美国BD鉴定仪器培训
BD流式细胞仪
目录简介流式细胞仪 (3)流式细胞仪的临床检验项目淋巴细胞亚群分析 (4)肿瘤细胞DNA检测分析 (5)白血病及淋巴瘤免疫分型 (6)残余白血病检测 (6)网织红细胞计数 (7)造血干细胞计数 (7)血小板疾病及活化血小板检测 (8)HLA-B27检测 (8)器官移植的配型及免疫状态监控 (9)AIDS诊断及治疗监控 (9)流式细胞仪的临床/医学研究 (10)流式细胞技术的发展及国内现况 (10)建议流式细胞仪之机型----BD公司FACSCalibur仪器主要特点 (11)配套设施(计算机、软件、试剂、样本制备仪、售后服务) (12)仪器主要技术参数 (15)BD公司全球及中国业务介绍BD公司流式细胞仪培训计划BD公司推荐配置单BD公司仪器与其他厂家仪器比较表一、简介流式细胞仪(一)流式细胞仪概念流式细胞术(FlowCytometry,FCM)是一种对处在液流中的细胞或其它生物微粒(如细菌)逐个进行多参数的快速定量分析和分选的技术。
简言之,流式细胞仪是测量染色细胞标记物荧光强度的细胞分析仪,是在单个细胞分析和分选基础上发展起来的对细胞的物理或化学性质,如大小、内部结构、DNA、RNA、蛋白质、抗原等进行快速测量并可分类收集的高技术,FCM以其快速、灵活、大量、灵敏和定量的特色,广泛应用于基础研究和临床实践各个方面,包括细胞生物学、肿瘤学、血液学、免疫学、药理学、遗传学及临床检验学等,在各学科领域发挥着重要的作用。
(二)原理待测样本的细胞悬液,在鞘液的包围和约束下,细胞排成单列高速由流动室喷嘴喷出,形成细胞液柱。
当液柱通过检测区,在入射的激光束照射下产生前向散射光(FSC)和侧向散射光(SSC),它们分别反映细胞大小和颗粒度,根据这些特性可以将细胞分类。
经一种或几种特殊荧光标记的样本,在激光束的激发下所产生的特定荧光,可被光学系统检测并输送到计算机进行分析,得到细胞相应的各种特性。
(三)流式细胞仪检测的细胞特性细胞结构组成细胞功能大小细胞表面、胞浆、核特异性抗原粒度细胞活性DNA、RNA含量胞内细胞因子蛋白质含量激素结合位点钙离子、pH值、膜电位酶活性二、流式细胞仪的临床检验项目目前在国内最常见的临床应用有两大类:一为肿瘤细胞的DNA含量析;另一为细胞表面的表型测定,包括淋巴细胞亚型分析、免疫功能监测、白血病和淋巴瘤免疫分型、残余白血病检测、以及HLA-B27组织抗原检测等等。
美国、欧盟法规培训内容大纲
美国、欧盟法规培训内容大纲一、法规概述1.美国医疗器械法规概况2.欧盟医疗器械法规概况二、欧盟医疗器械1.美国医疗器械管理的特点以及和我国情况的对比2.欧盟医疗器械管理的特点以及和我国情况的对比(1)立法和主管(2)定义和分类(3)上市前管理(4)质量体系(5)上市后管理(6)临床试验三、欧盟医疗器械警戒系统1.意外事件通报2.意外事故调查报告,纠正措施及处理决定四、条例、指令、决定的关系五、委员会认可的欧洲标准化机构1.法规概述1.1 美国医疗器械法规概况1.1.1 立法及主管1938年,美国国会通过了《食品、药品和化妆品法》(The 1938 Food, Drug, and Cosmetic Act),该法中对医疗器械仅作了简单规定。
1976年美国国会通过了《食品、药品和化妆品法》(FDCA)修正案,强化了对医疗器械进行监督管理的力度,并确立了对医疗器械实行分类管理。
以国家立法形式对医疗器械实行管理这在国际上是第一个。
根据该法案,美国政府行政部门开始对医疗器械进行监督管理,以确保工业界生产出安全有效、质量可靠的医疗器械。
1990年美国国会通过并由总统签发了《医疗器械安全法》(the Safe Medical Devices Act ,SMDA) ,该法在FDCA修正案的基础上补充了许多新的内容,主要有:医疗器械使用者和销售者必须报告所发现的与医疗器械有关的不良事件,对植入体内等风险较高的医疗器械提出了跟踪随访要求,增加了民事处罚条款,在质量体系规范中增加了产品设计要求,再次明确电子产品的放射卫生要求;等等。
美国食品药品管理局(以下简称FDA)负责对药品、食品、化妆品、医疗器械、兽药等产品进行全面监督管理。
FDA负责医疗器械的部门是CDRH(Center for Devices and Radiological Health.)。
CDRH属下有7个办公室,其中器械评估办公室(Office of Device Evaluation,ODE)有6个部门:临床试验器械部;常规、康复和神经科用器械部;生殖、腹部和放射学用器械部;心血管和呼吸用器械部;牙科、传染病控制和普通医院器械部;眼科和耳鼻喉科用器械部。
BD FACSCalibur 流式细胞仪
仪器功能介绍:
广泛应用于细胞生物学、免疫学、血液学、肿瘤学、药理学、遗传学、临床检验学等单细胞或其他生物粒子的定量分析,配置488nm激光器,具有三色分析系统,适用于细胞表型分析、胞内细胞因子的检测、细胞周期和DNA倍体分析、细胞凋亡分析、细胞内钙离子测量等。
仪器主要技术参数:
主机系统:含15mw 488nm氩离子蓝色激光器,3个荧光探测器和2个散射光探测器
光路: 单激光立体空间激发方式实现三色荧光分析,采用测向光路设计
滤光片:荧光通道包括530/30nm、585/42nm、670nm LP
可选用荧光:FITC, PE, PerCP,PI, PE-Cy5, PerCP-Cy5.5, PE-Cy,Rhodamine 等
光电倍增管:光谱检测范围300nm-1100nm 电压150V-990V
荧光检测灵敏度:<100MESF
全峰宽变异系数:CV<2%
样本获取速度:>10,000个细胞/秒
检测颗粒大小: 0.1um(min)-50um(max)
仪器使用注意事项:
本台仪器需要预约,使用者请与平台相关人员联系,请不要擅自使用仪器。
全自动血培养仪阳性病原菌种类及报警时间分析
全自动血培养仪阳性病原菌种类及报警时间分析目的:分析血培养阳性病原菌种类及仪器报警时间。
方法:用BD BACTEC9120全自动血培养仪检测笔者所在医院2010年4月-2012年4月共计2180份血标本,分析血标本在需氧瓶和厌氧瓶中生长细菌的种类及仪器报警时间。
结果:2180例血培养标本中报警阳性282例,其中真阳性263例,阳性率为12.1%。
分离出细菌269株,其中革兰阳性球菌占40.1%,革兰阴性杆菌占57.2%,真菌占2.6%。
其中仅需氧瓶报阳的阳性率为6.3%,仅厌氧瓶报阳的阳性率为2.8%,需氧瓶及厌氧瓶均报阳的阳性率为2.9%;最快阳性检出时间为5.02 h,24 h内检出的阳性数占69.1%,48 h检出的阳性数占92.5%,72 h检出的阳性数占97.0%;假阳性率为0.87%,假阴性率为0.09%。
结论:应用BD BACTEC 9120全自动血培养仪同时进行需氧瓶及厌氧瓶培养能提高血培养阳性率,缩短了阳性检出时间。
标签:血培养;微生物;细菌;报警时间血培养已经成为菌血症及败血症诊断和病情监测的重要手段,对临床针对性抗菌治疗至关重要。
目前国内越来越多医院采用全自动血培养仪进行血液标本的培养,不仅提高了阳性率,也大大缩短了检测时间;为了解血培养阳性细菌的种类、仪器报警时间及阳性率,就笔者所在医院2010年4月-2012年4月共计2180份血培养标本进行了临床评价,现将结果报告如下。
1 资料与方法1.1 标本来源本院2010年4月-2012年4月门诊或住院患者的血培养标本2180份。
1.2 仪器与试剂美国BD BACTEC 9120全自动血液培养仪及配套的培养瓶,包括成人含树脂需氧瓶、成人含树脂厌氧瓶、儿童专用瓶。
美国BD PhoenixTM100全自动细菌鉴定/药敏分析仪及各种配套鉴定/药敏试剂。
1.3 方法将血培养标本按照操作说明放入仪器中,仪器每隔10 min自动监测一次,检出阳性则报警并屏幕显示该标本位置。
BD公司及PAS产品概述20080505概论
玻璃 /塑料两种材质了,多种抗凝/促凝分类 -------提供用户多种选择。
无菌,硅化内壁 -------- Co-60消毒
-------减少红细胞挂壁
添加剂与血液比例准确 ---------为临床血液学、生化、免疫、 微生物、分子生物学等学科的 准确检测提供科学的前提。
PAS----静脉真空采血系统
微量采血管
其它标本
尿液标本采集产品
采集系统
BD PRIME标本分析前临床咨询教育系统
产品详见PAS主要产品列表.xls
PAS----静脉真空采血系统
安全用针头及采血附件
一次性多管采集双向针及可见回血针等 多种采血用针,配合BD持针器及压脉 带,减少病人的疼痛感,缩短血标本从 血管到采血管的行程,加快血流经过针 内腔的速度。
真空采血管
BD VACUTAINER 真空采血管
严格遵循国际最高质量标准:
国际通用颜色标记 ------方便用户国际化标准的使用习惯,
有利于国内用户的国际性交流。
国际通用尺寸-直接上机 -------方便地和各种血液分析仪、生化分
析仪、免疫分析仪等临床检测仪器配套使用。
HEMOGARD 安全头盖 -------极大地减少了检验科和护理科室在
1967年 BD发明多管采集双向采血针
1975年 BD研制成功惰性分离胶
1976年 Co-60 用 于 真 空 采 血 管 消 毒 , 无菌真空采血管问世
1979年 BD 推 出 MICROT NhomakorabeaINER® 微量采血管
1986年 BD 推 出 蝶 翼 采 血 双 向 针 和 末 梢 血安全采样针
1989年 BD 的 安 全 头 盖 问 世 , 获 行 业 杰 出设计奖
美国BD公司流式细胞仪 FACSCanto II介绍
• 分布:北京,上海
• 主要工作:对内对外各种培训,客户参观,Seminar、Workshop、 DEMO实验等
• 现有设备 仪器
配置
LSRFortessa
4 lasers 18 colors (6B/4R/6V/2UV)
FACSCalibur
2 lasers 4 colors
FACSVerse
3 lasers 8 colors with loader(4B/2R/2V)
定制服务 (Customs)
广泛适用于CHO、 NS0和杂交瘤细胞 等;根据不同工艺 要求可自主选择无 血清、无动物源和 化学限定培养基
适用于各种微生物 包括:大肠杆菌、 酵母发酵。品种齐 全(>50种),分动物 源性产品和非动物
源性产品
对培养基进行全方 位设计,包括:基 础培养基优化、蛋 白水解物优化和流
Sheath Flow sheath tank
sheath filter sheath
interior reservoir
bubble fit tube or plate
sample injection tube (SIT)
flow cell
百年BD 全球足迹
BD是由Becton 和 Dickinson 于1897年在纽约创立的,总部设在新泽西州。 经过一百多年的发展,BD已成为世界上最大的开发、生产和销售医疗设备、 医疗系统和试剂的医疗技术公司之一, 目前经营超过产品10000余种。BD 致力于提高全世界人类的健康水平,并以其领先的技术、卓越的产品质量 和诚实可信的服务赢得了全球用户及合作伙伴的广泛赞誉。
细胞功能 = 细胞表面/胞浆/核的特
异性抗原 = 细胞活性 = 细胞内细胞因子 = 酶活性 = 激素结合位点 = 细胞受体 = 细胞凋亡
美国BD公司PPT课件
1.3%
1%
0% 26gБайду номын сангаас
Quincke 斜面式
27g Quincke 斜面式
25g
17g
Whitacre Epidural
笔尖式 硬膜外针
对分娩疼痛的传统观念
• 分娩必痛 Natural pain .Good pain. • 分娩是人生经历中最严重的痛苦。每一次宫缩,产妇
得忍受一次痛苦。
• 50%抱怨很厉害和无法忍受的痛苦 • 35%感到中等程度的疼痛 • 15%轻微疼痛 • 90%的孕妇对分娩有不同程度的恐怖感
•
产痛的产生
• 第一产程:子宫收缩,子宫下段及宫颈扩张。
• 特点:疼痛范围弥散不固定,产妇对疼痛部位,性
•
质说不清。
• 潜伏期:牵拉性涨痛
• 活跃期:疼痛加剧,宫口开大7-8cm,疼痛最为难忍。
• 第二产程:骨盆、阴道、会阴体肌肉、筋膜、皮肤的
•
伸展,牵拉和扩张,撕裂性疼痛。
产痛的神经传导
• 生殖系统神经由交感和副交感神经支配。
• 子宫体感觉神经 盆腔神经丛
腰段交感段
•
↓
•
腹下神经丛
下胸段交感干
•
主动脉神经丛
↓
•
T11T12L1脊神经
•
↓
•
中枢
产痛的神经传导
• 子宫体运动神经
T5 — T10交感神经纤维支配
• 子宫体内有神经装置自动调节宫缩
• 子宫颈感觉、运动
S2—S4副交感神经传导
• 阴道上部感觉神经
S2—S4副交感神经传导
•
友谊医院等
分娩镇痛的意义
• 分娩镇痛—— 医疗服务(人性化服务) • 产妇—— 减轻产痛,享受分娩得子的欢乐 • 医院—— 提供了高层次医疗服务,提高 市
BD BACTEC9050全自动血培养仪检测1928份需氧血培养结果分析
BD BACTEC9050全自动血培养仪检测1928份需氧血培养结果分析发表时间:2013-07-26T09:29:28.437Z 来源:《医药前沿》2013年第18期供稿作者:刘光艳[导读] 真菌检出率有所上升,临床需加强注意。
目前检出阳性率为11.2%,与我院血液培养标本的送检量和送检次数有关刘光艳(四川省眉山市人民医院检验科 620010)【摘要】目的分析BD BACTEC9050全自动血培养仪检测1928份需氧血培养结果。
方法选取2012年1月-12月我院临床各科室送检的血培养标本1928例为研究对象进行回顾性分析,评估阳性、阴性、假阳性和假阴性检出情况和细菌种类。
结果 1928例血培养标本共有216例阳性,阳性率为11.2%,其中革兰阴性菌143株占66.2%,革兰阳性菌69例占31.9%,真菌4株占1.85%;假阳性率为2.31%,假阴性率为2.22%。
结论需养血培养结果显示BD BACTEC9050全自动血培养仪阳性检出率高,细菌检出种类多,临床应用效果较好。
【关键词】血培养血培养仪细菌假阴性率【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752(2013)18-0122-01 为分析BD BACTEC9050全自动血培养仪检测我院血培养标本情况,选取2012年1月-12月我院临床各科室送检的血培养标本1928例为研究对象进行回顾性分析,临床报告如下。
一.材料与方法1.标本采集选取2012年1月-12月我院临床各科室送检的血培养标本1928例为研究对象进行回顾性分析,标本来源于我院门诊、急诊和临床科室,使用一次性注射器采集患者血液,其中成人5-10ml,儿童2-5ml,年龄3-75岁,平均年龄(37.3±4.2)岁,血液采集均在患者发生高热、寒战等症状和应用抗生素治疗前进行,采集血液迅速注入配套需养血培养瓶,混匀后立即送检。
2.仪器与培养基血培养仪为美国BD公司生产的BACTEC9050全自动血培养仪和专用的配套含树脂需氧成人和儿童瓶。
血培养仪器培训之理论部分
血培养仪器培训之理论部分1、原理:微生物在培养瓶中生长产生CO2,CO2激活了包埋在培养瓶底部的荧光物质,荧光物质在发光二级管的照射下被激发出荧光,培养孔位底部的荧光探测器探测到荧光并将数据传递到后部的微处理器,微处理器通过预设的一系列运算模式计算出荧光值;荧光值的强弱与CO2浓度成正比,而CO2浓度又与微生物浓度成正比,这样通过CO2这一中间物质将荧光强度与微生物浓度关联起来,荧光值越强,微生物浓度越高,反之亦然。
2、培养瓶种类:三类七种培养瓶1)标准瓶:标准需氧瓶(血站、血液中心用)标准厌氧瓶(血站、血液中心用)2)树脂瓶:树脂需氧瓶(医院临床用)树脂厌氧瓶(医院临床用)树脂儿童瓶(医院临床用)树脂的功能:1.树脂最大的功能是吸附抗生素。
树脂瓶中有两种树脂,白色的叫阳离子交换树脂,褐色的叫共价吸附树脂,一个起化学吸附作用,一个起物理吸附作用,通过这两种吸附作用,树脂可以在极短的时间内将标本中抗生素的浓度降至接近于零的水平2.裂解血细胞。
如果裂解的是红细胞,可以将红细胞中的营养物质释放出来供微生物生长利用,其原理跟血平板与巧克力平板的关系一样;如果裂解的是白细胞,可以将被白细胞中吞噬的微生物释放出来,提高阳性检出率。
3.为微生物生长提供了广大的附着表面。
树脂用肉眼看表面是光滑的,但在高倍镜下观察表面是坑洼不平的、镂空的,打个比方就像一个核桃,如果将一个树脂瓶中所有树脂的表面积展开,可达5个标准足球场的面积。
4.涂片染色镜检时不会对观察背景造成干扰。
由于树脂本身无色透明、染色时又不着色,因而在涂片染色镜检时不会对观察背景造成干扰,从而避免了实验室初学者对观察结果产生误判。
3)含溶血素瓶:含溶血素厌氧瓶1. 厌氧瓶不仅可以培养厌氧菌还能培养兼性厌氧菌。
2. 研究数据表明有16%的链球菌和17%的肠杆菌科的细菌仅对厌氧瓶报阳,如果不用厌氧瓶就会对这部分微生物造成漏检。
含溶血素分枝杆菌/真菌培养瓶1. BD所有的需氧瓶都能培养真菌,之所以要用这一专业的真菌瓶是为了培养苛养的真菌,比如丝状真菌。
美国BD公司细菌鉴定仪phoenix100
肉汤稀释法
不生长 = 抗生素抑制细菌生长 生长 = 抗生素无法抑制细菌生长
Increasing Antibiotic Conc.
MIC = 8
2 4
8
.25
0.5
1
16
32
MIC (最小抑菌浓度) = 抗生素可抑制细菌生长的最小 浓度。
真正实测的倍比稀释MIC浓度,符合NCCLS标准!
Format: NMIC/ID-4 Format: PMIC/ID-55 Standard: NCCLS Standard: NCCLS / BSAC Standard: Format: SMIC/ID-2 NCCLS
Cefpodoxime 头孢泊肟
生长
owth
抑制
Ceftazidime 头孢他啶
生长
Ceftriaxone 头孢曲松 Clavulanate 克拉维酸
抑制
生长
not ESBL Ceftriaxone 头孢曲松 Clavulanate 克拉维酸
not ESBL
抑制
抑制 生长
Ceftazidime 头孢他啶
凤凰全自动细菌鉴定/药敏检测系统 最大的标本容量: 对100个标本同时进 行鉴定与药敏测试!
TM
上市情况
• 2000年
– 欧洲正式上市,113 Units, FY01 – 在中国上市准备 – 中国技术人员在美国培训
• 2002年
– – – – – 苏州培训基地建立 为香港临床评估提供技术支援 中文软件设计完毕 为代理商提供操作培训 为美国提供中国用户反馈及技术 改进意见
• 2001年
– 根据SDA/FDA认可的方案在 中国实验点评估完毕 – 在中国完成仪器注册 – BD工程师培训完毕 – 在中国上市
关于血站仪器培训内容
关于血站仪器培训内容血站开展血液初筛技术及血液标本质量控制等内容的业务培训为确保血液检测标本的质量,进一步提高采血护士的采血技能,近日,张家界市中心血站对全站采供血业务工作人员进行了第四期《血液初筛技术与标本质量控制》等内容的集中培训。
本次培训由市中心血站副站长授课,内容包括毛细管采血、转氨酶检测、乙肝梅毒联合检测、ABO血型正定型、血红蛋白测定、单采血小板献血前检测、标本质量控制与管理等方面的内容。
授课人员首先带领大家回顾前期培训内容,随后循序渐进导入本次培训主题,重点讲述了初筛血型错误统计分析与标本离心两个内容,并针对血液标本的采集、留取、标识、处理、包装、运输、接收、拒收、标本检测前处理等关于标本质量控制的各个流程、关键点进行了详细讲解。
最后授课人员结合工作实际,针对采血护士实际操作过程中容易发生差错的环节,提出了相应的纠正预防措施,并在培训现场进行互动提问和考核,以当场检验此次培训所达到的效果,各工作人员的回答准确率均达到了100%。
通过此次培训,使全体工作人员重新认知了采供血业务流程和血液检测标本前期质量控制的重要性,建立了质量、服务和安全意识,为确保血液质量安全奠定必要的理论基础、技术基础。
近年来,张家界市中心血站以入职培训、岗位技能培训、血站发展理念培训等为抓手,以素质和能力建设为核心,形成与血站发展相适应、符合员工成长规律的多层次、分类别、重实效、充满活力的培训格局,为建设一支学习型、实干型、创新型的员工队伍打下坚实基础!血站需要哪些设备和体外诊断试剂盒血站设备一般除了医院检验科所需要的设备外,还需要采血、储血、分离设备。
血浆速冻机;全自动加样仪;全自动生化分析仪;血球计数仪;冷冻离心机;水浴箱;采血车;低温冰柜;酶标仪;血浆分离机;高压消毒设备,等体外诊断试剂盒,如血型鉴定试剂、艾滋病、梅毒、甲肝、丙肝、乙肝、戊肝等常见传染病试剂盒,以及临检和生化试剂,随开展项目不同,试剂可以不同。
BD微生物鉴定及药敏系统介绍,Crystal AutoReader
1、试剂与耗材
试剂中包括试剂板条、盛液盒、接种液、比色卡等
试剂板:独立包装,2-8℃保存 接种液和盛液盒:2-8℃或室温保存
一个货号订购即可获得实验中所需的全部组分
3
2、鉴定试剂条种类
Gram Positive 革兰氏阳性菌
Rapid Gram Positive
Neisseria / Haemophilus
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Q5: 参考板的校正
初次使用时,以后每2月1次 参考版检测---放入参考板(标签外上)---点击扫描--显示“参照测试成功”
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产品性能优势
特点
荧光与显色结合进行结果判断 包括29-30种生化反应 可提供快速鉴定板条 检测灵敏度更高 鉴定更加准确 缩短培养时间,能够更快得到鉴定结果
益处
5
4、仪器
Crystal AutoReader由判读仪主机、电脑、MIND软件、定标板、 比浊仪组成
仪器内置显色/荧光判读系统和信号传输装置
每次只需很短时间即可扫描并自动鉴定一份样本
有效降低人工判读的误差
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要点:样品准备
纯培养物:24小时以内(48小时),营养型琼脂。 革兰氏染色:选择鉴定板条
打开程序软件
初始用户名:bbl crystal 初始密码:bbl
选择检测板种类
添加手工预实验结果(氧化酶、触酶、吲哚)
扫描检测板(板条的标签应向外、向下) 进行结果分析与鉴定 根据软件建议,决定是否需要进行补充实验
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软件的使用:初始界面
点击数据处理, 进入数据输入界面 (AutoReader将自动开门) 放入鉴定板条(标签朝外朝下)
挑取单菌落接种至肉汤管,比浊仪测量调整浓度
BD流式分选的原理和应用
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肿瘤细胞的非整倍体分析
二倍体
异倍体
四倍体
➢ 正常细胞DNA量相同,癌变细胞的DNA指数发生变化,非整倍体出现概率很高。 ➢ 用流式DNA峰图鉴别细胞的倍体在病理学上是一种快速、直接的检测方法。
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植物倍体的分析
➢ 植物细胞的倍体非常复杂,常以多倍体形式存在。 ➢ 检测时多采用对数形式。 ➢ 植物的倍性鉴定是多倍体研究的重要内容之一。流式细胞术已应用于玉米、
细胞凋亡-Annexin Ⅴ/PI双标记法
FITC Annexin V/PI染色和流式细 胞仪分析。Jurkat细胞(人T细胞 白血病)用6µM的喜树碱或0.1% DMSO(阴性对照)4小时,引导凋 亡。细胞根据Annexin V-FITC凋亡 检测试剂盒的染色指南,用FITC Annexin V和碘化丙啶(PI)染色。 与DMSO对照组相比,喜树碱处理会 增加细胞的早期凋亡(PI阴性, Annexin V阳性),即图中绿色部 分。死细胞(PI阳性,红色部分) 和活细胞(Annexin V和PI阴性, 黑色部分)群体很容易辨别。图中 的数据来自BD Accuri C6流式细胞 的BD CFlow® Plus。
➢ Sub-G1峰的出现被认为是凋亡细胞的标志之 一。
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肿瘤细胞凋亡检测
方法:Jurkat细胞分别用DMSO(对照;<2%)或HU-331(一种诱导细胞凋亡的大 麻素; Cayman Chemical Company )处理6小时。然后用Accuri Cell Cycle Phase Determination Kit (KR-300)固定细胞并染色。
流式对照的设置
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对照的设置
流式细胞术显示的荧光强度是相对的、可调节的, 所以需要设置一系列对照来确定细胞是否阳性。 ➢ 阴性对照 ➢ 阳性对照 ➢ 单染对照(补偿对照)
培训517
对激发光635的选色建议 对激发光635的选色建议(2) 的选色建议(2)
Alexa Fluor® 700 Fluor®
能量转换染料,激发光 633/635 nm,发射光 723 nm nm,发射光 在使用红色激光激发时,可以和APC(660),APC在使用红色激光激发时,可以和APC(660),APC-Alexa Fluor® Fluor® 750(775nm)三种染料共同使用 750(775nm)三种染料共同使用 荧光强度非常强,荧光更稳定 和 APC-Cy®5.5可以互相替换,但是是一个简单的小分子 APC-Cy®5.5可以互相替换,但是是一个简单的小分子 和APC补偿最小 APC补偿最小 和 RPE-Alexa Fluor® 700,RPE-Cy®5.5需要大量的补偿,不建议 RPEFluor® 700,RPE-Cy®5.5需要大量的补偿,不建议 一起使用
细胞凋亡检测盒 染料(fluorescent dye) 染料(fluorescent dye)
第二部分市场营销经验介绍
找寻目标客户(1) 找寻目标客户( ——根据课题内容
大多数涉及到生物实验的实验室都会使用 到流式仪专用荧光抗体 免疫,肿瘤,干细胞,实验室用量尤为大
找寻目标客户(2) 找寻目标客户( ——寻找流式细胞仪所在地
目前产品包括
荧光标记抗体(fluorescent antibody) 荧光标记抗体(fluorescent antibody)
抗鼠抗体( anti-mouse antibody) antiantibody) 抗大鼠抗体(anti- antibody) 抗大鼠抗体(anti-rat antibody) 抗人抗体 (anti-human antibody) antiantibody)
美国BD鉴定仪器培训
左氧氟沙星
0.5 - 4
头孢噻肟
1-32
1-8
利奈唑烷
1-4
药敏实验方法
检测反应孔内微生物生长情况
浊度(传统方法):
微生物生长形成小颗粒和聚集成团块
氧化还原作用(BD专利技术) :
通过药敏实验指示剂颜色变化检测微生物的新陈代谢 浊度与氧化还原的变化通过红、蓝、绿光每20分钟检测一次
配套试剂
LOC SUB-CODE LOC SUB-CODE LOC SUB-CODE A1 A2 A3 A4 A5 A6 A7 BALL BGEN DEX DGAL DFRU DGUA DMLB LARA MBGU NGA NGU DSBT DSUC GRA MTU LRHA B1 B2 B3 B4 B5 B6 B7 B8 B9 B10 B11 B12 B13 B14 B15 B16 B17 CLST DMNT CIT PXB LTRY LPYR LPROB LARGH FLR_CTL LPHET NAG LGTA ORN LPROT LGGH ESC C1 C2 C3 C4 C5 C6 C7 C8 C9 C10 C11 C12 C13 C14 C15 C16 C17 ACT ADO MLO KGA TIG LYALD GUGAH GLPRB FLR_CTL GLYB ARARR LLEUH URE BPHO BDGLU
NAG
A8
FLR_CTL LARGH PHOT LHIST LISO BDGAL URE NCF
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革兰氏阳性菌鉴定板
鉴定部分:
革兰氏阴性菌鉴定板
51孔鉴定实验,改良经典实验 显色+荧光检测,无需附加实验与试剂
BDFACSAria培训手册
2015lingwu zeng地址:上海市徐汇区建国西路445号3楼(中科院上海生科院院内)电话:400-819-9900邮箱:********************网址:/cn 4/8/2015目录BD FACSAria 系列流式细胞仪工作所需辅助设备 (2)BD FACSAria日常操作流程 (4)BD FACSAria开机程序 (5)BD FACSAria的分选 (7)BD FACSAria微孔板分选 (15)BD FACSAria关机程序 (18)每周五的关机流程 (19)BD FACSAria保养和维护 (21)BD FACSAria不定期维护流程 (30)BD FACSAria常见问题答疑 (31)关于液流的问题 (31)关于液流断点问题 (33)关于分选常见问题 (34)关于采样常见问题 (37)关于液流系统常见问题 (41)关于电子系统常见问题 (42)BD FACSAria使用FACSDiva 软件质控 (43)设置仪器的Configuration (43)准备质控微球 (43)调节合适的激光延迟和面积因子 (44)设置质控实验 (44)调节蓝激光对应的面积因子 (44)调节红激光、紫激光的激光延迟和面积因子 (47)记录质控数据 (48)BD FACSAria培训日程安排 (51)注:本操作手册适用于BD FACSAriaII/III/SORP型号BD FACSAria 系列流式细胞仪工作所需辅助设备日常工作所需要的设备设施1.ddH2O2.低速水平离心机3.多种规格移液器及枪头(如可取量程20ul,50ul,100ul,1ml等)4.次氯酸钠溶液(使用液有效氯浓度~0.5%)5.75%酒精、喷壶6.PBS溶液7.高压灭菌装置8.300-400目左右或根据细胞大小选择合适孔径滤网过滤细胞用9.棉签、吸水纸10.仪器质控微球:11.Diva6 CST Beads:641319 1bottle 50test、642412 3bottles 150test12.Diva7 CST Beads:655050 1bottle 50test、655051 3bottles 150test13.分选校准微球:AccuDrop Beads 货号:34524914.仪器放置于单独的房间,房间需要装配紫外灯15.高压灭菌桶(10L)16.流式专用5ml样本管或15ml样本管(也可以用实验室常规的离心管)17.超声清洗设备(喷嘴堵时,清洗用)18.抽湿机,24hr常开液流车1.10升金属鞘液桶:FACSFlow鞘液(货号342003)或自行配置过滤灭菌的0.01M的PBS溶液2.10升Waste桶:根据需要预装入高浓度的消毒液3.5升金属Ethanol桶:过滤过的75%酒精4.5升Bleach桶:FACSClean solution清洗液(货号340345)5.5升DIWater桶:过滤灭菌的ddH2O溶液6.5升Ethanol桶:过滤过的75%酒精无菌清洗流程需要事先备好1.高压灭菌DDH2O 10L(过滤、高压灭菌、冷却后用)2.高压灭菌PBS 10L(过滤、高压灭菌、冷却后用)3.70%酒精 5L常用的流式专用管:1.5ml 非无菌、无盖1000支/箱 PS 货号:352008 可用于日常检测2.5ml 无菌、有盖独立包装 500/箱 PS货号:352003 可用于无菌分选的样本管或接收管3.5ml 无菌、有盖,25根/包,500/箱 PP货号:352003 可用于无菌分选的样本管或接收管4.15ml 样本管可用实验室常规15ml离心管Corning 的联系方式:************;4000-770-082;***********************BD FACSAria日常操作流程a. 打开电脑和主机.b. 准备好液体.c. 优化断点.一,Start Up System目的:做好上样准备。
BD细菌鉴定系统操作说明
BD细菌鉴定系统操作说明操作步骤:1.准备样本:- 从临床标本中取得适量(一般为1-2ml)且已涂有抗凝剂的血或体液样本,避免样本受到污染。
-标本应尽快送到实验室进行处理,以避免细菌在样本中过度增殖。
2.处理样本:-将样本转移到BDBACTEC™培养瓶中,根据瓶上的标示进行相应操作。
-确保样品完全与培养基混合并充分接触。
3.将处理后的样品放入BDBACTEC™机器中:-打开机器,将培养瓶放入样品仓中。
-确保培养瓶的盖子已经正确闭合,以防止气体泄漏。
4.运行BDBACTEC™机器:-选择适当的程序来处理样品,这取决于所测试的细菌类型。
-启动机器并进行运行。
5.监控样品:-在运行过程中,可以监控机器上的显示屏来跟踪细菌的增殖情况。
-BDBACTEC™系统使用专有的检测技术,可以快速确定细菌是否存在,并且可以根据机器上的细菌鉴定库来确定细菌的种类。
6.鉴定细菌:-一旦BDBACTEC™机器确定细菌的存在,可以使用机器上的细菌鉴定库来确定细菌的种类。
-操作人员可以在机器上输入相关信息,并根据机器的指示进行操作。
7.结果分析:-当BDBACTEC™机器鉴定出细菌的种类后,可以根据结果进行相应的处理和分析。
-实验室人员可以参考相关的文献或数据库来进一步了解细菌的抗生素敏感性等信息。
注意事项:-操作人员应保持操作场所的干净和整洁,并佩戴适当的防护用品。
-在操作过程中,注意遵守实验室的安全规范,确保样品不会被污染。
-确保BDBACTEC™机器处于良好的工作条件下,并定期维护和清洁机器。
-在使用BDBACTEC™机器之前,应对机器进行正确的校准和验证,以确保其准确性和可靠性。
BD细菌鉴定系统是一种高效、可靠的细菌鉴定方法,可以大大缩短细菌鉴定的时间,并且提供准确的结果。
然而,在操作过程中,操作人员需要严格遵守操作规程,并且保持机器的正常工作状态。
通过正确使用BD细菌鉴定系统,可以提高实验室的工作效率,为临床提供更好的服务。
美军标光洁度检验培训
可忽略划痕定义: 宽度<0.002mm的划痕可忽略不计
1.3划痕分析
合并划痕定义:
当两条或两条以上划痕之间间隔小于0.1mm时划痕合并为 一条计算,交叉划痕也合并为一条计算。合并后的划痕长 度从划痕开始到划痕结束,宽度取划痕的外边。
1.4麻点分析
如何判断麻点是合格还是不合格?
判断标准一
当元件的麻点级数大于表面质量要求的麻点级数 时,元件不合格。 例如:一个元件光洁度要求40/20,实际上元件上有 一个0.3mm直径的麻点,那么元件合格吗? 判断过程:元件要求20#麻点,对应0.2mm麻点直 径,0.3mm>0.2mm,所以元件不合格。
抽样比例21抽样检测的定义22抽样检测的流程23一次抽样流程24抽样检测类型25抽样图表识别26简易抽样图表识别11光洁度标准的来源我司采用的光洁度标准源于美军标milprf13830b对于道子和点子的具体大小我们根据对美军标规定的军标板进行的实际测量得出并根据美军标的定义设定了高意光学的光洁度标准
练习一解答
答:
3:0.5=6:1 大于4:1 为划痕 4:2=2:1 小于5:1 等效直径=(4+2) ÷2 =3mm 有效孔径=(10×0.8)× (10×0.8)=8mm×8mm 有效孔径内等效直径=(5×0.8)× (5×0.8)= 4mm×4mm 有效孔径外等效直径=5mm×5mm 5. 等效直径=(3+3) ÷2 =3mm Φ2mm< 3mm <Φ10mm,应采用8倍放大镜在60瓦台灯下, 黑背景检测 1. 2. 3. 4.
1.4麻点分析
判断标准三
每等效直径为20mm的区域上麻点直径的总和不得超过最大 麻点的2倍 。
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Phoenix工作流程
加一滴AST指示剂到AST肉汤中
Phoenix工作流程
从ID肉汤管中准确吸取25 L菌悬液,
加入到AST肉汤中
Phoenix工作流程
将肉汤倒入检测板,盖盖子。检测板
已准备好,可以上机检测。
巧 妙 的 重 力 加 样 技 术
Phoenix工作流程
LOC SUB-CODE LOC SUB-CODE LOC SUB-CODE A1 A2 A3 A4 A5 A6 A7 A8 A9 A10 A11 A12 A13 A14 A15 A16 A17 BGEN DSUC DGUA 3MGA DFRU IMN CLST PXB KGA DMNT MAA THY PAGLU PHOL VAALA LPROT B1 B2 B3 B4 B5 B6 B7 B8 B9 B10 B11 B12 B13 B14 B15 B16 B17 MTT NGU DTRE BDCEL LALT BDGLU LPROB LPYR FLR_CTL LPHET LTRY PHOS META ADGLU ALALH ESC C1 C2 C3 C4 C5 C6 C7 C8 C9 C10 C11 C12 C13 C14 C15 C16 C17 DTAG MAL DEX ARARR GLPRB BDGLC LLEUH
仅需区别革兰氏染色即可选板 板条种类齐全: 鉴定板、药敏板、鉴定药敏复合 板 同时提供独立密封包装的鉴定肉 汤和药敏肉汤,无需用户配制。 试剂常温保存
Phoenix工作流程
从16-24小时纯培养的新鲜平板上挑取菌落
Phoenix工作流程
在ID肉汤中制成标准浊度(0.5~0.6麦
0.5 - 2
氨苄西林 头胞西叮
2-8 链霉素 2-8
0.5 - 2
氨苄西林/舒巴坦
4/2-16/8 环丙沙星
2-8 克林霉素
安曲南 头孢唑林
2-16 克林霉素 4-16
0.25 - 4
0.03125 - 1
0.5 - 2 红霉素
红霉素
0.0625 - 4
头孢吡肟 2-16
0.25 - 4 夫西地酸
•鉴定时间 minimum maximum average median 9 3:24 hr 2:26 hr 6:26 hr
• 无需附加实验 • 95-96% 准确性
药敏实验方法
检测反应孔内微生物生长情况
浊度(传统方法):
微生物生长形成小颗粒和聚集成团块
Phoenix工作流程
• 数据接收及报告的发出 检测完成后,与主 机相连的电脑可接收到相应的数据。输入 标本的相应信息并审核后便可打印并发出 报告。仪器专家系统会 对药敏结果给出提示, 对提示者应进行复查 或用K-B法重复实验。
Phoenix工作流程
• 质量控制 对每批新到的鉴定药敏板必须做质量控制 (QC)。可按以下步骤进行:按信息输入键,然后在输 入界面按QC键,进入QC输入界面,分别输入或扫描 Sequence、Accession、Isolate值,然后按选择键,选择 ID和(或)AST,并同时选择细菌名称后,分别输入 Tech ID,Panel Lot,Panel Exp, ID Broth Lot,ID Broth Exp,AST Broth Lot,AST Broth Exp,AST Indicator Lot,AST Exp。按存盘 键存盘后,将QC板放入仪器检测。 对失控者,要找出原因。
先进的鉴定/药敏复合板设计
封闭式设计,安全无泄漏
鉴定部分:
51孔鉴定实验 改良经典实验 显色+荧光检测 无需附加实验与试剂
药敏部分: 85孔药敏实验 比浊+氧化还原(专利) 实测倍比稀释MIC值 药物种类与浓度梯度最多 耐药机制检测同步进行
PhoenixTM100鉴定板
革兰氏阳性板、革兰氏阴性板生化反应组合
扫描板条,输入资料
Phoenix工作流程
• 按仪器屏幕旁板条放入键,等待屏幕上出 现已打开的小锁图标后,打开仪器门,仪 器停止转动,此时可将鉴定药敏板放入仪 器的空位置。
Phoenix工作流程
将检测板放入仪器(随意位置)
Phoenix工作流程
• 检测完成后,按仪器屏幕旁的板条取出键, 等待屏幕上出现已打开的小锁图标后,打 开仪器门,仪器停止转动,取出检测完成 的鉴定药敏板。
LOC SUB-CODE LOC SUB-CODE LOC SUB-CODE A1 A2 A3 A4 A5 A6 A7 BALL BGEN DEX DGAL DFRU DGUA DMLB LARA MBGU NGA NGU DSBT DSUC GRA MTU LRHA B1 B2 B3 B4 B5 B6 B7 B8 B9 B10 B11 B12 B13 B14 B15 B16 B17 CLST DMNT CIT PXB LTRY LPYR LPROB LARGH FLR_CTL LPHET NAG LGTA ORN LPROT LGGH ESC C1 C2 C3 C4 C5 C6 C7 C8 C9 C10 C11 C12 C13 C14 C15 C16 C17 ACT ADO MLO KGA TIG LYALD GUGAH GLPRB FLR_CTL GLYB ARARR LLEUH URE BPHO BDGLU
BD PhoenixTM -100 凤凰全自动细菌鉴定 药敏检测系统
杨守磊 新泰市人民医院检验科
仪器特点
• 同时进行100个样本的鉴定/药敏测试 • 独特的加样方式,准确均匀 • 系统连续检测,快速得出结果,细菌鉴定最快2-3小时,药敏试验3-5 小时。 • 图形界面,仪器操作简单 • 完备的细菌菌种库 • 药敏实验准确,真正的MIC检测 • 多种细菌耐药机制的检测,延迟耐药检测,无须附加实验 • 完善的专家系统,保障药敏结果的准确性, 内置多种标准规则(NCCLS,DIN,SFM) • LIS 接口,适应实验室联网需求 • 系统无需特别的维护 • 有中文统计报告软件
NAG
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FLR_CTL LARGH PHOT LHIST LISO BDGAL URE NCF
A9 A10 A11 A12 A13 A14 A15 A16 A17
革兰氏阳性菌鉴定板
鉴定部分:
革兰氏阴性菌鉴定板
51孔鉴定实验,改良经典实验 显色+荧光检测,无需附加实验与试剂
仪器判读结果
• 仪器自动记录每次判读的每个反应孔的结果。 • 将反应结果与上一次判读结果进行比较。
氧化还原作用(BD专利技术) :
通过药敏实验指示剂颜色变化检测微生物的新陈代谢 浊度与氧化还原的变化通过红、蓝、绿光每20分钟检测一次
真正实测的倍比稀释MIC浓度,符合NCCLS标准!
Format: NMIC/ID-4 Format: PMIC/ID-55 Standard: NCCLS Standard: NCCLS / BSAC Standard: Format: SMIC/ID-2 NCCLS
左氧氟沙星
0.5 - 4
头孢噻肟
1-32
1-8
利奈唑烷
1-4
药敏实验方法
检测反应孔内微生物生长情况
浊度(传统方法):
微生物生长形成小颗粒和聚集成团块
氧化还原作用(BD专利技术) :
通过药敏实验指示剂颜色变化检测微生物的新陈代谢 浊度与氧化还原的变化通过红、蓝、绿光每20分钟检测一次
配套试剂
Phoenix工作流程Phoenix工作 流程
• 仪器门锁由软件控制,在已打开的小锁图 标还未出现时,不要强行开门;开门后, 不可人工转动孵育架,如果孵育架没有停 止转动,应立即与BD公司 联系。
Phoenix工作流程
• 鉴定药敏板的孵育和检测 鉴定药敏板条放 入仪器后,仪器可自动进行孵育和检测, 结果出来后,仪器可自动报警。鉴定药敏 板在孵育和检测过程中 若持续停电达或超过半 小时,仪器便会自动放 弃检测,不能完成鉴定 和药敏实验。因此,最好配备UPS。
Catalog Number:
448505
Catalog Number:
448911 阿米卡星
Catalog Number:
448851 0.25 - 8 8 - 32 阿莫西林 头孢吡肟
阿米卡星 阿莫西林/克拉维酸
8-32
4/2-16/8 氨苄西林 4-16
阿莫西林/克拉维酸
1/0.5 - 4/2 头孢噻肟
• 当两次结果没有差别,则该反应结束。
• 内置的运算法则:颜色比率的变化
• 依时间而变的数据库:2、3、4、6、12小时,依据每 个测试周期的判读结果产生“百分比图”,如获得足 够的信息,则给出鉴定结果。
• 标准菌量,可信度>90%,给出结果。
优异的鉴定性能
• 鉴定能力 • 革兰氏阳性菌鉴定>180种 • 革兰氏阳性球菌 • 革兰氏阳性杆菌 • • • 革兰氏阴性菌鉴定>200种 革兰氏阴性发酵杆菌 革兰氏阴性非发酵杆菌