日立L-8900全自动氨基酸分析仪简易标准操作规程
日立L-8900氨基酸自动分析仪
离子交换树脂
专用氨基酸分析仪的色谱柱主要是以磺酸型强酸性阳离子交换 树脂为柱填料。强酸型阳离子交换树脂，它是由苯乙烯和二乙 烯苯聚合而成的。该树脂是由苯乙烯和二乙烯基本聚合后磺化 而成，球状树脂的粒度一般在5-10μm之间，交联度多为8%12%。
交联度大，树脂的网状结构紧密，孔隙度小，对外界离子进入 树脂有阻碍作用，较大的离子根本不能进入树脂内部，这样就 可以提高树脂对离子的选择性。交联度大的适合用于分子量较 小的氨基酸分离；交联度小，树脂结构疏松，孔隙度大，适合 用于蛋白质、肽类的分离。
氨基酸在溶液中受溶液 pH 的影响存在着下列平衡
等电点（pI）：在某一 pH 的溶液中，氨基酸解离成阳离子和阴 离子的趋势或程度相等，成为兼性离子，呈电中性，此时溶液 的pH成为该氨基酸的等电点。
不同氨基酸等电点
丙氨酸 Ala （A）6.02 天冬酰胺 Asn （N）5.41 半胱酰酸 Cys （C）5.02 谷氨酰胺 Gln （O）5.65 组氨酸 His （H）7.58 赖氨酸 Lys （K）9.74 苯丙氨酸 Phe （F）5.48 丝氨酸 Ser（S）5.68 色氨酸 Trp （W）5.88 缬氨酸 Val （V）5.97
缺点：水解时间长、而且不易水解完全。 提示：作为氨基酸全分析不可采用此法。 目前日本、欧洲和我国植物蛋白水解生产上采用的工艺均为酸水解法
4. 微波消解法：微波消解技术，近年来在化学领域尤其是在氨基酸 样品前处理方面显示出了良好的应用前景。
微波水解条件：体积30毫升左右高强度、耐腐蚀和透射微波的容器， 水解温度150-160℃，水解时间30分钟。
1.酸水解法：标准水解法，是普遍采用的水解方法，在水解过程中采 用6N 的盐酸作为水解剂，此方法的特点是水解彻底，水解后的氨基 酸全部以L-型形式存在，但色氨酸遭破坏。（6N HCL 、110℃真空 水解24小时）
日立氨基酸分析仪操作事项
日立氨基酸分析仪操作步骤 (1)日立氨基酸分析仪简介 (3)日立氨基酸分析仪操作注意事项 (4)日立氨基酸分析仪操作步骤1、开机：计算机开机及仪器开机。
2、创建新项目：打开软件→“项目”→“创建新项目”→填名称和路径，两个“□”打钩，点“启用程序”→“确定”→将D盘Method文件夹的6个方法复制到F盘Method文件夹。
3、泵的排气：“仪器”→“启动”和/或“离线启动”→关掉弹出窗口→点左下角“控制”→“仪器状态”→“Connet”→待左上角灰色框显示“Idle”，点“OPTION”→点Pump 1的“Purge”→ B1：B2：B3：B4 = 25：25：25：25 →“Start”→手动打开泵1开关（逆时针旋转90°）→“确定”→点Pump 2的“Purge”→R1：R2：R3 = 34：33：33 →“Start”→手动打开泵2开关→“确定”→待泵2的废液管液体无气泡，点Pump 2的“Purge”→拧紧泵2开关→点Pump 1的“Purge”→B5：B6 = 50：50 →“Start”→“确定”→待泵1的废液管液体无气泡，点Pump 1的“Purge”→拧紧泵1开关。
4、进样器的排气：“L 8900”→“Autosample”→“Sampler Wash”→“OK”→重复排气，直到进样器无气泡。
5、创建序列：“帮助”→“仪器向导”→“创建序列”→选方法“PH 4.6×60-2622”→“打开”→“下一步”→“样品”命名，加后缀→“数据文件”命名，选“样品ID”，加后缀“日期与时间”→填样品数（样品数= n+3，n为样品个数）→重复次数“1”→“下一步”→输入第一个样品瓶的编号→进样量“20”μL →“下一步”→“下一步”→“完成”→更改第一针方法为“PH 4.6×60-2622（Stand-by）”→更改第二针方法为“PH 4.6×60-2622（RG）”→更改样品瓶序号，与样品盘中一一对应→“文件”—“保存”—“序列”→命名文件夹→点“序列运行”。
L8900 AA analyzer 样品前处理简要步骤
日立L-8900全自动氨基酸分析仪样品前处理步骤（内部用）一、饲料样本中水解蛋白中氨基酸含量测定步骤（参考GB/T 18246-2000）1. 样品制备取具代表性的饲料样品，用四分法缩减分取25g 左右，粉碎并过。
.25m m孔径(60目)筛，充分混匀后装入磨口瓶中备用。
对于粗脂肪含量大于、等于5%的样品，需将脱脂后的样品风干、混匀，装入密闭容器中备用。
而对粗脂肪小于5%的样品，则可直接秤用未脱脂样品。
2. 氨基酸水解液制备（酸水解）称取含蛋白7.5 -25 mg的试样(约50~100 mg,准确至1 mg) 于20 mL水解管，加10.00 mL 酸解剂（6 mol/L HCl)，置液氮或干冰(丙酮)中冷冻。
然后，抽真空至7 Pa(-<5X1 0-'mm汞柱)后封口或充氮气封口。
将水解管放在110℃恒温干燥箱中，水解22~24 h。
冷却，混匀，开管，用水定容至50~100mL（保证上机液中总氨基酸浓度在50-250 nmol/mL），过滤，用移液管吸取1.0 mL 于真空干燥箱60℃蒸干，必要时，加少许水，重复蒸干1-2次（或50℃氮吹仪吹干，加少量水重复吹干2次）。
加入2 mL 0.02 mol/L HCl溶液，充分溶解，0.22 um滤膜过滤，上机。
二、血浆中游离氨基酸测定1. 样品制备采集约5 mL抗凝全血，4000 × rpm离心，获得血浆，检测前-20℃保存。
2. 分离游离氨基酸取血浆1.0 mL，加入1.0 mL 8%磺基水杨酸（8g磺基水杨酸溶于92mL的超纯水），4℃冰箱过夜，14000 × rpm 离心10 min，上清液过0.22 um滤膜，取约1 mL上机测定。
日立L-8900全自动氨基酸分析仪简易标准操作规程
日立L-8900全自动氨基酸分析仪标准操作规程一. 目的为规范日立L-8900全自动氨基酸分析仪的基本操作、维护保养、异常处理程序，防止人为操作失误，确保氨基酸分析仪正常运转，特制定本程序。
二.适用范围本程序适用于日立L-8900全自动氨基酸分析仪。
三．责任1. 本程序的实施者为氨基酸分析仪操作者，各实验室负责人对本程序的实施情况进行监督。
2. 日常运行及维护、定期维护、定期点检及保养由氨基酸分析仪操作者负责。
四. 内容1．联机（1）打开电脑。
（2）打开L-8900主机电源。
（3）双击桌面的图标，进入1-1画面，双击图标，进入程序。
1-1（4）在菜单栏中依次点击和，出现1-2画面，单击联机。
大约两分钟，初始化完毕。
中Uninitialized变成Idle，图1-2变成了图1-3，各个组件可以进行控制了。
初始化完毕后，分离柱的温度逐渐上升，分离柱的温度会升到50℃。
如果打开反应柱的柱温控制，则温度大约20分钟升到135℃。
1-21-32、手动各组件控制操作（1）泵1和泵2点击，出现2-1的画面。
设置泵1，流量0.1ml/分钟，B6 100%。
点击打开泵1。
泵打开后，泵的背景颜色由灰色变为黄色。
2-1点击，出现2-2的画面，设置泵2，流量0.1ml/分钟，R3 100%。
点击打开泵2。
泵打开后，泵的背景颜色由灰色变为黄色。
2-2（2）自动进样器点击，出现2-3的画面，设置Sampler Wash不少于3次。
2-3（3）分离柱柱温箱点击，出现2-4画面，设置柱温50℃，设置ON，打开柱温箱。
柱温箱打开后，背景颜色由灰色变为黄色。
2-4（4）反应柱柱温箱点击，出现2-5画面，设置柱温135℃，设置ON，打开柱温箱。
柱温箱打开后，背景颜色由灰色变为黄色。
2-5（5）钨灯点击，出现2-6画面，设置ON，打开钨灯。
钨灯打开后，背景颜色由灰色变为黄色。
2-63、编辑方法（1）Stand By 程序（a）依次点击、、出现3-1-1的画面。
全自动生化分析仪常规操作规程
全自动生化分析仪常规操作规程
1、开机检查试剂量是否充足，真空压力、水压、空气压力是否处在正常范围。
2、根据不同厂家仪器的操作要求安装试剂。
3、按照要求完成定标程序
4、生化室内质控
5、样本运行
6、审核病人报告：对每个病人报告逐一进行审核。
超过生化危急值必须复查，并立即向医生或病房电话报告。
全自动生化分析日常维护保养及使用安全事项
1、周保养：擦拭各样本针、试剂针：先按STOP键，然后用75%酒精擦拭，做完后按照操作要求“复位”。
2、月保养
（1）检查更换比色杯冲洗站上的小橡皮拭。
（2）清洗流动池
（3）清洗样本针、试剂针、搅拌针
（4）检查CL定标相关的SPAN值，根据需要保养或者更换CL电极。
3、根据仪器要求，更换缓冲液、样本、试剂注射器的活塞、K、Ca电极
4、做好仪器使用及保养的记录，以便核查。
全自动氨基酸分析仪安全操作规程
2.手动各组件控制操作
2.1泵点击泵1后设置泵1，流量为0.1mL/min，B1为100%。点击pump1 SW，打开泵1。泵打开后，泵的背景颜色由灰色变成黄色。点击泵2后设置泵2，流量为0.1mL/min，R3为100%。点击pump2 SW，打开泵2。泵打开后，泵的背景颜色由灰色变成黄色。
2.2自动进样器设置sampler wash不少于3次
如实验过程中遇停电等不可抗因素发生，请立即关闭钢瓶气体阀门，待问题排查解决后，经相关负责人确认后方可继续实验。
注意事项
预防措施
实验中的注意事项：
1、实验中控制氮气压力，压力过高会损坏仪器；
2、防止进样毛细管堵塞；
3、控制环境温度。
防护措施
1、氮气压力控制在0.05-0.1MPa，一旦停电或者压力过大，应立即关闭钢瓶气体阀门，待问题解决后，方可继续进行实验； 2、控制待测样品的浓度并注意进样泵的打开顺序；
3、为保证实验顺利进行，环境温度控制在18℃以上。
电源火线、零线、地线连接不正确及破损的危险特性
如果电源火线、零线、地线连接是否正确或者电线有破损，将有可能引起漏电而电到或者烧坏仪器的危险
防护措施
实验开始前，检查电源火线、零线、地线连接是否正确，电线是否有破损，确认无误后才能给装置通电。
分析测试中心
2.3反应柱柱温箱设置柱温135℃，设置ON，打开柱温箱，柱温箱打开后背景颜色由灰色变成黄色。
2.4编辑方法将方法另存L8900分析方法，文件名及路径均可自选。
2.5依次点击File >> sequence >> sequence Wizard，进入后，
选中For acquisition。其余参数默认。
日立-8900全自动氨基酸分析仪简单操作规程
日立L-8900全自动氨基酸分析仪简易操作规程一、联机1、打开电脑。
2、打开主机电源。
3、双击桌面的图标，进入1-1画面，双击图标，进入程序。
1-14、在菜单栏中依次点击和，出现1-2画面，单击联机。
大约两分钟，初始化完毕。
中Uninitialized变成Idle，图1-2变成了图1-3，各个组件可以进行控制了。
初始化完毕后，分离柱的温度逐渐上升。
分离柱的温度会升到50℃。
1-21-3二、手动各组件控制操作1、泵1和泵 2点击，出现2-1的画面。
设置泵1，流量0.ml/min，B1 100%。
点击打开泵1。
泵打开后，泵的背景颜色由灰色变为黄色。
2-1点击，出现2-2的画面，设置泵2，流量0.1ml/分钟，R3 100%。
点击打开泵2。
泵打开后，泵的背景颜色由灰色变为黄色。
2-22、自动进样器点击，出现2-3的画面，设置Sampler Wash不少于3次。
2-32-43、反应柱柱温箱点击，出现2-5画面，设置柱温135℃，设置ON，打开柱温箱。
柱温箱打开后，背景颜色由灰色变为黄色。
2-52-6三、编辑方法1、依次点击、、出现3-1-1的画面。
3-1-12、选中，点击。
再依次点击、，出现3-1-2的画面。
3-1-23、在设置中选中各个柱，其余参数默认。
4、将方法另存为L8900分析方法，文件名及路径均可自选。
注意一定不要覆盖原来的方法，一定得另存。
注意将梯度设为3-3-1所示，其余参数默认。
3-3-12、保存方法。
四、编辑Sequence1、依次点击、、，出现4-1画面。
选中，其余参数默认。
4-12、点击，出现4-2画面，根据需要填写各个参数。
4-23、点击，出现4-3画面，根据需要填写各个参数。
4-34、点击，出现4-4画面，根据需要填写各个参数。
4-45、点击，出现4-5画面。
4-56、通过复制、编辑，最终将Sequence编辑如图4-6所示。
注意此时第一行是再生程序（RG），进样体积为0，Run Type是Unknown，第二行是标准样品，三行起是未知样。
氨基酸分析仪使用调试技术
氨基酸分析仪使用调试技术一、仪器安装调试仪器安装最好外接稳压器，安装安全闸防止突然停电造成难以排除的故障。
还要安装铜板地线，这样可使峰谱线稳定。
仪器各项技术指标的调试采用18种氨基酸混合标样（日本和光试剂公司H型氨基酸混合标准液）。
1. 基酸分辨率的检测该仪器要求苏一丝氨基酸分辨率为70%以上，甘-丙氨基酸分辨率为80%以上，采用5个标样经检测苏-丝氨基酸分辨率为85%以上，甘一丙氨基酸分辨率为以95%上（试验数据表略）。
2. 氨基酸峰位重现性检测：5个标样连续多次检测，丙氨酸最高和最低出峰保留时间不超过1分钟，精氨酸出峰时间最高和最低偏差在1%以内（试验数据表略）。
3. 氨基酸蜂面积重现性检测：5个标样、经多次检测甘氨酸和丙氨酸峰面积重现性编差平均值均达仪器指标2.5%以下（数据表略）。
4. 仪器重复性检测：仪器分离柱重新装树脂后，对10个标样进行检测,，17种氨基酸（不包括氨峰）的出峰保留时间（t）和峰面积（A）的变异系数（CV）值列表1。
表1看出种17氨基酸值均在以1%内，说明各种氨基酸峰面积再现性较好，仪器重复性好。
二、不同样品氨基酸含里测定1. 仪器检测原理和方法：该分析仪不锈钢分离柱内装有专利2619混合离子交换树酯（Hitachi Cuiuomion-Exchange Resin），根据离子吸附交换的原理,，样品用6摩尔盐酸水介法处理后，经自动进样器定量，然后进入分离柱，用流量稳定的泵1输送规定的缓冲液，按事先编好的程序卡规定的程序自动淋洗，样品水介后的酸性、中性和碱性氨基酸分别从分离柱上被洗脱下来，各种氨基酸分次与泵2输送的茚三酮显色液在混合器中充分混合，在温度为100℃左右的反应浴中进行显色，生成紫色色素Dikepohydrindlidene Dikerohydrinaomine（DrDA），此紫色发色液经单色分离器的分光光度计，用570 纳米和440 纳米两个注长连续检测，得到的吸光度进行信号放大，记录仪自动绘出各神氨基酸峰谱，以标准氨基酸峰谱为基准，采用峰面极H·W 法进行结果计算，或通过数据处理系统进行计算打印，得出各种氨基酸含量。
氨基酸分析仪操作方法
氨基酸分析仪的操作流程及注意事项
操作流程
• 打开自动进样器，放入样品。 • 设置分析参数，如色谱柱、洗脱液、检测器等。 • 启动仪器，进行样品分析。 • 查看分析结果，进行数据处理。
注意事项
• 样品处理过程中，要保证样品的均匀性和代表性。 • 分析过程中，要保证仪器各部件的正常运行。 • 数据处理过程中，要保证数据的准确性和可靠性。
CREATE TOGETHER
SMART CREATE
氨基酸分析仪操作方法详解
01
氨基酸分析仪简介及工作原理
氨基酸分析仪的发展历程与应用领域
氨基酸分析仪的发展历程
• 20世纪50年代初期，出现了第一代氨基酸分析仪，主要用于蛋白质水解液中氨基酸的定量 分析。 • 20世纪60年代，出现了第二代氨基酸分析仪，采用了柱前衍生技术，提高了分析速度和灵 敏度。 • 20世纪80年代，出现了第三代氨基酸分析仪，采用了高效液相色谱技术，实现了氨基酸的 高灵敏度、高准确度分析。
氨基酸分析仪在医药领域的应用实例及案例分析
医药领域的应用实例
• 生物制品中氨基酸的纯度分析，评价生物制品的质量。 • 血液制品中氨基酸的分析，评价血液制品的营养价值。 • 药物研究中氨基酸的分析，评价药物的效果和安全性。
案例分析
• 某品牌奶粉中氨基酸的分析，发现某种氨基酸含量偏低，可能影响奶粉的营养质量。 • 某品牌酱油中氨基酸的分析，发现某种氨基酸含量偏高，可能影响酱油的风味和品 质。
氨基酸分析仪的分类
• 高效液相色谱法（HPLC）：采用高压液相色谱技术，实现了氨基酸的高灵敏度、 高准确度分析。 • 气相色谱法（GC）：采用气相色谱技术，分析了氨基酸的挥发性成分。 • 离子交换法（IE）：采用离子交换技术，分析了氨基酸的阴离子成分。
氨基酸分析仪培训讲义
基团不同。
每种氨基酸有D-构型和L-构型，蛋白
质中的氨基酸都是L-构型。
（一）氨基酸的定义
（略）
（二）氨基酸的分类
它的分类有两种： 1.按氨基酸具有的酸性和碱性基团的多 少分类： 中性氨基酸：甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、 亮氨酸、异亮氨酸、苏氨酸、丝氨酸（以 上七种又称脂肪族氨基酸）、苯丙氨酸、 酪氨酸、色氨酸（这三种又称芳香族氨基 酸）、蛋氨酸、胱氨酸、半胱氨酸（含硫 氨基酸）、脯氨酸、
状态 的衍生反应。而别的公司大多采用 反应圈技术，在传统的反应圈中样品带 在分离时容易扩散、引起重叠效应，液 体在反应圈中流动时中间部位快、两边 慢，从而引起样品带的加宽，反应后会 产生峰重叠。而通过在反应柱中填充的 小颗粒，流动相移动平缓、流动均匀， 无样品带加宽现象，峰显高斯分布，更 不会产生峰重叠。
2、离子进一步扩散到交换位置以致进入树 脂内部交换位置。这决定于树脂的交联 度和溶液的浓度，这个过程是整个离子 交换反应的关键。
3、在交换位置上进行离子交换，这个平衡 是瞬间的。被交换的离子带的电荷越多， 它与树脂的结合越紧密，被其它离子取 代就越困难。
4、被交换的离子通过树脂扩散到表面。
5、用洗脱液洗脱，被交换的离子扩散到
快速反馈给cpu、并发出指令使步进电机 加快运转、消除脉动，反之当系统压力 升高时则电机减慢运行。
（5）高效的光学系统：日立氨基酸分 析仪，分光光度计采用了高能量卤素灯、 高效的光学系统。光谱为：消象差凹面 衍射光栅，这种光直接入射到光栅的高 效单色器系统，即使在很小的空间也能 造就优异的光路、这种光栅同时还能聚 光及消除象差、仪器长时间工作测定时 也非常稳定。
6、开放的试剂
试剂配方公开、可自行配制不需冷 藏保存。
L-8900氨基酸分析仪分析柱重新填充方法
L-8900氨基酸分析仪分析柱重新填充方法陈蕊君;满目【摘要】2008年引进的L-8900高速全自动氨基酸分析仪由于使用过久、维护不当,导致泵1压强过高不能正常运行.通过更换线性过滤器,逆洗分析柱,仍没有解决问题,最后重填分析柱使仪器恢复正常.重填分析柱操作较复杂、容易出错,会造成树脂损失,因此,在重填过程中详细记录拆卸、清洗树脂、安装分析柱的完整过程,为今后工作和同行积累经验.【期刊名称】《分析测试技术与仪器》【年(卷),期】2019(025)003【总页数】3页(P204-206)【关键词】L-8900高速全自动氨基酸分析仪;压强过高;重新填充【作者】陈蕊君;满目【作者单位】中国人民解放军食品检测试验中心,北京 101301;中国人民解放军食品检测试验中心,北京 101301【正文语种】中文【中图分类】O657L-8900高速全自动氨基酸分析仪由日立(HITACHI)公司生产，是目前国内使用最多的氨基酸自动分析仪之一[1]. 当分析仪使用过久、维护不当时，其分析柱会发生堵塞或污染，从而导致系统压力升高，直接影响系统稳定性，同时引起保留时间的偏差. 当分析柱树脂老化，就会导致离子交换能力下降，柱效降低，相邻峰的分离度会变差，峰形也会改变，从而严重影响测试结果.1 故障表现分析仪开机后电脑进入设置界面，主机与软件连接正常. 初始化完毕，手动排出泵1和泵2流路中的气泡后，设置泵1流速(PH-1缓冲液B1为0.3 mL/min)和泵2流速(5%乙醇R3为0.2 mL/min)，执行后待流速逐渐升高，此时出现提示“PERSSURE MAX LIMIT ERROR” occurred on Pump 1(泵1压强过高)，主机停止运行.2 故障排除首先，根据使用说明书(主机)中故障诊断，首先检查线性过滤器是否被样品中的杂质堵塞. 卸下各部位的前推螺丝，卸下过滤器压板，取出过滤器，发现不仅被杂质污垢覆盖，并且已被腐蚀断裂. 更换新的过滤器并运行泵1，仍然弹出“泵1压强过高”的提示.第二步，确认分析柱是否发生堵塞. 采用逆洗方法，拆下分析柱并反向安装，不连接柱出口特氟隆管. 用RH-RG缓冲液B6冲洗10 min进行再生，再用缓冲液B1冲洗30 min，完成后将分析柱恢复正常流向，然后运行泵1，仍然弹出“泵1压强过高”的提示.最后，通过重新填充分析柱解决了问题. 因树脂价格昂贵，为避免造成损失，此操作需要小心谨慎，详见以下步骤.2.1 装柱工具玻璃棒、离心管、离心机等. 装柱工具一定要提前使用超纯水超声清洗，并用注射器清洗.2.2 试剂2 mol/L的HCl：将市售浓盐酸用蒸馏水稀释6倍. 2 mol/L 的NaOH：用烧杯称取氢氧化钠8 g，加水稀释，等溶液凉至室温后，转移定容至100 mL，存于聚乙烯试剂瓶中备用.丙酮和乙醇级别越高越好，如无色谱纯试剂，也可用国药的分析纯替代.2.3 树脂收集及清洗在柱温低于50 ℃时拆卸分离柱，拆下一端端帽后发现树脂明显变脏，用裁纸刀轻轻的去掉一层，重新连接分离柱，通过泵压把树脂冲洗出来(泵1流速设置为B1 0.999 mL/min)，收集至一空离心管中(如图1所示)，将分离柱金属外壳及两端端帽超声清洗.图1 树脂收集Fig. 1 Collection of resin把冲洗到离心管中的树脂进行离心，转速 5 000 r/min，离心5 min，弃去上清液(和树脂一同冲洗出的B1缓冲液). 向离心管中添加4～5倍量的丙酮(约10 mL)，用玻璃棒搅拌后离心(同时用丙酮冲洗玻璃棒)，转速5 000 r/min，离心5 min，弃去上清液，加入约10 mL超纯水搅拌，离心弃上清液，并重复2～3次. 向离心管中添加4～5倍量2 mol/L 的HCl，用玻璃棒搅拌后离心，转速5 000 r/min，离心5 min，弃去上清液，加入约10 mL超纯水搅拌，离心弃上清液，直到用普通pH试纸测试其pH值接近中性为止(或在5～6附近)，一般2-3次即可达到. 向离心管中添加4～5倍量2 mol/L 的NaOH，用玻璃棒搅拌后离心，转速5 000 r/min，离心5 min，弃去上清液，加入约10 mL超纯水搅拌，离心弃上清液，直到用普通pH试纸测试pH值接近8～9左右即可，一般洗2～3次即可达到.如清洗完成后无法立即重填柱子，可将清洗过的树脂加入少量B1缓冲液保存于冰箱中.2.4 填充分析柱拆开泵1 的出口，连接装柱工具. 因清洗过程中树脂会有损失，所以需要向清洗好的树脂中再添加少许新树脂. 将清洗好的旧树脂转移到装柱工具中(装柱工具总容量12.5 mL，树脂填充液添加至白色密封圈前约5 mm的位置)，转移完毕后重新连接装柱工具到泵1. 点击EZChrom 控制软件中的全自动装柱程序，设置压力为13 MPa. 把装柱工具和分离柱(如图2所示)斜向上，以排除柱中可能存在的气泡. 当没有气泡冒出后(约20 min)，放置如图3所示，开始填充分析柱. 当泵压上升至12.8 MPa时，等待60 min，即可拆开装柱工具及分离柱.图2 排除装柱工具中气泡Fig. 2 Remove air bubbles in packing tool图3 填充分析柱Fig. 3 Filling of analytical column拆下装柱工具后，用滤纸吸取分析柱另一端多余的水分，拧上端帽，安装至主机，泵1不再提示压强过高，实测氨基酸标准溶液，结果如图4所示. 由图4可见，设备运行正常.3 分析柱维护仪器一周以上不使用时，需要将分析柱的树脂用泵排出，并使用缓冲液B1浸泡，在4 ℃冰箱中保存，同时用蒸馏水清洗各个管路. 或每周使用手动清洗的方法：B6和R3缓冲液冲洗30 min，B1和R3缓冲液冲洗30 min. 需注意，冲洗后应将管路中的气泡排出干净，再将缓冲液泵接入分析柱. 由于样品中固形物、脂肪和蛋白质等污染物质的含量不同，分析柱使用寿命标准也不相同，当出现泵1压强过高、柱效降低等现象时，可考虑是否需要重填分析柱.图4 分析柱充填后标准溶液图谱Fig. 4 Standard solution map after refilling analytical column4 结语分析柱充填后，不仅解决了设备故障问题，分离度和重复性也有很大提高. 虽然重填分析柱可以恢复柱效，但是仪器的定期维护可降低重填的频率，维持较为稳定的仪器状态. 由于树脂价格昂贵，在充填树脂的过程中尤其要注意回收，避免浪费.仪器维修虽然可以利用说明书逐步推断故障原因，但在设备检查维修过程中，因元件较小，线路复杂，安装和拆卸错误会引起极大损失，因此操作时需格外小心谨慎. 在没有经验和技术支持的情况下，重填分离柱会有一定困难，为此将操作步骤进行记录与总结，以期为将来的工作和同行提供借鉴.参考文献:【相关文献】[1] 姜涛，冯永建，何学超，等. 氨基酸自动分析仪快速分析方法的研究[J].化学研究与应用, 2012,24(7):1159-1163.[JIANG Tao, FENG Yong-jian, HE Xue-chao, et al. Research on localized reagent and rapid analysis method of amino acid analyzer[J].Chemical Research and Application, 2012, 24(7):1159-1163.]。
日立操作
6、启动计算机。
7、如果要新建一个应用程序（方法、样品表、数据及报告都存在此应用程序文件夹中），双击Chromaster Administr,点击“蓝色图标”建立一个应用程序。
8、如果方法文件已经建好，省略第7步，双击桌面Chromaster键，点击“蓝色图标”（更改应用程序图标），选择所建立的（或所需）应用程序。（在窗口最上方的标题栏中显示已选择的应用程序名称）。
13、点击{数据采集}，开始{连续分析的开始}。
2）数据处理：
A、打开标准样品图：点击文件菜单下的{打开}，点击{数据}，选择数据存储的文件夹，点击{编辑}，修改样品类型（标准样品或未知样品）。
B、选择标准样品图，点击{显示}。
C、点击成分表，点击{前一个峰}或{后一个峰}确定相应成分，点击{输出RT}图标，填写相对应保留时间下的成分名称，点击{更新}（如果需要修改积分参数，就点击{波形处理参数表}图标）。
日立液相色谱仪操作规程
一、用途
用于有机物的定性定量分析。
二、操作步骤
1）、开机
1、接通组织器总电源。
2、接通各模块的电源（顺序随意）。
3、放置流动相、AS清洗液（保证每个溶剂瓶中都有充足的溶液）。
4、在GUI（触摸屏）上进行purge。
具体操作如下：开电源后，点击OK键，将显示Main Menu界面。点击Conditioning画面执行Wake UP Program的NO5
9、进行初始化，与各装置连接。
10、新建或调出方法:点击“文件”，新建或打开方法，设置相应模块的参数（要设置浓度表，标准曲线的参数，设置完毕后更新，保存方法：文件/保存方法）。
11、开泵，设流速冲柱子（去做样）。
氨基酸的测定方法
肽键
蛋白质水解就是使蛋白质逐渐降成分子量越来越小的肽段， 破坏肽键， 直到最后成为氨基酸的混合物。 （2）氨基酸分离原理 氨基酸是两性电解质，在水中既起酸（质子供体）的作用，也起碱（质子受体）的作用。 氨基酸在溶液中的存在形式：
氨基酸分离：
（2）氨基酸与茚三酮反应原理
3.试剂 除注明外全部试剂均为分析纯，实验用水为去离子水。 （1）6 mol/L（0.5%巯基乙酸）盐酸溶液：优级浓盐酸与水以体积 1 比 1 混合，加入巯基乙酸 5 mL 混匀。 （2）0.02 mol/L 的盐酸溶液：吸取 1 mL 的 6 mol/L 盐酸溶液，加入 300 mL 的蒸馏水，混匀即可。 （3）BRIJ-35 溶液：25 g 溶于 100 mL 蒸馏水中。 （4）缓冲溶液：（参考日立 L-8900 氨基酸自动分析仪） 三菱化学公司生产的 MCI○L-8500 系列缓冲溶液，或根据下表配制缓冲溶液
PH-3 B3 0.20 1.02 700 13.31 — 3.74 12.80 4.0 — 5.0 4.00 4.0 1.0 0.1
PH-4 B4 1.20 1.06 700 26.67 — 54.35 6.10 — 5.0 — 4.00 4.9 1.0 0.1
PH-RG B6 0.20 1.00 700 — 8.00 — — 100.0 — — 4.00 1.0 0.1
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
蒸馏水（约） 柠檬酸钠（二水） 氢氧化钠 氯化钠 柠檬酸（一水） 乙醇 苯甲醇 硫代双乙醇
BRIJ-35 溶液 PH（标称）
总计（校准） 辛酸
注：上表仅供参考。根据不同的仪器和不同的色谱柱，需要调整缓冲溶液的配方。 （5）茚三酮溶液： 日本和光纯药工业公司成套茚三酮试剂，或根据下表配制茚三酮试剂 容器 步骤 试剂 乙二醇独甲醚 茚三酮 氮气起泡，分解 硼氢化钠 氮气起泡 密度 蒸馏水 醋酸钠 冰醋酸 乙二醇独甲醚 总计 氮气起泡 密度 蒸馏水 乙醇 总计 密度 （6）氮气 （7）标准溶液配制 购买的氨基酸原液（Fluka AAS18）中每种氨基酸的浓度为 2.50 μmol/mL。 计量 单位
L－8900氨基酸分析仪分析柱重新填充方法
大型仪器维护与维修(２０４ ~ ２０６)
Ｌ － ８９００ 氨基酸分析仪分析柱重新填充方法
陈蕊君ꎬ满 目
( 中国人民解放军食品检测试验中心ꎬ北京 １０１３０１)
摘要: ２００８ 年引进的 Ｌ－８９００ 高速全自动氨基酸分析仪由于使用过久、维护不当ꎬ导致泵 １ 压强过高不能正常运行.
通过更换线性过滤器ꎬ逆洗分析柱ꎬ仍没有解决问题ꎬ最后重填分析柱使仪器恢复正常. 重填分析柱操作较复杂、容
易出错ꎬ会造成树脂损失ꎬ因此ꎬ在重填过程中详细记录拆卸、清洗树脂、安装分析柱的完整过程ꎬ为今后工作和同
行积累经验.
关键词:Ｌ－８９００ 高速全自动氨基酸分析仪ꎻ压强过高ꎻ重新填充
中图分类号: Ｏ６５７
管. 用 ＲＨ －ＲＧ 缓冲液 Ｂ６ 冲洗 １０ ｍｉｎ 进行再生ꎬ再
用缓冲液 Ｂ１ 冲洗 ３０ ｍｉｎꎬ完成后将分析柱恢复正
常流向ꎬ然后运行泵 １ꎬ仍然弹出“ 泵 １ 压强过高” 的
提示.
最后ꎬ通过重新填充分析柱解决了问题. 因树
脂价格昂贵ꎬ为避免造成损失ꎬ此操作需要小心谨
冲洗出的 Ｂ１ 缓冲液) . 向离心管中添加 ４ ~ ５ 倍量
(ＨＩＴＡＣＨＩ) 公司生产ꎬ是目前国内使用最多的氨基
酸自动分析仪之一 [１] . 当分析仪使用过久、维护不
当时ꎬ其分析柱会发生堵塞或污染ꎬ从而导致系统压
力升高ꎬ直接影响系统稳定性ꎬ同时引起保留时间的
偏差. 当分析柱树脂老化ꎬ就会导致离子交换能力
下降ꎬ柱效降低ꎬ相邻峰的分离度会变差ꎬ峰形也会
改变ꎬ从而严重影响测试结果.
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第 ２５ 卷第 ３ 期
２０１９年９月
水产品一般成分的检测—氨基酸的测定
水产品氨基酸态氮的测定 ——酸度计法
目录页
概述 原理 试剂与仪器 分析步骤 注意事项
一、概述
水产品中含有丰富的蛋白质，在食品加工 的过程中蛋白质会分解成多种氨基酸，这些氨 基酸可让食品呈现出独有的“鲜味”。
氨基酸态氮是指以氨基酸形式存在的氮元 素的含量，可以间接反映产品中氨基酸的多少， 是衡量产品鲜味和品质的特征性指标。
3. 混合氨基酸标准工作液和样品测定液分别以相同体积注入氨基酸 分析仪，以外标法通过峰面积计算样品测定液中氨基酸的浓度。
结果的计算 样品测定液氨基酸的含量按下式计算：
式中：
Ci——样品测定液氨基酸i的含量，单位为nmol/ml ； Ai——样测定液氨基酸i的峰面积； As —— 氨基酸标准工作液氨基酸s的峰面积； Cs —— 氨基酸标准工作液氨基酸s的含量，单位为nmol/ml ；
含水量较低或固态样品
样品搅拌均匀后，放入研钵中，在10min内迅速研磨至无肉眼可见颗粒, 装入磨口瓶中备用。用已知重量的称量瓶称取搅拌均匀的样品5.0g，用 50mL80℃左右的蒸馏水分数次洗入100mL烧杯中，冷却后，转入100mL容量 瓶中，用少量水分次洗涤烧杯,洗液并入容量瓶中,并加水至刻度,混匀后过滤。
混合氨基酸工作液色谱图
vis1 检测波长570nm时
vis1 检测波长440nm时
五、注意事项
本方法适用于食品中酸水解氨基酸的测定，包括天冬氨酸、 苏氨酸、丝氨酸等共16种氨基酸。也就是说20种氨基酸中不能测 谷氨酰胺、天冬酰胺、色氨酸和半胱氨酸。
脯氨酸在波长440 nm测定，其余氨基酸在570 nm波长下测定。 实验中注意控制氮气压力：仪器需要的压力一般为0.05-
日立液相色谱仪使用流程
日立液相色谱仪使用流程英文回答：Introduction.High-performance liquid chromatography (HPLC) is a separation technique used to separate components of a sample based on their differential interactions with a stationary phase and a mobile phase. HPLC is commonly used in analytical chemistry and biochemistry to identify, quantify, and purify compounds.Operating Procedure.1. Preparation.a) Choose a suitable column and mobile phase for the sample.b) Prepare the mobile phase and degas it.c) Equilibrate the column with the mobile phase.2. Injection.a) Inject a known volume of the sample into the system.b) The sample will be carried by the mobile phase through the column.3. Separation.a) The components of the sample will interact with the stationary phase to varying degrees based on their polarity, size, and charge.b) The more strongly a component interacts with the stationary phase, the slower it will elute from the column.4. Detection.a) The eluent from the column is passed through adetector, such as a UV-Vis detector or a fluorescence detector.b) The detector will generate a signal proportional to the concentration of the analyte in the eluent.5. Data Analysis.a) The detector signal is recorded and processed using software.b) The resulting chromatogram can be used to identify and quantify the components of the sample.Troubleshooting.1. No peaks eluting.a) Check if the mobile phase is flowing through the column.b) Check if the detector is turned on and properlycalibrated.2. Peaks are too broad.a) Increase the column temperature.b) Decrease the flow rate of the mobile phase.3. Peaks are tailing.a) Add a small amount of acid or base to the mobile phase.b) Increase the column temperature.Conclusion.HPLC is a versatile technique that can be used for a wide variety of applications. By following the operating procedure outlined above, users can ensure that their HPLC system is operating optimally.中文回答：前言。
日立L-8900高速全自动氨基酸分析仪测定食品中牛磺酸
1.1 仪器与试剂 氨基酸自动分析仪：日立835-50型高效氨基酸自
动分析仪，连有自动数据处理机和记录仪、自动进样 装置、梯度洗脱系统等；电热恒温干燥箱；牛磺酸标 准溶液，500 mg/mL；盐酸，6 mol/L；茚三酮显色剂： 将26.67 g茚三酮溶于1000 mL乙二醇甲醚中，加入 333.33 mL醋酸缓冲液，再加入2.3 mL三氯化钛，低温 保存。 1.2 色谱条件
表5 样品测试分析结果
2.2 仪器精密度 配制牛磺酸标准溶液10 mg/L，连续进样6次，由
表2可知，峰面积相对标准偏差为0.27%。
Table 5 Results of analysis of sample
样品名称
牛磺酸含量/(10-2 g/g)
牡蛎 1
5.42
表2 精密度实验
牡蛎 2
5.37
Table 2 The results of the precision test
分离柱：26 mm i.d.×150 mm不锈钢柱；交换树脂 型号：No.2619，日本公司生产的氨基酸分析专用树脂；
现代食品科技
Modern Food Science and Technology
2012, Vol.28, No.3
柱温：53 ℃；泵流速：0.225 mL/min；泵压力：8.8 MPa； 次独立测定结果的相对标准偏差为/g)
5.42
2
5.38
3
5.38
4
5.41
5
5.40
6
5.43
2.4 加标回收率
平均值 /(10-2 g/g)
标准偏差
RSD/%
5.40 0.0191 0.35
2 结果与讨论
酸水解—全自动氨基酸分析仪测定蜂蜜中17种氨基酸
酸水解—全自动氨基酸分析仪测定蜂蜜中17种氨基酸摘要运用酸水解法和全自动氨基酸分析技术，建立蜂蜜中氨基酸的测定方法。
17种氨基酸的线性范围为1～100 μmoL/L，线性回归系数均在0.999以上，加标回收率为88%～106%。
该方法测定了蜂蜜中的17种氨基酸，结果令人满意。
关键词蜂蜜；全自动氨基酸分析仪；酸水解；氨基酸；测定蜂蜜是蜜蜂采集花蜜酿制的，而花是植物的生殖器官，植物的精华大部分聚集于此，蜜蜂采集植物的“精华”，含有多种分解酶的唾液与其融合酿造而成的，是大自然奉献给人类的天然保健食品，味道甜蜜且营养丰富。
蜂蜜主要成分除葡萄糖和果糖外，还富含人体必需的多种氨基酸营养成分[1]。
不同产地、不同花种蜂蜜主要成分基本相同，但是其中的氨基酸含量不尽相同。
目前氨基酸的分析方法[2]主要有化学方法、荧光光谱法、电化学方法和分光光度法等。
其中荧光光谱法具有较高的灵敏度和较低的检出限，特别是全自动氨基酸分析仪[3-7]（荧光检测器）分析法具有较高的灵敏度和较强的操作和分析自动化能力。
本文运用酸水解-全自动氨基酸分析仪法技术，建立了快速、简便而准确测定油菜蜜、洋槐蜜、紫云英蜜、枣花蜜等安徽省常见4种蜂蜜中17种氨基酸检测的方法，并解析天然蜂蜜中氨基酸的含量。
现将该测定方法总结如下。
1 材料与方法1.1 主要仪器与试剂仪器：日立L-8900氨基酸自动分析仪（配有荧光检测器），干燥箱，真空泵，水解管：耐压螺盖玻璃管（体积为20～30 mL）。
试剂：盐酸（优级纯），重蒸苯酚，柠檬酸钠的缓冲溶液，茚三酮溶液（二甲基亚砜150 mL+pH值5.2乙酸锂溶液50 mL+水合茚三酮4 g+还原茚三酮0.12 g）。
混合氨基酸标准溶液2.5 mmoL/mL，SIGMA。
1.2 仪器分析条件检测器类型：荧光检测器（VIS）；检测波长：570、440 nm；色谱柱：离子交换柱，柱温60 ℃；进样体积：20 μL；流动相；柠檬酸缓冲液，流速0.4 mL/min；柱后反应柱的柱温：135 ℃。
全自动氨基酸分析仪
全自动氨基酸分析仪A200-IC（A200-IC Chromatography System）全自动氨基酸分析仪全自动氨基酸分析仪技术参数一.全自动氨基酸分析仪: 具双用的锂盐体系和经济的钠盐体系独特锂盐体系兼作21种水解氨基酸和43种游离氨基酸，不更换柱子。
钠盐体系高效完成21种水解氨基酸分析，测定一次样品试剂成本约1元人民币。
水解氨基酸检测限全部≤1pmol，平均0.5pmol；平均分离度≥98%；保留时间重现性CV≤0.3%，峰面积重现性CV≤1%；试剂和能源消耗及排污量为同类仪器1/3 - 1/4二.全自动氨基酸分析仪、离子色谱分析浓度范围：ppb–ppm离子色谱检测限(质量数)：抑制电导法：阴离子Cl:0.02ng非抑制电导法：阳离子Li:0.05ng柱后衍生法：重金属离子0.1ng仪器线性：0.9990保留时间重现性：CV≤0.5%峰面积或峰高重现性：CV≤1%分离度：≥1.36分钟分析7种常规阴离子，10分钟分析EPA10种阴离子2分钟分析Ca-Mg；一次测定甜菜碱氯化胆碱和一价阳离子Cr(III)-Cr(VI) 连测；13种高价金属离子连测80余种离子色谱分析。
全自动氨基酸分析仪主要特点A200-IC Chromatography System 是一代新型氨基酸分析仪。
主要特点: 高灵敏度,高稳定性,高性价比,双梯度（浓度＋温度梯度〕分离，黑匣子自动记录技术，低耗，环保。
具迄今最好的氨基酸检测限:水解氨基酸检测限平均0.5pmol，游离氨基酸检测限平均2 pmol。
连续分析水解和游离氨基酸而无须更换体系。
在线化学除氨除氧过滤和脱气。
A200-IC 同时又是一代新型离子色谱仪。
借助氨基酸分析仪高度自动化的主机、高灵敏度紫外可见检测器和电导检测器，适合80余种离子自动分析。
仪器介绍一.A200-IC主机全自动氨基酸分析仪组成：含8流路电子监控高位试剂架；在线化学脱氨脱氧脱气和过滤四项保护装置；带制冷室的120位三维自动进样器；高精度钛合金微型高压输液泵；流路电磁阀；温度梯度用高级柱温炉；柱后高温反应器；二.A200-IC检测器全自动氨基酸分析仪：UV.Vis 紫外可见光度检测器：波长190-900nm，恒温检测池；具汞灯和钨灯双光源，极高的信/噪比和极低的检测限；双光路同时检测，可扫描光谱。
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日立L-8900全自动氨基酸分析仪简易标准操作规程-CAL-FENGHAI-(2020YEAR-YICAI)_JINGBIAN日立L-8900全自动氨基酸分析仪标准操作规程一. 目的为规范日立L-8900全自动氨基酸分析仪的基本操作、维护保养、异常处理程序，防止人为操作失误，确保氨基酸分析仪正常运转，特制定本程序。
二.适用范围本程序适用于日立L-8900全自动氨基酸分析仪。
三．责任1. 本程序的实施者为氨基酸分析仪操作者，各实验室负责人对本程序的实施情况进行监督。
2. 日常运行及维护、定期维护、定期点检及保养由氨基酸分析仪操作者负责。
四. 内容1．联机（1）打开电脑。
（2）打开L-8900主机电源。
（3）双击桌面的图标，进入1-1画面，双击图标，进入程序。
1-1（4）在菜单栏中依次点击和，出现1-2画面，单击联机。
大约两分钟，初始化完毕。
中Uninitialized变成Idle，图1-2变成了图1-3，各个组件可以进行控制了。
初始化完毕后，分离柱的温度逐渐上升，分离柱的温度会升到50℃。
如果打开反应柱的柱温控制，则温度大约20分钟升到135℃。
1-21-32、手动各组件控制操作（1）泵1和泵2点击，出现2-1的画面。
设置泵1，流量分钟，B6 100%。
点击打开泵1。
泵打开后，泵的背景颜色由灰色变为黄色。
2-1点击，出现2-2的画面，设置泵2，流量分钟，R3 100%。
点击打开泵2。
泵打开后，泵的背景颜色由灰色变为黄色。
2-2（2）自动进样器点击，出现2-3的画面，设置Sampler Wash不少于3次。
2-3（3）分离柱柱温箱点击，出现2-4画面，设置柱温50℃，设置ON，打开柱温箱。
柱温箱打开后，背景颜色由灰色变为黄色。
2-4（4）反应柱柱温箱点击，出现2-5画面，设置柱温135℃，设置ON，打开柱温箱。
柱温箱打开后，背景颜色由灰色变为黄色。
2-5（5）钨灯点击，出现2-6画面，设置ON，打开钨灯。
钨灯打开后，背景颜色由灰色变为黄色。
2-63、编辑方法（1）Stand By 程序（a）依次点击、、出现3-1-1的画面。
3-1-1（b）选中，点击。
再依次点击、，出现3-1-2的画面。
3-1-2（c）在设置中选中各个柱（也可以不选），其余参数默认。
（d）将方法另存为Stand-By，文件名及路径均可自选。
注意最好不要覆盖原来的方法，最好另存方法。
（2）再生程序如同Stand By 程序，只是选中而已。
将方法另存为RG。
（3）分析程序（a）如同Stand By 程序，选中，参数默认，将方法另存为Analyze。
4、编辑Sequence（1）依次点击、、，出现4-1画面。
选中，其余参数默认。
4-1（2）点击，出现4-2画面，根据需要填写各个参数（未知样品的个数、未知样品重复次数等）。
4-2（3）点击，出现4-3画面，根据需要填写各个参数（标样和未知样品的第一个瓶号，增量、进样体积等）。
4-3（4）点击，出现4-4画面，根据需要填写各个参数（标样品的个数、标样的重复次数等）。
4-4（5）点击，出现4-5画面。
4-5（6）通过复制、编辑，最终将Sequence编辑如图4-6所示。
注意此时第一行是升温程序（Stand-By），第二行是再生程序（RG），两行的进样体积均为0，Run Type是Unknown，第三行是标准样品，四行起是未知样。
（7）将Sequence另存为Test。
5、采集数据点击Control、Sequence Run，运行Sequence Test。
数据采集完后，机器自动进入清洗程序。
清洗一个小时后，自动关泵，关灯，关柱温箱。
6、关机点击断开连接，关闭程序，关闭主机电源。
7、试剂的准备反应液R1、R2：醋酸钠(CH3COONa·2H2O)、冰醋酸(CH3COOH)、茚三酮(C9H6O4)、丙二醇甲醚（CH3CH(OH)·CH2OCH3）、硼氢化钠（NaBH4）缓冲液B1到B6：柠檬酸钠(Na3C6H5O7·2H2O)、柠檬酸(C6H8O7·H2O)、氯化钠(NaCl)、无水乙醇(C2H5OH)、氢氧化钠(NaOH)、硫代双乙醇（硫二甘醇）(S(C2H4OH)2)、苯甲醇（）、brij-35(聚氧乙烯十二烷基谜)、辛酸(C7H15COOH)试剂建议用优级纯的。
8．出峰情况Asp：天门冬氨酸 Thr：苏氨酸 Ser：丝氨酸 Glu：谷氨酸Pro：脯氨酸 Gly：甘氨酸 Ala：丙氨酸 Cys：胱氨酸Val：缬氨酸 Met：蛋氨酸 Ile：异亮氨酸 Leu：亮氨酸Tyr：酪氨酸 Phe：苯基丙氨酸 Lys：赖氨酸 NH3：氨气His：组氨酸 Trp：色氨酸 Arg：精氨酸9. 仪器使用注意事项（1）氮气压力：仪器需要的压力为—，压力过高会损坏仪器。
（2）为避免堵塞，注意泵1泵2的打开顺序。
先开泵1，再开泵2。
泵1用B6100%，分钟；泵2用R3100%，分钟。
（3）电脑严禁更改设置，严禁安装其他程序，严禁上网。
注意避免染上病毒。
因软件需要注册，如果操作系统发生故障，请通知天美公司。
（4）进样浓度范围：—10 nmol，过高的浓度会影响分析结果，且容易堵塞反应柱。
（5）注意检查仪器泵的压力是否正常。
（6）计划长期不用可以用B5清洗泵的流路。
但最好只清洗泵头，即开泵时最好将排放阀打开。
10. 样品的前处理准备想做测试的样品，在开动氨基酸分析仪之前，需要进行适合该项检测目的的处理，在这上分有两大系统，一个是将氨基酸以及和它有关连的化合物为对象对游离氨基酸的测定法（以下称生物液分析法），另一个是由蛋白质加水分解而得到的氨基酸对它的分析法（以下称蛋白质加水分解物分析法）在此对其中的几个作介绍。
另外，作为原则请用的过滤器对样品过滤。
（1）生物液分析法的前处理：主要目的是做氨基酸成分的提取（萃取），除去蛋白质以及不溶性物质。
（a）血液①把血液用7,000~10,000 rpm(7000~10000 G)离心分离15分钟②在澄清液中加入5~10%三氯醋酸，稀释2~3倍。
③用7,000~10,000 rpm（7000~10000 G）离心分离15分钟。
④将澄清液作为样品。
①剪开滤纸，沿着离心管的管壁放入（例如：②加入的1%三氯醋酸③用超声波清洗器震动2分钟④用7,000~10,000rpm（7000~10000G）离心分离15分钟⑤用的过滤器将澄清液过滤，使用微量小玻璃瓶装进自动进样器①在原尿中加入1%三氯醋酸再稀释2~5倍（由于有异常的尿有大量的氨基酸出来，所以要提高稀释倍率）。
②有混浊时，进行过滤或者离心分离。
③把得到的液体的~作样品。
①用1~5%三氯醋酸溶液稀释10倍②用7,000~10,000rpm（7000~10000G）离心分离15分钟③把澄清液作样品（e）酱油、酒等设有沉淀物的水系食品类①在稀释做样品（和PH的关系在3倍以上）①用研钵将样品搓碎，或是截断成细小状。
②在含有乙醇的20%~30%水中让其散开（1g样品/3ml乙醇/水）③在水浴器上用80℃，约20分钟以上提取（萃取）。
④将澄清液过滤提取，提取（萃取）要反复3次。
⑤使用漏斗将剩下的样品用酒精清洗。
⑥由④以及⑤的液体在水浴器上除去酒精。
⑦往残留下来的水溶液中加入乙醚提取（萃取）后，采取水层⑧把水层减压干硬⑨在 N HCI给一定的容量（2）蛋白质加水分解物分析法的前处理把混合了药液的氨基酸，以及用蛋白质加水分解得到的氨基酸作对象。
（a）药液①由 N HCI稀释3倍以上（根据氨基酸的浓度）作样品，包含有糖、核酸、维生素等水溶性物质，也不妨碍。
（b）盐酸加水分解①将样品在加水分解用的玻璃试管上秤②加入6N-HCI③在减压状态下封管，此时，若置换N2的话，将更正确。
④在加水分解炉中，用110℃、22小时加热分解。
分解时间以上面为准，根据目的而变更。
⑤减压干硬，除去HCI⑥在稀释一定的容量作样品（c）以回收Trp为目的的加水分解①代替6N-HCI的是使用4N甲烷磺酸，依从前面所述，盐酸加水分解的方法让其分解。
②分解后，由于不能减压干硬，加入4N-NaOH, 在PH=2调节。
③在给一定的容量作样品。
①精确秤量1~2mg样品。
②加入2ml过蚁酸，在0℃放置4~24小时。
③添加48%。
④减压干硬。
⑤依从盐酸加水分解的方法，减压进行到干硬为止。
⑥加入1ml的a2N-NaOH，放置1小时。
⑦在~a1NCHI，进行PH调制和给一定的容量。
五．仪器维护与保养1、样品处理严格按照程序处理样品，特别对生理体液样品，更需小心谨慎，加沉淀剂一定要过量，离心所用时间宁长勿短，最后，一定要用μm超滤膜进行超滤后方可上机，以防树脂的污染和柱头的堵塞。
2、缓冲液配置缓冲液配置后首先用360目的尼龙沙网过滤缓冲液（粗滤），然后，用全玻璃的溶液过滤器装上μm的微孔滤膜进行超滤。
配制茚三酮的缓冲液也应按上述程序进行。
三是进样器洗涤液关。
工作时，洗涤液要每日必换。
3、管路及部件的清洗经常需要进行清洗的管路和部件是吸样泵阀及泄液管的管路。
吸样泵阀的清洗步骤：将吸样泵止逆阀取下，放入超声波清洗池中，加30度左右的温水和几滴洗洁精，超声清洗10～15分钟，如发现仍不干净，可将阀体拆开清洗，冲洗干净后，再组装上（注意安装方向）。
吸样泵泄液管的清洗：在每次关机时，可将泄液管从阀上卸下，用玻璃注射器（50ml 以上并选用适当型号的针头）先用去离子水注射清洗，再用75%乙醇注射清洗。
如果管路中沉积物太多，不易清洗干净，或管路已完全堵塞，可将泄液管盘起放入超声波清洗池中，40度温水超声清洗10～15分钟，边清洗边用注射器反复推和抽，使管路里面的沉积物逐渐松动，最后完全清除。
必要时还可配合细铜丝等工具的使用，将沉积物捅开并清洗。
在突然断电又不能在短时间内来电的情况下，为了防止反应盘管中发生堵塞，也可采用注射器注入去离水的方法清洗反应盘管。
具体方法是：将混合器（三通）与反应盘管接合部卸下，选用适当型号的针头插入盘管一端，用注射器（50ml以上）注入去离水。
如压力太大，可将反应盘管后部的倍压线圈拆下另行清洗。
待反应液全部被去离子水置换出来后，再将管路接好。
注意：1、针头必须水平插入，以防刺破反应盘管的管壁；2、凡是有塑料管连接的部位，螺帽都需适度旋紧，以防管壁变形，使阻力增大。
4、分析柱的保养分析柱及去氨柱的保养分两个方面：1、样品及试剂的处理以防污染和堵塞，在前面已经提及；2、分析柱的再生。
合理的再生能有效的清除树脂及过滤器中的残余物，以减少因树脂污染和过滤器堵塞而引起的噪声，使仪器能够经常在较低的压力下工作，降低泵的工作负载，延长分析柱的使用寿命。
再生的具体做法是：开机后运行吸样泵清洗程序（4-2-0），然后，运行分析柱再生程序（1-6-0；2-10-0）。