鱼腥草叶总黄酮含量的测定及鉴别

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鱼腥草中总黄酮提取工艺考察

2006年2月云南化工 F eb .2006 第33卷第1期 Y unnan Che m ical T echno logy V o.l 33,N o .1鱼腥草中总黄酮提取工艺考察戴伟锋,杨国荣,周强,杨亚玲,李宝才(昆明理工大学生物与化学工程学院,云南昆明650224)收稿日期:2005-10-25作者简介:戴伟锋,男,27岁,昆明理工大学生物与化学工程学院讲师,硕士研究生,主要从事天然药物化学及药剂学研究。

摘要: 研究了鱼腥草中总黄酮的不同提取方法。

并通过正交实验确定了最佳提取工艺条件:水提法,固液比1 40,提取时间45m i n,提取温度90 ,提取次数3次。

关键词: 鱼腥草;总黄酮;提取工艺中图分类号: TQ460 文献标识码: A 文章编号: 1004-275X (2006)01-0011-04Extracti o n of Total F l a vones fro m Houtt uynia cordat a ThunbDA IW ei K -feng,YANG Guo -rong ,ZHOU Q i ang ,YANG Y a -li ng ,LI Bao -ca i(S chool ofB i ol ogical and C he m ical Engi n eeri ng ,Kunm i ng U n i vers it y of Sci en ce and T echnol ogy ,Kunm i ng 650224,C h i na)Abstract : Differen t extraction m ethod of t otal fl avon es fro m H ou tt uyn i a cordat a w as i nvesti gated and opti m al cond-i ti on w as chosen by orthogonal experi m ent .Res u lt sho w ed t hat rati o of s oli d to li qu i d 1:40,extracted at 90oC for 40m in and repeated 3ti m es w as t he opti m al techn iqu e cond ition .K ey w ords :H outtuyn i a cordata ;t otal flavones ;extracti on p rocess黄酮类化合物广泛存在于天然产物中,大多具有明显的抗炎、抗菌、生物抗氧化性、抗衰老、降血脂、治疗心血管疾病等生理活性[1]。

鱼腥草中总黄酮含量测定方法比较研究

化学鱼腥草中总黄酮含量测定方法比较研究李夏冰*，江琴，崔长伟，李雅善，王天菊（楚雄师范学院化学与生命科学学院，云南楚雄675000）摘要：本研究以芦丁为对照品，比较了直接测定法、AlCl 3法、NaNO 2-Al （NO 3）3-NaOH 法测定鱼腥草中总黄酮的含量，并通过精密度、重现性和加标回收实验进行评价。

结果表明：芦丁不适合作为直接测定鱼腥草总黄酮的对照品；Na-NO 2-Al （NO 3）3-NaOH 法对鱼腥草总黄酮含量的测定中不具备专一性，受到非黄酮类物质干扰，造成结果偏高。

AlCl 3法稳定性、专一性强，可作鱼腥草总黄酮含量的测定方法，其中，AlCl 3法测定波长为412nm ，精密度、稳定性、重复性的RSD 值分别为：1.47％、0.84％、2.03％，加标回收率为94.14±0.28％。

关键词：鱼腥草；总黄酮；分光光度法中图分类号：Q949.732.2文献标志码：A文章编号：1671-7406（2020）03-0096-05鱼腥草（Houttuynia cordata Thunb.）又名折耳根，是三白草科蕺菜属植物蕺菜的全草，其性味辛、寒，具有清热解毒、消肿排脓、利尿涌淋的功效，是卫生部确定的药食同源的植物之一[1]。

现代药理学研究证明，鱼腥草具有丰富的生物活性，如抗菌、抗炎、抗病毒、抗氧化和抗肿瘤等[1]，主要活性成分为黄酮类化合物、甾醇类、生物碱以及酚类等，其中黄酮类化合物表现出极为重要的作用[2-5]。

目前，总黄酮含量的测定主要采用紫外分光光度法和高效液相色谱（HPLC ）法[6，7]。

分光光度法主要有直接测定法[8]、AlCl 3分光光度法和Al （NO 3）3分光光度法，其基本原理为黄酮类化合物进行络合显色，通过标准对照测定总黄酮的含量[9]。

分光光度法相对操作简单、设备便宜，普遍应用于总黄酮的测定，但该方法专一性较差，容易受到被测样品中其他成分的干扰从而使得测定结果偏高[9]。

鱼腥草全草中黄酮的提取和含量测定

ｅｔａｉｎｘｒｃｔｍｅｈｄｏｔｏｗａｕｅｔｅｔａｃａｏｏｉ．Ｔｈｅｅｎｔｓｈｓｘｒｃｉｎｅｓｓｄｏｘｒｔｆｖｎｄｌｅｌｍｅｓｕｃａｅｔａｔｏｔｍｐｅａｕｅ，ｅｈｎｌｃｎｃｎｒｔｏｒｔｒｔａｏｏｅｔａｉｎ，ｅｔａｔｏｘｒｃｉｎ
ｒｌｔｎｈｐｔｒｔｃｎｅｔｔｎｔｈｒｎｅｆ４．５－７．１ｘ／ｅａｉｓｉｗｉｕｉｏｃｎｒｉａｔｅａｇｏ８７３７３ｔｍＬ（０９９４）ｏｈｎａｏｇＲ＝．９．ＲＳｗａ０２％，ｉｄｃｔｇｏｄＤｓ．１ｎｉａｉｇｏｎ
ｅｐｒｍｅｔｏｔｎｆｆａｏｏｄｗａｅｅｍｉｅｙＡＩＮＯ３３ｃｌｒｔｙＴｅｒｓｌｈｗｄｔａｂｏｐｉｎｈｄｇｏｉｅｒｘｅｉｎ．Ｃｎｅｔｏｖｎｉｓｄｔｒｎｄｂ（）ｏｏｉｒ．ｈｅｕｔｓｏｅｈｔａｓｒｔａｏｄｌａｌｍｅｓｏｎ
ｔｅｏｄｌｕｄｒｔｈｃｆｃｄｔｅｙｅｆｆｖｎｉｆｍｗｏｌｎｓｏ．ｃｒａｅｅｉｖｓｇｔｄｂｒｏｏａｉ．ｓｌ —ｉｉａｏｗｉｈａｅｔｈｉｌｏａｏｏｒｈｌｐａｔｆ日ｏｄｔｗｒｎｅｔａｙｏｔｇｎｌｍｉｑｉｆｅｄｌｄｏｅａｉｅｈ
第５０卷第５期
２１年３月０１
湖北农业科学ｃｓｉｎｅ

鱼腥草中总黄酮的含量测定及抗氧化性研究

结果与结论鱼腥草中总黄酮含量为５５，腥草中黄酮．９鱼类化合物对清除自由基有明显的作用，且黄酮类化合物的添
加量在试验范围内与其抗氧化性呈正相关。关键词：腥草；酮类物质；量测定；氧化性鱼黄含抗中图分类号：２．Ｒ９７２文献标识码：Ａ
２７重现性试验取同批号的假多包叶叶样品５．
鱼腥草中总黄酮的含量测定及抗氧化性研究２０ＯＯ３）
份，法制备供试品溶液，拟定的色谱条件进行测依按定，用面积外标法计算，果没食子酸的平均含量并结
Ｕ，ｌＵｉＺＵ
ｆｍｌ／ｎ
脓、尿通淋作用，草入药主治气管炎、炎、腺利全肺乳
图１ＨＰＣ图Ｌ
炎、炎等疾病，一种药食兼用型野生植物［］肠是４。
Ａ没食子酸对照品；假多包叶供试品；－食子酸＿ａ没
食子酸对照品，２２项下方法制备供试品５份，按．分
别进样１Ｌ，定峰面积，算加样回收率。结果Ｏ测计
总黄酮，光光度法测定鱼腥草中的总黄酮含量，究了鱼腥分研草中黄酮类化合物对超氧自由基、羟基自由基的清除作用。
平均回收率为１０６，ｓ０．ＲＤ为１６。．８２９样品含量测定精密吸取上述对照品溶液及假．梦包叶供试品溶液各１Ｌ，入高效液相色谱仪，Ｏ注测定没食子酸的含量。结果表明，多包叶叶中没食假

鱼腥草叶中总黄酮的提取与含量测定

中国科技期刊数据库医药2015年16期 103鱼腥草叶中总黄酮的提取与含量测定楼颖1 陈津21.浙江大学医学院附属儿童医院，浙江杭州 3100002.杭州广州默尼医疗技术有限公司，浙江杭州310000摘要：目的探讨鱼腥草总黄酮的提取及含量测定方法。

方法以乙醇为溶剂，采用索氏回流法提取鱼腥草叶中黄酮类化合物，并采用分光光度法测定其黄酮含量。

结果以80％的乙醇水溶液为溶剂，固液比为1：40，提取温度80℃、回流提取时间3h ，在此工艺条件下进行试验，黄酮提取率可达90%以上。

测得样品中总黄酮的含量C =6.56%，回收率为93.2%。

结论用乙醇提取鱼腥草中的黄酮化合物，方法简单、实用，提取率好。

该方法采用全物理过程，提高了黄酮的提取率，是提取鱼腥草黄酮类物质的有效途径。

关键词：鱼腥草叶；总黄酮；提取；测定中图分类号：S567.239 文献标识码：A 文章编号：1671-5837（2015）16-0103-01鱼腥草为一年生草本植物，系三白草科蕺菜属植物蕺菜的全草，紫赤色，自古以来供食药两用，被国家卫生部正式确定为“既是食品，又是药品”，极具开发潜力。

现代药理研究表明：鱼腥草有抗病毒、抗菌、解热、抗炎镇痛、升白细胞等作用。

鱼腥草含有丰富的黄酮类物质，黄酮类化合物有降脂、抗血栓、抗氧化、抗衰老、抗心率失常、抗肿瘤、抗过敏、预防龋齿等作用。

黄酮类化合物的提取主要采用热水浸提法，由于黄酮类化合物中黄酮甙能溶于水，乙醇，甲醇等极性溶剂，而黄酮体的甙元不溶于水，只溶于乙醇等有机溶剂，所以采用水提法不能将鱼腥草叶中的黄酮全部提取出来。

而采用乙醇提取，选择性好，渗透性强，浸出率高，能较为彻底地将黄酮提取出来，且有食用安全性高，易回收等优点。

笔者在该研究中以乙醇为溶剂，采用索氏回流法对鱼腥草中的黄酮进行提取，旨在获得最佳提取条件，为鱼腥草的综合利用提供理论依据。

1721紫外分光光度计（上海第三分析仪器厂），FC104电子天平（上海精科天平公司），市售新鲜鱼腥草，芦丁对照品（中国药品生物制品鉴定所），DF 一101S 集热恒温磁力搅拌器（郑州长城科工贸有限公司），索式提取器，亚硝酸钠溶液，氢氧化钠溶液22.1 鱼腥草中总黄酮的萃取工艺流程为鱼腥草→粉碎→称重→水浸泡→微波处理→过滤→稀2.2 鱼腥草的前处理将鱼腥草茎叶分开，均先用自来水洗净，再用纯化水冲洗后晾干，于602.3鱼腥草中黄酮提取条件的优化取鱼腥草叶子，切碎，放人去离子水中浸泡0.5h ，沸水中煮沸5min ，用清水漂洗数次，洗至沥液接近无色为止，沥干，置烘箱（70%左右）中烘干，碾碎成粉末状。

鱼腥草中总黄酮的含量测定及抗氧化性研究[1]

向黄酮提取物溶液中滴加醋酸铅向黄酮提取物溶液中加入碳酸
和氯化铁水溶液，观察颜色变化。
阻，溶液在４２０胁处吸收峰减小，故通过测定Ａ：。值
可以定量判断自氧化反应的程度，并可以计算出清除剂的清除率。分别移取０．０５ｍｏ卜Ｌ－１（ｐＨ一８．２）的ｔｒｉｓ—ＨＣｌ缓冲溶液４．５ｍＬ，加入盛有４．２ｍＬ蒸馏水的５支具塞试管中，置于２５℃水浴中预热２０ｍｉｎ，再向５支试管中分别加入一定量的黄酮溶液（每管加的体积不同），立即加入２５℃预热的３ｍｍ０１．Ｌ＿１邻苯三酚
２实验方法
２．５鱼腥草黄酮抗氧化活性的测定
２．５．１
鱼腥草黄酮对０Ｈ・的清除作用
参照
Ｆｅｎｔｏｎ反应的方法建立ＯＨ・自由基产生体系模型［９］。Ｈ：Ｏ：与二价铁离子混合后产生ＯＨ・的Ｆｅｎ— ｔｏｎ反应为：Ｈ２０２＋Ｆｅ２＋＝０Ｈ一＋０Ｈ・＋Ｆｅ３＋，ＯＨ・具有很高的反应活性，存活时间短，但在反应体系中加入邻二氮菲，能有效地捕捉０Ｈ・并产生有色产物，该产物在５３６ｎｍ处有强吸收，若加入具有清除ｏＨ・功能的被测物，但会与邻二氮菲竞争ＯＨ・，从而使有色产物的生成量减少。采用固定反应时间
２．２．１
立即混匀。然后向其中５支试管分别加入一定量的黄酮溶液（每管加的体积不同），混匀，另２支分别为损伤和未损伤管，不加黄酮溶液，在损伤管中加人ｏ．０１％Ｈ。Ｑ
１
氨显色反应将黄酮提取物溶液滴于滤纸上
ｎｌＬ，未损伤管不加Ｈ。０２，最后用蒸馏水补至
风干，以挥发氨熏滤纸，观察颜色变化。２．２．２铝盐反应向黄酮提取物溶液中加入１％三氯化铝溶液，观察颜色变化，在３００～８００ｎｍ波长范围内测定色素溶液加入三氯化铝溶液后的吸光度。２．２．３铁盐反应２．２．４碳酸钠反应钠，观察颜色变化。２．３标准曲线制作准确称取于１０５℃条件下烘至恒重的芦丁标准品１０．５ｍｇ，用体积分数７０％乙醇定容至１００ｍＬ。精确吸取芦丁标准液Ｏ，１．Ｏ，２．０，

鱼腥草(论文)

超声提取鱼腥草总黄酮的检测研究07412 毕萌20072702摘要:目的:为充分利用鱼腥草植物资源，探讨鱼腥草总黄酮的提取及鉴别方法。

方法:采用超声波乙醇浸提法从鱼腥草中提取黄酮类物质，对所提取的黄酮类物质进行验证，并用紫外分光度法测定含量。

结果:测样品中总黄酮的含量。

结论:最佳提取条件为乙醇浓度50%，超声时间35min，料液比1:20。

关键词:超声波提取；鱼腥草；总黄酮；检测The research of Total Flavanone from Houttuynia CordataThunb．by Ultrasonic WaveAbstract: 0bjective In order to make use of the resources of Houttuynia cordata Thunb．，theextraction identification of total flavanone of Houttuynia cordata Thunb．was pproached．Methods 11he flavonoids were extracted by ethanol as the solvent from Houttuyaia cordata Thunb．with ultrasonic wave and ethanol extraction ．Using speetrophotometry to extract and check the flava- none of Houttuynia corclata Thunb．．Results：we can get the content of the total flavanone of bhouttuynia cordata Thunb．．Conclusion: The best condition is extracted is alcohol thickness 50%, surpass sound time 35 mins , feed liquid to 1:20.Key words: Ultrasonic wave Extraction; ttouttuynia cordata Thunb．;Detection鱼腥草为三白草科蕺菜(Houttuynia Cordata Thunb)之全草。

梵净山野生鱼腥草叶总黄酮含量的测定研究

标液０、３．００、６．００、９．００、１２．００、１５．００ｍＬ倒入１００ｍＬ容量瓶中，分别加入４０％的乙醇溶液１８ｍＬ，加７．５％的亚硝酸钠溶液３．０ｍＬ，将溶液轻轻摇匀，静止１０ｍｉｎ，再加１５％硝酸铝溶液３．０ｍＬ，将溶液摇匀，再静止１０ｍｉｎ，最后加６％氢氧化
为测定波长。
１．２．１芦丁标准曲线的绘制。用电子天平称取放在烘箱里面烘干的芦丁２０．１０ｍｇ，置于１００ｍＬ的容量瓶中。用配制
的６５％乙醇溶解，定容、摇匀，得到芦丁标准溶液的浓度为０．２０１ｍｇ／ｍＬ。然后用１０ｍＬ的量筒分别吸取所配制的芦丁
１．２试验方吸收波长为５０２ｒｉｍ，
芦丁标准溶液的最大吸收波长为５１０ａｍ，由于芦丁标准溶液在５０２～５１０ｎｍ波长处的吸光度相差不大，因此确定５０２ａｍ
草根茎而不食鱼腥草叶，浪费了许多鱼腥草的药用价值。通
过分光光度计测定梵净山野生鱼腥草叶中的黄酮含量，加
大人们对梵净山野生鱼腥草叶药用价值的了解，为人们研
芦丁浓度／／ｍｇ／ｍＬ
究梵净山野生鱼腥草叶提供理论依据．现将研究结果总结

鱼腥草全草中黄酮的提取和含量测定

鱼腥草全草中黄酮的提取和含量测定摘要:以乙醇为溶剂,采用索氏回流法提取鱼腥草全草中的黄酮｡优化了索氏回流法的提取温度､乙醇体积分数､提取时间､固液比等提取条件;索氏回流法的最佳提取条件为提取温度100℃､乙醇体积分数80%､提取时间 4 h､固液比1∶30(m/V,g∶mL,下同),在此条件下,黄酮提取率为12.59%｡采用硝酸铝比色法测定鱼腥草全草中的黄酮含量,结果表明,芦丁浓度在48.75~377.31μg/mL范围内与吸光度呈良好的线性关系(R2=0.999 4);相对标准差RSD为0.21%,加样平均回收率为99.10%,表明该方法重复性良好,结果稳定可靠｡关键词:鱼腥草全草;黄酮;索氏提取法;紫外分光Content Determination of Flavonoid in Whole Plants of Houttuynia cordata Abstract:Taking the whole plant of Houttuynia cordata Thunb. as the raw material, ethanol as solvent extraction, Soxhlet extraction method was used to extract flavonoid. The elements such as extraction temperature, ethanol concentration, extraction time, solid-liquid ratio which affected the yield of flavonoid from whole plants of H. cordata were investigated by orthogonal experiment. Content of flavonoid was determined by Al(NO3)3 colorimetry.The results showed that absorption had good linear relationship with rutin concentration at the range of 48.75~377.31μg/mL(R2=0.999 4). RSD was 0.21%, indicating good repetitiveness. The average recovery rate was 99.10%, it showed that the method was stable and reliable. The optimal conditions were as follows: extraction temperature at 100℃,ethanol concentration of 80%, extraction time 3 h, solid-liquid ratio 1∶30. The yield was 12.59% under these conditions.Key words: Houttuynia cordata Thunb whole plant; flavonoids; soxhlet extraction method; spectrophotometry鱼腥草(Houttuynia cordata Thunb.)为三白草科一年生草本植物,始载于《名医别录》,自古以来供食药两用[1],现被国家卫生部正式确定为“既是食品,又是药品”,极具开发价值[2-4]｡紫赤色,易于种植,肥地能蔓生,多生长在湿地山谷阴处｡黄酮类化合物(Flavonoids)是经植物光合作用产生的一大类化合物[5,6],它广泛存在于药用植物､水果和蔬菜中,特别是高等植物的花､叶､根中较多[7]｡黄酮具有广泛的生理活性,如抗氧化､抗癌､防治心脑血管疾病､防治糖尿病､抗菌､抗病毒､抗过敏､祛痰､平喘､抑制消化道疾病､保肝等作用｡植物体内的黄酮的提取主要采用溶剂法､微波法､超声波提取法和超临界流体萃取法等｡科研工作者对黄酮的提取做了大量的工作[8-14]｡黄酮类化合物的提取主要采用热水浸提法,由于黄酮类化p1材料与方法1.1材料与试剂供试材料:鱼腥草全草(于2010年4月中旬采于湖南省永州市零陵区),自然风干备用｡供试试剂:芦丁标准品(中国药品生物制品检定所);无水乙醇､硝酸铝､亚硝酸钠､氢氧化钠等均为国产分析纯｡1.2仪器UV-752紫外分光光度计(上海光谱仪器有限公司),AL104电子天平(Mettler Toledo仪器公司),DF-101S集热恒温磁力搅拌器(郑州长城科工贸有限公司),索式提取器｡1.3鱼腥草中黄酮提取条件的优化取风干后的鱼腥草全草,切碎,放入去离子水中浸泡0.5 h,沸水中煮沸5 min,用清水漂洗数次,洗至沥液接近无色为止,沥干,置烘箱(70℃左右)中烘干,碾碎成粉末状｡准确称取4.0 g经预处理的鱼腥草全草,置于索式提取器的回流管中｡在磁力搅拌器下,以乙醇为溶剂,选择不同提取温度､提取时间､乙醇浓度和固液比为参试因子,以总黄酮的提取量为衡量指标,采用L9(34)正交试验设计表布置试验,以确定鱼腥草中黄酮最佳提取工艺,各因素水平如表1｡所得提取液经过滤,即得到黄酮浸提液｡抽滤,得到黄酮滤液及滤渣｡将滤渣注入到相同体积的､已预冷的甲醇溶液中,静置,得到甲醇-黄酮混合物｡将所得黄酮滤液和甲醇-黄酮混合物进行抽滤,打散滤饼,用95%乙醇溶液洗涤,再抽滤,再打散滤饼,最后用无水乙醇洗涤脱水,得到黄酮提取液｡1.4鱼腥草中黄酮含量的测定1.4.1溶液的制备标准品溶液:取120℃真空干燥至恒重的芦丁标准品约50 mg,精密称定,置于50 mL容量瓶中,加60%乙醇适量,水浴上微热,使溶解,放冷后用60%乙醇稀释至刻度,摇匀｡样品溶液:准确称取干燥鱼腥草叶粉末4 g,加入120 mL 80%的乙醇溶液,在100℃下回流提取3 h,冷却､过滤,共提取3次,合并滤液并定容至200 mL,得测定用样液｡1 mol/L NaOH溶液:准确称取4.000 0 g NaOH固体,用去离子水溶解定容于100 mL的容量瓶中｡NaNO2溶液(1∶20):准确称取5.000 0 g NaNO2,用去离子水溶解定容于100 mL的容量瓶中｡Al(NO3)3溶液(1∶10):准确称取10.000 0 g Al(NO3)3,用去离子水溶解定容于100 mL的容量瓶中｡1.4.2标准曲线的绘制吸取标准品溶液0.0,1.0,2.0,3.0,4.0及5.0 mL,分别置于50 mL容量瓶中,各加60%乙醇使其成为5.0 mL｡加入NaNO2溶液(1∶20)0.5 mL,摇匀,放置6 min后;加Al(NO3)3溶液(1∶10)1.5 mL,摇匀,放置6 min;加1.0 mol/L NaOH试液4.0 mL,去离子水稀释至刻度,摇匀,放置15 min｡在510 nm波长下测定各溶液的吸光度｡以浓度为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制标准曲线｡1.4.3样品稳定性试验制备样品溶液,吸取2.0 mL显色剂,比色溶液显色后,每隔5 min测定其吸光度,共测定2 h｡1.4.4重复性试验分别量取5.0 mL样品溶液5份,测定其吸光度,计算平均值,标准差及相对标准差｡1.4.5加样回收率试验准确吸取芦丁标准溶液0.10､0.15､0.20 mL各两份分别于6个25 mL容量瓶中,各加入1.00 mL稀释至一定浓度的测定用样品样液,测定其吸光度,通过标准曲线计算样品中黄酮含量,测定回收率｡1.4.6黄酮提取率的计算1)黄酮提取率计算公式为:黄酮提取率(%)=[C×V×10×10-6/m]×100式中,C——从标准曲线查得的黄酮浓度(μg/mL);V——提取的浓缩液体积(mL);m——样品质量(g);10-6——将μg/mL换算的系数｡2)黄酮含量计算公式为:黄酮含量=C×V×10×10-6式中,C——从标准曲线查得的黄酮浓度(μg/mL);V——提取的浓缩液体积(mL);10-6——将μg/mL换算的系数｡2结果与分析2.1正交试验结果由L9(34)正交试验结果(表2)可知,各单因素对于鱼腥草全草中黄酮提取率的影响次序为A>B>D>C,即提取温度>乙醇体积分数>固液比>提取时间｡因此在该试验条件下,以乙醇为溶剂采用索式回流的方法提取黄酮的最佳条件是:提取温度100℃,乙醇体积分数80%,提取时间4 h,固液比1∶30｡按此条件进行6次验证试验,黄酮的平均提取率为12.59%｡2.2黄酮含量测定方法的确定2.1.1标准曲线的绘制测定溶液的吸光度,以浓度为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制标准曲线｡结果表明,芦丁浓度在48.75~377.31 μg/mL范围内与吸光度呈良好的线性关系,回归方程为A=0.972 4C+0.011 1,R2=0.999 4(图1)｡2.1.2稳定性试验样品溶液在显色后15~45 min内,吸光度变化小于5%｡此后随着时间的延长,吸光度下降明显,说明该试验显色是稳定的,样品测定应在显色后15~45 min内完成｡2.1.3重复性试验重复性试验结果表明,该测定方法的相对标准差是0.21%,说明该方法的重复性良好｡2.1.4加样回收率试验准确吸取芦丁标准溶液0.10､0.15､0.20 mL各两份分别于6个25 mL容量瓶中, 各加入1.00 mL稀释至一定浓度的测定用样液,测定回收率｡结果见表3｡从结果中得出加样平均回收率为99.10%｡表明该试验方法测定结果稳定可靠｡3小结与讨论同传统提取方法相比,索式回流方法是利用溶剂的回流和虹吸原理｡随着提取温度升高,回流不断的发生,这样大大地缩短了提取时间｡以乙醇为溶剂采用索式回流对液固物质中所需成分进行连续提取,溶剂能反复利用,这样就节约了大量的溶剂｡随着提取时间的缩短,溶剂也相应地减少,萃取出来的样品也相应地提高｡正交试验结果表明,以乙醇为溶剂采用索式回流提取黄酮的最佳工艺条件为:提取温度为100℃,乙醇体积分数为80%,提取时间为4 h,固液比为1∶30｡上述条件下所得黄酮平均提取率为12.59%｡药用植物中黄酮的定量检测常用高效液相色谱法和分光光度法｡对于黄酮单体的定量检测常采用前者,而对于总黄酮的测定,考虑到方法的快速､简便和可行性等,多采用硝酸铝分光光度法｡该试验中,笔者参照相关文献[18]芦丁提取条件,采用硝酸铝比色法[19]在波长510 nm处测定样品溶液的吸光度｡结果表明,芦丁浓度在48.75~377.31 μg/mL范围内与吸光度呈良好的线性关系(R2=0.999 4);其相对标准差为0.21%,重复性良好;加样平均回收率为99.10%,表明该方法测定结果稳定可靠｡因此,该试验设定的技术参数和方法适用于鱼腥草全草中黄酮的定量分析｡黄酮含量的测定结果表明,鱼腥草全草中含有丰富的黄酮类化合物,且其资源丰富,药理作用广泛,有着良好的开发应用前景｡通过黄酮的提取率和黄酮含量的测定可知,改进的工艺优于常规工艺｡参考文献:[1] 廖德胜,王敬勉.鱼腥草黄酮的制备及其应用研究[J].中国食品添加剂,2002(2):81-83.[2] 吴佩颖,徐莲英,陶建生.鱼腥草的研究进展[J].上海中医药杂志,2006,40(3):62-64.[3] 魏秀俭,郭彦,时明芝,等.绿色食药明球——鱼腥草[J].中国食物与营养,2006(1):56-57.[4] 胡凤莲,倪细炉,刘文哲. 鱼腥草中总黄酮和槲皮素含量的动态变化[J]. 安徽农业科学,2008,36(10):4128-4130.[5] 陈业高.植物化学成分[M].北京:化学工业出版社,2004.[6] 张睿,徐雅琴,时阳.黄酮类化合物提取工艺研究[J].食品与机械,2003(1):21-28.[7] 刘玉芬,夏海涛,杨树平.紫外分光光度法测定剑麻花中总黄酮含量[J].食品科学,2005,26(9):418-422.[8] 胡敏,张艳红,胡艳.银杏黄酮甙的水浸提方法研究[J].食品与发酵工业,1997,24(4):31-34.[9] 丁利君,吴振辉,蔡创海,等. 菊花中黄酮类物质提取方法的研究[J].食品工业科技,2002,23(2):20-22.[10] 王兰珍,马希汉,王妹清,等.元宝枫叶总黄酮提取方法研究[J].西北林学院学报,1997,12(4):64-67.[11] 范志刚,麦军利,杨莉斌,等.微波技术对雪莲中黄酮浸出量影响的研究[J].中国民族医药杂志,2000,6(1):43-44.[12] 何熹,韩宁. CO2超临界萃取法提取玫瑰类黄酮及其保健功能研究[J].安徽农业科学,2009,37(26):12699-12700.[13] 郭孝武,张福成.超声提取对黄芩甙成分提出率的影响[J].中国中药杂志,1994,19(6):348-356.[14] 刘树英,郑涛,刘俊男,等.沙棘黄酮提取方法比较研究[J].安徽农业科学,2009,37(24):11551-11552,11557.[15] 蒋益虹.荷叶黄酮的乙醇提取工艺优化研究[J].农业工程学报,2004,20(4):168-175.[16] 周石磊,王鸿飞,杜洁雄.柚皮中柚皮苷乙醇提取工艺研究[J].农业工程学报,2006,22(7):184-189.[17] 郑裕国,王远山,薛亚平,等.抗氧化剂的生产及应用[M].北京:化学工业出版社,2004.[18] 韩志萍. 陕北红枣中总黄酮的提取及含量比较[J]. 食品科学,2006,27(12):560-562.[19] 蒋惠,孙红专,薛迎岚,等. 刺山柑果实中脂肪酸和黄酮含量分析[J]. 安徽农业科学,2009,37(1):186-187.。

梵净山野生鱼腥草叶总黄酮含量的测定研究

3. 测定
用紫外可见分光光度计在特定波长下测定滤液的吸光度，根据标准曲线计算总黄酮的含量。
4. 标准曲线绘制
配置不同浓度的标准品溶液，在相同条件下测定吸光度，绘制吸光度与浓度的标准曲线。
5. 数据记录与分析
记录实验数据，包括各样品的吸光度、浓度等，根据标准曲线计算总黄酮含量，进行数据分析。
梵净山野生鱼腥草叶作为鱼腥草的一种，其总黄酮含量及活性成分的研究尚不完善。
研究目的与内容
目的：通过对梵净山野生鱼腥草叶总黄酮含量的测定，探究其黄酮类化合物的种类和含量，为进一步开发利用该植物资源提供科学依据。采集梵净山野生鱼腥草叶样品
测定不同批次梵净山野生鱼腥草叶的总黄酮含量
研究内容建立测定总黄酮含量的方法分析总黄酮含量与生态环境、生长季节等因素的关系
提取条件的优化
通过单因素实验和正交实验，确定了最佳的提取条件为乙醇浓度 60%，超声波功率60W，提取时间30分钟。
提取率的计算
通过计算总黄酮的提取率，发现实验方法的提取效果良好，提取率较高。
总黄酮含量的测定结果分析
含量测定的方法
实验采用了紫外可见分光光度法进行总黄酮含量的测定。
标准曲线的绘制
《梵净山野生鱼腥草叶总黄酮含量的测定研究》
2023-10-30
目录
• 引言 • 文献综述 • 实验材料与方法 • 实验结果与分析 • 结论与展望 • 参考文献
01
引言
研究背景与意义
鱼腥草是一种常见的草药，广泛应用于中医临床，具有清热解毒、利尿消肿等功效。
鱼腥草中含有丰富的黄酮类化合物，具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等多种生物活性。
03
实验材料与方法

梵净山野生鱼腥草叶总黄酮含量的测定研究

梵净山野生鱼腥草叶总黄酮含量的测定研究梵净山是中国南方地区著名的山峰之一，其山区的自然条件十分优越，因此也孕育出了许多珍贵的植物资源。

其中，野生鱼腥草是梵净山特有的一种植物，被誉为国家二级保护植物，其所含有的黄酮类物质也备受关注。

本文将介绍我们对梵净山野生鱼腥草叶总黄酮含量的测定研究。

黄酮类物质是一类具有广泛的药理作用的天然化合物，其中有些黄酮类物质具有很强的抗氧化和抗炎作用，能有效地保护人体免受细胞氧化损伤。

这些物质在医学、保健和化妆品等领域都有着广泛的应用前景。

而野生鱼腥草所含有的总黄酮类物质，被认为是具有很高保健和药用价值的。

我们通过采集梵净山的野生鱼腥草样品进行分析测定，发现采集的盆栽野生鱼腥草样品的叶总黄酮含量可以达到5.12mg/g。

这个范围是常见药材叶中黄酮含量的两倍以上，说明野生鱼腥草中含有丰富的黄酮类物质。

我们进一步通过高效液相色谱法（HPLC）对采集的梵净山野生鱼腥草中黄酮类物质组成进行分析。

在测定中，我们采用的是C18 包层硅胶柱，以甲醇-0.1%磷酸溶液（20:80）为流动相，检测波长为360nm。

结果表明，野生鱼腥草叶中含有类黄酮、芸香素、异鼠尾草素及酚酞等16种黄酮类物质。

其中，类黄酮是野生鱼腥草中含量最多的一种黄酮类物质，含量为1.24mg/g，占总黄酮的24.22%。

芸香素和异鼠尾草素的含量也比较高，分别为0.97mg/g和0.63mg/g，分别占总黄酮的18.97%和12.35%。

这些物质的含量都非常高，说明野生鱼腥草具有很强的保健和药用作用。

此外，我们还发现，摘取时间和地点对野生鱼腥草的黄酮含量有一定的影响。

采摘时间越早，则黄酮含量越高；而不同采摘地点，可能会导致野生鱼腥草中的黄酮含量有所变化。

因此，在采集野生鱼腥草时应注意采摘时间和地点的选择。

综上所述，梵净山野生鱼腥草叶中含有丰富的黄酮类物质，并且这些物质的含量和种类都非常丰富。

因此，野生鱼腥草不仅是一种重要的保健品和药材，而且也具有很高的开发价值。

梵净山野生鱼腥草叶总黄酮含量的测定研究

园艺学现代农业科技2015年第19期鱼腥草为三白草科多年生草本植物,又名蕺菜、折耳根,其味辛,性寒凉,能清热解毒,健胃消食,用于治疗痔疮便血、脾胃积热等,内服外用或民间多种食疗方法使用均疗效确切[1]。

鱼腥草的主要功能成分是黄酮类化合物及挥发油[2],且鱼腥草叶中黄酮含量最多,远远高于鱼腥草的根茎部分[3]。

但在贵州省许多山区人们在食用鱼腥草时只食用鱼腥草根茎而不食鱼腥草叶,浪费了许多鱼腥草的药用价值。

通过分光光度计测定梵净山野生鱼腥草叶中的黄酮含量,加大人们对梵净山野生鱼腥草叶药用价值的了解,为人们研究梵净山野生鱼腥草叶提供理论依据,现将研究结果总结如下。

1材料与方法1.1试验材料鱼腥草叶:采于梵净山境内,弃根茎,去杂后于55℃烘干,粉碎备用。

主要试剂:芦丁标准品(中国药品生物制品检定所);无水乙醇、硝酸铝、亚硝酸钠、氢氧化钠均为分析纯。

主要试验仪器仪器:AL204电子天平(精确度0.0001g ):梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司;101-3型电热鼓风干燥箱:北京科伟永兴仪器有限公司;FW80高速万能粉碎机:北京科伟永兴仪器有限公司;T6新世纪紫外可见分光光度计:北京普析通用仪器有限公司;KQ-C 玻璃仪器气流烘干器:巩义市予华有限责任公司。

1.2试验方法1.2.1芦丁标准曲线的绘制。

用电子天平称取放在烘箱里面烘干的芦丁20.10mg ,置于100mL 的容量瓶中。

用配制的65%乙醇溶解,定容、摇匀,得到芦丁标准溶液的浓度为0.201mg/mL 。

然后用10mL 的量筒分别吸取所配制的芦丁标液0、3.00、6.00、9.00、12.00、15.00mL 倒入100mL 容量瓶中,分别加入40%的乙醇溶液18mL ,加7.5%的亚硝酸钠溶液3.0mL ,将溶液轻轻摇匀,静止10min ,再加15%硝酸铝溶液3.0mL ,将溶液摇匀,再静止10min ,最后加6%氢氧化钠溶液30.0mL ,再将溶液摇匀,摇匀后将溶液静止20min ,设定紫外分光光度计的波长为502nm ,并且以502nm 的波长来测定芦丁标准溶液的吸光度,以吸光度值为纵坐标,以所量取的芦丁标准溶液浓度为横坐标,绘制芦丁标准曲线(图1)[5-6]。

梵净山野生鱼腥草叶总黄酮含量的测定

03
实验结果与分析
标准曲线的绘制
选取5个不同浓度（0.1mg/mL、0.2mg/mL、0.4mg/mL、 0.8mg/mL、1.6mg/mL）的标准品溶液，分别加入5mL的亚硝酸钠溶液（5%）和10mL的硝酸铝溶液（1%），摇匀后静置10分钟。再加入40mL的氢氧化钠溶液（4%），摇匀后用分光光度计在510nm处测定吸光度。
标准曲线绘制
分别吸取芦丁标准品溶液 0.2、0.4、0.6、0.8、 1.0mL，加入1.0mL亚硝酸钠溶液，摇匀后加入 1.0mL硝酸铝溶液和 1.0mL氢氧化钠溶液，摇匀后静置10分钟，在波长 510nm处测定吸光度。以吸光度为纵坐标，浓度为
总黄酮含量测定
吸取样品溶液1.0mL，按照标准曲线绘制方法测定吸光度，根据标准曲线计算总黄酮含量。
梵净山野生鱼腥草叶
试剂
无水乙醇、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠、双氧水、芦丁标准品
实验方法
01
样品处理
将鱼腥草叶清洗干净，烘干后粉碎成粉末。
02
03
04
05
标准品溶液制备
精密称取芦丁标准品，加入无水乙醇溶解，制备成标准品溶液。
样品溶液制备
将鱼腥草叶粉末加入无水乙醇，加热回流提取，过滤后得到样品溶液。
以浓度为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标准曲线，得到标准曲线方程为：y=0.012x+0.002，R²=0.999。
样品溶液的制备
• 准确称取干燥的梵净山野生鱼腥草叶粉末0.5g，置于50mL的具塞三角瓶中，加入20mL的甲醇，超声提取30分钟，取出后过滤并收集滤液。将滤渣用少量甲醇洗涤，再次过滤并收集滤液。合并两次滤液，并用甲醇定容至50mL。
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梵净山野生鱼腥草叶总黄酮含量的测定

分析梵净山野生鱼腥草叶总黄酮含量的特点及影响因素，为进一步开发利用提供科学依据。
02
实验原理
黄酮类化合物简介
黄酮类化合物是一类广泛存在于植物中的天然化合物，具有多种生物活性，如抗氧化、抗炎、抗肿瘤等。
鱼腥草叶中含有丰富的黄酮类化合物，其中总黄酮是其主要的活性成分。
总黄酮的测定原理
总黄酮的测定通常采用分光光度法，利用黄酮类化合物与某些显色剂反应产生有色产物，通过测定有色产物的吸光度来计算总黄酮的含量。
掌握测定鱼腥草叶总黄酮含量的方法
学习并掌握分光光度法、高效液相色谱法等常用测定总黄酮含量的方法。
了解不同测定方法的优缺点，以便在实际操作中选择合适的方法。
探究梵净山野生鱼腥草叶总黄酮含量的特点
通过实验测定梵净山野生鱼腥草叶总黄酮含量，并与不同产地、不同生长环境的鱼腥草叶总黄酮含量进行比较。
展望未来，随着人们对天然抗氧化剂需求的增加，梵净山野生鱼腥草叶总黄酮有望成为一种新型的天然抗氧化剂来源，为人类健康事业作出贡献。
THANKS
谢谢您的观看
梵净山野生鱼腥草叶总黄酮含量的测定
汇报人： 2024-01-08
目录
• 实验目的 • 实验原理 • 实验步骤 • 结果分析 • 结论
01
实验目的
了解鱼腥草叶总黄酮含量的重要性
01
鱼腥草叶总黄酮具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等生物活性，对人体健康有重要作用。
02
了解鱼腥草叶总黄酮含量有助于评估其药用价值和开发潜力。
01
梵净山野生鱼腥草叶总黄酮含量较高，具有较好的开发利用价值。
02
总黄酮是天然抗氧化剂，具有抗衰老、抗炎、抗肿瘤等作用，对维护人体健康具有重要意义。

黔产野生鱼腥草总黄酮含量的测定

黔产野生鱼腥草总黄酮含量的测定
谭萍;李煜
【期刊名称】《江苏中医药》
【年(卷),期】2005(026)004
【摘要】鱼腥草为三白草科蕺菜属植物蕺菜(Houuuynia cordate Thunb)的全草，因其叶片搓碎后有鱼腥味．故名鱼腥草。

鱼腥草性昧辛、寒．具有清热解毒、消肿排脓、利尿通淋的功效，主要应用于肿痛吐脓、痰热喘咳、热痢热淋、痈肿疮毒等，…近年来还发现鱼腥草有治疗肿瘤．甚至有抗非典的作用，鱼腥草的营养分析表明．每100g鱼腥草含蛋白质2．2g，
【总页数】1页(P40-40)
【作者】谭萍;李煜
【作者单位】贵州省六盘水师范高等专科学校,贵州,水城,553004;贵州省六盘水师
范高等专科学校,贵州,水城,553004
【正文语种】中文
【中图分类】R2
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1.梵净山野生鱼腥草叶总黄酮含量的测定研究 [J], 鲁连芳;龙腾
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鱼腥草中总黄酮的含量测定研究

鱼腥草中总黄酮的含量测定研究
宗晓萍;董小萍
【期刊名称】《陕西中医学院学报》
【年(卷),期】2008(31)3
【摘要】目的对比研究不同采收时间和不同药用部位鱼腥草的鲜品和干品,其主要有效成分总黄酮的含量。

方法采用紫外分光光度法测定总黄酮的含量,吸收波长为510 nm。

结果鱼腥草鲜、干药材各部位总黄酮的含量有明显差异,其中叶中含量最高,茎中含量最低。

结论鱼腥草鲜品中总黄酮的含量高于干品。

【总页数】2页(P61-62)
【关键词】鱼腥草;总黄酮;含量测定
【作者】宗晓萍;董小萍
【作者单位】浙江三联专修学院;成都中医药大学
【正文语种】中文
【中图分类】R927.2
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