基本组织及血涂片制作

十一、心肌
猴或狗心肌切片观察。 （一）低倍镜观察 纵切面心肌纤维为有分支的带状，横切面心肌纤维为 不规则的圆形。 （二）高倍镜观察 在纵切面上，心肌纤维彼此分支吻合成网状。胞核卵 圆形，位于纤维中央。把显微镜的虹彩光圈缩小，光线放 暗一些，可见到心肌纤维的横纹，但不如骨骼肌纤维明显。 在肌纤维及其分支上可见染色呈深蓝色的梯形横线，即为 闰盘。肌纤维之间有结缔组织及血管。 在横切面上，心肌纤维为不规则的圆形。有的有胞核， 有的无胞核，这是由于切片切到或没切到胞核的缘故。
实验一
基本组织观察及血涂片制作
【目的】
掌握四种基本组织的结构特点。
【器具】
显微镜，单层扁平上皮、甲状腺、小肠、 气管、膀胱、食管、骨骼肌、心肌、脊髓、大 脑皮质、小脑皮质、坐骨神经、人头皮、环层
小体切片，结缔组织铺片，骨磨片，运动神经
元涂片，运动终板压片。载玻片,镊子,手套,
解剖盘,wenku.baidu.com鼠，瑞氏染液、缓冲液。
【基本组织观察】
一、单层扁平上皮
有肠系膜铺片银染色和切片HE染色两种装片。 银染色片上细胞呈多边形，边界锯齿状，清晰 可见，由于硝酸银感光沉淀为黑色。 HE染色片上可见上皮细胞核为扁平状，染成蓝
紫色，胞质着红色，细胞边界不清。
二、单层立方上皮
以甲状腺滤泡为例观察该结构，甲状腺滤泡壁细胞即 为单层立方上皮细胞。 HE染色片上可见细胞核呈圆形或近圆形，排成一列， 着蓝紫色，胞质着红色，细胞界限不清。细胞游离面和 基底面清晰可见。
十三、神经原纤维
猫脊髓横切片（Cajal银染色）观察。在这张切片上 主要观察神经原纤维的形态。 （一）低倍镜观察 脊髓横切面中央呈“H”形，染成棕黄色的部分为灰 质，灰质较宽的一端为脊髓灰质前角。 在灰质前角处可见大而呈多角形有突起的细胞，为 多极神经细胞。 （三）高倍镜观察 可以看到胞体和突起内均有棕褐色细丝状的结构， 此即神经原纤维。它们在胞体内排列成网状，而在突起 内则平行排列。
六、复层扁平上皮
人或猫食管切片（H－E染色）观察。 （一）肉眼观察 先辨别朝向食管腔的粘膜层。 （二）低倍镜观察 管壁粘膜的最内面着色较深的一层即复层扁平上皮，可 见由数层至十几层细胞组成，有的地方较厚，有的地方较 薄，所以基底面呈波浪状。 （三）高倍镜观察 和结缔组织交接的最深的一层细胞呈低柱状，细胞排列 紧密，胞核椭圆形，染色深，位于细胞基底部。中层为几层 多角形细胞。接近表面的细胞渐变为扁平状细胞。
较细的树突从胞体其他部位发出。若切片正切到轴突，
则可见一条轴突从锥体细胞的底部发出。换用高倍镜观 察树突的分支，可见其表面有许多鼓槌状小突起，为树 突棘。
十六、有髓纤维
1．低倍镜观察 可见神经纤维一条一条较紧密地平行 排列。 2．高倍镜观察 在每条神经纤维中央，见一条紫红色 的线条为轴突。轴突外围包有髓鞘。髓鞘在制片过程中因 类脂质被溶解，因而只剩下红色的蛋白质网状支架。在髓 鞘之外很薄的膜为神经膜。每条神经纤维上相隔一定的距 离，由于髓鞘中断而形成的缩窄，即是郎飞结（ranvier node）。两结之间的神经膜含有一个染成蓝紫色椭圆形的 胞核，但在切片上不一定都能切到。
十九、运动终板
运动终板压片（氯化金法）观察。 （一）低倍镜观察 骨骼肌纤维呈浅蓝紫色，有的呈紫红色。肌原纤维 的横纹清晰可见。神经和神经纤维呈黑色。神经纤维的 末端成爪状分支，附于肌纤维表面，与肌纤维附着处形 成的椭圆形板状隆起，即为运动终板。
（二）高倍镜观察
可见运动终板的爪状分支末端常呈钮扣状膨大。
十七、触觉小体
用低倍镜观察人皮肤切片（银染色），了解触觉 小体的形态及分布。先找到皮肤的复层扁平上皮，上 皮下面为结缔组织，结缔组织突向上皮形成许多乳头，
在乳头处可找到卵圆形的触觉小体。触觉小体外包有
很薄的结缔组织被膜，其中含有横列的扁平细胞，神 经纤维呈黑色，盘曲在触觉小体内。
十八、环层小体
取猫的肠系膜切片（H－E染色）用低倍镜观察，可以 找到纵、横切面的环层小体。在纵切面上可见环层小体呈 卵圆形。若切面正切到小体的中心，则可见小体的中心为
一条棍状结构（内柱），其外周为多层呈同心圆排列的结
缔组织纤维层，各层之间夹有扁平结缔组织细胞。在小体 一端可见到一条有髓纤维，它在穿过结缔组织纤维板层时 失去髓鞘。所以，在内柱中只看到被染为红色的轴突。
十四、小脑梨状细胞
标本的浅层是皮质，在皮质内用低倍镜观察，梨
状神经元的胞体大，似梨形或烧瓶状。从胞体一端发 出1－3个粗大的树突，由此树突再反复分支，形成扁 柏树枝状。从胞体另一端可看到一条轴突，因切片关 系所见到的轴突有长有短。
十五、大脑锥体细胞
标本的浅层是皮质，在皮质内用低倍镜观察，锥体 细胞的胞体形似圆锥，从其尖顶发出一条最粗的树突为 顶树突，由顶树突反复分支，逐渐变细。另外还有一些
三、单层柱状上皮
以小肠为例观察该结构，小肠绒毛粘膜上皮细胞 即为单层柱状上皮细胞。 HE染色片上可见细胞核呈长椭圆形，染成蓝紫色，
位于细胞基底部，排成一列，染成蓝紫色，胞质染成
红色，细胞界限不清。细胞游离面和基底面清晰可见。 柱状细胞间散在有杯形细胞，杯形细胞上端的胞 质内有粘液分泌颗粒，在切片上呈卵圆形空泡状结构。
七、皮下疏松结缔组织
兔皮下疏松结缔组织铺片（H－E染色）观察。 1.胶原纤维，染成粉红色、较粗。 2.弹性纤维，染成深红色、较细。
八、软骨
兔气管软骨切片（H－E染色）观察，气管壁内的蓝紫 色“C”字形结构为透明软骨，即气管软骨。 （一）低倍镜观察 在透明软骨中可见染成蓝紫色的基质和位于陷窝内的 软骨细胞。在软骨中央部分的软骨细胞较大，呈椭圆形或 圆形。经常2-4个成群存在。 （二）高倍镜观察 在H－E染色切片中看不到细胞间质内的胶原纤维。基 质染成蓝紫色，在陷窝周围的基质染色较深。有的切片由 于在制作过程中软骨细胞脱落，使基质中显现出一个个白 色空腔，即软骨陷窝。有的切片由于在制片过程中使部分 软骨细胞有所收缩，所以在软骨细胞周围出现白色间隙， 这也应是陷窝的一部分。
【血涂片制作】
一、每小组取 1 只小鼠，摘眼球取血，
每位同学滴 1 滴于载玻片右端。
二、取第 2 只载玻片，斜置于第 1 只载 玻片上的血滴左缘，待血充盈于两片夹角处， 向左推动第 2 只载玻片。 三、在晾干的血片区滴加瑞氏染液为血细
胞着色，2-3 min后，滴加约 1.5 倍的缓冲液，
静置 10-15 min，清水缓慢洗去染液，镜检。
九、骨
人骨磨片观察。骨组织内的软组织（神经、血管、淋 巴管、结缔组织）及细胞都已腐烂，仅留下空腔和管道。 因光线折射关系，这些空腔和管道均呈现黑色， （一）低倍镜观察 可见许多骨板呈多层同心圆排列的结构，即骨单位。 每个骨单位的中央有一个黑色、较大的圆形管道的横断面 即为中央管，在此管周围有许多成同心圆排列的骨单位骨 板。 （二）高倍镜观察 骨板内或骨板间有许多扁的卵圆形呈黑色的小腔隙即 骨陷窝。骨陷窝向四周发出许多细小的黑色分支，即骨小 管。
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五、变移上皮
兔膀胱切片（H－E染色）观察。 （一）肉眼观察 先辨别朝向膀胱腔的粘膜层。 （二）低倍镜观察 从粘膜层表面寻找上皮，可看到上皮细胞排列层次较 多，表层细胞较大，深层细胞较小。 （三）高倍镜观察 基层细胞最小，呈近似立方形，排列较密。中层细胞呈 多角形或倒置的梨形。表层细胞较大，为较阔的方形，游离 面略呈弧形，靠游离面的胞质着色深，有的细胞可见双核。
十二、尼氏体
牛脊髓灰质涂片（Nissl染色）观察。因为是涂 片，所以可以较完整地显示出神经元的结构。这种染 色可以把胞核及尼氏体染成蓝色。 （一）低倍镜观察 可见染成深蓝色、具有多个突起的多极神经元。 （二） 高倍镜观察 在胞体内有圆球形染色较浅的胞核，其中央有一 染成深蓝色的核仁。胞质内含有许多不规则的染成深 蓝色的小块，即尼氏体。胞体周围发出许多突起，这 些突起大多为树突，因为轴突只有一根，所以在涂片 上有时很难看到。
十、骨骼肌
猫骨骼肌纵、横切片的观察。 （一）低倍镜观察 找到纵切（肌纤维长条形）及横切（肌纤维多边形） 的肌纤维。在肌纤维间有结缔组织。 （二）高倍镜观察 1．纵切面 肌纤维长条形，外为肌膜，紧贴肌膜 内方，有许多染成蓝紫色的卵圆形胞核。肌原纤维沿着 肌纤维长轴排列，有明显的横纹，染色深的为A带，染 色浅的为I带。 2．横切面 肌纤维呈多边形或不规则圆形，外有 肌膜，卵圆形的胞核紧贴肌膜内侧。
四、假复层纤毛柱状上皮
以气管为例观察该结构，气管腔面粘膜上皮即为假复层 纤毛柱状上皮。 细胞排列紧密，界限不清，其间夹有透亮的杯形细胞。 胞核位置高低不等。依细胞的形状、胞核位置分为四种细胞。 1．基细胞，细胞成锥体形，基部宽顶部窄，不能达到上 皮游离面。胞核排列于整个上皮的下部。 2．梭形细胞，细胞的两端尖细，中间略宽。其胞核排列 于整个上皮的中部。 3．柱状细胞，胞体抵达上皮游离面。细胞的游离面有微 细而整齐的纤毛。胞核排列于整个上皮的上部。 4．杯形细胞，夹于柱状细胞之间，游离面无纤毛。胞核 排列于整个上皮的中部。