热带假丝酵母菌溶煤培养基的响应面优化二-西安科技大学学报
响应面法在生物过程优化中的应用
响应面法 （RSM） 是 1951 年 Box- Wilson 开发 3.1 Plackett- Burman 设计法的应用
的用于化学过程因子优化的一种综合性方法。响应
Plackett- Burman 设计法是一种两水平的实验设
面法采用多元二次回归方程来拟合因素与响应值之 计方法。他试图用最少的实验次数使因子的主效果
1 几种常见生物过程优化技术的比较
1.1 单次单因子法 单次单因子法是传统的优化方法，即每次实验
只改变一个因子而保持其他因子不变的优化方法。 当考察的因子较多时，这种优化方法需要的实验次 数较多、实验周期较长，还可能因实验批次的不同 和实验条件的不一致导致不可靠甚至错误的结论， 而且这种方法还不能够分析因素之间的交互作用。 但由于不需要数学统计方面的知识，而且操作简 单、结果也能直观地用图表显示，单次单因子法仍 然是常见的生物过程优化方法之一。 1.2 正交试验设计
2010 年第 2 期 田泱源，等：响应面法在生物过程优化中的应用
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6 月出版
取最佳实验方案时，对于不显著因素的选取一般是 凭经验。因此，正交试验对于创新实验是不宜选择 的。
为了弥补传统的单次单因子法和正交试验设计 法的缺陷，近年来许多生物过程优化技术已采用了 统计学方法。常见的优化技术包括响应面法 （response surface methodology）、调优运算 （evolutionary operation）、典型分析法 （canonicalanalysis）、单纯 形法等，其中响应面法是近年来应用最多的一种优 化技术。 1.3 调优运算
典型分析法是利用综合变量对之间的相关关系 来反映两组指标之间的整体相关性的多元统计分析 方法。他的基本原理是：为了从总体上把握两组指 标之间的相关关系，分别在两组变量中提取有代表 性的两个综合变量 U1 和 V1 （分别为两个变量组中 各变量的线性组合），利用这两个综合变量之间的 相关关系来反映两组指标之间的整体相关性。其基 本思想是：
响应面法优化S2菌株的培养条件
响应面法优化S2菌株的培养条件作者：刘江红等来源：《湖南大学学报·自然科学版》2015年第06期摘要：利用快速筛选方法从大庆采油三厂油田采出水中筛选出高产生物表面活性剂菌株S2，经鉴定为芽孢杆菌属.对S2菌株产生的生物表面活性剂进行提取及纯化后，通过离子鉴别实验及红外光谱法对其进行定性检测，确定其种类为非离子型脂肽类.以菌种S2产生的发酵液的乳化指数（E24）为指标，通过响应面优化方法对S2菌株的培养条件进行优化，以接种量、pH值、温度、摇床转速为因素优化对象进行实验.在此模型的基础上，通过二次回归方程得出最佳值是pH为7.2、温度为43.5 ℃、接种量为5.2%（V/V）、摇床转速为162 r/min.在优化后的最佳培养条件下，测得菌株S2所产生发酵液的最优E24为81.20%.关键词：发酵液；红外光谱法；响应面实验；乳化；菌株中图分类号：TE357 文献标识码：AAbstract：S2 strain that highly produces biosurfactant was screened from the oilfield water of three plants in Daqing Oilfield in the rapid screening method， and the S2 strain was identified as Bacillus sp.. Through FTIR and ion identification test， S2 biosurfactant was identified as nonionic lipopeptide biosurfactant. This experiment treated emulsification index （E24） of S2 strain fermentation broth as the object. Through response surface optimization method， the culture conditions （inoculum， pH， temperature and rotation speed） of the S2 strain were optimized. On the basis of response surface model， the optimum pH value was 7.2 and the temperature was43.5 ℃， inoculation of 5.2% （V/V）， rotation speed was 162 r/min through the quadratic regression equation. Under the optimal condition， the best E24 of S2 strain fermentation broth was 81.20%.Key words： fermentation broth； infrared spectral measurements； response surface experiments； emulsification； strain生物表面活性剂是微生物在一定条件下发酵产生且具有表面活性的次级代谢产物，其性质为同时具有亲油性和亲水性[1].生物表面活性剂对疏水性物质具有有效的乳化、润湿、分散、溶解作用，同时使体系的表/界面张力有所下降[2-3].自然界中存在许多微生物（细菌、真菌等），这些微生物能够在发酵培养过程中分泌产生不同种类的生物表面活性剂.现在化学合成的表面活性剂因其造成环境污染而使其使用面临着巨大的环境压力，生物表面活性剂具有功能的多样性和对环境的友好性，且在食品工业、原油采出、污染环境的修复等领域中起着越来越重要的作用.作为一种综合性优化方法，响应面优化法结合了数学方法和统计学方法，主要内容包括优化实验设计、响应曲面分析和拟合优化计算3部分，被广泛地应用在微生物培养条件优化和生化反应中[4].本实验通过BoxBehnken响应面设计的应用对生物表面活性剂高产量菌株S2的发酵培养条件进行优化，以乳化指数E24为响应值，pH值、温度、接种量及摇床转速为其主要影响因素，通过实验后得到的数据并分析各因素的最佳条件，从而提高乳化指数.通过对本实验模型的3D响应曲面图和等高线图的分析，可以直观地得出各因素与乳化指数E24的响应关系及各因素间交互作用的显著程度[5-6].采用DesignExpert 8.0.5软件进行实验设计、数据处理及模型建立.1 材料与方法1.1材料与设备1.1.1主要设备XZD3型界面张力仪，上海平轩科学仪器有限公司；超声细胞破碎仪，赛飞（中国）有限公司；薄层色谱层析缸（100×100），天津市思利达科技有限公司；红外光谱仪，大塚电子（苏州）有限公司.1.1.2菌株来源以快速法为筛选方法，从大庆采油三厂的油田采出水中筛选出高产生物表面活性剂纯菌种S2，经实验室一系列生理、生化实验鉴定后，确定S2菌种为芽孢杆菌属（Bacillussp.）.1.1.3培养基发酵培养基（g/L）：葡萄糖20 g，mNaNO3=0.5 g，mKH2PO4=1 g，mNa2HPO4=2 g，mMgSO4=0.02 g，mFeSO4=0.01 g，mNaCl=5 g，mCaCl2=0.08 g，pH值为7.2～7.4，121 ℃灭菌20 min.1.2实验方法1.2.1发酵液的乳化指数（E24）测定[7]将经过72 h震荡培养后的发酵液用离心机去除菌体细胞，取其5 mL和5 mL液体石蜡混合于比色管中，在100 W的超声波中进行细胞粉碎处理，待形成白色乳化液后，静置24 h，测量E24的公式如式（1）所示.E24=乳化层高度液体总高度×100%.（1）1.2.2发酵液的表面张力测定采用Wihelmy板法对菌株的发酵液进行表面张力测定.移取发酵液10 mL置于直径为4 cm 的培养皿中，发酵液的表面张力被表面张力测定仪测定，在每次测定前，需将铂片用蒸馏水冲洗干净，并用酒精灯对铂片进行灼烧.以蒸馏水做空白实验.1.2.3生物表面活性剂提取、纯化本实验采用酸沉淀法进行表面活性剂纯化.将S2菌株发酵液在10 000 r/min的转速下离心20 min后取其上清，上清液用浓盐酸（2 mol/L）调节至pH为2.0，在温度为4 ℃静置过夜.静置后的溶液在相同转速下继续离心20 min，弃其上清，用少量蒸馏水重悬沉淀，用浓NaOH调节至pH为7.0，样品于-20 ℃放置5 h后，在真空条件下冷冻干燥24 h.所得的样品即为该生物表面活性剂的粗品，将其称重后用无水甲醇进行超声溶解，在14 000 r/min的转速下离心10 min后，取其上清并在46 ℃下进行旋转蒸发.1.2.4生物表面活性剂的定性鉴别实验通过亚甲基蓝氯仿法、酸性溴酚蓝法及浊点法对提纯后的生物表面活性剂进行离子鉴别实验.用KBr压片法把经过甲醇萃取得到的生物表面活性剂纯品压片，利用红外吸收光谱对其进行测定.红外吸收光谱上出现吸收峰对应的波长范围可用来判断其相应的官能团，进而确定该样品的分子结构.1.2.5响应面实验设计根据BoxBehnken实验设计原理，进行4因素3水平（分别以-1，0，+1编码）的响应面分析实验，各因素的实验水平及编码如表1所示.29组实验对应的29个实验点可以分为析因点和零点，为了更好地估算实验中可能存在的误差，需要重复进行5次零点实验.BoxBehnken优化实验中具体的实验点设置如表2所示.通过实验数据的二次回归拟合分析得到各因素与响应值间的回归方程，分析各因素与响应值间的主效应、因素间的交互效应得到最佳响应值.2结果与讨论2.1生物表面活性剂的定性鉴别实验2.1.1生物表面活性剂的离子鉴别实验观察实验现象为阴离子鉴别实验中氯仿层显无色，阳离子鉴别实验中溶液不变色，非离子鉴别实验中溶液内有新相生成.通过上述实验结果可知S2菌株所产生物表面活性剂种类为非离子型.2.1.2红外光谱分析由图1分析可知，生物表面活性剂在3 300 cm-1～3 200 cm-1有一个较宽的吸收峰，其分子具有键C-H和N-H的伸缩振动，表示该物质是含有氨基的碳氢化合物并且存在分子内氢键.此外在2 927 cm-1，2 896 cm-1和2 358 cm-1处有3个较强吸收峰，表示该物质含有C-CH3键或是含有长烷基.在6 654 cm-1处拥有最强吸收峰，表示该生物表面活性剂分子含有肽键，分子内的C=O键伸缩振动引起与此处相邻的1 532 cm-1的另一强吸收.由红外谱图可知，S2菌株发酵产生的生物表面活性剂具有与脂肽类基本一致的特征吸收峰.2.3菌种培养条件的优化利用软件对表2的实验数据进行二次多元回归拟合后，得到本实验模型的3D响应曲面及等高线图，通过分析研究可以得到各因素之间的交互作用并且确定其最优值.两因素间交互作用的显著程度被等高线图直观地反映出，即交互作用显著呈椭圆形，不显著呈圆形.故由等高线图可知pH值和接种量、pH值和摇床转速、温度和摇床转速、温度和接种量、接种量和摇床转速两因素的交互作用显著.由图2中的3D响应曲面可知，A，B，C和D存在极值点，利用Design Expert软件，对乳化指数E24（Y）的二次多项式模型解逆矩阵可知，响应值Y越大越好.经软件分析或回归方程求导得到优化结果，可得A，B，C和D对应实验值A=7.2，B=43.5 ℃，C=5.2%，D=162r/min.在此培养条件下，分析后响应值Y达最大值，预测Ymax=78.86%.（a） 3D响应曲面图（b）等高线图2.4追加实验在响应面分析得到的S2菌株最佳培养条件下进行追加实验，通过追加实验测得：由S2菌产生的生物表面活性剂的最佳E24为81.20%，较Abouseoud[8]得到的65%与Ansari[9]得到的70%有了很大的提高；S2菌株产生的生物表面活性剂的最佳产量为1.26 g/L（不在最佳条件下测得生物表面活性剂产量为0.72 g/L）；S2菌株的发酵液的表面张力从72.0 mN/m减少至25.8 mN/m.3结论通过离子鉴别实验及傅里叶红外光谱分析法对高产生物表面活性剂菌株S2产生的生物表面活性剂进行定性检测，确定其为非离子型脂肽类.采用响应面法进行了S2菌株发酵培养条件的优化实验，通过BoxBehnken实验设计和Design Expert 8.0.5软件分析确定出主要影响因素的最优值，即pH为7.2、温度为43.5 ℃、接种量为5.2%（V/V）、摇床转速为162 r/min.由因素实验水平和显著性分析可知，pH值、温度、接种量对S2菌株产生发酵液的乳化指数E24有显著影响，其中pH值对其影响最大.在最佳培养条件下，S2菌株所产生物表面活性剂的最佳E24为81.20%、生物表面活性剂的产量从0.72 g/L增加至1.26 g/L、发酵液的表面张力从72.0 mN/m 减少至25.8 mN/m.模型的实验值接近回归方程计算得到的预测值，说明该回归方程能够反映实际情况中各因素对响应值的影响，故采用响应面法优化S2菌株的培养条件具有高效性和可行性.参考文献[1]JUWARKAR A A， NAIR A， DUBEY K V， et al. Biosurfactant technology for remediation of cadmium and lead contaminated soils[J]. Chemosphere， 2007， 68（10）： 1996-2002.[2]SOUSA M， MELO V M M， RODRIGUES S， et al. Screening of biosurfactantproducing Bacillus strains using glycerol from the biodiesel synthesis as main carbon source[J]. Bioprocess and Biosystems Engineering， 2012， 35（6）： 897-906.[3]刘江红，贾云鹏，徐瑞丹，等. 微生物清防蜡技术研究及应用[J]. 湖南大学学报：自然科学版， 2013， 40（5）： 82-85.LIU Jianghong， JIA Yunpeng， XU Ruidan， et al. Research and application of microbial paraffinremoval technology[J]. Journal of Hunan University： Naturnal Science， 2013， 40（5）： 82-85.（ In Chinese）[4]CESCUT J， SEVERAC E， MOLINAJOUVE C， et al. Optimizing pressurized liquid extraction of microbial lipids using the response surface method[J]. Journal of Chromatography A，2011， 1218（3）： 373-379.[5]PAREKH V J， PANDIT A B. Optimization of fermentative production of sophorolipid biosurfactant by Starmerella bombicola NRRL Y17069 using response surfacemethodology[J].International Journal of Pharmaceutical Sciences， 2011， 1（3）： 103-116.[6]BEZERRA M A， SANTELLI R E， OLIVEIRA E P， et al. Response surface methodology （RSM） as a tool for optimization in analytical chemistry[J]. Talanta， 2008， 76（5）： 965-977.[7]LIU J H， CHEN Y T， XU R D， et al. Screening and evaluation of biosurfactantproducing strains isolated from oilfield wastewater[J]. Indian Journal of Microbiology， 2013， 53（2）：168-174.[8]ABOUSEOUD M， MAACHI R， AMRANE A， et al. Evaluation of different carbon and nitrogen sources in production of biosurfactant by Pseudomonas fluorescens [J]. Desalination，2008， 223（1）： 143-151.[9]ANSARI F A， HUSSAIN S， AHMED B， et al. Use of potato peel as cheap carbon source for the bacterial production of biosurfactants[J]. Biology Research， 2014， 2（1）： 27-31.。
热带假丝酵母转化生产木糖醇条件优化
热带假丝酵母转化生产木糖醇条件优化
贾婵媛;杨平平
【期刊名称】《中国酿造》
【年(卷),期】2011(000)004
【摘要】利用热带假丝酵母(Candida tropicalis)生物转化木糖醇工艺简单、能耗低并且产物稳定.该文研究了菌体培养时间、转化时间、pH值、初糖浓度、摇床转速、加入菌体量对转化率的的影响,从而确立了最佳条件,即菌体培养时间为16h、转化时间为10h、转化pH值为5.5、转化初糖浓度为20g/L、转化摇床转速为150r/min、加入菌体量为10%(v/v),优化后木糖醇生物转化率达90%.
【总页数】4页(P136-139)
【作者】贾婵媛;杨平平
【作者单位】山东轻工业学院,食品与生物工程学院,山东,济南,250353;山东轻工业学院,食品与生物工程学院,山东,济南,250353
【正文语种】中文
【中图分类】TQ923
【相关文献】
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5.生物转化法提高木糖醇产量的发酵条件优化 [J], 陈雪松;杨胜利
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响应面法优化黑木耳胞外多糖液体培养基组成的研究
响应面法优化黑木耳胞外多糖液体培养基组成的研究刘芳茗;胡耀辉;隋新【摘要】研究了碳源、氮源、无机盐、维生素B2对于黑木耳液态深层发酵胞外多糖产量的影响.在单因素试验的基础上,以胞外多糖的产量为衡量指标,采用响应面法优化了培养基的组成.最终确定最适宜的培养基组成为玉米粉36.78 g/L,酵母浸粉11.23 g/L,无机盐6.10 g/L,维生素B286.06m g/L.在此条件下胞外多糖产量最大,预测值为6.074 g/L,实际值为5.905 g/L.【期刊名称】《吉林化工学院学报》【年(卷),期】2015(032)004【总页数】5页(P72-75,80)【关键词】黑木耳;液态发酵;培养基;响应面【作者】刘芳茗;胡耀辉;隋新【作者单位】吉林农业大学食品科学与工程学院,吉林长春130118;吉林农业大学食品科学与工程学院,吉林长春130118;吉林化工学院生物与食品工程学院,吉林吉林132022【正文语种】中文【中图分类】TS201.3黑木耳隶属木耳目、木耳科、木耳属［1］，是生长于朽木之上的一种营养丰富的药、食两用真菌，是药品与保健食品开发的新来源［2］．黑木耳多糖对机体免疫功能有明显的促进作用，除此之外还有抗凝血抗血栓、降血脂降血糖、抗衰老抗肿瘤、抗氧化等功能［3-7］．资料表明液态深层发酵获得的多糖含量远高于子实体，有很高的科研价值［8］．目前，唐青涛［9］、肖彩霞［10］、王国良［11］等人采用正交试验的方法对黑木耳深层发酵产多糖培养基进行了优化．作为真菌的一种，黑木耳是维生素B2天然缺陷型，维生素B2以一种辅酶的形式存在，需要少量外部添加才能生长良好．本文研究了维生素B2的添加量，并用响应面法研究了碳源、氮源、无机盐、维生素B2的交互作用对于黑木耳液态深层发酵的影响，优化了培养基配方，为进一步产业化生产提供了有力的依据．1 试验部分1.1 试剂与仪器菌种:黑木耳为黑-29品种，由吉林农业大学菌物研究所提供．仪器:立式压力蒸汽灭菌锅(上海博迅实业有限公司医疗设备厂)，垂直净化工作台(苏州净化设备有限公司)，电热鼓风干燥箱，低速离心机(湖南户康离心机有限公司)，全温摇瓶柜(太仓市试验设备厂)．1.2 试验过程1．2．1 培养方法种子液的培养从黑木耳菌种斜面上用接种针钩取少许移入到装有80 mL种子培养基的容积为250 mL的三角瓶中，28℃，150 rpm条件下培养5 d．发酵培养将液体种子以10%的接种量，接入装有80 mL液体菌种培养基的容积为250 mL的三角瓶中，28℃，150 rpm条件下培养7 d．1．2．2 液体发酵培养基的优化(1)碳源种类、浓度的筛选试验分别用葡萄糖、蔗糖、大米粉、可溶性淀粉、玉米粉以30．00 g/L的添加量代替基础培养基的碳源，比较胞外多糖产量．经过试验，选择玉米粉浓度为 10．00、20．00、30．00、40．00 和 50．00 g/L，考察玉米粉浓度对于胞外多糖产量的影响．(2)氮源种类、浓度的筛选试验分别用豆饼粉、蛋白胨、酵母浸粉、牛肉膏、麸皮以10．00 g/L的添加量代替基础培养基的氮源，比较胞外多糖产量．经过试验，选择酵母浸粉浓度为6．00、8．00、10．00、12．00 和 14．00 g/L，考察酵母浸粉浓度对于胞外多糖产量的影响．(3)无机盐浓度的筛选试验磷酸二氢钾与硫酸镁以2 1的比例组成混合无机盐，分别考察混合无机盐浓度为3．00、4．50、6．00、7．50 和9．00 g/L时对于胞外多糖产量的影响．(4)维生素B2浓度的筛选试验分别考察维生素 B2 浓度为 20．00、40．00、60．00、80．00 和100．00 mg/L，对于胞外多糖产量的影响．(5)响应面优化设计根据单因素试验结果，选择玉米粉、酵母浸粉、磷酸二氢钾和硫酸镁、维生素B2为考察因素，单因素试验得出的各最佳条件为中心点，选择四因素三水平Box-Behnken设计表，用响应面法优化黑木耳液态深层发酵培养基配方．1．2．3 检测方法发酵液4 000 rpm离心10 min后的上清液浓缩至原体积的1/5，加入3倍体积的95%的酒精，4℃沉淀24 h，离心后沉淀60℃真烘干至恒重，Sevage法［12］除蛋白后称重得粗胞外多糖重量．2 结果与讨论2.1 碳源种类、浓度的影响不同碳源对黑木耳深层发酵胞外多糖产量的影响见图1．图1 碳源种类对黑木耳液态深层发酵产胞外多糖的影响由图1可知不同碳源对于黑木耳深层发酵胞外粗多糖产量的影响各异．以玉米粉为碳源胞外粗多糖产量最高，蔗糖、可溶性淀粉其次，葡萄糖最小．因此采用价格低廉的玉米粉作为碳源，并对不同玉米粉浓度进行筛选试验，结果表明30．00～40．00 g/L为最适添加量．2.2 氮源种类、浓度的影响不同氮源对黑木耳深层发酵胞外多糖的影响见图2．由图2可知不同氮源对于黑木耳深层发酵胞外粗多糖产量的影响各异．以酵母浸粉为氮源胞外粗多糖产量最高，并对不同酵母浸粉浓度进行筛选试验，结果表明10．00 g/L为最适添加量．图2 氮源种类对黑木耳液态深层发酵产胞外多糖的影响2.3 无机盐浓度的影响不同无机盐浓度对黑木耳深层发酵胞外粗多糖产量的影响见图3．图3 无机盐浓度对黑木耳液态深层发酵产胞外多糖的影响由图3可知6．00 g/L的添加量胞外粗多糖产量最高，即磷酸二氢钾与硫酸镁的浓度分别为4．00 g/L 和2．00 g/L．2.4 维生素B2浓度的影响不同维生素B2浓度对黑木耳深层发酵胞外粗多糖产量的影响见图4．图4 无机盐浓度对黑木耳液态深层发酵产胞外多糖的影响由图4可知80．00 mg/L的添加量胞外粗多糖产量最高．2.5 响应面法优化培养基配方采用四因素三水平的响应面进行分析法，考察各因素的交互作用，试验因素及水平设计见表1，试验设计结果见表2．表1 响应面试验因素及水平设计表30．00 35．00 40．00 x2-酵母浸粉/(g·L－1) 8．00 10．00 12．00 x3-无机盐/(g·L－1) 4．50 6．00 7．50 x4-VB2/(mg·L－1)－1 0 1 x1-玉米粉/(g·L－1)因素水平60．00 80．00 100．00表2 响应面试验设计与结果Y试验号因素及水平设置x1 x2 x3 x4胞外粗多糖产量/(g·L－1)1 0 1 0 1 5．384 2 1 －1 0 0 2．991 3 －1 0 0 －1 3．447 4 0 0 1 －1 4．415 5 －1 0 －1 0 3．304 6 0 0 0 0 5．584 7 －1 0 1 0 3．504 8 0 1 －1 0 4．387 9 1 1 0 0 5．157 10 0 －1 －1 0 2．564 11 0 0 －1 1 3．504 12 1 0 0 －1 4．188 13 0 0 0 0 6．21 14 0 －1 0 1 2．564 15 0 0 －1 －1 2．991 16 －1 0 0 1 3．234 17 0 0 0 0 6．068 18 0 －1 0 －1 3．704 19 0 －1 1 0 3．447 20 0 1 0 －1 3．555 21 0 0 0 0 5．669 22 －1 －1 0 0 3．959 23 1 0 1 0 4．102 24 0 1 1 0 4．815 25 0 0 1 1 3．917 26 －1 1 0 0 4．328 27 0 0 0 0 5．384 28 1 0 －1 0 3．827 29 1 0 0 1 4．843经Design-Expert8．0．5软件对黑木耳液态深层发酵产胞外粗多糖的产量进行分析，得到二次模型回归统计分析表见表3．表3 响应面方差分析结果*Significant at 0．05 level;＊＊Significant at 0．01 level方差来源平方和自由度均方值 F值 P值模型 27．54 14 1．97 16．00 ＜0．000 1＊＊29．26 28 x1 0．93 1 0．93 7．53 0．015 8*x2 5．88 1 5．88 47．80 ＜0．000 1＊＊x3 1．09 1 1．09 8．90 0．009 9＊＊x4 0．11 1 0．11 0．89 0．361 4 x1x2 0．81 1 0．81 6．57 0．022 6*x1x31．406E-003 1 1．406E-0030．011 0．916 3 x1x4 0．19 1 0．19 1．53 0．236 1x2x3 0．052 1 0．052 0．42 0．526 9 x2x4 2．20 1 2．20 17．93 0．000 8＊＊x3x4 0．26 1 0．26 2．08 0．171 4 x12 4．91 1 4．91 39．92 ＜0．000 1＊＊x22 4．95 1 4．95 40．25 ＜0．000 1＊＊x32 8．33 1 8．33 67．76 ＜0．000 1＊＊x42 6．64 1 6．64 54．05 ＜0．000 1＊＊残差 1．72 14 0．12失拟项 1．25 10 0．12 1．05 0．527 0纯失误 0．48 4 0．12总离差从方差分析表中可以看出，x1、x1x2项差异显著，x2、x3、x2x4以及各因素的平方项差异极显著，建立的回归方程如下:Y= － 69．18+1．85x1+1．89x2+14．42x3+0．20x4+0．04x1x2 －0．08x2x3+0．02 x2x4 －0．02 x3x4－0．03－0．22－2．01，该方程决定系数R2=0．941 2，修正决定系数 Adj．R2=0．882 4，说明该模型能对试验数据进行较好的拟合，可以预测实际生产．此外，由于F值越大代表因素对于试验的指标越重要，由表3可知:x2＞x3＞x1＞x4，即培养基中各组分对于黑木耳液态深层发酵产胞外粗多糖的影响程度大小:酵母浸粉＞无机盐＞玉米粉＞维生素B2．图5 玉米粉与酵母浸粉交互影响黑木耳胞外多糖响应面图图6 维生素B2与酵母浸粉交互影响黑木耳胞外多糖响应面图图7 胞外多糖与玉米粉水平、酵母浸粉水平等高线图图8 胞外多糖与维生素B2水平、酵母浸粉水平等高线图进行响应面最优分析可知，对于黑木耳液态深层发酵产胞外多糖，玉米粉和酵母浸粉的交互作用显著，维生素B2和酵母浸粉的交互作用极显著．根据回归方程绘制的响应面和等高线如图5～8，可以更加直观地反映出其交互作用．等高线的形状可反映出交互效应的强弱，椭圆形表示两因素交互作用显著，而圆形则与之相反．3 结论通过单因素试验设计，采用Box-Behnken设计建立了黑木耳黑木耳液态深层发酵胞外粗多糖产量与四个关键因子的二次多项式回归模型，经检验证明该模型是合理可靠的．利用模型的响应面分析黑木耳胞外粗多糖得率的关键因子及其相互作用．通过模型系数显著性检验，得到因素的主效应关系:酵母浸粉＞无机盐＞玉米粉＞维生素B2．维生素B2虽然不是影响黑木耳液态深层发酵产胞外多糖的主要因素，但与酵母浸粉的交互作用极显著．最终得到优化培养基组成为:葡萄糖36．78 g/L，酵母浸粉11．23 g/L，无机盐6．10 g/L，维生素B286．06mg/L;在此条件下可得到胞外多糖的最大产量，预测值为6．074 g/L，对试验结果进行验证，得到胞外多糖的产量为5．905 g/L，与理论预测值基本一致．参考文献:【相关文献】［1］陈丽华，章克昌．8味中药对黑木耳发酵的影响［J］．食品与生物技术学报，2007，26(5):105-109．［2］肖彩霞，王玉红，章克昌．黑木耳深层发酵工艺条件的研究［J］．生物技术，2004，114(15):70-71．［3］史岳红，鲜乔，张拥军．不同品种黑木耳多糖含量差异的研究［J］．浙江食用菌，2009，17(5):15-17．［4］ YUAN Z，HE P，CUI J．Hypoglycemic effect of watersoluble polysaccharide from from woody ear(Auricularia auricula-judae Quel．)in genetically diabetic KKAy mice ［J］．Journal of nutritional science and vitaminology，1998，44(6):29-40［5］韩春然，徐丽萍．黑木耳多糖的提取、纯化及降血脂作用的研究［J］．中国食品学报，2007，7(1):55-58．［6］ J．Bohn，J．N．BeMiller．(l→3)-β-D-Glucans as biological respense modifiers:a review of structure-functional activity relations［J］．Carbohydrate Polymer，1995(28):3-14［7］赵鑫．黑木耳分级多糖抗氧化活性及其相关生理功能研究［D］．哈尔滨:东北林业大学，2011［8］张大为．以中药为基质的黑木耳多糖发酵工艺条件的研究［D］．贵阳:贵州大学，2008．［9］唐青涛，陈福生．深层发酵黑木耳产胞外多糖的初步研究［J］．食品科学，2002，23(3):46-49．［10］肖彩霞，章克昌．黑木耳胞外多糖深层发酵培养基组成的优化［J］．无锡轻工大学学报，2004，23(3):24-26．［11］王国良，王志江，蔡景顺，等．黑木耳菌丝体发酵条件优化和发酵罐生产多糖的试验［J］．农业科技通讯，2009(1):42-59．［12］穆文静，杜玲，扈瑞平，等．钝顶螺旋藻多糖Sevage法脱蛋白工艺的研究［J］．内蒙古石油化工，2011(10):1-4．。
响应面法优化热带假丝酵母104菌株产羰基还原酶发酵培养基
响应面法优化热带假丝酵母104菌株产羰基还原酶发酵培养基王普, 孙立明, 何军邀浙江工业大学药学院, 杭州 310032摘要: 通过菌种优选得到产高选择性羰基还原酶的热带假丝酵母(Candida tropicalis) 104菌株, 可不对称还原1-(3,5-二三氟甲基)苯基乙酮生成(S)-1-(3,5-二三氟甲基)苯基乙醇, 对映体过量值>99.9%。
采用部分因子实验设计考察发酵培养基中各组分对产酶的影响, 结果表明, 酵母粉、葡萄糖和NH4Cl浓度对产酶影响显著。
继而采用最陡爬坡路径逼近最大响应区域, 并结合中心组合实验和响应面对3个显著性因素进行分析, 得到优化的发酵培养基组成: 葡萄糖47.14 g/L, 酵母粉13.25 g/L, NH4Cl 2.71 g/L, MgSO4·7H2O 0.4 g/L, KH2PO4 1 g/L和K2HPO4 1 g/L。
采用该优化培养基, 供试菌株的羰基还原酶活力达851.13 U/L, 较优化前提高了65.2%。
关键词: 热带假丝酵母, 羰基还原酶, (S)-1-(3,5-二三氟甲基)苯基乙醇, 响应面, 培养基优化Medium optimization for enhanced production of carbonylreductase by Candida tropicalis 104 by response surfacemethodologyPu Wang, Liming Sun, and Junyao HeCollege of Pharmaceutical Science, Zhejiang University of Technology, Hangzhou 310032, ChinaAbstract: Using response surface method, we optimized the mediumfor the asymmetric whole cell biotransformation by Candida tropicalis104. This strain was used for microbial reduction of 1-[3,5-bis(trifluoromethyl)phenyl] ethanone to (S)-1-[3,5-bis(trifluoromethyl)phenyl] alcohol, with enantiomeric excess(e.e.)reached more than 99.9%. Fractional factorial design was used toevaluate the effects of medium components on carbonyl reductase activityof Candida tropicalis 104. Yeast extract, glucose and NH4Cl were themost important factors among six tested variables that influence theenzyme activity for the biotransformation process. Based on theexperimental results, the path of steepest ascent was undertaken toapproach the optimal region of these factors. Central composite designand response surface analysis were subsequently employed for furtheroptimization. The optimal medium for Candida tropicalis 104 was composedof (in g/L): glucose 47.14, yeast extract 13.25, NH4Cl 2.71, MgSO4·7H2O0.4, KH2PO4 1, K2HPO4 1. Under the optimum conditions, the maximumenzyme activity of 852.75 U/L in theory and 851.13 U/L in the experimentwere obtained, with an increase of 65.2% compared to the original mediumcomponents.Keywords: Candida tropicalis, carbonyl reductase, (S)-1-[3,5-bis(trifluoromethyl)phenyl] alcohol, response surface methodology, medium optimization手性醇是合成手性药物和农业化学品等的重要中间体, 在医药、精细化学品等领域用途广泛, 如光学活性的2-氯-1-(2,4-二氟苯基)乙醇可用于合成光学活性氮唑类抗真菌药物[1]。
《西安科技大学学报》2017年总目次
液态 ＣＯ２溶浸作用下煤体孔隙结构损伤特性研究 文 虎，李珍宝，王 旭，等（１４９） 冻融损伤岩石的强度准则研究 张慧梅，彭 川，杨更社，等（１５４） 基于声发射特征的覆岩采动裂隙演化规律研究 李志梁，李树刚，林海飞，等（１５９） “应力 －渗流 －损伤”分析下的煤柱宽度设计 范公勤，闫瑞兵，雷照源，等（１６４） 考虑地面动荷载的地铁运行隧道结构安全分析 刘新军（１７１） 浅埋深薄基岩煤层大采高综采工作面切眼支护优化研究 党应强（１７８） 水压致裂提高块煤率的机理及应用 邓广哲，齐晓华，王 雷（１８７） 苏里格气田苏东南地区盒 ８段储层孔隙结构研究 高 洁，孙 卫，段瑞芳（１９４） 隧道衬砌质量地质雷达检测影响因素研究 陈建平（２００）
第 ３７卷 第 ６期 ２０１７年 １１月
西安科技大学学报 ＪＯＵＲＮＡＬＯＦＸＩ′ＡＮＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹＯＦＳＣＩＥＮＣＥＡＮＤＴＥＣＨＮＯＬＯＧＹ
Ｖｏｌ．３７ Ｎｏ６ Ｎｏｖ２０１７ １期
基于热重 －傅里叶红外光谱联用的煤矸石自燃特性及微观表征 邓 军，李 贝，肖 ，等（１） 煤岩瓦斯动力灾害主控地质体理论及地质作用机理 董国伟，胡千庭（７） 天然气储罐泄漏扩散的影响因素及危害性 马 砺，崔祥华，邓 军（１５） 榆家梁煤矿多煤层开采矿压显现规律研究 黄庆享，贺雁鹏，周海丰（２１） 裂隙岩体损伤的注浆加固效果试验 许延春，李昆奇，谢小锋，等（２６） 基于原位直剪试验的岩土体力学特性研究 丁自伟，钱 坤（３２） 堆放方式对煤堆自燃升温过程的影响分析 刘星魁，屈丽娜，常绪华（３８） 博看网 . All基R于ig实ht物s期R权es的er石ve油d.勘探项目序列投资决策模型 王 玲，张金锁（４５） 盐锅峡黑方台黄土塬塬坡地下水浸润带研究 王念秦，杨盼盼，王得楷，等 （５１） 郭家河煤矿回采工作面瓦斯涌出量预测 叶桢妮，侯恩科，段中会，等（５７） 宁南山区泥石流灾害危险性量化评价研究 尚 慧，倪万魁，罗东海（６３） 煤矿井工开采对上覆反向滑坡扰动的模拟研究 孙学阳，安孝会，苗霖田，等（７１） 国道 Ｇ３４５镇安金钟至木王林场段公路建设地质灾害危险性评价 何青峰，胡 勇，白海杰（７８） 宁夏植被动态变化及其对降水的响应 张元栋，尚晓鹏，杜芬玲，等（８４） 湘西民乐地区马底驿组 －牛蹄塘组板岩类稀土元素地球化学特征及其意义
中心组合设计优化热带假丝酵母菌冷冻干燥保护剂
中心组合设计优化热带假丝酵母菌冷冻干燥保护剂
王华;贺金梅
【期刊名称】《食品科学》
【年(卷),期】2013(034)001
【摘要】采用单因素试验和响应面中心组合设计,对热带假丝酵母菌真空冷冻干燥保护剂配方进行筛选和优化.通过Design-Expert软件对试验数据进行回归分析,得到保护剂最佳配方为:蔗糖14.15g/100mL、L-谷氨酸钠7.07g/100mL、聚乙二醇1.10g/100mL,菌体存活率预测值为81.46％,实际值为82.73％.
【总页数】4页(P244-247)
【作者】王华;贺金梅
【作者单位】中国农业科学院柑桔研究所,重庆 400712;中国农业科学院柑桔研究所,重庆 400712;西南大学食品科学学院,重庆 400715
【正文语种】中文
【中图分类】Q93.336
【相关文献】
1.响应曲面法优化罗伊氏乳杆菌冷冻干燥保护剂的配比 [J], 秦鹏;谢鹏;刘广宇;梁宏基;梁淑娃
2.纳豆制备及冷冻干燥保护剂的筛选和优化研究 [J], 弓玉红;田晶
3.植物乳杆菌冷冻干燥保护剂配方优化及耐受性研究 [J], 仇梓冰;于长青;张东杰;王长远
4.响应面法优化乳双歧杆菌Z-1冷冻干燥保护剂配方 [J], 徐显睿;李翠凤;隋勇军;
张宗博;杨洪来;李道河;陈政言;张兰威
5.真空冷冻干燥法制备益生菌粉的冻干保护剂配方优化 [J], 陈胜杰;高翔;袁戎宇因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
利用响应面法优化混菌发酵细菌纤维素和醋酸培养基
利用响应面法优化混菌发酵细菌纤维素和醋酸培养基周莲;卢红梅;陈莉;罗锦洪;苏佳;乔岩【期刊名称】《中国调味品》【年(卷),期】2016(000)002【摘要】采用二水平多因素实验设计对影响木醋杆菌和醋酸杆菌混菌发酵细菌纤维素和醋酸的培养基成分进行了筛选，所选取的7个相关因素为糖源、酵母膏、蛋白胨、KH2 PO4、MgSO4、无水乙醇、柠檬酸，在此基础上，采用响应曲面法（RSM）对影响木醋杆菌和醋酸杆菌混菌发酵细菌纤维素和醋酸培养基的关键影响因素：糖源、无水乙醇的最佳水平范围做了进一步研究与探讨，通过对二次多项式回归方程求解得知，在上述自变量分别为糖源4．5％，无水乙醇4．0％时，综合指标（综合指标＝醋酸产量＋细菌纤维素产量）有最大值5．17。
优化的混菌发酵培养基为：糖4．5％，酵母膏0．8％，蛋白胨1．0％，KH2 PO40．3％，MgSO40．2％，无水乙醇4．0％。
在此条件下测得的综合指标为5．21，比未优化前的4．56提高了14．3％。
【总页数】5页(P69-73)【作者】周莲;卢红梅;陈莉;罗锦洪;苏佳;乔岩【作者单位】贵州大学化学与化工学院，贵阳 550003; 贵州大学贵州省发酵工程与生物制药重点实验室，贵阳 550003;贵州大学酿酒与食品工程学院，贵阳550003; 贵州大学贵州省发酵工程与生物制药重点实验室，贵阳 550003;贵州大学酿酒与食品工程学院，贵阳 550003; 贵州大学贵州省发酵工程与生物制药重点实验室，贵阳 550003;贵州大学化学与化工学院，贵阳 550003; 贵州大学贵州省发酵工程与生物制药重点实验室，贵阳 550003;贵州大学酿酒与食品工程学院，贵阳 550003; 贵州大学贵州省发酵工程与生物制药重点实验室，贵阳 550003;贵州大学酿酒与食品工程学院，贵阳 550003; 贵州大学贵州省发酵工程与生物制药重点实验室，贵阳 550003【正文语种】中文【中图分类】TS201.24【相关文献】1.响应面法优化木醋杆菌发酵酿酒丢糟水解液产细菌纤维素培养基及其产物性能[J], 张雯;刘康;罗霏霏;张敏娟;李彦军2.利用响应面法优化细菌纤维素发酵培养基 [J], 罗锦洪;卢红梅;张义明;杨建辉3.利用响应面法优化聚羟基丁酸混菌发酵培养基 [J], 郑冰心;李芳亮;陈倩倩;童延斌;李洪玲;鲁建江4.响应面法优化胶红酵母伴生的维生素C混菌发酵培养基 [J], 廖林; 吕淑霞; 张云鹤; 姚硕; 张良; 马镝; 林英; 于晓丹5.响应面法优化动态发酵细菌纤维素菌株HS01培养基 [J], 赵浩杰;王光翟;廖博文;谭玉静;常忠义;高红亮因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
利用热带假丝酵母发酵生产长链二元酸的研究进展
前 发酵 工 业 放 大 技 术 已成 熟 。据 Ｃ Ｎ１ ９ ２ ８ １ ０ Ｏ Ａ 报 道 利用 Ｃ Ｈ一 １ ４ — ２ ０ ４ 菌 株在 ５ ０ ｍ。发 酵 罐 中 发酵 １ ３ ０ ｈ ，
理生 态研 究所 、 中国石化抚 顺 石化 研究 院 ， 这 ３家科研
可分 为 ５ 个 步骤 ： （ １ ） 酵母 细胞 吸 收烷烃并 转运 至细胞
内； （ ２ ） 烷烃 被 Ｐ ４ ５ ０酶 系 ａ 一 氧化成 Ｄ Ｃ Ａ 。 ； （ ３ ） 十 二碳
面 的研究 主要集 中在 以下 ３ 个 方面 ： （ １ ） 长链 二 元酸产
抚顺石 化研 究 院从 中 国科 学 院上海 植物生 理生态研 究 所 购取 热 带 假 丝 酵母 菌株 ， 开 展 微 生 物 发 酵 制 备 Ｄ Ｃ Ａ 十 三碳 二元 酸 （ Ｄ Ｃ Ａ 。 ） 的应 用 开 发 研 究 。其 中热带 假丝 酵 母 突 变 株 Ｓ Ｐ ２ ＵＶ２ ５ ６已用 于工 业 化 发 酵生产 ＤＣ Ａ 培养 ６ ｄ的 平 均 产 酸 量 为 １ ５ ６ ． ５ ｇ・ Ｉ ＿ 。 ， 而Ｄ Ｃ Ａ。 在 ｌ Ｏ Ｉ 发 酵 罐 中培 养 ６ ｄ的平 均产 酸 量为 １ ７ ０ ｇ・ Ｉ ＿ 。 ， 但 工 业化应 用 报道较 少 ］ 。
利 用 热 带 假 丝 酵 母 发 酵 生产 长 链 二 元 酸 的 研 究 进 展
桂 秋芬 。 姚 嘉晏 。 蒋洋松 ， 赵意 平
（ 淮安 清 江石 油化 工有 限责任 公 司， 江 苏 淮安 ２ ２ ３ ０ ０ ２ ）
响应面法优化酵母增殖培养基
Ｏｐｔｉｍ ｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ Ｙｅａｓｔ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｍ ｅｄｉｕｍ ｂｙ Ｒｅｓｐｏｎｓｅ Ｓｕｒｆａｃｅ Ｍ ｅｔｈｏｄ
ＮＩＵ Ｘｉｙｕｅ ，ＲＥＮ Ｘｉａｏｐｕ ，ＹＥ Ｌｉｎ ，ＬＡＮ Ｈｏｎｇｚｈｕ ａｎｄ ＸＵ Ｑｉａｎ ，。 （１．Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆＬｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｔａｒｉｍ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ａｌａｒ，Ｘｉ￣ｉａｎｇ ８４３３００； ２．Ｋｅｙ Ｌａｂ ｏｆＤｅｅｐ－ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ
酿酒科技 ２０１６年 第４期（总第２６２期）·ＬＩＱＵＯＲ—ＭＡＫＩＮＧ ＳＣＩＥＮＣＥ＆ＴＥＣＨＮＯＬＯＧＹ ２０１６Ｎｏ．４（Ｔｏ１．２６２） ＤＯＩ：１０．１３７４６￣．ｎｊｋｊ．２０１５４７６
４７
响应面法优化酵母增殖培养基
牛希跃 ，任 晓镤 ，叶 林 ，兰鸿珠 ，许 倩 ＇
（１．塔里木大学生命科学学 院，新疆 阿拉尔 ８４３３００； ２．南疆特色 农产 品深加工兵团重点实验室，新疆 阿拉尔 ８４３３００）
摘 要 ： 为评价培养基成 分（碳 源、氮源、生长 因子 等）对酵母茵 生长量 的影响 ，利 用ＰｌａｃｋｅＲ—Ｂｕｒｍａｎ实验研 究主 要影响 因素 ，经最陡爬坡 实验确定各 因素峰 值 ，再利 用响应 面法优化 主要 影响 因素。结果表 明，最适培养基 配方为 蔗糖 ５８ ｇ／Ｌ、苹果 汁 ２２ｍＬ／Ｌ、蛋 白胨 １２ ｇ／Ｌ、马铃 薯 汁 １０ｍＬ／Ｌ、酵母粉 １０ ｇ／Ｌ、氯化钙 ０．１ ｇ／Ｌ、磷 酸氢二钾 １ ｇ／Ｌ， 在 ｐＨ４．５条 件 下 ２８℃ 培 养 ２４ ｈ，酵母 菌 的 生 长量 为 ８．８７４８ ｃｆｕ／ｍＬ。优 化 后 的培 养 基 与 传 统 的 ＹＰＤ培 养 基 （８．５５４３ ｃｆｕ／ｍＬ）￣Ｂ比 ，酵母 茵 菌数 提 高 明 显 。 关键词 ： 酵母 ； 培养基 ； ＰＢ设计 ； 响应 面 中图分类号 ：ＴＳ２６１．１；ＴＳ２６２．３；Ｑ９３—３ 文献标 识码 ：Ａ 文章编号 ：１００１—９２８６（２０１６）０４—００４７—０４
热带假丝酵母发酵法生产木糖醇的研究
热带假丝酵母发酵法生产木糖醇的研究
张晓元;王松梅;朱希强;郭学平;凌沛学
【期刊名称】《食品与药品》
【年(卷),期】2006(008)11A
【摘要】目的利用热带假丝酵母研究发酵木糖生产木糖醇的发酵条件。
方法采用摇瓶发酵对发酵生产条件，如培养基中初始木糖浓度、接种量和通气量、氮源、pH等进行优化，通过测定发酵液中木糖的残留量、木糖醇的转化率来确定适合的发酵工艺。
结果通过实验得到最佳培养基条件为：初始木糖50g／L，蛋白胨5g ／L，酵母粉10g／L，硫酸镁0．5g／L、磷酸二氢钾5g／L，硫酸铵1g／L；最佳发酵条件为：pH6．0，摇瓶发酵装液量50mL／250mL，转速200r／min，发酵温度30℃，发酵时间28h。
结论优化了木糖醇的发酵工艺。
【总页数】4页(P27-30)
【作者】张晓元;王松梅;朱希强;郭学平;凌沛学
【作者单位】山东省生物药物研究院,山东济南250108
【正文语种】中文
【中图分类】TS202
【相关文献】
1.发酵法生产木糖醇研究进展 [J], 龚霄;贺稚非;陈盼;伍先绍
2.热带假丝酵母发酵生产木糖醇的研究 [J], 邓立红;王艳辉;张扬;马润宇
3.热带假丝酵母利用酒糟水解液发酵生产木糖醇的初步研究 [J], 王铮;陈红英;沈才
洪;樊林;胡承
4.发酵法生产木糖醇的研究进展 [J], 王成福;秦海青;黄伟红
5.热带假丝酵母发酵法生产木糖醇的研究 [J], 张晓元;王松梅;朱希强;郭学平;凌沛学
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响应面法优化热带假丝酵母ypy06植酸酶发酵条件的研究
响应面法优化热带假丝酵母ypy06植酸酶发酵条件的研究摘要本文旨在优化热带假丝酵母 Ypy06 植酸酶的发酵条件。
采用响应面法，考察了两个参数（温度和pH）对植酸酶活性的影响。
以植酸酶的活性为目标函数，采用响应面分析方法研究了温度和pH值对植酸酶活性的影响，最佳发酵温度和 pH 值分别为 25°C 和 8.0 。
本研究为优化热带假丝酵母 Ypy06 植酸酶的发酵条件提供了有用的信息。
关键词：植酸酶；发酵条件优化；响应面法正文1. 简介热带假丝酵母 Ypy06 是一种发酵微生物，具有广泛的应用前景。
植酸酶是一种重要的酶，可用于制备多种衍生物，因此提升 Ypy06 植酸酶活性是重要的任务。
响应面法是一种理论方法，能够获得多个参数协同作用下的目标函数最优解，得到较好结果可以更快速、更有效地提升 Ypy06 植酸酶的活性。
2. 材料和方法2.1 培养基的配制用容量为 1000 mL 干式 Erlenmeyer 整瓶配制培养基，组成如表 1 所示。
2.2 发酵条件Ypy06 植酸酶的发酵条件由 2 个参数决定，分别为温度（25～30℃）和 pH 值（6 ～ 9）。
2.3. 响应面法为研究发酵温度和 pH 值对 Ypy06 植酸酶活性的影响，采用响应面法（RSM）对 Ypy06 植酸酶进行优化。
主因素参数包括温度 (T) 和 pH 值 (P)，把它们随机分布在 2 个参数的响应面上，以植酸酶活性（U）为响应变量，具体参数设置如表 2 所示。
3. 结果与讨论3.1 响应面图结果(省略...)4. 结论通过响应面分析，我们发现最佳发酵温度为 25°C，最佳 pH值为 8.0，在此条件下 Ypy06 植酸酶活性最高。
本研究为优化热带假丝酵母 Ypy06 植酸酶的发酵条件提供了有用的信息。
除了温度和 pH 值之外，培养基中的其它主要成分也可能会影响 Ypy06 植酸酶的活性。
通过改变培养基中其他成分，比如氮源、碳源等，可以获得更好的发酵效果。
响应面法优化热带假丝酵母ypy06植酸酶发酵条件的研究
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响应面法优化植物乳杆菌发酵产胆盐水解酶的培养基成分
响应面法优化植物乳杆菌发酵产胆盐水解酶的培养基成分李秀凉;王继超【期刊名称】《中国酿造》【年(卷),期】2013(032)005【摘要】以胆盐水解酶的活性为响应值,采用响应面设计分析法对植物乳杆菌发酵产胆盐水解酶培养基的成分进行优化.获得最佳培养基组成(g/L):葡萄糖19.40、蛋白胨17.05、大豆蛋白胨14.00、乙酸钠1.82、K2HPO4 2.00、酵母浸粉6.00、柠檬酸氢二铵1.00、MgSO40.87、MnSO40.45、L-半胱氨酸0.5、吐温-80 2.2mL/L.在该优化条件下,胆盐水解酶产量为(7.02±0.28) U/mL,较单因素优化前提高了6.44倍.所得数学模型的预测值与实验观察值相符,能够预测不同培养条件下植物乳杆菌发酵产胆盐水解酶产量的变化.【总页数】5页(P47-51)【作者】李秀凉;王继超【作者单位】黑龙江大学生命科学学院,黑龙江哈尔滨150080;微生物黑龙江省高校重点实验室,黑龙江哈尔滨150080;农业微生物技术教育部工程研究中心,黑龙江哈尔滨150080;黑龙江大学生命科学学院,黑龙江哈尔滨150080;微生物黑龙江省高校重点实验室,黑龙江哈尔滨150080;农业微生物技术教育部工程研究中心,黑龙江哈尔滨150080【正文语种】中文【中图分类】Q815【相关文献】1.产胆盐水解酶植物乳杆菌降胆固醇作用的研究 [J], 汤慧勤;姚晓敏;徐一涵;张建华2.响应面法优化植物乳杆菌代谢产细菌素的发酵条件 [J], 陈琳;孟祥晨3.响应面法优化植物乳杆菌产β-半乳糖苷酶发酵培养基 [J], 高晓峰;周颖;李柏良;周晶;霍贵成4.响应面法优化植物乳杆菌LPL-1产细菌素发酵条件及细菌素理化性质分析 [J], 王瑶;李琪;李平兰5.藏灵菇源干酪乳杆菌KL1高产胆盐水解酶发酵条件的优化研究 [J], 刘慧;熊利霞;李金锭;程雪;张红星因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
热带假丝酵母SG-1产单细胞蛋白的发酵培养基优化
热带假丝酵母SG-1产单细胞蛋白的发酵培养基优化李昆太;周佳;庞会忠;叶亚健;程新【摘要】本试验以甜高粱秸秆汁为主要的发酵原料,应用二次正交旋转组合试验设计方法对热带假丝酵母SG-1产单细胞蛋白的发酵培养基进行优化.结果显示,热带假丝酵母SG-1产单细胞蛋白的较佳发酵培养基组成为:甜高粱秸秆汁220 mL/L、工业葡萄糖37.5 g/L、工业蛋白胨37.5 g/L、MgSO4·7H2O3.75 g/L、KH2PO43.75 g/L.该优化条件下单细胞蛋白产量达15.38 g/L,比初始发酵培养基(甜高粱秸秆汁120 mL/L、工业葡萄糖20 g/L、工业蛋白胨20 g/L、MgSO4·7H2O2.0 g/L、KH2PO42.0 g/L)单细胞蛋白产量(10.77 g/L)提高了42.80％.【期刊名称】《中国饲料》【年(卷),期】2013(000)003【总页数】4页(P15-17,21)【关键词】热带假丝酵母SG-1;单细胞蛋白;发酵培养基;优化【作者】李昆太;周佳;庞会忠;叶亚健;程新【作者单位】江西农业大学生物科学与工程学院;江西农业大学生物科学与工程学院;江西农业大学生物科学与工程学院;江西农业大学生物科学与工程学院;江西农业大学生物科学与工程学院【正文语种】中文【中图分类】S816.7单细胞蛋白（SCP）又称微生物蛋白或菌体蛋白，通常可通过细菌、酵母菌等微生物利用食品工业及轻工业的副产品或下脚料发酵培养而得（郭状等，2008；许倩等，2007）。
酵母菌是广泛用于生产SCP的菌种，主要包括假丝酵母属、丝孢酵母属、汉森酵母属和接合豆孢酵母属等（马旭光和张宗舟，2010）。
SCP所含的营养物质极为丰富，具有丰富的粗蛋白质、氨基酸、维生素和促生长因子，是一类理想的蛋白质饲料（张建刚，2010）。
因此，利用非食用资源和废弃资源开发和推广微生物生产单细胞蛋白饲料已成为补充饲料蛋白来源不足的重要途径（张秋华等，2009）。
热带假丝酵母两态型的控制研究
热带假丝酵母两态型的控制研究
马伟超;李一婧;任伟亮;安建平
【期刊名称】《中国酿造》
【年(卷),期】2010(000)012
【摘要】通过对热带假丝酵母在不同培养基上的培养,研究了培养温度、pH值、脯氨酸浓度及培养时间对酵母两种形态的影响.通过正交试验得出;最有利于菌丝型生长的条件是:YX培养基、42℃、pH值6.5、接种量5%、木糖含量2%、24h补加10mmol/L脯氨酸、215r/min摇床培养,验证试验表明其最大丝化率为73.39%,平均丝化率为67.29%;最有利于酵母型生长的条件是:YM培养基、pH值4.5、27℃、215r/min摇床培养,其最大丝化率仅为1.14%,平均丝化率为0.08%.
【总页数】5页(P104-108)
【作者】马伟超;李一婧;任伟亮;安建平
【作者单位】天水师范学院,生命科学与化学学院,甘肃,天水,741001;天水师范学院,生命科学与化学学院,甘肃,天水,741001;天水师范学院,生命科学与化学学院,甘肃,天水,741001;天水师范学院,生命科学与化学学院,甘肃,天水,741001
【正文语种】中文
【中图分类】Q935
【相关文献】
1.两态型热带假丝酵母木糖醇发酵的最佳时间检测 [J], 李一婧;马伟超;高文辉;窦婷婷
2.跌坎型底流消能流态转捩及控制研究 [J], 郑铁刚;孙双科;柳海涛;夏庆福;朱志攀
3.向列型液晶与硬粒子两相体系的织态演化动力学研究 [J], 王涛;洪珂;张红东;杨玉良
4.电流跟踪型两态调制逆变器的仿真研究 [J], 赵水英; 张翠侠; 曹吉花
5.两态电流控制PWM开关频率方法的研究 [J], 颜新祥
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热带假丝酵母菌的生化特性与耐药性分析
热带假丝酵母菌的生化特性与耐药性分析张运起;刘一婷;李立新【期刊名称】《临床合理用药杂志》【年(卷),期】2016(0)16【摘要】目的分析热带假丝酵母菌的生化特性及其对抗真菌药物的耐药性。
方法对分离自临床标本的热带假丝酵母菌采用沙氏培养基培养,科玛嘉显色培养基和法国API AUX20C鉴定板做生化鉴定,观察真菌形态,并用K-B法做体外药敏试验。
结果 2005年7月-2013年6月共分离热带假丝酵母菌174株,占假丝酵母菌的33.0%,以>60岁的老年患者居多(79.9%),基础疾病以肺部疾病为主。
热带假丝酵母菌能同化D-葡萄糖、2-酮基-葡萄糖酸钙、D-木糖、D-半乳糖、D-山梨醇、α-甲基-D-葡萄糖甙、D-海藻糖、D-松三糖等;对制霉菌素(NYST)、酮康唑(KETO)、两性霉素B(AMPHO)、氟康唑(FLZ)和氟胞嘧啶(Fl U)的耐药率均在3.0%以下;特比萘芬(TEB)和咪康唑(MICO)的耐药率较高,分别为85.6%和32.2%。
结论制霉菌素、酮康唑、两性霉素B和氟康唑对热带假丝酵母菌具有较好的抗菌活性,但氟康唑的耐药率有上升趋势,特比萘芬不能作为治疗热带假丝酵母菌感染的首选药物。
【总页数】2页(P132-133)【作者】张运起;刘一婷;李立新【作者单位】河北省深泽县医院检验科;石家庄市第一医院检验科【正文语种】中文【中图分类】R446.5【相关文献】1.一株发酵木薯酒糟的热带假丝酵母菌株的分离及营养分析2.热带假丝酵母菌ERG11基因突变与氟康唑耐药性的关系3.耐氟康唑热带假丝酵母菌ERG11基因突变分析4.白假丝酵母菌基因型和假丝酵母菌群分布与外阴阴道假丝酵母菌病严重程度的相关性分析5.外阴阴道假丝酵母菌病来源的热带假丝酵母菌多位点序列分型因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
热带假丝酵母的二元酸分泌现象及其动力学
122 { [H + ] 0 ( [H + ] 0 + 10[H ] t ( [H ] t + 10
+ - 7. 21
7. 21
)-
) } c (mm o l L - 1 ) ( 1)
式中, c 代表缓冲溶液中以各种形式存在的磷酸盐
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5. 6.
2 实验方法
采取静息细胞分泌实验方法[ 3 ]。 将生长了 24 h, 再调节 pH = 7. 8 进入产酸期 48 h 的细胞由摇瓶中 取出, 5 k r m in 下离心 10 m in 移去上清液和油层, 用少量溶媒破坏乳化层, 用 pH = 5. 6 的生理盐水洗 涤, 在 4℃下离心后转移定容, 即得到静息细胞悬浮 液, 转移到盛有磷酸盐缓冲溶液的摇瓶中, 通气条件 下 140 r m in 振荡。经推导, 缓冲溶液中磷酸盐浓度 ～ 8. 4 范围内, 二元酸质 c = 50 mm o l L , pH = 6. 5 量浓度的变化 ∃Θ(DCA 13 ) 可用下式计算:
28
清 华 大 学 学 报 ( 自 然 科 学 版)
1999, 39 ( 12)
总浓度。 测得磷酸盐缓冲溶液 pH 随时间的变化即 可算出 t 时刻 DCA 13 浓度变化。 由于溶液离子强度 不大, 离子活度与浓度的区别可忽略。 对以上方法进 行了验证: 向缓冲溶液加入一定量 DCA 13 , 由 pH 值 的变化得到的计算值 ( 92214 m g L ) 与实际加入值 ( 926 m g L ) 的误差很小 ( - 0. 4% ) 。
热带假丝酵母菌溶煤培养基的响应面优化
热带假丝酵母菌溶煤培养基的响应面优化煤是由埋藏在地层下的古代植物残骸经历了一系列生物化学和物理化学变化而逐渐形成的，因此，煤中仍或多或少的保留着成煤植物残体中的木质素和多环芳烃类物质结构[1-2]。
微生物溶煤是利用微生物来实现煤中多环芳烃及其脂肪链的断裂、降解，使煤大分子转化为小分子物质，并最终溶解于水[3-6]。
自20世纪80年代有研究者发现一些微生物可将煤溶解为黑色液滴以来，科学工作者对微生物溶煤进行了广泛的研究，为实现煤的洁净高效利用开辟了一条可行之路，具有工艺简单、低能耗、无污染等许多常规处理技术难以比拟的优越性，引起了国内外学者的广泛关注[7-8]。
随着微生物溶煤研究的不断深入，许多科研工作者提出了不同的溶煤机理：碱性溶煤机理、螯合物溶煤机理、表面活性剂溶煤机理、酯酶降解机理和过氧化物酶降解机理等。
但无论是何种机理，无外乎是微生物利用培养基中的碳源、氮源、无机盐、微量元素等营养物质，代谢产生一些无机物或者有机物，而这些物质具有溶解或降解煤的特性。
因此微生物溶煤研究中培养基的营养物质种类、含量及比例，不仅影响着微生物的代谢过程和胞外物质的分泌，还对于溶煤效果的高低至关重要。
本实验利用热带假丝酵母菌对神府煤进行微生物溶煤实验，以液态溶煤所得黑色发酵液在450 nm处的吸光度为响应值，采用单因素实验筛选出最佳氮源，再利用析因实验和响应面分析实验对溶煤培养基进行优化，采用多元二次回归拟合出方程，从而获得培养基各营养物质的最佳配比，对含有溶煤产物的黑色发酵液加酸沉淀，获得溶煤产物，并对溶煤产物进行紫外和红外光谱分析。
1材料与方法1.1实验菌种实验所用菌种，热带假丝酵母菌（Candida tropicalis，CICC 1463）为球状真菌，具有较强的降解苯酚和脂肪烃的能力，购自中国微生物菌种保藏管理中心（CICC），采取甘油保藏法将菌种保存于-4 ℃冰箱中。
1.2煤样实验用煤样为神府长焰煤，首先将煤粒用圆盘式粉碎机粉碎，再筛分得到不同粒度级的原煤，选择粒度级为0.045～0.075 mm的原煤进行氧化预处理，获得实验所用的氧化煤样。
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： １ ０ ． １ ３ ８ ０ ０ ／ ｊ ． ｃ ｎ ｋ ｉ ． ｘ ａ ｋ ｊ ｄ ｘ ｘ ｂ ． ２ ０ １ ７ ． ０ ２ １ ８ 文章编号： １ ６ ７ ２－ ９ ３ １ ５ （ ２ ０ １ ７ ） ０ ２－ ０ ２ ６ ７－ ０ ７ ㊀㊀㊀㊀Ｄ Ｏ Ｉ
㊀ 热带假丝酵母菌溶煤培养基的响应面优化二
（ Ｃ ｏ ｌ ｌ ｅ ｇ ｅ ｏ ｆ Ｃ ｈ ｅ ｍ ｉ ｓ ｔ ｒ ｙａ ｎ ｄＣ ｈ ｅ ｍ ｉ ｃ ａ ｌ Ｅ ｎ ｇ ｉ ｎ ｅ ｅ ｒ ｉ ｎ ｇ ， Ｘ ｉ ’ ａ ｎＵ ｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙｏ ｆ Ｓ ｃ ｉ ｅ ｎ ｃ ｅ ａ ｎ ｄＴ ｅ ｃ ｈ ｎ ｏ ｌ ｏ ｇ ｙ ， Ｘ ｉ ’ ａ ｎ７ １ ０ ０ ５ ４ ， Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ）
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第３ ７卷㊀第 ２期 ２ ０ １ ７年 ０ ３月
西 安
科
技
大
学
学
ห้องสมุดไป่ตู้
报
Ｖ ｏ ｌ ． ３ ７ ㊀Ｎ ｏ ２ Ｍ ａ ｒ ２ ０ １ ７
Ｊ Ｏ Ｕ Ｒ Ｎ Ａ ＬＯ ＦＸ Ｉ ’ Ａ ＮＵ Ｎ Ｉ Ｖ Ｅ Ｒ Ｓ Ｉ Ｔ ＹＯ ＦＳ Ｃ Ｉ Ｅ Ｎ Ｃ ＥＡ Ｎ ＤＴ Ｅ Ｃ Ｈ Ｎ Ｏ Ｌ Ｏ Ｇ Ｙ
贾建军， 刘向荣 ， 张㊀杰， 赵顺省， 杨再文， 周安宁
（ 西安科技大学 化学与化工学院， 陕西 西安 ７ １ ０ ０ ５ ４ ）
摘㊀要： 以热带假丝酵母菌对神府煤进行微生物溶煤实验， 依次采用析因实验、 最陡爬坡实验和 并对溶煤产物的紫外可见光谱和红外光谱进行了分析。 响应面分析实验对溶煤培养基进行优化， 结果表明： 有机氮源更利于溶煤作用， 且最佳氮源为酵母粉； 葡萄糖、 酵母粉浓度和 ｐ Ｈ 对溶煤作 用影响显著， 其最佳水平分别为 ８ ． １ ５ ２ ， １ ５ ． ７ ５ ９ｇ ／ Ｌ和 ７ ． ４ １ ４ ， 此时的响应值 Ａ ４ ５ ０达 最 大 值 １ ４ ９ ３ ７ ， 溶煤率为 ２ ３ ． ０ ３ ％； 氧化煤被转化为深色小分子水溶性物质， 与氧化煤的结构相似， 溶煤 产物中含有醛、 酮、 羧酸类化合物。 关键词： 热带假丝酵母菌； 微生物溶煤； 响应面法 中图分类号： Ｔ Ｑ５ ３ ６ ． １ ㊀㊀㊀文献标志码：Ａ