72饲料中矿物元素分析-磷的测定

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一、饲料中总磷量的测定（钼黄比色法）
三、测定步骤
（3）结果计算
P=
α×10-6 m
×V V1
式中： m－试样质量；V－试样分解液总体积； V1－比色测定时所移取试样分解液体积； a－由标准曲线计算所得的试样分解液含磷量，μg/50ml； 10－6－为从μg转化为g的系数。
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一、饲料中总磷量的测定（钼黄比色法）
一、原理
先将试样中有机物破坏，使磷游离出来，在酸性溶 液中，用钒钼酸铵处理，生成黄色络合物—（NH4） 3PO4•NH4VO3•16MoO3（磷－钒－钼酸复合体），在波 长400nm下进行比色测定。
此法测得为总含磷量，其中包括动物难以吸收的植 酸磷。
与测定钙的方法一致，只是盐酸溶液浓度不一样。 有研究认为，用测定钙后的分解液可直接用于测定饲料总磷。
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一、饲料中总磷量的测定（钼黄比色法）
三、测定步骤
（1）试样的分解
B、湿法
称取试样0.5～5g于凯氏烧瓶中，精确至0.0002g，加入浓硝酸（GB623 分析纯）30mL，加热煮沸，至二氧化氮黄烟逸尽，冷却后加入高氯酸 （GB623分析纯）10mL，小心煮消沸至溶液无色,不得蒸干（危险！）， 冷却后加蒸馏水50mL，且煮沸腾驱逐二氧化氮，冷却后转入100mL容量 瓶，用蒸馏水稀释至刻度,摇匀,为试样分解液。
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一、饲料中总磷量的测定（钼黄比色法）
三、测定步骤
（2）标准曲线的绘制
吸光度（A）
0.8 0.7 0.6 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1
0 0
磷标准曲线
y = 0.001x - 0.001 R2 = 0.9995
100 200 300 400 500 600 700 800 磷含量（μg/50ml）
➢ 研究认为，湿法是目前较为理想的、稳定的一种分解方法，分解完全，易 于操作。准确度和优于干法。通风良好的情况下进行。
➢ 干法分解样品时，灼烧过程中，样品飞溅、灰化不完全等因素易引起较大
的误差。
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一、饲料中总磷量的测定（钼黄比色法）
三、测定步骤
（1）试样的分解
C、盐酸溶解法（适用于微量元素预混料） 称取试样0.2～1g（精确至0.0002g ）于100 ml烧杯中， 缓缓加入盐酸溶液10mL（1＋1，V+V）使其全部溶解，冷 却后溶液转入100 ml容量瓶，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀， 为试样分解液。
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一、饲料中总磷量的测定（钼黄比色法）
二、仪器设备及试剂
盐酸、硝酸、偏钒酸铵、钼酸铵、磷酸二氢钾；实验室用样品粉碎 机或研钵、分样筛、分析天平、分光光度计、高温炉、坩埚、容量瓶、 容量瓶或具塞比色管、刻度移液管、凯氏烧瓶。
1 盐酸 1＋1（V1＋V2） 2 浓硝酸 3 高氯酸 4 钒钼酸铵显色剂（避光保存，如生成沉淀则不能继续使用） 5 磷标准溶液（50μg/ml，用磷酸二氢钾配制，溶液中加入了3ml浓 硝酸）
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一、饲料中总磷量的测定（钼黄比色法）
三、测定步骤
（1）试样的分解
A、干法（不适用于含磷酸氢钙的饲料） B、湿法 C、盐酸溶解法（适用于微量元素预混料）
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一、饲料中总磷量的测定（钼黄比色法）
三、测定步骤
（1）试样的分解 A、干法（不适用于含磷酸氢钙的饲料）
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一、饲料中总磷量的测定（钼黄比色法）
三、测定步骤
（2）试样的测定 准确移取试样分解液1～10 ml于50 ml容量瓶，加 入钒钼酸铵显色试剂10 ml，用水稀释至刻度，摇匀， 放置10 min。以0 ml溶液为参比，用10 mm比色池， 在400 nm波长下，用分光光度计测得试样分解液得吸 光度。用标准曲线查得试样分解液的含磷量。
3．测定步骤
同总磷测定方法。
问题讨论： 总磷和无机磷测定有
什么不同？
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三、饲料中植酸磷的测定（TCA法）
➢ 植物性饲料中的磷以植酸磷和非植酸磷两种形式存在。
➢ 植酸即肌醇六磷酸，是一种淡黄色粘稠状液体，易溶于水，可 经盐酸水解生成肌醇和正磷酸。
➢ 植酸在植物体中一般不以游离形式存在，而是与钙、镁、钾、 钠、铁等金属离子结合，几乎都是以复盐(与若干金属离子结合) 或单盐(与一种金属离子结合)的形式存在，称为植酸盐 〔phytate)，或称为肌醇六磷酸盐
常见植物性饲料原料植酸磷含量. 表1
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三、饲料中植酸磷的测定（TCA法）
（一）原理
用30g/L三氯乙酸作浸提液提取植酸盐，然后加入铁盐 使植酸盐生成植酸铁沉淀，与氢氧化钠反应转化为可溶性 植酸钠和棕色氢氧化铁沉淀，用钼黄法直接测出植酸磷含 量。
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谢谢
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Baidu Nhomakorabea
一、饲料中总磷量的测定（钼黄比色法）
四、影响因素（注意事项）
（1）酸度的影响（配制磷标准溶液）
硝酸用量对被测物质的吸光度有较大的影响。当 1000mL 磷标准液加 1+1 硝酸2－4mL 之间时，测得溶液吸光度不变。故本实验选择加入 3mL硝酸。
（2）显色剂用量的选择
实验表明，显色剂用量在9.5－11.0mL 范围内，溶液吸光度较大且恒定， 因此本实验选用显色剂用量为10mL。
Algebra 2/Trig
72饲料中矿物元素分析-磷的测定
M acintosh P IC T im age form at
is not supported
8.6 Radical Expressions and Radical Functions Pages 520-527
饲料中磷的测定
饲料中总磷的测定（钼黄比色法） 饲料中植酸磷的测定（三氯乙酸）
（3）显色时间的影响
每隔5～10min 测定一次溶液的吸光度，显色时间在10min 时吸光度达最
大且恒定，在50min 内显色稳定，对测定结果基本没有影响。故本实验
3/12/2选021择10min 作为显色稳定时间。
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一、饲料中总磷量的测定（钼黄比色法）
四、影响因素（注意事项）
（4）共存离子影响及消除
A、钙离子干扰及其消除
饲料中含大量的钙，在分解液中以Ca2+ 形式存在，它可与PO43-离子生成 Ca3(PO4)2 沉淀（Ksp=2.0×10-29），使结果偏低。当 pH <7.0 时，产生酸效 应，Ca2+与PO43-不能生成Ca3(PO4)2 沉淀，所以，控制溶液pH <7.0 可以消 除Ca2+的干扰。由于本实验在样品处理过程中加入了酸，故无需另作处理便 可消除Ca2+的干扰。
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三、饲料中植酸磷的测定（TCA法）
植物性饲料中的磷大多以植酸磷的形式存在，而单胃动 物体内缺乏植酸酶或酶的活性不高，长期以来人们往往是 按照植物性饲料中磷的有效率为总磷的1／3的假设来进行 饲料配方设计，有的甚至忽略不计，而用无机磷来满足动 物对磷的需要量，这样势必造成磷源的浪费，导致磷的过 量排泄。
称取试样2～5g于坩埚中，精确至0.0002g，在电炉上小心炭化，再 放入高温炉于550℃下灼烧3h（或测定粗灰分后连续进行），在盛灰坩 埚中加入盐酸溶液10mL（1＋1，V+V）和浓硝酸数滴，小心煮沸约10 min，将此溶液转入100 ml容量瓶，冷却至室温，用蒸馏水稀释至刻度， 摇匀，为试样分解液。
化验指标都是测总磷，并不能确定其中有机磷的含量。
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二、饲料中无机磷的测定
1．无机磷测定原理
将饲料样品用盐酸和硝酸处理，使无机磷浸提出来，对滤液进行测 定，可求出无机磷。将总磷含量减去无机磷含量，即得有机磷含量。
2．测定无机磷样品处理
准确称取试样2～5g置于100ml烧杯中，加10ml盐酸溶液和硝酸数 滴，加水30ml，搅拌数分钟，然后定量转入100ml容量瓶中，用水稀 释至刻度，摇匀，过滤弃去初始的20ml滤液，为试样分解液。
B、砷离子干扰及消除
砷（V）可与钼酸铵产生与主反应类似的黄色物质杂多酸，使测定结果偏高。 选用0.5% Na2S2O3 作掩蔽剂。选择0.5% Na2S2O3 溶液3.0mL作掩蔽剂效果 最佳。
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二、饲料中无机磷的测定
动物体内的磷主要来自饲料，但植物性饲料中的磷相 当一部分是以有机磷(主要为植酸磷)的形式存在，不能被 动物充分利用，大部分随粪便排除体外。因此，在配合饲 料中必须补充足够的无机磷。但如果用之过量，常常又会 破坏畜禽生长的正常代谢过程及必要的生产过程。因此， 作为评价饲料品质，不仅要求测定总磷含量，而且要求对 不同化学形态的磷分别进行定量测定。但目前通用的常规