菠菜色素的提取

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菠菜色素的提取和分离实验报告

菠菜色素的提取和分离实验报告

菠菜色素的提取和分离实验报告
一、实验目的:
本次实验的主要目的是学习和掌握菠菜色素的提取和分离技术,了解菠菜中色素的提取和分离原理以及实验操作过程。

二、实验方法:
1、制备样品:将新鲜的菠菜叶片洗净晾干,切碎成小块备用;
2、提取菠菜色素:将切碎的菠菜叶片加入适量无水乙醇,研
磨成泥状物,过滤后取得浸提液;
3、进一步提取:将浸提液过滤并再次提取,过滤得到过滤液;
4、分离:将过滤液使用氯仿进行分离,水相和氯仿相层的色
素分离;
5、测定:将得到的色素溶于适量乙醇,测定菠菜色素的吸光度。

三、实验结果:
经过提取和分离,得到了深绿色的液体,与纯菠菜色素溶液比
较后发现两者颜色相似。

测定得到吸光度为0.54。

四、实验分析:
本次实验成功提取和分离了菠菜色素,并得到了较为准确的测定值。

在实验中,氯仿和无水乙醇是常用的有机溶剂,主要是因为在这些溶剂中菠菜色素的溶解度较高。

但是,在实验操作过程中需要注意保持实验环境的卫生和安全,氯仿是一种易挥发的有机物,需要注意防火和防烟。

五、实验结论:
通过本次实验,我们成功地提取和分离了菠菜色素,并且得到了较为准确的测定值。

同时,我们也了解了菠菜中色素的提取和分离原理以及实验操作过程。

本次实验的成功对于今后相关实验研究以及实际应用具有一定的指导意义。

菠菜色素的提取和分离实验报告

菠菜色素的提取和分离实验报告

菠菜色素的提取和分离实验报告菠菜色素的提取和分离实验报告引言:菠菜是一种常见的绿叶蔬菜,富含多种营养物质,其中包括一种被称为菠菜色素的成分。

菠菜色素是一类天然的色素,具有良好的生物活性和抗氧化性质。

本实验旨在通过提取和分离的方法,研究菠菜色素的性质和应用。

实验材料和方法:材料:新鲜菠菜叶片、无水乙醇、丙酮、石油醚、二氯甲烷、硅胶G柱、色谱柱、色谱试纸等。

方法:1. 取适量新鲜菠菜叶片,洗净并切碎成细末状。

2. 将菠菜末置于研钵中,加入适量无水乙醇,浸泡30分钟,搅拌均匀。

3. 将菠菜浸提液过滤,收集滤液。

4. 取少量滤液,加入石油醚,振荡混合,使菠菜色素溶于石油醚中。

5. 将石油醚层收集,加入少量无水乙醇,使溶液变为淡绿色。

6. 将淡绿色溶液倒入色谱柱中,以无水乙醇为洗脱剂,收集洗脱液。

7. 将洗脱液浓缩,得到菠菜色素。

实验结果和讨论:通过以上实验步骤,我们成功地从菠菜中提取和分离出了菠菜色素。

在实验过程中,我们使用了无水乙醇作为提取剂,因为乙醇能够有效溶解菠菜中的色素成分。

同时,我们使用石油醚作为分离剂,因为石油醚能够与菠菜色素发生亲和作用,使其溶于石油醚中。

在分离过程中,我们使用了色谱柱和色谱试纸进行分离和检测。

色谱柱是一种常见的分离工具,通过其内部填充的固定相材料,能够将混合物中的成分按照其亲和性和分子大小进行分离。

我们选择了硅胶G柱作为固定相材料,因为硅胶G柱对菠菜色素具有较好的亲和性。

通过使用无水乙醇作为洗脱剂,我们成功地将菠菜色素从硅胶G柱中洗脱出来。

在实验中,我们观察到菠菜色素呈现淡绿色。

这是因为菠菜色素主要由叶绿素和类胡萝卜素等成分组成,这些成分赋予了菠菜独特的颜色。

叶绿素是一种绿色的色素,具有光合作用的功能。

类胡萝卜素则是一类黄、橙、红等颜色的色素,具有抗氧化和免疫调节等作用。

菠菜色素不仅在食品工业中有广泛应用,还在医药和化妆品等领域发挥着重要作用。

菠菜色素富含抗氧化物质,能够有效清除自由基,延缓衰老和预防疾病。

实验7菠菜色素的提取和色素分离

实验7菠菜色素的提取和色素分离

实验7菠菜色素的提取和色素分离 (6学时)一、实验目的了解薄层层析和柱层析的原理和操作 二、反应原理绿色植物如菠菜含有多种天然色素,其中胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a 和b 等以极性逐渐增加:CH 3CH 3CH 3OHCH 3CH 3CH 3HOCH 3CH 3CH 3CH 3-胡萝卜素叶黄素叶绿素a (R=CH 3)叶绿素b (R= )OC HCH 3CH 3CH 3HCH 3CH 3CH 3HCH 3CH 3CH 3CH 3N NNN CHCH 2CH 3CH 2C OOCH 3COOCH 3CH 2CH 2CH 3RO CH 3CH 3CH 3CH 3CH 3CH 3Mg在薄层层析时,上述化合物的展开速度不同;在柱层析时,流出速度有差异,可被极性不同的溶剂洗脱。

三、主要试剂与仪器 甲醇、石油醚(60~90ºC)、无水硫酸钠、丙酮、乙酸乙酯、滴管剪刀、布氏漏斗、抽滤瓶、分液漏斗、量筒、三角瓶、圆底烧瓶、常压蒸馏装置、硅胶薄层层析板、薄层层析缸、150~160目中性氧化铝四、实验步骤1、菠菜色素的提取用分液漏斗洗涤时,旋荡要轻,以防乳化。

2、薄层层析点样于距离下边缘约1cm 处; 点样要轻,以免刺破硅胶层; 薄层板在展开剂展开后,测量并记录溶剂前沿和每个斑点中心与原点中心的距离。

按公式f R溶质的最高浓度中心至原点中心的距离溶剂前沿至原点中心的距离计算胡萝卜素、叶黄素、叶绿素的R f 值 3、柱层析可用滴管代替滴液漏斗滴加洗脱剂4、最好结果的薄层板、柱层析的所有单独接收组分上交。

实验4菠菜中色素的提取与分离

实验4菠菜中色素的提取与分离

实验4 菠菜中色素的提取与分离【实验目的】1.学会用有机溶剂提取菠菜中的色素并进行分离,了解从植物中提取有机化合物的一般方法;2.学会根据物质的性质选择合适的溶剂,知道选用混合溶剂是提取物质的有效途径;3.了解利用纸色谱法分离物质的原理和操作。

【实验原理】菠菜中含有多种色素,如叶绿素(绿色)、胡萝卜素(橙黄色)、叶黄素(黄色)等。

1.菠菜中色素的提取叶绿素a、叶绿素b和胡萝卜素易溶于石油醚,叶黄素易溶于乙醇,石油醚和乙醇可以混溶。

因此,可以选择石油醚-乙醇混合溶剂来提取菠菜中的色素,然后用水洗去乙醇和少量易溶于水的杂质,这样就可得到色素的石油醚溶液。

2.色素的分离提取菠菜色素得到的石油醚溶液可用纸色谱法分离:将少量含有几种物质的溶液涂在滤纸条的一端,并在这一端用适当的溶剂(称为展开剂)润湿,在滤纸的毛细作用下,展开剂携带待分离的物质沿滤纸纤维向上移动。

由于不同的组分的移动速度不同,一段时间后,不同的组分移动的距离不同,从而达到将这些组分分离开来的目的,如下图所示。

这种分离方法称为纸色谱法,又叫纸上层析。

【实验器具】试剂:石油醚、乙醇,丙酮、无水硫酸钠、脱脂棉。

仪器:研钵、锥形瓶、漏斗、铁架台(带铁圈)、分液漏斗、大试管。

【实验过程】一、菠菜中色素的提取1.研磨:取10g菠菜切成小块,用研钵捣烂,装入锥形瓶中。

2.浸取:向锥形瓶中加入10mL石油醚-乙醇混合溶剂(体积比为1:1),塞上橡胶塞,振荡。

3.过滤:将小团棉花放在漏斗颈部,过滤浸取液(如图1)。

4.洗涤:将滤液移人分液漏斗,用10mL水洗涤两次,以除去乙醇及浸取液中的少量水溶性物质。

注意不要剧烈振荡,以防止乳化;静置分层(如图2),弃去下层(水-乙醇层),将上层(石油醚层)溶液移至干燥的小锥形瓶中。

注意:洗涤后,下层水层从下口放出,上层有机层从上口倒出。

5.干燥:加入少量无水硫酸钠,干燥,备用。

图1 图2二、色素的分离1.裁纸:取一张滤纸裁成1.5cm×20cm的长方形,注意使滤纸纤维呈竖直走向。

从菠菜中提取叶绿素实验报告6篇

从菠菜中提取叶绿素实验报告6篇

从菠菜中提取叶绿素实验报告6篇从菠菜中提取叶绿素实验报告 (1)1.1 仪器与试剂仪器:研钵、分液漏斗、显微载玻片、毛细管、层析柱(20×10 cm)、UV-240紫外分光光度计试剂:石油醚、乙醇(95%)、菠菜叶、丙酮(化学纯)、乙酸乙酯(化学纯)、无水硫酸钠、硅胶G、中性氧化铝(150目~160目)1.2 提取与分离1.2.1 浸泡法提取色素在研钵中放入20 g新鲜的菠菜叶,加入20 mL3:2(体积比)石油醚—乙醇混合液,适当研磨(不要研成糊状,否则会给分离造成困难),用倾析法将提取液转移到分液漏斗中,每次用10ml水洗涤两次,以除去萃取液中的乙醇。

洗涤时要轻轻旋荡,以防乳化。

弃去水乙醇层,石油醚层用无水硫酸钠干燥,干燥后滤入小圆底烧瓶,在水浴上蒸发浓缩至大约l m L。

1.2.2 薄层层析取四块显微载玻片,硅胶G经0.5%羧甲基纤维素钠调制后制板,在室温下晾干后在110°C活化1h。

选取效果最好的一块进行点样。

展开剂:(1)石油醚—丙酮=8:2(体积比)(2)石油醚—乙酸乙酯=6:4(体积比)取活化后的层析板,点样,放入预先选定展开剂的广口瓶。

瓶的内壁贴一张高5cm,绕周长4/5的滤纸,下部浸入展开剂中,盖上瓶盖。

待展开剂上升至规定高度时,取出层析板,晾干,做出标记。

分别用两种展开剂展开,比较不同展开剂的展开效果。

观察斑点在板上的位置并排列出胡萝卜素、叶绿素和叶黄素的Rf值的大小。

注意更换展开剂时,需干燥层析瓶,不允许前一种展开剂带入后一系统。

1.2.3 柱层析取少量脱脂棉在小烧杯中用石油醚浸润后,挤压除去气泡,放在层析柱底部。

在层析柱中加15cm石油醚。

加入中性氧化铝8克,打开柱下活塞,保持石油醚高度不变,氧化铝在柱子中堆积。

装完后,打开下端活塞,放出溶剂,直到氧化铝表面剩下1—2mm高为止(不能使氧化铝表面露出液面)。

将浓缩液用滴管加到柱顶部,打开下端活塞,让液面下降到柱面以下1mm,关闭活塞,加数滴石油醚,打开活塞,使液面下降,几次反复,使色素全部进入柱体。

菠菜色素的提取与分离(实验方案)

菠菜色素的提取与分离(实验方案)

菠菜色素的提取与分离(实验方案)
菠菜色素是一种天然的色素,在食品、药品和化妆品等领域得到广泛应用。

本实验旨在通过提取和分离菠菜中的色素,探索其化学结构和性质。

实验步骤:
1.新鲜的菠菜叶子切碎后加入乙醇中,浸泡过夜。

2.过滤得到菠菜浸液,加5%的NaCl,搅拌均匀,沉淀后过滤,收集菠菜蛋白,保留上清液。

3.将上清液进行浓缩,得到浓缩液。

4.将浓缩液加入正己烷中,振荡后离心,得到两层液体,上层为绿色菠菜色素,下层为无色的正己烷。

5.倒出上层菠菜色素液,用NaOH溶液调整其PH值,得到纯净的菠菜色素。

实验原理:
菠菜色素是一种叶绿素和类胡萝卜素的混合物,其中叶绿素是绿色的,未成熟的植物中含量较高,而类胡萝卜素是黄色的,成熟的植物中含量较高。

为了提取出纯净的菠菜色素,需要将其与其他杂质分离开来。

在实验中,我们选择了乙醇作为提取菠菜中色素的溶剂,乙醇对叶绿素和类胡萝卜素有较好的溶解作用。

随着浸泡时间的延长,色素的溶解度不断增加。

在分离紫胡萝卜素和叶绿素时,利用了两种色素溶解度不同的特性。

正己烷是一种非极性溶剂,对叶绿素有良好的溶解度,而对紫胡萝卜素的溶解度较差。

因此,在将浓缩菠菜色素液加入正己烷中时,不同色素会分层,方便分离纯净的菠菜色素。

实验注意事项:
1.实验中使用的器材和试剂要洁净干燥,避免杂质污染。

2.提取菠菜中的色素时,要控制乙醇的浓度和浸泡时间,避免色素的损失。

3.在调整菠菜色素液的PH值时,要逐渐加入NaOH溶液,避免PH值过高导致色素分解。

4.实验过程中如有任何异常情况,应及时停止实验并处理。

菠菜中色素的提取

菠菜中色素的提取

菠菜中色素的提取及分离赵涛食品科学一实验目的1 通过绿色植物色素的提取和分离,了解天然物质分离提纯方法2 了解薄层色谱的基本原理,掌握薄层色谱的基本操作3 了解柱层析的基本原理,掌握柱层析的基本操作二实验原理菠菜的叶片中含有叶绿素(包括叶绿素a和叶绿素b)、叶黄素及胡萝卜素等天然色素。

叶绿素是绿色植物的主要色素,分子由脱镁叶绿素母环、叶绿酸、叶绿醇、甲醇、二价镁离子等部分构成。

高等植物中有两种叶绿素即叶绿素a和叶绿素b 共存,它们的含量约3:1,叶绿素a为一蓝黑色固体粉末,在乙醇溶液中为蓝绿色,并有深红色荧光,而叶绿素b为暗绿色固体粉末,其乙醇溶液为黄绿色,并有红色荧光。

叶绿素不溶于水,易溶于有机溶剂,常可用极性有机溶剂(例如丙酮、乙醇、乙酸乙酯等)从植物匀浆中提取它。

叶绿素存在于植物细胞的叶绿体中,与类胡萝卜素、类脂物质及脂蛋白复合在一起,分布在叶绿体内的蝶形体的片层膜上。

叶绿素a和叶绿素b及衍生物在600~700mm(红光)和400~500mm (蓝光)有尖锐的吸收峰,可借助这一特性来鉴定它们。

游离叶绿素很不稳定,对光和热都较敏感。

胡萝卜素是一种橙色的天然色素,属于四萜,为一长链共轭多烯,有α、β、γ三种异构体,,其中β异构体最多。

在植物组织中,它们可能以固态微粒或者以与蛋白质、脂质、或者糖类复合的形式存在,特别是在有色体中存在。

其为典型的脂溶性色素,易溶于石油醚,、乙醚而难溶于乙醇。

如遇氧化条件,易受氧化和光化学氧化形成加氧产物或者进一步分解为更小的分子,在受强热时可分解为多种挥发性小分子化合物。

叶黄素是一种黄色色素,与叶绿素同存在与植物体内,是胡萝卜素的羟基衍生物,较易溶于乙醇,在石油醚中溶解度较小。

色素所呈现的颜色和在叶绿体中的含量见下表:高等植物体内叶绿体色素的种类、颜色及含量比例项目叶绿素类胡萝卜素叶绿素a 叶绿素b β-胡萝卜素叶黄素颜色蓝绿色黄绿色橙黄色黄叶绿体内各色素的含量56 19 17 8色谱法的基本原理是利用混合物中各组分在某一物质中的吸附或溶解性能的不同,或和其它亲和作用性能的差异,使混合物的溶液流经该种物质,进行反复的吸附或分配等作用,从而将各组份分开。

菠菜色素的萃取实验原理

菠菜色素的萃取实验原理

菠菜色素的萃取实验原理
菠菜色素的萃取实验原理主要有以下几个方面:
1. 菠菜中的色素成分:菠菜中含有多种色素成分,主要包括叶绿素、胡萝卜素和花青素。

其中,叶绿素是菠菜中的主要色素成分,其具有较强的绿色。

2. 色素的溶解性:菠菜中的色素成分主要溶解在菠菜细胞的色素体中,叶绿素以及胡萝卜素等色素都是由细胞膜所包围的液泡中,而花青素存在于菠菜细胞的质体内。

3. 色素的溶剂萃取:为了获得菠菜中的色素成分,可以使用一种合适的溶剂进行色素的萃取。

常用的溶剂包括酒精、乙醚、甲醇、二氯甲烷等。

其中,酒精是一种常用的溶剂,可以溶解多种色素成分。

4. 色素的过滤和分离:在菠菜色素的萃取过程中,溶剂中会同时溶解一些杂质和其他成分。

为了使色素获得纯度提高,需要进行过滤和分离的步骤。

可以通过使用滤纸或者其他适当的过滤材料将溶剂中的杂质进行分离,从而得到纯净的菠菜色素溶液。

5. 色素的定性与定量分析:获得菠菜色素溶液后,可以通过一系列的定性和定量分析方法来分析菠菜色素的成分和含量。

例如,可以使用紫外可见光谱法来测定菠菜色素吸收的波长和强度,从而得到色素的定性和定量结果。

以上就是菠菜色素的萃取实验原理的基本过程。

不同的实验目的和方法可能会有一些差异,但总体上都是通过溶剂的萃取来获取菠菜中的色素成分,并通过过滤和分离来净化色素溶液,最后借助合适的分析方法进行定性和定量的分析。

+。

菠菜色素的提取和分离实验报告

菠菜色素的提取和分离实验报告

菠菜色素的提取和分离实验报告菠菜色素的提取和分离实验报告引言:菠菜是一种常见的食材,它不仅味道鲜美,而且富含多种营养物质。

其中,菠菜叶中的色素成分具有重要的生物学和营养学意义。

本实验旨在通过提取和分离菠菜叶中的色素,探究其组成和结构。

一、实验材料与方法:1. 实验材料:菠菜叶、无水乙醇、正己烷、醋酸乙酯、石油醚、氯仿、硅胶薄层色谱板。

2. 实验步骤:(1)菠菜叶的提取:将菠菜叶洗净并切碎,加入适量的无水乙醇中,浸泡30分钟,使色素充分溶解。

然后用滤纸过滤,收集菠菜叶提取液。

(2)色素的分离:将菠菜叶提取液与正己烷进行液液分配,重复3次,使色素分配到正己烷层中。

然后将正己烷层收集,蒸发溶剂,得到色素提取物。

(3)色素的纯化:将色素提取物溶解于醋酸乙酯中,进行液液分配,重复3次,使色素分配到醋酸乙酯层中。

然后将醋酸乙酯层收集,蒸发溶剂,得到纯化后的色素。

(4)色素的分离:将纯化后的色素溶解于石油醚中,进行液液分配,重复3次,使色素分配到石油醚层中。

然后将石油醚层收集,蒸发溶剂,得到分离后的色素。

(5)色素的鉴定:将分离后的色素溶解于氯仿中,进行薄层色谱分析。

将硅胶薄层色谱板浸泡于氯仿中,然后将色素溶液滴于色谱板上,放入色谱槽中,进行上升式开发。

开发完毕后,用紫外灯照射,观察色谱板上的色素带。

二、实验结果与分析:经过提取、分离和纯化,成功地从菠菜叶中提取到了色素。

通过薄层色谱分析,我们观察到了色谱板上的色素带,根据色素带的位置和颜色,可以初步判断菠菜叶中含有叶绿素、类胡萝卜素等多种色素成分。

三、实验总结与思考:通过本次实验,我们成功地提取和分离了菠菜叶中的色素。

然而,我们只能初步判断色素成分的种类,对于具体的结构和含量还需要进一步的分析和研究。

此外,本实验采用的是传统的提取和分离方法,还可以尝试其他更先进的技术,如高效液相色谱等,以提高分离效果和准确性。

结语:菠菜色素的提取和分离实验为我们了解菠菜叶中的色素成分提供了基础。

菠菜色素的提取与分离

菠菜色素的提取与分离

菠菜色素的提取与分离
实验材料:
1.菠菜叶:新鲜的菠菜叶作为原料。

2.无水乙醇:用于菠菜色素的提取。

3.正己烷:用于菠菜色素的分离。

实验步骤:
1.准备新鲜的菠菜叶,将其洗净并切碎成小段。

2.将切碎的菠菜叶放入一个绞肉机或搅拌机中,加入适量的无水乙醇。

搅拌均匀,使菠菜叶完全浸泡在乙醇中。

3.将浸泡好的菠菜浆放入玻璃烧杯中,放置在室温下浸泡一段时间
(通常为2-3小时),以充分提取菠菜色素。

4.将浸泡好的菠菜浆过滤,将提取得到的菠菜色素溶液收集起来,并
将其保存在一个干净的容器中。

5.取一定量的菠菜色素溶液,并用正己烷进行萃取。

将菠菜色素溶液
与正己烷按照1:1的比例混合,充分摇匀。

6.静置一段时间后,菠菜色素会分为两层,上层是正己烷层,下层是
菠菜色素层。

分离这两层,可以使用分液漏斗或者一些特殊的仪器设备来
完成。

7.分离得到的菠菜色素层即为所需的产品。

可以将其保存在一个干净
的容器中,或者对菠菜色素进行进一步的实验研究。

实验注意事项:
1.在实验过程中,应注意安全操作,避免乙醇和正己烷的接触和吸入。

2.密闭容器中的溶剂切勿满溢,以免发生外溢和溅出。

3.实验前应检查实验器材的完整性和密封性,确保实验过程的准确性
和安全性。

4.菠菜叶应该选择新鲜、无病虫害的叶片,并保持充分的洗净。

5.实验操作时要注意从装置的出口处向连接装置的玻璃瓶中逸出瓶道
的紫外光辐射。

6.实验后要及时清洗实验仪器和容器,避免菠菜色素的残留和污染。

菠菜色素的提取与分离课件

菠菜色素的提取与分离课件

超声波辅助提取法
原理
步骤 特点
微波辅助提取法
原理
利用微波的能量使植物细胞内的 水分迅速转化为蒸汽,产生压力 变化,使细胞壁破裂,促进色素
的释放和提取。
步骤
将菠菜洗净后放入微波反应器中, 加入适量有机溶剂,进行微波处
理,结束后过滤得到色素提取液。
特点
提取效率高,操作简便,但设备 成本较高,且可能对某些色素造
膜分离法
总结词
利用半透膜使不同分子量组分选择性透过,从而达到分离目的的方法。
详细描述
膜分离法是一种高效、节能的分离方法,适用于菠菜色素的精细分离。通过选择适当的半透膜,如超滤膜、纳滤 膜等,使菠菜色素在压力作用下通过半透膜,而其他组分则被截留,从而实现分离。膜分离法具有操作简便、分 离效果好等优点。
色谱分离法
总结词
详细描述
04
菠菜色素的应用研究
CHAPTER
在食品工业中的应用
天然色素
营养补充
风味改善
在医药领域的应用
药物载体
药物合成
诊断试剂
在化妆品行业的应用
美容护肤品
1
彩妆产品
2
指甲油
3
在农业领域的应用
植物生长调节剂 病虫害防治
05
菠菜色素提取与分离的 前景展望
CHAPTER
技术创新与改进
菠菜色素的提取与分离技术发展历程
早期技 术
现代技术
02
菠菜色素的提取技 术
CHAPTER
溶剂提取法
原理
特点
利用溶剂将菠菜中的色素提取出来。
操作简单,提取效率高,但有机溶剂 易挥发,对环境有污染。
步骤
将菠菜洗净、干燥后研磨成粉末,加 入有机溶剂(如乙醇、乙酸乙酯等) 进行搅拌、静置、过滤,得到色素提 取液。

有机实验-菠菜中色素的提取和分析

有机实验-菠菜中色素的提取和分析

有机实验-菠菜中色素的提取和分析
菠菜中色素的提取和分析是有机化学实验中的一个经典实验。

本实验主要是通过对菠
菜中的色素进行提取和分析,来了解天然色素的结构和性质。

实验步骤:
1.菠菜的准备
将新鲜的菠菜洗净后,去除根和水分,然后用手将菠菜叶子捏碎成小片状备用。

2.色素的提取
将捏碎的菠菜叶子放入料理机中,加入适量的酒精和石油醚,再开启料理机进行打浆,在打浆过程中注意随时观察,避免料理机出现卡顿的情况。

将打好的菠菜混合物过滤,将过滤得到的过滤液收集到干净的试管中,然后用滤纸进
行一次二次过滤,得到浅绿色的菠菜色素提取物。

3.色素的分离
4.色素的鉴定
将得到的菠菜色素溶液分别加入稀盐酸和稀碱液中,观察颜色变化,记录下来。

然后
将菠菜色素溶液加入小麦酰胺溶液中,搅拌均匀,观察颜色变化,记录下来。

实验原理:
本实验主要是利用了酒精、石油醚等有机溶剂的沸点差异,对菠菜中的色素进行了提取。

然后利用硅胶G的极性和吸附作用对菠菜色素进行了分离。

最后,通过加入稀盐酸、
稀碱液和小麦酰胺溶液来鉴定提取出来的色素种类和结构。

实验中所用到的酸和碱,可以将菠菜色素分解成不同的成分。

这些成分所表现出来的
颜色不同,可以通过色谱分析来确定其化学结构。

总结:
通过本实验,我们可以了解到菠菜中含有的天然色素,同时也可以学习到色素的分离
和分析技术。

此外,本实验还可以作为有机化学实验中的基础实验,为我们今后的学习和
研究提供了良好的基础。

菠菜色素的提取与分离实验报告

菠菜色素的提取与分离实验报告

菠菜色素的提取与分离实验报告
实验目的:探究菠菜中色素的提取与分离方法,了解菠菜色素的特性和结构。

实验原理:
菠菜中含有多种色素,包括叶绿素、类胡萝卜素等。

在本实验中,将采用乙醇提取法和硅胶柱层析法分别提取和分离菠菜中的色素。

实验步骤:
1. 将菠菜叶片切碎,加入适量的乙醇,用搅拌器搅拌均匀。

然后将混合液过滤,得到澄清的菠菜提取液。

2. 用无水硅胶将提取液转化为干燥的片状固体。

首先,在玻璃棒上将菠菜提取液和未熔化的硅胶混合,然后将其静置几分钟使其结块。

3. 将混合物放入适当大小的玻璃管中,并加上一层纯水使其达到玻璃管的顶端。

将其放在烘箱中干燥,直到片状固体完全干燥。

4. 将得到的片状固体碾碎成细粉末,然后使用硅胶柱层析法进行分离。

将硅胶填充到柱中,加入适量的乙醇,然后将菠菜粉末悬浮液倒入柱中。

根据色素的亲水性差异,使用适当的溶剂体系进行洗脱分离。

5. 收集分离得到的色素溶液,然后进行质量浓度测定和色谱分析。

实验结果:
通过乙醇提取法和硅胶柱层析法,成功得到了菠菜叶片中的色
素溶液。

通过质量浓度测定和色谱分析,确定了菠菜叶片中的主要色素成分和含量。

实验结论:
菠菜叶片中含有多种色素,其中叶绿素是主要组分。

通过乙醇提取法和硅胶柱层析法,可以有效地提取和分离菠菜叶片中的色素。

实验结果可为进一步研究菠菜色素的结构和功能提供基础。

菠菜色素提取实验报告

菠菜色素提取实验报告

一、实验目的1. 掌握植物色素提取的基本原理和方法;2. 了解菠菜中主要色素的种类、性质和含量;3. 熟悉薄层色谱和柱层析法的原理及应用;4. 培养实验操作技能,提高分析问题、解决问题的能力。

二、实验原理植物色素主要分为叶绿素、类胡萝卜素和黄酮类化合物。

叶绿素是植物进行光合作用的重要物质,主要存在于叶绿体中,具有绿色、蓝绿色和黄绿色等不同颜色。

类胡萝卜素是一类具有橙黄色、红色和黄色的色素,具有抗氧化、防癌等作用。

黄酮类化合物是一类具有黄色、绿色和蓝色等不同颜色的色素,具有抗炎、抗菌、抗肿瘤等作用。

本实验采用溶剂萃取法提取菠菜中的色素,利用不同极性的溶剂对各种色素的溶解度差异进行分离。

实验过程中,采用薄层色谱法和柱层析法对提取的色素进行分离和鉴定。

三、实验材料与仪器1. 实验材料:新鲜菠菜叶、石油醚、乙醇、丙酮、无水硫酸钠、中性氧化铝、硅胶GF254、CMC水溶液、层析板、点样毛细管、分液漏斗、旋转蒸发仪、研钵、剪刀、量筒、玻璃棒、烧杯、漏斗、层析柱、表面皿、滤纸等。

2. 实验仪器:研钵、分液漏斗、广口瓶、玻璃板、量筒、点样毛细管、抽滤瓶、载玻片、旋转蒸发仪、圆底烧瓶、丙酮、石油醚、95%乙醇、乙酸乙酯、饱和氯化钠、无水硫酸钠、硅胶GF254,CMC水溶液。

四、实验步骤1. 提取菠菜中的色素:(1)将新鲜菠菜叶洗净、晾干,用剪刀剪成小片,放入研钵中;(2)加入适量的石油醚,用研钵研磨,使菠菜叶中的色素充分溶解;(3)将提取液倒入分液漏斗中,加入等体积的乙醇,振摇、分层,收集有机相;(4)将有机相倒入烧杯中,加入适量的无水硫酸钠,搅拌,静置,过滤,得到提取液。

2. 薄层色谱分离:(1)将层析板用铅笔标记起始线,用点样毛细管吸取提取液,在起始线上点样;(2)将层析板放入装有CMC水溶液的玻璃板中,使其吸附层析液;(3)待层析液上升到一定高度时,取出层析板,晾干;(4)观察层析板上的色素带,鉴定各色素。

一种菠菜色素的提取方法

一种菠菜色素的提取方法

一种菠菜色素的提取方法
一种常用的菠菜色素提取方法是溶剂浸提法。

具体步骤如下:
1. 准备新鲜的菠菜,并将其洗净、切碎备用。

2. 将切碎的菠菜放入一个容器中,并加入足够的溶剂。

常用的溶剂包括乙醇、丙酮、甲醇等。

溶剂的选择应根据实际需要和安全要求进行。

3. 用搅拌器搅拌混合物,以促进色素的溶解和提取。

4. 将混合物放入离心机进行离心,以分离出悬浮在溶剂中的色素。

5. 将离心后的溶液过滤,以去除悬浮物和杂质。

6. 将过滤后的溶液进行浓缩,可以采用蒸发、冷冻干燥等方法。

7. 最后,将浓缩后的溶液经过一系列的纯化步骤,如溶剂萃取、柱层析等,以获得纯净的菠菜色素。

这是一种简单的菠菜色素提取方法,但具体的操作条件和步骤还需根据实际情况进行调整和优化。

同时,提取出的菠菜色素还需进行进一步的分析和检测,以确
定其化学成分和质量。

菠菜色素的提取及薄层色谱和柱色谱分离

菠菜色素的提取及薄层色谱和柱色谱分离

菠菜色素的提取及薄层色谱和柱色谱分离菠菜色素的提取及薄层色谱和柱色谱分离一、实验目的1.通过对菠菜色素的提取和分离,了解天然物质分离提纯方法;2.了解薄层色谱和柱色谱分离的基本原理,掌握柱色谱和薄层色谱分离的操作;3.通过柱色谱和薄层色谱分离操作,加深了解微量有机物色谱分离鉴定的原理。

二、实验原理1.菠菜叶中的叶绿体含有绿色素(包括叶绿素a和叶绿素b)和黄色素(包括胡萝卜素和叶黄素)两大类天然色素。

这两类色素都不溶于水,而溶于有机溶剂,故可用乙醇或丙酮等有机溶剂提取。

2.柱色谱法又称为柱层析法,固定相装于柱内,流动相为液体,样品沿竖直方向由上而下移动而达到分离的色谱法。

本法主要用于分离,有时也起到浓缩富集作用。

柱色谱法分为吸附柱层析法和分配柱层析法,本实验仅介绍吸附柱层析法。

它是根据混合物中各组分的分子结构和性质(极性)来选择合适的吸附剂和洗脱剂,从而利用吸附剂对各组分吸附能力的不同及各组分在洗脱剂中的溶解性能不同达到分离目的。

3.薄层色谱法(TLC),是将适宜的固定相涂布于玻璃板、塑料或铝基片上,成一均匀薄层。

待点样、展开后,根据比移值(R f)与适宜的对照物按同法所得的色谱图的比移值(R f)作对比,用以进行药品的鉴别、杂质检查或含量测定的方法。

薄层色谱法是快速分离和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术。

三、仪器与试剂1.仪器: 布氏漏斗、抽滤瓶、研钵、分液漏斗、显微载玻片、毛细管、层析柱( 20×3cm )、分液漏斗、普通漏斗、玻璃棒、锥形瓶、胶头滴管、烧杯(250ml和50ml)、食品保鲜膜、橡皮筋2.试剂和原材料: 石油醚(60℃~90℃)、甲醇( AR )、无水乙醇( AR )、乙醇( AR ) 、乙酸乙酯(AR) 、丙酮(化学纯)、苯( AR )、无水硫酸钠( AR )、硅胶G60型(青岛海洋化工厂,薄层层析用)、中性氧化铝(150目~160目)、菠菜叶、脱脂棉。

四、实验步骤1.硅胶板的制备:硅胶液配制→铺板→干燥→活化(1)硅胶液配制:称取20g硅胶G60型在研钵中,加入约50ml 4%CMC溶液,用研棒不断搅拌,直至感到液体变得较粘稠状,且用研棒蘸取硅胶液可见粘丝状即可;(2)铺板:用药勺取适量硅胶液置于玻璃片上,并用药勺均匀地摊开,然后将该玻璃片放在桌面上,做上下地颠动几次直至硅胶液均匀铺满即可;(3)干燥:自然晾干1小时左右;(4)活化:放在恒温干燥箱里于105-110℃干燥2~3h,然后冷却室温,取出存放在干燥器保存,待用。

实验十二-菠菜色素的提取和分析

实验十二-菠菜色素的提取和分析

实验十二- 菠菜色素的提取和分析菠菜色素的提取和分离实验目的1、通过绿色植物色素的提取,学习天然物质的提取方法;2、通过薄层色谱分析,掌握有机物色谱分析的原理和方法。

二、 实验原理1 菠菜色素的提取绿色植物如菠菜叶中含有叶绿素(绿) 、胡萝卜素(橙)和叶黄素(黄)等 多种天然色素。

叶绿素 存在两种结构相似的形式即叶绿素 a (C 55H 72O 5N 4Mg )和叶绿素 b(C 55H 70O 6N 4Mg ),其差别仅是叶绿素 a 中一个甲基被甲酰基所取代从而形成了叶 绿素 b 。

它们都是吡咯衍生物与金属镁的络合物, 是植物进行光合作用所必需的 催化剂。

植物中叶绿素 a 的含量通常是 b 的 3 倍。

尽管叶绿素分子中含有一些 极性基团,但大的烃基结构使它易溶于醚、石油醚等一些非极性的溶剂。

胡萝卜素( C 40H 56)是具有长链结构的共轭多烯。

它有三种异构体,即 - 胡 萝卜素、β -胡萝卜素和γ - 胡萝卜素,其中β -胡萝卜素含量最多,也最重要。

在生物体内, β- 胡萝卜素受酶催化氧化形成维生素 A 。

目前β -胡萝卜素已可进 行工业生产,可作为维生素 A 使用,也可作为食品工业中的色素。

叶黄素( C 40H 56O 2)是胡萝卜素的羟基衍生物,它在绿叶中的含量通常是胡萝 卜素的两倍。

与胡萝卜素相比,叶黄素较易溶于醇而在石油醚中溶解度较小。

叶绿素 a (R=CH )CH 3 CH 3 CH 3OOCH 3 CH 2CH RN NMgNN H 3CCH 2CH 3 CH 3 CO 2CH 3 2 CH 3H 3C R维生素 A2 薄层色谱原理常用 TLC 表示,又称薄层层析,属于固液吸附色谱。

样品在薄层板上的吸 附剂(固定相)和溶剂(移动相)之间进行分离。

由于各种化合物的吸附能力 各不相同,在展开剂上移时,它们进行不同程度的解吸,从而达到分离的目的。

3 薄层色谱的用途:1)化合物的定性检验。

桩色谱法分离提纯纯菠菜色素的实验现象

桩色谱法分离提纯纯菠菜色素的实验现象

桩色谱法分离提纯纯菠菜色素的实验现象
使用桩色谱法分离提纯纯菠菜色素的实验现象,主要是在实验过程中观察到不同化合物在柱色谱中的运动速率不同,从而在柱中发生分离。

具体实验过程如下:
1. 首先制备菠菜色素提取液,使用正己烷提取法将菠菜中的色素提取出来。

2. 将提取液加入到桩色谱柱中,并迅速通过柱子以一定的流速进行分离。

3. 在分离的过程中,观察到不同颜色的化合物会以不同的速率运动通过柱子。

具有更重分子量的物质会比分子量较轻的物质更慢地运动。

因此,某些化合物会在柱子的不同位置分离出来。

4. 在实验过程中,再使用紫外线或其他检测设备,可以根据不同组分的吸光度逐渐分离出纯的菠菜色素。

总之,桩色谱法可用于分离和分离各种天然产物,这使得实验者能够更好地了解化合物的特性,并提供纯的产物来进一步研究各种应用。

实验菠菜中色素的提取和分离

实验菠菜中色素的提取和分离

实验菠菜中色素的提取和分离实验2 菠菜中色素的提取和分离扬州大学化学化工学院张磊 091301223一.实验目的:1.了解分离与提纯过程在科学研究和生产生活中的应用;2.掌握分离与提纯实验设计的一般思路和方法;3. 掌握菠菜中色素提取的原理,步骤和影响因素;二.实验原理:1.叶绿体中的色素是有机物,不溶于水,易溶于乙醇等有机溶剂中,所以用石油醚、乙醇等能提取色素。

2.本实验选用的是吸附色谱,氧化铝作为吸附剂(极性),色素提取液为吸附液,色素提取液中各成分极性大小为:叶绿素b(黄绿色)>叶绿素a(蓝绿色)>叶黄素(黄色)> β-类胡萝卜素(橙色)。

3. 柱层析法的分离原理是根据物质在氧化铝上的吸附力不同而使各组分分离。

一般情况下极性较大的物质易被吸附,极性较弱的物质不易被吸附,所以由上到下为:叶绿素b(黄绿色),叶绿素a(蓝绿色),叶黄素(黄色),β-类胡萝卜素(橙色)。

三、实验材料:仪器:研钵、分液漏斗、层析柱(20×10 cm),表面皿,普通漏斗,量筒试剂:石油醚、乙醇(95%)、菠菜叶、丙酮(化学纯)、中性氧化铝,无水硫酸钠四、实验步骤与内容【探究:菠菜(或青菜)的处理方式】(1)小组讨论处理菠菜的各种方式,然后按照“手撕”,“划几刀,再手撕”,“剪成丁状”,“剪碎后稍加研磨”,“研磨成浆”共五种方式分为五组进行实验,最后确定控制菠菜叶取25克,加入有机溶剂15mL(9mL石油醚+6mL乙醚),浸泡时间取25min为统一条件;(2)开始分组实验,各自处理好各组的菠菜,放置在烧杯中,加入15mL有机溶剂并盖上表面皿浸泡25min。

(3)在浸泡的时间内开始装柱,首先在滴管下口装上橡皮管并夹上弹簧夹(夹紧),在管的出口处放入一小撮棉花,在棉花上放置已剪好的和滴管内径一般大小的圆形滤纸,然后用普通漏斗往里面装入中性氧化铝,最后在氧化铝上再加上和滴管内径一般大小的圆形滤纸,夹在铁架台上备用。

菠菜中色素的提取分离和鉴定(有机化学实验)

菠菜中色素的提取分离和鉴定(有机化学实验)

菠菜中的色素提取、分离及鉴定一、实验目的1.进一步熟悉和掌握薄层色谱的原理及应用2.了解菠菜中主要色素的基本性质,通过菠菜色素的提取和分离,了解天然物质分离提纯方法及原理3.掌握用紫外光谱和荧光光谱鉴别菠菜中色素的原理及方法二、菠菜中的色素简介菠菜叶中富含多种色素成分,如叶绿素(绿色)、胡萝卜素(橙黄色)和叶黄素(黄色)等多种天然色素。

叶绿素存在两种结构相似的形式即叶绿素 a(C 55 H 72O 5N 4Mg) 和叶绿素 b(C 55H 7O 6N 4Mg),结构见图1。

二者差别仅是 a 中一个甲基被 b 中的甲酰基所取代。

它们都是吡咯衍生物与金属镁的络合物,是植物进行光合作用所必需的催化剂。

植物中叶绿素a 的含量通常是b 的3倍。

尽管叶绿素分子中含有一些极性基团,但分子中大的烷基结构使它易溶于丙酮,乙醇,乙醚,石油醚等有机溶剂。

胡萝卜素( C 40H 56 )是具有长链结构的共轭多烯。

它有三种异构体,即 α-, β - 和γ - 胡萝卜素,其中β - 异构体含量最多,也最重要。

在生物体内,β - 体受酶催化氧化即形成维生素 A 。

目前β - 胡萝卜素已可进行工业生产,可作为维生素 A 使用,也可作为食品工业中的色素。

叶黄素( C40H56O2 )是胡萝卜素的羟基衍生物,它在绿叶中的含量通常是胡萝卜素的两倍。

与β - 胡萝卜素相比,叶黄素较易溶于醇而在石油醚中溶解度较小。

根据这些色素在有机溶剂中的溶解性,可将它们提取出来。

N N NNH 3CCHCH 2RCH 2CH 3CH 3H 3C OCO 2CH 3CH 2CH 2OOCH 3CH 3CH 3CH 3CH 3Mg叶绿素a 和叶绿素b 的结构(叶绿素a :R=CH 3, 叶绿素b :R=CHO )H 3C CH 3RCH 3H 3CH 3CCH 3CH 3CH 3CH 3CH 3β-胡萝卜素和叶黄素的结构(β-胡萝卜素:R =H , 叶黄素: R = OH ) 菠菜中各色素的理化性质绿色植物中的叶绿体色素在把光能转变为化学能的光和作用中起着重要作用。

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实验概要
通过绿色植物色素的提取和分离,了解天然物质分离提纯方法;了解柱层析和薄层色谱分离的基本原理,掌握柱层析和薄层色谱分离的操作技术。

通过柱色谱和薄层色谱分离操作,加深了解微量有机物色谱分离鉴定的原理。

实验原理
层析法是一种物理分离方法。

柱层析法是层析方法中的一个类型,分为吸附柱层析法和分配柱层析法。

本实验仅介绍吸附柱层析法。

吸附柱层析法是分离、纯化和鉴定有机物的重要方法。

它是根据混合物中各组分的分子结构和性质(极性)来选择合适的吸附剂和洗脱剂,从而利用吸附剂对各组分吸附能力的不同及各组分在洗脱剂中的溶解性能不同达到分离目的。

吸附柱层析法通常是在玻璃层析柱中装入表面积很大、经过活化的多孔性或粉状固体吸附剂(常用的吸附剂有氧化铝、硅胶等)。

当混合物溶液流过吸附柱时,各组分同时被吸附在柱的上端,然后从柱顶不断加入溶剂(洗脱剂)洗脱。

由于不同化合物吸附能力不同,从而随着溶剂下移的速度不同,于是混合物中各组分按吸附剂对它们所吸附的强弱顺序在柱中自上而下形成了若干色带。

在洗脱过程中,柱中连续不断地发生吸附和溶解的交替现象。

被吸附的组分被溶解吸出来,随着溶剂向下移动,又遇到新的吸附剂颗粒,把组分从溶液中吸附出来,而继续流下的新溶剂又使组分溶解而向下移动,这样经过适当时间移动后,各种组分就可以完全分开,继续用溶剂洗脱,吸附能力最弱的组分随溶剂首先流出,再继续加溶剂直至各组分依次全部由柱中洗出为止,分别收集各组分。

绿色植物如菠菜叶中的叶绿体含有绿色素(包括叶绿素a和叶绿素b)和黄色素(包括胡萝卜素和叶黄素)两大类天然色素。

这两类色素都不溶于水,而溶于有机溶剂,故可用乙醇或丙酮等有机溶剂提取。

H72O5N4Mg)和叶绿素b(C55H70O6N4Mg),其差叶绿素存在两种结构相似的形式即叶绿素a(C
55
别仅是叶绿素a中一个甲基被甲酰基所取代从而形成了叶绿素b。

它们都是吡咯衍生物与金属镁的络合物,是植物进行光合作用所必需的催化剂。

植物中叶绿素a 的含量通常是b 的3 倍。

尽管叶绿素分子中含有一些极性基团,但大的烃基结构使它易溶于醚、石油醚等一些非极性的溶剂。

H56)是具有长链结构的共轭多烯。

它有三种异构体,即a-胡萝卜素、β-胡萝胡萝卜素(C
40
卜素和γ-胡萝卜素,其中β-胡萝卜素含量最多,也最重要。

在生物体内,β-胡萝卜素受酶催化氧化形成维生素A。

目前β-胡萝卜素已可进行工业生产,可作为维生素A 使用,也可作为食品工业中的色素。

H56O2)是胡萝卜素的羟基衍生物,它在绿叶中的含量通常是胡萝卜素的两倍。

叶黄素(C
40
与胡萝卜素相比,叶黄素较易溶于醇而在石油醚中溶解度较小。

石油醚是一种脂溶性很强的有机溶剂。

叶绿体中的四种色素在石油醚中的溶解度是不同的:溶解度高的随层析液在滤纸上扩散得快;溶解度低的随层析液在滤纸上扩散得慢。

溶解度最
高的是胡萝卜素,它随石油醚在滤纸上扩散得最快,叶黄素和叶绿素a的溶解度次之;叶绿素b的溶解度最低,扩散得最慢。

这样,四种色素就在扩散过程中分离开来。

同样,提取液可用色层分析的原理加以分离。

因吸附剂对不同物质的吸附力不同,当用适当的溶剂推动时,混合物中各成分在两相(流动相和固定相)间具有不同的分配系数,所以它们的移动速度不同,经过一定时间层析后,便将混合色素分离。

本实验是用活性氧化铝作吸附剂,分离菠菜中胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a和叶绿素b。

主要试剂
1. 硅胶G
2. 中性氧化铝
3. 甲醇
4. 石油醚(60-90 ℃)
5. 丙酮
6. 乙酸乙酯
主要设备
1. 研钵
2. 布氏漏斗
3. 圆底烧瓶
4. 直形冷凝管
5. 色谱柱
6. 抽滤瓶
7. 烧杯
8. 铁架台
9. 脱脂棉723分光光度计
实验材料
菠菜叶
实验步骤
1. 菠菜色素的提取
取2g 新鲜菠菜叶,与10mL 甲醇拌匀研磨5 分钟,弃去滤液。

残渣用10mL 的石油醚-甲醇(3:2)混合液进行提取,共提取两次。

合并液用水洗后弃去甲醇层,石油醚层进行干燥、浓缩。

2. 薄层层析
将上述的浓缩液点在硅胶G 的预制板上,分别用石油醚-丙酮(8:2)和石油醚-乙酸乙酯(6:4)两种溶剂系统展开,经过显色后,进行观察并计算比移值。

3. 柱层析
取3g 中性氧化铝进行湿法装柱。

填料装好后,从柱顶加入上述浓缩液,用石油醚-丙酮(9:1)、石油醚-丙酮(7:3)和正丁醇-乙醇-水(3:1:1)进行洗脱,依次接收个色素带,即得胡萝卜素(橙黄色溶液)、叶黄素(黄色溶液)、叶绿素a(蓝绿色溶液)以及叶绿素b(黄绿色溶液)。

称取12g碱性三氧化二铝加入30mL石油醚搅拌,浸泡10min。

在层析柱内加入一团棉花(棉花要尽量薄)在底部再加入0.5cm的石英砂,然后用石油醚半充满柱子,再将浸泡好的三氧化二铝倒入柱内,倒时应该缓慢,重复使用下面的石油醚,直到装完。

用石油醚洗柱内壁,顶部加一小团棉花,然后再加入石英砂0.5cm高。

样品的分离层析
将浓缩液小心地从柱顶部加入。

加完后打开活塞,让液面下降到柱中砂层,关闭活塞,加几滴石油醚冲洗内壁,打开活塞,使液面下降如前,在柱顶小心加入约1.5—2cm高度的石油醚-丙酮洗脱剂,层析即开始进行。

当第一个有色成分即将滴出时,另取一洁净的烧杯收集,得黄色溶液,即胡萝卜素。

将洗脱剂换成1:7的石油醚-丙酮混合液,继续洗脱可得到第二色带的黄绿色溶液,即叶绿素a和叶黄素。

注意事项
1. 选材时要注意选取新鲜、颜色深的叶片。

2. 用丙酮和层析液都是易挥发且有一定毒性的有机溶剂,所以研磨时要快,收集的滤液要用棉塞塞住,层析时要加盖,减少有机溶剂的挥发。

3. 在研磨时加入少许SiO2,目的是为了研磨得充分;加入少许CaCO3的目的是为了防止研磨时叶绿体中色素受到破坏;加入丙酮的目的是作为叶绿体中色素的溶剂。

4. 研磨过程中丙酮要少量多次加入,以免研磨时四处飞溅。

5. 过滤时不要使用滤纸而使用棉花,棉花塞在漏斗基部要松紧适当。

6. 叶绿素要避光保存。

叶黄素易溶于醇而在石油醚中溶解度较小,从嫩绿菠菜得到的提取液中,叶黄素含量很少,柱色谱中不易分出黄色带。

7. 萃取时不要剧烈振荡,以防止发生乳化现象。

8. 为了保持柱子的均一性,使整个吸附剂浸泡在溶剂或溶液中是必要的,否则当柱中溶剂或溶液流干时,就会使柱身干裂,影响渗透和显色的均一性。

因此要保证整个装样过程中溶剂要高于三氧化二铝的表面。

9. 在吸附剂上端加入脱脂棉(或滤纸)是使加样品时不致把吸附剂冲起;在吸附柱下端加脱脂棉(或沙子)可以防止吸附剂细粒流出。

10. 层析柱填装紧密与否,对分离效果很有影响,若各部分松紧不匀,会影响渗透速度和显色的均匀。

11. 注意洗脱剂的配比,胡萝卜素出来后,换成1:7的洗脱液。

12. 洗脱流速不宜过快,避免因此压紧凝胶,色素分离不开;也不要过慢,使柱装得太松,导致层析过程中,凝胶床高度下降,色素洗脱很慢。

因此应控制洗脱流速,以每分钟60~80滴为宜。

13. 样品一定要足够浓缩,加样量不要过大或过小。

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