超声破碎
超声波细胞破碎机原理
超声波细胞破碎仪就是将电能通过换能器转换为声能，这种能量通过液体介质而变成
一个个密集的小气泡，这些小气泡迅速炸裂，产生的象小炸弹一样的能量，从而起到
破碎细胞等物质的作用。
超声波细胞破碎仪具有破碎组织、细菌、病毒、孢子及其它细胞结构，匀质、乳化、
混合、脱气、崩解和分散、浸出和提取，加速反应等功能，故广泛应用于生物、医学、化学、制药、食品、化妆品、环保等实验室研究及企业生产。
超声破碎，是用频率大于1.6千周1} (}fiICG/Sy #7声波破坏液体培养基中的微生物的方法。
定义
超声波是由声波发生器产生的。超声破碎在微生物酶学研究中，可用于破碎细胞。用
广泛频率的声波测试了抗橄生物的活性，一般说来，频率越高，活性越大，但似乎不
存在一个最适的杀微生物频率。超声破碎对革兰氏阴性菌的作用一般大于革兰氏阳性菌，而汗菌比球菌更敏感，抱子的抗性则比营养细胞大得多。处理病毒得到}1}果是不
规律的，病毒粒子的形态可能影响处理效果(超声破碎一般并不认为是可靠的灭菌方法)。超声处理的致死效应似乎是由千,(1y空腔形成(cavitation)，即在液体的一定时刻，声
波传播稀琉区域中形成微小的、短暂的气泡或蒸汽泡。据悉，在空腔的形成和瓦解期间，微环境中发生巨大而突然的压力变化，使空腔内的或邻近空腔的细胞破裂(由于声能的吸收而恒定地产生的热效应与空腔效应不同)。(Z)在空腔形成期间，在通气培养中过氧化氢和(或》单线态氧的形成。
快速破石头的方法
快速破石头的方法
1 问题背景
在工程建设中，经常会遇到需要破碎石头的情况。传统的方法往
往是使用锤子或者爆破等方式，但这些方法不仅效率低下，而且会对
环境造成破坏。那么，有没有一种快速破碎石头的方法呢？
2 原理介绍
近年来，随着科技的发展，一个新的方法出现了——超声波破碎。超声波是指低于人类能听到的声音，而超声波破碎正是利用了超声波
的原理。具体来说，将超声波传输到石头表面时，会产生一个高强度
的压力波，将石头破碎而成微小颗粒，这个过程需要非常短的时间。
3 实际应用
超声波破碎已经在许多领域得到应用，例如医疗、矿山开采、材
料试验等。在工程建设中，也被广泛应用于破碎石头，效率很高，而
且对环境造成的影响小，不会像传统方法那样产生噪音和空气污染。
4 优缺点分析
超声波破碎的优点有以下几个方面：
1.效率高：破碎速度极快，可以在短时间内完成大量石头破碎。
2.精度高：可以精确控制破碎的位置和范围。
3.环保性好：不会产生噪音和空气污染。
但是，超声波破碎也存在以下几个缺点：
1.成本高：需要特殊的设备和高级材料。
2.适用范围有限：只适用于某些脆性的材料。
5 结语
总体来说，超声波破碎是一种高效、精确、环保的破碎方法。虽然它的成本较高，但可以在某些场合下取代传统的锤子或者爆破等方式，是一个非常值得推广的技术。
体外超声波碎石原理
体外超声波碎石原理
体外超声波碎石是一种利用超声波产生的机械能将体内结石破碎的方法。其原理是利用超声波的高频振动和强聚焦性，通过聚焦超声波束将能量传递到结石表面，从而引起结石的破碎。
具体过程如下：
1.超声波发生器产生高频振动的超声波信号。
2.超声波传送到聚焦装置，形成一束高度聚焦的超声波束。
3.超声波束从体外引入体内，经过皮肤和组织传递到结石表面。
4.超声波束在结石表面产生机械能，引起结石的振动和共振。
5.结石在超声波的作用下破碎成小碎片。
6.小碎片随后从体内排出。
体外超声波碎石具有非创伤性和无放射线的特点，在泌尿科等领域得到广泛应用。
超声波细胞破碎法介绍
超声波细胞破碎法介绍
细胞破碎，细胞破碎技术是指利⽤外⼒破坏细胞膜和细胞壁，使细胞内容物包括⽬的产物成分释放出来的技术。细胞破碎分离提纯某⼀种蛋⽩质时，⾸先要把蛋⽩质从组织或细胞中释放出来并保持原来的天然状态，不丧失活性。所以要采⽤适当的⽅法将组织和细胞破碎，处理细胞破碎的⽅法也有很多，今天⼩编主要讲的是超声波细胞破碎法，以下就是具体的操作步骤。
⼀、超声波处理
⽤⼀定功率的超声波处理细胞悬液，使细胞急剧震荡破裂，此法多适⽤于微⽣物材料，⽤⼤肠杆菌制备各种酶，常选⽤50-100毫克菌体/毫升浓度，频⾼于15～20KHz的超声波在⾼强度声能输⼊下可以进⾏细胞破碎。其破碎机理：可能与空化现象引起的冲击波和剪切⼒有关。超声破碎的效率与声频、声能、处理时间、细胞浓度及⾸种类型等因素有关。
特点：操作简单，重复性较好，节省时间；多⽤于微⽣物和组织细胞的破碎。
存在问题：超声波破碎在实验室规模应⽤较普遍，处理少量样品时操作简便，液量损失少，但是超声波产⽣的化学⾃由基团能使某些敏感性活性物质变性失活。⽽且⼤容量装置声能传递，散热均有困难，应采取相应降温措施。对超声波敏感和核酸应慎⽤。空化作⽤是细胞破坏的直接原因，同时会产⽣活性氧，所以要加⼀些巯基保护剂。
细胞超声破碎仪使用方法
细胞超声破碎仪使用方法
细胞超声破碎仪是一种常用的生物实验工具，主要用于细胞破碎和细胞内物质提取。它利用超声波的高能量作用于细胞，将细胞组织破碎成小颗粒，以便后续的分析和实验操作。下面将介绍细胞超声破碎仪的使用方法。
1. 准备工作
在使用细胞超声破碎仪之前，首先要进行一些准备工作。将破碎仪放置在平稳的工作台上，接通电源并打开仪器。检查超声探头是否安装正确，并确保连接线的连接牢固。检查破碎仪的工作台是否清洁，以避免污染样品。
2. 样品处理
将待破碎的细胞样品放入一个离心管中，并加入适量的破碎缓冲液，缓冲液的选择应根据实验的需求来确定。将离心管放入冰上，使样品保持低温，减少样品的降解。注意，样品的量应适中，不宜过多以免超声能量无法充分作用于每个细胞。
3. 设置超声参数
根据实验的需要，设置超声破碎仪的参数。超声破碎仪通常具有不同的参数可供选择，如功率、时间和工作模式等。根据细胞类型和所需破碎效果，选择合适的参数。一般来说，功率设置越高，破碎效果越明显，但也容易引起样品的过热。时间的选择应根据样品的
特性来确定，一般建议从较短的时间开始，逐渐增加以达到理想的破碎效果。
4. 进行破碎
将装有样品的离心管插入超声破碎仪中，确保探头完全浸入样品中。注意，超声破碎仪的工作时应保持冷却系统正常工作，以防止样品过热。启动超声破碎仪，开始破碎过程。破碎过程中要注意观察样品的状态，避免超声能量过高导致样品过热和损伤。
5. 破碎后处理
破碎完成后，将离心管从超声破碎仪中取出，进行破碎后处理。根据实验需要，可以进行离心、冷冻、离心上清液等处理步骤，以获得所需的样品。注意，破碎后的样品应尽快进行后续的实验操作，以避免样品的降解和污染。
超声破碎的原理及方法
超声破碎的原理及方法
超声破碎是一种利用超声波的能量对细胞进行破碎的方法。其工作原理主要基于超声波的物理特性，即超声波的频率高于人类能够听到的范围，但能够在固体、液体和气体中传播，并在传播过程中产生一系列的物理效应，如振动、微射流、声流等。当超声波遇到细胞时，会通过这些效应使细胞壁产生疲劳、裂纹，最终导致细胞破碎。
超声破碎具有破碎组织、细菌、病毒、孢子及其它细胞结构，匀质、乳化、混合、脱气、崩解和分散、浸出和提取，加速反应等功能，广泛应用于生物、医学、化学、制药、食品、化妆品、环保等实验室研究及企业生产。
蛋白纯化超声破碎的步骤
蛋白纯化超声破碎的步骤
蛋白纯化是生物化学实验中常见的步骤，超声破碎是其中一种
常用的方法。在进行蛋白纯化超声破碎时，通常会按照以下步骤进
行操作：
1. 样品制备，首先需要准备含有目标蛋白的样品。这可能涉及
到细胞培养、组织提取或其他方法来获取蛋白样品。
2. 超声破碎前处理，在进行超声破碎之前，通常需要对样品进
行预处理，例如使用低速离心去除细胞碎片或其他杂质。
3. 超声破碎，将经过预处理的样品置于超声波破碎仪中，通过
超声波的作用产生高频振动，从而引起样品中的细胞破裂，释放蛋
白质。
4. 控制破碎条件，在超声破碎过程中，需要控制超声波的功率、破碎时间和温度，以避免过度破碎导致蛋白变性或降解。
5. 样品处理，超声破碎后，样品可能需要经过离心等步骤，以
去除残余的细胞碎片和细胞核等杂质。
6. 蛋白提取，最后，可以使用适当的方法（如离心、过滤、亲
和层析等）来提取目标蛋白，以便进行后续的纯化步骤。
在进行蛋白纯化超声破碎时，需要注意操作过程中的卫生与安全，以及对超声波破碎仪的正确使用，确保获得高质量的蛋白样品。此外，根据具体的实验要求和样品特性，可能需要对以上步骤进行
适当的调整和优化。
超声破碎的原理
超声破碎的原理
超声破碎是一种利用超声波的机械能对物质进行破碎和分散的技术。其原理主要基于超声波产生的振动与微小空化作用。
当超声波通过溶液或悬浮液中传播时，超声波的能量会导致溶液中的液体分子产生往复性的振动。当振动幅度足够大时，液体中的空化会随着超声波的变化而快速膨胀和收缩。在膨胀的瞬间，空化内部压力会迅速降低，达到一个临界值，使溶液中的液体分子产生空化塌缩，形成微射流。而当塌缩的瞬间，空化内部压力突然升高，形成局部高压，此时会生成空化崩塌，产生微小的冲击波。这些冲击波能够破坏物质分子之间的键合，从而实现破碎作用。
此外，超声波还可以引起声流场的涡旋、剪切和切向转动等大尺度涡旋流场。这些涡旋流场对固体物质的微粒破碎同样起到关键作用。通过涡旋流场的剪切力和撞击力，固体颗粒之间的强度迅速减弱，从而容易实现破碎和分散。
综上所述，超声破碎主要通过超声波的振动和微小空化作用以及涡旋流场的剪切力和撞击力来对物质进行破碎和分散。这种技术在化学、生物、材料等领域具有广泛的应用前景。
超声波细胞破碎仪 用途
超声波细胞破碎仪用途
超声波细胞破碎仪是一种实验室设备，主要用于将生物细胞或其他有机物质加工成细胞提取物或浸液。它利用超声波的高能量、高频率振动作用于细胞或样品，通过机械剪切、液体剪切、压力剪切等多种方式破碎和分散样品，从而释放细胞内的生物大分子（如蛋白质、核酸、碳水化合物等）和细胞器如线粒体、叶绿体等。
超声波细胞破碎仪主要用于以下方面：
1. 细胞裂解：用于提取组织或细胞中的特定细胞器，如细胞核、线粒体等。
2. DNA/RNA提取：用于从细胞中提取DNA或RNA，用于进
一步的实验如PCR、测序等。
3. 蛋白质提取：用于提取蛋白质，如实验中的免疫印迹、酶联免疫吸附分析等。
4. 细胞颗粒破碎：用于破碎和释放细胞中的颗粒，如细菌、酵母等，用于分析和研究。
5. 植物细胞破碎：用于提取植物细胞中的叶绿体、淀粉粒等。
6. 病毒颗粒破碎：用于破碎病毒颗粒，用于病毒学研究和制备疫苗等。
通过超声波细胞破碎仪，可以高效、快速地破碎细胞和有机物质，提取所需的生物大分子或颗粒，为生物学、分子生物学、遗传学、生物化学等实验提供重要的前处理步骤。
293细胞超声破碎条件
293细胞超声破碎条件
（实用版）
目录
1.293 细胞简介
2.超声破碎技术的原理
3.293 细胞超声破碎的具体条件
4.超声破碎 293 细胞的注意事项
5.结论
正文
一、293 细胞简介
293 细胞是一种人类胚胎肾细胞系，由德国科学家 Wolf-Dieter Bachmann 和 Michael Zschieschang 于 1977 年建立。这种细胞系具有高度的突变特性，易于传代，广泛应用于基因表达研究、药物筛选、细胞信号传导等领域。
二、超声破碎技术的原理
超声破碎技术是一种利用超声波的高频振动，破坏细胞膜和细胞壁的结构，从而使细胞内容物释放出来的方法。该技术具有操作简便、效率高、对细胞损伤小等优点。
三、293 细胞超声破碎的具体条件
1.超声波发生器：通常使用高频超声波发生器，频率为 20-40kHz，输出功率为 10-50W。
2.破碎槽：破碎槽应选择能容纳 293 细胞的体积，并具有较好的密封性，以保证超声波的能量能充分作用于细胞。
3.温度：超声破碎过程中，温度应控制在 37℃左右，以保持细胞的
活力。
4.时间：超声破碎时间应根据细胞数量和超声波强度进行调整，通常为 1-5 分钟。
5.细胞浓度：细胞浓度应适中，过低会导致破碎效果不佳，过高则容易产生细胞堆积，影响破碎效果。
四、超声破碎 293 细胞的注意事项
1.在超声破碎前，应确保 293 细胞处于良好的生长状态，避免使用过于老化或过于幼嫩的细胞。
2.超声波发生器和破碎槽应定期进行清洁和消毒，以避免细胞污染。
3.在超声破碎过程中，应随时观察细胞的状态，以避免过度破碎导致细胞死亡。
超声破碎细胞需要的频率
超声破碎细胞需要的频率
超声波是指频率超过20kHz的声波。在超声破碎细胞中，通常使用的频率范围是20kHz到100kHz。选择合适的频率对于破碎细胞起到决定性的作用。
超声波的频率会直接影响到破碎细胞的效果。频率越高，声波的能量越强，对细胞的破碎作用也就越强。然而，过高的频率也会导致细胞内部的分子结构被破坏，影响实验结果的准确性。因此，在选择频率时需要综合考虑超声波的能量和对细胞的影响。
细胞的类型也会对选择频率产生影响。不同类型的细胞在结构和组成上有所差异，因此对超声波的敏感程度也有所不同。一般来说，较大、较坚硬的细胞需要较高的频率才能被有效破碎，而较小、较脆弱的细胞则需要较低的频率。
超声波的频率还会受到实验条件和设备限制的影响。不同的实验目的和设备参数可能需要不同的频率范围。在实验前，需要根据实验要求和设备性能来选择适当的频率。
在超声破碎细胞实验中，除了频率外，还需要考虑其他因素。例如，超声波的功率和持续时间也会对细胞破碎产生影响。适当调整这些参数可以提高实验的效果。
选择适当的频率是超声破碎细胞实验中的重要步骤。频率的选择需
要综合考虑超声波的能量和对细胞的影响，以及细胞的类型和实验条件。合理选择频率可以提高实验效果，得到准确的结果。希望本文能对超声破碎细胞的频率选择有所帮助。
超声破碎仪清洗方法
超声破碎仪清洗方法
引言
超声破碎仪是一种常用于实验室和工业生产中的设备，它利用高频声波产生的微小气泡振动来实现物质的破碎和分散。由于它的工作原理，超声破碎仪在使用过程中会积累大量的污垢和残留物，因此定期进行清洗十分重要。本文将介绍超声破碎仪的清洗方法，帮助用户维护设备的正常运作。
准备工作
在开始清洗超声破碎仪之前，我们需要做一些准备工作，以确保操作的顺利进行。首先，关闭超声破碎仪的电源，并拔掉电源插头，确保安全。然后，准备好以下工具和材料：
1. 清洗液：可以使用去离子水、酒精或其他适用的清洗液。选择清洗液时，应注意其对超声破碎仪材质的兼容性。
2. 清洁刷：选择合适的刷子，如软毛刷或棉花棒。刷子的材质应该是耐腐蚀的。
3. 干净的毛巾或纸巾：用于擦拭超声破碎仪的表面和部件。
4. 塑料容器：用于盛放清洗液。
清洗步骤
以下是超声破碎仪清洗的一般步骤：
步骤一：拆卸零部件
首先，根据超声破碎仪的结构和使用说明，拆卸需要清洗的部件。通常需要清洗的部件包括探头、杯盖、液处理罐等。小心操作，确保不损坏和弄丢任何部件。步骤二：清洗零部件
将需要清洗的部件放入塑料容器中，倒入足够的清洗液，使部件完全浸泡。根据
清洗液的要求，可以选择将部件浸泡一段时间，一般建议10-30分钟，以便彻底去除污垢和残留物。
使用清洁刷轻轻刷洗零部件表面，特别是纤维状物质或堵塞的区域。注意刷洗过程中的力度，避免对部件造成损坏。
步骤三：清洗超声破碎仪主体
使用清洗液蘸取毛巾或纸巾，擦拭超声破碎仪的表面和部件。特别注意清洁仪器的外壳和控制面板，确保它们保持干净。
293细胞超声破碎条件
293细胞超声破碎条件
293细胞超声破碎（或称为293 细胞超声解聚）是一种常见的分离和提取细胞成分的方法。以下是常用的293细胞超声破碎条件：
1. 温度：通常在冰浴条件下进行，以避免样品受热而损坏。
2. 缓冲液：需要选择合适的缓冲液来维持pH和细胞内环境。常用的缓冲液包括PBS（磷酸盐缓冲液）和Tris缓冲液。
3. 超声功率：超声功率的选择会影响到细胞破碎的效果。一般来说，较高的超声功率可以更快地破碎细胞，但也会造成更大的机械剪切力，可能导致细胞内组分的降解。因此，需要根据实验需求和细胞类型选择适当的超声功率。
4. 超声时间：超声时间也是影响细胞破碎效果的重要因素。通常情况下，超声时间会根据所需细胞成分的多少来进行调整。较长的超声时间可能会导致样品过热。
5. 样品处理：在超声破碎前，需先将293细胞洗涤以去除残留的培养基和细胞碎片。然后，将细胞悬浮液转移至适当的容器中，如离心管。
这些超声破碎条件仅供参考，具体的实验条件还需根据研究目的和实验要求进行优化。
蛋白纯化超声破碎的步骤
蛋白纯化超声破碎的步骤
全文共四篇示例，供读者参考
第一篇示例：
蛋白纯化是生物化学领域中非常重要的一个步骤，通过蛋白纯化可以从混合物中分离出目标蛋白，达到提纯的目的。而超声破碎是蛋白纯化中常用的一种方法，利用超声波的机械作用可以破坏细胞膜或细胞壁，释放出蛋白质。下面将介绍一下蛋白纯化超声破碎的步骤。
一、准备工作
在进行蛋白纯化超声破碎之前，首先需要准备好实验室必需的设备和试剂。设备方面，需要准备超声波破碎机、离心机等设备；试剂方面，需要准备破碎缓冲液、裂解酶等。还需要准备好待破碎的细胞或组织样品。
二、制备破碎缓冲液
在进行超声破碎之前，需要制备好破碎缓冲液。通常可以选择含有离子界面活性剂的缓冲液，如Tris缓冲液或PBS缓冲液。在制备缓冲液的过程中需要注意保持PH值的稳定以及避免氧化。
三、组织细胞裂解
将待破碎的组织或细胞样品加入到破碎缓冲液中，并通过搅拌等
方式使细胞充分裂解。裂解的时间和方式会根据样品的性质而有所不同，有些样品需要冰浴下裂解以保持蛋白活性。
四、超声破碎
将裂解后的样品放入超声波破碎机中，设定好合适的参数（如功率、时间等），启动超声波破碎机进行破碎。超声波的振动作用可以破坏细胞壁或细胞膜，释放出内部的蛋白质。
五、冷却处理
在超声破碎完成后，需要对样品进行冷却处理以防止蛋白质的变性。可以将样品放入冰浴中进行冷却处理，并在此过程中避免突然改
变温度。
六、离心
对经过超声破碎的样品进行离心处理，将细胞碎片等残留物去除，得到较为纯净的上清液。上清液中含有的蛋白质即为我们需要纯化的
目标蛋白。
七、蛋白质纯化
超声波破碎仪操作流程
超声波破碎仪操作流程
超声波破碎仪是一种常用的实验室设备，用于将样品破碎成微小颗粒或分子。本文将介绍超声波破碎仪的操作流程，以帮助使用者正确使用该设备并获得高质量的样品破碎结果。
一、设备准备
1. 确保超声波破碎仪处于稳定的工作台面上，并接通电源。
2. 检查超声波探头是否正确安装在破碎仪的振荡杆上，并确保其与样品接触的部分干净且无污染。
3. 准备好所需的样品，并将其放入适合的破碎仪容器中。确保容器干净，并在破碎前根据需要添加适量的溶液或缓冲液。
二、设定操作参数
1. 打开破碎仪的控制面板，选择所需的工作模式（如连续模式或脉冲模式）和破碎时间。
2. 根据样品的特性和需要，调整超声波功率和振幅。一般来说，较硬或较难破碎的样品需要较高的功率和振幅。
三、进行破碎操作
1. 将装有样品的容器放入超声波破碎仪的固定夹具中，并确保夹具牢固地固定容器，避免破碎过程中的晃动或跌落。
2. 关闭破碎仪的密封盖或安全盖，并确保其紧密密封。
3. 启动破碎仪，开始进行样品破碎。在破碎过程中，可以通过控制面板监控功率、振幅和破碎时间等参数，并根据需要进行调整。
4. 监视破碎过程中的溶液温度，并确保其在可接受范围内，以避免样品的过度加热或损坏。
5. 根据所需的破碎程度和时间，适时关闭破碎仪并取出破碎后的样品。注意在取出样品之前关闭超声波发生器以避免伤害。
四、清洁和维护
1. 使用清洁剂和干净的布或纸巾清洁超声波探头和容器，将残留的样品和杂质完全清除。
2. 检查超声波探头是否有损坏或磨损，如有需要及时更换。
3. 定期检查和清洁破碎仪的工作台面、控制面板和电缆等部分，保持设备整洁并延长其使用寿命。
超声破碎原理
超声破碎原理
超声破碎是一种利用高频振荡产生的机械能对物质进行破碎、分散和混合的方法。其原理基于超声波在物质中传播时所产生的压缩、膨胀交替作用，从而引起物质内部的微小振动和局部涡流，进而导致分子间的相互作用力发生变化，使得物质的结构和性质发生改变。
超声波是一种频率高于20kHz的机械波，其传播过程中会引起介质内部分子的振动。当超声波通过介质时，介质中的分子会随着波动周期性地压缩和膨胀。这种周期性的压缩和膨胀作用会产生局部涡流和微小气泡，并在介质中形成高强度、高频率的机械应力场。
当这种应力场作用于固体材料时，会引起其内部分子之间相互作用力的变化。当材料内部受到足够大的应力时，其原子或分子之间相互作用力将被克服，从而导致材料断裂或破碎。此外，在液态介质中，超声波还可以产生局部高压和低压的涡流，从而促进分子之间的扩散和反应，实现混合和分散。
超声破碎的破碎效果受到多种因素的影响，如超声波频率、功率、处理时间、处理容器形状等。一般来说，超声波频率越高、功率越大、处理时间越长，破碎效果就越好。此外，在选择处理容器时也要考虑其形状和材质对超声波传播和反射的影响。
总之，超声破碎是一种利用高频振荡产生的机械应力场对物质进行破碎、分散和混合的方法。其原理基于超声波在物质中传播时所产生的压缩、膨胀交替作用，从而引起物质内部分子之间相互作用力发生变化。通过调节超声波频率、功率、处理时间等参数，可以实现不同程度的破碎效果。
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大肠杆菌表达外源蛋白，在超声破碎的时候，用含有1%triton-X-100的PBS悬浮，然后超声的效果较好，1%triton-X-100的作用还是很明显的，对其他的一些细菌同样起作用，比如链霉菌。
细菌沉淀直接加样品1buffer，再加5ul的巯基乙醇，混匀，离心，煮沸10min，直接上样，染色脱色步骤如下:将胶放入适量的染色液微波炉里加热1min(下次适当补点醋酸即可),将染色液换成大量的水(自来水即可)在微波炉煮10min 就可以。在表达重组蛋白后超声波破碎细胞，采用冰浴，400w，破2s停1s，但是不一会就产生大量泡沫，影响了破碎功率，pbs和tris缓冲液都是这样，最后都是破碎不完全，而我的目的蛋白就在这些未破碎的细胞中。
1*会产生气泡是因为你的探头位置没放好。探头一定要接近底部，约1cm（我一般是距底部0.5mm）。功率根据仪器不同会有所不同，但你可以观察液面，有波动但不要太剧烈就好。
2*破3S停10S，破个二三十次看看。
3*变幅杆位置摆放也要注意，听声音如果不对的话就要及时调整。另外可以从菌浓度方面考虑。在破碎时试着加大体积,强度最好不要超过60%.
4*尝试超8s停8s,对有些菌体蛋白来说，你的方法很难散热，导致蛋白变性产生气泡，最好停顿时间稍长一些，这种情况多见于包涵体形式的蛋白。
链霉菌（放线菌）超声破碎的，用的方法条件是什么？前处理一般就是配置成一定浓度的菌悬液。
使用超声破碎时采用的具体条件是：
(1)取细菌的24 h培养液于5 000 r／min 下离心5 min收集菌体．
(2)用pH 7．5的Na2HPO -NaH2PO 缓冲液洗涤3次，再用该缓冲液将菌体配成1：3的菌悬液．置于40 mL 大塑料试管内．
(3)将大塑料试管置于冰浴中，采用超声波破碎(功率200 W，1／2”探头，破碎30 s，间歇30 S)．
(4)破碎液于12 000 r／min下高速冷冻离心30 min，收集细胞碎片和上清夜．
超声破菌流程与上述基本一致，就是洗涤菌体也可以用预冷的生理盐水或pH8的Tris－HCl，洗涤一次就可以。另外，超声剂量随样品量、菌体改变比较大，功率可以到400－600w，超5s，停5s，冰浴，要加终浓度1 mM的PMSF。为确定合适的超声强度和次数，有必要随时镜检观察菌体是否完全破碎。放线菌属于原核生物系统进化树上的（G＋C）摩尔百分含量（mol％）高的革兰氏阳性菌（Eubacteria）分枝类群，它虽然具有原核生物特有的分子生物学特性，但在其不同类群中，细胞壁的化学组分变化很大。
在做大肠杆菌超声时，采用的是400W，超5停5的方法，效果不错，但是用在链霉菌上，似乎没什么效果。会不会就是由于细胞壁组成差异造成的呢，因为大肠杆菌式属于革兰氏阴性菌的。
再有镜检是检验破碎效果,但是细胞破碎程度和我需要的酶获得之间有正比关系吗？破碎时间长也会影响到酶的活性。所以想问问anaisai战友，你提供的“功率200 W，1／2”探头，破碎30 s，间歇30 S”的条件好像是用于破碎链霉菌孢子的，也可以用于发酵离心后的菌泥吗？如果可以，你破碎的全程时间大概是多少呢？
如果你需要的是胞内酶，细胞破碎程度和需要的酶获得之间基本上有正比关系。破碎时间长的确会影响到酶的活性。这就需要在最佳的破碎时间和酶活性之间做出判断，最直接的办法是先绘制相关曲线（酶
活性和时间的关系曲线）。
实验中，破碎的是棒状杆菌（也是很难破壁的G+菌），破碎时间控制在30min左右，酶活较好。如果是基质菌丝的话,好可以考虑用溶菌酶处理一下.
一般来讲这几种方法读可以的:
一,液氮研磨
二,用french press破碎
三，超声波破碎
四，溶菌酶处理预处理
超声波是物质介质中的一种弹性机械波，它既是一种波动形式,又是一种能量形式。超声对细胞的作用主要有热效应，空化效应和机械效应。热效应是当超声在介质中传播时，摩擦力阻碍了由超声引起的分子震动，使部分能量转化为局部高热（42－43℃）。空化效应是在超声照射下，生物体内形成空泡，随着空泡震动和其猛烈的聚爆而产生出机械剪切压力和动荡。另外，空化泡破裂时产生瞬时高温（约5000℃）、高压（可达500×104Pa），可使水蒸气热解离产生.OH自由基和.H原子，由.OH自由基和.H原子引起的氧化还原反应可导致多聚物降解、酶失活、脂质过氧化和细胞杀伤。机械效应是超声的原发效应，超声波在传播过程中介质质点交替地压缩与伸张构成了压力变化，引起细胞结构损伤。损伤作用的强弱与超声的频率和强度密切相关。
100g大肠杆菌溶于1L破碎液里（破碎掖：50mM Tris-Cl(PH8.5) 5mM EDTA 0.14M NaCl），搅拌，发现菌液发粘，菌体不能够很好分散，用高压匀质机破碎，加压后，菌液不能进入匀质机，速度很慢，请问是何原因？能有好的办法解决，很好用匀质机快速破碎菌体？将破碎液的量加大，不能很好分散可能是量太大。超声处理5－10分钟，菌液粘度即可大大降低，也可促进菌体分散。
不同型号的设备功率不一样，功率的大小决定了使用变幅杆的大小范围（直径2mm至几十毫米），你使用多大的变幅杆就在设备的上调至该刻度（很简单的）！变幅杆的大小决定了处理量5ml一下选3mm，5～50ml可选6～8mm，50ml以上选10mm的变幅杆，依此类推！占空比不用关心的，主要是指超声时间和停顿时间的比值。
酵母破碎的问题
一般的PROTOCOL都是用glass beads 破碎酵母细胞sigma G-8772 酵母破碎效果好的我所做过的方
法中还是玻璃珠，效率很高，而且对目的蛋白活性不会有什么影响。一般应该用这个方法。
化学裂解的方法，10g酵母加1ml的乙酸乙酯，充分搅拌至液体状。此法的裂解效果不错的加尿素裂解液（尿素8mol/L, NaCl 0.5mol/L,Tris 20mmol/L, EDTA 20mmol/L, 2%SDS, PH值8.0），据说效果可以。毕氏酵母细胞破碎法在破碎遇到的问题是菌体浓度太低，OD620nm在4-6之间。细胞破碎仪的最低破碎体积为4ml左右，这样再稀释一倍，OD就到2-3啦，我们怀疑破碎完溶出蛋白和酶活测定时会测不准。所以请教大家细胞破碎时最低的菌浓多少为下限？我们的菌是一种棒杆菌。破碎后，你可将液体放入透析袋中浓缩。我们所做的方法是按照1：20的比例将离心后的菌体（e.coli）溶解于超声缓冲液（50mM 磷酸 pH 8.0 ）300w 10s/10s 破碎20分钟。做了镜检！基本全被破碎了！我做蛋白纯化的，做的包涵体。实验中我们的菌体浓度相对独立，与培养液中的菌体od无关，不收其限制，便于操作者调控。一般按每g 湿菌体加5-10ml裂菌缓冲液。超声肯定会产热，所以一定要有降温装置，除非你需要得成分耐高温。