丙酮酸的测定方法
丙酮酸(pyruvic acid PA)含量测定试剂盒说明书
货号：QS2204 规格：50管/48样丙酮酸（pyruvic acid PA）含量测定试剂盒说明书
可见分光光度法
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
丙酮酸通过乙酰CoA连接葡萄糖、脂肪酸和氨基酸三大代谢，起着重要的枢纽作用。
测定原理：
丙酮酸与2,4-二硝基苯肼作用，生成丙酮酸-2,4-二硝基苯腙，在碱性溶液中呈色。
自备实验用品及仪器：
可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿、研钵、冰、蒸馏水。
试剂的组成和配制：
提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存；
试剂一：液体5mL×1瓶，4℃避光保存；
试剂二：液体25mL×1瓶，4℃保存。
丙酮酸提取：
1、细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次），静置30min， 8000g，25℃离心10min，取上清待测。
2、组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆，静置30min，8000g，25℃离心10min，取上清待测。
3、血清（浆）样品：按照血清（浆）体积（mL）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议取0.1mL血清（浆）加入1mL提取液），进行冰浴匀浆，静置30min， 8000g，25℃离心10min，取上清待测。
丙酮酸激酶检测试剂盒测定原理
丙酮酸激酶检测试剂盒测定原理
具体的测定步骤如下：
1.样品准备：将待测样品（如血浆、血清、脑脊液等）收集到试管中。
2.加入试剂：向样品中加入适量的试剂盒中所提供的反应液，包括缓
冲液、辅酶、底物和酶测定物等。
3.反应催化：通过加入反应液，使丙酮酸与辅酶协同催化下，生成丙
酮酸脱氢酶并伴随着NADH的氧化，生成乳酸和NAD+。
反应方程式：
丙酮酸+NADH+H+->乳酸+NAD+
4.光度计测定：利用光度计测定在反应中，NADH的浓度的变化，NADH的浓度的变化可通过测量吸光度来表示。
在反应开始时，NADH的浓度较高，吸光度也较高，而反应过程中，
随着NADH的消耗，其浓度下降，吸光度也逐渐减小。
5.数据分析：将吸光度与时间建立标准曲线，通过与标准曲线进行比对，可以确定样品中丙酮酸激酶的活性。
注意事项：
1.实验过程需要在恒温条件下进行，以保证反应的稳定性。
2.标本的处理过程需要避光，以免光敏化反应的发生。
3.实验中要注意纯化试剂的选择，以减少因杂质引起的误差。
4.测试前要进行仪器的校准，确保测试结果的准确性。
总结：
丙酮酸激酶检测原理主要是通过测定丙酮酸脱氢酶催化下的丙酮酸形成乳酸的速率，间接反映出丙酮酸激酶的活性。这种检测方法非常重要，可以帮助医生评估患者的病情和治疗效果，对提高脑卒中的诊断和治疗水平具有重要意义。
丙酮酸耐量实验原理
丙酮酸耐量实验原理
一、引言
丙酮酸是一种有机化合物，化学式为C3H6O2，常见于生物体内，例如酒精代谢过程中产生的乙醛可以进一步氧化生成丙酮酸。丙酮酸在生物化学、有机化学和药物化学等领域具有广泛的应用和研究价值。为了更全面了解丙酮酸的性质和特性，科学家们开展了丙酮酸耐量实验，以便对其耐受性进行评估和分析。
二、实验原理
丙酮酸耐量实验的原理是通过测定不同浓度的丙酮酸溶液对生物体生长、代谢和存活的影响，从而评估丙酮酸的耐受性。实验中通常使用细胞培养技术或动物模型进行研究。
1. 细胞培养实验
细胞培养实验是一种常用的评估丙酮酸耐受性的方法。在实验中，科学家将不同浓度的丙酮酸溶液加入细胞培养基中，然后培养细胞一段时间。通过观察细胞形态、生长速度和存活率的变化，可以得出不同浓度丙酮酸对细胞的影响程度。通常会使用细胞存活率、细胞增殖率和细胞凋亡率等指标来评估丙酮酸的耐受性。
2. 动物模型实验
动物模型实验是另一种评估丙酮酸耐受性的常用方法。科学家通常选择小鼠或大鼠作为实验对象，将不同浓度的丙酮酸溶液注射或灌
胃给动物，然后观察动物的行为、生理指标和组织病理学变化等。通过对动物的观察和数据分析，可以评估丙酮酸对动物的影响程度，进而判断其耐受性。
三、实验步骤
丙酮酸耐量实验的步骤根据实验目的和实验对象的不同而有所差异。以下以细胞培养实验为例，介绍一般的实验步骤。
1. 细胞培养准备
准备细胞培养所需的培养基、培养皿和细胞悬液。将培养基倒入培养皿中，加入适量的细胞悬液。
2. 丙酮酸处理
将适量的丙酮酸溶液加入培养基中，使得最终丙酮酸的浓度符合实验要求。通常会设置不同浓度的丙酮酸处理组和对照组。
检测丙酮酸的存在方法有
检测丙酮酸的存在方法有
丙酮酸（Acetone）是一种重要的有机溶剂和中间体化合物，在化学、医药、化妆品等多个领域具有广泛的应用。下面将介绍一些用于检测丙酮酸存在的方法。
1. 火焰光度法（Flame Photometry）：火焰光度法是一种常用的检测丙酮酸存在的方法。该方法基于丙酮酸在火焰中释放金属离子的特性。将样品通过火焰燃烧，然后使用光度计测量火焰中金属离子的发射光谱，根据发射光信号的强度进行分析和测定。
2. 气相色谱法（Gas Chromatography, GC）：气相色谱法是一种高效、灵敏的分析方法，可以用于检测丙酮酸的存在。该方法将待测样品中的丙酮酸通过气相色谱柱分离，并通过检测器检测产生的色谱峰来进行定性和定量分析。
3. 液相色谱法（Liquid Chromatography, LC）：液相色谱法是一种广泛应用于生化分析中的方法，也可以用于检测丙酮酸的存在。通常采用高效液相色谱（High Performance Liquid Chromatography, HPLC）分析仪器，通过样品与流动相之间的相互作用（如吸附、分配、亲和等）来实现分离和检测。
4. 分光光度法（Spectrophotometry）：分光光度法是一种常用的定量分析方法，也适用于丙酮酸的检测。此方法基于化合物与特定试剂反应后在特定波长范围内吸收或散射光线，利用分光光度计测量吸光度或透射率，并根据标准曲线确定丙酮酸的浓度。
5. Raman光谱法：Raman光谱法是一种非破坏性的分析技术，可以用于无需前处理的丙酮酸检测。根据样品中分子键振动产生的拉曼散射光谱，通过光谱解析和比对来确定丙酮酸的存在。
紫外分光光度法测定丙酮酸
紫外分光光度法测定丙酮酸
紫外分光光度法是一种常用的分析方法，可以用于测定丙酮酸的浓度。
测定步骤如下：
1. 准备样品：将待测溶液中的丙酮酸转移至紫外光度计量筒中。如果样品浓度较高，可以适当稀释。
2. 设置仪器：将紫外光度计设置在适当的波长，通常在190-400nm 之间选择一个合适的波长。同时进行零点校准，即不加入样品的情况下记录光吸收。
3. 测量样品：将样品加入光度计量筒中，记录下吸光度值。
4. 计算浓度：根据比尔定律，计算出丙酮酸的浓度。比尔定律表示吸光度与浓度之间呈线性关系。
需要注意的是，测定时要避免其他物质的干扰，确保样品中只含有丙酮酸。同时，还需要注意选择适当的波长和合适的光程，以确保准确测量。
根据具体测定要求和样品特性，可能需要进行样品预处理、稀释或其他操作。具体操作步骤应根据仪器和试剂的说明进行。
丙酮酸及系列产品的检测与应用
*基金项目：北京市教委科技发展计划KM200610011011 作者简介：刘彩霞（1980～），女，硕士生；孙家跃（1955～），男，博士，教授，通讯联系人，主要研究方向：材料化学。
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综述
酮酸钙的质量。因此，HPLC法较EDTA络合滴定法更 能真实地反应丙酮酸钙的含量，且简便，应用广泛。 2.3 高效液相色谱电化学发光法
2005年大连医科大学检验医学院的徐恒瑰[11]等 利用琉基棉分离富集丙酮酸钙中Pb2+、Cd2+、Cu2+, 采用火焰原子吸收光谱法进行测定标准加入法测得 样品回收率。其检测器是AA370mc型原子吸收分光 光度计。此法装置简单、分析步骤简便、快速、精
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生命科学仪器 2006 第4卷/6月刊
密度和准确性均达到要求。特别适用于丙酮酸钙工 业化生产中的重金属离子的检验和监控。 2.9 核磁共振法
2003年石河子大学的杨红兵[7]基于在恒电流条 件下电解产生不稳定化学发光试剂Ｍｎ(Ⅲ)，能直 接氧化丙酮酸产生化学发光，将高效液相色谱法与 电化学发光法相结合，建立了高效液相色谱电化学 发光法测定丙酮酸的检测方法。实验表明在考察共 存物质的干扰情况当中，淀粉、尿酸、NH4H2P04 不产生电化学发光信号，不干扰测定。葡萄糖、草 酸、柠檬酸、乳酸产生电化学发光信号，但是流出 时间相差较大，能与被测物质很好地分开，不干扰 测定。因此，在优化的实验条件下，提高了测定的 选择性，对一些复杂的样品如:啤酒、人体血清、尿 液中丙酮酸进行了分析。本方法的检出限:3×108ｇ/ｍＬ,相对标准偏差2.5%(ｎ=11,ρ=5.0×105ｇ/ｍＬ)，线性范围1×10-7～1×10-4ｇ/ｍＬ。 2.4 酶法测定丙酮酸
ALT,AST测定方法
ALT,AST测定⽅法
3.8.2.1⼩⿏肝、肾、⼼组织ALT含量测定
1实验原理
⾕丙转氨酶作⽤于由丙氨酸及α-酮戊⼆酸组成的基质，在⼀定的反应条件下，产⽣⼀定量的丙酮酸。在酶反应到规定时间时，加⼊2,4-⼆硝基苯肼，在当量浓度的酸性条件下，终⽌了酶反应。2,4-⼆硝基苯肼分别与反应产⽣的丙酮酸及剩余的基质α-酮戊⼆酸形成各⾃对应的2,4-⼆硝基苯腙。在碱性条件下，虽然⼆种苯腙分别显出红棕⾊，但由于丙酮酸⽣成的颜⾊较深，以同等克分⼦计算，在480-530nm波长范围内其浓度约为α-酮戊⼆酸⽣成的颜⾊的3倍，利⽤这⼀差别可以反映出丙酮酸的⽣成量。本实验设⾕草转氨酶活⼒为：样品液与ALT 基质液在37℃下反应60min时每⽣成1µmol丙酮酸所需的酶量为1个活⼒单位（U）。
2试剂配制
（1）0.1mol/L磷酸缓冲液（pH7.4）
称取NaH2PO4.2H2O 2.96495g，Na2HPO4.12H2O 29.0142g，溶解于蒸馏⽔中，定容到1000mL。
（2）20µmol/L丙酮酸钠标准溶液
称取22mg丙酮酸钠，溶解于0.1mol/L磷酸缓冲液（pH7.4）100mL中。现配现⽤。
（3）ALT基质液
称取α-酮戊⼆酸29.2mg，DL-丙氨酸1.78mg（L-丙氨酸0.85mg）溶解于30mL 0.1mol/L磷酸缓冲液（pH7.4）中，溶解后校正pH⾄7.4，再⽤pH7.4的磷酸缓冲液定容⾄100mL，置冰箱中保存备⽤（可保存⼀周）。可加⼊氯仿数滴防腐。（4）0.02% 2，4—⼆硝基苯肼溶液
丙酮酸的测定方法
实验七丙酮酸含量的测定
一、实验目的
掌握植物组织中丙酮酸含量测定的原理和方法;
二、实验原理
植物样品中的组织液,用三氯乙酸去蛋白质后,其中所含的丙酮酸可与2,4—二硝基苯肼作用,生成丙酮酸—2,4—二硝基苯腙,后者在碱性溶液中呈樱红色,其颜色可用分光光度计
测量,与已知丙酮酸标准曲线进行比较,即可求得样品中丙酮酸的含量;
三、实验器材与试剂
1、.实验器材
分光光度计；研钵；具塞刻度试管：20mL×8；容量瓶：100mL×2；移液管：1mL×15mL×4；量筒：10mL×1；离心机；天平；
大蒜、大葱或洋葱
2、试剂
18%三氯乙酸当日配制置冰箱中备用
21.5mol/L氢氧化钠
30.1%2,4—二硝基苯肼:称取2.4—二硝基苯肼100mL,溶于2mol/LHCl中配成100mL溶液,盛入棕色试剂瓶,保存于冰箱内;
4丙酮酸钠
四、实验操作步骤
1.丙酮酸标准曲线的制作：
称取丙酮酸钠7.5mg于烧杯中,用8%三氯乙酸溶解,转入100mL容量瓶中,并用8%三氯乙酸定容,此液为60μg/mL的丙酮酸原液;取6支试管,按下表数据配制不同浓度的丙酮酸标准液：
1 2 3 4 5 6
管号
丙酮酸原液量mL 0 0.6 1.2 1.8 2.4 3.0 8%三氯乙酸量mL 3.0 2.4 1.8 1.2 0.6 0 丙酮酸浓度μg/mL0 12 24 36 48 60
1.5mol/L的氢氧化钠溶液,摇匀显色,在520nm波长下比色;做标准曲线;
2.植物样品组织液的提取：
称取植物样品大蒜、大葱或洋葱5g,于研钵中加入少许石英沙及少量8%三氯乙酸,仔细研成匀浆,再用8%三氯乙酸洗入100mL容量瓶中沙留在研钵内,定容至刻度;静置30min,取10mL匀浆液离心4000r/min10min,取上清液备用;
丙酮酸钠质量标准
丙酮酸钠质量标准
丙酮酸钠是一种常用的化工原材料，广泛应用于化学合成、药物制造、染料工
业等领域。为了确保丙酮酸钠的质量符合相关标准，制定丙酮酸钠的质量标准非常重要。本文将介绍丙酮酸钠的质量标准及其相关要求。
一、产品品质要求 1. 外观丙酮酸钠的外观应为白色结晶粉末，无明显杂质。
2.纯度丙酮酸钠的纯度应不低于99%，通过化学分析等方法进行检测。
3.水分丙酮酸钠的含水量应控制在5%以下，通过烘干后称重或其他相
应方法进行测定。
4.酸度丙酮酸钠的酸度应符合标准要求，通过酸碱滴定、pH值检测等
方法进行检测。
二、检测方法 1. 纯度检测方法采用高效液相色谱法(HPLC)或气相色谱法(GC)
等先进仪器对丙酮酸钠样品进行检测，通过峰面积或峰高比进行定量分析。
2.水分检测方法将丙酮酸钠样品置于105℃的恒温干燥器中，烘干至
恒重后进行称重，通过样品质量的变化计算得到水分含量。
3.酸度检测方法采用酸碱滴定法或pH检测仪器对丙酮酸钠样品中的
酸度进行测定。
三、包装与储存要求 1. 包装丙酮酸钠应采用密封的塑料或复合纸袋包装，包
装袋应标明产品名称、纯度、净重等信息。
2.储存丙酮酸钠应存放在通风干燥的库房中，避免与酸性物质接触，
远离明火，避免阳光直射。储存期间，应定期检查包装是否完好，避免潮湿和日晒。
四、质量控制 1. 质量跟踪在生产过程中，应建立质量跟踪记录，对原材料、
生产环境等关键因素进行监控，确保丙酮酸钠的质量稳定可靠。
2.质量检验生产出的每批丙酮酸钠产品应进行质量检验，检测项目包
括纯度、水分、酸度等，确保产品符合标准要求。
丙酮酸检测 丙酮酸性能检测
丙酮酸检测丙酮酸成分检测
一：丙酮酸（003）
原称焦性葡萄酸，是参与整个生物体基本代谢的中间产物之一。丙酮酸可通过乙酰CoA 和三羧酸循环实现体内糖、脂肪和氨基酸间的互相转化，因此，丙酮酸在三大营养物质的代谢联系中起着重要的枢纽作用。
二：丙酮酸的主要化学性质
在空气中颜色变暗。加热时缓慢聚合，富有反应性，容易与氮化物、醛、卤化物、磷化物等反应，参与生物体的糖代谢、胶质、氨基酸、蛋白质等的生化合成、代谢、醇的发酵等。当用力时，在肌肉中被还原为乳酸，休息时再次氧化并部分转变为糖原。丙酮酸是人体的一种成分，在人体内主要参与糖、脂肪等的代谢，也是碳水化合物代谢的中间产物之一。三：丙酮酸的主要检测
1.定性测定的结果：在测定一批样品前，先确定ELISA对照的吸收值，大于该值者为阳性，小于该值者为阴性。
2.定量测定的结果：测定标准浓度的抗原ELISA反应的光密度绘制标准曲线。测得待测样品ELISA反应的光密度，从而查得抗原量。在标记抗原竞争法中，定酶标记抗原的酶活性为100%，在加入作为标准样品的未标记抗原后，以酶活性降低的百分率绘制曲线，从曲线上查得待测抗原的量。至于对抗体的定量，则要绘制出竞争抵制曲线。在制作标准曲线时，需进行空白对照测定，进行校正。或者在测定时，将对照液作为零点测定点。
科标能源检测中心专业提供丙酮酸检测、丙酮酸成分检测、丙酮酸含量测定、丙酮酸性能检测等相关检测项目（3.12）
丙酮酸激酶检测试剂盒测定原理
丙酮酸激酶检测试剂盒测定原理
丙酮酸激酶检测试剂盒是一种用于检测生物体内丙酮酸激酶含量的工具。这种酶在人体内十分重要，是将糖类分解成能量的关键环节之一，也是糖尿病和肥胖等疾病的关键因素之一。下面我将为大家分步骤地介绍丙酮酸激酶检测试剂盒的检测原理。
第一步，样品制备。我们需要将要检测的血液、血清、血浆等样品加入一定的试剂中混合均匀，获得我们所需要的稀释后样品。这里需要注意的是，样品的制备过程中需要去除可能存在的脂质、其他蛋白质、酶类等干扰因素。
第二步，反应系统的制备。将试剂盒中所提供的所有试剂按一定比例混合，制成我们需要的反应系统。反应系统包含两个方面：底物和酶标记物。具体的，底物是指在酶的作用下，丙酮酸和ATP反应形成丙酮酸ADP，其中ADP是电子吸收素的辅因子，在波长340nm时较好吸收；酶标记物是取代分子中的二氢维生素K-3（又称香叶酸钠），是电化学发光素的前体物。
第三步，加样。将制备好的稀释后样品加入反应系统中，进行反应。反应的过程中，丙酮酸激酶与反应系统中的底物进行酶促反应，产生释放出的ADP，而此时体系中的酶标记物直接与ADP结合，生成复合物，这个复合物具有一定的电化学性质。
第四步，清洗。首先用洗板液清洗反应后的微孔板，去除未结合的底物和酶标记物；然后再用去离子水清洗，彻底去除阻碍我们检测的任何余量原料。
第五步，测定。将清洗后的微孔板放入读板仪上进行检测。读板仪将指定波长的光束照射到微孔板中，同时检测光源照射后反射回来的光强。反应后样品中复合物产生的荧光值与丙酮酸激酶的含量呈正相关，我们便得以精确检测出丙酮酸激酶的含量。
血清钾离子的丙酮酸激酶法测定
血清钾离子的丙酮酸激酶法测定
概述
1. 本文旨在探讨血清钾离子的丙酮酸激酶法测定方法及其临床应用意义。高钾血症是一种常见的临床情况，及时准确地测定血清钾离子水平对于临床诊断和治疗具有重要意义。而丙酮酸激酶法是目前用于测定血清钾离子的一种常见方法。
测定原理
2. 丙酮酸激酶法是一种酶动力学测定法，其基本原理是利用丙酮酸激酶催化反应将丙酮酸和辅酶A反应生成乙醛和丙酮酸，同时转移ADP 磷酸根生成ATP。而在此反应过程中，ADP的浓度与生成的乙醛分子数量成正比，因此可以通过检测ADP的浓度来间接测定血清钾离子的水平。
实验操作
3. 取血清标本并离心制备样品；加入适量的丙酮酸激酶、辅酶A、ATP和谷氨酸钾盐，混合后在37摄氏度恒温下进行反应；通过添加一种特定的酶来将生成的乙醛转化成乙酸，然后测定反应前后ADP的浓度变化，从而得出血清钾离子的水平。
临床应用
4. 丙酮酸激酶法测定血清钾离子水平在临床应用中具有重要意义。血
清钾离子水平的异常变化可以反映出机体内部的一些疾病情况，比如
肾脏疾病、糖尿病、心脏病等。血清钾离子水平的测定可以指导临床
药物治疗，及时调整药物剂量，避免药物不良反应的发生。丙酮酸激
酶法测定血清钾离子水平在临床中具有非常重要的意义。
优缺点
5. 丙酮酸激酶法作为一种常用的血清钾离子测定方法，具有诸多优点。此法操作简便，结果准确可靠，且不受血清中其它物质影响；此法对
常见的医用药物没有干扰作用，具有很高的特异性。然而，此法也存
在一些缺点，比如对实验条件要求较高，需要较为精确的实验操作和
配制试剂，且操作流程较为繁琐。
测定丙酮酸含量的基本原理
测定丙酮酸含量的基本原理
测定丙酮酸含量的基本原理是利用化学反应或仪器分析的方法来确定样品中丙酮酸的浓度。
一种常用的方法是通过酸碱中和反应进行测定。首先，将含有丙酮酸的样品溶解在适当的溶剂中，得到丙酮酸溶液。然后，将丙酮酸溶液滴定至中性终点。在滴定过程中，加入酸碱指示剂，如酚酞或溴丙酚绿等，使溶液产生颜色变化。当溶液中的丙酮酸被完全中和时，颜色发生明显变化，表示反应终点达到。根据滴定液的体积和已知的滴定液浓度，可以计算出丙酮酸的浓度。
另一种常用的方法是利用光谱分析仪器测定丙酮酸的含量。这种方法称为分光光度法。首先，将样品制备成适当的溶液，并将其放置在光谱分析仪器中。然后，根据丙酮酸分子的特定吸收波长，在特定波长下测量样品的吸光度。根据比色法或比浊法，可以将吸光度与丙酮酸的浓度相关联。通过构建标准曲线，可以准确测定未知样品中丙酮酸的含量。
除了以上提到的方法，还有其他一些测定丙酮酸含量的基本原理，如电化学分析方法、色谱分析方法等，这些方法的原理和操作过程可以根据实际需要选择合适的方法进行测定。
荧光毛细分析法测定丙酮酸的研究
丙酮 酸 （ｙ ｉ ａｉ） 糖 代谢 过程 中一 个 关 Ｐｍｖ ｃ 是 ｃ ｄ 键的中间产物 ， 普遍应用 于医药 、 业、 品等领 农 食 域 。丙酮 酸 的测 定 主 要 有相 对 滴定 法 … 、 效 液 高 相色谱法（ Ｐ Ｃ 】酶电极法 、 ＨＬ） 、 Ｊ化学发光法 、 Ｊ 紫外分光 光度 法 、 相 色谱 法 （ ｃ 、 Ｊ气 Ｇ ） 比色 法 、 荧光法 等 。其 中 Ｇ 、 Ｐ Ｃ 化学发光法 ’ ＣＨＬ、 不适合现场 的快速监 测， 仪器 昂贵 ， 且维护成本 高； 相对滴定法测定精度不 高， 操作繁琐； 酶电极 法（ 与比色法相比） 具有使用选择性好 、 灵敏度高 的特点 ， 是现有 的酶 电 极往 往 不稳 定 ， 但 酶层容 易 脱落 ， 因而造成 电极的重现性差， 限制 了其应用 。 荧光法比紫外分光光度法灵敏度高 ， 但是 由于可 以发射荧光 的物质种类数量有 限 ， 因而使得常规 荧光法 没有 紫外 分光光度 法应 用广 泛 。 本 研 究 将 荧 光 毛 细 分 析 法 （ ｌｏｅｃｎｅ Ｆｕｒｓｅｃ Ｃｐｌｒ ｎｌ ｉ， Ｃ 与 液 态 酶 催 化 技 术 结 ａｉａ Ａ ａｙ ｓ Ｆ Ａ） ｌｙ ｓ 合， 开发 了一种 丙 酮酸 测定 方 法—— Ｐ—Ｌ Ｅ—Ｆ Ａ Ｃ （ ｙ ｉ — ａｉ Ｌｑｉ Ｅｚｍａｃ ｌｕｒ ｅｃ Ｐｍｖ ｅ ｃｄ ｉｕｄ ｎｙ ｔ Ｆ ｏｅ ｎｅ ｉ ｃ ｓ ｃｐ ａ Ａ ａｙｉ） ， ａｉ ． ｌ ｓ 兼有了荧光法的灵敏度高和 Ⅱ ｓ 法 ｎ 酶法的特异 性强等特 点， 使用 毛细管作为测量载 体 样用 量 仅 ｌ ， 大 大 节 省 贵 重试 剂 酶 的 试 ８ 可 用量。在温度为 ３ ｃ ，Ｈ ．０的条件下 ， ７Ｉ ｐ ７５ ＝ 乳酸脱 氢酶（ Ｄ 催化丙酮酸与氢离子以及强荧光性物 Ｌ Ｈ） 质还原型辅蔚 （ Ａ Ｈ） Ｎ Ｄ 进行 反应 ， 生成非荧光 性 物质乳酸与氧化型辅酶 （ Ａ ） 通过荧光猝灭 ＮＤ ，
丙酮酸含量测定定1
一、实验目的：
学习并掌握植物组织中丙酮酸含量测定的原 理及方法。
二、实验原理:
植物样品组织液用三氯乙酸去除蛋白质后，其中所含丙酮酸
可与2，4-二硝基苯肼发生反应，生成的丙酮酸- 2，4-二硝基苯
腙在碱性溶液中呈樱红色。 丙酮酸- 2，4-二硝基苯腙在520nm处有最大的光吸收，在一 定范围内O.D520nm值与组织中丙酮酸的含量成正比。 所以用分光光度计测定其吸光度，然后与已知丙酮酸标准曲 线进行比较，即可求出样品中丙酮酸的含量。
3、试剂：
（1）8%三氯乙酸溶液
（2）1.5mol/L NaOH溶液
（3）0.1% 2，4-二硝基苯肼溶液
（4）丙酮酸标准液 浓度：60ug/ml
四、实验步骤：
1、制作标准曲线: 取6支试管，按下表操作，然后以丙酮酸标 准液为横坐标，对应的吸光值为纵坐标，绘制标准曲线。
管 号 丙酮酸标 8%三氯乙 酸溶液 准液 (mL) (mL) 丙酮酸 含量 （ ug ） 2，4-二 NaOH溶 硝基 液(mL) 苯肼 (mL) 光密度值 OD520nm
二、实验原理:
CH3 | C O | COOH
NH— CH3 | C N | COOH
﹢ NH2
—NO2
=
NH －
—NO2
NO2
NO2 丙酮酸 2，4-二硝基苯肼
丙酮酸- 2，4-二硝 基苯腙
丙酮酸溶解度
丙酮酸溶解度
丙酮酸是一种有机化合物，化学式为C3H6O3。丙酮酸与水的相容性较好，在常温下可以溶解于水中，形成无色的溶液。丙酮酸溶液的酸碱性较弱，pH值在5-6左右。
丙酮酸的溶解度受到多种因素影响，包括温度、溶剂、溶质浓度等。以下是一些相关参考内容，以帮助了解丙酮酸的溶解度特性。
1. 温度对丙酮酸溶解度的影响
温度是影响溶质溶解度的重要因素之一。一般来说，固体物质在溶剂中的溶解度随着温度的升高而增加。对于丙酮酸而言，其在水中的溶解度也随着温度的升高而增加。实验研究表明，在室温下，丙酮酸可以完全溶解于水中。随着温度的升高，丙酮酸的溶解度也随之增加。但需要注意的是，当温度超过一定范围时，丙酮酸可能发生分解反应，导致其溶解度的下降。
2. 溶剂对丙酮酸溶解度的影响
溶剂的性质对溶质的溶解度也有一定的影响。除水外，丙酮酸还可以溶解于一些有机溶剂中，如乙醇、丙酮等。这些有机溶剂的极性较高，能够与丙酮酸分子发生相互作用，从而促进其溶解。但与水相比，这些有机溶剂的溶解度较低。
3. 溶质浓度对丙酮酸溶解度的影响
溶质浓度是指单位体积内溶质的质量。一般来说，溶剂中溶质的溶解度与其浓度成正比关系。对于丙酮酸而言，其溶解度与其浓度也存在一定的关系。当丙酮酸的浓度较高时，其在溶剂
中的溶解度也相应较高。但需要注意的是，随着溶质浓度的增加，溶剂中溶质分子间相互作用的增强可能导致溶解度的下降。
总之，丙酮酸的溶解度受到多种因素的影响，包括温度、溶剂、溶质浓度等。为了更准确地确定丙酮酸的溶解度，可以通过实验方法进行测定，并结合理论模型进行分析。同时，还可以参考相关文献和研究成果，以进一步了解丙酮酸的溶解度特性。
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丙酮酸的测定方法内部编号：（YUUT-TBBY-MMUT-URRUY-UOOY-DBUYI-0128）
实验七丙酮酸含量的测定
一、实验目的
掌握植物组织中丙酮酸含量测定的原理和方法。
二、实验原理
植物样品中的组织液，用三氯乙酸去蛋白质后，其中所含的丙酮酸可与2,4—二硝基苯肼作用，生成丙酮酸—2,4—二硝基苯腙，后者在碱性溶液中呈樱红色，其颜色可用分光光度计测量，与已知丙酮酸标准曲线进行比较，即可求得样品中丙酮酸的含量。
三、实验器材与试剂
1、.实验器材
分光光度计；研钵；具塞刻度试管：20mL×8；容量瓶：100mL×2；移液管：
1mL×15mL×4；
量筒：10mL×1；离心机；天平；
大蒜、大葱或洋葱
2、试剂
（1）8%三氯乙酸(当日配制置冰箱中备用)
（2）1.5mol/L氢氧化钠
（3）0.1%2,4—二硝基苯肼:称取2.4—二硝基苯肼100mL，溶于2mol/LHCl中配成100mL溶液，盛入棕色试剂瓶，保存于冰箱内。
（4）丙酮酸钠
四、实验操作步骤
1.丙酮酸标准曲线的制作：
称取丙酮酸钠7.5mg于烧杯中，用8%三氯乙酸溶解，转入100mL容量瓶中，并用8%三氯乙酸定容，此液为60μg/mL的丙酮酸原液。
取6支试管，按下表数据配制不同浓度的丙酮酸标准液：
1.5mol/L的氢氧化钠溶液，摇匀显色，在520nm波长下比色。做标准曲线。
2.植物样品组织液的提取：
称取植物样品（大蒜、大葱或洋葱）5g，于研钵中加入少许石英沙及少量8%三氯乙酸，仔细研成匀浆，再用8%三氯乙酸洗入100mL容量瓶中（沙留在研钵内），
定容至刻度。静置30min，取10mL匀浆液离心（4000r/min）10min，取上清液备用。
3.组织液中丙酮酸的测定1.5mol/L氢氧化钠溶液，摇匀显色。在520nm波长下比色，记录吸光度，在标准曲线上查得丙酮酸的含量。
五、结果处理
式中：A—标准曲线中查得的丙酮酸克数。
六、思考题：测定丙酮酸含量的基本原理是什么？