木本植物组织培养及其现状
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MgSO4·7 H2O KH2PO4 NaH2PO4·H2O Na2HPO4 Na2EDTA FeSO4·7 H2O H3BO3 MnSO4·H2O ZnSO4·7 H2O KI
Na2MoO4·2 H2O CuSO4·5 H2O CoCl2·6H2O Myo-Inositol
Thiamine.HCl
茎段培养成苗示意图
茎段培养成苗示意图
组织培养 分生组织培养 薄壁组织培养 输导组织培养
胡萝卜形成层(分生组织)培养示意图
胚胎培养 胚乳培养 原胚培养 胚珠培养
种胚培养
Βιβλιοθήκη Baidu培养
败育
细胞培养
看
平
悬
微
护
板
浮
室
培
培
培
培
养
养
养
养
原生质 培养
非融合 培养
融合 培养
四、植物组织培养的特点
（Characteristics of Plant Tissue Culture Techniques）
木本植物组织培养及其现状
2.根据外植体分类
原
植器 组胚 细生
株官 织培 胞质
培培 培养 培体
养养 养
养培
养
木本植物组织培养及其现状
植株培养
扦 插 苗 培 养
种 子 苗 培 养
器官培养
根系培养 茎段培养 叶片培养 花器培养 果实培养 种子培养
人参根消毒、接种操作程序图
菊花茎尖消毒、接种操作程序图
木本植物组织培养及其现状
WOODY PLANTS TISSUE CULTURE AND ITS
RECENTLY SITUATION
木本植物组织培养及其现状
一、植物组织培养的意义
1、植物组织培养概念（concept）
1、狭义概念： 指对植物体组织或由植物器官培养产生的愈
伤组织进行培养直至生成完整植株。 2、广义概念：
1、培养条件可以人为加以控制
木本植物组织培养及其现状
2、繁殖系数大，培养周期短
3、管理方便，有
利于实现工厂化生 产和自动化控制
五、组织培养发展历史
（Historical Perspectives）
1902年Haberlandt首次进行离体细胞实验，发 表了“植物离体细胞培养实验”报告； 1934年White由番茄根建立了第一个活跃生长的 无性系，第一次器官培养； 1939年White、Gautheret和Nobecourt愈伤组织 培养实验成功，第一次进行细胞/组织培养； 1957年Skoog和Miller提出了有关植物激素控制 器官形成的概念，通过改变培养基中生长素和 细胞分裂素这两类生长调节物质的相对浓度可 以控制器官的分化；
木本植物组织培养及其现状
1958年Steward在胡萝卜愈伤组织培养中形成了 体细胞胚； 1960年Morel提出了一个离体无性繁殖兰花的方 法；繁殖系数高，迅速建立起“兰花工业”； 1962年Murashige和Skoog为烟草组织培养建立 了培养基，此培养基被证明适合大部分植物的 组织培养，至今仍被广泛使用。 自60年代以来，组织培养技术得到了飞速发展 ，特别是进30年来，迄今进行组培的植物已达 3000多种，已从开始时的纯学术性研究，发展 到今天有巨大应用价值的技术。
六、组织培养步骤
木本植物组织培养及其现状
六、组织培养步骤
木本植物组织培养及其现状
六、组织培养步骤
木本植物组织培养及其现状
转移到温室
大田移栽和生长
七、影响木本植物器官发生的主要因子 1、基因型与外植体
木本植物组织培养及其现状
2、培养基与激素
Compound
KNO3 NH4NO3 CaCl2·2H2O Ca(NO3)2·4 H2O (NH4)2SO4 K3SO4 KCl
Nicotinic acid
Pyridoxine. HCl
Glycine
Glutamine
GD
1000 -
150 -
200 -
300 250
90 30 37.3 27.8 3.0 10.0 3.0 0.75 0.25 0,25 0.25 10.0 1.0 0.1 0.1 2.0 2.0
MS
1900 1650 440
WPM
400 96 556
990
370 170
37.3 27.8 6.2 22.3 8.6 0.25 0.25 100.0 1.0 0.5 0.5 2.0 2.0
• 1958年Steward等人在以胡萝卜根组织为外植 体的组织培养实验中，证实了细胞的全能性。
木本植物组织培养及其现状
2.相关名词
分化〔differentiation〕：
细胞在分裂过程中发生结构和功能上的改变， 从而在个体发育中形成各类组织和器官完成整 个生活周期。
脱分化〔dedifferentiation〕:
无菌操作分离植物体一部分(即外植体 )接 种到培养基，在人工条件下培养直至生成完整 植株。
生物技术中的一个基本技术
木本植物组织培养及其现状
1、植物组织培养概念
愈伤组织〔callus〕:在离体培养过程中形成的 具有分生能力的一团不规则细胞，多在植物体 切面上产生。
木本植物组织培养及其现状
1、植物组织培养概念
370 170 37.3 27.8 6.2 22.3 8.6 0.75 0.25 0.25 0.02 100.0 1.0 0.5 0.5 2.0 2.0
BTM
190 165 44 640 240 860
370 170
37.3 27.8 6.2 22.3 8.6 0.15 0.25 0.25 0.02 100.0 1.0 0.5 0.5 2.0 2.0
外植体〔explant〕：从植物体上分离下来
的用于离体培养的材料。
分生组织
组织
成熟组织
花梗
胚乳
种子 胚 子叶
胚珠
胚轴
原生质体
花粉
子房 花器 花托
花药 苞片
果实
根
茎 芽 叶柄 叶 木本植物组织培养及其现状
幼苗
二、植物组织培养的理论基础
1.细胞全能性（totipotency）理论：
植物每一个具有完整细胞核的体细胞，都 含有植物体的全部遗传信息，在适当条件 下，具有发育成完整植株的潜在能力。
已分化好的细胞在人工诱导条件下，恢复分生 能力，回复到分生组织状态的过程。
再分化〔redifferentiation〕:
脱分化后具有分生能力的细胞再经过与原来相
同的分化过程，重新形成各类组织和器官的过
程。
木本植物组织培养及其现状
三、植物组织培养的类型
1.根据培养基分类 培养基
固体培养
液体培养
静止培养 旋转培养 纸桥培养 振荡培养
Na2MoO4·2 H2O CuSO4·5 H2O CoCl2·6H2O Myo-Inositol
Thiamine.HCl
茎段培养成苗示意图
茎段培养成苗示意图
组织培养 分生组织培养 薄壁组织培养 输导组织培养
胡萝卜形成层(分生组织)培养示意图
胚胎培养 胚乳培养 原胚培养 胚珠培养
种胚培养
Βιβλιοθήκη Baidu培养
败育
细胞培养
看
平
悬
微
护
板
浮
室
培
培
培
培
养
养
养
养
原生质 培养
非融合 培养
融合 培养
四、植物组织培养的特点
（Characteristics of Plant Tissue Culture Techniques）
木本植物组织培养及其现状
2.根据外植体分类
原
植器 组胚 细生
株官 织培 胞质
培培 培养 培体
养养 养
养培
养
木本植物组织培养及其现状
植株培养
扦 插 苗 培 养
种 子 苗 培 养
器官培养
根系培养 茎段培养 叶片培养 花器培养 果实培养 种子培养
人参根消毒、接种操作程序图
菊花茎尖消毒、接种操作程序图
木本植物组织培养及其现状
WOODY PLANTS TISSUE CULTURE AND ITS
RECENTLY SITUATION
木本植物组织培养及其现状
一、植物组织培养的意义
1、植物组织培养概念（concept）
1、狭义概念： 指对植物体组织或由植物器官培养产生的愈
伤组织进行培养直至生成完整植株。 2、广义概念：
1、培养条件可以人为加以控制
木本植物组织培养及其现状
2、繁殖系数大，培养周期短
3、管理方便，有
利于实现工厂化生 产和自动化控制
五、组织培养发展历史
（Historical Perspectives）
1902年Haberlandt首次进行离体细胞实验，发 表了“植物离体细胞培养实验”报告； 1934年White由番茄根建立了第一个活跃生长的 无性系，第一次器官培养； 1939年White、Gautheret和Nobecourt愈伤组织 培养实验成功，第一次进行细胞/组织培养； 1957年Skoog和Miller提出了有关植物激素控制 器官形成的概念，通过改变培养基中生长素和 细胞分裂素这两类生长调节物质的相对浓度可 以控制器官的分化；
木本植物组织培养及其现状
1958年Steward在胡萝卜愈伤组织培养中形成了 体细胞胚； 1960年Morel提出了一个离体无性繁殖兰花的方 法；繁殖系数高，迅速建立起“兰花工业”； 1962年Murashige和Skoog为烟草组织培养建立 了培养基，此培养基被证明适合大部分植物的 组织培养，至今仍被广泛使用。 自60年代以来，组织培养技术得到了飞速发展 ，特别是进30年来，迄今进行组培的植物已达 3000多种，已从开始时的纯学术性研究，发展 到今天有巨大应用价值的技术。
六、组织培养步骤
木本植物组织培养及其现状
六、组织培养步骤
木本植物组织培养及其现状
六、组织培养步骤
木本植物组织培养及其现状
转移到温室
大田移栽和生长
七、影响木本植物器官发生的主要因子 1、基因型与外植体
木本植物组织培养及其现状
2、培养基与激素
Compound
KNO3 NH4NO3 CaCl2·2H2O Ca(NO3)2·4 H2O (NH4)2SO4 K3SO4 KCl
Nicotinic acid
Pyridoxine. HCl
Glycine
Glutamine
GD
1000 -
150 -
200 -
300 250
90 30 37.3 27.8 3.0 10.0 3.0 0.75 0.25 0,25 0.25 10.0 1.0 0.1 0.1 2.0 2.0
MS
1900 1650 440
WPM
400 96 556
990
370 170
37.3 27.8 6.2 22.3 8.6 0.25 0.25 100.0 1.0 0.5 0.5 2.0 2.0
• 1958年Steward等人在以胡萝卜根组织为外植 体的组织培养实验中，证实了细胞的全能性。
木本植物组织培养及其现状
2.相关名词
分化〔differentiation〕：
细胞在分裂过程中发生结构和功能上的改变， 从而在个体发育中形成各类组织和器官完成整 个生活周期。
脱分化〔dedifferentiation〕:
无菌操作分离植物体一部分(即外植体 )接 种到培养基，在人工条件下培养直至生成完整 植株。
生物技术中的一个基本技术
木本植物组织培养及其现状
1、植物组织培养概念
愈伤组织〔callus〕:在离体培养过程中形成的 具有分生能力的一团不规则细胞，多在植物体 切面上产生。
木本植物组织培养及其现状
1、植物组织培养概念
370 170 37.3 27.8 6.2 22.3 8.6 0.75 0.25 0.25 0.02 100.0 1.0 0.5 0.5 2.0 2.0
BTM
190 165 44 640 240 860
370 170
37.3 27.8 6.2 22.3 8.6 0.15 0.25 0.25 0.02 100.0 1.0 0.5 0.5 2.0 2.0
外植体〔explant〕：从植物体上分离下来
的用于离体培养的材料。
分生组织
组织
成熟组织
花梗
胚乳
种子 胚 子叶
胚珠
胚轴
原生质体
花粉
子房 花器 花托
花药 苞片
果实
根
茎 芽 叶柄 叶 木本植物组织培养及其现状
幼苗
二、植物组织培养的理论基础
1.细胞全能性（totipotency）理论：
植物每一个具有完整细胞核的体细胞，都 含有植物体的全部遗传信息，在适当条件 下，具有发育成完整植株的潜在能力。
已分化好的细胞在人工诱导条件下，恢复分生 能力，回复到分生组织状态的过程。
再分化〔redifferentiation〕:
脱分化后具有分生能力的细胞再经过与原来相
同的分化过程，重新形成各类组织和器官的过
程。
木本植物组织培养及其现状
三、植物组织培养的类型
1.根据培养基分类 培养基
固体培养
液体培养
静止培养 旋转培养 纸桥培养 振荡培养