实验6小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象观察
巨噬细胞吞噬现象的实验观察
巨噬细胞吞噬现象的实验观察一．实验目的：1.观察巨噬细胞吞噬全过程和意义。
2.掌握小鼠腹腔注射给药和颈椎脱臼处死方法。
二．实验原理吞噬细胞由骨髓干细胞分化生成，具有非特异性免疫功能。
当病原微生物或其他异物侵入机体时，能招引巨噬细胞，而巨噬细胞又有趋化性，能响应招引因子的招引，产生活跃的变形运动，主动向病原体或异物移动，在接触到病原体或异物时，即伸出伪足将之包围，并内吞入细胞，形成吞嗜体，继而细胞质中的初级溶酶体与吞噬泡发生融合形成吞噬性溶酶体，通过其水解酶作用，将病原体杀死，消化分解，最后将不能消化的残渣排除细胞外。
三．实验用品1.器材：显微镜解剖盘剪刀镊子载玻片盖玻片注射器吸管2.试剂：A.0.85%生理盐水B.alsever溶液（葡萄糖2.05g 柠檬酸钠0.89g 柠檬酸0.05g 氯化钠0.42g 蒸馏水100ml）将alsever溶液ph调至7.2，高压灭菌10分钟，保存于4℃冰箱中。
C.0.4％台盼蓝染液D.4.0％淀粉肉汤（牛肉膏0.3g 蛋白胨1.0g 氯化钠0.5g 蒸馏水100ml 含台盼蓝染液）加热后加入可溶性淀粉6.0g，促使溶解，再煮沸灭菌，置4℃冰箱中保存，用时水浴融化，加入适量台盼蓝染液混匀，使其成蓝色。
3.材料:A.小白鼠B．1％鸡红细胞悬液（从健康鸡翼静脉采血1ml，放入盛有4mlalsever溶液瓶中，混匀置4℃冰箱中备用。
用时加0.85％生理盐水离心，洗涤两次，再用生理盐水配成1％浓度悬液。
）四．实验方法1.实验前一天给小白鼠腹腔注射6％淀粉肉汤1ml。
2.试验时，将注射过淀粉肉汤的小白鼠腹腔注射1％鸡红细胞悬液1ml，轻按小鼠腹部，使悬液分散。
3.二十分钟后，用颈椎脱臼法处死小鼠。
4.将小鼠置于解剖盘中，剪开腹部，把内脏推向一侧，用不装针头的注射器或吸管取腹腔液。
5.取一干净载玻片，滴一滴腹腔液，盖上盖玻片，置显微镜下观察。
五．实验结果10*100 图中椭圆形有核淡黄色细胞为鸡红细胞；较大的呈圆形或不规则细胞，内含蓝色颗粒的为巨噬细胞，仔细观察玻片，可见巨噬细胞吞噬红细胞的过程。
吞噬现象观察实验报告
一、实验目的1. 了解巨噬细胞的吞噬功能及其在免疫应答中的作用。
2. 观察巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬过程，加深对吞噬作用机制的理解。
二、实验原理巨噬细胞是一类具有吞噬功能的免疫细胞，能够识别、吞噬并消化各种抗原物质，如细菌、病毒、细胞碎片等。
在本实验中，我们通过观察小鼠腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬作用，了解吞噬作用的过程和机制。
三、实验材料与试剂1. 实验动物：清洁级雄性小鼠（体重20-25g）。
2. 实验试剂：鸡红细胞悬液、生理盐水、台盼蓝染色液、显微镜等。
3. 实验仪器：超净工作台、移液器、显微镜、离心机等。
四、实验步骤1. 麻醉小鼠，打开腹腔，收集腹腔巨噬细胞。
2. 将收集到的巨噬细胞用生理盐水洗涤两次，制成细胞悬液。
3. 将鸡红细胞悬液与巨噬细胞悬液按一定比例混合，置于37℃水浴中温育30分钟。
4. 取出混合液，用台盼蓝染色液染色，置于显微镜下观察。
5. 记录吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数量和形态变化。
五、实验结果在显微镜下观察到，巨噬细胞对鸡红细胞具有明显的吞噬作用。
具体表现为：1. 部分巨噬细胞表面出现鸡红细胞，表明巨噬细胞已将鸡红细胞吞噬入细胞内。
2. 吞噬鸡红细胞的巨噬细胞体积增大，细胞核形态发生改变。
3. 部分巨噬细胞内可见被吞噬的鸡红细胞碎片。
六、实验分析与讨论1. 本实验结果表明，小鼠腹腔巨噬细胞具有吞噬鸡红细胞的能力，这与巨噬细胞的免疫功能相一致。
2. 吞噬过程中，巨噬细胞表面出现鸡红细胞，说明巨噬细胞通过表面受体识别鸡红细胞。
3. 吞噬后，巨噬细胞体积增大，细胞核形态发生改变，说明巨噬细胞在吞噬过程中发生了代谢变化。
4. 吞噬鸡红细胞过程中，部分鸡红细胞碎片被巨噬细胞消化，说明巨噬细胞在吞噬作用中具有一定的消化功能。
七、实验结论通过本实验，我们成功观察了小鼠腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬现象，加深了对吞噬作用机制的理解。
实验结果表明，巨噬细胞在免疫应答中发挥着重要作用，具有识别、吞噬和消化抗原物质的能力。
小鼠腹腔巨噬细胞吞噬实验
巨噬细胞吞噬酵母菌
在干净的载玻片上用记号笔画一个直径约2cm的圆圈，在 圆圈内滴加50μL细胞悬液，再向其中加50μL酵母液，混
匀后放入湿盒内并于37℃温箱孵育30分钟。
细胞染色
用生理盐水轻轻冲洗并甩干，加1-3滴试剂一固定1.5min； 加3-6滴试剂二，轻摇玻片使其充分混匀，染色5-8min； 自来水轻轻冲洗； 待干燥后加显微镜油于100倍目镜下观察。
本实验是通过小鼠巨噬细胞对酵母菌的吞噬来检测 巨噬细胞的功能
实验用品
1．器材：显微镜、解剖盘、剪刀、镊子、 载玻片 、吸管等 2．试剂： 生理盐水；PBS；快速姬姆萨染液。 3．材料：小白鼠；酵母菌（浓度为8*106/ml）
方法与步骤
将菌液置于70℃水浴锅中加热20min以灭活酵母菌， 置4 ℃冰箱备用。
吞噬细胞发育普
巨
噬
细
胞
腹腔巨噬细胞
主 要 存 在 部 位
主要功能：对细胞残片及病原体进行噬菌作用（即吞噬
以及消化），并激活淋巴球或其他免胞吞噬过程
巨噬细胞功能是衡量机体免疫能力的一个很重要指标
测定方法：主要是巨噬细胞的吞噬功能实验，其他的有 溶酶体酶活性检测和表面受体检测。
实验六-吞噬细胞功能测定
免疫学系
目的要求
1．掌握小鼠腹腔巨噬细胞的分离方法 2．熟悉细胞吞噬作用的基本过程 3．了解细胞吞噬实验的研究意义
• 吞噬细胞有大、小两种。小吞噬细胞一般指血液中
的中性粒细胞。大吞噬细胞是血中的单核细胞和多种器 官、组织中的巨噬细胞，两者构成单核吞噬细胞系统。
单核/巨噬细胞具有很强的吞噬能力，特别是巨噬细胞， 在适应性免疫和固有免疫中均发挥重要作用。
小鼠腹腔巨噬细胞悬液的制备
小鼠腹腔巨噬细胞体内吞噬功能测定
小鼠腹腔巨噬细胞体内吞噬功能测定小鼠腹腔巨噬细胞体内吞噬功能测定摘要】目的建立小鼠腹腔巨噬细胞体内吞噬功能测定方法，并测定其吞噬率。
方法用6%淀粉肉汤诱导小鼠腹腔产生巨噬细胞，体内吞噬5%鸡红细胞，并测定其吞噬率。
结果小鼠腹腔巨噬细胞成活率＞98%，平均吞噬百分率和平均吞噬指数分别是38.04%和0.39。
结论本实验方法可以用于小鼠腹腔巨噬细胞的相关研究。
【关键词】巨噬细胞吞噬功能小鼠巨噬细胞属于免疫细胞，有抗肿瘤、免疫调节等多项功能[1]。
巨噬细胞具有很强的吞噬功能，在体内外均能吞噬颗粒物质，将巨噬细胞与颗粒物质(如白色假丝酵母菌、鸡红细胞或葡萄球菌等)混合孵育一定时间后，颗粒物质可被巨噬细胞吞噬，本次实验颗粒物质是鸡红细胞CRBC，观察巨噬细胞吞噬CRBC的百分率和吞噬指数，了解其吞噬功能。
巨噬细胞可以用各种方法和各种来源获得，以小鼠腹腔巨噬细胞取材最为经济实用。
1 材料与方法1.1 实验动物健康小白鼠，体重20-25g，8-12周龄，雄性，由第四军医大学实验动物中心提供。
1.2 主要试剂6%淀粉肉汤，5%鸡红细胞，瑞氏染液，台盼蓝染液，小牛血清,EMDM培养液。
1.3 主要仪器 Nikon双目光学显微镜，TDL-60B湘仪离心机。
1.4 材料一次性5ml注射器，手术剪刀，镊子，小试管，尖嘴吸管，牛鲍计数板。
1.5 小鼠腹腔巨噬细胞体内吞噬功能测定小鼠的腹腔注射6%淀粉肉汤液1.0ml，诱导小鼠产生腹腔巨噬细胞。
48h后小鼠腹腔注射5%鸡红细胞生理盐水悬液1.0ml。
30min后，颈椎脱臼处死小鼠，吸取腹腔液（腹腔液太少可用含10%小牛血清的EMDM液冲洗小鼠腹腔以收集腹腔液），1500r/min 8min离心，洗涤腹腔液，取少量腹腔液置于洁净载玻片上，推成涂片，瑞氏染色后油镜下（10*100）观察小白鼠巨噬细胞吞噬鸡红细胞现象，每片计数200个巨噬细胞，计数吞噬率和吞噬指数[1]。
吞噬率=吞噬鸡红细胞的巨噬细胞/200个巨噬细胞*100%吞噬指数=被吞噬的鸡红细胞数*2/200个巨噬细胞1.6 细胞活力鉴定取1滴细胞悬液加1滴台盼蓝染液混匀，静置5分钟后滴入牛鲍计数板，观察死细胞，活细胞情况。
小鼠腹腔吞噬实验报告
小鼠腹腔吞噬实验报告小鼠腹腔吞噬实验报告一、引言吞噬作为一种重要的细胞功能，在免疫系统中起着重要的作用。
腹腔巨噬细胞是一类在腹腔内胚胎发育过程中产生的巨噬细胞，它们能够吞噬和消化异物、细菌和坏死细胞等。
本实验旨在观察小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力。
二、材料与方法1. 材料：BALB/c小鼠（8周龄，雄性和雌性各5只）、PBS、0.1%苏木精溶液、0.1%酚溶液、尼龙网、离心管、移液管、顶针、显微镜和实验台。
2. 方法：（1）将BALB/c小鼠以适当的麻醉方式麻醉后置于实验台上；（2）在小鼠腹部剃毛，用70%酒精消毒；（3）用显微镊子将小鼠腹部皮肤拉开，插入15号顶针穿透腹腔；（4）慢慢抽取腹腔中积聚的液体；（5）将抽取的液体均匀滴在一块尼龙网上，用PBS洗涤；（6）将尼龙网取出，放入一滴0.1%苏木精溶液中染色10分钟，洗净；（7）将尼龙网摆到显微镜下，观察包括吞噬细胞数量和吞噬效果等。
三、结果与分析经过腹腔巨噬细胞吞噬实验后，我们观察了吞噬细胞的数量和吞噬效果。
在5只雌性小鼠中，吞噬细胞的数量平均为10个，吞噬效果良好，吞噬颗粒清晰可见。
在5只雄性小鼠中，吞噬细胞的数量平均为12个，吞噬效果也良好，吞噬颗粒清晰可见。
通过统计分析发现，雄性小鼠相较于雌性小鼠具有更高的吞噬细胞数量，但两者之间差异不显著。
四、讨论1. 从实验结果来看，小鼠腹腔巨噬细胞具有较好的吞噬能力，能够有效地清除异物和消化坏死细胞等。
2. 在我们的实验中，我们观察到雄性小鼠的吞噬细胞数量略高于雌性小鼠，这可能与性别激素的差异有关，但仅仅依靠本实验无法确定性别激素对吞噬能力的具体影响，需要进一步的研究来证实。
3. 本实验中使用的苏木精和酚溶液可以染色吞噬细胞，便于观察。
但这种方法相对于其他荧光染色方法来说更为繁琐，同时也可能对细胞造成一定的伤害。
4. 本实验中只是通过观察吞噬细胞数量和吞噬效果来判断腹腔巨噬细胞的吞噬能力，后续的实验可以考虑使用其他细胞学和分子生物学技术来进一步验证腹腔巨噬细胞的功能和机制。
实验六小鼠巨噬细胞吞噬现象的观察
吞噬速率测定
通过定量分析，计算出巨噬细胞的吞 噬速率，结果表明吞噬速率与细胞活 性呈正相关。
结果分析
吞噬机制探讨
根据实验结果，分析巨噬细胞吞 噬作用的机制，包括细胞膜的运 动、细胞骨架的调节以及与吞噬
相关的酶类作用等。
吞噬与免疫关系
探讨巨噬细胞吞噬作用与免疫系统 的关系，分析其在机体防御和炎症 反应中的作用。
利用荧光物质标记细胞或 外来物质，以便在显微镜 下观察和追踪。
细胞培养技术
在体外培养巨噬细胞，以 便观察其吞噬行为。
显微观察技术
通过显微镜观察巨噬细胞 吞噬现象，记录并分析实 验结果。
03
实验步骤
准备实验材料和试剂
实验材料
小鼠巨噬细胞、细菌悬液
试剂
生理盐水、培养基、染色剂
器材
显微镜、培养皿、移液管、离心机
1. 用染色剂对细胞进 行染色。
步骤三：染色与观察
实验操作流程
01 2. 在显微镜下观察并记录吞噬现象，如吞 噬数量、吞噬程度等。
02
步骤四：数据记录与处理
03
1. 详细记录实验数据，包括吞噬数量、吞 噬程度等。
04
2. 对实验数据进行统计分析，得出结论。
数据记录和处理
01
使用表格或电子表格记录每组实验数据。
学习并掌握相关实验技术和方法
通过本实验，学生将学习并掌握相关的实验技术和方法，如细胞培养、显微镜观 察、染色等技术。这些技术是生物学和医学领域中常用的基本技能，对于学生未 来的学习和工作具有重要意义。
通过实践操作，学生可以加深对相关理论知识的理解，提高实验操作能力和科学 探究能力。此外，本实验还可以为学生提供实践经验，为后续的课程和科研工作 打下基础。
小鼠腹腔巨噬细胞体内吞噬功能测定
小鼠腹腔巨噬细胞体内吞噬功能测定摘要】目的建立小鼠腹腔巨噬细胞体内吞噬功能测定方法，并测定其吞噬率。
方法用6%淀粉肉汤诱导小鼠腹腔产生巨噬细胞，体内吞噬5%鸡红细胞，并测定其吞噬率。
结果小鼠腹腔巨噬细胞成活率＞98%，平均吞噬百分率和平均吞噬指数分别是38.04%和0.39。
结论本实验方法可以用于小鼠腹腔巨噬细胞的相关研究。
【关键词】巨噬细胞吞噬功能小鼠巨噬细胞属于免疫细胞，有抗肿瘤、免疫调节等多项功能[1]。
巨噬细胞具有很强的吞噬功能，在体内外均能吞噬颗粒物质，将巨噬细胞与颗粒物质(如白色假丝酵母菌、鸡红细胞或葡萄球菌等)混合孵育一定时间后，颗粒物质可被巨噬细胞吞噬，本次实验颗粒物质是鸡红细胞CRBC，观察巨噬细胞吞噬CRBC的百分率和吞噬指数，了解其吞噬功能。
巨噬细胞可以用各种方法和各种来源获得，以小鼠腹腔巨噬细胞取材最为经济实用。
1 材料与方法1.1 实验动物健康小白鼠，体重20-25g，8-12周龄，雄性，由第四军医大学实验动物中心提供。
1.2 主要试剂 6%淀粉肉汤，5%鸡红细胞，瑞氏染液，台盼蓝染液，小牛血清,EMDM培养液。
1.3 主要仪器 Nikon双目光学显微镜，TDL-60B湘仪离心机。
1.4 材料一次性5ml注射器，手术剪刀，镊子，小试管，尖嘴吸管，牛鲍计数板。
1.5 小鼠腹腔巨噬细胞体内吞噬功能测定小鼠的腹腔注射6%淀粉肉汤液1.0ml，诱导小鼠产生腹腔巨噬细胞。
48h后小鼠腹腔注射5%鸡红细胞生理盐水悬液1.0ml。
30min后，颈椎脱臼处死小鼠，吸取腹腔液（腹腔液太少可用含10%小牛血清的EMDM液冲洗小鼠腹腔以收集腹腔液），1500r/min 8min离心，洗涤腹腔液，取少量腹腔液置于洁净载玻片上，推成涂片，瑞氏染色后油镜下（10*100）观察小白鼠巨噬细胞吞噬鸡红细胞现象，每片计数200个巨噬细胞，计数吞噬率和吞噬指数[1]。
吞噬率=吞噬鸡红细胞的巨噬细胞/200个巨噬细胞*100%吞噬指数=被吞噬的鸡红细胞数*2/200个巨噬细胞1.6 细胞活力鉴定取1滴细胞悬液加1滴台盼蓝染液混匀，静置5分钟后滴入牛鲍计数板，观察死细胞，活细胞情况。
实验6小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象观察
实验6小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象观察姓名：李思露学号：131140040一、 实验目的1. 通过对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞活动的观察,加深理解细胞吞噬作用的过程；2. 了解巨噬细胞吞噬能力检测的形态学方法二、 实验原理吞噬作用也称为胞吞作用（cellular eating ），指细胞通过质膜内陷形成内吞泡的方式吞入不能渗透过膜的较大固体物质（直径一般大于250mm ）的过程。
许多原生动物通过吞噬作用摄取营养；高等动物体内的巨噬细胞和嗜中性粒细胞的吞噬作用成为动物体非特异性免疫的重要组成部分。
不同动物来源的巨噬细胞或同一动物来源的不同巨噬细胞吞噬功能强弱不同，个体吞噬细胞的平均吞噬能力是机体非特异性免疫功能强弱的重要反映。
吞噬细胞细胞膜上有识别某些病原体相关分子及凋亡细胞磷脂酰丝氨酸等配体的受体，可以使巨噬细胞识别结合病原体、凋亡细胞及其它异物，引起受体胞内区活化，进而导致与其相连的细胞骨架重排引发吞噬作用。
巨噬细胞吞噬自身衰老凋亡细胞而不吞噬正常细胞，原因是，凋亡细胞细胞膜内侧面的磷脂酰丝氨酸反转到胞膜外侧面而被巨噬细胞模式识别受体识别。
吞噬功能一般用吞噬百分率和吞噬指数两个指标反映。
吞噬百分率＝吞噬有鸡红细胞的巨噬细胞数/巨噬细胞总数×100％吞噬指数＝吞噬的鸡红细胞总数/吞噬有鸡红细胞的巨噬细胞数内吞内吞体吞噬溶酶体胞吐三、实验材料、试剂及器材（一）材料：1.健康小白鼠：6-8周龄健康小白鼠，实验前1~2天，每只腹腔注射4％淀粉肉汤1mL。
2.抗凝鸡血（二）试剂:1.4%淀粉肉汤2.D-Hanks液3.0.85％生理盐水4.180IU/mL肝素钠生理盐水溶液（三）用品普通光学显微镜、 10mL低速离心机、托盘天平、水浴箱（37℃）、5mL一次性注射器、10mL玻璃离心管、试管架、胶头滴管等四、实验操作1.巨噬细胞收集：脱颈处死小鼠；腹腔注入2mL生理盐水，揉匀；剪开腹部皮肤，暴露腹膜；用带针头的注射器插进腹腔吸取腹腔液。
小鼠腹腔巨噬细胞吞噬实验报告
小鼠腹腔巨噬细胞吞噬实验报告
实验目的：
本实验的主要目的是观察小鼠腹腔巨噬细胞对胶体金颗粒的吞噬作用并初步探究巨噬细胞的吞噬过程及机制。
实验材料：
1. 胶体金溶液；
2. 无菌生理盐水；
3. 酶消化试剂；
5. 显微镜和激光共聚焦显微镜。
实验步骤：
1. 将腹腔巨噬细胞准备好，收集细胞的方法可以在Gibco™血清教育中心找到。
2. 将100微升的胶体金颗粒溶液加入小鼠巨噬细胞的培养基中。
3. 将培养基加入培养箱中，并调节适当的条件，使细胞生长。
4. 观察并拍摄巨噬细胞吞噬胶体金颗粒的过程。
5. 经过一段时间后，将巨噬细胞用生理盐水洗涤几次，以去除吞噬的颗粒和其他杂质。
6. 对巨噬细胞进行显微镜观察，并用激光共聚焦显微镜观察细胞的粒饱和度，探究吞噬过程中的机制。
实验结果：
通过实验，我们发现在溶液中加入胶体金颗粒后，小鼠腹腔巨噬细胞会对颗粒进行吞噬，而且吞噬的过程会随着时间的延长而增加。
在观察吞噬过程时，我们发现颗粒先进入到巨噬细胞的液泡内，液泡随后与溶质相合并，颗粒进入到细胞内部。
通过激光共聚焦显微镜的观察，我们还发现，巨噬细胞吞噬颗粒时，会出现粒饱和现象，说明在吞噬的过程中，细胞表面的可吞噬物质已经被消耗殆尽，而吞噬速度由于细胞的活动而缓慢下降。
结论：
细胞吞噬是一种重要的细胞生理过程，对于身体的免疫防御系统具有重要意义。
而小鼠腹腔巨噬细胞具有良好的吞噬能力，对于异物、死亡细胞和各种病原体的清除起到了重要作用。
此次实验成功观察了巨噬细胞对胶体金颗粒的吞噬过程，并初步探究了其机制，这对于深入了解细胞免疫机制具有重要意义。
小鼠小吞噬实验报告
一、实验目的1. 观察小鼠腹腔巨噬细胞对大肠杆菌的吞噬过程，加深对细胞吞噬作用机制的理解。
2. 测定小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能，评估其非特异性免疫功能。
二、实验原理吞噬作用是细胞通过质膜内陷形成内吞泡的方式吞入不能渗透过膜的固体物质的过程。
在高等动物体内，巨噬细胞和嗜中性粒细胞的吞噬作用是非特异性免疫的重要组成部分。
巨噬细胞能够识别并结合病原体、凋亡细胞及其它异物，通过胞吞作用将其吞噬并消化。
三、实验材料与试剂1. 实验动物：健康小鼠若干。
2. 仪器：显微镜、离心机、无菌操作台等。
3. 试剂：大肠杆菌悬液、生理盐水、甲醛固定液、姬姆萨染液等。
四、实验步骤1. 制备腹腔巨噬细胞悬液：- 将小鼠麻醉后，无菌操作下取其腹腔液。
- 将腹腔液离心，弃去上清液，沉淀即为腹腔巨噬细胞。
- 用生理盐水洗涤腹腔巨噬细胞，重复洗涤2次，弃去上清液，沉淀即为纯化的腹腔巨噬细胞悬液。
2. 制备大肠杆菌悬液：- 将大肠杆菌接种于生理盐水中，37℃培养过夜。
- 将过夜培养的大肠杆菌用生理盐水洗涤，重复洗涤2次，弃去上清液，沉淀即为大肠杆菌悬液。
3. 实验分组：- 将纯化的腹腔巨噬细胞悬液分为实验组和对照组。
- 实验组：将腹腔巨噬细胞悬液与大肠杆菌悬液混合，37℃孵育30分钟。
- 对照组：将腹腔巨噬细胞悬液与生理盐水混合，37℃孵育30分钟。
4. 制片与染色：- 将实验组和对照组的细胞悬液分别制片。
- 用姬姆萨染液染色，显微镜下观察细胞形态和吞噬现象。
5. 结果分析：- 计算吞噬百分率和吞噬指数。
- 吞噬百分率 = 吞噬有细菌的巨噬细胞数 / 巨噬细胞总数× 100%- 吞噬指数 = 吞噬的细菌总数 / 吞噬有细菌的巨噬细胞数五、实验结果实验结果显示，实验组巨噬细胞对大肠杆菌的吞噬百分率和吞噬指数均显著高于对照组，表明小鼠腹腔巨噬细胞具有较强的吞噬功能。
六、讨论1. 本实验成功制备了小鼠腹腔巨噬细胞悬液，并观察了其吞噬大肠杆菌的过程，验证了巨噬细胞的吞噬功能。
小鼠吞噬能力实验报告
一、实验目的本实验旨在观察和评估小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力，以了解其非特异性免疫功能。
通过对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的实验，加深对细胞吞噬作用过程的理解，并分析不同条件下吞噬能力的变化。
二、实验原理吞噬作用是指细胞通过质膜内陷形成内吞泡的方式吞入不能渗透过膜的较大固体物质的过程。
巨噬细胞是动物体内重要的免疫细胞，具有吞噬和消化病原体、凋亡细胞等异物的功能。
在本实验中，我们通过观察小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的现象，评估其吞噬能力。
三、实验材料与试剂1. 实验动物：昆明种小鼠2. 仪器：解剖显微镜、载玻片、盖玻片、滴管、移液枪等3. 试剂：鸡红细胞悬液、生理盐水、甲醛固定液、苏木素染液、伊红染液等四、实验方法1. 实验分组：将实验小鼠随机分为实验组和对照组，每组10只。
2. 诱导腹腔巨噬细胞：实验组小鼠腹腔注射生理盐水1ml，对照组小鼠腹腔注射生理盐水2ml。
3. 制备鸡红细胞悬液：将鸡红细胞用生理盐水洗涤3次，配成2%的红细胞悬液。
4. 吞噬实验：实验组小鼠腹腔注射鸡红细胞悬液1ml，对照组小鼠腹腔注射等体积的生理盐水。
5. 观察与计数：30分钟后，取小鼠腹腔液，用生理盐水稀释，涂片，固定，染色，显微镜下观察巨噬细胞吞噬鸡红细胞的现象，并计数吞噬细胞数和吞噬指数。
五、实验结果1. 实验组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的现象明显，对照组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的现象不明显。
2. 实验组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬指数明显高于对照组。
六、分析与讨论1. 实验结果表明，小鼠腹腔巨噬细胞具有较强的吞噬能力，能够有效地吞噬鸡红细胞。
2. 诱导腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的能力可能与其非特异性免疫功能有关。
3. 实验组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬指数明显高于对照组，可能与注射鸡红细胞悬液刺激有关。
七、结论本实验成功观察了小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力，并分析了不同条件下吞噬能力的变化。
实验结果表明，小鼠腹腔巨噬细胞具有较强的吞噬能力，其非特异性免疫功能可能与其吞噬能力有关。
小鼠腹腔吞噬实验报告
实验目的：1. 观察并理解小鼠腹腔巨噬细胞吞噬活动的全过程。
2. 深入了解巨噬细胞在非特异性免疫中的作用。
3. 学习巨噬细胞吞噬功能的测定方法。
实验原理：吞噬作用，也称为胞吞作用，是细胞通过质膜内陷形成内吞泡的方式吞入不能渗透过膜的固体物质的过程。
在高等动物体内，巨噬细胞和嗜中性粒细胞的吞噬作用是非特异性免疫的重要组成部分。
巨噬细胞表面有识别病原体、凋亡细胞及其它异物的受体，可以识别并结合这些物质，进而引发吞噬作用。
实验材料与试剂：1. 实验动物：清洁级小鼠2. 仪器设备：显微镜、注射器、载玻片、盖玻片、生理盐水、鸡红细胞悬液、台盼蓝染色液等实验步骤：1. 选取健康清洁级小鼠，将其麻醉后进行腹部手术，收集腹腔巨噬细胞。
2. 将收集到的腹腔巨噬细胞与鸡红细胞悬液混合，在显微镜下观察巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬情况。
3. 使用台盼蓝染色液对吞噬细胞进行染色，观察吞噬细胞内台盼蓝颗粒的分布情况。
4. 对吞噬细胞进行计数，计算吞噬百分率和吞噬指数。
实验结果：1. 在显微镜下观察到，巨噬细胞能够吞噬鸡红细胞，形成吞噬体。
2. 使用台盼蓝染色后，吞噬细胞内台盼蓝颗粒主要分布在溶酶体中。
3. 通过计数，得到吞噬细胞的吞噬百分率和吞噬指数。
结果分析：1. 巨噬细胞在非特异性免疫中发挥着重要作用，能够吞噬病原体、凋亡细胞及其它异物，从而清除体内的有害物质。
2. 吞噬百分率和吞噬指数可以反映巨噬细胞的吞噬功能，吞噬百分率越高，吞噬指数越大，说明巨噬细胞的吞噬功能越强。
实验讨论：1. 巨噬细胞的吞噬功能受到多种因素的影响，如细胞表面受体的种类和数量、吞噬细胞的活化状态等。
2. 本实验通过观察小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的过程，加深了对巨噬细胞吞噬作用的理解。
3. 吞噬功能的测定方法在免疫学研究中具有重要意义，可以用于评估机体免疫功能的变化。
实验结论：通过本次实验，我们成功观察了小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬活动，加深了对巨噬细胞吞噬作用的理解，并掌握了巨噬细胞吞噬功能的测定方法。
巨噬细胞吞噬作用的观察实验报告
巨噬细胞吞噬作用的观察实验报告一．实验目的1.通过小鼠腹腔巨噬细胞对异物吞噬作用的观察，了解巨噬细胞在非特异性免疫中的功能。
2.掌握小鼠等实验动物腹腔巨噬细胞采集和制片的方法。
3.学习小鼠腹腔注射的操作方法和步骤。
二．实验原理1.向小鼠腹腔内注射无菌淀粉肉汤，排异反应使小鼠产生大量巨噬细胞，且巨噬细胞吞噬淀粉肉汤后不会对细胞造成伤害，反而被“喂养”。
连续多天注射使小鼠腹腔内聚集大量巨噬细胞。
2.台盼蓝是一种生物染料，专一染色死细胞。
活细胞的细胞质膜对台盼蓝有不透过性。
巨噬细胞吞噬含有台盼蓝的淀粉肉汤后，可以消化其中的淀粉和蛋白质，但是不能消化其中的台盼蓝，因此台盼蓝会聚集在溶酶体中。
是一种溶酶体染色的方法。
3.当向小鼠腹腔中注射鸡红细胞时，鸡红细胞作为外源物质，会被小鼠细胞识别并吞噬，在适当的的时机，我们就有可以在显微镜下观察到巨噬细胞吞噬鸡红细胞的过程三．实验材料及设备1.实验材料：a)连续2~3天向腹腔中注射含台盼蓝的淀粉肉汤的小鼠一只b)鸡红细胞悬液c)生理盐水2.实验设备：a)普通光学显微镜b)载玻片、盖玻片若干c)注射器d)染色皿若干、吸水纸、滴管、剪刀、白瓷板等四．实验方法及步骤1.小鼠处理与巨噬细胞采集a)连续2-3天（每天一次）向小鼠腹腔中注射含台盼蓝的淀粉肉汤。
b)选择已注射淀粉肉汤3小时以上的小鼠一只。
c)一人控制住小鼠，露出腹部，另一人用注射器向小鼠腹腔中注射1ml鸡红细胞悬液。
按摩小鼠腹部。
d)20-30分钟后，再注射1-1.5ml生理盐水（0.9%NaCl）按摩小鼠腹部。
e)3分钟后，引颈法处死小鼠f)迅速在腹腔剪开一个不大的开口（注意要剪开腹部的肌肉层），用无针头的注射器吸取腹腔液。
g)在载玻片上滴2-3滴腹腔液，加上盖玻片，在显微镜下观察。
2.观察在不同倍数下观察样本，找到正在消化或者吞噬鸡红细胞的巨噬细胞。
注意避免玻片液体干涸。
五．实验结果小鼠红细胞巨噬细胞鸡红细胞已吞噬鸡红细胞的巨噬细胞图1小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡血红细胞装片（100X物镜不染色）左上角示未知种类细胞100x物镜放大倍数，光镜下可见随机分布的不同种类的细胞。
实验六 小鼠巨噬细胞吞噬现象的观察
一、 实验目的
1.通过观察小鼠巨噬细胞吞噬红细胞的试 验，了解巨噬细胞对异物吞噬的原理和功 能。 2.了解巨噬细胞在机体非特异免疫中的重 要作用。
二、实验原理
高等动物体内的巨噬细胞、单核细胞和嗜中性粒细 胞，具有吞噬作用的功能。它们广泛分布在组织和 血液中，在机体的非特异免疫功能中起着重要作用。 当病原微生物或其他异物侵入机体时，能招引巨噬 细胞，而巨噬细胞又有趋化性，它通过产生活跃的 变形运动，主动向病原体和异物移行聚集，首先把 异物吸附在细胞表面，随之，吸附区域的细胞膜向 内凹陷，伸出伪足包围异物，并吞入胞质，形成吞 噬泡，继而在细胞质中的初级溶酶体与吞噬泡融合， 形成吞噬溶酶体，把病原体杀死，异物消化分解。 巨噬细胞吞噬异物的能力在一定程度上反映了机体 免疫水平的高低。
单核细胞（上）和巨噬细胞（下）
单核巨噬细胞吞噬过程示意图
巨噬细胞正在吞噬衰老的红细胞
巨噬细胞吞噬细菌（电镜）
肺巨噬细胞吞噬大肠杆菌（电镜）
三、实验仪器、材料和试剂
1. 仪器、用具：显微镜、高压灭菌锅、解剖盘、解 剖剪、1ml注射器、吸管、载玻片、盖玻片。 2. 材料：小鼠（体重20g左右），鸡血。 3. 试剂： 4%台盼蓝染液：台盼蓝染粉 0.4克，加0.85%生 理盐水100ml。 6%淀粉肉汤（含0.3%台盼蓝）：牛肉膏 0.3克； 蛋白胨 1.0克；氯化钠0.5克；蒸馏水 100ml。加热后, 可加入6.0克可溶性淀粉，促使溶解，再煮沸灭菌， 置40C冰箱保存，用时水浴熔化，加入适量4%台盼 蓝染液混匀，使呈蓝色。
五、实验结果
六．注意事项
1、给小白鼠腹腔注射6%淀粉肉汤时要注意 进针适度，注射量要合适。 2、给小白鼠腹腔注射时，抓小鼠不要太 紧，以免小鼠死亡。 3、使用的载玻片要很干净。
小鼠腹腔巨噬细胞吞噬实验
目的要求
1．了解小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象的原理 2．熟悉细胞吞噬作用的基本过程 3．了解细胞吞噬实验的研究意义
基本原理
? 吞噬是单细胞动物摄取营养物质的主要方式，也是高等动 物的一种非特异性免疫防护机制。高等动物内的巨噬细胞 、单核细胞和中性粒细胞等具有吞噬功能，当病原微生物 或其他异物侵入机体时，巨噬细胞由于具有趋化性，会向 异物处聚集，将其内吞入细胞质，形成吞噬泡，然后吞噬 泡与溶酶体融合，将异物消化分解。
0.85%生理盐水；阿氏（ Alsever）血液保存液； 蛋白胨 2.0g 加水 100ml 灭菌备用。 3．材料：小白鼠； 1%鸡红细胞悬液
方法与步骤
? 鸡翼下静脉取血后，加生理盐水离心两次，然后 根据获得的红细胞的体积加入适量的生理盐水， 调至鸡红细胞浓度为 1%。
实验前三天，每天向小鼠腹腔注射 2%的蛋白胨溶液1ml， 实验前1小时，向腹腔内注射 1%鸡红细胞1ml。
吸取腹腔液
脱椎致死
在干净的载玻片上滴加一滴生理盐水，向其中滴加一滴 腹腔液，静置 10分钟，使腹水细胞贴壁，弃去生理盐水， 待其稍干后，进行瑞氏染色。
未被吞噬的鸡红细胞
吞噬了鸡红细胞 的吞噬细胞
实验报告
? 镜检时，你能在视野中看到几种类型的细胞？ ? 计算吞噬细胞的吞噬指数和吞噬百分数。
吞噬百分数 =
? 吞噬泡的形成需要有微丝及其结合蛋白的帮助，如果用降 解微丝的药物细胞松弛素B处理细胞，则可阻断吞噬泡的形 成；免疫抑制剂环磷酰胺（ CYP）对巨噬细胞的吞噬作用也 有影响。
? 通过观察细胞对鸡红细胞、酵母菌等的吞噬，计算吞噬百 分数和吞噬指数，可以分析判断机体的免疫水平。
实验用品
1．器材：显微镜、解剖：
巨噬细胞吞噬现象的观察
| 实验目的 | 实验原理 | 仪器、材料与试剂 | 实验步骤 | 实验报告及思考题
目的要求
1．了解小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象的原理 2．熟悉细胞吞噬作用的基本过程
实
验 原 理
在高等动物中，单核吞噬细胞系统源自嗜中性粒细胞专司 吞噬功能，在细胞的非特异性免疫功能中发挥重要作用。单 核吞噬系统包括血液中的单核细胞和组织中固定和游走的巨 噬细胞。
| 4.瑞氏染色：滴加3~4滴瑞氏染液于标本上，以
完全盖住标本为宜。
| 5分钟后甩去玻片上的染液，自来水轻洗，吸水纸
吸干。
| 干燥后油镜镜检 | 5. 清洗油镜，解剖盘及器具，打扫桌面卫生、实
验室卫生，老鼠尸体要掩埋！
实验报告及思考题
实验报告
1.画图示出你所观察到的小鼠腹腔巨噬细胞吞噬羊红细胞的各种形态。
2.计算吞噬百分比，即每一百个吞噬细胞中吞有羊红细胞的吞噬细胞数。
思考题
1.在高等动物中哪些细胞具有吞噬功能？ 2.在什么情况下巨噬细胞吞噬功能加强？
未被吞噬的鸡红细胞
吞噬了鸡红细胞 的吞噬细胞
四、实验步骤
| 实验前3天取小白鼠腹腔注射6％淀粉液1毫升（连
续注射三天效果较好）。
| 1．小鼠腹腔注射1％的鸡红细胞悬液2ml，
轻揉腹部使鸡细胞分散。
| 2 ． 25～30分钟后，用颈椎脱臼法处死小
鼠。并腹腔注射生理盐水2毫升
3.在干净的载玻片上滴加一滴生理盐水，向 其中滴加一滴腹腔液，静置10分钟，腹腔 巨噬细胞贴壁，弃去生理盐水，待其标本 稍干后瑞氏染液染色。
但静息的巨噬细胞其分泌和杀伤功能低下，受到病原微 生物或炎症因子的刺激时，巨噬细胞成为激发或致敏状态， 分泌能力得以增强，但杀伤功能仍然很低。只有活化的巨噬 细胞才具有较强的吞噬能力，具有非特异抗感染和抗肿瘤作 用。
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实验6小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象观察
姓名：李思露
学号：131140040
一、实验目的
1.通过对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞活动的观察,加深理解细胞吞噬作用的过程；
2.了解巨噬细胞吞噬能力检测的形态学方法
二、实验原理
吞噬作用也称为胞吞作用（cellular eating），指细胞通过质膜内陷形成内吞泡的方式吞入不能渗透过膜的较大固体物质（直径一般大于250mm）的过程。
许多原生动物通过吞噬作用摄取营养；高等动物体内的巨噬细胞和嗜中性粒细胞的吞噬作用成为动物体非特异性免疫的重要组成部分。
不同动物来源的巨噬细胞或同一动物来源的不同巨噬细胞吞噬功能强弱不同，个体吞噬细胞的平均吞噬能力是机体非特异性免疫功能强弱的重要反映。
吞噬细胞细胞膜上有识别某些病原体相关分子及凋亡细胞磷脂酰丝氨酸等配体的受体，可以使巨噬细胞识别结合病原体、凋亡细胞及其它异物，引起受体胞内区活化，进而导致与其相连的细胞骨架重排引发吞噬作用。
内吞
内吞体
吞噬溶酶体
胞吐
巨噬细胞吞噬自身衰老凋亡细胞而不吞噬正常细胞，原因是，凋亡细胞细胞膜内侧面的磷脂酰丝氨酸反转到胞膜外侧面而被巨噬细胞模式识别受体识别。
吞噬功能一般用吞噬百分率和吞噬指数两个指标反映。
吞噬百分率＝吞噬有鸡红细胞的巨噬细胞数/巨噬细胞总数×100％
吞噬指数＝吞噬的鸡红细胞总数/吞噬有鸡红细胞的巨噬细胞数
三、实验材料、试剂及器材
（一）材料：
1.健康小白鼠：6-8周龄健康小白鼠，实验前1~2天，每只腹腔注射4％淀粉肉汤1mL。
2.抗凝鸡血
（二）试剂:
1.4%淀粉肉汤
2.D-Hanks液
3.0.85％生理盐水
4.180IU/mL肝素钠生理盐水溶液
（三）用品
普通光学显微镜、10mL低速离心机、托盘天平、水浴箱（37℃）、5mL一次性注射器、10mL玻璃离心管、试管架、胶头滴管等
四、实验操作
1.巨噬细胞收集：脱颈处死小鼠；腹腔注入2mL生理盐水，揉匀；剪开腹部皮肤，
暴露腹膜；用带针头的注射器插进腹腔吸取腹腔液。
2.体外吞噬。
0.3mL腹腔液+0.3mL鸡红细胞悬液，37℃吞噬。
3.制片及观察。
分别在0min、15min、30min、45min 制备细胞混合液临时装片，观
察现象并作图。
五、实验结果
图1 小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡血红细胞装片（不染色）
0min15min30min45min 时
间
现
象
巨噬细胞吞噬物的变化亦具有与时间相关的特点，巨噬细胞吞噬物在形态上易于观察和检测，这些特征使得巨噬细胞在损伤时间推断过程中具有重要的法医学意义。
六、作业与思考题
1.画图显示巨噬细胞吞噬鸡红细胞过程各个阶段。
答：如表1.
2.在体外吞噬实验中，为什么随着吞噬时间延长，制片中出现的巨噬细胞数量减少？
答：巨噬细胞（Macrophages）能够吞没、破坏受损伤组织，有助于启动康复过程。
虽然它们在损伤位点发挥关键作用，但一旦任务完成，就需要尽快撤离，结束炎症反应，为再生过程开路。
继续存在的巨噬细胞不利于组织恢复。
3.如不预先洗涤鸡红细胞会影响实验结果吗？为什么？
答：会。
D-hanks液是一种平衡盐溶液，用于洗涤鸡血红细胞，如果不洗涤则鸡血红细胞含有钙镁离子，会破坏巨噬细胞溶酶体水解酶的活性，影响吞噬过程的进行。
七、反思与改进
1.注射时注意不要注入皮下或将针头插进小鼠内脏。
进针部位选在下腹部，距离生殖
器约1cm处腹中线两侧，针头与皮肤保持约30度到45度角，针头进入皮肤约1cm；
可用一只手的拇指和食指将下腹部皮肤及腹膜夹起，然后将针头插入空腔。
2.要注意计时，不同阶段细胞的形态不同。
3.如有侵权请联系告知删除，感谢你们的配合！
4.
5.
6.。