赤霉素对小鼠仔鼠生长发育的影响

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文章编号:1006—3110(2005)02—0226一04
赤霉素对小鼠仔鼠生长发育的影响
湛进,钟才高,关岚,李世宏,张洪霞
【论著】
摘要:目的观察农业用植物生长调节剂赤霉素(gibberellin,俗称920)对仔鼠生长发育的影响。

方法实验中将怀孕KM小鼠及其所产仔鼠随机分为4组:A正常饲料组、B低剂量饲料组(赤霉素浓度o.0625g/kg)、C中剂量饲料组(赤霉素浓度o.2500g/kg)、D高剂量饲料组(赤霉素浓度1.000g/kg)。

各组母鼠产仔后24h起给予相应剂量的饲料,观察至第20d,从21d起仔鼠雌雄分笼,直接给予相同剂量的饲料,在不同时间观察仔鼠生长发育指标。

结果赤霉素染毒组仔鼠耳阔分离、牙齿萌出、长毛、开眼时间以及阴道开口和睾丸下降时间均明显缩短,21、28、35、42日龄仔鼠的体重、体长、尾长明显增加,与对照组动物相应指标比较,差异均存在统计学意义(P<o.05)。

结论赤霉素具有促进仔鼠出生后生长发育作用。

关键词:赤霉素;生长发育;小鼠
中图分类号:R一332文献标识码:A
GibbereⅢnsEffectonGrowthandDeVelopmentof
Suckling
MjceZ日AⅣ.,锄,Z日D^峪国f一占口口,GⅣAⅣ三疗席,以耐.(D印口rt,托enfo,月’e口ff矗To工fco£ogy,xl口ngy口】Sc^oofo,PH6ffc三r棚Zf^,Cenf,口,SoⅣf|IlunfyP,苫ffy,C.Il口甩gs_Il口410078,C^f一口)Abstract:objectiVeToeVaIuatethegibbere¨ineffectongrowthanddeVeIopmentofsuckingmice.MethodsKunm{ngpregnantmiceandtheirsuckIingoffspringswererandomcIydividedinto4groups:ThegroupAserVedascontroIgrOupwerefedonnOrmaIfeedOnIy;themlceassignedingrOupB,CandDweretreatedwithfeedstuffscOntaining9ibbereIIinofO.0625g/kg,O.2500g/kgand1.OOOg/kgrespectiveIy.AfterdeIlvery,thebreastfeedingmicewerecOntinuOusIyfedOnthecOrrespOndingfeedstu什swithg.bbere川nfOr20days;thefemaleandmaIeOffspringmicewerediVidedintOdifferentcagesfedthemwiththesamefeedstuffOfthemOthersduringthe21毗day.IndexesOfthegrOwthanddeveIopmentofthemwerecarefuIIyrecorded.ResuItsThetimeofpjnnadetachment,hairappearance,upperandlOwerincisOrsprOut,eyeOpeningOftheneonataImice,andVaginahatchOfthefemaIeandtestisdescendingOftestsOfthemalesweresignigicantIyaheadOfscheduIeascOmparedwiththecOntrOl;andthebOdyweight,bOdyIengthandta.|lengthofthemweresignifIcantIyincreasedjnthegibbere¨inexposedgroups(1.OOOg/kg)for21,28,35and42daysascomparedwiththecontroIgroup(P<:O.05).ConclusionsGibbere¨inpromotesthegrowthanddeveIopmentofsuckIingmice.
Keywords:Gibbere…ns;GrOwthanddevelOpment;Mice
赤霉素(Gibberellins,俗称920)是目前国内外使用最广泛的植物生长调节激素,其分子结构与体内类固醇激素相似。

赤霉素分子量346.37,分子式C。

H。

0。

,纯品为白色结晶粉末,能溶于甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯等,难溶于煤油、氯仿、醚、苯、水等。

干燥状态及酸性条件下较稳定,遇碱易分解。

对于动物急性毒性非常低,小鼠静脉注射LDso>6.3g/kg,口服25g/kg剂量,动物无明显毒性反应。

赤霉素大量用于农业,以提高粮食生产,促进瓜果植物的座果或无核果实的形成;促进叶菜类蔬菜植物的营养体生长;打破植物种子休眠,促进种子发育;延基金项目:湖南省自然科学基金项目(计划批准号:ooJJY2073)
作者单位:中南大学湘雅公共卫生学院(湖南长沙410078)
作者简介:湛进(1972一),男,湖南泪罗人,在读MPH研究生,研究方向:环境毒理学。

通讯作者:钟才高(1954一),男,教授,硕士、博士生导师。

李世宏,99级预防医学专业本科毕业生。

缓水果衰老,起到保鲜作用;用于杂交水稻制种时,可调节花期,促进制种植物的抽穗。

增加有效穗数和粒数,明显提高结实率,促进细胞延长与细胞分裂[1‘2]。

由于赤霉素有以上生物学功能,目前在农业和林业生产中广泛应用。

我国现有数十家企业生产赤霉素,估计全国年产量达4ooo余吨,每年有大量赤霉素进人环境,已成为生态环境中典型的化学类激素污染物,可通过饮用水、食物等渠道进入人体。

赤霉素分子结构与体内类固醇激素相似,认为赤霉素可能对动物生长发育、人类健康产生潜在危害。

本次实验主要研究赤霉素对仔鼠生长发育影响,为进一步研究赤霉素对人类生长发育的影响及其作用机制提供初步实验依据。

1材料与方法
1.1受试药物85%赤霉素结晶粉末,赤霉素含量为850单
万方数据
位/mg,水份含量≤5%。

农业用药量依农作物不同而定。

该药由湖南亚华种业股份有限公司生物制药厂提供,农药登记号:PD86183—2,生产批件号:HNP43015一Eol05,执行标准:Q/0BA008—200l。

1.2受试动物受试动物品系:昆明种白色孕鼠及其仔鼠。

受试动物购自湖南农业大学动物科技学院实验动物养殖场,实验动物生产许可证:scxK(湘)2003一o003号。

实验前检查孕鼠分娩情况,挑选临盆、产崽期相差小于9d、健康无病者(32只)进入实验。

常规饲养,饲养环境温度控制在(20±3)C,相对湿度40%~60%,每天12h日光,12h黑暗交替,工作照度150~3001x,清洁卫生按有关要求进行。

1.3染毒剂量设置将受试动物32只孕鼠随机分成对照组(A组)与三个剂量组,即85%赤霉素结晶粉末(920)低剂量组(B组)、中剂量组(c组)、高剂量组(D组),孕鼠所产仔鼠进入母鼠所在组别。

实验前进行赤霉素急性毒性实验,即给予20只小白鼠85%赤霉素结晶粉末(920)5ooomg/kg灌胃染毒,小白鼠死亡2只,LD5。

>5OOOmg/kg。

以5000mg/kg剂量的1/8、l/32、1/128分别作为高、中、低剂量,即各组染毒给药量分别设计为625.oo、156.25、39.06mg/kg。

对照组动物给予正常饲料,饲养条件与染毒组一致。

1.4给药方法与给药时间根据85%赤霉素(gibberellin)结晶粉末实际应用方式,实验采用喂饲法染毒。

按每只成年孕鼠平均体重约50g、每天进食量(g/d.只)约30g估计,将受试物直接加入饲料中,搅拌均匀。

根据剂量组别的设定,则B、c、D三个剂量组饲料的赤霉素浓度分别为o.0625、o.25、1.00g/妇。

依据浓度配制实验所需饲料,对照组(A组)饲料不加受试物。

染毒分两个阶段,第一阶段实验:仔鼠出生后24h开始,A组孕鼠给予普通饲料,B、c、D组孕鼠分别给予配制的低剂量、中剂量、高剂量赤霉素饲料,仔鼠以母鼠乳汁为食。

每天下午5:oo准确称量饲料重量,计算食物摄入量,依据以上数据,计算出母鼠实际平均染毒剂量,染毒持续至孕鼠分娩后20d。

第二阶段实验:待仔鼠21日龄对所有仔鼠称重、编号,雌雄仔鼠分笼饲养。

各组给予原母鼠相同赤霉素含量的饲料,对照组仔鼠喂饲不含赤霉素的饲料,直到实验结束(42d)。

同样依据前述方法计算出仔鼠实际平均染毒剂量(mg/妇・d)。

实际染毒剂量见表1。

1.5观察指标①仔鼠体重:记录仔鼠2l、28、35、42日龄的体重,计算仔鼠体重增长情况。

在仔鼠离乳前、后,分别记录母鼠、仔鼠每天摄食量。

②仔鼠生理发育[3“]:观察并记录新生小鼠耳阔分离、牙齿萌出(下牙)、开眼、长毛(绒毛)、雄性仔鼠睾丸下降、雌性仔鼠阴道开口时间(日龄)。

观察并记录仔鼠身长(头臀),尾长,测量时轻拉仔鼠尾,让其自然伸直身体测量。

每周一次,至第42d实验结束。

表1动物实际平均染毒剂量(j±s)
注:1.各组孕鼠日平均摄食量差异无显著性(|P>o.05)。

各组母鼠均为7只。

2.各组仔鼠日平均摄食量差异无显著性P>o.05。

1.6数据统计分析所有数据均以j±s表示,P<O.05具有统计学意义。

采用SPSS12.O对数据分别进行方差分析AN0VA与秩和检验。

2结果
2.1赤霉素对仔鼠体重的影响高剂量组仔鼠21、28、35日龄,低剂量组、中剂量组21、28日龄时体重(g)明显高于对照组相应日龄仔鼠体重,其差异具有统计学意义(P<o.05),见表2。

2.2赤霉素对仔鼠生理发育的影响
2.2.1赤霉素对仔鼠体长与尾长的影响低、中、高剂量赤霉素染毒组21、28、35日龄仔鼠体长以及低、高剂量组42日龄仔鼠体长与对照组比较,差异具有统计学意义(P<o.05),见表3。

低剂量组、高剂量组21、28、35、42日龄仔鼠尾长以及中剂量组28日龄仔鼠尾长与对照组比较,差异具有统计学意义(P<O.05),见表4。

表2仔鼠体重(g)(j±5)
注:*表示与对照组比较.差异有统计学意义P<0.05。

万方数据
表3仔鼠体长(cm)(j±5)
注:*表示与对照组比较,差异存在显著性P<O.05。

表4仔鼠尾长(cm)(i士5)
注:*表示与对照组比较,差异存在显著性尸<o.05。

表5仔鼠部分生理发育指标(日龄)(;±s)
注:*表示与对照组比较,差异存在显著性P<0.05;a表示与低剂量组比较,差异存在显著性P<O.05.b表示与中剂量组比较,差异存在显著性P<O.05。

表6仔鼠性发育指标(日龄)(i±s)
注:*表示与对照组比较,差异存在显著性P<O、05。

a表示与低剂量组比较,差异存在显著性尸<o.05。

△低剂量组在测定仔鼠性发育指标前死亡2只。

2.2.2赤霉素对仔鼠生理发育的影响低、中、高剂量组与对照组比较,仔鼠张耳、牙齿萌出、开眼、长毛、阴道开口、睾丸下降时间均明显缩短(P<o.05),见表5、表6。

低剂量组与中剂量组、中剂量组与高剂量组的张耳时间、低剂量组与中剂量组的牙齿萌出时间、低剂量组与高剂量组的雄性睾丸下降时间的组间比较,其差异具有统计学意义(P<O.05)。

3讨论
农药是保证农作物增产的重要化学物质,当前我国耕地面积日趋减少、人口增长,对农药的生产与使用的需求有增无减。

有些农药分子结构与机体内某些激素相似、代谢缓慢,长期存在于环境之中,成为危害人类健康的环境内分泌干扰物(EDCS)。

越来越多的研究证实EDCs能激活或抑制内分泌系统功能,影响人体正常生长发育与生殖,甚至导致癌症凹’“。

目前儿童、青少年发育超前、早熟的现象,以及癌症发病年龄提前已引起了人们的广泛关注。

有关专家认为由于蔬菜、水果、粮食等生产过程中使用了大量激素类农用化学品,可食农作物与饮用水源受到严重污染,导致上述人类健康问题的出现。

有文献报道赤霉素可以影响机体内分泌系统,实验发现受试动物甲状腺、卵巢、肾上腺等内分泌腺重量较对照组明显增加,使得动物某些激素水平发生改变,影响动物的生长发育,甚至发生癌变口’8]。

赤霉素的作用机制最可能与体内类胰岛素样生长因子(insulinlikegrowthfactorl,IGF一1)过度表达有关,因为IGF一1是生长发育的关键因子,介导GH的生物学作用。

并且IGF一1过度表达与肿瘤的发生发展密切密切相关紫3试验效应观察指标中仔鼠牙齿萌出、阴道开口、睾丸下降、开眼时间的变异系数较小且稳定口],我们选取了以上指标,作为判断实验中各组生长发育的情况。

结果显示,实验组仔鼠较对照组的张耳、牙齿萌出、开眼、长毛(绒毛)、阴道开口、睾丸下降时间均明显缩短(P<o.05)。

另外实验组的体长、尾长、体重都高于对照组。

为了消除各窝仔鼠数量差异所带来的偏倚,在进行统计学分析时,我们剔除了窝仔鼠数量少于5只和大于15只的样本,保证各组内窝仔鼠数构成比接近,从而降低实验分析结果的误差。

本实验采用直接、间接两种方法给仔鼠染毒。

在仔鼠出生后前20d给予实验组母鼠相应剂量浓度饲料,以观察赤霉素是否能够经过垂直途径影响子代,结果显示,低、中、高三个剂量组仔鼠生理发育指标明显高于对照组(P<o.05),表明赤霉素可以通过垂直途径作用于子代。

低、中、高三个剂量组两两比较,差异无显著性(P>o.05),认为无剂量一效应关系。

有文献报道,母乳中的IGF一1水平可以影响新生儿的生长发育[1““],所以我们认为赤霉素在此期间(前20d)促进仔鼠生长发育的机制可能为:①影响了母鼠体内IGF一1合成,从而提高了乳汁中IGF一1的浓度水平,仔鼠摄入了IGF一1浓度较高(与对照组比较)的乳汁,导致试验组仔鼠的生长发育优于对照组;②赤霉素以本体形式经乳汁或饲料进入仔鼠体内,起到类生长激素(GH)样作用,诱导仔鼠体内生长相关因子(如IGF一1)增加。

实验进行到21d,仔鼠可以觅食后,直接喂饲各组相应母鼠饲料,实验结果显示实验组仔鼠2l、28、35、42日龄的体重、体长、尾长要明显高于对照组(P<o.05)。

作者认为赤霉素可能通过某种机制上调仔鼠体内IGF~1合成,从而促进受试动物生长发育。

值得提出的是,赤霉素是充当生长激素(GH)作用,或通过其它途径诱导IGF一1合成来促进动物生长发育有待进一步研究探讨。

万方数据
实用预防医学2005年4月第12卷第2期PracticalPreventiveMedicine,Apr.2005,Vol12,No.2229
文章编号:1006—3110(2005)02一0229一03
13一HCG联合CA蛾对孕早期流产的预测
米春梅,周昌菊
【论著】
摘要:目的观察孕妇发生先兆流产时的绒毛膜促性腺激素(口一HCG)及癌胚抗原(CA。

)的变化规律为预测孕早期流产及预防性治疗流产提供依据。

方法选取2002年5月~2004年11月就诊的孕4~12周,年龄23~35岁先兆流产的孕妇39例,自开始出现阴道流血就诊时起即抽血用放射免疫法测血清口一HCG及CA。

值,每周一次,找出规律。

结果绝大多数的先兆流产发生在孕4~8周;出现先兆流产症状时血清p—HCG值第4~7周与正常早孕组两组相比差异无显著性(P>o.5),7周以后显著低于正常早孕组(P<o.05)。

流产组cAm值在4~9周与正常组无明显差异(P>o.05),9周以后迅速上升,最高可达259.40U/ml,统计学差异不显著(P>o.5)。

结论动态监测血清口一HCG可以预测流产,对早孕者特别是习惯性流产患者可自孕7周开始动态监测血清p—HcG值,当发现此值低于正常即给予预防性治疗,可望改善预后;习惯性流产患者应于孕4周起即给予预防性保胎治疗;cA。

值与先兆流产的关系有待进一步研究。

关键词:孕早期流产;预测;预防性治疗
中图分类号:R714.21文献标识码:A
serump—HCGandserumcAl25inPredictingThreatenedAbortionM,c^Ⅳ胛~m西,z日Ouc_}lⅡ咒g一知.(r抛r|IlirdXf口H量y口—H口spff口,,CP甩f,Ⅵ,_SDHf_IlU以fV口rsf砂,C矗n挖gs|ll口410013,C^i甩n)
Abstract:objectiVe。

TotestthepredictingvaIueofserumbeta——humanchorionjcgonadotropin(p—HCG)andserumcancerembryoantigen(C:A125)aIterationsinpatientswiththreatenedabortIoninordertoprovideprophylactictreatment.MethodsThlrty—ninepregnantwomenaged23~35yearswiththreatenedabOrtIOnduringthe4~12weekspregnancywereselectedandenroIIedinevaIuation.Radiojmmunoassaymethodwasusedtomeasureserum口——
基金项目:湖南省卫生厅资助课题
作者单位:中南大学湘雅三医院(湖南长沙410013)
作者简介:米春梅(1971一),女,土家族,重庆市人,本科学历,主治医师,主要从事妇产科临床医疗、教学及科研工作。

环境内分泌干扰物的危害应当受到人们的重视,赤霉素在粮食、蔬菜、水果等生产与保鲜中广泛使用,现已经成为人类环境中较为典型的化学类激素污染物之一,其健康危害作用应受到高度重视。

4结论
本次实验结果表明,小鼠在胚胎发育及其出生后的早期生长发育时期,对其生长发育有明显促进作用。

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(收稿日期:2005一01—22)
万方数据。

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