蛋白质工程
蛋白质工程重点
一、名词解释1、蛋白质工程(Protein Engineering)——以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础,通过化学、物理和分子生物学的手段进行基因修饰或基因合成,对现有蛋白质进行改造,或制造一种新的蛋白质,以满足人类对生产和生活的需求的工程技术。
2、结构模体(supersecondary structure,motif)——介于蛋白质二级结构和三级结构之间的空间结构,指相邻的二级结构单元组合在一起,彼此相互作用,排列形成规则的、在空间结构上能够辨认的二级结构组合体,并充当三级结构的构件(block building),其基本形式有αα、βαβ和βββ等。
3、结构域(domain)——是在二级结构或超二级结构的基础上形成三级结构的局部折叠区,它是相对独立的紧密球状实体。
4、蛋白质的折叠(protein folding)——从体内新生的多肽链或体外变性的多肽链的一维线性氨基酸序列转化为具有特征三维结构的活性蛋白质的过程。
5、分子伴侣(molecular chaperone)——一大类相互之间没有关系的蛋白质,它们具有的共同功能是帮助其他含蛋白质的结构在体内进行非共价的组装和卸装,但不是这些结构在发挥其正常的生物学功能时的永久组成部分。
6、晶胞(Unit cel l)——空间点阵的单位(大小和形状完全相同的平行六面体),是晶体结构的最小单位。
7、核磁共振现象(nuclear magnetic resonance ,NMR)——指核磁矩不为零的核,在外磁场的作用下,核自旋能级发生塞曼分裂(Zeeman splitting),共振吸收某一特定频率的射频辐射(radio frequency, RF)的物理过程。
8、化学势(位)移( )——在有机化合物中,各种氢核周围的电子云密度不同(结构中不同位置)共振频率有差异,即引起共振吸收峰的位移,这种现象称为化学位移。
9、耦合常数(J)——由于自旋裂分形成的多重峰中相邻2峰间的距离。
蛋白质工程
20种氨基酸的密码子表
—丙氨酸—色氨酸—赖氨酸—甲硫氨酸—苯丙氨酸—”的脱氧核苷酸序列
比较基因工程和蛋白质工程
中心法则逆推
中心法则
流程
蛋白质工程是在基因工程基础上的延伸,是第二代基因工程
联系
基因修饰或基因合成
基因重组
实质
自然不存在的蛋白
天然存在的蛋白
结果
操作环境——生物体外;操作对象——基因;操作水平——分子
玉米中赖氨酸含量可提高数倍
1、目标:根据人们对 功能的特定需求,对蛋白质的 进行分子设计。 2、原理:改造基因 基因 或基因 。 3、途径: 预期蛋白质功能→设计 →推测应有的 序列→找到对应的 序列 基因 。
蛋白质工程的途径:
基础:
蛋白质工程的实质:
途径:
目标:
蛋白质分子的结构规律和生物功能
基因修饰或基因合成
改造或制造新的蛋白质,满足人类的生产或生活的需要
是对编码蛋白质的基因进行改造
蛋白质工程的概念
讨论:对照密码表,至少写出三种决定“—丙氨酸—色氨酸—赖氨酸—甲硫氨酸—苯丙氨酸—”的脱氧核苷酸序列。 P27
Suitable for teaching courseware and reports
蛋白质工程
温故而知新
2、描述基因工程的操作步骤。
3、讨论基因工程产生的蛋白质的特点。
基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质。
1、蛋白质的基本单位蛋白质多样性的根本原因
一、蛋白质工程崛起的缘由
1、基因工程的应用 1 基因工程的实质:将一种生物的 转移到另一种生物体内,使后者产生本不能产生的 ,进而表现出的 。 2 基因工程的不足:在原则上只能生产自然界已存在的 。 2、天然蛋白质的不足 天然蛋白质是生物在长期 过程中形成的,它们的 符合特定物种 的需要,却不一定完全符合人类生产和生活的需要。 3、蛋白质工程的目的生产符合人类生产和生活需要的 。
高中生物苏教版选修三课件第一章第三节蛋白质工程
(4)治癌酶的改造:癌症的基因治疗分两个方面:药物作用于 癌细胞,特异性地抑制或杀死癌细胞;药物保护正常细胞免受化 学药物的侵害,可以提高化学治疗的剂量。通过改造治疗癌症的 酶,能够达到更好的治疗效果。
(5)嵌合抗体和人缘化抗体:通过蛋白质工程对抗体进行改 造,增强机体的免疫力。
以对概念的比较分析为依据,考查基 因工程和蛋白质工程的异同
蛋白质工程的应用
1.提高酶的热稳定性 方法一:将酶分子中的天__门__冬__酰__胺__和_谷__氨__酰__胺__转变为其他 氨基酸。 方法二:在蛋白质分子中引入_二__硫__键__。
2.生物工程制药 (1)实例1:鼠源杂交瘤抗体的改造。 ①改造方法:在_基__因__水平上对抗体进行重组,产生人恒定区 和鼠可变区嵌合抗体。 ②结果:对人体的不良反应_减__少__。 (2)实例2:对t-PA的改造。 ①t-PA功能:溶解_血__栓__块__,医治心肌梗死等疾病。 ②改造方法:将t-PA分子中的天门冬酰胺替换为_谷__氨__酰__胺__。 ③结果:t-PA在_血__液__循__环__中停留时间_大__大__延__长__,疗效更加 显著。
改善蛋白质的性质和功能
1.对天然蛋白质进行改造,是通过直接对蛋白质分子进行 操作来实现的吗?
提示:不是,由于基因决定蛋白质,因此要对蛋白质的结构 进行设计改造,最终必须通过改造基因来完成。
2.蛋白质工程操作程序的基本思路与基因工程有什么不同? 提示:基因工程是按照中心法则进行的:基因→表达(转录和 翻译)→形成氨基酸序列的多肽链→形成具有高级结构的蛋白质→ 行使生物功能,基本上是生产出自然界已有的蛋白质。蛋白质工 程却与之相反,一般是先创造出适合人类需求的新基因,然后使 其表达出具有特定结构和功能的蛋白质。蛋白质工程可以创造出 自然界不存在的蛋白质。
蛋白质工程
蛋白质工程一、名词解释:1.蛋白质工程:是研究蛋白质结构和定点改造蛋白质结构的一门学科。
它运用基因工程手段,通过有控制的基因修饰和基因合成,对现有蛋白质进行定向改造,以期获得性能更加优良、更符合人类社会需要的蛋白质分子。
2. 抗体:指机体的免疫系统在抗原刺激下产生的可与相应抗原发生特异性结合的免疫球蛋白。
3. 人-鼠嵌合抗体:用鼠可变区和人恒定区融合形成的抗体。
4.人源化抗体:将鼠杂交瘤抗体的超变区嫁接到人抗体上形成的抗体。
5. 一级结构:是多肽链中氨基酸残基从N-末端到C-末端的排列顺序及二硫键的位置。
6.二级结构:是指多肽链主链借助氢键排列成特有的规则的反复构象。
7.超二级结构(结构模体):一级顺序上相邻的二级结构在三维折叠中,彼此靠近、按特定的几何排布形成排列规则的、在空间结构上可以辨认的、可以同一结构模式出现在不同蛋白质中的二级结构组合体,称为结构模体。
8.发夹式β模体(或ββ组合单位):两段相邻的反平行β链被一环链连接在一起构成的组合单位,其形貌与发夹相似,称为发夹式β模体。
9.希腊钥匙模体:四段紧邻的反平行β链以特定的方式来回往复组合,其形貌类似于古希腊钥匙上特有的回形装饰纹,故称为希腊钥匙型模体。
11.结构域:二级结构和结构模体以特定的方式组织连接,在蛋白质分子中形成两个或多个在空间上可以明显区分的三级折叠实体,称为结构域。
12.三级结构:在二级结构、结构模体的基础上,进一步盘曲、折叠形成的,涉及主链、侧链在内的所有原子和基团的空间排布。
13.四级结构:是指在多条肽链组成的一个蛋白质分子中,各亚单位在寡聚蛋白质中的空间排布及亚单位间的互相作用。
14.优势构象:任何氨基酸侧链中的组成基团都可以绕着其间的C-C单键旋转,从而产生各种不同的构象。
AA分子的各种构象异构体并不是平均分布的, 总是以其最稳定的构象为重要的存在形式即为优势构象。
15.交错构象:是能量上最有利的排布,在这种构象中,一个碳原子的取代基正好处在另一个碳原子的两个取代基之间。
蛋白质工程的概念
蛋白质工程的概念
蛋白质工程是一门应用生物技术手段,通过物理、化学和分子生物学等技术手段对蛋白质结构基因进行修饰或改造,生物表达合成具有特定功能的蛋白质的技术。
它是基于已知蛋白质的结构与生物功能之间的关系,运用生物信息学、计算机辅助设计、生物化学和晶体学等理论和方法,通过物理、化学和分子生物学等技术手段对蛋白质结构基因进行修饰或改造,生物表达合成具有特定功能的蛋白质。
蛋白质工程的应用非常广泛,包括药物研发、食品工业、生物制药、环境保护等领域。
在药物研发中,蛋白质工程技术可以帮助科学家研究和理解蛋白质的生理和生物化学特性,开发出更有效的治疗药物。
在食品工业中,蛋白质工程技术可以用于改善食品的口感、营养价值和保质期。
在生物制药中,蛋白质工程技术可以用于生产重组蛋白、抗体等生物制品。
在环境保护中,蛋白质工程技术可以用于处理废水、废气等环境污染物。
蛋白质工程定义
蛋白质工程定义介绍蛋白质工程是一门综合学科,涉及到生物学、生物化学、生物信息学等多个领域。
蛋白质工程的目标是通过合成或改造蛋白质的结构和性质,开发出具有特定功能的新型蛋白质。
蛋白质工程在药物研发、生物能源、农业和环境保护等领域具有广泛的应用前景。
蛋白质工程的起源和发展蛋白质工程起源于20世纪70年代,当时科学家们开始尝试通过改变蛋白质的氨基酸序列来改变其性质。
随着技术的进步,研究人员可以通过基因工程的手段来合成具有特定性质的蛋白质。
1982年,第一个通过基因工程合成的人类蛋白质——胰岛素成功问世,这标志着蛋白质工程的重要突破。
蛋白质工程的方法和技术蛋白质工程利用多种方法和技术来实现对蛋白质的改造,其中常用的包括:1. 随机突变通过人工合成或随机突变的方式,改变蛋白质的氨基酸序列,进而改变蛋白质的结构和功能。
这种方法常用于寻找具有新功能的蛋白质。
2. 有针对性的突变通过对蛋白质的氨基酸序列进行有选择性的突变,例如点突变、插入突变和缺失突变,可以改变蛋白质的稳定性、抗原性以及其他性质。
3. 蛋白质摘要和重组将两个或多个蛋白质的功能单元进行重新组合,可以获得具有新特性的重组蛋白质。
4. 手性选择通过合成手性选择性的氨基酸或引入特定的修饰基团,改变蛋白质的手性结构,并调节其生物活性。
5. 蛋白质折叠和组装通过调控蛋白质的折叠和组装过程,可以控制蛋白质的结构和功能。
这种方法常用于改善蛋白质的稳定性和可溶性。
蛋白质工程在药物研发中的应用蛋白质工程在药物研发中发挥着重要作用。
通过对药物靶点蛋白质的改造,可以提高药物的选择性和疗效,减少副作用。
同时,蛋白质工程还可以用于合成新型药物载体和药物传递系统,提高药物的稳定性和药效。
蛋白质工程在生物能源领域的应用蛋白质工程在生物能源领域也有广泛的应用。
通过改造酶和微生物的代谢途径,可以提高生物能源的产量和转化效率。
蛋白质工程还可以用于合成新型酶类催化剂,提高能源生产过程中的反应速率和选择性。
蛋白质工程含义
蛋白质工程含义1.蛋白质工程:蛋白质工程是一门高级分子生物学技术,它涉及许多方面,包括蛋白质的结构、生物化学和功能、蛋白质的设计、合成、表达和表征。
蛋白质工程可以通过改变蛋白质的结构和功能实现对其作用的调控。
有了蛋白质工程的发展,研究人员可以以更简单、更快、更准确的方式来设计和合成新的蛋白质,从而更好地利用生物体的基因组。
2.蛋白质工程的设计:蛋白质工程设计包括两个主要部分:蛋白质结构设计和蛋白质功能设计。
蛋白质结构设计是指人工设计和合成新的蛋白质结构,使其最适合该蛋白质的应用领域;蛋白质功能设计是指根据特定应用的要求,改变蛋白质的结构和特性,实现蛋白质的功能调控。
3.蛋白质工程的表达:蛋白质工程表达是指将新设计的蛋白质通过受试生物系统表达出来,以便对蛋白质结构和功能进行测试。
常用的受试生物可以是真核生物,如果你要进行后续研究,可以有人工合成的抗原,也可以有哺乳动物的基因组评价、基因组修饰或基因编辑等等,这些都是受试生物系统的表达。
4.蛋白质工程的表征:蛋白质工程的表征是指对蛋白质进行性状分析,具体包括测量蛋白质的纯度水平、分子量、细胞表达量、子实验和域结构等等,这些特性都都受到设计、表达、纯化和亲和结构等因素的影响,有助于充分理解蛋白质的性质,并有助于新型蛋白质药物的开发。
5.蛋白质工程的应用:蛋白质工程技术广泛应用于生物技术领域,它可以用于调控抗原的表达、发现新函数的蛋白质、改善蛋白质的特性、开发新的抗体药物、基因疗法的发现和分子诊断等,都有助于改善健康水平,提高人类生活质量。
由于蛋白质工程的应用越来越广泛,它已经成为生物技术的重要组成部分,并逐步在医学领域、农业生物技术领域以及环境污染控制领域取得了巨大成就。
蛋白质工程名词解释
蛋白质工程名词解释
蛋白质工程是一门应用生物技术和分子生物学原理,通过对蛋白质的基因序列进行改变和重新组合,来设计和制造具备新功能或改良功能的蛋白质的领域。
在蛋白质工程中,用于改变蛋白质的基因序列的方法包括基因突变、插入或删除特定基因片段、以及不同蛋白质之间的基因互换。
这些方法旨在改变蛋白质的结构和功能,以满足特定的应用需求。
蛋白质工程的应用范围广泛。
例如,在医药领域,蛋白质工程可以用来改良药物的效力和安全性,设计更有效的抗生素或抗癌药物,甚至用于生产重组蛋白质药物。
在农业领域,蛋白质工程可以用于改良农作物的抗病能力和适应性,提高农作物的产量和品质。
此外,蛋白质工程在工业生产中也起着重要作用,如开发新型生物催化剂、生产工艺中的酶和蛋白质纳米材料等。
蛋白质工程的发展对科学研究和应用领域带来了巨大的潜力。
通过对蛋白质结构和功能的了解,科学家能够精确地设计和构建具有特定性能和特征的蛋白质,以满足不同领域的需求。
总之,蛋白质工程是一门迅速发展的科学领域,其研究和应用有助于创造出更加智能和高效的生物技术产品,并在医药、农业和工业等领域做出贡献。
蛋白质工程
3、 合成嵌合抗体。如:人鼠嵌合抗体抗原性显著下降 、 合成嵌合抗体。
第三节
蛋白质工程
1、蛋白质工程概念 2、蛋白质工程原理、步骤 3、蛋白质的分子设计 1)小范围改造 如:T4溶菌酶、速效胰岛素 2)拼接组装 如:人鼠嵌合抗体 3)从头设计 4、蛋白质工程的应用 1)提高蛋白质的稳定性 2)改变蛋白质的活性 3)合成嵌合抗体
二、蛋白质工程原理、步骤 蛋白质工程原理、
基因表达流程图 基因表达流程图
蛋白质工程流程图 蛋白质工程流程图 工程流程
1. 从预期的蛋白质功能出发 从预期的蛋白质功能 功能出发 2. 设计预期的蛋白质结构 设计预期的蛋白质结构 3. 推测应有的氨基酸序列 推测应有的氨基酸 氨基酸序列 4. 找到相应的脱氧核苷酸序列 找到相应的脱氧核苷酸 脱氧核苷酸序列
(1)获得②一般用 人工合成基因 的方法,①和②结合能形 ______的方法 的方法, )获得② 最重要的是① 成③,最重要的是①和②经处理后具有 相同的黏性末端 。 (2)在⑤→⑥过程中,获得抗病基因的金茶花细胞将经历 ) ⑥过程中, 脱分化和 再分化 _____和 过程后才能形成⑦ 过程后才能形成⑦。 (3)抗枯萎病金茶花的培育成功说明一种生物的基因表达系统 ) 脱氧核苷酸序列(遗传信息或碱基序列) 脱氧核苷酸序列 能够识别来自另一种生物的DNA的________。(遗传信息或碱基序列) 能够识别来自另一种生物的 的 。 (4)欲快速培育大量该抗病新品种,应该采用的技术是 )欲快速培育大量该抗病新品种, 植物组织培养 ____________________。通过转基因方法获得的抗病金茶花, 。通过转基因方法获得的抗病金茶花, 将来产生的配子中是否一定含有抗病基因? 将来产生的配子中是否一定含有抗病基因? 不一定 。
蛋白质工程概念
蛋白质工程概念
蛋白质工程是一种利用现有蛋白质结构及功能的基础上,通过改变其氨基酸序列、引入新的功能基团或者构建新的蛋白质结构,以设计和生产具有特定功能的蛋白质的科学技术。
它涉及到对蛋白质的理解、改造和优化,旨在开发出具有高效率、高特异性和高稳定性的蛋白质产物。
蛋白质工程的主要目的是通过对蛋白质结构和功能的改变,使其具备新的性质和功能。
这些新的性质和功能可以包括增强酶活性、改善抗原性或药物亲和性、提高蛋白质的稳定性和可溶性等。
蛋白质工程在生物医药领域具有广泛的应用,比如用于开发新型药物、治疗癌症、设计新的酶催化反应等。
蛋白质工程的方法主要包括定向进化、理性设计和随机设计等。
其中定向进化是一种通过模拟自然界的进化过程,通过引入随机变异和筛选优胜劣汰的方法,逐步筛选出具有目标性能的蛋白质。
理性设计是一种通过对蛋白质结构和功能的深入理解,有针对性地进行氨基酸序列的改变,以实现特定的蛋白质性质改造。
随机设计是一种通过随机引入氨基酸变异的方法,以获得新的蛋白质序列,从而创造出新的蛋白质结构和功能。
蛋白质工程的发展对于提高生物技术和生物医学领域的研究和应用具有重要意义。
它不仅为开发新药物和生物材料提供了新的途径,还为研究蛋白质的结构和功能以及理解生物过程提供了有力的工具。
蛋白质工程的概念高中生物
蛋白质工程的概念高中生物
蛋白质工程是指利用生物技术手段对蛋白质进行改造或设计,以满足特定需求的过程。
在高中生物课程中,通常会涉及到基本的概念和应用。
具体来说,蛋白质工程可以包括以下内容:
1.蛋白质的结构与功能:学习蛋白质的基本结构,了解蛋
白质在细胞中的重要作用,如酶的催化作用、结构蛋白的支持作用等。
2.基因工程:了解基因工程技术,包括DNA重组技术和
基因克隆等,这些技术可以被用来改造蛋白质的编码基因,从而改变蛋白质的性质。
3.重组蛋白的生产:学习如何利用重组DNA技术来大规
模生产重组蛋白,例如利用大肠杆菌或其他微生物表达系统来生产人类重组胰岛素等药物。
4.蛋白质结构预测与设计:了解一些基本的蛋白质结构预
测方法,以及蛋白质设计的基本原理,例如通过蛋白质工程设计出新的酶类催化剂或药物分子。
总的来说,蛋白质工程是一门涉及生物技术和生物化学的学科,涉及到对蛋白质的理解、改造和应用。
在高中生物课程中,可以简要介绍这些基本概念,并引导学生对蛋白质工程的潜在应用进行思考。
蛋白质工程
高级改造:蛋白质分子的剪裁,如结构域的拼接 从头设计合成新型蛋白质
一、 初级改造
➢通过基因突变方法,以达到改变氨基酸进而改造蛋白 质的目的。
➢目前,主要采用的基因突变方法: 基因定位突变 盒式突变。
➢基因定位突变
根据三联体密码,编码DNA(目的基因)的确定位点, 改变其组成核苷酸的顺序或种类,使基因发生定向变 异,使其控制合成的氨基酸种类、顺序发生改变,合 成出具有预期氨基酸序列的修饰蛋白质。
六、修饰酶的催化特异性
➢利用定点突变技术葡萄糖淀粉酶的催化特性。如将 活性中心的GLu、Asp被Gln、Asn取代时,突变体酶分 解α-1,4糖苷键和α-1,4糖苷键的活性比例发生明 显改变
七、修饰Nisin的生物防腐效应 ➢ Nisin是乳酸球菌分泌的有较强抗菌作用的小分子 肽,可用于罐头食品、乳制品、肉制品的保藏
与质粒 连接
感染 E.coli
(A)n 胰岛素原mRNA cDNA
重组质粒
mRNA
转化细菌
第四节 蛋白质工程在食品中的应用
蛋白质工程自问世以来,短短十几年的时间,已取得 了引人瞩目的进展,在医学和工业用酶方面也获得了 良好的应用前景。 ➢提高蛋白的稳定性包括以下几个方面: ①延长酶的半衰期; ②提高酶的热稳定性; ③延长药用蛋白的保存期; ④抵御由于重要氨基酸氧化引起的活性丧失。
“人类肝脏蛋白质组计划”是国际上第一个人类组织/器官的蛋白质 组计划,由我国贺福初院士牵头,这是中国科学家第一次领衔的重大 国际科研协作计划,总部设在北京,目前有16个国家和地区的80多个 实验室报名参加。它的科学目标是揭示并确认肝脏的蛋白质,为重大 肝病预防、诊断、治疗和新药研发的突破提供重要的科学基础。
生物工程的蛋白质工程
生物工程的蛋白质工程生物工程的蛋白质工程是指利用基因工程等方法对蛋白质进行设计、合成和改良的一门学科。
蛋白质工程的目的是通过改变蛋白质的结构、功能或性质,实现对生物体生长、代谢等过程的调控,从而获得具有特定功能或性能的精确控制的蛋白质。
一、蛋白质工程的意义蛋白质作为生物体中最重要的宏观有机分子之一,扮演着多种重要生理功能的角色。
通过对蛋白质的工程处理,可以实现许多有益的应用,如:1. 药物开发与治疗:蛋白质工程可以用于开发新药物,并改善现有药物的治疗效果。
通过工程处理蛋白质,可以增加其稳定性、活性和药代动力学性质,提高药物的治疗效果和稳定性。
2. 生命科学研究:蛋白质工程可以用于研究生物体的生理过程和分子机制。
通过改变蛋白质的结构和功能,可以揭示生命科学中复杂的分子互作关系和信号传递途径,为理解生物系统的运作机制提供了重要工具。
3. 工业应用:蛋白质工程可以用于开发生物制造工艺中的酶催化系统,提高生产效率和产物质量。
利用工程处理后的蛋白质,可以设计新的酶催化反应,实现环境友好型的高效生产过程。
4. 农业领域:蛋白质工程可以用于改良植物和动物的性状,提高农作物的产量和抗病虫害能力,改善畜禽育种品种的性能。
二、蛋白质工程的方法蛋白质工程的方法主要包括以下几种:1. 合成基因:通过合成基因技术,可以设计和合成具有特定序列的蛋白质基因。
合成的基因可以经过进一步的改造和表达,得到具有特定功能的蛋白质。
2. 蛋白质改造:通过对蛋白质的序列、结构和功能进行改变,可以得到具有不同性质的蛋白质。
这可以通过遗传工程手段,如点突变、插入或删除等,来实现。
3. 蛋白质表达:通过利用多种表达系统,如大肠杆菌、酵母、动物细胞等,可以高效地表达和生产目标蛋白质。
4. 蛋白质折叠和修饰:蛋白质在细胞表达过程中会发生折叠和修饰。
通过控制折叠条件和改变修饰酶的表达,可以获得具有良好稳定性和活性的蛋白质。
5. 结构预测和设计:通过计算机模拟和预测方法,可以推测蛋白质的结构和功能。
蛋白质工程简介
蛋白质改造
01
02
03
氨基酸替换
通过改变蛋白质中特定氨 基酸的类型,以改善其功 能或性质。
肽链剪切
将肽链中的一部分切除或 替换,以产生具有更好性 能的蛋白质。
基因敲除或敲入
通过基因工程技术,将目 标基因从蛋白质编码基因 组中删除或插入,以改变 蛋白质的结构和功能。
蛋白质从头设计
总结词:实践应用
详细描述:该书不仅介绍了蛋白质工程的基本原理和方法,还详细介绍了其在各个领域的应用和实践,为读者提供了理论与 实践相结合的学习体验。
THANK YOU
蛋白质特异性不高等
蛋白质工程中,提高蛋白质特异性和功能是重要挑战之一 。解决方案包括合理设计氨基酸序列、引入突变或使用噬 菌体展示技术等。
蛋白质工程的发展趋势与前景
发展潜力巨大
蛋白质工程作为生物技术领域的重要分支,具有 广泛的应用前景。未来,蛋白质工程将为医药、 农业、能源和环境等领域带来更多创新和突破。
特定功能的蛋白质。
优化
通过重复筛选和突变体的产生, 逐步优化蛋白质的性能,提高其
与抗体的亲和力。
04
蛋白质工程的应用案例
蛋白质工程用于药物设计
蛋白质工程用于药物设计时,可以针对已知的靶点设计出高 活性的药物分子。例如,通过蛋白质工程改造抗体,使其具 有更强的抗肿瘤效果或者更低的副作用。
蛋白质工程还可以优化药物的代谢性质,提高药物的生物利 用度,降低药物的毒副作用。例如,通过蛋白质工程技术改 变药物的代谢途径,减少药物在体内的积累,降低药物的毒 副作用。
工业领域
蛋白质工程在工业领域的应用主要包括生物催化、生物材料、生物信息 等方面。例如,通过蛋白质工程改造酶类,提高其催化效率和特异性, 用于化工、制药等领域。
蛋白质工程
精选ppt
1
一、蛋白质工程崛起的缘由
例如:
满足人类生产 和生活的需要
干扰素(半胱氨酸) 改造 干扰素(丝氨酸)
体外很难保存
体外可以保存半年
玉米中赖氨酸含量比较低
天冬氨酸激酶 (352位的苏氨酸)
玉米中赖氨酸含量可提高数倍
改造
天冬氨酸激酶(异亮氨酸)
二氢吡啶二羧酸合成酶 (104位的天冬酰胺)
14
一、 初级改造
➢通过基因突变方法,以达到改变氨基酸进而改造蛋白 质的目的。 ➢目前,主要采用的基因突变方法:
基因定位突变 盒式突变。
精选ppt
15
➢基因定位突变
根据三联体密码,编码DNA(目的基因)的确定位点, 改变其组成核苷酸的顺序或种类,使基因发生定向变 异,使其控制合成的氨基酸种类、顺序发生改变,合 成出具有预期氨基酸序列的修饰蛋白质。
①延长酶的半衰期;
②提高酶的热稳定性;
③延长药选ppt
21
一、 消除酶的被抑制特性
➢1985年,美国的埃斯特尔借助寡核苷酸介导的定位 突变技术,用19种其他氨基酸分别替代枯草芽孢杆菌 蛋白酶分子第222位残基上易氧化的Met,获得了一系 列活性差异很大的突变酶。发现除了用Cys代替Met的 突变体以外,其他突变体的酶活性都降低了。
精选ppt
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六、修饰酶的催化特异性
➢利用定点突变技术葡萄糖淀粉酶的催化特性。如将 活性中心的GLu、Asp被Gln、Asn取代时,突变体酶分 解α-1,4糖苷键和α-1,4糖苷键的活性比例发生明 显改变
七、修饰Nisin的生物防腐效应 ➢ Nisin是乳酸球菌分泌的有较强抗菌作用的小分子 肽,可用于罐头食品、乳制品、肉制品的保藏 ➢Nisin由34个氨基酸残基构成
高中生物选修三知识点蛋白质工程的崛起
1.蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础,通过基因修饰或基因合成,对现有蛋白质进行改造,或制造一种新的蛋白质,以满足人们生产和生活的需求。与基因工程合成的蛋白质的主要区别是基因工程只能合成自然界已存在的蛋白质,而蛋白质工程可合成一些自然界中原本不存在的蛋白质。
2.玉米中赖氨酸含量较低,原因是赖氨酸合成过程中两种酶――天冬氨酶激酶和二氢吡啶二羧酶合成酶的活性受细胞内赖氨酸浓度的影响,当赖氨酸达到一定量时会抑制这两种酶活性质结构→推测氨基酸序列→找出对应的脱氧核苷酸序列。
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第一节 蛋白质工程概述
二、蛋白质概述
(一)蛋白质的组成 组成人体蛋白质的氨基酸仅有20种其中除甘氨 酸和脯氨酸外,均属于 L-α-氨基酸
第一节 蛋白质工程概述
二、蛋白质概述
(二)蛋白质的结构 一级结构 二级结构 三级结构 四级结构
第一节 蛋白质工程概述
二、蛋白质概述
【技能目标】
第一节 蛋白质工程概述
一、蛋白质工程的概念
根据对蛋白质己知结构和功能的了解,借助计 算机辅助设计,利用基因定点诱变等技术,特 异性地对现有蛋白质结构基因进行改造,借以 改善蛋白质的物理和化学性质,如提高蛋白质 的热稳定性、酶的专一性等,或者利用化学和 物理手段,对目标基因按预期设计进行进行修 饰和改造,合成新的蛋白质的技术手段,并可 以借此对蛋白质的结构与功能的关系进行更加 深入的研究。
(三)蛋白质结构与功能的关系 1.蛋白质一级结构与功能的关系 (1)相似的结构具有相似的功能 (2)不同结构具有不同的功能 2.蛋白质空间结构与功能的关系
空间结构发生改变,其功能活性也必然会随之 改变
第二节 蛋白质工程的研究方法
一、蛋白质工程的研究策略
研究过程就是通过严格的分子设计,把它定向 地改造成一个具有预期的新的特性的蛋白质。 一种是对天然蛋白质进行改造;另一种是完全 重建一个新的蛋白质。在具体操作中,前者是 对天然蛋白质中的少数几个氨基酸残基进行的 替换(小改)、分子剪裁(中改)或者局部重建(大 改);后者是从头设计—个全新的蛋白质。我们 目前的蛋白质工程研究中主要进行的是“小改” 和“中改”。
第三节 蛋白质工程的应用实例
三、人白细胞介素-2
人们用蛋白质工程中的定位诱变技术将Cys125的 密码TGT转换成TCT或GCA,使Cys125转换成丝 氨酸或丙氨酸,避免了错误配对的产生。结果 不但使IL-2的生物活性不受影响,而且其热稳 定性等方面也得到了较明显的改善。工程IL-2 目前已被美国FDA批准上市,用于治疗肾细胞 瘤。我国卫生部也已经批准了在国内试生产基 因工程白细胞介素-2。
一、胰蛋白分离后, 会得到4个具有胰蛋白酶活性的片段。通过对N 末端残基的分析,表明这些活性产物是由于 Arg117-Val118、Lys145-Ser146及Lys159-Ala160处发生 了断裂而出现的。人们运用了蛋白质工程手段, 对Arg117位自溶点进行了缺失突变,最终得到了 稳定性明显提高的突变株。
第二节 蛋白质工程的研究方法
二、改变现有蛋白质的结构
(一)小改——少数几个氨基酸残基的替换 定点突变是目前蛋白质工程研究的主要技术手 段。 (二)中改——分子剪裁
分子剪裁是指在对天然蛋白质的改造中替换一 个肽段或一个结构域。
第二节 蛋白质工程的研究方法
三、蛋白质全新设计
对蛋白质的全新设计所应用的技术手段是我们 前面所提到的“大改”或“从头设计“工作 是在人们认识蛋白质、掌握其结构规律并了解 其结构功能关系的基础上进行的。同时也是人 们更加深入全面认识蛋白质的一个过程,它的 目的是人工创造出自然界中不存在的蛋白质分 子,使之具有人们所需要的特殊结构和功能, 为人类所利用。 目前该技术仍处于实验初级阶段。
第三节 蛋白质工程的应用实例
二、金属硫蛋白
金属硫蛋白(metallothionein,MT)是由微生物和植 物产生的金属结合蛋白,是一类富含半胱氨酸 的短肽,是半胱氨酸残基和金属含量极高的蛋 白质,可以通过半胱氨酸的巯基结合大量的金 属素,对多种重金属有高度的亲和性。一般由 两个大小相近,结构与功能类似的结构域组成, 即α-结构域和β-结构域。人们为将含有α-结构域 的基因转移到烟草中,成功的获得了对镉,铜, 铅等重金属具有较高抗性的工程株。
第三节 蛋白质工程的应用实例
五、枯草杆菌蛋白酶
枯草杆菌蛋白酶可以催化蛋白质,把蛋白质水 解成氨基酸。具有重要的应用价值,被广泛应 用在洗涤剂、制革及丝绸工业中,是一种重要 的工业用酶。三维结构及编码基因目前已经基 本搞清楚,而且配有合适的克隆、表达系统以 及准确的定量分析催化活性的方法,因此缺点 目前已经可以通过蛋白质工程得到改进
第三节 蛋白质工程的应用实例
一、胰蛋白酶
胰蛋白酶(EC3.4.21.4)是丝氨酸蛋白酶类,它 是一条单链肽,由223个氨基酸残基组成,N末 端为异亮氨酸。主要作用于精氨酸或赖氨酸羧 基端的肽键。是特异性最强的蛋白酶,在决定 蛋白质的氨基酸排列中,它成为不可缺少的工 具。
第三节 蛋白质工程的应用实例
第三节 蛋白质工程的应用实例
四、组织纤维蛋白溶酶原激活因子
利用基因定点诱变技术,改变tPA分子中的某些 糖基化氨基酸而减少或避免了糖基化,有效地减 缓了它在血浆中被清除的速率,达到了延长其半 寿期的目的,临床应用价值得到有效提高
第三节 蛋白质工程的应用实例
五、枯草杆菌蛋白酶
枯草杆菌蛋白酶(subtilisin)是由枯草芽抱杆菌 (Bacillus subtilis)合成的一种丝氨酸蛋白酶。枯草 杆菌蛋白酶根据来源的不同可分为Carlsberg,E, BL,YaB等多种。
第三节 蛋白质工程的应用实例
四、组织纤维蛋白溶酶原激活因子
tPA能够切割纤溶酶原形成纤溶酶,从而激活纤 溶作用(fibrino1ysis),使血栓溶解。作为一种高 效特异性溶血栓药物。优点 :(1)血栓选择性高但 几乎不激活循环血液中的纤溶系统,可直接静 脉注射;(2)对中毒性休克引起的弥散性血管内 凝血疗效显著等。
第五章 蛋白质工程
第五章 蛋白质工程
【知识目标】
①了解蛋白质工程的产生背景及目前的发展状况。 ②理解蛋白质工程的主要的研究过程及具体操作手段。 ③掌握蛋白质工程的概念并明确其研究的目标。 ①能够运用蛋白质工程的基本原理解析在实际生产生 活中蛋白质工程应用的实例。 ②掌握胰蛋白酶酶活力的测定方法。
第三节 蛋白质工程的应用实例
三、人白细胞介素-2
IL-2是第—个被发现的白细胞介素。天然人白 细胞介素-2是一个由133个氨基酸残基组成的多 肽,133个氨基酸中共有3个半胱氨酸,其中有 一个半胱氨酸(Cys125)以游离方式存在,而另 两个半胱氨酸(Cys58和Cys105)缩合成活性所必 需的二硫键。