HILIC色谱柱介绍[优质材料]
亲水多孔硅胶色谱柱
亲水多孔硅胶色谱柱柱床填充：亲水多孔硅胶（HILIC）色谱柱以其独特的分离机制在色谱领域得到了广泛的应用。
它是一种新型的色谱柱填充材料，能够有效地分离亲水性物质，广泛适用于分析和生物药物制剂的固定相。
亲水多孔硅胶填充物的独特性能使其在分析和制备中具有重要的应用价值。
亲水多孔硅胶色谱柱由一种多孔性硅胶基质组成，具有大的表面积和优异的亲水性能。
柱床填充物的多孔结构可以提供更大的分析表面积，使样品充分与固定相接触，有利于分析物的吸附和分离。
亲水多孔硅胶材料的亲水性能可以与溶液中的亲水性溶剂相互作用，从而实现分析物的选择性分离。
分离机理：亲水多孔硅胶色谱柱的分离机理是基于静电和极性相互作用的。
亲水性化合物在亲水多孔硅胶上发生吸附，而疏水性化合物则迅速通过柱床。
这种分离机理可以用于分离多种亲水性物质，如醇类、酚类、胺类等。
应用领域：亲水多孔硅胶色谱柱在药物分析、环境监测、食品安全等领域具有广泛的应用。
在药物分析中，亲水多孔硅胶色谱柱可以用于分离和定量分析亲水性物质，如抗生素、植物提取物等。
在环境监测中，亲水多孔硅胶色谱柱常用于分离和测定水中的有机污染物，如酚类、抗生素、农药等。
在食品安全领域，亲水多孔硅胶色谱柱可以用于检测食品中的添加剂、农药残留等亲水性物质。
优点：亲水多孔硅胶色谱柱具有以下几个优点。
首先，它的静电和极性相互作用机理适用于各种类型的亲水性化合物分离。
其次，亲水多孔硅胶色谱柱具有优异的选择性和分离效能，能够有效地分离复杂样品。
此外，亲水多孔硅胶色谱柱具有较大的样品容量和较好的重复性，可满足分析研究的需要。
总结：亲水多孔硅胶色谱柱是一种用于分离亲水性物质的重要工具，其独特的分离机理和优异的性能在多个领域得到了广泛的应用。
随着科学技术的不断发展和进步，亲水多孔硅胶色谱柱的分离效能和选择性还将进一步提高，为各种样品的分离和分析提供更好的解决方案。
亲水作用(Hilic)色谱简介,以及和正相色谱相、反相色谱比较
亲水作用（H i l i c）色谱，有时被称为“含水正相色谱”，有时又被称为“反反相色谱”，简单来说，是极性的固定相和极性的流动相组成，参考表1，在固定相方面，看似和正相色谱一样，那么，同一款色谱柱是否既可以用于正相色谱，又可以用于H i l i c色谱？在流动相方面，和反相色谱接近，那两种模式保留行为和流动相对保留的影响规律有什么差异？你对H i l i c色谱是否也疑惑重重？接下来让我们一起揭开亲水作用（H i l i c）色谱的神秘面纱吧。
表1 反相、正相、Hilic色谱对比一、Hilic简介1.1流动相在大多数的Hilic分离中，采用的流动相为含有少量水/缓冲液与有机相混合（典型的是乙腈），水的比例为3%-40%之间。
水的比例不低于3%是由于Hilic色谱的保留机理决定的，普遍认为Hilic色谱流动相中的水会被吸附到极性固定相的表面形成水膜，然后分析物在水膜和流动相之间进行液液分配作用，加上极性官能团和固定相之间的氢键作用力，离子官能团之间的静电作用力等，实现被分析物的保留。
水膜的作用非常重要，所以Hilic流动相中至少含有3%的水。
当水的比例大于40%时，保留一般很弱（k≈0）。
1.2固定相应用于Hilic色谱的固定相有：纯硅胶柱、氨基柱、二醇基柱、酰胺基柱等。
纯硅胶柱有固定相不易流失的优点，在使用CAD、ELSD和LC-MS检测器时，最受欢迎；氨基柱，在Hilic 色谱中的应用，特别适合碳水化合物（糖类）分离；二醇基柱，亲水性很好，可以提供不同的选择性。
二、Hilic和正相色谱相比2.1固定相的区别同样是Silica，NH2，Diol柱，与用于正相色谱中的色谱柱不同，专为Hilic色谱设计的色谱柱，可以用于水/有机物的流动相中，换句话说，Hilic色谱对固定相的耐水性要求更高，否则会因固定相的水解，出现基线噪音大、色谱柱寿命短等问题。
所以用于正相色谱中的色谱柱，不一定能用于Hilic色谱。
HILIC色谱柱介绍
亲水作用（HILIC）是近年来色谱领域研究的热点之一。
本文简介了HILIC的起源、定义、分离特点；比较了HILIC和反相色谱（RPLC）的选择特性，讨论了HILIC与质谱联用技术的特点，并对其使用中的进行了总结。
1. HILIC的概念亲水色谱（HILIC）是一种用来改善在反相色谱中保留较差的强极性物质保留行为的色谱技术。
它通过采用强极性固定性，并且结合高比例有机相/低比例水相组成的流动相来实现这一目的。
而这样的流动相组成尤其有利于提高电喷雾离子化质谱（ESI-MS）的灵敏度。
2. HILIC的分离机制HILIC的分离机理在目前还存在着争议，主要包括以下三个方面：（1）分配机理（2）离子交换（3）偶极-偶极相互作用。
更多的试验现象则表明HILIC的保留机理包含氢键作用、偶极作用和静电作用等多种次级效应，很难将其区分开来。
影响保留的主要因素普遍认为HILIC保留行为受到多种参数的影响，如固定相的官能团、有机改性剂的含量、流速、柱温、流动相缓冲体系的pH值、缓冲盐的种类和浓度。
影响样品在固定相上的保留行为的最主要因素都是流动相中有机相的比例，例如乙腈的含量的增加会显着增加样品的保留因子。
在HILIC分离模式中，溶剂洗脱能力由弱到强为：四氢呋喃<丙酮<乙腈<异丙醇<乙醇<甲醇<水, 流动相中水是最强的洗脱溶剂。
一般采用乙腈-水体系作为流动相，其中水相的比例为5%-40%以保证其显着的亲水作用。
如图1所示，将流动相中的水相用甲醇、乙醇、异丙醇代替，随着流动相极性的减小，待测物在柱上的保留就会增强。
Figure 1. HILIC retention as a function of polar modifier. 100 mm length ACQUITY UPLC BEH HILIC column. Peaks: 1 = methacrylic acid, 2 = cytosine, 3 = nortriptyline, 4 = nicotinic acid.4. HILIC与RP-HPLC的比较传统的反相色谱（RPLC）对强极性和亲水性的小分子物质的保留和分离能力较弱，通常流动相需要采用高比例的水相才能实现其保留，然而高比例的水相会导致一系列问题，比如固定相的反浸润和ESI-MS灵敏度的下降。
PC_HILIC_介绍资料
PC_HILIC_介绍资料PC_HILIC（Porous graphitized carbon hydrophilic interaction chromatography）是一种新型的色谱分析技术，主要应用于极性和水溶性分析物的分离和鉴定。
PC_HILIC色谱技术结合了亲水性交换和碳相色谱的特点，具有较强的保留能力和分离效果。
PC_HILIC色谱柱采用了一种具有高孔隙率的石墨碳材料作为固定相。
这种材料有着大量的亲水性功能基团，可以与水溶性化合物形成氢键、离子键等相互作用，从而实现分离。
此外，石墨碳材料还能形成多孔结构，提供了更大的表面积和更高的保留能力。
1.宽泛的应用范围：PC_HILIC色谱技术适用于分离和鉴定各种不同极性化合物，包括有机酸，糖类，氨基酸，核苷酸等。
因此，在食品、生物医学、环境监测等领域具有很高的应用潜力。
2.较强的保留能力：PC_HILIC色谱柱具有较高的保留能力，能够有效地保留具有弱极性功能基团的化合物。
这使得它在复杂样品的分离和鉴定中表现出色。
3.良好的分离效果：PC_HILIC色谱技术能够对目标化合物进行有效地分离和预提纯。
其分离效果优于传统的反相色谱技术，能够提高分析结果的准确性和可靠性。
4.简单的操作和易于优化：相比于其他液相色谱技术，PC_HILIC色谱技术的操作比较简单。
同时，通过调整流动相的组成、pH值和流速等参数，可以对色谱分离进行优化，以获得更好的分离效果。
需要注意的是，由于PC_HILIC色谱柱的反相作用较弱，因此在分离和鉴定时需要对流动相进行精确的调控，特别是在选择有机溶剂和缓冲液时。
此外，由于采用了高孔隙率的石墨碳材料，色谱柱的稳定性相对较差，需要注意保养和使用。
总结起来，PC_HILIC色谱技术是一种有效的分离和鉴定水溶性化合物的方法。
它具有宽泛的应用范围、较强的保留能力和良好的分离效果。
随着该技术的不断发展和改进，相信其在科学研究和实际应用中将得到更广泛的应用。
HILIC色谱柱介绍
亲水作用色谱(HＩLIＣ)就是近年来色谱领域研究得热点之一。
本文简介了HＩＬIC得起源、定义、分离特点；比较了ＨIＬIC与反相色谱（RＰＬC）得选择特性，讨论了HILIC与质谱联用技术得特点,并对其使用中得注意事项进行了总结.ﻫ1、HIＬIC得概念亲水色谱（ＨILIＣ)就是一种用来改善在反相色谱中保留较差得强极性物质保留行为得色谱技术。
它通过采用强极性固定性,并且结合高比例有机相/低比例水相组成得流动相来实现这一目得.而这样得流动相组成尤其有利于提高电喷雾离子化质谱（EＳI-MS）得灵敏度。
ﻫ２、HＩLIC得分离机制ﻫHＩLIＣ得分离机理在目前还存在着争议,主要包括以下三个方面：（1）分配机理（2）离子交换(3)偶极—偶极相互作用。
更多得试验现象则表明HIＬIＣ得保留机理包含氢键作用、偶极作用与静电作用等多种次级效应，很难将其区分开来.３、ＨILIＣ影响保留得主要因素普遍认为ＨILIC保留行为受到多种参数得影响，如固定相得官能团、有机改性剂得含量、流速、柱温、流动相缓冲体系得pH值、缓冲盐得种类与浓度。
影响样品在固定相上得保留行为得最主要因素都就是流动相中有机相得比例，例如乙腈得含量得增加会显著增加样品得保留因子。
在ＨILＩC分离模式中,溶剂洗脱能力由弱到强为:四氢呋喃＜丙酮<乙腈〈异丙醇<乙醇<甲醇＜水，流动相中水就是最强得洗脱溶剂。
一般采用乙腈—水体系作为流动相,其中水相得比例为5％-40％以保证其显著得亲水作用.如图1所示,将流动相中得水相用甲醇、乙醇、异丙醇代替，随着流动相极性得减小,待测物在柱上得保留就会增强。
Figure１、ＨILＩC ｒｅtenｔion as aｆｕｎｃtｉoｎof polar ｍodｉfier、１00 ｍm lenｇｔh AＣQＵＩTY UPLC BEH HILICｃolｕmｎ、Peakｓ：1= metｈacｒyl ｉc acｉd, 2 = cｙｔosinｅ，3 = nortripｔｙlｉne, 4 = nｉｃｏtinｉcａcid、4、HILIC与RP－ＨPＬC得比较ﻫ传统得反相色谱（RPLＣ）对强极性与亲水性得小分子物质得保留与分离能力较弱，通常流动相需要采用高比例得水相才能实现其保留,然而高比例得水相会导致一系列问题，比如固定相得反浸润与ＥＳI－MＳ灵敏度得下降。
hilic色谱柱新柱子活化 解释说明以及概述
hilic色谱柱新柱子活化解释说明以及概述1. 引言1.1 概述HILIC（Hydrophilic Interaction Chromatography）色谱是一种高效液相色谱分析技术，其特点是利用极性固定相与水样品间的亲和作用进行物质的分离。
随着科学研究和实际应用的需要，近年来出现了许多新型的HILIC色谱柱子。
本文将重点介绍这些新柱子的活化解释以及给出相关概述。
1.2 文章结构本文将按照以下结构进行论述：首先，将对新型HILIC色谱柱子的概述进行介绍；接着，会详细解释新柱子的活化原理；然后，探讨这些新柱子在不同领域中的应用领域和意义；其次，进行性能分析，包括分离效能评估、色谱峰形态分析和保留机制研究；最后，提供关于优化操作方法和操作指南。
1.3 目的本篇文章旨在向读者介绍最新发展的HILIC色谱柱子，并深入探讨这些柱子在实际应用中的优势及性能。
通过阐明它们的活化解释和特点，目的是帮助读者更好地理解和运用新柱子，从而推动HILIC色谱技术在分析领域的发展，并为相关研究人员提供操作指南和优化方法。
2. hilic色谱柱新柱子活化解释说明:2.1 hilic色谱柱概述HILIC（Hydrophilic Interaction Liquid Chromatography）即亲水性相互作用液相色谱，是一种基于极性分离机制的液相色谱技术。
和传统的反相色谱技术不同，HILIC色谱使用亲水性固定相，通过样品中化合物与固定相表面上的极性官能团间的疏水效应进行分离。
HILIC色谱在极性化合物、水溶性小分子药物和多肽等方面表现出优异的分离能力。
2.2 新柱子活化原理hilic色谱柱新柱子活化是为了提高柱子表面亲水性而进行的一系列处理步骤。
新柱子在经过特殊处理后，能够形成更精细的涂层结构，增加其极性官能团暴露在表面上，从而提高柱子表面对样品中目标化合物的吸附能力。
具体来说，在hilic色谱柱新柱子活化过程中，可以采用各种方法来调整和改变固定相表面的组成和结构。
聚合物基质亲水性相互作用(HILIC)色谱柱(HILICpak)
Column Eluent
5
10
15
17
有机磺酸的LC/MS/MS分析
1
泛酸和维生素C的LC/MS分析
样品 : 5µL 0.01µM each (in H2O/CH3CN=1/3) 1. 牛磺酸 (Taurine) 2. 牛黄胆酸 (Taurocholic acid)
1
样品 : 100ng/mL each, 10µL 1. 维生素 B5 (Vitamin B5) ( 泛酸 (Pantothenic acid) ) 2. 维生素 C (Vitamin C) ( 抗坏血酸 (Ascorbic acid) )
R2 NH2 NH2 OH OH
R3 NH2 NH2 OH NH2
2 3
N N R3
1 2 3
R2
N
4
3
4
0
5
10
15 min
0
5
10
15
20 min
Column : Eluent : Flow rate : Detector : Column temp. :
Shodex HILICpak VG-50 4E H2O/CH3CN/CH3OH=5/75/20 1.0mL/min RI 40˚C
果糖 (Fructose), 甘露糖 (Mannose), 葡萄糖 (Glucose)
葡萄糖胺 (Glucosamine)
蔗糖 (Sucrose) + 乳糖 (Lactose)
麦芽糖 (Maltose) 棉子糖 (Raffinose) 半乳糖醛酸
(Galacturonic acid)
: Shodex HILICpak VG-50 2D : (A); 0.5% NH3 aq./(B); CH3CN Linear gradient (High pressure); (B%) 80% (0 to 2min) 80% to 10% (2 to 12min) 10% (12 to 15min) 80% (15 to 20min) Flow rate : 0.2mL/min Detector : ESI-MS (SIM) Column temp. : 40˚C
hilic色谱柱 寡糖
hilic色谱柱寡糖
HILIC色谱柱是一种亲水性交换色谱柱，用于分离和分析亲水性分子，例如糖类、寡糖。
寡糖是由2-9个单糖单元组成的糖分子，具有重要的生物学功能和应用价值。
在糖类的分析中，HILIC色谱柱常被用于寡糖的分离和定量分析。
HILIC色谱使用极性固定相和较强的有机溶剂作为流动相，通过样品分子与固定相之间的亲水性相互作用来实现分离。
在HILIC色谱柱上，寡糖在流动相中与固定相发生相互作用，不同寡糖之间的亲水性差异导致它们在柱上有不同的保留时间，从而实现分离。
使用HILIC色谱柱进行寡糖分析时，常常需要选择合适的流动相和柱温来优化分离性能。
同时，可以通过检测器测量吸光度、折射率或电导率等来检测和定量寡糖。
总之，HILIC色谱柱是一种常用的分离和分析寡糖的工具，可以提供高分辨率和灵敏度的分析结果。
hilic色谱柱 寡糖
hilic色谱柱寡糖hilic色谱柱在寡糖分析中的应用色谱技术作为一种重要的分离技术在许多领域中得到了广泛的应用，其中之一就是在寡糖分析中的应用。
而hilic（Hydrophilic Interaction Chromatography）色谱柱作为一种常用的分离工具，因其对水溶性物质具有较强的保留能力而备受关注。
本文将介绍hilic色谱柱在寡糖分析方面的应用，以及其特点和优势。
一、hilic色谱柱的基本原理和结构特点hilic色谱柱是基于氢键作用的离子交换色谱的衍生物，其分离机制主要是通过溶剂流动模式的改变来调节寡糖的保留和分离。
hilic色谱柱对于带有羟基或氨基的寡糖分子具有较强的保留能力，可实现较好的分离效果。
hilic色谱柱的固定相一般采用亲水性较强的材料，例如对碳链较长的硅胶或磨碎的硅胶。
而流动相则通常选择含有高浓度有机溶剂和高离子强度的缓冲液，用以增加寡糖分子之间的相互作用和保留能力，并实现寡糖的有效分离。
二、hilic色谱柱在寡糖分析中的应用1. 寡糖的定性分析hilic色谱柱在寡糖分析中可以用于寡糖的定性分析。
通过改变流动相的成分和流速，可以控制分离色谱峰的保留时间，进而确定不同寡糖的特征保留时间。
利用这一特性，可以通过与标准寡糖的保留时间比较，对未知样品中寡糖的种类进行鉴定。
2. 寡糖的定量分析hilic色谱柱也可用于寡糖的定量分析。
通过建立标准曲线，确定不同浓度下寡糖的峰面积与浓度的关系，并利用该关系式进行未知样品中寡糖的定量分析。
这种定量方法快速、准确，并且无需复杂的前处理步骤，因此在寡糖分析中具有广泛的应用前景。
3. 寡糖的结构分析hilic色谱柱还可用于寡糖的结构分析。
利用分离效果较好的hilic色谱柱，可以有效地分离具有不同修饰基团或不同链长的寡糖，进而对其结构进行分析。
此外，结合质谱技术，可实现对寡糖的进一步鉴定和结构表征。
三、hilic色谱柱的优势和不足1. 优势hilic色谱柱在寡糖分析中具有一些明显的优势。
HILIC色谱柱使用注意事项
HILIC色谱柱使用注意事项1.样品准备：由于HILIC色谱柱适用于极性和亲水性化合物的分离，因此需要使用水溶性溶剂进行样品制备。
最好避免使用含有高浓度有机溶剂的样品，因为这些溶剂可能会造成柱的沾污或损坏。
2.流动相的选择：在选择流动相时，应优先选择极性溶剂，如甲醇、乙醇和乙腈。
此外，可以添加少量的缓冲剂，以控制溶液的pH值。
请注意，不同的流动相组合可能会对柱的性能产生显著影响，因此在实验前需要进行流动相的优化。
3.柱温的控制：HILIC色谱柱对温度敏感，因此在使用过程中需要控制好柱温。
一些常用的温度范围为20-30摄氏度。
请注意，过高的温度可能会导致柱的浸润性下降，从而影响分离效果。
4.注射量的控制：使用HILIC色谱柱时，注射量的控制也非常重要。
一般来说，较小的注射量可以提高分离效果，但如果注射量太小，可能会导致响应信号过弱。
因此，需要在仪器的线性范围内选择适当的注射量。
5.流速的选择：对于HILIC色谱柱，流速的选择也非常重要。
较低的流速可以提高分离效果，但可能会导致分离时间过长。
较高的流速可以缩短分离时间，但可能会降低分离效果。
因此，需要在选择流速时权衡分离效果和分析时间。
6.柱的保养与保护：为了保护HILIC色谱柱并延长其使用寿命，需要注意以下几点。
首先，使用前请确保柱和流动相达到平衡状态。
其次，在每次使用后用纯水或甲醇进行冲洗，以去除残留的样品和杂质。
最后，在使用后请存放在恰当的溶剂中，避免干燥。
7.样品的选择：由于HILIC色谱柱适用于分离极性和亲水性化合物，样品的选择也非常重要。
推荐使用具有一定极性的化合物进行分析，如氨基酸、酮糖和亲水性药物等。
总之，使用HILIC色谱柱时需要注意样品准备、流动相的选择、柱温控制、注射量的控制、流速的选择、柱的保养与保护以及样品的选择。
通过良好的操作和实验条件的优化，可以有效地提高HILIC色谱柱的分离效果和使用寿命。
亲水作用色谱柱型号
亲水作用色谱柱型号
在液相色谱（Liquid Chromatography，简称LC）中，亲水作用色谱柱（Hydrophilic Interaction Chromatography，简称HILIC）是一种常用的分离柱类型。
HILIC柱主要用于极性化合物的分离和分析，特别适用于水溶性化合物、极性化合物、氨基酸、糖类、多肽和核苷酸等化合物的分离。
常见的亲水作用色谱柱型号有以下几种：
1. TSKgel Amide-80，这是一种经典的HILIC柱，由乙二醇基团修饰的硅胶填料构成，适用于分离极性化合物和糖类。
2. Atlantis HILIC Silica，这是一种亲水作用色谱柱，由硅胶填料构成，表面经过化学修饰，适用于极性化合物、氨基酸和糖类的分离。
3. ZIC-HILIC，这是一种亲水作用色谱柱，由亲水性离子交换填料构成，适用于分离极性化合物、糖类和多肽。
4. SeQuant ZIC-pHILIC，这是一种亲水作用色谱柱，由亲水性
离子交换填料构成，适用于分离极性化合物、糖类和多肽。
5. Acquity UPLC BEH Amide，这是一种亲水作用色谱柱，由乙
二醇基团修饰的硅胶填料构成，适用于分离极性化合物和糖类。
这些亲水作用色谱柱型号具有不同的特点和应用范围，选择适
合的柱型号应根据样品的特性和分析需求进行评估。
此外，还有其
他厂家提供的亲水作用色谱柱型号，你可以根据具体需求进行选择。
HILIC色谱柱介绍
部件号 176001963 176001964 176001965 176001966
ACQUITY UPLC方法验证包（3根/包，来自不同填料批次）
键合相
BEH HILIC BEH HILIC BEH Amide BEH Amide
颗粒度
1.7µm 1.7µm 1.7µm 1.7µm
柱长
50mm 100mm 50mm 100mm
ACQUITY UPLC BEH色谱柱
键合相
粒径
柱规格
部件号1根/包 部件号3根/包
BEH HILIC
1.7µm
1.0 x 50 mm
186003457
176001089
BEH HILIC
1.7µm
1.0 x 100 mm 186003458
176001090
BEH HILIC
1.7µm
1.0 x 150 mm 186003459
XBridge HILIC
186004455 186004456 186004457 186004458 1860044592 186004460 186004461 186004429 1860044301 186004431 186004432 186004433 186004434
—
186004435 186004436 1860044372 186004438 186004439 186004440 186004441
部件号 2.1mm内径 186004053 186004054 186004807 186004808
部件号 3.0mm 内径 186004699 186004700 186004809 186004810
ACQUITY UPLC方法转换包
HILIC色谱柱简介
HILIC色谱柱简介：1. HILIC的概念亲水色谱（HILIC）是一种用来改善在反相色谱中保留较差的强极性物质保留行为的色谱技术。
它通过采用强极性固定性，并且结合高比例有机相/低比例水相组成的流动相来实现这一目的。
而这样的流动相组成尤其有利于提高电喷雾离子化质谱（ESI-MS）的灵敏度。
2. HILIC的分离机制HILIC的分离机理在目前还存在着争议，主要包括以下三个方面：（1）分配机理（2）离子交换（3）偶极-偶极相互作用。
更多的试验现象则表明HILIC的保留机理包含氢键作用、偶极作用和静电作用等多种次级效应，很难将其区分开来。
”HILIC方法开发经验大披露：1. HILIC色谱柱的以waters 公司的HILIC色谱柱为例，分为HPLC和UPLC两种类型，又分为Atlantis，Xbridge，Acquity三个品牌。
填料类型分为BEH，无封尾和Amide填料三种。
2. HILIC色谱柱的应用范普通反向色谱难以保留的物质。
3.HILIC的对化合物的保留原理：亲水性吸附，离子交换和氢键作用。
应用小TIPS：1.HILIC柱如何平衡？HILIC柱使用70%的乙腈水溶液平衡。
2.HILIC柱如何保存？HILIC柱使用90%的乙腈水溶液保存。
前言：1. 一直使用Waters 的HILIC较多，感觉质量还行，但是要小心waters 的HILIC是分两种类型的填料的BEH HILIC和HILIC。
很多waters 的销售都不清楚之一点。
但是大家一定要注意，这两款的区别是很大的，保留的效果是不同的。
2. 费罗门公司的HILIC柱，感觉是小家碧玉型的，保留能力不是太强，但是清秀文雅，峰型很好看。
3. HILIC的流动相推荐使用乙腈。
4. 推荐使用乙酸铵，这也以后再说。
5.不能使用100% 的乙腈，推荐使用到95%就行了。
不能使用60%一下的乙腈。
所以梯度范围小。
但是足够用了。
因为100%的乙腈可能对HILIC的中亲水的部分不利于键合相的伸展开。
HILIC柱使用说明及注意事项
HILIC柱使用说明及注意事项本柱为两性离子的固定相共价结合于多孔硅胶上。
坚固亲水的两性离子官能团使得柱子更适合于亲水相互作用的液相色谱。
带电分析物和中性两性离子固定相之间的弱的静电相互作用力形成特殊的选择性，特别适合在反相柱上保留差的分析物。
ZIC-HILIC柱作为一种工具，它可以改变甚至增强极性和亲水性物质的选择性和峰的分辨率，例如：糖类、代谢物、酸、碱、有机离子、无机离子、金属络合物、氨基酸、肽、蛋白消化液等等。
柱子的硬件和化学兼容性柱子外壳由不锈钢制作而成，可以在pH 3-8范围内使用，不可使用强的碱性溶液以及NaOH作为洗脱剂，柱温最高可加到70摄氏度。
清洗和再生如果柱后压增强或者选择性发生改变，可以使用下面的清洗步骤：30倍柱体积的双蒸水30倍柱体积的0.5M NaCl30倍柱体积的双蒸水第一步使用双蒸水是为了去除有机溶剂和极性杂质，之后跟一段0.5M NaCl 的冲洗，最后去除盐并用80%乙腈平衡。
保存柱子购买时由80%乙腈及5mM NH4Ac (pH 6.8) 保存，该溶剂也适用于柱子的长期保存。
样品使用溶剂及溶剂强度样品应该溶解在60-80%的有机溶剂中或者最初的流动相中。
水的含量要尽量少，弱亲水溶剂如乙腈是比较推荐的。
在自动进样后推荐使用含5%水的清洗溶剂。
亲水溶剂的相对强度如下：丙酮<乙腈<异丙醇<乙醇<甲醇<水。
流动相的探索为了获得可重复的结果，流动相中至少包含3%的水以确保固定相颗粒的足够的水合作用。
HILIC分离的适宜的缓冲体系为甲酸和醋酸盐，因为它们在较高的有机溶剂中仍有很好的溶解性。
避免磷酸盐以及低溶解性的缓冲盐，防止后者在柱床中沉淀。
大部分的分析物缓冲盐的浓度在5-20mM是比较适宜的，上限在200-300mM，主要取决于盐在洗脱溶剂中的溶解度。
TFA和其它离子对试剂坚决不能使用，因为它们会干扰HILIC的分离机制并抑制质谱信号。
典型的洗脱程序等度洗脱：80：20(v:v)乙腈：醋酸铵-水(5-20mM)或者其它适合的缓冲盐梯度洗脱：90%至40%的乙腈，洗脱时间为20min(2.5%/min)。
VenusilHILIC丙基酰胺亲水作用液相色谱柱
VenusilHILIC丙基酰胺亲水作用液相色谱柱Venusil HILIC丙基酰胺亲水作用液相色谱柱，键合相为中性的酰胺基团。
在处理强极性化合物方面，Venusil HILIC色谱柱比反相C18色谱柱表现出更大的优势，利用亲水作用色谱原理，可保留或分离强极性、水溶性碱性有机化合物。
HILIC是一种亲水作用色谱模式，其洗脱是以化合物亲水性/极性增加的次序排列，典型的流动相是乙腈（40%--97%）－水（或挥发性缓冲盐），所以HILIC色谱具有和反相色谱互补的选择性，同时它可以使用更高挥发性的流动相，增加了HILIC色谱的LC/MS分析灵敏度，降低了分离的压力。
同时HILIC色谱摒弃了离子对试剂，极大的方便了制备色谱方法的开发。
Venusil HILIC色谱柱与传统的氨基柱和硅胶柱相比，Venusil HILIC色谱柱具有更好的重现性和寿命。
Venusil HILIC是是替代氨基柱和硅胶柱的最佳选择。
硅胶纯度>99.999%；pH适用范围2.0-8.0；孔径100?水溶性维生素分析（与硅胶柱比较）另外，Venusil HILIC 由于其出色的亲水性用于测益母草中的盐酸水苏碱已经被中国药典所收录。
从化学结构上看，盐酸益母草碱和盐酸水苏碱由于含有较多的极性基团（-OH、-NH2、-COOH）和孤对电子，水溶性特别强，因此普通的C18反相色谱柱已不能满足此类化合物的分析要求，最重要的原因即亲水性成分在C18柱上没有保留。
而丙基酰胺键合硅胶（HILIC)克服了传统正相色谱柱在水相条件下不稳定的缺点,其常使用流动相是和反相色谱相同的水相缓冲液(< 40%)及有机溶剂,但是其梯度条件通常是初始为高比例有机相，逐步加大水相含量;极性丙基酰胺键合硅胶的HILIC色谱柱在反相条件下，可以有效的保留极性化合物，是一种崭新的极性化合物HPLC分离解决方式.可用于奶粉中双氰胺检测！。
HILIC色谱柱使用注意事项
HILIC色谱柱使用注意事项HILIC（Hydrophilic Interaction Liquid Chromatography）色谱柱是一种水合作用液相色谱技术，适用于极性化合物的分离和分析。
使用HILIC色谱柱需要注意以下几个方面：1.样品准备：在使用HILIC柱之前，需要确保样品是水溶性的或能够在水溶剂中溶解。
对于非极性或溶解度低的化合物，可以选择在HILIC之前进行样品前处理，如使用极性溶剂预溶解。
2.流动相选择：HILIC色谱柱适用于极性溶剂，如甲醇、乙腈等。
常见的HILIC流动相为水-有机溶剂的混合物。
选择合适的流动相组成对于有效分离是至关重要的。
一般来说，水的含量越高，极性化合物的保留时间越长。
3.pH控制：HILIC色谱柱在分析过程中可能受到溶剂pH的影响，因此对于一些对pH敏感的化合物，需要进行pH调供更好的保留和分离效果。
4.柱温控制：HILIC柱的温度会影响保留时间和分离效果。
在使用HILIC柱的过程中，需要控制柱温，一般常见的温度范围为20-40℃。
不同样品性质和分析需求可能需要不同的柱温设置。
5.柱平衡：新购买的HILIC柱在使用前需要进行柱平衡，这可以提供更稳定的保留时间和重复性。
常见的柱平衡方法是使用几个体积的流动相进行洗脱，直到保留时间稳定。
6.注样量控制：合适的注样量可以确保信号的线性范围和峰形状的良好。
通常推荐的注样量为柱的最大负载能力的5-10倍。
如果注样量过多，可能会导致峰形变宽或峰形不对称。
7.柱清洗和保养：使用HILIC柱后，及时进行柱的清洗和保养是重要的。
一般来说，可以使用合适的洗脱剂进行柱的冲洗，以去除残留的样品和杂质。
柱的保养包括存放在干燥、封闭的环境中，避免与相干混。
总而言之，HILIC色谱柱的使用需要注意合适的样品准备、流动相选择、pH控制、柱温控制、柱平衡、注样量控制以及柱的清洗和保养。
只有在正确的操作下，才能获得准确、可靠、重复性好的分析结果。
agilent hilic色谱柱分离糖
近年来，随着人们对健康和营养的关注不断增加，糖类成为了备受关注的食品成分。
糖在食品中的含量及种类多样，对于研究和分析其中的糖类成分，色谱技术成为了一种重要的手段。
在色谱分析中，Agilent HILIC色谱柱以其优秀的分离效果和稳定性备受研究人员的青睐。
我们需要了解HILIC色谱技术的基本原理。
HILIC色谱是一种亲水性相逆向色谱技术，其名字HILIC即Hydrophilic Interaction Liquid Chromatography的缩写。
相比传统的反相色谱，HILIC色谱是在亲水性固定相的作用下，以水相为流动相，通过调节有机溶剂的含量来实现糖类成分的分离。
这种技术不仅可以有效分离极性化合物，还能够在保持分离效果的对样品进行浓缩。
这使得HILIC色谱在糖类分析中具有独特的优势。
在Agilent HILIC色谱柱中，其采用了高负荷度的亲水性固定相，能够更好地保持极性化合物的保持能力。
这意味着即使在高流速下，也能够保持较好的分离效果。
Agilent HILIC色谱柱还具备较高的稳定性和重现性，这对于糖类分析来说尤为重要。
在糖类分析中，样品中往往含有多种不同种类的糖，需要较高的分离能力和选择性。
Agilent HILIC色谱柱在分离糖类成分时能够较好地满足这一需求。
值得一提的是，在糖类分析中，常常需要对样品进行前处理。
对于一些复杂的食品样品，需要通过样品制备技术来提取和纯化糖类成分。
在这一过程中，Agilent HILIC色谱柱也能够发挥其优势。
由于其较强的浓缩作用和对极性化合物的较好保持能力，Agilent HILIC色谱柱能够更好地保留样品中的糖类成分，并在分离过程中达到更好的分离效果。
在我的个人观点和理解中，Agilent HILIC色谱柱作为一种重要的色谱分析技术，在糖类分析中具有不可替代的地位。
其优秀的分离效果、稳定性和重现性，为研究人员提供了一种可靠的手段，能够更全面、深入地了解食品中的糖类成分及其含量。
HILIC色谱柱介绍
HILIC色谱柱介绍HILIC（Hydrophilic Interaction Liquid Chromatography）是一种基于水性相互作用的色谱技术。
与传统的反相色谱相比，HILIC色谱具有许多独特的优点，在许多研究领域中得到了广泛的应用。
HILIC色谱是一种液相色谱技术，涉及在含水流动相中使用水亲和性固定相材料。
与反相色谱不同，HILIC色谱是在极性流动相中分离极性化合物。
这些化合物通过极性流动相中的水性分区相和水相关的分区系数来进行分离。
相比之下，反相色谱使用非极性流动相进行分离，根据化合物的亲水性来分离化合物。
HILIC色谱具有许多优点。
首先，它适用于分析极性化合物，这些化合物在反相色谱中可能很难分离。
HILIC色谱对于亲水性化合物，如水溶性维生素、氨基酸和糖类化合物的分离具有很高的选择性和灵敏性。
其次，HILIC色谱不需要在样品和固定相之间添加有机溶剂，因此有利于对生物样品进行分析，如血浆、尿液和蛋白质样品。
此外，HILIC色谱还能够分离极性化合物的异构体和同分异构体，有助于解决化合物纯度和杂质分析问题。
HILIC色谱柱的选择是该技术成功应用的关键。
目前市场上有许多不同类型的HILIC色谱柱可供选择。
根据固定相材料的特性，可以将HILIC色谱柱分为两大类：吸附型HILIC色谱柱和离子交换型HILIC色谱柱。
吸附型HILIC色谱柱是通过将水亲和性的高分子有机化合物固定在色谱柱中来实现分离。
这些固定相材料通常是通过化学修饰或共价交联来实现的，以增加固定相的亲水性。
常见的吸附型HILIC色谱柱固定相材料包括亲水性羟乙基磺酸酯、碳水化合物、氨基酸和糖类衍生物等。
这些材料具有良好的亲水性，并且能够在水性条件下提供良好的分离效果。
离子交换型HILIC色谱柱是通过在色谱柱中使用离子交换材料来实现分离的。
这些材料具有固有的离子交换特性，可以在水性条件下提供选择性分离。
离子交换型HILIC色谱柱的固定相材料通常是在无机载体上固定有离子交换基团，如硅胶或硅氧烷。
默克---HILIC柱介绍
affected during eluent optimization.
0
1
2
Retention Time (min)
Injection #1001
Injection #501
BSFBMTPEJTQMBZFE
PDUBOPMXBUFSQBSUJUJPODPFGGJDJFOU
Toluene 甲苯
Hexane 正己烷
2
3
Analyte LogP *
3PCVTU[XJUUFSJPOJDTPSCFOU 强劲的两性离子吸附剂
The ZIC®-HILIC Column is designed to retain and separate all types
通常都很小甚至是负值， normally characterized by a small or negative LogP value*
在反相色谱上保留很弱。 and have poor retention on reversed-phase columns.
The ZIC®-HILIC Column is designed to retain and separate
????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????
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亲水作用色谱（HILIC）是近年来色谱领域研究的热点之一。
本文简介了HILIC的起源、定义、分离特点；比较了HILIC和反相色谱（RPLC）的选择特性，讨论了HILIC与质谱联用技术的特点，并对其使用中的注意事项进行了总结。
1. HILIC的概念
亲水色谱（HILIC）是一种用来改善在反相色谱中保留较差的强极性物质保留行为的色谱技术。
它通过采用强极性固定性，并且结合高比例有机相/低比例水相组成的流动相来实现这一目的。
而这样的流动相组成尤其有利于提高电喷雾离子化质谱（ESI-MS）的灵敏度。
2. HILIC的分离机制
HILIC的分离机理在目前还存在着争议，主要包括以下三个方面：（1）分配机理（2）离子交换（3）偶极-偶极相互作用。
更多的试验现象则表明HILIC的保留机理包含氢键作用、偶极作用和静电作用等多种次级效应，很难将其区分开来。
3.HILIC影响保留的主要因素
普遍认为HILIC保留行为受到多种参数的影响，如固定相的官能团、有机改性剂的含量、流速、柱温、流动相缓冲体系的pH值、缓冲盐的种类和浓度。
影响样品在固定相上的保留行为的最主要因素都是流动相中有机相的比例，例如乙腈的含量的增加会显著增加样品的保留因子。
在HILIC分离模式中，溶剂洗脱能力由弱到强为：四氢呋喃<丙酮<乙腈<异丙醇<乙醇<甲醇<水, 流动相中水是最强的洗脱溶剂。
一般采用乙腈-水体系作为流动相，其中水相的比例为5%-40%以保证其显著的亲水作用。
如图1所示，将流动相中的水相用甲醇、乙醇、异丙醇代替，随着流动相极性的减小，待测物在柱上的保留就会增强。
Figure 1. HILIC retention as a function of polar modifier. 100 mm length ACQUITY UPLC BEH HILIC column. Peaks: 1 = methacrylic acid, 2 = cytosine, 3 = nortriptyline, 4 = nicotinic acid.
4. HILIC与RP-HPLC的比较
传统的反相色谱（RPLC）对强极性和亲水性的小分子物质的保留和分离能力较弱，通常流动相需要采用高比例的水相才能实现其保留，然而高比例的水相会导致一系列问题，比如固
定相的反浸润和ESI-MS灵敏度的下降。
HILIC正好可以解决这些问题，它提供了一种与传统RPLC互补的保留方式，能够使在RPLC 上保留较弱或没有保留的物质在HILIC柱上提供合适的保留，如图2所示：
Figure 2: Chromatograms comparing the retention of allantoin on Atlantis HILIC Silica and Atlantis dC18 columns. (a) Column: 50 mm×4.6 mm, 3-μm dp Atlantis dC18; mobile phase: 10 mM ammonium formate, pH 3; Shows no retention (k =0) of allantoin. (b) Column: 50 mm×4.6 mm, 3-μm dp Atlantis HILIC Silica; mobile phase: 95:5 (v/v) acetonitrile–water containing 10 mM ammonium formate, pH 3; Shows retention (k =1) of allantoin.
另外，HILIC柱上的洗脱顺序与RPLC柱上的正好相反，极性较小的物质先出峰，极性较大的物质后出峰。
如图3所示：
Figure 3. Comparison of ESI+MS response using HILIC and RP conditions. SIR channels of acetylcholine (m/z 146.2) and choline (m/z 103.9); Columns: 100 mm×2.1 mm, 1.7μm (A) ACQUITY UPLC BEH C18 (B) ACQUITY UPLC BEH HILIC. Peaks: 1 = acetylcholine,。