不发酵革兰阴性杆菌

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产碱杆菌属
临床意义

人体的正常菌群 医院感染的病原菌之一
生物学特性
革兰阴性杆菌 周鞭毛、有动力 最适生长温度为 25~35℃ 普通培养基生长



分离培养与鉴定



pH至8.6为本菌特点 氧化酶阳性 触酶阳性 不分解任何糖类 O-F基础培养呈碱性 脲素酶阴性 不液化明胶
第四节 黄杆菌属
分类

短黄杆菌 (F.breve) 脑膜炎败血性黄杆菌 (F.meningospticum) 芳香黄杆菌 (F.odoratum) 水田黄杆菌 (F.mizutaii) 嗜糖黄杆菌 (F.multrivorum) 嗜醇黄杆菌 (F.spiritivorum)

1.分类

假单菌属按rRNA同源性分为5群及未确定rRNA
同源群有关的种

一群需氧、不发酵葡萄糖
无芽胞,有鞭毛
氧化酶阳性的革兰阴性杆菌
多为条件致病菌
2.临床意义

假单胞菌属分布广泛,人类不发酵菌感染 中,假单胞菌占70%~80%,主要为铜绿假 单胞菌,其他较为常见的菌种有嗜麦芽窄 食单胞菌、鲍曼不动杆菌等

临床经验用药可选磺胺及大环内脂类的红
霉素。

临床上常见的脑膜炎败血黄杆菌及芳香黄
杆菌等对广谱抗菌药有耐药性,所以最好
根据药敏试验选择用药。
第五节 莫拉菌属
分类

莫拉菌属(Moraxella)属莫拉菌科(Moraxellaceae) 医学上重要的莫拉菌有: 腔隙莫拉菌(M. lacunata) 卡他莫拉菌(M.catarrhalis) 非液化莫拉菌(M. nonliquefaciens) 奥斯陆莫拉菌(M. osloensis) 亚特兰大莫拉菌(M. atlantae) 狗莫拉菌(M. canis) 林肯莫拉菌(M. lincolnii)
临床意义

引起眼结膜炎、气管炎、肺炎、脑膜炎、
脑脓肿、心包炎、心内膜炎及泌尿生殖系
统炎症
微生物特性

革兰阴性球杆菌

呈双短链状排列,
具有多形性
微生物检验
分离培养:

营养要求较高 生长温度32~35℃ 血琼脂平板上生长良好 针尖大小的圆形凸起、 光滑、半透明、边缘整 齐不溶血的菌落。
葡萄糖产酸
+
+ + 端鞭毛
尿素
- 无色杆菌属 + 土壤杆菌属
+
假单胞菌属
第 一节 假单胞菌属 (Pseudomonas)
一、 概述 1. 分类 2. 临床意义 3. 微生物特性 4.微生物检验 (1)检验程序 (2)鉴定 (3)药物敏感性试验(Antibacterial Susceptibility Test)



黄杆菌属 (Flavobacterium) 艾肯菌属 (Eikenella) 土壤杆菌属 (Agrobacterium) 黄单胞菌属 (Xanthomonas) 丛毛单胞菌属 (Comamonas)
不发酵革兰阴性杆菌
常见不发酵革兰阴性杆菌的初步分群鉴定
试验 氧化酶
O/F试验 假单胞菌属 无色杆菌属 黄杆菌属 不动杆菌属 产碱杆菌属 丛毛菌属 莫拉菌属

第二节 不动杆菌属
分类:



醋酸钙不动杆菌(A.calcoaceticus) 洛菲不动杆菌(A.lwoffi) 溶血不动杆菌(A.haemolgticus) 鲍曼不动杆菌(A.baumannii) 琼氏不动杆菌(A.junii) 约翰逊不动杆菌(A.johnsonii)
临床意义
医院感染的常见菌之一 引起败血症、新生儿及婴幼儿的化脓性 脑膜炎
生物学特性
革兰阴性杆菌 无鞭毛、无动力、 无荚膜、无芽胞 需氧代谢

氧化酶、触酶、磷酸 酶阳性
分离培养与鉴定

血琼脂培养基 生长温度为35℃ 菌落:光滑、有光 泽、边缘整齐,淡 黄色,也有的呈黄 色或棕黄色
药物敏感试验及结果解释
微生物检验
分离培养: 营养要求苛刻,生长缓慢 生长温度为35℃ 最适pH6.7~7.0 初次分离必须采用(BCYE) 3~5天可形成1~2mm直径 的光泽菌落

核酸检测:是快速特异的方法,采用DNA
探针及PCR扩增rRNA的方法均可用于军团

为条件致病菌

在不发酵菌的感染中仅次于假单胞菌,近
年呈上升趋势
生物学特性

革兰阴性杆菌,多为球杆 状,常见成对排列 无芽胞,无鞭毛 专性需氧菌 生长温度为35℃ 普通培养基,麦康凯、血 平板均生长


氧化酶阴性,动力阴性, 硝酸盐试验阴性
微生物检验(检验程序)

血琼脂培养基:菌落 圆形、灰白色、光滑、 边缘整齐、直径 2~3mm 而洛菲不动杆菌菌落 小,直径为1~1.5mm
临床意义
引起肺炎型和非肺炎型(庞蒂亚克热Pontiac fever)感染 肺炎型:多器官损害,肺部、消化道及神经系统症 状及体征,致死率高 医院感染可高达23% 慢性心、肺、肾病变、艾滋病或接受免疫抑制剂者 易发本病,且死亡率高达45%

临床意义
空气-乳胶微粒传播
发病机制:①内毒素和细胞产生的多种酶
生物学特性
革兰阴性杆菌 无芽胞、无荚膜 伪马勒鼻伯克霍尔德菌一端有丛鞭毛(1~4 根), 4℃不能生长 马勒鼻伯克霍尔德菌无鞭毛无动力,42℃ 不生长

微生物检验



分离培养与鉴定 需氧菌 生长温度35℃ 普通培养基、血琼脂、麦康凯 生化鉴定 荧光直接法染色镜检,可快速诊断
铜绿假单胞菌(P. aeruginosa)
检验结果分析与报告: 诊断一定要与临床表现相结合 治疗过程中,3-4天后重复药敏测试
铜绿假单胞菌(P. aeruginosa)
耐药机制:
①产酶:金属酶,OXA酶
Baidu Nhomakorabea
②外膜蛋白的改变(Outer membrane proteins,OMP)
为主要机制 ③主动泵出机制:对喹诺酮类,
3.微生物特性

革兰阴性、无芽胞、专性需氧
有端鞭毛或丛鞭毛
生长温度范围广,最适生长温度为35℃
产生各种水溶性色素:绿脓素、脓玉红素、荧光
素、脓褐素

对理化因素耐受性较强,对多种抗生素耐药
4.微生物检验

检验程序 鉴定
药物敏感性试验按NCCLS(National
Committee for Clinical Laboratory Standards)推荐,
+ O/+/-
+ O +/-
+/O +/-
O/-
+ +
+ +
+/-
动力
注:+:90%以上阳性;-10%以下的阳性;+/-:约70%为阳性;O:为氧化。
常见不发酵菌的鉴定双岐索引
- 不动杆菌属 葡萄糖产酸 黄色素 - 摩拉氏菌属 - + 黄杆菌属 +

OX
+
非发酵菌
动力
- OX
嗜麦芽窄食单胞菌 - 产碱杆菌属
第九章 不发酵革兰阴性杆菌
陈端
不发酵革兰阴性杆菌

概念:一大群不发酵葡萄糖或仅以氧化形 式利用葡萄糖的需氧或兼性厌氧、无芽胞 的革兰阴性杆菌。
不发酵革兰阴性杆菌



假单胞菌属 (Pseudomonas) 产碱杆菌属 (Alcaligenes) 不动杆菌属 (Acinetobacter) 莫拉菌属 (Moraxella) 无色杆菌属 (Achromobacter) 金氏杆菌属 (Kingella)
酶类
2.生物学特性
革兰阴性,长短不一 单鞭毛 生长温度25~42℃ 氧化酶阳性 还原硝酸盐、分解尿素、 精氨酸酶阳性
3.微生物检验(检验程序) (1)分离培养与鉴定: 标本可接种于血琼脂平板培养基和选 择性培养基 鉴定根据镜下特征、菌落形态、生化
反应等
铜绿假单胞菌(P. aeruginosa)


血平板上毛玻璃 样,金属光泽, 生姜味 可产生多种色素: 荧光素与绿脓素
铜绿假单胞菌(P. aeruginosa)

绿脓素
铜绿假单胞菌(P. aeruginosa)
(2)抗原检测:血清学分型、噬菌体分型 (3)核酸检测:质粒指纹图分析、脉冲场凝 胶电泳分析(PFGE pulsed field gel electrophoresis)、基因芯片、PCR技术、 16SrDNA分型鉴定技术
MexA-MexB-OprM及MecC-MexD-Oprj
④整合子:1类,3类
三、马勒伯克霍尔德菌与伪马勒伯克霍尔德菌

属于rRNA第II群 鼻疽病与类鼻疽病的病原体 2004年NCCLs称为可能成为生物恐怖的细菌
马勒伯克霍尔德菌与伪马勒伯克霍尔德菌
临床意义

两菌均人兽共患病原菌 人类感染是经伤口、粘膜、呼吸道 急性患者可有高热、衰竭等全身症状 肺鼻疽病 、皮肤鼻疽病、内脏脓肿、 菌血症、脓毒血症
微生物检验
鉴定: 氧化酶阳性 触酶阳性 无动力 不分解任何糖类 吲哚试验阴性
药物敏感试验及结果解释
对青霉素类敏感 对头孢类、四环素类、喹诺酮类、氨基糖 甙类药物均为敏感 脑炎或脑膜炎、脑脓肿应注意药物通过血 脑屏障的问题

第六节 军团菌属
分类




军团菌属(Legionella) 属于军团菌科 (Legionellaceae) 常见的与人类疾病有关的军团菌: 嗜肺军团菌(Legionella pneumophila) 米克戴德军团菌(L. micdadei) 长滩军团菌(L. longbeachae) 杜莫夫军团菌(L. dumoffii) 波兹曼军团菌(L. bozemanii)
分为4组:A,B,C,D
二、铜绿假单胞菌(P. aeruginosa)

1.临床意义:铜绿假单胞菌在自然界分布较 为广泛,因此很容易污染器械而造成感染 机会
致病机制
粘附素:粘附
结构成分 多糖似荚膜物质
毒素 毒力因子
内毒素:LPS 外毒素:A 阻止真核细胞蛋白质合成 S 干扰吞噬杀菌作用 绿脓素:具有氧化还原活性,催化超氧化物和 过氧化氢产生有毒基团 弹性蛋白酶:丝氨酸蛋白酶(Las-A) 降解弹性 锌金属蛋白酶(Las-B)蛋白 磷脂酶C:分解脂质和卵磷脂,损伤组织细胞
四、嗜麦芽窄食单胞菌
分类

属于假单胞菌科的rRNA同源群Ⅴ

嗜麦芽窄食单胞菌(S.maltophilia)和S.
africana
临床意义

为条件致病菌 呼吸道、泌尿道、伤口等部位感染,菌血 症及心内膜炎。

在不发酵菌引起的感染中,仅次于铜绿假
单胞菌和鲍曼不动杆菌,居临床分离阳性
率的第三位。
生物学特性

药物敏感试验及结果解释

Kirby-Bauer法做药敏试验,药物的选择与假 单胞菌抗生素的分组相同 鲍曼氏不动杆菌,对全部氨基青霉素、一

代二代头孢菌素和一代喹诺酮类抗生素天
然耐药
第三节 产碱杆菌属
分类

粪产碱杆菌(A.faecalis) 皮乔特产碱杆菌(A.Piechaudii) 粪产碱杆菌亚型(A.faecalis typeⅡ) 木糖氧化产碱杆菌(A.xylosoxidans) 脱硝亚种(Subsp.denitrificans) 木糖氧化亚种(Subsp xylosoxidans)
②裂解红细胞
③消化卵黄囊
生物学特性


革兰阴性杆菌 菌体呈线状 无芽胞,无荚膜,有端 鞭毛或侧鞭毛 严格需氧 触酶阳性 可液化明胶 不分解糖类 部份菌株氧化酶阳性
微生物检验

临床标本:痰、气管分泌物、胸水和血
液为主。

病理组织标本:必须制成悬液,再进行
涂片和分离培养。

环境污染标本:应先浓缩再接种。





嗜温黄杆菌 (F.thalpophilum) 薮内黄杆菌 (F.gaduuchiae) IIb群黄杆菌 (F.group IIb) IIe群黄杆菌 (F.group IIe) IIh群黄杆菌 (F.group IIh) IIi群黄杆菌 (F.group IIi)
临床意义


是条件致病菌

革兰阴性,端鞭毛,(1~8)根 有动力、无芽孢、无荚膜 生长温度为35℃,4℃不生长 血琼脂、普通培养基 菌落中等大小、圆形、光滑、湿润、产生 不溶血的黄色色素

生化鉴定:氧化酶阴性 液化明胶 水解七叶苷 赖氨酸脱羧酶阳性 氧化分解麦芽糖
药物敏感试验及结果解释

治疗首选磺胺类:TMP/SMZ;喹锘酮类:环丙 氟派酸或替卡西林/棒酸 泰能(Imipenem)天然耐药 药敏试验纸片法仅有三种抗生素:左氧氟沙星、 米诺环素、复方磺胺有折点。其他药敏试验应选 用肉汤、琼脂稀释法作MIC,或采用E-TEST的 方法。
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