实验食品中蜡样芽孢杆菌检验
蜡样芽孢杆菌 食品法规
蜡样芽孢杆菌食品法规
蜡样芽孢杆菌是一种常见的细菌，主要存在于土壤、水、气等环境中，也可存在于一些食品中。
由于蜡样芽孢杆菌能产生耐热毒素，故在食品安全监管中备受关注。
目前，国内外对蜡样芽孢杆菌的食品法规主要有以下几点规定： 1.微生物指标：蜡样芽孢杆菌属于食品中的指标菌之一，其在食品中的数量应符合国家标准规定。
例如《食品安全国家标准食品安全微生物指标》中规定，各类食品中蜡样芽孢杆菌的限量标准均不得超过10CFU/g或CFU/mL。
2.食品安全标准：蜡样芽孢杆菌能够产生耐热毒素，因此在某些食品中的含量应该特别关注。
例如，我国《食品安全国家标准食品中耐热性毒素限量》中规定，蜜饯制品中耐热性毒素的限量标准应不得超过10μg/kg。
3.食品生产卫生管理：为了确保食品的安全，食品生产企业应加强生产卫生管理，控制蜡样芽孢杆菌的污染。
例如，我国《食品安全法》中规定，食品生产企业应具备相应的生产设施、设备和卫生条件，并实行食品安全管理制度，确保食品生产符合卫生标准。
总之，蜡样芽孢杆菌在食品安全监管中备受关注，各国都采取了相应的法规措施来确保食品的安全。
企业应加强生产卫生管理，确保食品的安全和健康。
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欧盟蜡样芽孢杆菌标准
欧盟蜡样芽孢杆菌标准全文共四篇示例，供读者参考第一篇示例：欧盟蜡样芽孢杆菌标准是指欧洲联盟制定的关于蜡样芽孢杆菌（Bacillus cereus）的质量要求和检测方法的标准。
蜡样芽孢杆菌是一种常见的细菌，广泛存在于自然界中的土壤、水源、植物等环境中。
它是一种潜在的食品污染源，能够在一定条件下产生产生毒素，引起食物中毒。
欧盟制定了一系列的标准，旨在控制和监测蜡样芽孢杆菌在食品中的含量，保障食品安全。
欧盟蜡样芽孢杆菌标准主要包括以下几个方面：1. 质量要求：欧盟规定了食品中蜡样芽孢杆菌的最大容许限量。
不同类型的食品具有不同的容许限量，其中以婴幼儿食品和食品中成分含水量高的产品要求最为严格。
这些限量的设定旨在保证人们在食用食品时不会遭受蜡样芽孢杆菌毒素的危害。
2. 检测方法：欧盟规定了蜡样芽孢杆菌的检测方法，包括取样方法、预处理方法、培养方法、毒素检测方法等。
这些方法一般由专业实验室进行操作，确保检测结果的准确性和可靠性。
3. 风险评估：欧盟对食品中蜡样芽孢杆菌的风险进行评估，分析潜在的风险因素和传播途径。
通过风险评估，可以及时采取控制措施，降低食品中蜡样芽孢杆菌的污染风险。
4. 风险管理：欧盟制定了一系列的风险管理措施，包括食品加工中的卫生规范、食品贮存和运输中的控制措施等。
这些措施旨在预防和控制蜡样芽孢杆菌在食品中的传播和繁殖。
欧盟蜡样芽孢杆菌标准的制定和执行，旨在保障食品安全，减少食品中蜡样芽孢杆菌的污染，降低人们因食用受污染食品而引发的食物中毒风险。
对于食品生产企业和相关部门而言，严格执行欧盟蜡样芽孢杆菌标准是确保产品质量和消费者健康的重要措施。
希望通过这些标准的制定和实施，可以有效地保障欧盟市场上食品的安全性，提高消费者对食品的信任度和满意度。
第二篇示例：欧盟蜡样芽孢杆菌标准（European Union Bacillus cereus Standard）是欧洲联盟为保障食品安全所制定的一项重要规范。
蜡样芽孢杆菌国标检测方法
蜡样芽孢杆菌国标检测方法蜡样芽孢杆菌（Bacillus cereus）是一种广泛存在于自然环境中的细菌，它可以生长在食品和环境中，因此对于食品和饮料行业来说，蜡样芽孢杆菌的检测非常重要。
国际上已经制定了相关的标准，而国内也制定了具体的检测方法。
本文将介绍蜡样芽孢杆菌国标检测方法并展开详细描述，以供相关行业参考。
1. 国标检测方法蜡样芽孢杆菌国标检测方法主要采用了生物学检测和分子生物学检测方法。
生物学检测主要使用平板计数法和过滤膜法，分子生物学检测主要使用聚合酶链式反应法（PCR法）和实时荧光定量PCR法（qPCR法）。
2. 样品选择需要检测的样品包括：发酵食品、膳食补充剂、调味品、果蔬制品、肉制品和乳制品等。
3. 样品制备样品制备前应先进行预处理。
首先采样应在保持样品原有状态的基础上进行。
对于固体样品，应采用加热处理或浸泡法进行分离；对于液体样品，应使用过滤方法或离心沉淀法进行分离。
4. 平板计数法平板计数法是指直接将样品加入含有富含营养物质的寒天平板中，将平板培养在适宜的环境中，形成菌落后进行计数。
整个操作过程需要消毒操作标本及工具，取样后用无菌吸管挤压或邀约样本，点样于寒天平板上，用无菌毛细管在菌液上滴蒸馏水，最后在恰当条件下培养。
5. 过滤膜法过滤膜法将膜片放入模具上，加入样品后进行过滤，将膜片放入含营养物质的寒天平板中，使其形成菌落后，进行计数。
操作过程中需要对膜片进行密封操作以避免空气污染。
6. PCR法PCR法是指从样品中提取DNA，并使用特定引物进行扩增，在扩增过程中计量目的DNA 的含量。
PCR方法的核心技术是产生大量DNA分子复制，以此来检测目标DNA。
7. qPCR法qPCR法是指通过PCR法产生信息荧光信号，以定量检测目标DNA的含量。
qPCR法和PCR法类似，都是通过DNA扩增并检测扩增产物来判断样品是否含有目标DNA。
8. 标准限值国标GB 4789.38-2016中规定蜡样芽孢杆菌在各类食品和饮料中的限值分别为100CFU/g和10CFU/mL，不得检出则符合标准。
基于双富集微流控技术的食品中蜡样芽孢杆菌快速检测
引用格式：唐璎, 周春红, 杨晓楠, 等. 基于双富集微流控技术的食品中蜡样芽孢杆菌快速检测[J]. 中国测试，2023, 49(11): 53-59.TANG Ying, ZHOU Chunhong, YANG Xiaonan, et al. Rapid detection of Bacillus cereus in food using dual-enrichment microfluidic technology[J]. China Measurement & Test, 2023, 49(11): 53-59. DOI: 10.11857/j.issn.1674-5124.2023080005基于双富集微流控技术的食品中蜡样芽孢杆菌快速检测唐 璎， 周春红， 杨晓楠， 黄 佳， 邓展瑞， 马婷婷(甘肃省产品质量监督检验研究院，甘肃 兰州 730050)摘 要: 为实现食源性致病菌多场景即时检验，替换常规检验及快检技术中耗时的增菌培养过程，以缩短检验时间和降低实验环境及设备要求。
研究以蜡样芽孢杆菌为研究对象，采用双层膜富集样品中菌体，磁珠提取纯化微量DNA 的方式，取代增菌培养过程，同时将环介导等温扩增反应与微流控芯片相结合，有效避免扩增中气溶胶污染问题。
实验结果显示：使用双富集微流控技术检测食品中蜡样芽孢杆菌，可将现行国标的检验时间由5~7 d 缩短至1 h 内，方法特异性良好，检出限为10 CFU/g(mL)等同于现行国标，Ct 值变异系数<5%，显示重复性好。
研究建立的双富集微流控技术快速检测食品中蜡样芽孢杆菌方法可实现食源性致病菌即时快速检验，为食源性致病菌引起的食品安全事件和舆情风险防控快速反应提供技术支撑。
关键词: 食源性致病菌快检; 蜡样芽孢杆菌; 膜富集; 磁珠纯化DNA; 环介导等温扩增; 微流控芯片中图分类号: Q939;Q75;TB9文献标志码: A 文章编号: 1674–5124(2023)11–0053–07Rapid detection of Bacillus cereus in food using dual-enrichment microfluidictechnologyTANG Ying, ZHOU Chunhong, YANG Xiaonan, HUANG Jia, DENG Zhanrui, MA Tingting (Gansu Province Product Quality Supervision and Inspection Research Institute, Lanzhou 730050, China)Abstract : To achieve real-time detection of foodborne pathogenic bacteria in various scenarios, and to address the time-consuming steps of bacterial enrichment and cultivation process in conventional and rapid testing techniques, thereby reducing the testing time and requirements for experimental environment and equipment.The study focused on Bacillus cereus as the research subject. It employed a dual-membrane enrichment method to enrich Bacillus cereus from the samples, and magnetic beads were used to extract and purify trace amounts of DNA, replacing the bacterial enrichment and cultivation process. Simultaneously, the study integrated the loop-mediated isothermal amplification-PCR(LAMP) reaction with a microfluidic chip, effectively avoiding aerosol contamination issues during LAMP amplification. The experimental results showed that the use of the dual-enrichment microfluidic technology for detecting Bacillus cereus in food can reduce the testing time from the current national standard of 5-7 days to within 1 hour. The method exhibited good specificity with a收稿日期: 2023-08-01；收到修改稿日期: 2023-09-24基金项目: 国家市场监督管理总局科技项目（2021MK109）；甘肃省自然科学基金项目（23JRRA1707）作者简介: 唐 璎（1986-），女，安徽阜阳市人，高级工程师，硕士，从事食品微生物检验研究。
食品中蜡样芽孢杆菌的检验
三、微生物检验
▪ 操作步骤： 2、分离试验
取检样或稀释液划线分离培养于选择性培养基（MYP）上，置37℃培养12-20h，挑取可疑的 蜡状芽胞杆菌菌落接种于肉汤和营养琼脂作成纯培养，然后做证实试验。 3 证实试验 （1）镜检观察形态 （2）培养特性 （3）生化性状及分型
三、微生物检验
▪ （三）结果报告 根据证实为蜡状芽胞杆菌的菌落数计算出该平板上的菌落数，然后乘以稀释倍数，即得每 g(ml)样品中所含蜡状芽孢杆菌数。如MYP平板上的可以菌落为25个，取5个鉴定，证实为四 个，乘上稀释倍数（104），再乘上1g(ml)检样数（取的是0.1ml样)，则 N=25*4/5*104*10=2*106 报告每个g(ml)检样中含蜡状芽胞杆菌的数量（个/个g(ml))
中乳。
▪ 麦芽糖：阳性
（三）、生化反应
▪ 甘露醇：阴性
（三）、生化反应
▪ 木糖：阴性
（三）ห้องสมุดไป่ตู้生化反应
▪ 尿素酶试验：阴性
（三）、生化反应
未接种
接种
（四）、抵抗力
1、耐热； 2、对抗菌素的敏感性。
二、流行病学
（一）、细菌分布 蜡样芽胞杆菌在自然界分布广泛，常存在于土壤、灰尘和污水中，植物和许多生熟食品中常见。已 从多种食品中分离出该菌，包括肉、乳制品、蔬菜、鱼、土豆、糊、酱油、布丁、炒米饭以及各种 甜点等。 在美国，炒米饭是引发蜡样芽胞杆菌呕吐型食物中毒的主要原因；在欧洲大都由甜点、肉饼、色拉 和奶、肉类食品引起；在我国主要与受污染的米饭或淀粉类制品有关。
二、流行病学
（一）、细菌分布 以前调查各种食品514件，发现本菌：日本1641件中有193件阳性，阳性率11.8%；国内480件 中有221件阳性，阳性率46%；乳制品阳性率77%；水果、干果阳性率8.1%；肉制品阳性率26%。
蜡样芽孢杆菌检测国标
蜡样芽孢杆菌检测国标蜡样芽孢杆菌是一种常见的致病微生物，它会引起食物中毒的发生。
针对蜡样芽孢杆菌的检测方法，我国制定了相关国家标准，本文将从以下三个方面进行介绍。
一、蜡样芽孢杆菌简介
蜡样芽孢杆菌又称为蜡样芽孢菌（Bacillus cereus），是一种革兰氏阳性菌。
其孢子分布广泛，可以在空气、土壤、水、食品等各种环境中存活，甚至在高温加工食品中也可以存活。
蜡样芽孢杆菌是一种致病微生物，能够引起急性食物中毒，这是因为它产生的毒素能够影响肠胃道，引起呕吐、腹泻等症状。
二、蜡样芽孢杆菌检测国标
为了保障人们的食品安全，我国对食品中的蜡样芽孢杆菌进行了规范化的检测方法，主要是通过标准的培养及鉴定步骤进行。
1.样品采集：首先需要确定样品的种类，其次选择适当的采集方法，例如在市场上购买的食品需要在废弃部位进行采集，以保障采样的准确性。
2.样品处理：将采集到的食品样品进行前处理，包括样品的清洁去除外部污染等步骤。
3.菌液制备：将采样到的食品样品用合适的培养基进行培养，培养出的菌落进行鉴定，得到蜡样芽孢杆菌后进行菌液制备。
4.检测方法：采用PCR法、生物分子方法、蛋白质检测法等方式对菌液进行检测，以确认菌液中是否有蜡样芽孢杆菌存在。
5.结果判定：判定样品中是否存在蜡样芽孢杆菌，并进行定性和定量分析。
三、总结
蜡样芽孢杆菌检测国标对食品安全有着重要的意义，它通过科学、规范的检测方法保障了人们的食品安全。
在实际操作中，应加强样品采集及前处理，保证样品的准确性。
同时，为了提高检测的灵敏度和准确性，应选择合适的检测方法。
最后，需要将检测结果进行有效记录，以便后续参考。
出口食品中蜡样芽孢杆菌检验方法
出口食品中蜡样芽孢杆菌检验方法1.适用范围本方法适用于出口食品的检验。
2.培养基和仪器2.1.培养基甘露醇卵黄多粘菌素琼脂(MYP)；胰酪胨大豆多粘菌素肉汤；酚红葡萄糖肉汤；硝酸盐肉汤；营养琼脂；l-酪氨酸营养琼脂；溶菌酶营养肉汤；改良V-P培养基；动力培养基；胰酪胨大豆羊血琼脂(TSSB)；Butterfield 氏磷酸盐缓冲稀释液；亚硝酸盐试剂；V-P试剂；碱性复红染色液。
2.2.仪器吸管：容量1.0mL和10.0mL，具0.1mL刻度；菌落计数器；均质器；厌氧培养装置；涡动搅拌器；L形玻璃棒；恒温培养箱：30℃及36±1℃。
3.样品的保存和送检待检样品应保持在6℃以下运送并尽可能不使其冷冻。
送达实验室后，应保存于4 ℃并尽快进行检验。
如在4d内不能进行检验，应将样品储存在－20℃，检验前再于室温下解冻。
脱水食品可在常温下送检和储存。
4.样品的制备4.1.以无菌操作用灭菌刀、剪将样品剪碎。
称取50g放于无菌均质杯中。
4.2.加450mL无菌磷酸盐缓冲稀释液于均质杯中以18000～20000r/min均质2min。
制成1∶10样品稀释液。
4.3.取1∶10稀释液10.0mL加到含有90.0mL无菌磷酸盐缓冲液的稀释瓶中，充分混匀制成1∶100的稀释液。
4.4.每个稀释度换用1支10.0mL灭菌吸管，按上述操作程序进行10倍递增稀释直至10－6。
5.检验步骤5.1.平板计数法取各稀释液0.1mL接种到MYP琼脂平板上。
用灭菌L形玻璃棒均匀涂布于整个琼脂表面。
每稀释度接种两个MYP琼脂平板。
将平板置于30℃培养24h。
选取具有15～150个典型或可疑蜡样芽孢杆菌菌落的平板，进行计数。
并计算同一稀释度两个平板的平均菌落数。
蜡样芽孢杆菌在MYP琼脂平板上生成的菌落为微粉红色，环绕产生卵磷脂酶沉淀环。
如反应不典型，可继续培养24h再计数。
计数后，从每个平板至少选取5个已计数的菌落分别接种于营养琼脂斜面，于30℃培养24h，按第6章进行证实试验。
蜡样芽孢杆菌食物中毒诊断标准
蜡样芽孢杆菌食物中毒诊断标准【蜡样芽孢杆菌食物中毒诊断标准】引言：在当今食品安全日益成为人们关注的焦点之际，蜡样芽孢杆菌食物中毒成为了一个备受争议的话题。
蜡样芽孢杆菌是一种常见的细菌，能够在恶劣条件下生存，并产生毒素，导致中毒症状。
为了保障公众健康，食物中毒的诊断标准至关重要。
本文将从深度和广度两个角度出发，全面评估蜡样芽孢杆菌食物中毒的诊断标准，并为读者提供深入的理解。
一、蜡样芽孢杆菌食物中毒的概述蜡样芽孢杆菌是一种厌氧细菌，可以存在于土壤、水源、动物肠道等不同环境中。
当食物受到污染后，蜡样芽孢杆菌便会繁殖并产生毒素。
主要通过摄入受污染的食物或饮用水进入人体，引发中毒。
蜡样芽孢杆菌食物中毒在全球范围内都较为常见，尤其是与未煮熟的动物产品有关。
二、蜡样芽孢杆菌食物中毒的临床表现蜡样芽孢杆菌食物中毒的临床表现多种多样，包括腹痛、呕吐、恶心、腹泻等。
通常在摄入受污染食物后6至12小时内出现临床症状，持续时间较短，一般不超过48小时。
对于临床医生来说，准确的诊断标准至关重要。
三、蜡样芽孢杆菌食物中毒的诊断标准1. 临床症状：患者应该出现急性胃肠炎症状，包括腹痛、呕吐、恶心、腹泻等。
这些症状通常在摄入受污染食物后6至12小时内出现，并持续时间较短，一般不超过48小时。
2. 实验室检测：从患者的粪便或食物样品中分离和鉴定出蜡样芽孢杆菌。
实验室检测的结果对于蜡样芽孢杆菌食物中毒的诊断起着关键作用。
3. 流行病学调查：确定是否存在食品源的污染，并追踪病例，找出疫点，制定相应的控制措施。
四、个人观点和理解蜡样芽孢杆菌食物中毒的诊断标准对于保障公众健康具有重要意义。
然而，仅凭临床症状很难得出准确的诊断，必须依靠实验室检测和流行病学调查来提供确凿的证据。
在实际中，医生应该密切关注患者的症状和流行病学调查的结果，及时采取相应的控制措施，以预防和控制蜡样芽孢杆菌食物中毒的发生。
总结回顾：本文通过深度和广度的探讨，全面评估了蜡样芽孢杆菌食物中毒的诊断标准。
蜡样芽孢杆菌检测标准
蜡样芽孢杆菌检测标准蜡样芽孢杆菌（Bacillus cereus）是一种常见的细菌，广泛存在于土壤、水、空气和食品中。
它是一种厌氧菌，在适宜的条件下能够迅速生长繁殖，因此对其检测标准十分重要。
蜡样芽孢杆菌的存在会对食品安全造成威胁，因为它可以产生多种毒素，其中包括引起食物中毒的致病毒素。
因此，对食品中蜡样芽孢杆菌的检测标准必须严格执行，以保障食品安全。
首先，蜡样芽孢杆菌的检测应该基于科学的方法和标准。
目前，国际上对蜡样芽孢杆菌的检测标准主要包括ISO标准和FDA标准。
ISO标准主要适用于食品和饮用水等领域，而FDA标准则更多地用于医药和化妆品等领域。
在执行检测时，应当严格按照相关标准进行操作，以确保检测结果的准确性和可靠性。
其次，蜡样芽孢杆菌的检测应该注重样品的采集和保存。
在采集样品时，应当避免外界污染，并选择适当的容器进行保存，以防止细菌的生长和繁殖。
同时，在运输和保存过程中，应当注意避免温度和湿度的变化，以确保样品的完整性和稳定性。
另外，蜡样芽孢杆菌的检测还应该关注检测方法的选择和操作流程。
目前常用的检测方法包括培养法、PCR法和免疫学方法等。
在选择检测方法时，应当根据具体的检测对象和要求进行合理的选择，并严格按照操作流程进行操作，以确保检测结果的准确性和可靠性。
除此之外，蜡样芽孢杆菌的检测还应该关注检测结果的解读和评估。
在获得检测结果后，应当根据相关标准和法规进行结果的解读和评估，以确定是否符合安全标准。
同时，还应当对检测过程中出现的异常情况进行分析和处理，以确保检测结果的真实性和可靠性。
总的来说，蜡样芽孢杆菌的检测标准对于保障食品安全至关重要。
在执行检测时，应当严格按照科学的方法和标准进行操作，注重样品的采集和保存，选择合适的检测方法并严格执行操作流程，最终对检测结果进行准确的解读和评估。
只有这样，才能有效地预防和控制蜡样芽孢杆菌对食品安全造成的威胁。
实验三、蜡样芽胞杆菌(Bacillus cereus)的检验
4．证实试验
（1）形态观察
本菌应为G＋杆菌，宽度在1μm或1μm以上，芽孢呈卵圆形， 不突出菌体，多位于菌体中央或稍偏于一端。
革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤，具体操 作方法是： 1）涂片固定。 2）草酸铵结晶紫染1分钟。 3）自来水冲洗。 4）加碘液覆盖涂面染约1分钟。 5）水洗，用吸水纸吸去水分。 6）加95%酒精数滴，并轻轻摇动进行脱色，20秒后水洗，吸去水分。 7）蕃红染色液（稀）染2分钟后，自来水冲洗
（2）培养特性 本菌在肉汤中生长混浊，常有菌膜或壁环， 振摇易乳化。琼脂平板上形成的菌落不透明， 表面粗糙，似毛玻璃状或融蜡状且边缘不齐。
（3）生化特性
本菌有动力；产生卵磷脂酶和酪蛋白酶；过氧 化氢酶试验阳性；溶血；不发酵甘露醇和木糖； 能液化明胶和还原硝酸盐；在厌氧条件下能发酵
葡萄糖。
A、 MYP平板实验
选择性培养基（分离培养） MYP 36 ℃ ±1℃ 12h~20h 营养琼脂培养基 染色镜检 生化试验 菌株保存
报
告
2．菌数测定
以无菌操作将检样25g或25 mL，用灭菌生理盐水或磷酸盐缓冲液
做成10-1～10-5的稀释液。取各稀释液0.1mL，接种在两个选择培养基
（甘露醇卵黄多黏菌素琼脂）平板上，用L形棒涂布于整个表面，置 37℃培养12～20h后，选取菌落数在30个左右者进行计数。蜡样芽孢
还原） 不变为阳性（亚硝酸盐
已分解成氨和氮气）
D、木糖-明胶（Gelatin）液化试验
结果观察与记录：
明胶液化，为阳性，+。 明胶凝固，为阴性，-。
E、L-酪氨酸分解试验
接种于L-酪氨酸琼脂培养基上，35℃培养48 h,阳性反应菌落周围培养基应出现澄清透明 区（表示产生酪蛋白酶）。阴性时应继续培 养72 h再观察。
蜡样芽孢杆菌食物中毒诊断标准
蜡样芽孢杆菌食物中毒诊断标准
摘要：
I.概述
- 蜡样芽孢杆菌食物中毒的定义
- 蜡样芽孢杆菌食物中毒的临床表现
II.诊断标准
- 临床表现
- 呕吐
- 腹痛
- 腹泻
- 反酸和烧心
- 病程和病情
- 病程短，一般不超过12 小时
- 病情轻，多为自限性
- 辅助检查
- 从可疑食物和患者粪便中培养出蜡样芽孢杆菌
- 菌量应达到每克粪便含105 或以上，才有诊断意义III.治疗方法
- 积极的对症治疗
- 给予解痉、止痛药物
- 补充水分和电解质
- 预防措施
- 不吃未经彻底加热的食物
正文：
蜡样芽孢杆菌食物中毒是一种由进食含有蜡样芽孢杆菌所产生的肠毒素所致的食物中毒。
污染的食物主要为含淀粉较多的各类食物。
临床以呕吐、腹泻为主要特征。
病情较轻，病程短，一般不超过12 小时。
诊断蜡样芽孢杆菌食物中毒的主要依据是临床表现、病程和病情。
患者会出现呕吐、腹痛、腹泻和反酸烧心等症状。
病程短，病情轻，多为自限性。
在辅助检查方面，从可疑食物和患者粪便中培养出蜡样芽孢杆菌是确诊的重要依据。
菌量应达到每克粪便含105 或以上，才有诊断意义。
治疗蜡样芽孢杆菌食物中毒主要采用积极的对症治疗。
例如，给予解痉、止痛药物缓解腹痛，补充水分和电解质以防止脱水。
预防蜡样芽孢杆菌食物中毒的关键是不吃未经彻底加热的食物，避免食用含淀粉较多的食物。
蜡样芽孢杆菌
食品卫生微生物学检验蜡样芽胞杆菌检验1范围本标准规定了蜡样芽胞杆菌的检验方法。
本标准适用于各类食品和食物中毒样品中蜡样芽胞杆菌的检验。
2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。
凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。
凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。
GB／T 4789.2食品卫生微生物学检验菌落总数测定GB／T 4789.28—2003食品卫生微生物学检验染色法、培养基和试剂3设备和材料3.1冰箱：0℃～4℃。
3.2恒温培养箱：36℃±l℃。
3.3恒温水浴锅：46℃±l℃。
3.4显微镜：l0×～l00×。
3.5均质器或灭菌乳钵。
3.6架盘药物天平：0g～500g，精确至0.5 9。
3.7灭菌锥形瓶：500 mL。
3.8灭菌试管：16 mm×160 mm。
3.9灭菌吸管：1 mL(具0.01 mL刻度)、10mL(具0.1 mL刻度)。
3.10灭菌平培养皿：直径90 mm。
3.11灭菌刀、剪、镊子等。
4培养基和试剂4.1 肉浸液肉汤培养基：GB／T 4789.28 2003中4.1。
4.2 酪蛋白琼脂培养基：GB／T 4789.28—2003中4.65。
4.3 动力一硝酸盐培养基：GB／T 4789.28—2003中4.72。
4.4 缓冲葡萄糖蛋白胨水：GB／T 4789.28—2003中3.4。
4.5 血琼脂培养基：GB／T 4789.28--2003中4.6。
4.6 3％过氧化氢溶液。
4.7 甲萘胺一乙酸溶液：GB／T 4789.28—2003中3.17。
4.8 对氨基苯磺酸一乙酸溶液：GB／T 4789.28—2003中3.17。
4.9 革兰氏染色液：GB／T 4789.28—2003中2.2。
牛奶中蜡样芽孢杆菌的分离和鉴定
蜡 样 芽孢 杆菌 是 一 种好 氧 、 产 芽 孢 的 革 兰 氏 阳性 杆
物 ２ ７ Ｆ： ＡＧ ＡＧ Ｔ ｒ ｒ Ｇ Ａ Ｔ Ｃ Ｃ Ｔ ＧＧ Ｃ Ｔ Ｃ Ａ Ｇ； １ ４ ９ ２ Ｒ： Ｔ Ａ Ｃ Ｇ ＧＣ －
菌， 可产生致吐和致腹泻肠毒素 ， 前者耐热 ， 是引起食物 中毒的主要成分 。芽孢是蜡样芽孢杆菌主要的繁殖方 式， 有些菌种能粘附在人的上皮细胞上 ， 它们的致病机制
Ｓｕ ｎ Ｄａ ｑ ｉ ｎ ｇ Ｉ ｅ ｔ ａ ａ ｎ ｇ Ｆ ｏ ｏ ｄ ａ ｎ ｄ Ｂ ｉ ｏ ｔ ｅ ｃ ｈ ｎ ｏ ｌ ｏ ｇ ｙ Ｉ ｎ ｎ ｏ ｖ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ Ｉ ｎ ｓ ｔ ｉ ｔ ｕ ｔ ｅ ， Ｈ ｅ ｉ ｌ ｏ ｎ ｇ ｊ ｉ ａ ｎ ｇ Ｂ ａ ｙ ｉ Ａ ｇ ｒ ｉ ｃ ｕ ｌ ｔ ｕ ｒ ａ ｌ Ｕ ｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ ， Ｍｕ ｄ ａ ｎ ｊ ｉ ａ ｎ ｇ １ ５ ７ ０ ０ ０ ， Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ）
色 实验 ， 之 后镜 检 观察结 果 。
１ ． ６ 分离 菌株 生化鉴 定
食物中毒进行 比较系统的调查 、 分析和统计 ， 但是从我 国 的饮食结构 、 食品加工 、 保藏和运输条件等方面推测 ， 蜡 状芽孢杆菌 的食品污染情况可能比较严重 ， 尤其是营养 丰富的乳制品 。 ］ 。因此 ， 从食品安全的角度来看 ， 很有必 要对我国乳制品中蜡状芽孢杆菌的检出率、 分布情况和毒 素产生的情况进行调查 ， 以查明污染途径 、 污染源 ， 制订相 应的检测标准和卫生安全标准 ， 提供消毒和杀菌的指导 ，
关键 词 ： 牛奶 ； 蜡 样 芽孢杆 菌 ； 安 全风 险 中图分 类号 Ｔ Ｓ ２ ５ ２ ． １ 文 献标 识码 Ａ 文章编 号 １ ０ ０ ７ — ７ ７ ３ １ （ ２ ０ １ ７ ） ０ ７ — ０ ０ ３ ９ — ０ ２
关于食品中蜡样芽胞杆菌污染情况的调查分析
关于食品中蜡样芽胞杆菌污染情况的调查分析摘要] 目的：了解鄂尔多斯市蜡样芽胞杆菌在市售食品中的污染情况。
方法：按照食品安全国家标准《食品微生物学检验蜡样芽胞杆菌检验》GB4789.14对样品进行检测。
结果：5种场所4类食品中85份样品共检出蜡样芽胞杆菌11份，检出率为12.9%。
4种场所中的5类食品中，奶吧污染严重，奶吧中巴氏杀菌乳的检出率均为30%，其次是超市，超市的婴幼儿配方奶粉的检出率为23.3%；最后是学生午餐，检出率为10%。
结论：蜡样芽胞杆菌的检测在预防食源性疾病方面具有重大意义，各部门应加强对食品安全方面的重视。
[关键词] 蜡样芽胞杆菌，食品微生物检验，食源性疾病Investigation on Food Contamination Caused by Bacillus Cereus??Shang Yibo( Ordos Center of Disease Control & Prevention of Inner Mongolia Autonomous Region ) 【Abstract】?Objective: To investigate the contamination of food in sale in Ordos caused by bacillus cereus. Methods: ?Samples were tested according to National Food Safety Standard Food Microbiology Testing ?Bacillus Cereus Testing GB/T4789.14 Results: 11 out of 85 samples in 5 places of 4 kinds of food were detected bacillus cereus. The detection rate was 12.9%. Among 5 kinds of food in 4 places, milk bar was heavily contaminated, the detection rate of pasteurized?milk was 30%; the next is supermarket, the detection rate of baby?formula in supermarket was 23.3%; the last was students’ lunch, the detection rate was 10%. Conclus ion: The testing of ?bacillus cereus has?great?significance in the prevention of ?food borne?diseases, all departments involved should strengthen the??emphasis on?food safety.【Key Words】:? bacillus cereus, food microbiology testing, food borne?diseases 蜡样芽孢杆菌（学名：Bacillus cereus），又称仙人掌杆菌，是一种地方性，土壤生活的，革兰氏阳性，β溶血性的杆状细菌，它会引起食物中毒，例如"炒饭综合征"（Fried Rice Syndrome）。
食品中蜡样芽孢杆菌芽孢EMA-qPCR 检测
蜡样芽孢杆菌（Bacillus cereus）是 1.2 仪器设备
一种常见的兼性需氧革兰氏阳性致病
ABI 7500FAST 实时荧光 PCR 仪、
菌，极易污染乳制品、米饭、水果制 生物安全柜、超声波细胞破碎仪、显 品等食品 [1]。目前，检测方法主要是传 微镜。
图 3 不同光照时间处理对 EMA-qPCR 结果影响
管黑暗中室温放置 5 min。然后将离心 列， 设 计 引 物 和 探 针（ 南 京 金 斯
管放置冰上，分别强光下ຫໍສະໝຸດ 光 0、1、5、 瑞 生 物 公 司 合 成 ）。 上 游 引 物：
运用到蜡样芽孢杆菌实时荧光PCR检测中， 30 s，12 000 r/min 离心 2 min，取上
提高qPCR检测的准确度，降低假阳性率。 清用细菌 DNA 提取试剂盒提取 DNA。
1 材料和方法
1.4.2 溶菌酶法
1.1 菌种
向收集菌体的离心管加入 500 μL
蜡样芽孢杆菌 CMCC(B)63301。 无菌水，涡旋 30 s，再加入 1 μL 溶菌
统培养法，耗时费力，难以适应现代 1.3 蜡样芽孢杆菌芽孢的制备
食品生产的检验需要。
蜡样芽孢杆菌芽孢形成可以通过
蜡样芽孢杆菌实时荧光 PCR 技术 营养限量进行诱导，在培养基中添加 因具有检测时间短、操作简便等优点 Mn2+ 能提高芽孢的得率及稳定性。孔
得到广泛运用。蜡样芽孢杆菌在食品 雀石绿染色镜检芽孢生成情况。蜡样
酶（100 mg/mL），37 ℃ 水 浴 2 h， 12 000 r/min 离心 2 min，取上清提取 DNA。
1.4.3 煮沸法 在菌体中加入 500 μL 无菌水，涡 旋 30 s，置 95 ℃水浴 5 min，12 000 r/min 离心 2 min，取上清提取 DNA。 1.4.4 超声波破碎法 向 离 心 管 中 加 入 500 μL 的 无 菌 水，涡旋 30 s，放入超声波细胞破碎 仪超声波振荡 20 min（40%，5 s，5 s）， 12 000 r/min 离心 2 min，取上清提取 DNA。 1.5 EMA 使用浓度优化 用 ddH2O 配 制 0.1 mg/mL 的 EMA 溶液，-20 ℃避光保存。取 Mn2+ 营 养 肉 汤 中 30 ℃ 培 养 48 h 的 蜡 样 芽孢杆菌菌液于 80 ℃水浴中处理 20 min，灭活营养体细胞。将 EMA（0.1 mg/mL）分别加入装有 1 mL 上述灭 活 菌 液 的 离 心 管 中， 使 EMA 终 质 量 浓 度 分 别 达 到 0.1、1.0、2.0、5.0、 10.0、20.0 μg/mL，不加 EMA 的菌液 作为对照。充分混匀后，将离心管黑 暗中室温放置约 5 min，让 EMA 与细 菌 DNA 充分结合。然后将离心管放置 冰上，强光下曝光 20 min，以此为模 板采用超声波破碎法提取 DNA。 1.6 EMA 光照时间优化 添加 EMA 到 1.5 中所述灭活菌液 1 mL 离心管中，使每管 EMA 终浓度 达到 2.0μg/mL。充分混匀后，将离心
蜡样芽孢杆菌 食品法规
蜡样芽孢杆菌食品法规蜡样芽孢杆菌是一种在大自然中广泛分布的菌类，同时也是一种重要的致病菌。
随着人们对食品安全的关注度不断提高，越来越多的国家和地区开始制定针对蜡样芽孢杆菌的食品法规。
本文将详细介绍蜡样芽孢杆菌食品法规的相关内容。
一、国内对蜡样芽孢杆菌的法规1.《食品安全法》《食品安全法》是中国制定的最重要的食品安全方面的法律法规之一，在其中已明确规定了蜡样芽孢杆菌的检测标准。
规定了蜡样芽孢杆菌在茶叶类、肉制品、水产制品等领域中的检测限值及其相关标准。
2.《食品安全国家标准》此标准规定了在食品加工、运输、储存以及销售过程中关于蜡样芽孢杆菌的检测方法、检测标准及防范方法等。
该标准还明确了食品生产加工企业在处理蜡样芽孢杆菌时需要遵守的原则和方法。
3.地方性法规各省市还分别出台了适应其本地情况下的食品安全法规，各个地区都在根据其本地情况和实际情况制定适宜的推进措施，以保障当地食品安全。
这些东西包括当地的法规和企业自制的内部品质控制系统。
二、国际对蜡样芽孢杆菌的食品法规1.欧盟食品法规欧盟规定蜡样芽孢杆菌在3个统计批量中的平均值，应该小于每克100 CFU。
他们也规定了蜡样芽孢杆菌可以存在于肉制品、乳制品及某些植物制品中的最大限制值。
2.美国食品法规美国FDA在对蜡样芽孢杆菌的标准中，规定蜡样芽孢杆菌在食品中比其它类别的食品中更加重要。
他们也在制定针对防范蜡样芽孢杆菌的检测标准和预防措施。
综合来看，不同国家或地区蜡样芽孢杆菌食品法规存在差别，但都要求加强对食品中蜡样芽孢杆菌的监管。
食品制造企业需要加强其产品的品质控制体系，不断完善并落实相关的法规标准，确保食品的安全卫生且经久耐用。
欧盟蜡样芽孢杆菌标准
欧盟蜡样芽孢杆菌标准全文共四篇示例，供读者参考第一篇示例：欧盟蜡样芽孢杆菌标准是指欧盟针对食品安全领域中蜡样芽孢杆菌的监测、检测和控制制定的相关规定和标准。
蜡样芽孢杆菌是一种常见的细菌，存在于土壤、水源、动植物体表等环境中。
它可以在适宜的条件下繁殖生长，并产生毒素，对人体健康造成危害。
欧盟通过制定相应的标准，以确保食品中不含有危害健康的蜡样芽孢杆菌。
蜡样芽孢杆菌在食品中的检测主要是通过对食品样品进行采样，提取样品中的蜡样芽孢杆菌，然后进行培养、鉴定和计数。
欧盟要求食品生产企业在生产过程中对食品进行严格的监控，确保食品中蜡样芽孢杆菌的数量符合规定的标准。
如果食品中的蜡样芽孢杆菌超过规定的限量，必须立即采取措施加以处理，以避免对消费者造成健康风险。
欧盟蜡样芽孢杆菌的标准主要包括以下几个方面：1. 检测方法：欧盟规定了蜡样芽孢杆菌的检测方法，包括培养、分离、鉴定和计数等步骤。
食品生产企业必须使用认可的检测方法对食品进行检测，确保检测结果的准确性和可靠性。
2. 菌落数量限量：欧盟规定了食品中蜡样芽孢杆菌的菌落数量限量。
不同类型的食品对蜡样芽孢杆菌的容许量也会有所不同。
食品生产企业在生产过程中必须严格按照标准的要求进行控制，保证食品中的蜡样芽孢杆菌数量在安全范围内。
3. 处理措施：如果食品样品中的蜡样芽孢杆菌超过规定的限量，食品生产企业必须立即采取措施，如停产、召回产品等，以避免对消费者造成健康风险。
企业还必须配合相关部门进行溯源调查，查明蜡样芽孢杆菌的来源，并采取措施避免再次发生类似事件。
4. 标签要求：欧盟规定在食品包装上必须标明食品中是否含有蜡样芽孢杆菌，并注明蜡样芽孢杆菌的数量是否符合标准要求。
消费者通过检查食品包装上的标签信息可以了解食品的安全性和质量。
欧盟蜡样芽孢杆菌标准是欧盟为确保食品安全和保护消费者健康而制定的重要规定。
食品生产企业必须严格遵守蜡样芽孢杆菌的检测、限量和处理要求，确保生产的食品符合相关标准，保障消费者的权益和健康。
蜡样芽孢杆菌国标检测方法
蜡样芽孢杆菌国标检测方法蜡样芽孢杆菌是一种常见的致病菌，可以引发许多疾病，比如肺炎、食物中毒等。
因此，对于蜡样芽孢杆菌的检测方法非常重要。
目前，我国规定的蜡样芽孢杆菌国标检测方法共包括以下几个步骤：首先，样品前处理。
在此步骤中，需要将待检样品样品进行预处理，确保样品中的蜡样芽孢杆菌含量达到检测标准。
一般而言，对于不同类型的样品，处理方法也会有所不同。
比如在食品及饲料中检测，可以添加适当数量的生长因子，利于蜡样芽孢杆菌的生长和繁殖；在水及废水中检测，需要进行过滤、浓缩等步骤，以提高样品中菌落的数量。
其次，培养。
在此步骤中，待检样品需要在适当的培养基上进行培养，并采用适宜的培养条件和温度，使蜡样芽孢杆菌营养生长，并清晰地表现出其形态特征。
比如在肉汤杨氏平板上进行培养，在37℃下进行孵育，并对培养基的pH值和氧气浓度进行控制，以确保蜡样芽孢杆菌可以正常生长。
第三，菌落特征的观察。
在此步骤中，需要对培养出的蜡样芽孢杆菌菌落的特征进行观察。
一般而言，蜡样芽孢杆菌的菌落呈灰白色，中心较高，表面光滑细腻，菌体呈杆状，染色后呈青紫色，有时并可呈蓝绿色。
最后，进行鉴定和计数。
在此步骤中，需要对菌落进行进一步的鉴定和计数。
一般而言，可以采用荧光抗体技术、PCR扩增等方法进行检测，以确保检测结果的准确性和可靠性。
以上就是针对蜡样芽孢杆菌国标检测方法的详细介绍。
对于我们日常生活中经常遇到的食品、水源等，如果能够采用这些方法进行检测，那么对于保障我们的健康会起到非常重要的作用。
同时，也提醒大家在生活中注意卫生，遵守食品安全规定，以免受到蜡样芽孢杆菌等致病菌的侵害。
蜡样芽孢杆菌的检测
产生溶血素：使胰酪胨大豆羊血琼脂（TSSB ）中的血细胞发生β溶血。
产生明胶酶：将明胶水解为多肽再水解为氨 基酸而使其由半固体转化为液态状。
触酶实验: 产生过氧化氢酶分解过氧化氢生 成水和氧气。
动力和硝酸盐试验: 蜡样芽胞杆菌运动活泼, 能还原硝酸盐为亚硝酸盐。
4 证实试验
预
菌落形态观察
实 验
革兰染色
镜检观察菌体
营
养
生
琼
化
脂
实
卵磷脂酶实验 L-酪氨酸分解实验
MYP琼脂平
板 L-酪氨酸琼脂培养基
培
验
养
触酶实验
双氧水
基 鉴
溶血实验
胰酪胨大豆羊血琼脂平板
别
动力与硝酸盐还原实验
试
验
动力-硝酸盐生化鉴定管
1 形态观察
本菌革兰染色阳性，呈短链或长链，芽孢位于菌体 中央或偏端，不是菌体胀大。
蕈状芽孢杆菌常常呈绒毛状生长，蜡样和紫云金芽 孢杆菌通常运动极为活泼，而炭疽芽胞杆菌则不运动。
实验结果
3 计数（表面涂布法）
1克样品中含的蜡样芽孢杆菌数：
MYP平板上的菌落数× 证实阳性菌落数 × 稀释倍数× 10 挑取的菌落数
举例：将检样10-4稀释液0.1mL涂布于MYP琼脂平板 上，生成的可疑菌落数为25个，取5个进行鉴定， 证实为蜡样芽胞杆菌的是4个，则1g样品中含的蜡 样芽孢杆菌数为（25×4/5）×104×1/0.1
10-1~10-6稀释液
选择性培养基 MYP 30°C , 24h
形态观察 菌数测定
证实试验
营养琼脂 30°C , 24h
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2、食品种类 －剩饭，特别是大米饭。
－乳及乳制品、畜禽肉类制品、蔬菜、莱汤、马铃薯、 豆芽、甜点心、调味汁、色拉。
国内：与淀粉质食品相关多。
实验食品中蜡样芽孢杆菌检验
3、临床症状
呕吐型中毒：多见于过剩米饭和油炒饭，由耐热性肠 毒素为致病因素；潜伏期短，一般为2～3小时，最短为 30分钟，最长5～6小时；症状以呕吐，腹痉挛为主，腹 泻则少见，一般经过8～10小时而治愈。
25×4/5×104×10＝ 2×106实验食品中蜡样芽孢杆菌检验
3．分离培养 • 将检样或其稀释液划线于上述选择性培养基平板上
，置37℃培养12～20h，挑取可疑蜡样芽孢杆菌的 菌落接种于肉汤和营养琼脂培养基上做纯培养，然 后做证实试验。
实验食品中蜡样芽孢杆菌检验
4．证实试验 （1）形态观察 • 本菌应为G＋杆菌，宽度在1μm或1μm以上，芽孢呈
蜡样芽胞杆菌(Bacillus cereus)的检验
实验食品中蜡样芽孢杆菌检验
（一）蜡样芽胞杆菌生物学性状
1、形态和染色特性 该菌为革兰氏阳性的大杆菌，菌体两端较平整，芽胞 呈椭圆形，位于菌体中央稍偏一端,多呈链状排列,无荚 膜，有周鞭毛。
实验食品中蜡样芽孢杆菌检验
2、培养特性
（1）需氧菌，生长温度范围在10-45℃之间。最 适
生长温度为28-35℃。
（2）在普通培养基上生长良好。 本菌在普通琼脂平板上，生长 的菌落呈乳白色，不透明，直 径4-6mm,边缘不整齐，表面 粗糙，呈毛玻璃状或白蜡状。
实验食品中蜡样芽孢杆菌检验
（3）在血液琼脂平板上形成 浅灰色、不透明、似毛玻璃 状的菌落。菌落周围初呈草 绿色溶血,时间稍长即完全透 明。
实验食品中蜡样芽孢杆菌检验
• 计数后，从中挑取5个这样的菌落作证实试验。根 据试验证实为蜡样芽孢杆菌的菌落数，计算出该 培养皿内的蜡样芽孢杆菌数，然后乘其稀释倍数 即得每克或每毫升样品所含的蜡样芽孢杆菌数。
实验食品中蜡样芽孢杆菌检验
选取具有15-150个典型或可疑蜡样芽孢杆菌菌落的平板, 进行计数。计算同一稀释度两个平板的平均菌落数。
10-1~10-5的 稀释液的制备
每个稀释度 36±1℃2~20h
36±1℃ 12~20h
挑取菌落接种肉汤和营养琼脂培养基（分离培养）
形态观察
证实试验
染色镜检 培养特性 生化特性
报告
生化分型
实验食品中蜡样芽孢杆菌检验
2．菌数测定 • 以无菌操作将检样25g或25 ml按菌落总数测定方式，
用灭菌生理盐水或磷酸盐缓冲液做成10-1～10-5的稀释 液。取各稀释液0.1ml，接种在选择培养基（甘露醇卵 黄多黏菌素琼脂）平板上，用L形棒涂布于整个表面， 置37℃培养12～20h后，选取菌落数在30个左右者进 行计数。蜡样芽孢杆菌在此培养基上生成的菌落为红色 （表示不发酵甘露醇）,环绕有白色至淡粉红色的晕（表 示产生卵磷脂酶）。
计数后，从中挑取5个此种菌落做证实试验，根据证实的 蜡样芽孢杆菌的菌落数，计算出该平板上的菌落数，然后 乘其稀释倍数，即得每克（毫升）样品中所含蜡样芽胞杆 菌数。
例如将0.1mL 10-4样品稀释液涂布于MYP平板上，其可 疑菌落为25个，取5个鉴定，证实四个菌落为蜡样芽孢杆菌， 则1g（mL）检样中所含蜡样芽孢杆菌数为：
型中毒的致病因素,常在米饭中形成。
不耐热肠毒素：是引起腹泻型胃肠炎的病因，能在各种 食物中形成。
实验食品中蜡样芽孢杆菌检验
5、抵抗力
蜡样芽胞杆菌100 ℃ 20分钟即可被杀死；对酸 碱不敏感，pH6-11对本菌基本上不受影响， pH5以下，生长可受到抑制。
实验食品中蜡样芽孢杆菌检验
（二）流行病学特点
（2）硝酸盐还原试验：阳性（红色）。
（3） V-P试验：接种于改良V-P培养基中，35℃ 培养48 h。加V-P试剂及肌酸数粒，静止 1h，应为阳性反应（伊红色）。
实验食品中蜡样芽孢杆菌检验
（4）L-酪氨酸分解试验：接种于L-酪氨酸琼脂培 养基上，35℃培养48 h,阳性反应菌落周围培 养基应出现澄清透明区（表示产生酪蛋白 酶）。阴性时应继续培养72 h再观察。
中华人民共和国国家 标准食品卫生微生物 学检验蜡样芽孢杆菌 检验GB/T 4789.282003
选择性培养基（菌数测定） MYP
36 ℃ ±1℃ 12h~20h
选择性培养基（分离培养） MYP
36 ℃ ±1℃ 12h~20h
菌数计算
营养琼脂培养基
生长及菌落观察 染色镜检 生化试验 菌株保存
报告
实验食品中蜡样芽孢杆菌检验
（4）蜡状芽胞杆菌在甘露醇 卵黄多粘菌素琼脂(MYP) 上的菌落为粉红色(表示不发 酵甘露醇)，周围有粉红色的 晕（表示产生卵磷脂实酶验食）品中。蜡样芽孢杆菌检验
（5）在普通肉汤内生长迅速，肉汤混浊，常 常有菌膜或壁环，振摇易乳化。
实验食品中蜡样芽孢杆菌检验
3、生化性状：
（1）葡萄糖发酵试验：接种于酚红葡萄糖肉汤中， 厌氧条件下35℃培养24h。培养基应由红色变 为黄色。 （表明本菌在厌氧条件下分解葡萄糖产酸）
卵圆形，不突出菌体，多位于菌体中央或稍偏于一端。 （2）培养特性 • 本菌在肉汤中生长混浊，常有菌膜或壁环，振摇易乳化
。琼脂平板上形成的菌落不透明，表面粗糙，似毛玻璃 状或融蜡状且边缘不齐。
（5）溶菌酶试验：用直径2mm接种环取纯菌悬液 一环,接种于溶菌酶肉汤中，35℃培养24h。 该菌在本培养基（含0.001％的溶菌酶）中能 生长。如出现阴性反应,应继续培养24 h。
实验食品中蜡样芽孢杆菌检验
4、致病性
蜡样芽胞杆菌引起食物中毒，除必须具有大量的细菌外， 肠毒素也是重要的致病因素。
耐热性肠毒素：100℃30分钟不能被破坏，为引起呕 吐
腹泻型中毒：由各种食品中不耐热肠毒素引起，潜伏 期在6小时以上，一般为6～14小时；症状以腹泻，腹痉 挛，而呕吐却不常见；病程24～36小时。
实验食品中蜡样芽孢杆菌检验
（三）检测方法
检样
25g(ml)+225ml生理盐水
1.蜡样芽孢杆菌检验程序：
做成10-1-10-5的稀释液 37℃，18h-24h