实验1 细菌的形态与结构
实验一：细菌基本形态与结构
操作原则：无菌操作（烧灼灭菌）
Aseptic area 10-20cm
外焰 内焰 焰芯
细菌涂片的制备
器具：接种环（上）和接种针（下）
2—5mm
柄约22cm
5—8cm
金属柄约14.5cm
绝缘柄 约7.5cm
安装环(针)的螺口(约8mm)
细菌涂片的制备
菌液采取法
三、实验器材
示教玻片、显微镜、擦镜纸、 香柏油、二甲苯
四、实验步骤
（一）普通光学显微镜 的使用
显微镜的构造 （1）支持部分：镜臂、镜筒、精细调节 （2）放大部分：接目镜、接物镜 （3）照明部分：反光镜、取光器、滤光
镜
（一）普通光学显微镜的使用
1、油镜的使用方法 （1）低倍镜观察 （2）光圈调最大 （3）标本上滴加香柏油0.5-1滴 （4）转换油镜头浸入油滴中
幽门螺杆菌
（三）细菌的特殊结构观察
芽胞示教片：破伤风梭菌。 鞭毛示教片：变形杆菌。 荚膜示教片：肺炎双球菌。
产芽芽孢胞细菌的种类
芽孢 菌体 （营养细胞）
破伤风梭菌×1000
鞭毛
变形杆菌鞭毛×1000
细菌荚膜示意图
荚膜的观察：
负染色
细菌标本染色检查法
细菌染色
活菌染色
死菌染色
（一）普通光学显微镜的使用
2、使用完毕显微镜及标本片的处理 （1）油镜用过后，应立即用擦镜纸
将镜头和玻片擦拭干净 （2）如油渍已干，须用擦镜纸蘸少
许二甲苯溶液拭去油渍，再用干擦镜 纸拭净镜头
油镜的使用与保护
1.原理 2.方法
（二）细菌的三种基本形态
球菌：双球菌、链球菌、葡萄球菌 杆菌：球杆菌、链杆菌、分支杆菌 螺形菌：霍乱弧菌、螺杆菌
实验一细菌形态和结构观察，涂片制作及染色法.pdf
实验一 细菌形态和结构观察，涂片制作及染色法 课程名称：兽医微生物学 实验学时： 2学时一、目的要求1．了解、熟悉油镜的使用和使用原理。
2．掌握细菌抹片的制备及美蓝和革兰氏染色方法。
3．能够识别革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的染色特征。
4．熟悉细菌的基本形态学特征和特殊构造。
二、知识背景细菌个体微小，无色透明，在一般显微镜下不易识别，必须用适当的染料使其着色后，才能看到其形态、排列和结构。
某些细菌因有特殊的染色性，更可借特殊的染色方法加以鉴别。
因此染色技术是细菌鉴定中的基本技术之一。
检查微生物标本，需要使用显微镜。
比较多用的是普通光学显微镜。
根据不同要求，可使用暗视野显微镜、相差显微镜、荧光显微镜和电子显微镜。
前几种显微镜用可见光线或紫外光线作照明光源，它们都属于光学显微镜；电子显微镜则是用电子流代替照明光源，与光学显微镜不同。
［普通光学显微镜的构造和使用］普通光学显微镜（或称生物显微镜）的构造，使用与保护方法，已在《组织学与胚胎学》教材中讲过，这里概述油镜的原理和使用要点：检查细菌标本，多用油镜进行，油镜是一种高倍放大（95-100倍）的物镜，一般都标有放大倍数（如95×；100×等）和特别标记，以便识别。
国产镜多用“油”字表示，国外产品则常用“Oil 或“HI”作记号。
油镜上还常漆有黑环或红环，而且油镜镜身比高倍镜和低倍镜长，镜片最小，这也是识别的另一个标志。
油镜头的晶片细小，进入镜中的光量也较少，其视野比用高倍镜时为暗。
当油镜头和载玻片之间为空气层所隔时，因为空气的折光指数与玻璃的不同，故有一部分光线被折射而不能进入镜头之内，使视野更暗；若在镜头与载玻片之间放上与玻璃的折光指数相似的油类，如香柏油等，使光线不致于因折射而大为损失，则可使视野充分照明，并能使操作者清楚地进行观察和检查（图l ）。
实验室中几种常用物质的折光指数 品名 玻璃 檀香油香柏油 加拿大树胶二甲苯 液体石蜡松节油甘油 水 折光指数 1.52-1.59 1.52 1.51 1.52 1.49 1.48 1.47 1.47 1.33进行油镜检查时，应先对好光线，但不可直对阳光，采取最强亮度（升高集光器，开大光圈，调好反光镜等）。
动物微生物2.1细菌的形态与结构
项目二细菌任务一细菌的形态结构一、细菌的形态结构（一）细菌细胞的形态和排列方式细菌细胞的基本形态有球状、杆状、螺旋状三种（图1-1），分别称为球菌、杆菌和螺旋菌，其中以杆状最为常见，球状次之，螺旋状较为少见。
仅有少数细菌或一些细菌在培养不正常时为其他形状，如丝状、三角形、方形、星形等。
图1-1 细菌的三种基本形态（左为模式图，右为照片）1. 球菌球菌单独存在时，细胞呈球形或近球形。
根据其繁殖时细胞分裂面的方向不同，以及分裂后菌体之间相互粘连的松紧程度和组合状态，可形成若干不同的排列方式（图1-2）。
A B C DE F图1-2 球菌的形态及排列方式（A.单球菌； B.双球菌； C.四联球菌； D.八叠球菌； E.链球菌； F 葡萄球菌）（1）单球菌细胞沿一个平面进行分裂，子细胞分散而独立存在，如尿素微球菌。
（2）双球菌细胞沿一个平面分裂，子细胞成双排列,如褐色固氮菌。
（3）四联球菌细胞按两个互相垂直的平面分裂，子细胞呈田字形排列,如四联微球菌。
（4）八叠球菌细胞按三个互相垂直的平面分裂，子细胞呈立方体排列,如尿素八叠球菌。
（5）链球菌细胞沿一个平面分裂，子细胞成链状排列,如溶血链球菌。
（6）葡萄球菌细胞分裂无定向，子细胞呈葡萄状排列,如金黄色葡萄球菌。
细菌细胞的形态与排列方式在细菌的分类鉴定上具有重要的意义。
但某种细菌的细胞不一定全部都按照特定的排列方式存在，只是特征性的排列方式占优势。
2. 杆菌杆菌细胞呈杆状或圆柱状，形态多样。
不同杆菌其长短、粗细差别较大，有短杆或球杆状（长宽非常接近），如甲烷短杆菌属；有长杆或棒杆状（长宽相差较大），如枯草芽孢杆菌。
不同杆菌的端部形态各异，有的两端钝圆，如腊状芽孢杆菌；有的两端平截，如炭疽芽孢杆菌；有的两端稍尖，如梭菌属；有的一端分支，呈“丫”或叉状，如双歧杆菌属，有的一端有一柄，如柄细菌属。
也有的杆菌稍弯曲而呈月亮状或弧状，如脱硫弧菌属。
杆菌的细胞排列方式有“八”字状、栅状、链状等多种（图1-3）。
细菌的形态和结构
无效
细胞壁的关系
细胞壁对酒精的通透性 细胞壁的化学组成不同
内毒素为阴性菌细胞壁成分 作用部位为肽聚糖 五肽交联桥 作用部位为肽聚糖 聚糖骨架
功能
1.维持细菌细胞固有外形。
2.和细菌细胞膜共同完成物质的交换。
3.细胞壁上的多种抗原决定簇、决定了抗原 性。
细菌细胞壁缺陷型（细菌L型）
细菌细胞壁缺陷型（细菌L型）
细菌细胞壁的肽聚糖结构受到理化或生物 因素的直接破坏或合成被抑制后，这种细 胞壁受损的细菌一般在普通环境下不能耐 受菌体内的高渗透压而将会胀裂死亡，但 在高渗环境下，它们仍可和存活。这种细 胞壁受损的细菌能够生长和分裂者称为细 菌细胞壁缺陷型（细菌L型）
细菌L型
返回
形态：多形态性, G培养：须在高渗低琼脂含血清的培 养基中生长，多呈油煎蛋状菌落 对作用于细胞壁的抗生素无效 常规细菌培养阴性 细菌L型仍有一定的致病能力
≥0.2μm荚膜，＜ 0.2μm 微荚膜
化学组成：多糖/多肽
形成条件：营养丰富
染色：不易着色，负染（墨汁）
Structure of G+
Wall teichoic acid
(LTA)
革兰阴性菌
外膜（outer membrane）
– 脂蛋白
LIPID BILAYER
– 脂质双层
– 脂多糖LPS
脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）
（1）脂质（类）A（lipid A） 为一种糖磷脂，由D-氨基葡萄糖双糖 组成的基本骨架，不同细菌骨架一致。 内毒素毒性与生物学活性成分 无种属特异性
临床分离葡萄球菌L型
葡萄球菌L型回复后
细胞膜（cell membrane）
第一章 细菌的形态与结构
芽胞的作用
①芽胞的大小、形状和在菌体内的位 置随菌种而不同，在细菌鉴别上有 一定意义。 ②当进行消毒灭菌时往往以芽胞是否 被杀死作为判断灭菌效果的指标。
第三节 细菌形态与结构 检查法
一、显微镜放大法
第九章 细菌的形态与结构
细菌(bacterium)是一类具有细 胞壁的单细胞型微生物，在分类学 上属于原核细胞型微生物。
第一节 细菌的大小和形态
一、细菌的大小
细菌个体微小，通常以微米（μｍ） 作为测量其大小的单位。 一般大多数球菌直径在1μｍ左右； 杆菌长1～5μｍ，宽0.3～1μｍ。
二、细菌的形态
细胞壁位于细菌细胞最外层， 包绕在细胞膜的周围，是一层质地 坚韧而有弹性的膜状结构。
1.革兰阳性菌细胞壁
G+菌细胞壁主要由肽聚糖和穿 插于其内的磷壁酸组成。
(1)肽聚糖（peptidoglycan）
G+菌肽聚糖由聚糖骨架、四肽 侧链和五肽交联桥三部分组成，这 三种成分形成坚固致密的三维立体 结构 。
荚膜的作用
①抵抗宿主吞噬细胞的吞噬和消化 作用，并具有抗有害物质对细菌 的损伤作用； ②抗干燥作用； ③黏附作用； ④具有抗原性，可帮助鉴别细菌以 及作为细菌分型的依据。
（二）鞭毛 （flagellum）
鞭毛是弧菌、螺菌、许多杆菌 及少数球菌在菌体上附有的细长并 呈波状弯曲的丝状物。
鞭毛的作用
细胞质中常含有多种颗粒，多 数为细菌储备的营养物质，如多糖、 脂类、多磷酸盐等。
异染颗粒(metachromatic granules
有些细菌胞质中含有由RNA和偏 磷酸盐组成的胞质颗粒，称为迂回体 (volutin) ，又称为异染颗粒 异染颗粒可作为鉴别细菌的依据， 如白喉棒状杆菌的异染颗粒。
实验一细菌的形态结构观察
实验一细菌的形态结构观察引言：细菌属于原核生物，是一类非常小的微生物，其形态结构一直是微生物学领域的重要研究内容。
通过观察细菌的形态结构，可以了解其生物学特性，甚至为细菌的分类和鉴定提供辅助依据。
本实验旨在通过显微镜观察、绘制不同种类细菌的形态特征，并对其进行描述和分析。
材料和方法：1.细菌样本：从环境中采集的细菌样本，使用无菌技术制备细菌涂片；2.显微镜：高性能光学显微镜；3.其他实验工具：无菌培养皿、无菌移液器、无菌盖玻片、无菌镊子等。
实验步骤：1.细菌准备：在无菌实验台上，取一块无菌盖玻片，用无菌镊子取一小滴待观察的细菌悬浮液在盖玻片上；2.细菌涂片制备：将另一块无菌盖玻片，倾斜放在含细菌悬浮液的盖玻片上，使两个盖玻片接触并自然扩散，制备细菌涂片；3.固定细菌：将细菌涂片在微火上加热，使细菌固定在玻片上；4.染色：将固定的细菌涂片浸入甲醇中进行固定，并在甲醇中静置3-5分钟；5.除染：将固定染色的细菌涂片置于水龙头下轻轻冲洗，冲洗到水清澈；6.贴片：将染好的细菌涂片倒置在无菌盖玻片上，用手指轻轻压实；7.观察：将贴好的细菌涂片放在显微镜下，逐个观察细菌的形态结构；8.绘制：选取有代表性的细菌形态，在实验记录本中进行绘制和注释。
结果和讨论：通过以上实验步骤，我们观察到了不同细菌的形态结构，如以下几个典型细菌的形态特征描述。
1. 球菌（cocci）：球形或近球形的单细胞菌，如葡萄球菌（Staphylococcus aureus）。
形态特征：球形，直径约0.5-1微米，聚集在一起呈葡萄状、串珠状。
2. 杆菌（bacilli）：长形的单细胞菌，如大肠杆菌（Escherichia coli）。
形态特征：长棍状，直径约0.5-1微米，长度约2-6微米。
3. 弯曲菌（spirilla）：弯曲或螺旋形的细胞，如鲍曼不动杆菌（Vibrio cholerae）。
形态特征：螺旋形，直径约0.5-1微米，长度约2-6微米。
第一节 细菌的形态和结构
第一篇微生物的基本知识第一章细菌第一节细菌的形态和结构细菌是一类具有细胞壁的单细胞原核型微生物。
细菌在一定的环境条件下具有相对恒定的形态结构和生理生化特性，了解这些特性，对于细菌的分类鉴定、疾病的诊断、细菌的致病性与抗原性的研究，均有重要意义。
一、细菌的形态(一)细菌的大小细菌的个体微小，须用显微镜放大数百倍乃至数千倍才能看到。
通常使用显微测微尺来测量细菌的大小，以微米（μm）作为测量单位。
不同种类的细菌，大小很不一致，即使是同一种细菌在不同的生长繁殖阶段其大小也可能差别很大。
一般球菌的直径约为0.8～1.2μm；杆菌长1～10μm，宽0.2～1.0μm；螺旋菌长1～50μm，宽0.2～1.0μm。
细菌的大小，是以生长在适宜的温度和培养基中的青壮龄培养物（指对数期）为标准。
在一定条件下，各种细菌的大小是相对稳定的，而且具有明显特征，可以作为鉴定细菌的依据之一。
同种细菌在不同的生长环境（如动物体内、外）、不同的培养条件下，其大小会有所变化，测量时的制片方法、染色方法及使用的显微镜不同也会对测量结果产生一定影响，因此，测定细菌大小时，各种条件和技术操作等均应一致。
(二)细菌的基本形态和排列细菌的基本形态有球状、杆状和螺旋状三种，并据此将细菌分为球菌(图1-1，图1-2)、杆菌(图1-3，图1-4)和螺旋菌（图1-7)三种。
细菌的繁殖方式是简单的二分裂，不同细菌分裂后其菌体排列方式不同，有些细菌分裂后单个存在，有些细菌分裂后彼此仍通过原浆带相连，形成一定的排列方式。
1．球菌菌体呈球形或近似球形。
根据球菌分裂的方向和分裂后的排列状况将其分为：双球菌沿一个平面分裂，分裂后两两相连，其接触面扁平或凹入,菌体有时呈肾形，如脑膜炎双球菌；有时呈矛头状，如肺炎双球菌。
链球菌沿一个平面分裂，分裂后三个以上的菌体呈短链或长链排列，如猪链球菌。
葡萄球菌沿多个不同方向的平面分裂，分裂后排列不规则，似一串葡萄，如金黄色葡萄球菌。
细菌的形态和结构
二、细菌的特殊结构
鞭毛的功能： 1. 运动器官； 2. 与致病性有关：如霍乱弧菌穿过小肠黏液层； 3. 细菌的分类鉴定：具有抗原性，H抗原。
二、细菌的特殊结构
三、菌毛 pilus
1. 菌体表面短、细、直硬的丝状物，光学显微镜下 看不到。多见于G－菌，与运动无关。2. 化学组成：菌毛蛋白
1. 无完整的核结构、核膜、核仁和有丝分裂器等。 2. 单一闭合环状DNA，含少量蛋白质。 3. 特点：DNA量少，多为单拷贝形式，少重复序列。
二、细菌的特殊结构
一、荚膜 capsule
细胞壁外的一层较厚、黏性、胶冻样物质 ≥0.2 μm 荚膜
<0.2 μm 微荚膜 化学组成：多数为多糖，少数是多肽 形成条件：营养丰富（活体内，含血清培养基） 染色：不易着色
其中含有的一些结构：
1. 核糖体ribosome：70S（30S + 50S）
2. 质粒plasmid：染色体外的遗传物质，闭合环状DNA（以后讲）
3. 胞质颗粒：储存营养物质（如白喉杆菌的异染颗粒）
异染颗粒
质粒（EM照片）
一、细菌的基本结构
四、核质nuclear material或拟核nucleoid
第一章 细菌的形态与结构
第一节 细菌的大小与形态
一、大小
以微米(m)为测量单位，使用光镜观察。
二、形态：细菌按其外形分三类
球菌(coccus)：双球菌、链球菌、葡萄球菌、四联球菌、 八叠球菌；
杆菌(bacillus)：如大肠杆菌、炭疽杆菌、白喉杆菌等；
螺形菌(spiral bacterium)：弧菌（霍乱弧菌）、 螺菌（幽门螺杆菌）
保存全部生命必需物质：核酸、酶、合成菌体组分的结构 可发芽成繁殖体：1个细菌→1个芽胞→1个细菌 特点：壁厚，折光性强，不易着色。
细菌与真菌学实验
细菌与真菌学实验细菌与真菌学实验实验⼀细菌形态结构观察【⽬的】1、了解细菌的基本形态和特殊结构观察法2、明确细菌特殊结构在医疗实践中的意义3、细菌不染⾊标本的观察⽅法4、观察活细菌的形态及运动情况【材料】⾰兰染⾊标本⽚：1、球菌：葡萄球菌、链球菌、脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌。
2、杆菌：伤寒沙门菌、⼤肠埃希菌、炭疽芽胞杆菌、枯草芽胞杆菌。
3、螺形菌：霍乱弧菌或⽔弧菌。
细菌特殊结构标本⽚：1、鞭⽑:变形杆菌、霍乱弧菌2、荚膜:肺炎链球菌、产⽓荚膜杆菌3、芽孢：破伤风杆菌、炭疽杆菌细菌动⼒观察材料：1、菌种：普通变形杆菌、表⽪葡萄球菌。
2、变形杆菌和表⽪葡萄球菌8～12min⾁汤培养物。
3、其他：凹玻⽚、盖玻⽚、凡⼠林、⽛签、接种环、酒精灯、⾹柏油、⼆甲苯、擦镜纸⼀细菌形态结果观察1、使⽤油镜观察上述⾰兰染⾊标本⽚：认识细菌的三种基本形态。
注意观察各菌的形态、⼤⼩、排列⽅式及染⾊性等特点。
2、使⽤油镜观察细菌的特殊结构标本⽚：（1）荚膜：肺炎链球菌经⾰兰染⾊后，呈⽭头状成双排列，菌体四周有不着⾊的透明圈（既荚膜）；肺炎链球菌与产⽓荚膜杆菌的荚膜（荚膜染⾊法），注意观察菌体及荚膜的颜⾊及两者的形态特点。
（2）鞭⽑：变形杆菌与霍乱弧菌的鞭⽑（鞭⽑染⾊法），注意观察菌体和鞭⽑的颜⾊、鞭⽑的长短、数⽬及在菌体上的位置。
（3）芽胞：破伤风梭菌及炭疽杆菌芽胞（芽胞染⾊法），注意观察菌体、芽孢的形态、颜⾊及芽孢在菌体中的位置。
⼆、细菌不染⾊标本观察法（动⼒观察法）1、悬滴法图2－1－1（1）取⼀张洁净盖玻⽚，⽤⽛签涂少许凡⼠林于盖玻⽚的四个⾓处。
（2）⽤接种环取3～4环普通变形杆菌或表⽪葡萄球菌液体培养物于盖玻⽚中央。
（3）把凹玻⽚凹⾯朝下盖在盖玻⽚上，使凹窝中央正对菌液（见图2－1－1）。
（4）迅速翻转凹玻⽚，使粘附在凹玻⽚上的盖玻⽚朝上。
（5）先⽤低倍镜观察，再换⾼倍镜观察。
图2－1－1悬滴法普通变形杆菌有鞭⽑，运动活泼，可向不同⽅向迅速运动。
微生物学实验
微生物学实验
实验一 细菌的形态和结构观察
观察细菌的菌落特征 掌握简单染色法和细菌涂片方法 在油镜下观察细菌个体的形态特征
【一】实验目的
【二】实验的差不多 原理 形态观察要紧包括群体的形态和个体的形态观察。
细菌的差不多形态要紧分为球菌、杆菌、螺旋菌三大类，近年 还发现星状和四方形细菌等。细菌形态受培养时间、培养基成 分、浓度、培养温度、培养时间等发生变化。
【四】实验步骤
思
对各种来源的样品进行对比，如平板菌落数和菌落类型等？ 饭前为何要洗手？ 如何防止培养物的污染与防止细菌的扩散方面？
考
题
实验四 培养基的配制与灭菌
1.熟悉玻璃器皿的洗涤和灭菌前的准备。 2.掌握培养基和无菌水的制备方法。
3.掌握高压蒸气灭菌技术。
【一】实验目的
【二】实验的差不多
3.观察标本时，必须依次用低、中、高倍镜，最后用油镜。
当目视接目镜时，特别在使用油镜时，切不可使用粗调节
器，以免压碎玻片或损伤镜面。
4.观察
时，两眼睁开，养成两眼能够轮换观察的适应，以免眼睛
疲劳，同时能够在左眼观察时，右眼注视绘图。
细菌的形态与结构
异染现象
白喉棒状杆菌 Albert染色
白喉棒状杆菌 Neisser染色
（四）核质
概念：是原核生物特有的无核膜，无固定形 态的原始细胞核。 作用：决定细 菌的遗传性状。
二、细菌的特殊结构
（一）荚膜 (capsule)
1、概念： 某些细菌合成并分泌至细胞外的 一层粘液样物质；普通染色不易着色 2、种类：荚膜、微荚膜、粘液层 3、化学组成：主要成分为水（95%+）
直径或宽×长度（m） 0.5-1 0.6-1 0.8-1 4-4.5 7-8
0.5 x 1 - 3 0.5 – 1 x 1 - 3 0.6 - 0.7 x 2 - 3 0.6 - 0.9 x 1.5 - 6 0.8 -1.2 x 1.2 - 3 1 - 1.5 x 4 - 8 0.2 x 0.7 - 0.7 0.4 - 0.7 x 2.8 - 7 0.3 - 0.6 x 1 - 3 1.5 – 2 × 10 - 20
2.组份：蛋白质
3.种类与功能： （1）普通菌毛：
多，短而细；黏 附，致病。
3.种类与功能： （1）普通菌毛：
多，短而细；黏 附，致病。 （2）性菌毛：少， 粗、长、中空； 传递质粒。
细菌通过性菌毛的接合过程
（四）芽胞 (spore)
1. 概念：某些细菌在特定环境中，细胞质脱 水浓缩，在菌体内形成的一个通透性很低 的圆形或者卵圆形小体
（2）磷壁酸（G+特有）
壁磷壁酸（与肽聚糖的N-乙酰胞壁酸共价连接） 膜磷壁酸（与细胞膜外层糖脂共价连接）
细胞壁结合蛋白
壁磷壁酸
膜磷壁酸
肽聚糖
细胞膜
2、革兰阴性菌的细胞壁
肽聚糖层较薄，除肽聚糖层外还有外膜
细菌的形态和与结构~
第一章细菌的形态与结构细菌的概述：细菌是属于原核细胞型微生物，这是一类形体微小、结构简单，具有细胞壁和原始核质，没有核仁和核膜，除了核糖体没有其他细胞器。
对细菌进行认识，是从它的大小、形态将细菌进行分门别类以及将细菌进行解剖后，看看它是由哪些微小的结构组成的，也就是细菌的基本结构和特殊结构。
第一部分细菌的大小长度单位：微米。
对细菌进行描述选择出一个适当的单位是非常重要的，细菌可以在光学显微镜下观察到，大小可以用测微尺在显微镜下进行测量。
光学显微镜可观察到0.2微米以上的，所以再次强调细菌的测量单位是微米。
细菌的长短不同对于细菌的鉴别是很有帮助的。
第二部分细菌的形态一、球菌：我们根据细菌的外形，单个菌体呈球形或者是近似球形；二、杆菌：单个细菌呈杆状、菌体长而且直的；三、螺形菌：如果菌体呈波状、或不规则的锯齿状。
这是根据菌体形态上的特点差异将全部细菌分为这三类。
一、球菌细菌的增殖是通过无性繁殖，自身复制遗传物质，然后又进行自身的裂解，这样生成的是一个和母体一模一样的子代体。
根据细菌进行繁殖时选择的平面不同和分裂后菌体之间相互粘附的程度不同，又可以将球菌进行细分：1、单球菌：细菌分裂沿一个平面进行，新个体分散而单独存在，例如尿微球菌。
2、双球菌：指细菌沿一个平面分裂，分裂后两个菌体成对排列，例如脑膜炎奈瑟军、肺炎链球菌。
3、链球菌：是指细胞沿一个平面进行分裂，分裂后多个菌体粘连成链状，例如乙型溶血性链球菌。
4、四联球菌是指细胞分裂是沿两个相垂直的平面进行，分裂后四个菌体粘附在一起呈正方形，例如四联加夫基菌。
5、八叠球菌是指细菌在三个相互垂直的平面上分裂，分裂后八个菌体粘附成包裹状立方体，例如如藤黄八叠球菌。
6、葡萄球菌是指细菌在多个不规则的平面上分裂，分裂后菌体无一定规则的黏连在一起似葡萄状，如金黄色葡萄球菌。
说明：我们说细菌属于球菌是说单个细菌的形态特点，单个细菌近似球形就说是球菌范围的，两个粘附在一个就是双球菌，粘附称一串就是链球菌，四个在一起近似正方形就是四联球菌，八个包裹在一起呈立方体是八叠球菌，在临床是最常见的是排列不规则的葡萄球菌，是最常见的化脓性球菌，医院交叉感染的来源。
1-1细菌的形态和结构
第1章 细菌的形态与结构
第一节 细菌的大小与形态 第二节 细菌的结构 第三节 细菌形态与结构检查法
细菌 (bacterium)
属于单细胞原核生物型微生物（prokaryotes ）
广义的细菌：泛指各类的原核细胞型微生物，包 括细菌、放线菌、支原体、衣原体、立克次体、 螺旋体。 狭义的细菌：细菌
较坚韧
厚度
20-80nm
肽聚糖层数 可多达50层
革兰阴性菌 较疏松 10-15nm 1-3层
肽聚糖含量 占细胞壁干重50%-80% 占细胞壁干重5%-20%
磷壁酸
+
—
外膜
—
+
4.细胞壁的功能
维持菌体固有的形态 保护细菌抵抗低渗环境 参与菌体内外的物质交换 与细菌的黏附致病有关 菌体表面带有多种抗原决定簇，决定 了菌体的抗原性
2. 性菌毛(sex pilus)
仅见于少数革兰阴性菌。 数量少，1-4根。 比普通菌毛长而粗，中空呈管状。 性菌毛由致育因子（F）质粒编码，故又称F菌毛。 带有性菌毛的细菌为F+菌，无菌毛的为F-菌 功能： F+菌内的质粒或DNA可通过性菌毛进入F-菌体内，
称接合。
特殊结构
（四）芽胞 (spore)
细菌的特点
形体微小，结构简单 具有原始核质，但无核膜和核仁。遗传 物质为RNA和DNA 细胞器不完整，只有核糖体 繁殖迅速，二分裂方式繁殖
第一节 细菌的大小和形态
细菌的大小：以微米(μm)为单位，最常用 光学显微镜观察。
球菌 (球状) 细菌按其外形分，主要有 杆菌 (杆状)
螺形菌 (螺旋状)
球菌 (coccus)
许多细菌（所有的弧菌和螺菌，约半数的杆菌 和个别的球菌）在菌体上附有细长并呈波状弯 曲的丝状物，称为鞭毛，是细菌的运动器官。
实验一显微镜的使用、细菌形态和结构观察与革兰氏染色法
实验一显微镜的使用、细菌形态和结构观察与革兰氏染色法一、显微镜的使用普通光学显微镜是一种精密的光学仪器。
以往最简单的显微镜仅由几块透镜组成，而当前使用的显微镜由一套透镜组成。
普通光学显微镜通常能将物体放大1500—2000倍。
（一）显微镜的构造普通光学显微镜的构造可分为两大部分：一为机械装置，一为光学系统，这两部分很好的配合，才能发挥显微镜的作用。
1、显微镜的机械装置显微镜的机械装置包括镜座、镜筒、物镜转换器、载物台、推动器、粗动螺旋、微动螺旋等部件（1）镜座镜座是显微镜的基本支架，它由底座和镜臂两部分组成。
在它上面连接有载物台和镜筒，它是用来安装光学放大系统部件的基础。
（2）镜筒镜筒上接接目镜，下接转换器，形成接目镜与接物镜（装在转换器下）间的暗室。
从物镜的后缘到镜筒尾端的距离称为机械筒长。
因为物镜的放大率是对一定的镜筒长度而言的。
镜筒长度的变化，不仅放大倍率随之变化，而且成像质量也受到影响。
因此，使用显微镜时，不能任意改变镜筒长度。
国际上将显微镜的标准筒长定为160mm，此数字标在物镜的外壳上。
（3）物镜转换器物镜转换器上可安装3—4个接物镜，一般是三个接物镜（低倍、高倍、油镜）。
Nikon显微镜装有四个物镜。
转动转换器，可以按需要将其中的任何一个接物镜和镜筒接通，与镜筒上面的接目镜构成一个放大系统。
（4）载物台载物台中央有一孔，为光线通路。
在台上装有弹簧标本夹和推动器，其作用为固定或移动标本的位置，使得镜检对象恰好位于视野中心。
（5）推动器是移动标本的机械装置，它是由一横一纵两个推进齿轴的金属架构成的，好的显微镜在纵横架杆上刻有刻度标尺，构成很精密的平面座标系。
如果我们须重复观察已检查标本的某一部分，在第一次检查时，可记下纵横标尺的数值，以后按数值移动推动器，就可以找到原来标本的位置。
（6）粗动螺旋粗动螺旋是移动镜筒调节接物镜和标本间距离的机件，老式显微镜粗螺旋向前扭，镜头下降接近标本。
新近出产的显微镜（如Nikon显微镜）镜检时，右手向前扭载物台上升，让标本接近物镜，反之则下降，标本脱离物镜。
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4.
如在实验过程中发生有菌材料溅出、污染环境或化学药品
灼伤等意外情况，应立即报告老师，以便及时处理。
5. 爱护仪器设备，不经老师批准，不准自行接通、断开电
源或拆卸仪器。对仪器设备造成人为损坏的，要酌情赔 偿。实验结束后，仪器设备状态复原。 6. 实验结束后，清洁台面、所有循环使用器材复原；安排 值日生打扫卫生；检查水、电、门、窗等设施，并经实 验室负责人检查认可。
功能：帮助细菌在液体环境中自由运动
细菌的特殊结构
芽孢：
定义：某些细菌在一定条件下，能在菌体内形成一个
圆形或卵圆形的小体，是细菌为适应恶劣环境，维持 生存而处于代谢相对静止的特殊结构。
液体培养基：
表面生长
均匀混浊生长
沉淀生长
固体培养基：
半固体培养基：
无动力
有动力
革兰染色
由丹麦细菌学家革兰1884年发明而得名
单染色
染色 标本
复染色
特殊染色
鞭毛、芽孢、荚膜
细菌的基本形态
Cocci Bacilli Spiral bacteria
细菌的特殊结构
荚膜：
定义：某些细菌在其细胞壁外包绕的一层黏液
性物质，为多糖或蛋白质的多聚体。 功能：抗吞噬、黏附、抗有害物质损伤
细菌的特殊结构
鞭毛：
分类：单鞭毛、双鞭毛、丛鞭毛、周鞭毛
细菌分离培养方法——平板划线法
（混合菌液） I
1/10
Flame loop Rotate 90
II
1/5
Flame loop Rotate 90 Rotate 90
III
1/4
IV
细菌代谢产物检查方法——IMViC试验接种
（大肠埃希菌、产气肠杆菌）
材料： 葡萄糖蛋白胨水（4支） 蛋白胨水（2支） 枸橼酸盐斜面（2支） VP test Citrate test Indole test Methyl red (MR) test
大肠杆菌 蛋白胨水
产气杆菌 蛋白胨水
葡萄糖蛋白胨水 葡萄糖蛋白胨水 葡萄糖蛋白胨水 葡萄糖蛋白胨水 枸橼酸盐斜面 枸橼酸盐斜面
纯种接种
液体接种
斜面接种
The end
实验一
细菌的形态及培养
病原生物学实验室守则
1.
学生进实验室应穿好白大衣；与实验无关物品不准带入实
验室，所有实验材料严禁带出实验室。
2. 3.
实验室内禁止吸烟及饮食。 严格操作规程，杜绝生物安全事故。污染标本及使用过的 有菌器材放于指定的消毒缸内，统一进行消毒处理。需要 培养的物品做好标记，放于指定培养箱内。
用肥皂或消毒液洗手、脱隔离衣后方可离开实验室。
本次实验内容
内容一 细菌形态学 1. 细菌基本形态及特殊结构（示教） 2. 革兰染色（操作）
内容 二 细菌的培养
1. 细菌的生长现象（示教） 2. 细菌的分离培养（操作） 3. 细菌的纯种接种（操作）
细菌的形态学观察
动力观察
不染色 标本
革兰染色、抗酸染色、albert 染色
原理：
尚为完全阐明，但与细胞壁结构密切相关。 等电点学说、通透性学说、化学学说
革兰染色（Gram stain)
步骤：
意义：
鉴别细菌 选择抗菌药物 研究细菌致病性
涂片
干燥 结晶紫1分钟
5%酒精脱色
水洗
稀释石炭酸复红30秒
水洗
干燥
油镜观察
革兰染色结果
油镜下模式图 ×1000