4300紫外可见分光光度计检测血中碳氧血红蛋白含量快速诊断一氧化碳中毒

4300紫外可见分光光度计检测血中碳氧血红蛋白含量快速诊断

一氧化碳中毒

摘要：目的建立4300紫外可见分光光度计捡剥血中碳氧血红蛋白含量方

法快速诊断一氧化碳(CO)中毒，方法检血用0 1％Na2CO3稀释．加入连二亚硫酸钠．4300紫外可见分光光度计测定500 nm～600nm吸收光谱和538nm和555nm 处吸光度值，确定碳氧血红蛋白，计算碳氧血红蛋白含量。

结果氧和血红蛋白的最大吸收波长为555 nm，碳氧血红蛋白的最大吸收波长为538 nm和555 nm。4300紫外可见分光光度计检测血中碳氧血红蛋白含量(10％～90％)回收率平均为95％一l10％．标准差为2.1％-8. 0％，最低检出农度为2％：80例可疑CO中毒者中63例血中检出碳氧血红蛋白，平均含量为35％。

168倒可疑CO中毒死亡者中124例血中检出碳氧血红蛋白。

结论4300紫外可见分光光度计检测血中碳氧血红蛋白，具有快速、准确、操作简便、结果可靠的特点，可应用于CO中毒的诊断和CO中毒死亡的法医学鉴定。关键词：一氧化碳中毒；碳氧血红蛋白；4300紫外可见分光光度计

1资料与方法

1.1药品和试剂：连二亚硫酸钠、肝索钠均为国产分析纯。

1.2主要仪器：4300紫外可见分光光度计，扫描渡长范围(200--700)nm。

1.3标本采集：可疑CO中毒病人，肘静脉采血(5～10)mL，加入肝素化试管中，试管上部不留空问，密封，立即送检。

1.4碳氧血红蛋白定性定量检验：检血40uL，加入1 0mL0 1％Na2CO3溶液，4300紫外分光光度计测定(500--600)nm吸收光谱及538nm和555nm处吸光度值(和

A555)。根据吸收光谱形状和最大吸收波长确定有无碳氧血红蛋白，按公式COHb％=A538÷A555÷0 458 -1.692计算血中碳氧血红蛋白含量。

2结果

2.1 碳氧血红蛋白光谱扫描图

取新鲜肝素钠抗凝人血100mL_通人CO饱和(2-3)h，充分饱和，使碳氧血红蛋白含量达100％。配制不同碳氧血红蛋白含量的系列血液样品，按上述方法操作和扣描，得到不同碳氧血红蛋白含量血液的光谱扫描。

2.2 血中碳氧血红蛋白含量检测回收率

用空白血和CO充分饱和血(碳氧血红蛋白含量为100％)配制不同碳氧血红蛋白含量(10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％)的系列血液样品，每个浓度血样按前述方法取5份检测氧血红蛋白含量。详见表1

2.3 中毒病人检测

选择2005年1月1日-2005年12月30日山西医科大学第一医院急诊科、山西医科大学第二医院急诊科、山西省人民医院急诊科所送可疑CO中毒病人80例，其血中碳氧血红蛋白含量检测结果。共检验80例，枪出COHb者63例，未榆出COHb者17例，COHb含量35％，检出含量25％～65％。

2 4 CO中毒死亡者检测

2005年1月1日-2005年12月30日山西省范围内部分可疑CO中毒死亡案例检测结果。共检验168例，未检出COHb者44例(26.2％)，检出COHb者124例(73.8％)，COHb含量9.0％-70.6％，其中<10％例(0.08％)，10％～20％6例(4.80％)，20％～30％8例(6.45％)，30％～40％i例(0.08％)．40％～50％9例(7.25％)，(50％～60％)，51例(41 1％)，61％～70％35例(28 20％)，>70％13例(10.50％)。

3讨论

3.1血中碳氧血红蛋白检测

建立血中碳氧血红蛋白的4300紫外可见分光光度计检测方法，光谱扫描和吸光度值可同时进行，整个检验可在10 min内完成。与化学法和氯化钯试验法相比，具有操作简便、耗时短、成本低等优点，检测灵敏度、回收率均达到生物检验内毒物检测的要求，可应用于CO中毒的诊断和CO中毒的法医学鉴定。

3.2中毒病人检测

临床CO中毒症状和体征比较明显，病史结台临床症状诊断准确度较高。本研究巾临床诊断80例可疑cO中毒病人55例血中检出COHb。但中毒程度的判

定，尤其怀疑合并用药或病史不清伴有昏迷时COHb定量检测很有必要。所检血中COHb含量最高的昏迷病人血中COHb达65％，10 mm内检验完毕，依照检验结果很快进钉高压氧舱治疗，24 h后病人意识恢复，各种生命体征恢复正常。

3.3 CO中毒死亡案例检测

一般认为，CO中毒死亡者血中碳氧血红蛋白含量多达60％～80％。2005年山西省部分CO中毒死亡案例死者血中COHb检出情况显示，26.2％中未检出COHb，73．.8％检出COHb。后者(124例)中COHb含量大于60％者占38．72％，50％～60％者占4l.1％，40％～50％者占7.25％，小于40％者占12 9％，而在大于50％的99例血中均未检出其他毒物，故认为血中碳氧血红蛋白含量大于50％，排除其他毒物即可诊断为CO中毒死亡。

参考/，

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