农杆菌介导的转化方法
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第二步 感染植物
农杆菌吸附于植物的表面伤口部位（常在茎的 基部）。
.
第三步 毒性基因（vir）表达 virA、virG、virD、virB…
第四步 T-DNA转移
T-DNA被vir基因产物切下来，并运送到植物细胞 核里，整合到植物基因组中。 第五步 诱导冠瘿瘤
T-DNA上的产物催化产生过量的生长素和细 胞分裂素，形成植物冠瘿瘤。
农杆菌介导转化法
❖农杆菌 (Agrobacterium tumefaciens),是一种革兰氏阴性土壤杆菌,它含 有Ti质粒,能诱导被侵染的植物细胞形成肿瘤,即诱发冠瘿瘤.Ti质粒(包 括Ri质粒)上有一段转移DNA,在农杆菌侵染宿主植物时,这段DNA可以 转移进植物细胞,并稳定地保留在植物细胞染色体中,变为植物细胞新增 加的一群基因,最终能通过有性世代遗传给子代 。
.
① Ti质粒
存在于能引起植物形成冠瘿瘤的农杆菌中，诱导双子 叶冠瘿瘤形成，又称肿瘤诱导质粒（tumor inducing plasmid）。
根瘤 .
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改造后的Ti质粒载体模式
oriLeabharlann Baidu
.
4
② 农杆菌的感染和生存
第一步:植物受伤
植物受伤后能分泌酚类化合物（如乙酰丁香 酮、羟基乙酰丁香酮），诱导Ti质粒上的 毒性基因表达。
第六步 土壤农杆菌代谢冠瘿碱。
.
④农杆菌转化的方法
1、共培养法
包括原生质体共培养、悬浮细胞共培养和愈伤组织共培养。
2、叶圆盘法 3、活体接种法
.
1.共培养法
The co-integra. tion method
2.叶盘转化法
农杆菌共培养侵染 愈伤组织 分化生芽
生根
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3. 活 体 接 种 法
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农杆菌吸附于植物的表面伤口部位（常在茎的 基部）。
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第三步 毒性基因（vir）表达 virA、virG、virD、virB…
第四步 T-DNA转移
T-DNA被vir基因产物切下来，并运送到植物细胞 核里，整合到植物基因组中。 第五步 诱导冠瘿瘤
T-DNA上的产物催化产生过量的生长素和细 胞分裂素，形成植物冠瘿瘤。
农杆菌介导转化法
❖农杆菌 (Agrobacterium tumefaciens),是一种革兰氏阴性土壤杆菌,它含 有Ti质粒,能诱导被侵染的植物细胞形成肿瘤,即诱发冠瘿瘤.Ti质粒(包 括Ri质粒)上有一段转移DNA,在农杆菌侵染宿主植物时,这段DNA可以 转移进植物细胞,并稳定地保留在植物细胞染色体中,变为植物细胞新增 加的一群基因,最终能通过有性世代遗传给子代 。
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① Ti质粒
存在于能引起植物形成冠瘿瘤的农杆菌中，诱导双子 叶冠瘿瘤形成，又称肿瘤诱导质粒（tumor inducing plasmid）。
根瘤 .
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改造后的Ti质粒载体模式
oriLeabharlann Baidu
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② 农杆菌的感染和生存
第一步:植物受伤
植物受伤后能分泌酚类化合物（如乙酰丁香 酮、羟基乙酰丁香酮），诱导Ti质粒上的 毒性基因表达。
第六步 土壤农杆菌代谢冠瘿碱。
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④农杆菌转化的方法
1、共培养法
包括原生质体共培养、悬浮细胞共培养和愈伤组织共培养。
2、叶圆盘法 3、活体接种法
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1.共培养法
The co-integra. tion method
2.叶盘转化法
农杆菌共培养侵染 愈伤组织 分化生芽
生根
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3. 活 体 接 种 法
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