常见猪病检测方法
中小规模养猪场猪病实验室检测技术及注意事项
中小规模养猪场猪病实验室检测技术及注意事项
今天的畜牧业已经变得非常复杂，猪的疾病也变得越来越多，因此中小规模养猪场需
要实验室检测技术来监测其猪舍中的健康状况。
下面介绍一些关于中小规模养猪场猪病实
验室检测技术及注意事项。
一、实验室检测技术
1、粪便检测
猪的粪便中可携带各种病原体，如细菌、寄生虫、真菌等。
因此，粪便检测是猪病诊
断的重要手段。
2、血液检测
血液检测可以检测猪的血常规、生化指标、肝、肾功能等，诊断一些常见疾病如猪瘟、伪狂犬病、传染性胸膜肺炎等。
3、组织检测
组织检测通常在病猪死后进行，包括肉眼检查、病理学检查和组织学检查等。
4、状况评估
对于中小规模的养猪场，状况评估是很重要的。
它可以提供一个总览，包括猪的健康
状况、猪舍卫生情况和饲养条件等。
二、注意事项
1、现场采样
采样前，要先观察猪的表现，了解疾病的发生情况。
采样时必须有专业技术人员指导
操作。
2、正确存放样本
采样完成后，要立即将样本存放在特定的容器中。
样本应尽快送到实验室进行分析，
以保证分析结果的准确性。
3、保持实验室洁净
实验室必须保持干净卫生，有良好的通风、排气系统，能够消毒杀菌。
实现多种对任
务的灵活应对。
4、选择正规实验室
选择正规的实验室进行检测，以保证结果的准确性和诊断的可靠性。
5、情况反馈
实验室必须及时向养猪场反馈检测结果，并提供专业意见和建议。
常见猪病检测方法.
猪病诊断技术规范一、致病性大肠杆菌的检测1 引用标准参考NY/T 555-2002（动物产品大肠杆菌、粪大肠菌群和大肠杆菌的检测方法）。
2 范围适用于猪大肠杆菌病的诊断。
3 检测方法3.1 材料3.1.1 营养肉汤3.1.2 营养琼脂3.1.3 EMB3.1.4 TSI3.1.5 IMViC生化鉴定管3.1.6 小白鼠3.2 分离培养a)将采集的肝、脾、心血或肠内容物等分别接种伊红美兰琼脂平板（同时接种营养肉汤增菌备用），置37 ℃培养18~24 h。
b)观察培养特性，挑取黑色有金属光泽的菌落，用该菌落涂片，革兰氏染色，镜检。
c)如可见到两端钝圆并多以单个存在的革兰氏阴性粗短杆菌，应取5~10个典型菌落再接种于TSI琼脂。
d)同时挑取典型菌落接种营养琼脂，37 ℃培养16~18 h的菌液用于生化特性鉴定。
3.3 生化鉴定挑取上述菌落纯培养物接种以下生化培养基和乳糖发酵管，(36±1) ℃培养24 h后观察结果。
3.3.1 靛基质试验：a)滴加Kovacs氏靛基质试剂0.1 mL于靛基质试验培养基中混合，观察结果。
b)出现红色环的为反应阳性；出现黄色环的为反应阴性。
3.3.2 甲基红（MR）试验a)滴加甲基红指示剂0.2 mL于MR-VP培养基中混合，观察结果。
b)出现红色为阳性反应；出现黄色为阴性反应。
3.3.3VP试验a)滴加VP试剂甲液0.2 mL于MR-VP培养基中混匀，再滴加VP试剂乙液0.1 mL混匀，静置，观察结果。
b)在15 min内出现红色的为阳性反应；无颜色变化的为阴性反应。
阴性结果1 h后再观察一次，出现红色也为阳性反应。
3.3.4 枸橼酸盐试验：观察培养基颜色变化，出现蓝色为阳性反应；不变色为阴性反应。
3.4 大肠杆菌鉴定结果应符合表1要求。
表1 大肠杆菌鉴定结果出现表1的生化反应类型时，如果为组织样品，由此可初步报告为致病性大肠杆菌。
如果为粪便，尿液，饲料，饮水，应进一步做致病性试验。
常见猪病判断方法
常见猪病判断方法常见猪病的判断方法有很多种，以下是其中一些常见的方法：1.观察猪的一般情况：首先要观察猪的一般情况，包括食欲、精神状态、是否有发热等。
如果发现猪食欲不振、精神萎靡或者体温异常升高，可能是患有猪病的迹象。
2.观察皮肤和毛色：猪的皮肤和毛色也能反映其健康状态。
如果发现猪的皮肤出现红斑、糙疹、溃疡等异常症状，或者毛色变暗、无光泽，可能是患有其中一种疾病。
3.观察呼吸和咳嗽：猪的呼吸和呼吸道情况也能反映其健康状况。
如果发现猪呼吸困难、呼吸加快或者出现咳嗽，可能是患有呼吸系统疾病。
4.观察粪便：猪的粪便状况也可以判断其健康情况。
如果发现猪的粪便量变少、颜色异常、质地不正常(如稀薄、干硬等)或者带有异物，可能是患有消化系统疾病。
5.观察眼部：猪的眼部也能反映其健康状况。
如果发现猪的眼睛红肿、流泪、结膜炎等，可能是患有眼部疾病。
6.观察尿液：猪的尿液状况也能反映其健康情况。
如果发现猪的尿液颜色发黄、浑浊、有异味等异常，可能是患有泌尿系统疾病。
7.体检：定期对猪进行体检是预防和了解猪病的一种重要方法。
通过体检能够及时发现病变和异常现象，从而采取相应的措施。
8.实验室检测：在猪出现异常症状时，可以通过实验室检测来明确诊断。
如血液、尿液、粪便等的常规检查，以及病原学检测，如病毒、细菌和寄生虫等的检测，能够帮助确定疾病的类型和严重程度。
以上是常见猪病的判断方法。
然而，需要注意的是，这些方法只能提供一些初步的判断依据，具体的诊断和治疗仍需要依靠专业的兽医进行综合分析和判断。
对于明确病因和制定针对性治疗方案，一定要及时请教兽医的专业意见。
猪的检测项目
实验室对猪病的检测可以采用多种方法和技术。
以下是一些常见的猪病检测方法：
1.血清学检测：通过采集猪的血液样本，进行血清学检测，包括血清抗体检测和血清学指
标检测。
这些检测可以用于确定猪是否感染了特定的病原体，或者是否已经产生了免疫应答。
2.分子生物学检测：分子生物学技术，如聚合酶链反应（PCR）、逆转录聚合酶链反应
（RT-PCR）和核酸杂交等，可以用于检测病原体的核酸序列，从而确定猪是否感染了特定的病原体。
这些方法通常能提供快速、准确的结果。
3.细菌学和真菌学检测：通过细菌培养、细菌鉴定和真菌培养等方法，可以检测猪体内是
否存在细菌或真菌感染。
这些检测方法可以确定病原体的种类和敏感性，以便选择合适的治疗方法。
4.组织学检测：通过取得猪的组织样本，进行组织学检测，如病理学检查、免疫组织化学
染色和组织培养等，可以确定病变的组织学特征，辅助诊断和病因分析。
5.免疫学检测：包括免疫荧光、免疫酶联免疫吸附试验（ELISA）、免疫电泳等方法，可
以检测猪体内特定抗体或抗原的存在，用于诊断感染性疾病。
谈谈猪的疫病的鉴别与诊断
谈谈猪的疫病的鉴别与诊断【摘要】猪的疫病是农业生产中常见的一种疾病，给养猪业带来了不小的损失。
本文主要探讨了猪的疫病的鉴别与诊断。
在正文部分中，详细介绍了不同疫病的症状及特点，以及常见猪疫病的检测方法和疫病鉴别诊断技术。
也提出了猪的疫病预防措施和疫病的防治策略。
在强调了疫病鉴别与诊断的重要性，同时也强调了疫病防控的重要性。
通过本文的介绍，读者可以更加全面地了解猪的疫病，加强对疫病的认识和防控意识，有效保障猪的健康和生产。
【关键词】猪的疫病、鉴别诊断、症状、检测方法、预防措施、防治策略、重要性。
1. 引言1.1 猪的疫病概述猪是世界上重要的畜禽之一，但由于生长环境、饲养管理以及传染病的影响，猪的疫病问题一直备受关注。
猪的疫病是指由病原微生物侵入猪体，在机体内繁殖、生长并引起机体组织器官结构或功能异常的一类疾病。
猪的疫病种类繁多，常见的有猪瘟、口蹄疫、猪肺疫等。
猪的疫病对养殖业造成了严重的经济损失，同时也对人类健康构成潜在威胁。
及早进行疫病的鉴别与诊断显得尤为重要。
通过对不同疫病的症状及特点进行详细了解，可以帮助养殖者及时发现问题，并采取相应的措施进行预防和治疗。
了解常见猪疫病的检测方法以及猪的疫病鉴别诊断技术，也是有效防控疫病的重要手段。
通过加强疫病的预防措施和实施科学的防治策略，可以有效地减少疫病的发生，降低疫病造成的损失。
2. 正文2.1 不同疫病的症状及特点猪是我国畜禽生产中重要的养殖动物，但也面临着各种病害的威胁。
不同的猪疫病表现出不同的症状和特点，及时识别并采取有效的措施对于保障猪群健康至关重要。
1. 猪瘟(ASF)猪瘟是一种严重的猪病，具有高度的传染性和致死性。
患病猪出现高热、食欲减退、呼吸困难、皮肤发绀等症状，同时容易出现出血现象，如鼻出血、口腔出血等。
2. 猪传染性胃肠炎(TGE)TGE主要侵袭幼猪，表现为剧烈呕吐、腹泻和脱水等症状。
此病易引起猪群集体死亡，给养猪业造成严重的经济损失。
非洲猪瘟的实验室检测技术与质量控制
非洲猪瘟的实验室检测技术与质量控制非洲猪瘟是一种高度传染性的猪病，对猪养殖业造成了巨大的经济损失。
为了及早发现和控制非洲猪瘟的传播，实验室检测技术和质量控制在疾病监测和病毒鉴定中起着至关重要的作用。
本文将重点介绍非洲猪瘟的实验室检测技术，并探讨质量控制在检测中的重要性。
一、实验室检测技术1. PCR技术聚合酶链反应（PCR）是非洲猪瘟病毒检测中最常用的技术之一。
它能够从动物组织或血液样本中快速检出病毒的核酸。
PCR技术具有高灵敏度和高特异性，可以在感染初期就进行检测。
此外，PCR技术还可以区分非洲猪瘟病毒与其他相关病毒的差异，提高了检测的准确性。
2. ELISA技术酶联免疫吸附测定法（ELISA）是一种常用的检测非洲猪瘟病毒抗体的技术。
ELISA技术通过检测动物血清中的特定抗体水平来确定是否有非洲猪瘟病毒感染。
ELISA技术具有高效、准确、简便的特点，并可以进行大量样本的快速筛查。
3. 病毒分离与鉴定病毒分离与鉴定是为确定病原体是否存在以及其类型、亚型和基因组序列等信息提供关键数据的技术。
通过将实验室动物感染或组织样本接种到适当的细胞培养物中，可以成功分离非洲猪瘟病毒。
然后，通过电镜观察和核酸测序等方法，可以鉴定病毒的特征和亚型。
二、质量控制在非洲猪瘟实验室检测中，质量控制起着至关重要的作用，可以保证检测结果的准确性和可靠性。
以下是一些常用的质量控制措施：1. 内部质控实验室应建立内部质控计划，包括使用已知标准样本进行日常质控，以确保实验的稳定性和准确性。
这些标准样本应包括阳性对照、阴性对照和质量控制样本，用于验证实验室的操作流程和仪器设备的性能。
2. 外部质控参与外部质控项目有助于实验室评估其检测结果的准确性和可靠性。
外部质控项目由国家或国际组织组织，实验室需按要求参加，接受其他实验室的盲样品检测，并比对结果评估自身实验室的准确性。
3. 人员培训和认证实验室工作人员需要进行相关培训，包括病毒检测技术的理论和实践，操作规范以及质量控制流程。
猪病的病理学诊断和实验室检查方法
猪病的病理学诊断和实验室检查方法前言随着农业生产的发展，猪的养殖已成为世界范围内广泛存在的经济活动之一。
然而，由于环境、饲养管理、饲料、疫苗等诸多因素的影响，猪的健康状态长期面临着风险。
猪病的早期诊断能够及时发现病情，采取有效措施，降低猪养殖中的经济损失，而病理学诊断和实验室检查方法是猪病诊断中的重要手段。
病理学诊断病理学诊断是通过对病变部位和组织器官进行细致的观察和分析，鉴定病因和病程的过程。
病理学诊断主要包括病理变化和病变解剖学特点以及其影响病理诊断的因素等方面。
病理变化病理变化是指病害的生理变化和形态改变，包括：•形态学变化：变化涉及有形的形态结构，包括器官、组织、细胞等的大小、形态、颜色、形状、质地等；•生理变化：指组织器官结构、形态和功能的改变，包括增生、萎缩、坏死、变性、增生等生命活动表现的量化变化。
病变解剖学特点病变解剖学特点是指病害在病理形态学上的特点。
影响病理诊断的因素影响病理诊断的因素包括诊断者的经验和专业知识、病变或非病变的体积和分布、病变的时效性、取样和制片等影响。
实验室检查方法实验室检查方法主要包括病原学检测、血液检查、组织和细胞培养、免疫学检查等方面。
病原学检测病原学检测是指对病原体进行检测的方法。
病原体可以采用全血或分泌物等样品进行检测。
病原学检测方法包括了细菌培养、病毒分离和检测、真菌定植和检测等。
血液检查血液检查是指通过对血液样本中的生理指标进行检查，来诊断疾病。
血液检查可以检测到动物的健康状态、免疫系统反应和代谢变化等。
血液检查包括生物化学检查、血清学检查和血细胞学检查等。
组织和细胞培养组织和细胞培养是通过对组织和细胞进行培养，观察相应的增生和生长等情况，来诊断疾病。
组织和细胞培养可以检测到许多病理性变化，如肿瘤等。
免疫学检查免疫学检查是指通过检查免疫系统对病原体的免疫应答，来诊断疾病。
免疫学检查可以检测动物的免疫状态，如感染后特异和非特异免疫反应、细胞介导的免疫反应等。
中小规模养猪场猪病实验室检测技术及注意事项
中小规模养猪场猪病实验室检测技术及注意事项随着养猪业的发展，猪病的防控变得越来越重要。
中小规模养猪场由于规模较小，通常没有自己的实验室，因此需要借助外部实验室进行猪病检测。
本文将介绍中小规模养猪场猪病实验室检测技术及注意事项，希望对养猪场的管理者和兽医人员有所帮助。
一、实验室检测技术1. 病原学检测：病原学检测是检测猪体内的病原微生物，包括细菌、病毒、真菌和寄生虫等。
常用的病原学检测方法包括血清学、细胞培养、PCR技术等。
2. 生化学检测：生化学检测是检测猪体内的生化指标，包括血红蛋白、白蛋白、血糖、尿素氮等。
常用的生化学检测方法包括ELISA、免疫测定法、比色法等。
3. 分子生物学检测：分子生物学检测是检测猪体内的基因表达及变异情况，包括PCR、基因测序、基因组学等。
这些方法能够更准确地判断猪的遗传背景和疾病易感性。
4. 免疫学检测：免疫学检测是检测猪体内的免疫指标，包括白细胞计数、淋巴细胞计数、免疫球蛋白浓度等。
免疫学检测方法包括免疫印迹法、流式细胞术等。
二、注意事项1. 选择合适的实验室：中小规模养猪场在选择实验室时应当考虑实验室的技术水平、设备设施以及服务质量。
最好选择具有较强实力和口碑的实验室，可以通过咨询其他养猪场或兽医单位来获取信息。
2. 提前准备样品：在送样前，养猪场方面需要做好猪的标本采集和处理工作，确保样品的完整性和准确性。
必要时，可以向实验室咨询采样方法及标本保存的注意事项。
3. 遵守实验室规定：在与实验室的沟通和合作中，养猪场方面要严格遵守实验室的规定和要求，包括提供准确的样品信息、及时缴费等。
只有双方共同尊重合作，才能顺利完成检测工作。
4. 积极配合与沟通：在检测过程中，养猪场方面应积极配合实验室的工作，包括及时提供需要的信息、回答实验室的疑问等。
要保持良好的沟通，及时了解检测进度和结果，并与实验室共同商讨后续的处理方案。
5. 妥善处理检测结果：当实验室出具检测报告后，养猪场方面应认真阅读并妥善处理检测结果。
猪三种常见疾病的诊断方法与治疗手段
猪三种常见疾病的诊断方法与治疗手段
常见的猪疾病有猪瘟、猪蓝耳病和猪肺疫病，以下将为您介绍这三种疾病的诊断方法和治疗手段。
猪瘟是一种高度传染性的猪病，也被称为猪传染性胃肠炎。
诊断猪瘟可以通过以下方法：
1. 临床症状观察：猪瘟初期会出现食欲不振、发烧、腹泻等症状，后期可能会出现呕吐、贫血、黏膜出血等严重症状。
2. 病理学检查：可以通过解剖病死猪进行病理学检查，观察病变部位和病变程度，如胃肠黏膜充血、出血等。
3. 实验室检测：可以通过PCR (聚合酶链反应)、酶联免疫吸附试验等方法检测病原体的存在。
治疗猪瘟的主要手段是预防接种，目前使用的疫苗包括灭活疫苗、减毒疫苗和基因工程疫苗。
还可以通过合理的营养、环境和管理来增强猪的免疫力。
治疗猪蓝耳病的方法比较有限，目前主要依靠预防控制。
预防措施包括疫苗接种、隔离感染猪只、环境清洁消毒等。
治疗猪肺疫病的方法包括抗生素治疗和支持疗法。
常用的抗生素包括青霉素、氨苄西林、环丙沙星等，同时还需要提供营养支持和护理。
猪瘟、猪蓝耳病和猪肺疫病是常见的猪疾病，诊断方法主要包括临床症状观察、实验室检测和病理学检查。
治疗手段主要包括预防接种、抗生素治疗和支持疗法。
及时诊断和治疗疾病对于保障猪的健康和养殖业的发展至关重要。
常见猪病的诊断与防治
可见全身淋巴结肿大出血,肾脏表面有弥漫性 针尖状的出血点或出血斑,膀胱、喉头、肠粘膜 有点状至斑状出血,脾脏有梗死(猪瘟最具诊断 意义的病变)，回盲瓣处有纽扣状溃疡。
5.46 断奶仔猪坏死性干酪样肠炎的结肠，粘膜层的淋巴组 织上有积聚的纤维，故又称为“钮扣状溃疡”。见于猪瘟， 也见于沙门氏菌感染合并引起的痢疾。
剖检:
可见胃肠道有出血性炎症,心包液混浊,心肌表面 或切面呈灰白色或淡黄色斑纹或不规则斑点,类似 虎皮斑纹，又叫虎斑心。心肌松软像煮过似的,心 内外膜出血.
防治处方:
①彻底扑杀
②注射疫苗
③彻底消毒
三、猪繁殖与呼吸综合症(蓝耳病)
诊断要点:
本病是由病毒引起的猪的一种繁殖障碍和呼吸道 症状的传染病,其特征为厌食、发热,怀孕后期发生 流产、死胎和木乃伊胎,幼龄仔猪发生呼吸道症状. 感染本病后:
2. 病理指标 脾脏边缘或表面出现梗死灶，显微镜下见 出血性梗死； 肾脏呈土黄色，表面可见针尖至小米粒大出血点 斑； 皮下、扁桃体、心脏、膀胱、肝脏和肠道均可 见出血点和出血斑。显微镜下见肾间质性炎； 心脏、肝脏和膀胱出血性、渗出性炎等病变； 部分病例可见胃肠道出血、溃疡、坏死。
3 .病原学指标 高致病性猪蓝耳病病毒分离鉴定阳性。 高致病性猪蓝耳病病毒反转录聚合酶链式反应 （RT-PCR）检测阳性。
4.免疫胶体金快速诊断试纸检测
四、猪圆环病毒(PCV-2)感染
诊断要点:
猪圆环病毒是由猪2型圆环病毒(PCV-2)引起猪的 一种新的传染病,主要感染6-16周龄猪,其特征为体 质下降、消瘦、腹泻、呼吸困难.与猪2型圆环病毒 (PCV-2)相关的疾病有仔猪断奶后多系统衰竭综合 症、呼吸道疾病综合症、仔猪抖抖病、皮炎与肾病 综合症、母猪繁殖障碍.PCV-2常与细小病毒(PPV) 或猪繁殖与呼吸综合症病毒(PRRSV)混合感染.本 病主要感染断奶后仔猪,哺乳猪很少发病.饲养条件 差、通风不良、饲养密度高、不同日龄猪混养等应 激因素均可加重病情的发展.
猪病的常见症状与诊断方法
猪病的常见症状与诊断方法猪病是养猪业中常见的问题之一，猪只出现疾病症状时应及时进行诊断和治疗，以防止疾病的蔓延和扩散。
本文将介绍猪病的常见症状以及相关的诊断方法。
一、常见猪病的症状1. 猪流行性腹泻：- 症状：猪出现腹泻，粪便呈水样或稀泥状，色泽异常偏黄，食欲减退，体重下降。
- 原因：主要由于病毒感染引起，包括猪瘟病毒和轮状病毒等。
2. 猪瘟：- 症状：猪出现体温升高，食欲减退，精神不振，皮肤颜色发红，呼吸急促，呕吐，腹泻等症状。
后期可出现呼吸困难、发生抽搐等。
- 原因：猪瘟病毒感染引起，具有极强的传染性和致死性。
3. 猪蓝耳病：- 症状：猪出现发烧、咳嗽、呼吸困难、流涕、流涎、发疹等症状，高发病率和致死率。
- 原因：蓝耳病病毒感染引起，传播性广泛，易于传播。
4. 猪繁殖与呼吸综合症（PRRS）：- 症状：母猪流产或仔猪早产，仔猪弱小，易死亡。
成年猪体温升高，食欲不振，呼吸急促，咳嗽等症状。
- 原因：PRRS病毒感染引起，对猪的生产力和免疫力都具有严重影响。
二、猪病的诊断方法1. 体检：- 通过观察猪只的外观表现、行为和粪便等特征进行初步判断。
- 检查猪的体温、呼吸频率、心跳等生理指标，以及皮肤是否有异常状况等。
2. 实验室检测：- 采集猪只的血液、粪便、尿液等样本进行实验室检测。
- 使用PCR、ELISA等技术检测样本中的病原体，如病毒、细菌或寄生虫等。
3. 病理解剖：- 对于死亡的猪只，可以进行病理解剖，检查内脏器官的异常情况。
- 采集病变组织进行组织学检查，观察细胞或组织的变化、病变类型等。
4. 专业咨询与技术支持：- 在诊断疑难病例时，可以寻求兽医专家的咨询，并借助现代技术设备的支持，如核磁共振、超声波检查等，以获得更准确的诊断结果。
总结：猪病的常见症状包括猪流行性腹泻、猪瘟、猪蓝耳病和猪繁殖与呼吸综合症（PRRS）等。
诊断猪病可以通过体检、实验室检测、病理解剖以及专业咨询和技术支持等手段来确定病因和病情，从而采取相应的治疗措施，保障猪只的健康和生产效益。
中小规模养猪场猪病实验室检测技术及注意事项
中小规模养猪场猪病实验室检测技术及注意事项随着养猪业的发展，猪病成为了养猪场的一大隐患。
为了及时发现猪病，提高养猪场的生产效率和猪群的健康水平，建立一套科学有效的猪病实验室检测技术是至关重要的。
尤其是对于中小规模养猪场来说，要想控制好猪病，提高猪群的生产效益，实验室检测技术更是必不可少。
本文将就中小规模养猪场猪病实验室检测技术及注意事项进行详细介绍。
一、实验室检测技术1. 采样技术（1）选择合适的采样器具，如无菌采样棉签、无菌采样管等。
（2）选择合适的采样部位，通常情况下可选择猪体表、排泄物、血液、组织等等。
（3）采样前要对采样器具进行消毒，保证采集的样本不受外界污染。
2. 样本处理（1）根据采样部位的不同，样本处理方法也不同。
如对于猪体表的样本，可以直接采集并送至实验室。
对于血液、组织等样本，需要进行预处理，如制成薄片、样本悬液等。
（2）样本要妥善保存，避免交叉污染和样品变质。
（1）采用PCR技术对样本进行DNA扩增，以检测猪病的基因序列。
（2）采用ELISA技术检测样本中特定抗体的含量，从而判断猪是否感染该病原体。
（3）使用传统的微生物学方法，如培养、涂片染色等，观察病原体的形态和生长情况。
（4）结合临床症状，进行细菌培养和抗药敏试验。
4. 数据分析（1）对实验室检测结果进行综合分析，结合获得的数据和临床表现，判断猪是否感染了某种疾病。
（2）根据检测结果，制定相应的疾病防治措施和用药方案。
以上就是中小规模养猪场猪病实验室检测技术的主要步骤，当然在实际操作中还需要根据具体情况进行调整和改进。
二、注意事项1. 实验室检测前的准备工作（1）实验室要保持干净、整洁，必要时要进行消毒。
（2）实验室工作人员要进行相关培训，了解实验室操作规范和安全知识。
（3）准备好必要的器具、试剂和耗材。
（1）选择合适的采样时间和采样部位，以保证样本的质量。
（2）根据猪的临床症状和历史，合理选择采样部位。
3. 采样时的注意事项（2）样本采集应尽可能快速，并及时送至实验室进行处理。
国家标准_伪狂犬的酶联免疫吸附试验检测方法
国家标准——几种常见猪病的酶联免疫吸附试验检测方法一、猪伪狂犬病毒1.1试验材料抗原、酶标抗体、阴性血清、阳性血清;底物邻苯二胺一过氧化氢(OPD-H202)溶液，抗原包被液、封闭液、冲洗液、终止液配制方法见附录C(标准的附录)，酶标反应板1.2操作步骤1.2.1包被用包被液(见附录c中C2)将抗原稀释到工作浓度加人酶标板孔内，每孔100uL,37℃作用1h后，放入4 C°冰箱过夜。
1.2.2洗涤弃去孔内液体，用冲洗液(见附录C中Cl)洗3次，每次3 min，用吸水纸拍干。
1.2.3封闭各孔加人封闭液(见附录C中C3)100 uL，37 C°作用1h。
按1.2. 2步骤洗涤。
1.2.4加人待检血清和阴性、阳性血清对照待检血清经56 C° 30 min灭活后，用冲洗液作1:40稀释，加入抗原孔中，每孔100uL;同时将阴性血清对照和阳性血清对照各加人三个抗原孔中，分别标记，37 C°作用1 h,重复1.2.2步骤1.2.5加人酶标抗休用冲洗液将酶标抗体按工作浓度稀释，每孔加人100 uL，37 C°作用1h。
按1.2. 2步骤洗涤。
1.2.6加人底物邻苯二胺一过氧化氢,(见附录C中C4)每孔100 uL，室温避光显色25 min1.2.7终止反应每孔加人50uL一终止液(见附录C中C5)终止反应1.2. 8测定透光值(OD)值在酶联免疫检测仪上于490 nm波长处测定光吸收值。
1.2.9结果的判定阴性对照光吸收值(OD) 3孔的平均值，阴性对照光吸收值(OD) 3孔的平均值，血清检测值与阳性对照血清检测值之比(S/P)值计算：S/P=(样品A490 –NC)/(PC-NC)如S/P≥0.5，则判为抗体阳性;如S/P﹤0.5，则判为抗体阴性。
附录C：c1冲洗液含0.0,5%吐温-2(1("1'ween-20)pH7. 4的磷酸盐缓冲液。
猪病的病理学诊断 猪病的实验室检查方法 - 养猪技术
猪病的病理学诊断猪病的实验室检查方法-养猪技术所谓猪病诊断就是认识猪病的过程，通过流行病学调查、临床分析、病理剖检微生物检验、血清学测定等手段，确定猪病的名称、性质，判断疾病的预后提出对疾病的处理意见，制定正确的防治方案，并建立切实可行的防治措施。
下面一起来具体了解一下：猪病的病理学诊断猪病的实验室检查方法。
1、病理学诊断病理学诊断在实际的养猪生产工作中是对猪病进行诊断的重要方法。
主要是将病死猪或者是濒死期致死的猪只进行病理剖检，通过肉眼和显微镜对各个器官及其组织细胞的病理变化进行观察，最终给出正确的诊断。
有的疾病，尤其是传染性疾病，均能够观察到一定的具有特殊性的病理变化，比如猪瘟、副伤寒、喘气病等，对感染这些疾病致死的猪只进行剖检，观察到特殊性的病理变化，在临床中即可给出诊断结果。
最急性的病例，通常不会具备特有的病理变化，所以，在临床工作中要尽量多检查几只病死猪只，然后整理多只病死猪的检查结果，一般会总结出某种疾病典型的病理变化特征，对于该疾病的诊断工作有很大的助力。
而另外还有一些疾病，不仅要进行肉眼检查，而且必须将采集到的病料送实验室进行病理组织学检查，综合结果以后才能最终给出确诊结论。
病理学诊断主要包括以下具体内容。
器材准备，包括胶皮手套、靴子、剖检器材、盛有10%福尔马林的广口玻璃瓶等。
外观检查，指的是对病死猪只的眼、鼻、口、耳、肛门、皮肤和蹄等进行全方面的外观检查。
尸体剖检的操作要点，将病死猪的尸体呈仰卧位姿势，先将肩胛骨内侧和髋关节周围的肌肉切断，让其四肢呈摊开状态，随后沿腹壁中线向前至下颌骨切开，继续向后切直到肛门，将皮肤掀开，再把剑状软骨至肛门之间的腹壁切开，沿着左右的最后肋骨处将腹壁至脊柱部切开，将腹腔至肛门之间可以全部暴露。
这时，应该检查腹腔脏器的位置正常与否。
继续从横膈处将食管切断，由骨盆腔将直肠切断，按照肝、脾、肾、胃、肠等的次序，将其分别取出，然后进行具体的检查操作。
胸腔剖检，首先是将膈膜沿着季肋部切断，用刀或者是骨剪将肋软骨和胸骨连接部切断，再将刀伸入到胸腔内，划断脊柱两侧的肋骨和胸椎连接部的胸膜以及肌肉，再用刀按压两侧的胸壁肋骨，使肋骨和胸椎连接处的关节自行折裂从而敞开胸腔。
怎样诊断猪大肠杆菌病猪大肠杆菌病诊断技术
怎样诊断猪大肠杆菌病-猪大肠杆菌病诊断技术摘要猪大肠杆菌病是一种非常常见的猪病，它可以导致猪的生长减缓、死亡和下呼吸道感染。
因此，正确和及时的诊断对于猪的养殖和兽医治疗都非常重要。
本文将介绍常用的猪大肠杆菌病诊断技术，以协助兽医师快速、准确地诊断病症，采取相应的治疗措施。
前言猪大肠杆菌病是一种细菌性的感染病，通常由大肠杆菌引起。
如果不及时诊断和治疗，这种猪病可能导致死亡率高达30%。
当猪被感染后，在发病的早期阶段，很难确定是否感染了猪大肠杆菌病。
因此，本文将详细介绍猪大肠杆菌病诊断的不同技术和步骤，以便及时诊断、预防和控制该疾病的传播。
病症猪大肠杆菌病的症状可以因猪的年龄段、环境和压力而有所不同。
通常，大肠杆菌病在一周内表现出下列临床症状：1.体温升高，可能高达41°C；2.食欲下降，猪可能出现厌食症状；3.猪的粪便发生变化，可能变得黏稠，呈黄色，有时可能夹杂着血液和黏液。
当猪大肠杆菌病感染向更为严重的阶段发展时，病症将更为明显：4.猪开始出现下呼吸道感染症状；5.猪的死亡率高达30%。
诊断技术1.传统细菌学方法传统细菌学方法是指将病变组织标本采集到实验室，通过细菌学技术（如培养和荚膜加染）来分离和识别病原菌的方法。
这些定量方法可以提高诊断病菌的准确性和特异性。
然而，这种方法需要很长的实验时间，并且很可能会出现假阴性结果。
因此，这种方法经常与其他技术一起使用。
2.快速诊断技术近年来，许多快速诊断技术已经被开发出来。
这些技术通常基于免疫学和分子生物学。
例如，酶联免疫吸附试验（ELISA）和聚合酶链反应（PCR）技术可以提供快速诊断结果，并且非常适合在实验室和田间进行。
这些技术可以在短时间内确定猪是否感染了猪大肠杆菌病，因此在疫情爆发时，它们被广泛用于种养企业的快速筛查，并对猪进行分类隔离，以减少疫情的传播。
3.免疫学检测免疫学检测技术通常会测试猪是否已产生特异性抗体，以便确定猪是否感染了猪大肠杆菌病。
中小规模养猪场猪病实验室检测技术及注意事项
中小规模养猪场猪病实验室检测技术及注意事项随着养猪业的不断发展，养猪场的规模也在不断扩大。
对于中小规模养猪场来说，猪病的检测是非常重要的，可以帮助养猪场及时发现猪的健康问题，采取有效的措施防止疫病的传播。
建立一套完善的猪病实验室检测技术及科学的操作规范是非常必要的。
一、实验室检测技术1、病原微生物的检测病原微生物的检测是猪病实验室检测的核心内容之一。
在中小规模养猪场，主要需要检测的病原微生物包括猪瘟病毒、圆环病毒、猪传染性胃肠炎病毒、轮状病毒、猪流行性腹泻病毒等。
针对这些病原微生物的检测，需要使用PCR技术、ELISA技术等现代化的生物学检测手段，能够快速、准确地检测出病原微生物的存在。
除了病原微生物，猪病实验室还需要对病原菌进行检测。
常见的病原菌有沙门氏菌、大肠杆菌、猪链球菌等。
针对这些病原菌的检测，需要使用细菌培养、PCR技术、酶联免疫吸附法等方法，能够准确地鉴定出病原菌的种类和数量。
3、疫苗滴度的检测在猪病防控中，疫苗的滴度检测是非常重要的。
通过检测疫苗的滴度，可以判断疫苗的有效性，为猪病的预防提供有力的保障。
疫苗滴度的检测通常采用细胞培养、传染量测定法等技术，能够准确地测定出疫苗的滴度。
二、注意事项1、实验室环境的清洁与消毒建立猪病实验室时，首先要保证实验室环境的清洁与消毒。
实验室的各项设备、培养皿、试剂瓶等物品都需要定期进行清洁和消毒，以防止受到外来细菌的污染。
2、实验室操作规范在猪病实验室中，操作规范是非常重要的。
工作人员要严格按照操作规程，做好实验记录，避免实验过程中发生误操作或交叉感染。
3、安全防护措施为了保障工作者的健康和安全，猪病实验室需要配备充足的防护设备，包括口罩、手套、防护服等。
在操作过程中，要注意避免接触有害物质，以免造成伤害。
4、废弃物处理在实验室检测过程中产生的废弃物需要及时清理处理，避免对环境和人员造成污染。
废弃物可以通过消毒和分装等方式进行处理，确保实验室的环境卫生。
中小规模养猪场猪病实验室检测技术及注意事项
中小规模养猪场猪病实验室检测技术及注意事项中小规模养猪场在进行猪病检测时，通常需要依靠实验室来进行检测。
下面将介绍常见的猪病实验室检测技术及注意事项。
猪病实验室检测技术主要包括传统的病原学检测和分子生物学检测。
传统的病原学检测主要是通过细菌培养、病毒分离、病原体生物学特性等方法来进行。
这种方法的优点是操作简单、成本较低，适合于中小规模养猪场使用。
具体步骤包括：1. 采集样本：应选择来自疑似患病猪的病变组织或病理变化明显的器官作为样本。
2. 消毒处理：样本采集后应进行消毒处理，以防止交叉感染。
3. 细菌培养：将样本接种于适当的培养基中，培养出病原菌，并通过鉴定技术来确认病原菌的种类。
4. 病毒分离：将样本进行适当的稀释处理后，利用细胞培养等方法进行病毒分离，然后通过病原学特性来鉴定病毒种类。
5. 鉴定：根据瘟猪热、口蹄疫等不同病的特点，使用不同的鉴定方法进行检测。
分子生物学检测是一种较为新兴的病原学检测方法，它通过检测病原体的核酸来快速鉴定病原体的种类和数量。
该方法的优点是具有高度敏感性和特异性，且可以同时检测多种病原体。
具体步骤包括：1. 样本处理：将采集的样本进行处理，如提取DNA或RNA。
2. PCR扩增：使用聚合酶链式反应（PCR）方法对目标病原体的核酸进行扩增。
3. 凝胶电泳：将扩增产物进行凝胶电泳分析，通过检测扩增产物的大小和形状来确定病原体的种类和数量。
4. 鉴定：通过比对已知病原体的基因序列数据库来进行鉴定。
在进行猪病实验室检测时，还需注意以下事项：1. 选择可靠的实验室：确保实验室具备专业的设备和技术人员，能够提供准确可靠的检测结果。
2. 样本采集和处理：准确采集样本，并进行适当的处理，以确保样本的质量。
3. 通风与消毒：实验室空间应具备良好的通风条件，并定期进行消毒和清洁，以防止交叉感染。
4. 防护措施：实验室工作人员应该严格按照防护规定进行工作，戴好口罩、手套等防护用品，避免接触到有害物质。
中小规模养猪场猪病实验室检测技术及注意事项
中小规模养猪场猪病实验室检测技术及注意事项引言养猪是我国重要的农业产业之一，但养殖过程中经常会遇到各种猪病问题。
为了迅速、准确地掌握猪病的发生情况，中小规模养猪场需要建立猪病实验室，进行病原检测，以便及时采取相应的防治措施。
本文将介绍中小规模养猪场猪病实验室检测技术及注意事项。
一、猪病实验室检测技术1. 核酸检测技术核酸检测技术是目前常用的病原检测技术之一，可以用于病原细菌、病毒、寄生虫等的检测。
核酸检测技术主要包括聚合酶链反应（PCR）和实时荧光定量PCR（qPCR）两种方法。
这两种方法具有高灵敏度、高特异性和准确性的特点，可以快速、准确地检测猪病原。
血清学检测技术是通过检测病原体抗体或抗原在血清中的存在与浓度来判断是否感染病原体。
常用的血清学检测方法有血清中和试验、酶联免疫吸附试验（ELISA）、补体结合试验等。
这些方法可以用于检测猪病毒、细菌等病原体的感染情况。
3. 细菌培养技术细菌培养技术是通过将病原细菌取出并培养于适宜的培养基上，观察和鉴定其形态、生理生化性质，从而确定病原细菌的种类和数量。
细菌培养技术对于一些病原细菌的检测具有重要意义，可以帮助病原检测实验室进一步了解猪病原的特性和变异情况。
1. 实验室环境猪病实验室应设置在相对封闭的环境中，以防止病原体的传播。
实验室应定期进行消毒和清洁，以确保实验室的卫生安全。
2. 人员防护进行猪病实验室检测时，人员应佩戴适当的防护设备，如口罩、手套、实验服等，以避免接触病原体造成感染。
3. 样品采集与保存采集样品时，注意避免交叉感染，使用无菌采样器具，并尽量避免污染。
为了保持样品的完整性和有效性，样品应保存在适宜的温度和环境条件下，并按照标准要求及时送检。
4. 病原体分类与鉴定在进行猪病实验室检测时，要根据不同的病原体选择合适的检测方法，并进行有效的鉴定和分类。
进行病原鉴定时，需参照相关标准和指南，确保检测结果的准确性和可靠性。
5. 结果解读与报告对于实验室检测的结果，应仔细解读并及时报告给养猪场负责人。
屠宰检疫中几种常见猪病检疫程序和处理
屠宰检疫中几种常见猪病检疫程序和处理作者：朱保权来源：《畜牧兽医科学》 2018年第8期1?屠宰检疫中猪病检疫程序1.1?生猪入场的查证验物对入场的生猪，首先查看动物有没有产地检疫证、动物免疫证，证明是否由兽医站动检人员签发，有无伪造或涂改，是否超过有效期，物证是否相符。
根据不同情况分别做出不同处理，最后填写好入场登记表，包括圈主畜主的名字、进场日期、来源地、数量、产地检疫数、免疫数、耳标数、外观症状、合格数、不合格数、检疫员姓名等。
对物证不相符和不符合规定要求的。
猪只一律打回原产地不能入场，对证物相符查验合格的猪方能进入屠宰场。
在对生猪进行屠宰之前需要先进行检疫工作，因为只有这样才能及时将已经患病的猪在屠宰之前就有效的鉴别出来，这样就能很好的将患病生猪和健康的生猪有效的隔离开来，从而就能在很大程度上避免疾病的大范围传播，避免不必要的经济损失。
在屠宰之前的检疫工作主要有4个程序，分别如下：准宰，这一程序只有是在经过检疫合格之后的生猪才能正常的进行屠宰；急宰，这一程序主要指的是在对生猪进行屠宰之前，对一些患有疾病的生猪进行检疫，在确定存在疾病可是又不会对最终动物食品安全卫生造成影响的话，就需要对其进行尽快的屠宰；缓宰，这一程序主要指的是对于那些已经患有疾病可是能够得到有效治疗的生猪，而且疾病治愈率可能性也十分高就可以放缓屠宰禁宰，对于那些患有较为严重疾病的生猪不能进行屠宰，还需要对其进行隔离处理[1]。
1.2?宰后检疫处理宰后检疫这一程序也是屠宰检疫过程中较为重要的一项程序，主要是在屠宰之后对猪肉产品质量进行检疫，宰后检疫这一工作能够及时的检查出肉产品质量是否低下，同时也能够检疫出哪些肉品是对人体有害的，这样相关人员就能够对其进行及时的处理，避免因为上市而造成危害。
在进行宰后检疫处理的过程中，其主要程序大多是选择猪某一部位依照某一限度来进行检测，如果在检疫过程中发现肉品已经发生了病变的话，就要及时对刀具进行消毒处理，避免刀具在今后使用过程中造成其它猪肉感染。
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猪病诊断技术规范一、致病性大肠杆菌的检测1 引用标准参考NY/T 555-2002（动物产品大肠杆菌、粪大肠菌群和大肠杆菌的检测方法）。
2 范围适用于猪大肠杆菌病的诊断。
3 检测方法3.1 材料3.1.1 营养肉汤3.1.2 营养琼脂3.1.3 EMB3.1.4 TSI3.1.5 IMViC生化鉴定管3.1.6 小白鼠3.2 分离培养a)将采集的肝、脾、心血或肠内容物等分别接种伊红美兰琼脂平板（同时接种营养肉汤增菌备用），置37 ℃培养18~24 h。
b)观察培养特性，挑取黑色有金属光泽的菌落，用该菌落涂片，革兰氏染色，镜检。
c)如可见到两端钝圆并多以单个存在的革兰氏阴性粗短杆菌，应取5~10个典型菌落再接种于TSI琼脂。
d)同时挑取典型菌落接种营养琼脂，37 ℃培养16~18 h的菌液用于生化特性鉴定。
3.3 生化鉴定挑取上述菌落纯培养物接种以下生化培养基和乳糖发酵管，(36±1) ℃培养24 h 后观察结果。
3.3.1 靛基质试验：a)滴加Kovacs氏靛基质试剂0.1 mL于靛基质试验培养基中混合，观察结果。
- 1 -b)出现红色环的为反应阳性；出现黄色环的为反应阴性。
3.3.2 甲基红（MR）试验a)滴加甲基红指示剂0.2 mL于MR-VP培养基中混合，观察结果。
b)出现红色为阳性反应；出现黄色为阴性反应。
3.3.3VP试验a)滴加VP试剂甲液0.2 mL于MR-VP培养基中混匀，再滴加VP试剂乙液0.1 mL 混匀，静置，观察结果。
b)在15 min内出现红色的为阳性反应；无颜色变化的为阴性反应。
阴性结果1 h 后再观察一次，出现红色也为阳性反应。
3.3.4 枸橼酸盐试验：观察培养基颜色变化，出现蓝色为阳性反应；不变色为阴性反应。
3.4 大肠杆菌鉴定结果应符合表1要求。
表1 大肠杆菌鉴定结果MR VP 枸橼酸盐鉴定靛基质-- + + 典型大肠埃希氏杆菌--- + 非典型大肠埃希氏杆菌+ - + + 典型柠檬酸盐杆菌+ -- + 非典型柠檬酸盐杆菌+ ---典型产气杆菌+-+-非典型产气杆菌由此可初步报告为致病性大肠杆菌。
1出现表的生化反应类型时，如果为组织样品，如果为粪便，尿液，饲料，饮水，应进一步做致病性试验。
3.4 致病性试验20g16~18 h37 取经营养肉汤℃培养后的纯化菌株培养液，分别腹腔接种体重a)12，／cfu×1（含菌量约为每只只，2~3左右的小白鼠，每株接种0.3 mL10mL）同时用相同数量的小白鼠接种无菌肉汤作对照。
小时内出现b)饲养观察、记录死亡数，并从死亡鼠的心、肝中回收接种菌。
在24 死亡的可报告为致病性大肠杆菌。
- 2 -4 药敏试验a)挑选琼脂平板上典型菌落接种营养肉汤培养中，37 ℃培养16~18 h，菌液用于药敏试验。
9 cfu／将肉汤培养物（用标准比浊管比较达相同浊度）稀释至含菌量为1×10b) mL，摇匀后蘸取菌悬液均匀涂布于琼脂平板上，然后用无菌镊子将药敏片贴附其上，每纸片2~5张，置37 ℃培养24 ｈ后观察。
c)根据抑菌圈大小来判定其对药物的耐受性，选择敏感药物。
二、沙门氏菌的检测1 引用标准参考NY/T 550-2002（动物和动物产品沙门氏菌检测方法）。
2 范围适用于猪沙门氏菌病的诊断。
3 检测方法3.1 材料3.1.1 SC3.1.2 DHL3.1.3 TSI3.1.4 赖氨酸脱羧酶（LD）3.1.5 邻-硝基酚-β-D-半乳糖苷（DNPG）3.1.6 甘露醇糖发酵管3.2分离培养a)采集疑似病例的肝、脾、心血或肠内容物样品。
b)无菌剪取肝、脾样品1 g，投入10 mL SC增菌液中（血液、粪便样品可以采适量直接投入10 mL增菌液），36±1 ℃培养18~24 h。
c)取一接种环增菌液划线接种于DHL琼脂平板上，36±1 ℃培养18~24 h。
观察平板上菌落生长形态。
沙门氏菌在DHL平板上呈无色半透明，产硫化氢（HS），2菌落中心黑色或几乎全黑色。
- 3 -3.3 生化鉴定a)挑取DHL平板上可疑菌落3~5个，每个菌落先洗入TSI培养基冷凝水中，继而在斜面上划线接种并高层穿刺接种。
b)再挑取同一菌落依次接种氨基酸脱羧酶发酵试验（LD）和ONPG，甘露醇糖发酵管三支生化管，若菌落偏小，二次挑取菌落有困难，可用接种环醮取TSI 培养基中冷凝水接种其余生化管，36±1 ℃培养18~24 h（挑取菌落后的平板，应置于4 ℃冰箱保留48 h以备复查）。
c)按表1记录反应结果，对照表2进行判定。
d)凡符合表2生化反应模式，可报告为沙门氏菌。
+-％a1％4 药敏试验a)挑选DHL平板上典型菌落接种营养肉汤培养中，36±1 ℃培养16~18 h，菌液用于药敏试验。
- 4 -9 cfu10／将肉汤培养物（用标准比浊管比较达相同浊度）稀释至含菌量为1×b)mL，摇匀后蘸取菌悬液均匀涂布于琼脂平板上，然后用无菌镊子将药敏片贴附其上，每纸片2~5张，置36±1 ℃培养24 ｈ后观察。
c)根据抑菌圈大小来判定其对药物的耐受性，选择敏感药物。
三、产气荚膜梭菌的检测1 引用标准自定标准。
2 范围适用于猪产气荚膜梭菌病的诊断。
3 材料3.1 绵羊血琼脂3.2 牛乳培养基。
4 组织染色镜检+，直杆状，两端钝圆，单在或成双，G对疑似病例的肠道黏膜涂片，魏氏梭菌呈无鞭毛，不运动。
芽孢大而卵圆，位于菌体中央或近端，多数菌株可形成荚膜。
5 分离培养可将肠道内容物接种血平板，37 ℃厌氧培养18～24 h后观察。
菌落特点：魏氏梭菌在血平板上可形成直径2～5 mm、圆形、边缘整齐、灰色至灰黄色、表面光滑半透明、圆屋顶状菌落，有双层溶血环。
可通过镜检对形态进一步确定。
6 生化鉴定对牛乳培养基的“暴烈发酵”。
7 肠内毒素检查采集空肠后段或结肠前段内容物，加适量生理盐水稀释，经离心沉淀后取上清液分成两份，一份加热（60 ℃30min）。
两份上清液分别静脉注射家兔（1～3ml）或小鼠（0.1～0.3ml）。
如有毒素存在，不加热组动物常于数分钟至数小时内死亡，而加热组动物不死亡。
8 报告- 5 -因为正常人畜肠道内存在此菌，并且发病菌主要靠在肠道内产生毒素致病，细菌本身并不侵入机体。
因此只有细菌分离和肠毒素检查都符合，并结合临床症状才能报告产气荚膜梭菌感染。
鉴别A型和C型要靠中和保护试验。
四、猪痢疾诊断1 引用标准参考NY/T 545-2002。
2 范围适用于猪痢疾（SD）的实验室诊断。
3 粪便中Sh显微镜检查3.1 材料3.1.1 器材：显微镜，暗视野镜头，玻片及盖玻片，酒精灯等3.1.2 染色液：结晶紫染色液或稀释的石炭酸复红。
3.1.3 样品：病猪新鲜粪便（含粘）或直肠拭子或大肠内容物及黏膜3.2 操作方法3.2.1 染色样品制作：取样品直接抹片，干燥，火焰固定，以1.2.2结晶紫液或稀释复红染色2 min~3 min，水洗，吸干后待检。
3.2.3 悬滴样品制作：取样品少许悬于生理盐水，待检。
每份样品最少制片2张3.2.4 显微镜检查：染色样品以油镜直接观察，悬滴样品在暗视野400~1000倍镜头下观察。
3.3 结果判定典型Sh菌体长6 μm~8.5 μm，呈2~5个密螺旋体，两端尖锐，呈蛇样活泼运动。
当视野中有数量（3~5条以上）Sh样菌体时，在获培养前，可作为诊断的重要参考。
4 分离培养和鉴定4.1 材料准备4.1.1 器材：厌氧培养装置及使用方法，细菌学实验常规器材，外科手术器材，微孔滤器和0.65 μm滤膜。
- 6 -4.1.2 试验动物：小鼠（20 g左右）4.1.3 试剂：PBS(0.01M，pH7.2)，生理盐水，多粘菌素，TSA。
4.1.4 样品：病猪新鲜粪便或大肠粘膜刮取物（含粘液）。
对死猪或扑杀猪大肠分段结扎（每段10cm），分离取出。
样品应尽早分离培养，也可0～4 ℃保存4～7 d。
4.2 操作方法4.2.1 样品种Sh镜检将样品少许摸片染色或作成悬滴标本，镜检，观察Sh有无活力。
含菌量少且无活力者，则难以分离成功。
4.2.2 分离培养4.2.2.1 直接划线分离法：即取样品直接在TSA上划线接种若干皿。
4.2.2.2 集菌法：先将样品以生理盐水或PBS作1：5稀释，2000 r/min，弃去沉淀。
将上清液再以6000～8000 r/min离心20 min。
取沉淀划线接种TSA若干皿。
-6-8。
取各梯度稀释～10稀释法：将样品或集菌法的沉淀物作倍梯度稀释至10104.2.2.3液各1滴，分别划线接种于TSA上，（每梯度稀释液最少接种3皿）。
接种后的培养皿置厌氧罐内进行厌氧培养。
若上述稀释液中加入多粘菌素200 U/mL～300 U/mL，可提高分离率。
4.3 结果判定4.3.1 观察每隔2～4 d开罐检查一次，共2～4次，观察有无溶血区及溶血菌落。
致病性Sh呈强β溶血，一般看不见菌落。
当培养条件适宜时，再溶血区可见到云雾状菌苔。
无害蛇样螺旋体等呈弱β溶血。
4.3.2 移植纯化先作溶血区内物质涂片，染色镜检。
如见Sh样菌体，可在无菌落溶血区内移取小块琼脂划线于TSA若干皿。
如此每隔2天移植一次，一般2~4次后即可纯化和保存。
4.3.3猪蛇样螺旋体鉴定4.3.3.1 溶血试验将猪蛇样螺旋体、无害蛇样螺旋体或毛肠蛇样螺旋体及被检菌株，分别划线于同一TSA上不同区内，经48 h培养后，观察比较其溶血程度。
4.3.3.2 肠致病性试验- 7 -每菌株至少接种6只小鼠，将小鼠停饲24 h后，每只每次灌服1 mL（含菌3～5亿），次日再灌服一次，15 d后剖检观察盲肠病变。
感染后50％出现腹泻和病变者，则为致病性Sh。
五、猪巴氏杆菌病诊断技术1 引用标准参考NY/T 564-2002。
2 范围适用于猪巴氏杆菌病的检测。
3 材料3.1 改良马丁氏琼脂3.2 马丁氏肉汤3.3 常用生化培养基。
4 组织染色镜检用肝脏组织或心血摸片或纯培养物染色呈阴性，瑞氏染色呈两极浓染的球杆菌。
5 病原分离鉴定将濒死前或死后数小时内以无菌手术采取病死猪的心血、肝脏组织，接种于改良马丁氏琼脂斜面，进行分离。
培养18～24 h后，改良马丁琼脂斜面生长纯粹的培养物，呈微蓝色菌台或菌落。
马丁肉汤培养物生长为均匀浑浊，不产生菌膜。
6 生化鉴定本菌发酵葡萄糖、果糖、半乳糖，多数发酵蔗糖，不发酵乳糖、肌醇、菊糖、水杨素及鼠李糖，吲哚试验和氧化酶试验阳性。
7 诊断判定根据临床症状和病理变化，加上涂片染色镜检，可对本病作出初步的诊断，但确诊要靠病原分离鉴定。
- 8 -六、猪链球菌病诊断技术1 引用标准参考GB/T 199 15.2-2005和GB/T 199 15.9-20052 范围适用于猪链球菌病诊断。