熊果酸提取工艺的研究进展

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可以减少放、化疗之后对造血系统的不良损害。其 防癌抗癌作用已引起重视。可以预见，熊果酸可能 会成为很有前途的抗肿瘤新药之一。 １．２抗氧化作用 熊果酸是一个较强的抗氧化剂，抗氧化作用对 人体抗衰老和皮肤祛斑、祛色素ｊ美容都有积极作 用，可应用于美容护肤产品。熊果酸能明显地捕获 ０：一，在肝微粒体和Ｐ４５０单胺氧化酶系中对脂质过 氧化均显示较强的抑制作用。 １．３对肝炎的作用 熊果酸对急性实验性肝损伤有明显的保护作 用，临床表现为血清谷丙转氨酶含量下降、肝细胞变 性、坏死明显减轻，可迅速恢复肝功能的作用，具有 见效快、疗程短、效果稳定的特点。经临床验证，熊 果酸可有效治疗病毒性肝炎，是抗病毒性肝炎药的 主要活性成分。熊果酸在制备治疗病毒性肝炎药物 中不论单独使用，还足与其它药物配合使用，只要制 备成药品或保健药品均具有显著治疗病毒性肝炎的 作用。熊筱娟帕。等研究了乌索酸抗急性肝损伤的 作用，结果发现急性肝损伤模型组与正常对照组比 较，各项指标差异均有显著性（Ｐ＜０．０１）；乌索酸组 与模型组比较，血清ＡＬＴ、ＡＳＴ、ＭＤＡ明显降低（Ｐ＜ ０．０５），光镜下肝细胞脂肪变性、水样变性明显减 轻；表明乌索酸对Ｄ—ＧａＩＮ诱导的急性肝细胞损伤 的保护作用与其阻止肝细胞坏死，抗氧化作用有关。 １．４抗菌抗病毒作用 熊果酸能导致细胞生存能力下降，能抑制Ｇ＋ 和Ｇ一菌以及抑制真菌生长。对杀灭和抑制变形链 球菌组及牙周病原菌具有明显的效果。熊果酸能抑 制ＨＩＶ—ｌ蛋白酶活性，增强免疫功能，发挥抗ＨＩＶ 的作用。 此外，熊果酸还具有抗疟作用，能使疟原虫的增 殖明显减少；降血压、抗高血脂、促利尿和降血糖活
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夹带剂９５％酒精用量为物料干质量的３０％，产品 得率４．１７％。结果表明，与传统法相比，该法具有 操作简便快速、溶剂用量少，提取时间短，有效成分 提取率高，测定时无杂质干扰等优点。 与传统的提取分离法相比较，ＳＦＥ最大的优点 是可在近常温条件下提取分离不同极性、不同沸点 的化合物，几乎保留产品中全部有效成分。无有机 溶剂残留；产品纯度高，收率高，操作简单，节能；通 过改变萃取压力、温度或添加适当的夹带剂，可改变 制取的溶解性和选择性。缺点是操作压力高、能量 消耗大、设备放大时制造成本高。不适宜提取成分 不明的混合物和在二氧化碳中溶解度较小的物质。 工业化超临界二氧化碳萃取设备比较大，管路较长， 因此在萃取出的产物（特别是粘性较大的产物）粘 到管壁上而分离不出，如何分离是今后工作中要考 虑的问题，尽管用超临界二氧化碳萃取山朵萸中熊 果酸的工业化还有许多工作要做，但随着我国传统 中药走出国门，中药生产实现现代化，超临界ＣＯ： 萃取作为一种很有开发价值的“绿色”萃取方法，将 会达到更广泛、更普及的工业化应用。 ２．４超声波提取法 超声波在媒质中传播可使媒质质点在其传播空 间内进入振动状态强化溶质扩散、传质，即超声波机 械机制。超声波在媒质质点传播过程中其能量不断 被媒质质点吸收变成热能，导致媒质质点温度升高， 即超声波热学机制。同时当大能量的超声波作用于 提取介质，在振动处于稀疏状态时，介质被撕裂成许 多小空穴，这些小空穴瞬时即闭合，闭合时产生高达 几干大气压的瞬时压力，即空化现象。空化中产生
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ｈ～，产品的出膏率为３１．５８％，萃取物中熊果酸的 含量为６１．９３％。该法与传统方法相比，具有操作 简便快速，溶剂用量少，有效成分提取率高等优点。 张晓明【１引等研究了超ｌ临界ｃｏ：萃取（ＳＣＤＥ）冬 凌革中熊果酸的工艺方法。确定了１ ｋｇ冬凌草ＳＣ－ ＤＥ的最佳工艺条件为：萃取压力２０ＭＰａ、粒度４０ 目、温度４０℃、ＣＯ：流量２０ Ｌ・ｈ～、萃取时间３
收稿Ｒ期：２００８—１ｌ一１１ 作者简介：于明明，男（１９８６一）大学本科生 基金来源：陕西理上学院大学生科研基金项目（ＳＬＧ２００７Ｈ００９６）
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于明明等：熊果酸提取工艺的研究进展
性等作用；对精子具有一定的毒性，可作为避孕药。 在抗癌保健食品、饮料和护发素、头发生长剂等方面 也有一定的应用。可以预见，熊果酸很有希望成为 有前途的抗肿瘤、抗病毒性肝炎药物，亦将广泛应用 于保健和美容护肤产品，熊果酸开发、利用的前景十 分广阔。所以，近年来有关熊果酸的提取分离研究 引起了许多研究者的注意，业已成为天然产物提取 领域的研究热点之一。 ２提取分离和含量测定 在化学结构上熊果酸属于ａ一香树脂醇型五环 三萜类。由于可溶于甲醇、乙醇、乙醚，所以目前的 提取溶剂多选择醇、醚类。熊果酸提取方法有多种， 如回流提取法、渗漉法、超声波提取法、超临界流体 萃取法（ＳＦＥ）等。
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枇杷叶原药材中得到０．８５ ｇ熊果酸结晶，所得熊果 酸纯度为９４．ｏ％。该方法简便、经济、安全、数据可 靠。 超声波强化提取能利用超声波振动的能量强化 扩散过程，使溶剂容易浸入固体，固体溶质容易从固 体内部扩散到同液界面，从而加速了萃取过程，且超 声波具有絮凝作用，使浸出液容易澄清过滤。缺点 是受超声波功率限制，大规模生产的经济性不好，大 功率超声波的安全性也有待验证。
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进行了优化。结果表明，各因素对熊果酸提取效果 的影响程度从高到低分别是：提取时间＞提取次数 ＞乙醇体积分数＞液固比；确定的最适提取条件为： ９５％乙醇溶液在回流温度下提取两次，每次１．５ 液固比为８：１。 可以看出，回流提取法近年来的研究报道主要 集中在对不同原料工艺条件的改进，以期拓宽熊果 酸的提取原料，所有这些都极大的推动了回流提取 法的快速发展。但这种提取方法需消耗大量的溶 剂，且提取所需时间较长，料液长时间受热，很容易 使其中的有效成分发生损失。如何有效的解决好这 一问题，以减少提取过程溶剂的消耗及其中有效成 分的损失，将是今后科研工作者对回流提取法亟待 解决的问题。 ２．２渗漉法 渗漉法是将中草药粉末装在渗漉器中，不断添 加新溶剂，使其渗透过药材，自上而下从渗滚器下部 流出浸出液的一种浸出方法。当溶剂渗进药粉溶出 成分比重加大而向下移动时，上层的溶液或稀浸液 便置换其位置，造成良好的浓度差，使扩散能较好地 进行，故浸出效果优于浸渍法。但应控制流速，在渗 流过程中随时自药面上补充新溶剂，使药材中有效 成分充分浸出为止。或当渗流液收集的稀渗色极浅 或渗流液的体积相当于原药材重的１０倍时，便可认 为基本上已提取完全。在大量生产中常将滚液作为 另一批新原料的溶剂之用。 周韵丽…ｏ等采用渗流法浸出长春花中的熊果 酸，长春花令草干料粉碎后，用少量水拌和后投入装 好苯的渗流桶中进行渗流浸出，苯渗漉液中加入 ６％酒石酸作液一液逆相萃取，将长春碱及长春新碱 从有机相转移到水相，而熊果酸依然留在苯渗流液 中。该方法苯消耗量较大，熊果酸中残留的苯对成 品质量造成影响，且在分离过程中易造成苯的泄漏， 影响操作环境。 渗漉法在摩温的条件下就可进行，操作方法简 易，没有相变发生，因此比较节能。但完成一次操作 所需的时间很长，而其对药材的粒度要求较高，有污 染的存在。所以如何处理药材及解决污染的问题是 今后研究的重点。 ２．３超临界萃取法 超Ｉ临界流体萃取法（ＳＦＥ）的原理是以～种超临 界流体在高于临界温度和压力下，从目标物中萃取 有效成分，当恢复到常压常温时，溶解在流体中成分 立即以溶于吸收液的液体状态与气态流体分开。萃
熊果酸（Ｕｒｓｏｌｉｃ ａｃｉｄ），又名乌苏酸、乌索酸、ａ一 香树脂醇，是一种弱酸性五环三萜类化合物。在自 然界分布很广，是多种天然产物的功能成分。熊果 酸纯品为白色针状结晶（乙醇中结晶），味苦，其基 本骨架是多氧蒎的五环母核，分子式为Ｃ，。Ｈ。。０，，分 子量为：４５６．６８。熔点２８５～２８７℃，不溶于水和石 油醚，易溶于二氧六环、吡啶、乙醇和甲醇¨以Ｊ。熊 果酸在自然界分布很广，如山茱萸、乌梅、陆英、芦 笋、野蔷薇果、车前草、女贞子等植物中均含有。熊 果酸具有多种生物活性，日本等国家已经将其作为 天然抗氧化剂应用于食品中。本文简要介绍了熊果 酸的生物活性及其应用，综述了熊果酸提取工艺的 研究进展，探讨了其今后的发展方向。
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谢艳¨叫等通过单因素实验，以提取的选择性和 提取率为指标，考察了白花蛇舌草中熊果酸的提取 过程的几个影响因素，并通过正交实验，对过程参数
取过程一般分为流体压缩一萃取一减压一分离四个
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氦基酸和牛物资源
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阶段。 如刘艳辉¨２１用正交实验法优化采用超临界 ＣＯ：技术萃取车前草中熊果酸的工艺条件。在单因 素实验基础上，采取ＩＪｏ（３３）探讨萃取压力、萃取温 度、ＣＯ，流量对萃取车前草熊果酸的得率的影响情 况，确定了超临界ＣＯ：萃取车前草中熊果酸的适宜 条件。超临界萃取最优条件为：萃取压力３５Ｍｐａ，萃 取温度为４０℃，选择无水乙醇为夹带剂，夹带剂质 量分数为２０％，萃取时间２・ｈ，ＣＯ：流量为２０
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的极大压力造成被破碎物细胞壁及整个生物体破 裂，而且整个破裂过程在瞬间完成，同时超声波产生 的振动作用加强了胞内物质的释放、扩散及溶解。 超声波破碎过程是一个物理过程，浸提过程中无化 学反应，被浸提的生物活性物质在短时间内保持不 变，生物活性不减，同时提高了破碎速度，缩短了破 碎时间，可极大地提高提取效率。 如相延英．１４１等研究提取和分离枇杷叶中熊果 酸的方法：用９５％乙醇超声波提取３次，每次３０ ｍｉｎ，回收乙醇，浸膏分别用石油醚、１％氢氧化钠溶 液和水洗至洗出液无色，再用无水乙醇加热溶解，加 活性炭回流脱色１５ ｍｉｎ，滤过。用热乙醇反复洗涤 残渣，放冷，静置，得白色片状结晶，用热甲醇重结 晶，高效液相色谱法检活性及其应用 熊果酸资源广，毒性低，具有广泛的生物活性，
尤其在抗癌、抗肿瘤、抗氧化、抗炎、保肝、降血脂方 面的作用显著，值得重视。近年来发现，熊果酸不仅 对多种致癌、促癌物有抵抗作用，而且能抑制多种恶 性肿瘤细胞的生长。同时，熊果酸及其衍生物还对 病毒具有抑制活性。因此，熊果酸的药理学活性越 来越引起药物专家们的关注。近年来随着对熊果酸 研究的不断深入，使得其在临床中开始得到了广泛 的应用¨”１。 １．１抗肿瘤作用 近年来发现，熊果酸具有突出的抗肿瘤作用，其 抗肿瘤谱广，对肿瘤形成生长各阶段具有预防和抑 制作用。它对多种致癌、促癌物有抵抗作用，从而抑 制癌变的形成；对多种恶性肿瘤细胞有明显细胞毒 作用，且对多种肿瘤细胞体内、外均有抑制作用，并