3M 微生物检测方法介绍
ATP(3M技术)
额外耗材 (同位素 放射棒)
1.波长与荧光不同 2.定期人工操作 3.对人伤害
同位素放射棒
波长与荧 光不同
50
3M Clean-Trace™ATP荧光检测仪的软件支持
51
3M Clean-Trace™ ATP荧光检测的技术特点
52
3M Clean-Trace™ ATP 软件
初次清洗后的检测结果 Sample Plan:All Selected Sample Plans
Site ID: A ll Selected Site ID's To tal Test P o int(s) used = 2 : To tal P lan(s) used = 2 : To tal Sites(s) used = 2
39
不要将采样棒遗留在仪器中
否则将可能污染检测腔!
40
采样棒检测完后的处理
其材质与内含的试剂是无害的物质,无需灭菌再抛弃。
41
注意事项 — 仪器
42
充电与电池的持续时间
从无到满电需充2小时,充满后可连续工作10小时。
43
充电注意事项
1. 需使用3M提供的专门的充电器 2. 注意充电线接口的插入方向
3M Clean-Trace™ ATP荧光检测系统
© 3M 2009. All Rights Reserved.
3M纸片法在水质检验工作中的应用
3M纸片法在水质检验工作中的应用
目的探讨3M纸片法在水质检验工作中的应用价值。方法随机采取该辖区内末梢水样品、二次加压水样品和井水样品共54份,分别采用3M Petrifilm 检测纸片法(3M纸片法)和平皿计数法进行水质检验,比较两种方法检测标准菌株和水样中的细菌总数。结果比较两组方法检测大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的结果,差异有统计学意义(P<0.05)。采用3M纸片法检测末梢水样品、二次加压水样品和井水样品的平均菌落数为(32.7±8.31)个,平皿计数法检测的平均菌落数为(22.9±2.58)个,两组方法检测54份水样品平均菌落数比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论3M纸片法检测水质的准确度高、特异性强,方便快捷,具有推广应用价值。
标签:水质检验;3M纸片法;平皿计数法;菌落总数
水是生产生活中不可或缺的重要资源,水质的好坏直接影响着人们的生活质量和身体健康。近年来,环境及水资源污染问题日益严重,水的安全问题也引起了人们的广泛重视。水质检验是检验水质、确保水质安全的重要措施,平皿计数法是多年来被广泛采用的水质检测方法,其操作过程复杂、消毒清洗量大,易出现假阴性结果[1]。为克服该检测方法的不足,人们研制出了更为有效的纸片检测方法。3M纸片法通过在细菌生长所需营养成分中附加着色剂,使其比平皿计数法等传统检测方法更易于判读[2],但其应用价值尚待进一步证实。有鉴于此,该文探讨了3M纸片法在水质检验工作中的应用价值,现报道如下。
1 资料与方法
1.1 检测材料
高压蒸汽灭菌器(山东新华医疗器械公司生产,YXQG02型)、恒温培养箱(沈阳利港净化设备厂生产,420型)、3M Petrifilm检测纸片(美国3M公司)、标准菌株(中国生物制品检定所,大肠杆菌(CMCC44159)、金黄色葡萄球菌(CMCC26001))、该辖区内末梢水样品、二次加压水样品和井水样品共54份。
3m生物指示剂说明书
3m生物指示剂说明书
3M生物指示剂的使用说明书可能因具体型号而有所不同。以下是1292型
生物指示剂的使用说明:
1. 适用范围:适用于121℃下排气及132℃预真空压力蒸汽灭菌器灭菌效果监测。
2. 使用方法:将生物指示剂放入生物测试包中,置于压力蒸汽灭菌器内最难灭菌的位置处,执行正常装载灭菌过程。灭菌完毕后,取出指示剂冷却10
分钟后,将指示剂内部安瓿瓶压碎,在专用的3m快速生物阅读器内培养3小时左右,在3m快速生物阅读器上观察荧光反应。
3. 结果阅读:荧光阳性表示灭菌失败,荧光阴性表示灭菌合格。只有对照管为阳性,其生物监测结果才算有效。
4. 注意事项:该生物指示剂不能用于121℃预真空和132℃下排气压力蒸汽灭菌锅,及干热、化学蒸汽、环氧乙烷和其他的低温灭菌过程。
5. 有效期:24个月。
此外,有些型号的生物指示剂使用方法可能包括将指示剂放于标准测试包中,按国家规范,分别将各测试包放于锅内不同位置,灭菌处理完毕,取出生物指示剂。挤破内含的安瓿,与一支对照管一起放于37℃恒温箱,48小时后,
阅读结果。灭菌管不变色(呈绿色),表示灭菌通过;灭菌管变色(呈黄色),表示灭菌不通过;同时培养的对照管应为阳性(黄色)。
以上信息仅供参考,具体使用方法请参照相应型号的生物指示剂说明书。
3M大肠菌群的测定
3M Petrifilm
3M Petrifilm TM大肠菌群测试片
•含有改良的VRB培养基
•目标菌落为红色带气泡
•35±1°C, 24 ±2 h培
养
•AOAC Offical Method
991.14
3M Petrifilm TM
大肠杆菌/大肠菌群测试片
样品制备
样品制备
接种
接种
接种
培养
解释
微生物限度检测方法
微生物限度检测方法
微生物限度检测是指在药品、食品、化妆品等产品中,对微生
物的数量和种类进行检测,以确保产品的质量安全。微生物限度检
测方法的选择和执行对产品的质量控制和安全性评价具有重要意义。本文将介绍常见的微生物限度检测方法及其应用。
一、培养法。
培养法是一种常见的微生物限度检测方法,它通过将样品接种
在适当的培养基上,利用微生物在培养基上生长、分裂和形成可见
的典型菌落的特性,来检测微生物的数量和种类。培养法主要包括
菌落计数法、膜过滤法等。
菌落计数法是将样品均匀涂布在含有营养物质的琼脂平板上,
经过一定时间的培养后,根据菌落的数量来确定微生物的数量。膜
过滤法是将样品过滤到孔径为0.45μm的膜上,然后将膜放置在含
有营养物质的琼脂平板上培养,根据在膜上形成的菌落数量来确定
微生物的数量。
二、生物学法。
生物学法是利用微生物的生物学特性,通过培养微生物或者利用生物学试剂来检测微生物的数量和种类。生物学法主要包括酶标记法、PCR法等。
酶标记法是利用酶标记的抗体或抗原来检测微生物的数量和种类,其原理是将酶标记的抗体或抗原与待检测微生物发生特异性反应,然后通过酶反应产生显色物质或荧光物质来进行检测。PCR法是利用聚合酶链式反应技术,通过扩增微生物的特异基因序列来检测微生物的数量和种类。
三、物理化学法。
物理化学法是利用微生物的生理生化特性,通过测定微生物的生长代谢产物或者利用特定的物理化学性质来检测微生物的数量和种类。物理化学法主要包括ATP生物发光法、流式细胞术等。
ATP生物发光法是利用微生物在生长过程中产生的ATP来进行检测,通过测定样品中的ATP含量来确定微生物的数量。流式细胞术是利用流式细胞仪对微生物进行快速、高效的检测和鉴定,通过测定微生物在流式细胞仪中的光散射和荧光信号来确定微生物的数量和种类。
微生物 的检测方法
微生物的检测方法
微生物检测是指对环境样品、食品、水体、医药、农业等领域中的微生物进行检测、鉴定和计数的过程。微生物的检测方法有很多种,包括传统培养方法、生物学方法、生物化学方法、分子生物学方法等。下面将介绍一些常见的微生物检测方法。
1. 传统培养方法:
传统的微生物检测方法主要是通过将样品培养在不同的培养基上,利用微生物在特定环境条件下生长繁殖的特性,来检测和计数微生物。常用的培养基有液体培养基和固体培养基。通过观察培养基上是否有菌落的形成,计数菌落数量及进行鉴定。
2. 生物学方法:
生物学方法主要是通过检测微生物的生物学活性来确定其存在与否。例如,利用菌落形成和生长速率、产生气体或腐解物质等,来检测微生物的存在和数量。常用的生物学方法有生化试剂、糖发酵试剂、氧化还原电位检测等。
3. 生物化学方法:
生物化学方法主要是通过检测微生物代谢产物、酶活性和生化反应来判断其存在。例如,通过检测微生物产生的气体、酸碱度的变化、酶活性的测定等方法,来检测微生物的存在和数量。
4. 分子生物学方法:
分子生物学方法是利用分子生物学技术进行微生物的检测和鉴定。例如,通过PCR(聚合酶链式反应)、RT-PCR(逆转录聚合酶链式反应)等方法,检测微生物的特定基因序列,从而对微生物的存在和数量进行准确的鉴定。
5. 免疫学方法:
免疫学方法是利用抗原与抗体的免疫反应来检测和鉴定微生物的存在。常见的方法有免疫荧光法、酶联免疫吸附法(ELISA)、放射免疫法等。通过与微生物特异性抗体结合,检测抗原-抗体反应产生的信号来确定微生物的存在。
3M测试方法讲座幻灯片-110页PPT精选文档
Microbiology
3MTM PetrifilmTM 肠杆菌测试片
• 含有改良的VRB 葡萄糖 培养基
• 肠杆菌为红色带黄色区域, 有或没有气泡的菌落
• 含有酸检测的pH指示剂 • 培养时叠放片数小于20 • 培养时间24h
Microbiology
3MTM PetrifilmTM测试片的影响
• 采用现有劳力,加大质量管理 • 提高总的生产质量 • 降低微生物检测成本 • 减少工作时间 • 加强数据管理
Microbiology
顾客评价
• 它使我们以更低的成本做得更好 • Petrifilm测试片解放了我们,它是如此方便和快捷 • Petrifilm使我们的工作效率翻了一倍 • 直到我们使用Petrifilm, 我们才相信自己确实能节省
3MTM PetrifilmTM 细菌总数测试片
估算 • 当每片菌落数大于250个时
采用估算 • 测定每小格(1cm2)内的
平均菌落数 • 乘以20(总生长面积数)
Microbiology
3MTM PetrifilmTM 细菌总数测试片
阴性对照
不可计数 Microbiology
3MTM PetrifilmTM 大肠菌群测试片
估算
微生物检测的方法
微生物检测的方法
微生物检测在食品安全、环境保护、疾病诊断等领域具有重要作用。为了确保检测结果的准确性和可靠性,了解并掌握各种微生物检测方法至关重要。本文将为您详细介绍微生物检测的常见方法。
一、直接显微镜检测法
直接显微镜检测法是通过显微镜观察样品中的微生物形态、数量和活性等特征,从而进行微生物检测的方法。该方法简单、快速,适用于现场快速检测。但缺点是准确度较低,对操作人员的技术要求较高。
二、分离培养法
分离培养法是将样品中的微生物分离出来,然后在适宜的培养基上进行纯化培养,通过观察菌落的特征、生理生化实验等方法进行鉴定。这是传统的微生物检测方法,具有较高的准确性和可靠性,但检测周期较长,操作较为繁琐。
三、分子生物学检测法
1.PCR技术:聚合酶链式反应(PCR)技术通过特异性引物扩增目标微生物的基因片段,从而实现微生物的快速检测。该方法灵敏度高、特异性强,适用于微量微生物的检测。
2.实时荧光定量PCR技术:实时荧光定量PCR技术是在PCR反应过程中,通过荧光信号的变化实时监测目标基因的扩增情况。该方法具有更高的灵敏度和定量准确性,已广泛应用于微生物检测领域。
3.基因测序技术:基因测序技术通过对微生物基因进行测序,分析其遗传
信息,从而实现微生物的鉴定和分类。该方法准确性高、检测范围广,但成本较高,操作复杂。
四、免疫学检测法
免疫学检测法是利用抗原与抗体的特异性结合反应进行微生物检测。常见的方法有:
1.酶联免疫吸附试验(ELISA):通过抗原或抗体的固定、抗原与抗体的特异性结合以及酶标记的检测,实现微生物的检测。该方法灵敏度高、特异性强,适用于大批量样品的检测。
3M大肠菌群大肠杆菌测试片作业指导书
3M Petrifilm 大肠菌群/大肠杆菌测试片作业指导书
●稀释液的使用
*使用适宜的无菌稀释液:0.1%蛋白胨水,蛋白胨盐稀释液,缓冲蛋白胨水,生理盐水(0.85-0.90%),不含硫酸氢盐的letheen肉汤或蒸馏水。
*请勿将包含柠檬酸盐、硫酸氢盐或硫代硫酸盐的稀释液与3Mpetrifilm金黄色葡萄球菌测试片配合使用;它们可抑制生长。
●估算
*测试片菌落生长的圆形区域面积约为20平方厘米。网格线在背光条件下清晰可见,可辅助估读计数。
*计数2个或者多个方格内的菌落数量,得到每方格内的平均菌落数,然后乘以20计算出测试片上的菌落数量。
3M微生物检测方法介绍
3M微生物检测方法介绍
3M是一家全球知名的科技公司,其微生物检测方法在食品安全和饮
用水处理等领域具有广泛的应用。以下是对3M微生物检测方法的介绍,
以及其在食品安全和饮用水处理等领域的应用。
3M的微生物检测方法基于现有的国际标准和法规,并结合了先进的
仪器设备和检测试剂盒,可以快速、准确地检测并分析样品中的微生物。
首先,3M的微生物检测方法采用了先进的胶基生长培养基和试剂盒,在短时间内可以培养和检测多种微生物,包括细菌、真菌和酵母等。这种
方法不仅可以提供清晰的结果,还可以帮助用户更好地了解微生物数量和
种类等信息。
其次,3M的微生物检测方法采用了快速的检测技术,可以在短时间
内完成检测,并提供准确的结果。这对于食品加工厂和饮用水处理厂等需
要快速检测的行业非常重要,可以帮助他们更好地控制产品质量和维护公
共安全。
此外,3M的微生物检测方法还具有操作简便、结果可靠等优点。其
检测仪器设备使用方便,只需要按照说明书进行操作即可,不需要复杂的
培养条件和专业的实验操作。同时,检测结果准确可靠,可以满足行业监
管和质量控制的需求。
在食品安全领域,3M的微生物检测方法被广泛应用于食品加工厂和
餐饮行业等。它可以用于检测食品中的微生物污染,包括大肠菌群、沙门
氏菌和霉菌等。这对于保护消费者的健康和确保食品质量非常重要,可以
帮助食品行业及时发现和解决食品安全问题,减少食品中毒事件的发生。
在饮用水处理领域,3M的微生物检测方法可以用于检测水源、水处
理过程和水系统中的微生物污染。它可以检测大肠菌群、肺炎克雷伯菌和
铜绿假单胞菌等有害微生物,帮助饮用水处理厂及时发现和解决水质问题,保障公众的饮用水安全。
3M微生物检测方法
3M微生物检测方法
3M是一家全球知名的科技公司,它在微生物检测领域有着丰富的经验和创新的解决方案。本文将详细介绍一些3M微生物检测方法。
一、3M Petrifilm微生物计数板
3M Petrifilm微生物计数板是一种方便、快速和可靠的微生物检测方法。它采用薄膜技术,将培养基和生长辅助物质包裹在一层薄膜中,用于菌落的形成和计数。使用者可直接在其表面上涂布样品,然后通过孔隙的氧气和水分透过薄膜,为微生物提供生长所需的环境。随着微生物的繁殖,产生的菌落可被直接计数。3M Petrifilm微生物计数板以其快速、易于操作和结果可读性受到广泛使用。
二、3M Petrifilm E.coli/Coliform计数板
3M Petrifilm E.coli/Coliform计数板是一种专门用于大肠杆菌和埃希氏菌的检测的微生物计数板。通过使用这种计数板,用户可以在24小时内确定食品、饮料和水样中E.coli和总大肠菌群的存在。它采用了改进的培养基和目标域维持剂,能够在孔隙中维持更大的氧气浓度,提供最适宜微生物生长的环境。这种计数板的优势在于它能够准确、快速和可靠地检测食品和水样中的致病性细菌。
三、3M Molecular Detection系统
3M Molecular Detection系统是一种基于聚合酶链反应(PCR)技术的微生物检测方法。它结合了使用特定试剂盒和3M的电子检测仪器,能够在短时间内对食品、饮料和水样中的致病性细菌进行快速检测。该系统具有高度特异性和灵敏度,能够准确鉴定微生物的存在并区别致病性和非
微生物检测方法
微生物检测方法
微生物检测是指对环境、食品、药品等中的微生物进行检测和
监测的方法。微生物是一类微小的生物体,包括细菌、真菌、病毒、藻类等。它们在自然界中广泛存在,对人类的生产生活和健康造成
了一定的影响。因此,对微生物的检测至关重要。本文将介绍几种
常用的微生物检测方法。
首先,常用的微生物检测方法之一是培养法。培养法是将待检
样品在适当的培养基上培养,利用微生物在培养基上生长繁殖的特性,通过观察培养基上的菌落形态、颜色、大小等特征,来判断待
检样品中是否存在微生物。培养法的优点是操作简单,结果直观,
但需要较长的培养时间,且只能检测到能在特定培养条件下生长的
微生物。
其次,PCR法是一种快速、高灵敏度的微生物检测方法。PCR法
利用聚合酶链式反应技术,通过扩增待检样品中微生物的DNA序列,从而实现微生物的检测和鉴定。PCR法具有高度的特异性和灵敏度,能够检测到极小量的微生物,且可以快速得到结果。但是PCR法对
实验条件要求较高,且可能受到污染的影响。
另外,免疫学检测法也是一种常用的微生物检测方法。免疫学检测法利用抗原与抗体之间的特异性反应来检测微生物。常见的免疫学检测方法包括ELISA法、免疫荧光法等。这些方法具有高度的特异性和灵敏度,能够快速、准确地检测微生物的存在。但是免疫学检测方法需要相应的抗体或抗原,且操作较为繁琐。
最后,基因测序技术是一种新兴的微生物检测方法。基因测序技术通过对微生物的基因组进行测序分析,来实现微生物的检测和鉴定。基因测序技术具有高度的特异性和灵敏度,能够对微生物进行全面、准确的检测和鉴定。但是基因测序技术需要较长的分析时间和较高的成本。
微生物检测标准
微生物取样方法、微生物检测标准
举例一:
一、空气采样及检验方法
1培养基:普通营养琼脂平板,按GB4789.28中3.7条配制
2采样(空气沉降法)2.1布点:面积小于30平方米的车间,设一对角线,在线上取3点,即中心一点,两端在距墙1米处各取一点;面积大于30平方米的车间,设东、西、南、北、中5个点,其中东、西、南、北点均距墙1米。
2.2采样高度:与地面垂直高度80-150厘米。2.3采样方法;用直径为9厘米的普通营养琼脂平板在采样点上暴露20分钟盖上送检培养。
3培养:于37°C培养24小时。
4检测频率:每周空气质量标准:生车间、熟车间、成品车间:低于100个半成品库、成品库:低于10个二、设备的采样与检验方法根据生产过程所要求的重点卫生部位,实验室对其进行涂抹采样,进行细菌总数检验。
1采样方法
1.1涂抹法(适用于表面平坦的设备和工器具产品接触面)取经过灭菌的铝片框(框内面积为50平方厘米)放在需检查的部位上,用无菌棉球蘸上无菌生理盐水擦拭铝片中间方框部分,擦完后立即将棉球投入盛有10毫升无菌生理盐水的试管中,此液每毫升代表5平方厘米。
1.2贴纸法(适用于表面不平坦的设备和工器具接处面)
将无菌规格纸(5X5厘米,纸质要薄而软)用无菌生理盐水泡湿后,于需测部分分别贴上两张,两张纸面积共50平方厘米,然后取下放入盛有10毫升无菌生理盐水的试管中,此液每毫升代表5平方厘米。
2检验方法
2.1细菌总数的检验将上述样液充分振摇,根据卫生情况,相应地做10倍递增稀释,选择其中2-3个合适的稀释度作平皿倾注培养,培养基用普通营养琼脂,每个稀释度作2个平皿,每个平皿注入1毫升样液,于37C培养24小时后计菌落数。
微生物快速检测方法及应用进展
微生物快速检测方法及应用进展
随着人们生活水平不断提高,各种安全问题越来越受到人们的重视,微生物的污染问题也相应地备受关注。在食品和环境等各个方面都有微生物污染的可能,一旦污染,微生物将大量繁殖而导致食源性疾病或环境污染甚至医院内感染。特别是近年来随着环境污染的加剧和生态平衡的不断破坏,导致感染的致病菌的种类越来越多,病原微生物对人类的威胁越来越大。传统的检验方法,主要包括形态检查和生化方法,其准确性、灵敏性均较高,但涉及的实验较多、操作烦琐、需要时间较长、准备和收尾工作繁重,而且要有大量人员参与[1,2]。所以,迫切需要准确、省时、省力和省成本的快速检验方法。本文对微生物快速检测方法的进展情况及实际应用进行综述,以利于预防食源性疾病及公共卫生突发事件的发生。
1 即用型纸片法
3M公司的perrifilmTMPlate系列微生物测试片,可分别检测菌落总数、大肠菌群计数、霉菌和酵母计数[3]。由RCP Scientific Inc 公司开发上市的Regdigel系列,除上述项目外还有检测乳杆菌、沙门氏菌、葡萄球菌的产品[4],这两个系列的产品与传统检测方法之间的相关性非常好。如用大肠菌群快检纸片检测餐具的表面,操作简便、快速、省料,特异性和敏感性与发酵法符合率高,已经被列为国标方法。使用时应正确掌握操作技术和判断标准,从而达到理想的检测效果[5]。美国3M公司生产的PF(Petrifilm)试纸还加入了染色剂、显色剂,增强了菌落的目视效果,而且避免了热琼脂法不适宜受损细菌恢复的缺陷。霉菌快速检验纸片,应用于食品检验中的霉菌具有操作简便,仅需36℃培养,不需要低温设备;快速,仅需2 d就可观察结果,比现在的国家标准检验方法缩短3~5 d,大大提高了工作效率。纸片法与国标法在霉菌检出率上差异无统计学意义,且菌落典型,易判定。纸片荧光法利用细菌产生某些代谢酶或代谢产物的特点而建立的一种酶—底物反应法。只需检测食品中大肠菌群、大肠杆菌的有关酶的活性,将荧光产物在365 nm紫外光下观察即可。同时纸片可高压灭菌处理,4℃保存,简化了实验准备、操作和判断[6]。但由于它们价格昂贵,限制了在基层单位的实际应用。
3M 微生物检测方法
Microbiology
3M微生物产品
有效控制食品工业中的微生物危害
Microbiology
3M微生物产品
Microbiology
检测方法概述
1. 食品卫生细菌的检测
细菌总数、大肠菌群
2. 食品中病原菌的检测
大肠杆菌、金黄色葡萄球菌
3. 食品中霉菌酵母菌的检测
霉菌酵母菌
Microbiology
p3 3
− 0.001λ p3
) (e
− 0.001λ 3− p3
)
Microbiology
最大可能数 ≠ 最大数
2-0-0 (90 MPN/100g) Pmax = 31.9% 50 45 40 35 Probability (%) 30 25 20 15 10 5 0 0 25 50 75 100 125 150 175 200 225 250 275 300 325 350 375 400 425 450
10~360
Concentration (cfu/100g)
Microbiology
概率越低越不准确
2-0-1 (140 MPN/100g) Pmax = 1.12% 50 45 40 35 Probability (%) 30 25 20 15 10 5 0 0 30 60 90 120 150 180 210 240 270 300 330 360 390 420 Concentration (cfu/100g) 30~370
3M快检片使用方法
3M霉菌和酵母菌检验测试片操作以及判读
一、测试霉菌和酵母菌操作方法
1、未开封时,冷藏于≤8℃(≤46℉),并在保存期
内用完,高温度时,凝固水可以排除,包装物最好于
室温启开。
2、已开封的,将封口以胶带封紧。
3、保存再封的袋于≤25℃(≤77℉)和温度<50%,不要冷藏已开启的包装袋,并于一个月内使用完。
4、制备1:10和更大稀释的食物样品稀释液,称取或吸取食物样品,置入适宜的无菌容器内,如均质袋、稀释瓶、WhirlPak bag 或者其他灭菌容器内。
5、加入适量的无菌稀释液,包括Buffered peptone
Buffer(IDF phopsphate buffer ,用0.0425g/L的
KH2PO4调PH7.2) 、0.1%的旦白胶水(ISO方法6887) 、
缓冲旦白胶水(ISO方法6579) 、盐溶液
(0.85-0.90%)、bisulfite-free letheen broth或蒸馏水。不可使用含有枸橼酸盐、酸性亚硫酸盐或硫代硫酸盐的缓冲液,因为它
们能抑止菌生长。
6、搅拌或均质样品.
样品不需要调PH,但已调解PH 的样品也能够使用。
7、将测试片置于平坦表面处,揭开上层膜。8、使用吸管将1ml样液垂直滴加
在测试片的中央处。
9、允许使上层膜直接落下,切勿向下滚动上层膜. 10、手拿压板横膜,将压板放置在
上层膜中央处.
11、平稳的压下,使样液均匀覆盖于圆形的培养面积
上,切勿扭转压板。12、拿起压板,静置至少1分钟
以使培养基凝固。
13、测试片的透明面朝上,可堆叠至20片,于21-25℃
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大肠菌群检测方法
• MPN(Most Probable Number)法
最大可能数法
• 直接计数法
3MTMPetrifilmTM法 VRB(Violet Red Bile)培养基法
Microbiology
国标MPN 法
乳糖胆盐发酵 24 ± 2 h
EMB琼脂平板 18 – 24 h
乳糖发酵管 18 – 24 h
) (e
−0.1λ 3− p2
)
) (e
− 0.01λ 3− p3
)
接种量为 0.1,0.01,0.001 ml(g)时的概率:
P = C (1 − e
p1 3
−0.1λ p1
) (e
−0.1λ 3− p1
)
+ C (1 − e
p2 3
−0.01λ p2
) (e
−0.01λ 3− p2
)
+ C (1 − e
Microbiology
3MTM PetrifilmTM细菌总数测试片
Microbiology
平板法和 Petrifilm纸片法的对照试验
表 琼脂平板法和 PetrifilmTM纸片法对6类试样对比试验结果的差异检验
Samples
肉与肉制品 奶和奶制品 饮料 糕点 调味品 冷荤制品
No
29 17 14 30 27 21
Microbiology
FDA MPN法
LST肉汤
24 – 48 h
煌绿乳糖胆汁肉汤(BGLB)
48 ± 2 h
Microbiology
MPN 法
• 1915发表 • 估算菌落浓度 • 使用置信区间
Microbiology
30 MPN/100 g = ?
A: X = 30 cfu/100g B: X <= 30 cfu/100g C: X >= 30 cfu/100g D: above all
)
阴性管: 阳性管:
1− e
e
− vλ
− vλ
Microbiology
概率公式
3×3管
接种量为 1,0.1,0.01 ml(g)时的概率:
P = C3p1 (1 − e ) p1 (e ) 3− p1 + C3p2 (1 − e + C3p3 (1 − e
− 0.01λ p3
−λ
−λ
−0.1λ p2
Microbiology
3MTM PetrifilmTM测试片的结构
例:3MTM PetrifilmTM细菌总数测试片 薄膜 粘合剂+指示剂 冷水可溶性凝胶 标准培养基 粘合剂 印有格子纸片
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3MTM PetrifilmTM细菌总数测试片
z z z z z z z
标准培养基 添加TTC菌落指示剂 培养时叠放片数小于20 培养时间为48 h 合理计数范围 25~250 方格设计便于计数 AOAC Official Method
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3M微生物产品
有效控制食品工业中的微生物危害
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3M微生物产品
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检测方法概述
1. 食品卫生细菌的检测
细菌总数、大肠菌群
2. 食品中病原菌的检测
大肠杆菌、金黄色葡萄球菌
3. 食品中霉菌酵母菌的检测
霉菌酵母菌
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细菌总数检测标准
• 国标 (GB 47892—94)
我国
• FDA平板法
美国 (FDA,l986) 日本 (日本食品卫生协会,1993) 台湾 (Marin,1978)
• PetrifilmTM纸片法
美国AOAC, 美国公共健康协会,法国AFNOR, 日本卫生部等
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影响平板法检测结果的因素
• 培养基制备
培养基质量 培养基灭菌时间、加热时间 倾注时的培养基温度控制
• 菌落计数
样品干扰 菌落小 菌落成片
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菌落指示剂
TTC
(Tri-phenyl Tetrazolium Chloride, 氯化三苯基四氮唑) 原理 细菌具有脱氢酶能使相应的底物脱氢而释放出氢离子, 培养基中的 TTC作为氢离子的受体,在接受氢离子后会 被还原为红色非溶解性产物-三苯甲 (Formazan),从而 使细菌着色,达到易观察便计数的效果。
-大肠菌群的检测
大肠菌群的定义: 需氧及兼性厌氧、在37 °C能分解乳糖产 酸产气的革兰氏阴性无芽孢杆菌。
*国家1994年颁布的食品卫生检验方法微生物学部分
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大肠菌群
• • • •
埃希氏菌属
大肠埃希氏菌
肠杆菌属
阴沟肠杆菌
枸橼酸杆菌属
弗劳地枸橼酸杆菌
克雷伯氏菌属
产气克雷伯氏菌
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p3 3
− 0.001λ p3
) (e
− 0.001λ 3− p3
)
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最大可能数 ≠ 最大数
2-0-0 (90 MPN/100g) Pmax = 31.9% 50 45 40 35 Probability (%) 30 25 20 15 10 5 0 0 25 50 75 100 125 150 175 200 225 250 275 300 325 350 375 400 425 450
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MPN 原理
k (k=0,1,2…) 个菌落出现在每个试管中的概率服从泊松 (Poisson) 分布:
Pn = e
− vλ
(vλ ) k!
k
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MPN 原理
细菌存在的概率:
P = ∏ C (1 − e
i =1 pi ni
k
− vi λ pi
) (e
− vi λ ni − pi
食品微生物检测技术
陆苏飚
技术工程师/硕士 3M 技术中心
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全
球
¾ 3M产品远销200多个国家
¾ 在60多个国家设有分支机构 拥有29个国际研究所和开发实验室 建立41家工厂
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Welcome
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创意全为你
¾ 3M为全球市场生产创新 产品 ¾ 3M具有发现顾客需求, 发明核心技术,提供价 值服务的独特能力
GB
3.97 2.13 2.13 2.68 3.43 5.04
Petrifilm
3.96 2.22 2.16 2.70 3.55 5.06
P > t
0.8481 0.2848 0.2093 0.5462 0.2062 0.2100
*卫生部食品卫生监督检验所
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食品卫生细菌的检测
10~360
Concentration (cfu/100g)
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