加样回收实验.ppt
临床生化检验：7-回收试验
回收试验的原理
• 回收实验可以对分析方法使用纯标准液为标 准，ห้องสมุดไป่ตู้测样品为病人标本时的检验结果受基 质效应的影响作出估计。
• 回收率接近100%，说明分析方法以对分析物 无论在纯溶液中还是复杂的基质环境中，反 应能力是一致的，即分析不受基质影响。
• 若回收率明显偏离100%，说明分析方法对于 基质环境中的分析物的反应能力有明显差别
1、各测定管浓度计算
测定管浓度（mmol/L）=
2、加入浓度计算
AU ×6.41mmol/L AS
标准液用量（ml） 加入浓度（mmol/L）=标准液浓度×
血清量（ml）+标准液用量（ml）+生理盐水量（ml）
3、回收量计算
回收量=回收管测定值－基础管测定值
计算㈡
4、回收率计算
回收率（%）=
5、计算平均回收率
比例误差
实验目的
掌握：方法学回收试验的原理、操作步骤。 熟悉：回收试验的注意事项和评价标准。
回收试验的原理
• 回收试验是分析某方法正确测定加入常 规分析样品中的纯分析物能力的试验， 用于评价候选方法的比例系统误差。
• 通过GOD-POD（葡萄糖氧化酶法）测定 血糖的回收率，能较确切地判断该分析 方法比例系统误差的大小，从而评价方 法的准确性。
• 加入标准液的体积不得超过血清样品的10%，避免 将血清稀释过度，引起误差的改变或消失
• 加入标准液后，最好使实验标本的被测定浓度达 到医学决定水平。血糖测定的医学决定水平为2.8 、6.7、8.9mmol/L。
• 标本加入标准液后，总浓度必须在方法的分析范 围内，一般须加入高中低不同浓度做回收试验， 计算平均回收率。
评价
加样回收试验
现在一般都用第二种方法，又分两种添加方法：1 添加样品中含量一半的80%、100%和120%，每个两份2 添加样品中含量一半的50%、100%和150%，每个两份。
这两种都可以的计算时添加后测得的含量与原来样品的含量一半之差作分子，添加的含量做分母，并计算这6个结果的RSD，小于3%即可。
关于加样回收率的讨论已有报道［１－３］，虽对加样回收率的两种计算方法均从不同侧面做了较透彻的讨论与选择，但均忽略了原样品（实际样品）中待测组分含量确定的方法及其误差性质对回收率结果可靠性的影响，有必要做进一步的探讨作为补充。
设原样品中待测组分的真实量为Ｘｏ，待测组分纯品标准加入的真实量为Ｙｏ，为统一讨论，我们把Ｙｏ的获得及加入过程也看为一种测量，那么，Ｘｏ、Ｙｏ及其总量的测得量分别为Ｘ、Ｙ和Ｚ，它们的测量误差分别为ＥＸ、ＥＹ和ＥＺ，则目前回收率Ｒ有如下两种计算方法依据测得Ｘｏ的方法不同分以下两种情况讨论。
１成熟方法包括药典法及可靠的文献法。
由于选用的方法成熟可靠，测量误差小，则ＥＸ可忽略，而且Ｙｏ的获得及加入过程一般是可靠的，Ｅｙ亦可忽略，则（１）、（２）式可分别简化为（３）、（４）式：两式中，Ｒ唯一地与测量误差ＥＺ相关，理论上讲，可以用来检验拟订方法的准确度。
２拟订方法同上讨论，Ｅｙ可以忽略，但由于Ｘ０是按拟订方法测得的，故ＥＸ不可盲目忽略，则（１）、（２）式可分别简化为（５）、（６）式：Ｒ并不唯一地与ＥＺ相关，还与测定原样品中Ｘｏ的误差ＥＸ有关，是否可以用来检验拟订方法的准确度需要做进一步的讨论。
测量误差按其性质分为两类：偶然误差和系统误差，系统误差又包括恒定误差和比例误差。
偶然误差可以通过增加试验次数来消除，本文不做更深讨论，而系统误差却会给测定带来固定方向的偏差。
２．１系统误差为恒定误差：此时ＥＸ＝ＥＺ，所以（５）、（６）式可写为（７）、（８）式：即在该情况下，无论拟订方法的误差多大，回收率均为１００％。
加样回收试验
加样回收试验.txt我退化了，到现在我还不会游泳，要知道在我出生之前，我绝对是游的最快的那个回收试验回收试验，英文称作recoverytest，是“对照试验”的一种。
当所分析的试样组分复杂，不完全清楚时，向试样中加入已知量的被测组分，然后进行测定，检查被加入的组分能否定量回收，以判断分析过程是否存在系统误差的方法。
所得结果常用百分数表示，称为“百分回收率”，简称“回收率”。
回收率包括绝对回收率和相对回收率。
绝对回收率考察的是经过样品处理后能用于分析的药物的比例。
因为不论是生物基质还是制剂辅料中的药物，经过样品处理都有一定的损失。
做为一个分析方法，绝对回收率一般要求大于50%才行。
它是在空白基质中定量加入药物，经处理后与标准品的比值。
标准品为流动相直接稀释而来，而不是同样品一样处理。
若一样，只是不加基质来处理，可能会有很多影响因素被此屏蔽掉。
如全部转移有机相时只转移了98%等。
也就因此失去了绝对回收率的考察初衷。
相对回收率严格来说有两种。
一种是回收试验法，一种是加样回收试验法。
前者是在空白基质中加入药品，标准曲线也是同此，这种测定用得较多，但有标准曲线重复测定的嫌疑。
第二种是在已知浓度样品中加入药物，来和标准曲线比，标准曲线也是在基质中加药物。
相对回收率主要考察准确度。
准确度系指用该方法测定的结果与真实值或认可的参考值之间接近的程度。
有时也称真实度。
一定的准确度为定量测定的必要条件，因此涉及到定量测定的检测项目均需要验证准确度，如含量测定、杂质定量试验等。
准确度应在规定的范围内建立，对于制剂一般以回收率试验来进行验证。
试验设计需考虑在规定范围内，制备3个不同浓度的试样，各测定3次，即测定9次，报告已知加入量的回收率（％）或测定结果平均值与真实值之差及其可信限。
1.含量测定原料药可用已知纯度的对照品或符合要求的原料药进行测定，或用本法所得结果与已建立准确度的另一方法测定的结果进行比较。
制剂可用含已知量被测物的各组分混合物进行测定。
《加样回收实验》PPT课件
1OS来估算定量限度。（以定量限度
制备的样品来验证）
非仪器分析：通过分析己知被测
物浓度的样品并确定一个样品中被
测物可被准确和精密测定出的最低
浓度（量）。
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（五）专属性（specificity ） （选择 性）：
指有其他成分（杂质、降解物、辅料 等）可能存在情况下采用的方法能准确测 定出被测物的特性，能反映该方法在有共 存物时对供试物准确而专属的测定能力， 是指该法用于复杂样品分析时是否受到相 互干扰程度的度量。
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通常通过分析含有加了杂质、 降解产物、有关化学物质或安慰剂 成分的样品，将所获分析结果与未 加前述成分之样品的测试结果进行 比较，两组测试结果之差即专属性。
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1．鉴别反应 应能与可能共存的
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2. 中间精密度 同一实验室，
不同时间由不同分析人员用不同设
备所得结果的精密度。
3. 重现性(reproducibility)不
同实验室，不同分析人员测定结果
的精密度。
数据要求：需报告RD，RSD和可
信限。
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（三）检测限（limit of detection，
LOD）
检测限系指试样在确定的实验
第三节 药品质量标准分析方法验证 一、目的
证明所采用的分析方法适合于相 应的检测要求。
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1
二、用途
（一）药品质量标准起草时，分析方法 需经验证。
（二）药物生产方法变更、制剂的组分
变更、原分析方法进行修订时，分析方
法需经验证。
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2
三、需验证的分析项目
加标回收试验
在测定样品得同时,于同一样品得子样中加入一定量得标准物质进行测定,将其测定结果扣除样品得测定值,以计算回收率注意点1.加标物得形态应该与待测物得形态相同2.加标量应与样品中所含待测物得测量精密度控制在相同得范围内,一般情况下作如下规定: 1）加标量尽量与样品中待测物含量相等或相近,并应注意对样品容器得影响2）当样品中待测物含量接近方法检出限时,加标量控制在校准曲线得低浓度范围3）在任何情况下加标量均不得大于待测物含量得３倍4）加标后得测定值不应超过方法得测量上限得90%5）当样品中待测物浓度高于校准曲线得中间浓度时,加标量应控制在待测物浓度得半量空白加标回收:在没有被测物质得空白样品基质中加入定量得标准物质,按样品得处理步骤分析,得到得结果与理论值得比值即为空白加标回收率。
样品加标回收:相同得样品取两份,其中一份加入定量得待测成分标准物质;两份同时按相同得分析步骤分析,加标得一份所得得结果减去未加标一份所得得结果,其差值同加入标准物质得理论值之比即为样品加标回收率。
加标回收率得测定, 就是实验室内经常用以自控得一种质量控制技术、对于它得计算方法, 给定了一个理论公式:加标回收率＝(加标试样测定值－试样测定值)÷加标量×100%.1、1理论公式使用得前提条件文献＆#91;1 &＃93;中对加标回收率得解释就是:“在测定样品得同时, 于同一样品得子样中加入一定量得标准物质进行测定, 将其测定结果扣除样品得测定值, 以计算回收率、"因此,使用理论公式时应当满足以下2 个条件:①同一样品得子样取样体积必须相等; ②各类子样得测定过程必须按相同得操作步骤进行。
1.2理论公式使用得约束条件文献[２＆＃93;中强调指出:加标量不能过大,一般为待测物含量得０、５~ 2、０倍, 且加标后得总含量不应超过方法得测定上限; 加标物得浓度宜较高, 加标物得体积应很小,一般以不超过原始试样体积得1％为好。
《加样回收实验》课件
实验意义二
02
通过加样回收实验，可以发现实验室检测方法中存在的问题和
不足，促进实验室不断完善和改进检测技术。
实验意义三
03
加样回收实验有助于提高实验室的检测水平和质量意识，增强
实验室的竞争力和信誉度。
实验局限性及展望
实验局限性一
实验局ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ性二
加样回收实验需要耗费较多的时间和人力 ，对于大规模的检测任务可能存在一定的 挑战。
加样回收
加样量确定
回收率计算
根据实验目的和要求，确定合适的加 样量。
根据实验结果，计算加样回收率，评 估加样效果。
加入标准品
将已知浓度的标准品加入到样品中， 确保加样均匀。
结果计算
数据记录
详细记录实验过程中的数据，包 括样品处理前后的浓度、加样量
等。
数据处理
根据记录的数据，进行必要的计 算和处理，得出实验结果。
结果分析
对实验结果进行分析，评估加样 回收实验的准确性和可靠性。
04
CATALOGUE
结果分析
数据处理
数据清洗
去除异常值、缺失值和重复数据，确保数据准确 性和可靠性。
数据转换
将数据转换为适合分析的格式，如百分比、比例 等。
数据分组
根据实验目的和要求，将数据分成不同的组或类 别，以便进行比较和分析。
THANKS
感谢观看
结果解读
解读实验结果
根据实验数据和图表，分析实验结果是否符合预期，并解释可能 的原因。
对比分析
将实验结果与相关文献或之前的实验结果进行比较，分析异同点并 解释原因。
推断结论
根据实验结果和对比分析，推断出实验的结论，并指出其适用范围 和局限性。
加标回收试验
在测定样品得同时,于同一样品得子样中加入一定量得标准物质进行测定,将其测定结果扣除样品得测定值,以计算回收率注意点1.加标物得形态应该与待测物得形态相同2.加标量应与样品中所含待测物得测量精密度控制在相同得范围内,一般情况下作如下规定: 1）加标量尽量与样品中待测物含量相等或相近,并应注意对样品容器得影响2）当样品中待测物含量接近方法检出限时,加标量控制在校准曲线得低浓度范围3）在任何情况下加标量均不得大于待测物含量得３倍4）加标后得测定值不应超过方法得测量上限得90%5）当样品中待测物浓度高于校准曲线得中间浓度时,加标量应控制在待测物浓度得半量空白加标回收:在没有被测物质得空白样品基质中加入定量得标准物质,按样品得处理步骤分析,得到得结果与理论值得比值即为空白加标回收率。
样品加标回收:相同得样品取两份,其中一份加入定量得待测成分标准物质;两份同时按相同得分析步骤分析,加标得一份所得得结果减去未加标一份所得得结果,其差值同加入标准物质得理论值之比即为样品加标回收率。
加标回收率得测定, 就是实验室内经常用以自控得一种质量控制技术、对于它得计算方法, 给定了一个理论公式:加标回收率＝(加标试样测定值－试样测定值)÷加标量×100%.1、1理论公式使用得前提条件文献＆#91;1 &＃93;中对加标回收率得解释就是:“在测定样品得同时, 于同一样品得子样中加入一定量得标准物质进行测定, 将其测定结果扣除样品得测定值, 以计算回收率、"因此,使用理论公式时应当满足以下2 个条件:①同一样品得子样取样体积必须相等; ②各类子样得测定过程必须按相同得操作步骤进行。
1.2理论公式使用得约束条件文献[２＆＃93;中强调指出:加标量不能过大,一般为待测物含量得０、５~ 2、０倍, 且加标后得总含量不应超过方法得测定上限; 加标物得浓度宜较高, 加标物得体积应很小,一般以不超过原始试样体积得1％为好。
3.回收试验
操作提醒
• 准确加样在本实验中尤其重要，如果吸量稍不 准确就会很大影响结果。
实验原理
首先用候选方法测定基础样本和回收样本相 应物质的浓度，然后计算回收率。通过回收率 判断该方法比例系统误差的有无或大小，从而 对候选方法的准确性作出可靠评价。
实验器材
微量移液器 吸量管
722型可见光分光光度计
水浴箱
实验试剂
1．正常人混合血清
2．80mmol/L葡萄糖标准液（1.44g无水葡萄糖 +100ml蒸馏水） 3．GOD-POD法测定葡萄糖试剂盒
基础样品及回收样品制备 （实验准备前工作）
基础样品：混合血清0.9ml + 0.1ml蒸馏水 回收样品Ⅰ：混合血清0.9ml+0.01ml 80mmol/L葡萄 糖标准液+0.09ml蒸馏水 回收样品Ⅱ ：混合血清0.9ml+0.09ml 80mmol/L葡萄 糖标准液+0.01ml蒸馏水
学生按下表操作
回收试验
回收
• 回收是指分析方法准确测定加入常规分析样品中的纯 分析物的能力，用于反映分析方法的比例系统误差。
实验误差
恒定系统误差 CE：与干扰物有关 系统误差 SE
实验误差 比例系统误差 PE：与被测物浓度有关 随机误差 RE：是由一些偶然的原因造成的
实验目的
1.掌握回收试验的原理。 2.熟悉实验方法和操作过程。 3.掌握实验数据处理的方法。
计算结果请填入表内：
平均吸光度 测定浓度 加入浓度 回收浓度 回收率
基础样品 回收样品Ⅰ
—
—
—
回收样品Ⅱ 平均回收率
—
—
—
—
回收试验数据处理
1．加入浓度计算： 加入浓度(mmol/L)=加入标准液量ml/(混合血清量ml+标准液量ml)× 标准液浓度（80mmol/L） 2．回收浓度计算： 回收浓度＝回收样品测定浓度－基础样品测定浓度
加样回收试验
现在一般都用第二种方法，又分两种添加方法：1 添加样品中含量一半的80%、100%和120%，每个两份2 添加样品中含量一半的50%、100%和150%，每个两份。
这两种都可以的计算时添加后测得的含量与原来样品的含量一半之差作分子，添加的含量做分母，并计算这6个结果的RSD，小于3%即可。
关于加样回收率的讨论已有报道［１－３］，虽对加样回收率的两种计算方法均从不同侧面做了较透彻的讨论与选择，但均忽略了原样品（实际样品）中待测组分含量确定的方法及其误差性质对回收率结果可靠性的影响，有必要做进一步的探讨作为补充。
设原样品中待测组分的真实量为Ｘｏ，待测组分纯品标准加入的真实量为Ｙｏ，为统一讨论，我们把Ｙｏ的获得及加入过程也看为一种测量，那么，Ｘｏ、Ｙｏ及其总量的测得量分别为Ｘ、Ｙ和Ｚ，它们的测量误差分别为ＥＸ、ＥＹ和ＥＺ，则目前回收率Ｒ有如下两种计算方法依据测得Ｘｏ的方法不同分以下两种情况讨论。
１成熟方法包括药典法及可靠的文献法。
由于选用的方法成熟可靠，测量误差小，则ＥＸ可忽略，而且Ｙｏ的获得及加入过程一般是可靠的，Ｅｙ亦可忽略，则（１）、（２）式可分别简化为（３）、（４）式：两式中，Ｒ唯一地与测量误差ＥＺ相关，理论上讲，可以用来检验拟订方法的准确度。
２拟订方法同上讨论，Ｅｙ可以忽略，但由于Ｘ０是按拟订方法测得的，故ＥＸ不可盲目忽略，则（１）、（２）式可分别简化为（５）、（６）式：Ｒ并不唯一地与ＥＺ相关，还与测定原样品中Ｘｏ的误差ＥＸ有关，是否可以用来检验拟订方法的准确度需要做进一步的讨论。
测量误差按其性质分为两类：偶然误差和系统误差，系统误差又包括恒定误差和比例误差。
偶然误差可以通过增加试验次数来消除，本文不做更深讨论，而系统误差却会给测定带来固定方向的偏差。
２．１系统误差为恒定误差：此时ＥＸ＝ＥＺ，所以（５）、（６）式可写为（７）、（８）式：即在该情况下，无论拟订方法的误差多大，回收率均为１００％。
加样回收试验
回收试验
授课对象：06级检验1-5班课 时：2学时回收试验目 标：1.掌握回收实验的基本原理2.学会衡量检验方法和检测结果的准确度---回收率实验的设计3.归纳总结进行回收实验的注意事项及对检测方法的评价实验用品：（以二乙酰法测BUN 为例）水浴箱（100℃）、721型分光光度计、混合血清、（①②③）、BUN 标准液（100mmol/L 、200 mmol/L 、7.14 mmol/L ）等内 容： 一、原理：在已知浓度的样品中加入一定量的被测物，然后用同样方法测定，测定值与“理论值”（样品浓度和加入浓度之和）之比，乘以100%即为回收率，一般实验方法应在100±5%为合格。
回收实验是测定生化实验方法准确性较好的方法之一，有人认为回收率除鉴定测定方法的优劣处，不可用来纠正测定中的误差，其计算公式如下：100%%⨯=加入浓度回收浓度）回收率（)ml )ml )ml 标准液量（血清量（标准液量（标准液浓度加入浓度+⨯=二、操作步骤（以二乙酰一肟法测尿素氮为例）：1．样本处理：a 混合血清2ml+H 2O0.1ml （R ）b 混合血清2ml+BUN 标（200mmol/L ）0.1ml （R+S 1）c 混合血清2ml+BUN 标（100mmol/L ）0.1ml （R+S 2）2．测定： 1 R+S 2 S B R 血清 0.02 — — — — R+S 1血清 — 0.02 — — — R+S 2血清——0.02——BUN 标准 — — — 0.02 — 蒸馏水 — — — — 0.02 酸性试剂 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 二乙酰一肟 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 混匀，置100℃12min ，取出待冷比色（λ=540nm ），取各管A 值计算。
三、计算：1001.00.21.010014.7A A A %)S ()R )1S R (⨯+⨯⨯-=+（）回收率（四、注意事项：1．加入标准液的体积在整个样品中占比例要少，一般不能超过10%，否则整个样品稀释过大，不能反映原有样品的实际情况。
加标回收试验
在测定样品的同时，于同一样品的子样中加入一定量的标准物质进行测定，将其测定结果扣除样品的测定值，以计算回收率注意点1.加标物的形态应该和待测物的形态相同2.加标量应和样品中所含待测物的测量精密度控制在相同的范围内，一般情况下作如下规定：1）加标量尽量与样品中待测物含量相等或相近，并应注意对样品容器的影响2）当样品中待测物含量接近方法检出限时，加标量控制在校准曲线的低浓度范围3）在任何情况下加标量均不得大于待测物含量的3倍4）加标后的测定值不应超过方法的测量上限的90%5）当样品中待测物浓度高于校准曲线的中间浓度时，加标量应控制在待测物浓度的半量1加标回收率- 有空白加标回收和样品加标回收两种空白加标回收：在没有被测物质的空白样品基质中加入定量的标准物质，按样品的处理步骤分析，得到的结果与理论值的比值即为空白加标回收率。
样品加标回收：相同的样品取两份，其中一份加入定量的待测成分标准物质；两份同时按相同的分析步骤分析，加标的一份所得的结果减去未加标一份所得的结果，其差值同加入标准物质的理论值之比即为样品加标回收率。
加标回收率的测定, 是实验室内经常用以自控的一种质量控制技术. 对于它的计算方法, 给定了一个理论公式：加标回收率= (加标试样测定值－试样测定值)÷加标量×100%.加标回收率- 理论公式的使用条件与不足1.1理论公式使用的前提条件文献[1 ]中对加标回收率的解释是:“在测定样品的同时, 于同一样品的子样中加入一定量的标准物质进行测定, 将其测定结果扣除样品的测定值, 以计算回收率. ”因此,使用理论公式时应当满足以下2 个条件：①同一样品的子样取样体积必须相等; ②各类子样的测定过程必须按相同的操作步骤进行。
1.2理论公式使用的约束条件文献[2 ]中强调指出: 加标量不能过大,一般为待测物含量的0.5～2.0 倍, 且加标后的总含量不应超过方法的测定上限; 加标物的浓度宜较高, 加标物的体积应很小，一般以不超过原始试样体积的1%为好。
回收试验
授课对象：06级检验1-5班 课 时：2学时回收试验目 标：1.掌握回收实验的基本原理2.学会衡量检验方法和检测结果的准确度---回收率实验的设计3.归纳总结进行回收实验的注意事项及对检测方法的评价实验用品：（以二乙酰法测BUN 为例）水浴箱（100℃）、721型分光光度计、混合血清、（①②③）、BUN 标准液（100mmol/L 、200 mmol/L 、7.14 mmol/L ）等 内 容： 一、原理：在已知浓度的样品中加入一定量的被测物，然后用同样方法测定，测定值与“理论值”（样品浓度和加入浓度之和）之比，乘以100%即为回收率，一般实验方法应在100±5%为合格。
回收实验是测定生化实验方法准确性较好的方法之一，有人认为回收率除鉴定测定方法的优劣处，不可用来纠正测定中的误差，其计算公式如下：100%%⨯=加入浓度回收浓度）回收率（)ml )ml )ml 标准液量（血清量（标准液量（标准液浓度加入浓度+⨯=二、操作步骤（以二乙酰一肟法测尿素氮为例）：1．样本处理：a 混合血清2ml+H 2O0.1ml （R ）b 混合血清2ml+BUN 标（200mmol/L ）0.1ml （R+S 1）c 混合血清2ml+BUN 标（100mmol/L ）0.1ml （R+S 2） 2．测定： 12R 血清 0.02 — — — — R+S 1血清—0.02— — —R+S 2血清 — — 0.02 — — BUN 标准 — — — 0.02 — 蒸馏水 — — — — 0.02 酸性试剂 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 二乙酰一肟 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 混匀，置100℃12min ，取出待冷比色（λ=540nm ），取各管A 值计算。
三、计算：1001.00.21.010014.7A A A %)S ()R )1S R (⨯+⨯⨯-=+（）回收率（四、注意事项：1．加入标准液的体积在整个样品中占比例要少，一般不能超过10%，否则整个样品稀释过大，不能反映原有样品的实际情况。
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（六） 线性（Linearity） 在设计的范围内，测试结果与试样
中被测物浓度直接呈正比关系的程度。 线形通常用最小二乘法处理数据求
得回归曲线的斜率（Slope）来表示。数 据要求：至少需要五个浓度考察线形， 需提供相关系数、y截距（是检定的可能 偏差）、回归斜率及方差等参数，应列 出回归方程数和线性图。
标准（偏）差（SD或S）
相对标准（偏）差（RSD），也称 变异系数（CV）
1. 重复性(repeatability):在 相同条件下，由同一个分析人员测定 所得结果的精密度；在规定的范围内， 至少用9次测定结果评价，如制备三 个不同浓度样品各测三次或把被测物 浓度当作100%，至少测6次进行评价。
通常通过分析含有加了杂质、 降解产物、有关化学物质或安慰剂 成分的样品，将所获分析结果与未 加前述成分之样品的测试结果进行 比较，两组测试结果之差即专属性。
1．鉴别反应 应能与可能共存的 物质或结构相似化合物区别，不含 被分析的样品，以及结构相似或组 分中的有关化合物，均应呈负反应。 2．含量测定和杂质测定 色谱法 和其他方法，应附代表性图谱，亦 说明专属性。图中应标明各组份的 位置，色谱法中的分离度应符合要 求。
（四）定量限（1imit of quantitation，LOQ）
指样品中被测物能被定量测定的 最低量，结果应具有一定准确度和精 密度要求。
常用信噪比法确定定量限，一般 以信噪比（S/N）为10∶1时相应的浓 度或注入仪器的量进行确定，也可按 1984年国际纯粹和应用化学联合会 (IVPAC)规定：用仪器所测空白背景响 应标准差（SD）的10倍为估计值，再 经试验确定方法的实际测定下限。
1. 含量测定方法的准确度
原料药可用已知纯度的对照品或 样品进行测定，或用本法所得结果与 已建立准确度的另一方法测定的结果 进行比较。
制剂可用含己知量被测物的各组 分混合物进行测定，即采用在空白辅 料中加入原料药对照品的方法。
如不能得到制剂的全部组分，可 向制剂中加入已知量的被测物进行测 定，或与另一个已建立准确度的方法 比较结果。
第三节 药品质量标准分析方法验证
一、目的
证明所采用的分析方法适合于相 应的检测要求。
二、用途 （一）药品质量标准起草时，分析方法 需经验证。 （二）药物生产方法变更、制剂的组分 变更、原分析方法进行修订时，分析方 法需经验证。
三、需验证的分析项目 1. 鉴别试验； 2. 杂质定量或限度检查； 3. 原料或制剂中有效成分含量测定； 4. 制剂中其它成分（降解产物、防腐
（1）空白值＝0时；①测定背景10次以
上，求出标准差σb。②将σb乘以三倍； ③在工作曲线上求出3σb相对应的浓度 Xb；即为方法的检出值； （2）空白值不等于0；①测定背景10次
以上，求出标准差σb ；②将σb 乘以 三倍；③在工作曲线上求出3 σb 相对 应的浓度Xb ；④将求得的对应浓度值 加上空白值即得该方法的检出限。
仪器分析：通过测定一组空的 样品的背景信号后计算标准差S。以 1OS来估算定量限度。（以定量限度 制备的样品来验证）
非仪器分析：通过分析己知被测 物浓度的样品并确定一个样品中被 测物可被准确和精密测定出的最低 浓度（量）。
（五）专属性（specificity ） （选择 性）：
指有其他成分（杂质、降解物、辅料 等）可能存在情况下采用的方法能准确测 定出被测物的特性，能反映该方法在有共 存物时对供试物准确而专属的测定能力， 是指该法用于复杂样品分析时是否受到相 互干扰程度的度量。
是限度检验效能指标，无需定 量测定，只要指出高于或低于该规 定浓度即可。
1．非仪器分析目视法 用已知浓度的被测物，试验出能
被可靠地检测出的最低浓度或量。
2．信噪比法 用于能显示基线噪音的分析方法
（仪器分析方法），是把已知低浓度 试样测出的信号与空白样品测出的信 号进行比较，算出能被可靠地检测出 的最低浓度或量。一般以信噪比（S/N） 3∶1或2∶1时的相应浓度或注入仪器 的量确定检测限。
2. 中间精密度 同一实验室， 不同时间由不同分析人员用不同设 备所得结果的精密度。
3. 重现性(reproducibility)不 同实验室，不同分析人员测定结果 的精密度。
数据要求：需报告RD，RSD和可 信限。
（三）检测限（limit of detection，
LOD）
检测限系指试样在确定的实验 条件下，被测物能被检测出的最低 浓度或含量。
测定回收率R（recovery）的具体方法 可采用“回收试验法”和“加样回收试验 法”。
回收试验 空白+已知量A的对照品 （或标准品）测定，测定值为M
加样回收试验 已准确测定药物含量 P的真实样品+已知量A的对照品（或 标准品）测定，测定值为M
数据要求
规定的范围内，至少用9次测定结 果评价，如制备高、中、低三个不同 浓度样品各测三次。
（二）精密度（precision） 精 密度是指在规定条件下，同一个均匀 样品，经多次取样测定所得结果之间
的接近程度。用偏差（d）、标准偏差 (SD)、相对标准偏差(RSD)（变异系数， CV）表示。
偏差（d）：测量值与平均值之差
相对偏差＝
允许差：容量分析（中和法、非水滴定 法、银量法、络合滴定法、重氮化法、 氧化还原法）≤0.3%；重量法≤ 0.5%； 氧瓶燃烧法≤ 0.5%；仪器分析≤ 3%、 凯氏定氮法≤ 1%
剂等）的测定； 5. 溶出度、释放度等功能检查中的溶
出量等的测试方法。
四、验证内容
验证内容有：准确度、精密度 （重复性、中间精密度和重现性）、 专属性、检测限、定量限、线性、范 围和耐用性
（一） 准确度（accuracy）
准确度是指用该方法测定的结果与真 实值或参考值接近 收试验衡量。中药回收率一般要求在 95～105%范围内，有些方法操作步骤 繁多时，可要求在90～110%范围内。 RSD一般在2%以内。
2．杂质定量测定的准确度 可向原料药或制剂中加入已知量
杂质进行测定。如果不能得到杂质或 降解产物，可用本法测定结果与另一 成熟的方法进行比较。