作为了解
化妆品中检测的全部为有氧环境下测试。偶尔会出现鼓包极有可能 是存在厌氧菌。
专性好氧菌:
好氧菌
微好氧菌：
微 生
兼性厌氧菌
物
耐氧厌氧菌：
厌氧菌
(专性)厌氧菌：
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16
4.光及射线
太阳光除可见光线外，还有长光波的红外 线和短光波的紫外线以及更短的电磁波包 括X—射线和γ（Co60电子流辐照）—射线。
和兼性厌氧菌落总数。
厌氧菌可能会导
致面膜袋鼓包面 膜原液腐败。
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33
2.霉菌和酵母菌总数（真菌）：化妆品检 样在一定条件下培养后，1g或1mL化妆品中 所污染的活的霉菌和酵母菌数量，藉以判
明化妆品被霉菌和酵母菌污染程度及其一
般卫生状况。本方法根据霉菌和酵母菌特
有的形态和培养特性，在虎红培养基上， 置28℃±2℃培养5d，计算所生长的霉菌和 酵母菌数（ATCC10231、ATCC16404）
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20
6.化学物质（防腐剂研发部门比较熟悉）
很多化学药物对微生物有杀菌作用和抑制生长 作用。 低剂量的化学药物对微生物起抑制或防腐 作用，
高剂量的化学药物对微生物起杀菌作用。
化学药物杀菌剂种类很多，现分如下几大类 进行讨论。
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21
6.1重金属盐类
有无机和有机的重金属盐类，如汞、银、铅、 锌、铜等重金属元素的化合物都有很强的毒性 杀菌作用很强。
28
6.6毒性物质
二氧化硫（SO2）、硫化氢（H2S）、一氧化碳
（CO）和氰化物（HCN）。O3
杀菌原理：对原生质中的一些活性基团或辅酶成 分能发生专性结合，使其失活，降低代谢活动或 使代谢不能进行，达到杀菌作用。
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该菌在对4人2℃有±致1病℃力条，件可下使能伤生处长化。脓，引起败血 症等。
化妆品微生物指标检验
17
SCDLP培养基
配培 养基 和稀 释液
供试 液的 制备
十六烷三甲基 溴化铵琼脂
增
菌 18~24h 培 36±1℃ 养
分 离 18~24h 纯 36±1℃ 化
灰白色、扁 平、周围有 水溶性蓝绿 色素
特征菌落
以判明化妆品被霉菌和酵母菌污染程度 及其一般卫生状况。
化妆品微生物指标检验
21
SCDLP培养基或 7.5%NaCl肉汤
Baird Parker’s 或血琼脂
配培 养基 和稀 释液
供试 品的 处理
增 菌 24±2h 培 36±1℃ 养
分
离 24~48h 纯 36±1℃ 化
特征菌落
无菌落或无特征菌落
书写检验 记录单
最终结 果判断
革兰染色、镜检→ 生化试验:血浆凝固酶试验
化妆品微生物指标检验
微生物检验方法
• GB/T 7918.1-1987 化妆品微生物标准检验方法 总则
• 菌落总数 （化妆品卫生规范-2007年） GB/T 7918.2-1987 化妆品微生物标准检验方法 细菌总数测定
• 粪大肠菌群：GB/T 7918.3-1987 化妆品微生物标准检验方法 粪 大肠菌群
化妆品微生物指标检验
9
供试液 的制备
混合平板 的制备
细菌的培 养
书写检验 记录单
数据 处理
检查结果、 观察与计数
化妆品微生物指标检验
10
• 化妆品中防腐剂抑制细菌的生长.
• 含卵磷脂、吐温80 营养琼脂培养基进行 中和。对尼泊金类、苯甲酸类、六氯酚 类等有效，但对卡松类的防腐剂的中和 效果有限。
• 铜绿假单胞菌 （化妆品卫生规范-2007年） GB/T 7918.4-1987 化妆品微生物标准检验方法 绿脓杆菌
• 金黄色葡萄球菌 GB/T 7918.5-1987 化妆品微生物标准检验方 法 金黄色葡萄球菌
• 霉菌和酵母菌：（化妆品化妆卫品微生生物规指标范检验-2007年）
2
适用范围
总则
• 微生物检验的基本要求 • 微生物检验样品的采集、保存及制备
化妆品微生物指标检验
11
• 卡松的中和剂半胱氨酸,可较好的中和卡 松的抑菌效果。因此,检测时不同的防腐 剂加入不同的中和剂
化妆品微生物指标检验
12
• 为便于区别化妆品中的颗粒与菌落，可在每 100mL 卵磷脂吐温 80 营养琼脂中加入 1mL 0.5％的 TTC 溶液，如有细菌存在，培养后 菌落呈红色，而化妆品的颗粒颜色无变化。
结果 判断
不产酸不产气
最终结 果判断
分离培养
产酸产气
36±1 ℃
18~24h
蛋白胨水
培养
特
44 ±0.5℃ 24±2h
征 菌
落 靛基质
液面玫瑰红色
★粪大肠菌群检查流程图
化妆品微生物指标检验
紫黑色
16
铜绿假单胞菌
• 铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa） 属于假单胞菌属，为革兰氏阴性杆菌， 氧化酶阳性，能产生绿脓菌素。此外还 能液化明胶，还原硝酸盐为亚硝酸盐，
无菌落或无特征菌落
书写检验 记录单
最终结 果判断
革兰染色、镜检→ 氧化酶试验 绿脓菌素试验
生化试验 硝酸盐还原试验 42℃生长试验 明胶液化试验
★铜绿假单胞菌检查流程图
化妆品微生物指标检验
18
黄绿色 菌膜
灰白色 湿润
十六烷三甲基溴化铵平板
SCDLP培养基
粉红/ 紫红色
氧化酶试验
化妆品微生物指标检验
甘露醇发酵试验
★金黄色葡萄球菌检查流程图
化妆品微生物指标检验
22
灰/黑色
Baird Parker’s平板
甘露醇发酵试验 血浆凝块
液态血浆
血浆凝固酶试验
化妆品微生物指标检验
23
霉菌和酵母菌
• 霉菌和酵母菌数测定（Determination of molds and yeast count）是指化妆品检样 在一定条件下培养后，1g 或 1mL 化妆品 中所污染的活的霉菌和酵母菌数量，藉
19
盐酸层呈粉紫色 氯仿层呈蓝绿色
N2
绿脓菌素试验
硝酸盐还原产气试验
明胶液化 试验
明胶液化
明胶培养基（高层）
化妆品微生物指标检验
20
金黄色葡萄球菌
• 金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus） 为革兰氏阳性球菌，呈葡萄状排列，无 芽胞，无荚膜，能分解甘露醇，血浆凝
该菌固是酶葡阳萄性球。菌中对人类致病力最强的一种， 能引起人体局部化脓性病灶，严重时可导致 败血症。
无菌容器、材料及操作
样品的均一性
化妆品微生物指标检验
7
样品的检验及保管
及时检验 样品应放在室温阴凉干燥处 样品先进行微生物检验，再做其他指标 须防止微生物的再污染和扩散 如检出粪大肠菌群或其它致病菌，自报告发 出之日起该菌种及被检样品应保存一个月
化妆品微生物指标检验
8
菌落总数检验
• 菌落总数（Aerobic bacterial count）是指化妆品 检样经过处理，在一定条件下培养后（如培养 基成分、培养温度、培养时间、pH 值、需氧性 质等），1g（1mL）检样中所含菌落的总数。 所得结果只包括一群本方法规定的条件下生长 的嗜中温的需氧性菌落总数。 测定菌落总数便于判明样品被细菌污染的程 度，是对样品进行卫生学总评价的综合依据。
• 2、抽/采样数量 • 按照抽样批及抽样方案
化妆品微生物指标检验
5
3、检验量
检验时，应分别从两个包装单位以上的 样品中共取10g 或10mL。包装量小于20g 的样品，采样量可适当增加样品包装数 量。
化妆品微生物指标检验
6
样品的制备
液体样品 膏、霜、乳剂半固体状样品 固体样品
样品的制备注意事项
化妆品微生物指标检验
3
样品的采集
总则
1、具有代表性 随机抽取相应数量的包装单位。 应从批的整体中各部位抽取，如从四角+中
间；分上、中、下层；或上、中上、中、中 下、下层；梅花点式等。
所有接触样品的工具、容器都必须保持清洁。
化妆品微生物指标检验
4
JJF1070－2005 定量包装 商品净含量计量检验规则
化妆品微生物指标检验
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• 在膏霜类化妆品中,微生物都是吸附或附 着于颗粒状的原料中,检测时不易洗脱下 来,因此,需要验证检测方法的有效性。
化妆品微生物指标检验
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双倍胆盐乳糖M
产酸稀 释液
供试 液的 制备
书写检验 记录单
增
菌 44 ±0.5℃ 检查
培 24~28h 养
化妆品微生物指标检验
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SCDLP培养基
配培 养基 和稀 释液
供试 液的 制备
十六烷三甲基 溴化铵琼脂
增
菌 18~24h 培 36±1℃ 养
分 离 18~24h 纯 36±1℃ 化
灰白色、扁 平、周围有 水溶性蓝绿 色素
特征菌落
以判明化妆品被霉菌和酵母菌污染程度 及其一般卫生状况。
化妆品微生物指标检验
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SCDLP培养基或 7.5%NaCl肉汤
Baird Parker’s 或血琼脂
配培 养基 和稀 释液
供试 品的 处理
增 菌 24±2h 培 36±1℃ 养
分
离 24~48h 纯 36±1℃ 化
特征菌落
无菌落或无特征菌落
书写检验 记录单
最终结 果判断
革兰染色、镜检→ 生化试验:血浆凝固酶试验
化妆品微生物指标检验
微生物检验方法
• GB/T 7918.1-1987 化妆品微生物标准检验方法 总则
• 菌落总数 （化妆品卫生规范-2007年） GB/T 7918.2-1987 化妆品微生物标准检验方法 细菌总数测定
• 粪大肠菌群：GB/T 7918.3-1987 化妆品微生物标准检验方法 粪 大肠菌群
化妆品微生物指标检验
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供试液 的制备
混合平板 的制备
细菌的培 养
书写检验 记录单
数据 处理
检查结果、 观察与计数
化妆品微生物指标检验
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• 化妆品中防腐剂抑制细菌的生长.
• 含卵磷脂、吐温80 营养琼脂培养基进行 中和。对尼泊金类、苯甲酸类、六氯酚 类等有效，但对卡松类的防腐剂的中和 效果有限。
• 铜绿假单胞菌 （化妆品卫生规范-2007年） GB/T 7918.4-1987 化妆品微生物标准检验方法 绿脓杆菌
• 金黄色葡萄球菌 GB/T 7918.5-1987 化妆品微生物标准检验方 法 金黄色葡萄球菌
• 霉菌和酵母菌：（化妆品化妆卫品微生生物规指标范检验-2007年）
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适用范围
总则
• 微生物检验的基本要求 • 微生物检验样品的采集、保存及制备
化妆品微生物指标检验
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• 卡松的中和剂半胱氨酸,可较好的中和卡 松的抑菌效果。因此,检测时不同的防腐 剂加入不同的中和剂
化妆品微生物指标检验
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• 为便于区别化妆品中的颗粒与菌落，可在每 100mL 卵磷脂吐温 80 营养琼脂中加入 1mL 0.5％的 TTC 溶液，如有细菌存在，培养后 菌落呈红色，而化妆品的颗粒颜色无变化。
结果 判断
不产酸不产气
最终结 果判断
分离培养
产酸产气
36±1 ℃
18~24h
蛋白胨水
培养
特
44 ±0.5℃ 24±2h
征 菌
落 靛基质
液面玫瑰红色
★粪大肠菌群检查流程图
化妆品微生物指标检验
紫黑色
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铜绿假单胞菌
• 铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa） 属于假单胞菌属，为革兰氏阴性杆菌， 氧化酶阳性，能产生绿脓菌素。此外还 能液化明胶，还原硝酸盐为亚硝酸盐，
无菌落或无特征菌落
书写检验 记录单
最终结 果判断
革兰染色、镜检→ 氧化酶试验 绿脓菌素试验
生化试验 硝酸盐还原试验 42℃生长试验 明胶液化试验
★铜绿假单胞菌检查流程图
化妆品微生物指标检验
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黄绿色 菌膜
灰白色 湿润
十六烷三甲基溴化铵平板
SCDLP培养基
粉红/ 紫红色
氧化酶试验
化妆品微生物指标检验
甘露醇发酵试验
★金黄色葡萄球菌检查流程图
化妆品微生物指标检验
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灰/黑色
Baird Parker’s平板
甘露醇发酵试验 血浆凝块
液态血浆
血浆凝固酶试验
化妆品微生物指标检验
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霉菌和酵母菌
• 霉菌和酵母菌数测定（Determination of molds and yeast count）是指化妆品检样 在一定条件下培养后，1g 或 1mL 化妆品 中所污染的活的霉菌和酵母菌数量，藉
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盐酸层呈粉紫色 氯仿层呈蓝绿色
N2
绿脓菌素试验
硝酸盐还原产气试验
明胶液化 试验
明胶液化
明胶培养基（高层）
化妆品微生物指标检验
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金黄色葡萄球菌
• 金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus） 为革兰氏阳性球菌，呈葡萄状排列，无 芽胞，无荚膜，能分解甘露醇，血浆凝
该菌固是酶葡阳萄性球。菌中对人类致病力最强的一种， 能引起人体局部化脓性病灶，严重时可导致 败血症。
无菌容器、材料及操作
样品的均一性
化妆品微生物指标检验
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样品的检验及保管
及时检验 样品应放在室温阴凉干燥处 样品先进行微生物检验，再做其他指标 须防止微生物的再污染和扩散 如检出粪大肠菌群或其它致病菌，自报告发 出之日起该菌种及被检样品应保存一个月
化妆品微生物指标检验
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菌落总数检验
• 菌落总数（Aerobic bacterial count）是指化妆品 检样经过处理，在一定条件下培养后（如培养 基成分、培养温度、培养时间、pH 值、需氧性 质等），1g（1mL）检样中所含菌落的总数。 所得结果只包括一群本方法规定的条件下生长 的嗜中温的需氧性菌落总数。 测定菌落总数便于判明样品被细菌污染的程 度，是对样品进行卫生学总评价的综合依据。
• 2、抽/采样数量 • 按照抽样批及抽样方案
化妆品微生物指标检验
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3、检验量
检验时，应分别从两个包装单位以上的 样品中共取10g 或10mL。包装量小于20g 的样品，采样量可适当增加样品包装数 量。
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样品的制备
液体样品 膏、霜、乳剂半固体状样品 固体样品
样品的制备注意事项
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样品的采集
总则
1、具有代表性 随机抽取相应数量的包装单位。 应从批的整体中各部位抽取，如从四角+中
间；分上、中、下层；或上、中上、中、中 下、下层；梅花点式等。
所有接触样品的工具、容器都必须保持清洁。
化妆品微生物指标检验
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JJF1070－2005 定量包装 商品净含量计量检验规则
化妆品微生物指标检验
13
• 在膏霜类化妆品中,微生物都是吸附或附 着于颗粒状的原料中,检测时不易洗脱下 来,因此,需要验证检测方法的有效性。
化妆品微生物指标检验
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双倍胆盐乳糖M
产酸稀 释液
供试 液的 制备
书写检验 记录单
增
菌 44 ±0.5℃ 检查
培 24~28h 养