响应面法优化Xenorhabdu_省略_atophila发酵培养基的研究_王永宏 - 副本

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响应面法优化厌氧细菌产纤维素酶发酵培养基

响应面法优化厌氧细菌产纤维素酶发酵培养基

响应面法优化厌氧细菌产纤维素酶发酵培养基张海健;刘占英;黄恒猛;魏爱花【期刊名称】《中国酿造》【年(卷),期】2012(031)006【摘要】通过单因素试验确定了厌氧纤维素降解细菌—溶纤维丁酸弧菌WHQ产纤维素酶的最佳培养条件,结果表明,最适产酶条件为培养时间48h,接种量10%,初始pH值8.5,温度37℃.在此基础上,应用响应面法优化该菌株产纤维素酶培养基.在初期研究中,葡萄糖和尿素确定为最佳的碳氮源,利用Plackett-Burman设计从10种培养基成分中筛选出对WHQ产内切纤维素酶有重要性的因素,结果表明葡萄糖、NaHCO,和MgSO4·7H2O对WHQ产内切纤维素酶有重要影响,利用Box-Behnken设计研究这3种因素对WHQ产内切纤维素酶的综合效应,结果表明3种因素的最佳值为MgSO4·7H2O 0.14g/L、葡萄糖14.3g/L、NaHCO3 6.92g/L,此时的内切酶酶活力最大值为206.548μg/(mL.min),与实验值相接近199.324μg/(mL·min),比未优化前的内切纤维素酶活力71.254μg/(mL·min)提高179%.【总页数】5页(P110-114)【作者】张海健;刘占英;黄恒猛;魏爱花【作者单位】内蒙古工业大学化工学院,内蒙古呼和浩特010051;内蒙古工业大学化工学院,内蒙古呼和浩特010051;内蒙古工业大学化工学院,内蒙古呼和浩特010051;内蒙古工业大学化工学院,内蒙古呼和浩特010051【正文语种】中文【中图分类】TQ920.6【相关文献】1.响应面法优化康宁木霉产纤维素酶固态发酵培养基 [J], 陈晓萍;孙付保;陈晓旭;张建华;张宏建;毛忠贵2.响应面法优化产细菌素屎肠球菌BC-3发酵培养基 [J], 韩曦;朱昆;闵钟熳3.产纤维素酶的枯草芽孢杆菌C-11发酵培养基的响应面法优化 [J], 胡斌4.响应面法优化康宁木霉产纤维素酶的发酵培养基 [J], 陈浩;谭忠元;冯昆达;谢模意;汪兆成;龚大春5.响应面法优化芽孢杆菌BY-3产纤维素酶发酵培养基 [J], 孟凡旭;马丽;杨伟平;姬生跃;辛海云;曹斌云因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

响应面法优化杏鲍菇液体发酵培养基

响应面法优化杏鲍菇液体发酵培养基

响应面法优化杏鲍菇液体发酵培养基翟宏伟;陈晓明【摘要】设计并通过响应面优化了一种适用于杏鲍菇(Pleuromse cryngii)液体发酵的新培养基TSM-1.以单因子试验筛选出指标具有显著影响的TSD-1微生物生长促进剂,液体多肽蛋白肥和NaCl,并通过Box-Behnken设计以及响应面分析得到了3因子最优添加量,形成TSM-1培养基的最优配方:葡萄糖40 g,酵母浸膏10 g,KH2PO41g,MgSO4·7H4O 0.5 g,NaCl 0.15 g,复合维生素B片1片(市售OTC 成药),添加TSD-1微生物生长促进剂0.3 g,钙蛋白2 g,蒸馏水1 000 mL,pH值6.4,121℃灭菌30 min.优化后TSM-1培养基中杏鲍菇菌丝生物量可达18.70±0.03 g·L-1.【期刊名称】《天津农业科学》【年(卷),期】2018(024)009【总页数】4页(P52-55)【关键词】杏鲍菇;培养基;优化;响应面【作者】翟宏伟;陈晓明【作者单位】天津科技大学,天津300457;天津科技大学,天津300457【正文语种】中文【中图分类】S646自1948年以来,利用液体层发酵技术培养各种食用菌引起人们的极大重视[1]。

相对于食用菌的固体培养而言,液体培养既可以缩短培养周期又提高了培养效率,特别适合于食用菌的规模化、周年化、工厂化生产,要实现杏鲍菇的大规模商品化生产,应用液体菌种是必然。

截至目前,有关杏鲍菇液体培养均集中于杏鲍菇对不同碳氮源的利用上,但有关生长促进剂在食用菌液体发酵培养基中的应用鲜有报道。

因此,笔者尝试设计并优化了一种新的适用于杏鲍菇的液体深层发酵培养基TSM-1,并添加了食用菌生长促进剂TSD-1、钙蛋白制剂、渗透压调节剂NaCl,以响应面法对TSM-1液体培养基中这3种特殊成分进行优化,以培养基中杏鲍菇菌丝的最大生物量为标准,确定了TSM-1液体培养基的最优配方,为食用菌生长促进剂在杏鲍菇液体深层发酵上的应用打下基础。

响应面法优化巴西虫草发酵培养基的研究

响应面法优化巴西虫草发酵培养基的研究

响应面法优化巴西虫草发酵培养基的研究利用响应面法优化巴西虫草(Cordyceps brasiliensis)液态发酵培养基。

在预备实验的基础上,采用Plankett-Burman设计对影响巴西虫草菌丝体产量的液态发酵培养基组分进行了筛选,确定主要影响因子为葡萄糖和牛肉膏。

再用最陡爬坡实验逼近以上2个因素的最大响应区域。

最后通过中心组合设计和响应面分析法,确定了主要影响因子的浓度。

优化后的培养基组成为:葡萄糖4.46 g/100 mL,可溶性淀粉2 g/100 mL,蚕蛹粉4 g/100 mL,牛肉膏2.93 g/100 mL,KH2PO4 0.1g/100 mL和MgSO 4·7H2O 0.15 g/100 mL。

巴西虫草;发酵;响应面法;中心组合设计S567.390.4A冬虫夏草(Cordyceps sinensis)是一种特异的虫菌复合体,其子座部分属真菌门(Eumycota),子囊菌亚门(Ascomycotina),核菌纲(Pyrenomycetes),麦角菌目(Clavicipitales),麦角菌科(Clavicipitaceae),虫草属(Cordyceps)。

冬虫夏草为我国传统名贵的强壮滋补中药材,与人参、鹿茸齐名,在国内外享有盛名。

冬虫夏草多生于海拔3000~4000 m的高山草甸土层中,由于其生长条件和寄生条件特殊,再加上人们不断采挖,生长环境不断遭到破坏,天然资源非常紧缺[1]。

为寻找天然冬虫夏草替代品以满足市场需求,国内外研究人员展开了大量的研究。

1988年,广东省农科院蚕业与农产品加工研究所科技人员于自然保护区采集到虫草野生菌株,经广东省微生物研究所鉴定证实为巴西虫草(Cordyceps brasiliensis)。

随后,有研究表明,巴西虫草菌丝体中氨基酸、微量元素和有效成份D-甘露醇、麦角甾醇、虫草多糖等的含量与天然的冬虫夏草相近[2]。

通过液体深层发酵培养可以快速生产食药用菌菌丝体,缩短传统固体培养时间,节约生产成本,因此,以菌丝体生物量为指标,进行巴西虫草发酵培养基优化,具有重要意义。

响应面法优化重组大肠杆菌发酵生产藻蓝蛋白培养基的关键介质组分

响应面法优化重组大肠杆菌发酵生产藻蓝蛋白培养基的关键介质组分

响应面法优化重组大肠杆菌发酵生产藻蓝蛋白培养基的关键介质组分响应面法是一种常用的参数优化方法,它可以在多个变量之间建立数学模型,通过优化模型的参数,得到最优结果。

在生物制药领域,响应面法被广泛应用于发酵过程的优化。

藻蓝蛋白是一种重要的生物色素,它被广泛用于生物技术、医药和食品工业等领域。

大肠杆菌是产生藻蓝蛋白的重要菌种之一。

在大肠杆菌发酵生产藻蓝蛋白的过程中,培养基是一个关键的因素。

培养基中的关键组分可以影响藻蓝蛋白的合成和产量。

因此,优化培养基中的关键介质组分是提高藻蓝蛋白发酵生产的重要策略。

在优化培养基中的关键介质组分时,响应面法可以帮助我们确定最佳组合条件。

响应面法通常包括以下几个步骤:1. 确定变量和水平:在大肠杆菌发酵生产藻蓝蛋白的过程中,培养基中的关键介质组分可能涉及多个变量,如碳源、氮源、微量元素等。

通过实验确定变量和每个变量的水平。

2. 设计试验矩阵:使用正交试验设计或中心组合试验设计等方法,生成一组试验矩阵,包含各种组合条件下藻蓝蛋白的产量和其他指标。

3. 进行实验:使用试验矩阵中的组合条件进行实验,并记录藻蓝蛋白的产量和其他指标。

4. 分析结果:根据实验数据建立数学模型,并通过响应面分析确定最佳组合条件。

在确定大肠杆菌发酵生产藻蓝蛋白培养基的关键介质组分时,可以选择以下几个关键介质组分:1. 碳源:碳源是大肠杆菌产生藻蓝蛋白的关键组分之一。

常用的碳源包括葡萄糖、甘露糖、乳糖等。

通过响应面法优化碳源的组分和浓度,可以提高藻蓝蛋白的产量。

2. 氮源:氮源对大肠杆菌的生长和藻蓝蛋白的合成也具有重要的影响。

常用的氮源包括酵母提取物、氨基酸、尿素等。

优化氮源的组分和浓度可以提高藻蓝蛋白的合成和产量。

3. 微量元素:微量元素对大肠杆菌发酵生产藻蓝蛋白也具有重要的影响。

铁、镁、锌、铜等微量元素都可以影响藻蓝蛋白的产量和合成。

优化微量元素的组分和浓度可以提高藻蓝蛋白的发酵生产。

综上所述,响应面法可以帮助我们确定最佳的培养基中的关键介质组分,进而提高大肠杆菌发酵生产藻蓝蛋白的产量和合成效率,具有重要的应用价值。

响应面法在发酵培养基优化中的应用

响应面法在发酵培养基优化中的应用

北方园艺2009(2):127~129・专题综述・响应面莹在发酵培养基优丫匕中的应用刘志祥,曾超珍(中南林业科技大学生命科学与技术学院,湖南长沙410004)摘要:介绍了响应面法的原理和实验设计的方法,并对其在优化发酵培养基中的应用做了详细的综述。

关键词:响应面法;发酵培养基;优化中图分类号:TQ920.1文献标识码:B文章编号:i001--0009{2009)02--0127--03响应面法(RSM)是采用多元二次回归方程来拟合因素与响应值之间的函数关系,通过对函数响应面和等高线的分析,能够精确地研究各因子与响应值之间的关系,寻求最优工艺参数,解决多变量问题的一种统计方法[1]。

它可用在描述单个试验变量对响应值的影响、确定试验变量之间的相互关系、描述所有试验变量对响应值的综合影响。

RSM是一种适用性强的试验设计方法,不仅包括试验设计、建模、因子效应评估以及寻求因子水平最佳操作条件等功能,而且具有数据统计处理功能,显示出了其它试验方法如正交试验、因子试验、田口试验方法等所不具备的优点,该法不但具备试验次数少,周期短、精度高等优点[2],而且可以建立连续变量曲面模型;同时,对影响试验指标的各因子水平及其交互作用进行优化和评价,可快速有效地确定多因子系统的最佳条件Cs-s]。

RSM已经在食品、医药、生物工程、农业、天然物提取等领域广泛的应用。

1响应面法在培养基优化中的试验设计利用微生物发酵生产各种有用代谢产物,其培养基成分种类繁多,各成分间的相互作用也错综复杂,因而,微生物培养基的优化工作就显得尤为重要。

数学统计中的多种优化方法已开始广泛地应用于微生物发酵培养基的优化工作中,其中以响应面法的效果最为显著。

响应面法优化培养基的试验设计步骤为:①利用Hack—ett—Burman(PB)试验确定主要影响因素:PB设计法是一种两水平的试验设计方法。

它试图用最少的试验次数达到使因素的主效果尽可能精确的估计,适用于从众多的考察因素中快速有效地筛选出最为重要的几个因素第一作者简介:刘志祥(1978-),男.在读博士,讲师,研究方向为天然产物提取与植物生物技术。

响应面法优化达托霉素发酵培养基的研究

响应面法优化达托霉素发酵培养基的研究

1 3个氨 基酸 的大 环脂肽 类抗 生素 , 在玫 瑰孢 链 霉 菌 中
以非 核糖 体 蛋 白合 成 酶 ( nr o o l e t esn No —i sma p p i y - b d
t ea eNRP ) h ts , S 机制合 成 , 有依 赖 于 C 破 坏病 菌 具 a
细胞 膜 的新型作用 , 此 对许 多 耐药 病 菌 具有 显 著 的 广泛 应用 于工程设 计 、 因 生物医药 等领域 , 取得 了 良好 并 治疗 作用口 。达托霉 素具 有在体 外抗 绝大 多 数临床 ’ 的 效 果 。 叫] 。。 革 兰 氏阳性 菌 的作 用 , 于一 些 可选 择 的抗 生素 很少 对 的耐 药菌 , 耐万 古 霉 素 的 肠球 菌 ( 如 VRE 、 甲氧西 )耐 林 的金黄 色葡 萄 球菌 ( S 、 肽类 敏感 的金 黄色 MR A) 糖 葡 萄球 菌( I A) 凝 固酶 阴性 的葡萄 球菌 ( NS 和耐 GS 、 C )
突变株 , 自行保藏 。 高 氏一 号培 养基 ( 面 固体 培养 基 , 斜 g・L ) 可 : 溶性 淀粉 2 , 0 KNO , S 0 5 K HP 0 5 3 1 Mg O . , 2 O . ,
产 物产 量 ] 。近 年来 培 养 基优 化 方法 已经 由传 统 的
1 5 3 mg・L_ , 8 . 。 较优 化 前 提 高 了 7 . 。 37
关键 词 : l kt B r n设 计 ; 陡爬 坡 设 计 ; 应 面 设 计 ; 托 霉 素 ; 酵培 养 基 Pa et uma c — 最 响 达 发
中 图分 类 号 : Q 2 . T 9O1 文献标识码 : A 文 章 编 号 :62 4 5 2 1 )0 0 0 5 1 7 —5 2 ( 0 2 1 —0 4 —0

响应面法优化Xenorhabdus nematophila发酵培养基的研究

响应面法优化Xenorhabdus nematophila发酵培养基的研究

响应面法优化Xenorhabdus nematophila发酵培养基的研究王永宏;张强;张兴【摘要】[目的]提高Xenorhabdus nematophila YL001的抗菌活性,为该菌株杀菌活性成分的提取分离及生物农药的开发应用奠定基础.[方法]以YSG培养基为基础,采用单因子试验方法,对最佳碳源和氮源进行筛选,并采用全因子中心组合试验设计和响应面法对其最佳配比进行优化.[结果]YL001菌株的最佳碳源为玉米粉,氮源为豆饼粉,培养基的最佳组成为:玉米粉9.69 g/L,豆饼粉76.50 g/L,MgSO4 1.07 g/L,(NH4)2SO4 1.79 g/L,KH2PO4 0.63 g/L,K2HPO4 0.80 g/L,Na2SO4 1.25 g/L,在此条件下,YL001菌株抗菌活性达268.9 U/mL.[结论]培养基优化后YL001菌株的抗菌活性与试验的预测值接近,表明响应面法在培养基优化中十分有效,相对简单,且节省时间和材料.【期刊名称】《西北农林科技大学学报(自然科学版)》【年(卷),期】2009(037)007【总页数】7页(P140-146)【关键词】Xenorhabdus nematophila;抗菌活性;响应面法;发酵培养基【作者】王永宏;张强;张兴【作者单位】西北农林科技大学,无公害农药研究服务中心,陕西,杨凌,712100;西北农林科技大学,无公害农药研究服务中心,陕西,杨凌,712100;西北农林科技大学,无公害农药研究服务中心,陕西,杨凌,712100【正文语种】中文【中图分类】S476+.15嗜线虫致病杆菌(Xenorhabdus nematophila)是一种革兰氏阴性细菌,属肠杆菌科,其与斯氏线虫(Steinernema)共生,存在于侵染期线虫肠腔内,侵染期线虫通过一些自然孔口进入寄主昆虫体内,将共生菌释放到寄主昆虫血淋巴中,共生菌在血淋巴中大量繁殖,使寄主昆虫患败血症死亡[1]。

响应面法优化泰乐菌素发酵工艺的研究

响应面法优化泰乐菌素发酵工艺的研究

响应面法优化泰乐菌素发酵工艺的研究
郑向伟;桑艳丽
【期刊名称】《现代畜牧科技》
【年(卷),期】2024()6
【摘要】泰乐菌素是一种重要的兽用抗生素,具有广谱的抗菌活性。

为提高泰乐菌素的发酵产量,该研究采用单因素试验和响应面法对弗氏链霉菌发酵工艺进行优化。

结果表明,接种量、发酵温度、初始pH值和摇床转速是影响产量的关键因素。


响应面法优化,当接种量7.2%、温度30.3℃、初始pH值7.38、转速212 r/min 时,泰乐菌素的产量可达1518 mg/L,比优化前提高12.4%。

该研究为泰乐菌素发
酵工艺的优化提供了理论参考,也为其他抗生素的高效生产积累了经验。

【总页数】3页(P17-19)
【作者】郑向伟;桑艳丽
【作者单位】山东鲁抗舍里乐药业有限公司
【正文语种】中文
【中图分类】S859.796
【相关文献】
1.响应面法对多黏菌素E发酵工艺的优化
2.响应面法优化发酵液中多拉菌素的脱色工艺
3.利用响应面法优化泰乐菌素发酵培养基
4.响应面法优化泰乐菌素发酵工艺
的研究5.泰乐菌素发酵补料工艺优化研究
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响应面法设计优化阿维菌素化学合成发酵培养基

响应面法设计优化阿维菌素化学合成发酵培养基

响应面法设计优化阿维菌素化学合成发酵培养基胡栋;柯灵超;张敬宇;谭高翼;张立新;高强【摘要】目的设计优化一种化学合成发酵培养基,为阿维菌素产生菌生理生化研究提供基础.方法在单因素实验的基础上运用响应面分析的方法,对9种因素进行Plackett-Burman设计筛选得到3个显著因子,并对其进行最陡爬坡试验和Box-Behnken 试验,利用Design-Expert V8.06分析软件进行回归分析得到最优组合.结果优化后化学合成培养基的组成为:葡萄糖12 g/L,麦芽糖18g/L,苏氨酸1.98g/L,50%乳酸钠0.5mL/L,K2HPO4·3H2O 0.3g/L,MgSO4·7H2O0.5g/L,NaCl 0.5g/L,FeSO4· 7H2O0.01g/L,MnSO4·H2O 0.015g/L,MOPS 5g/L.结论经验证,该培养基的产素能力比目前的清亮培养基提高了397.4%,并具有透明清亮且产素稳定等特点,为以后阿维链霉菌的理论和生产研究奠定了基础.【期刊名称】《中国抗生素杂志》【年(卷),期】2018(043)008【总页数】7页(P1055-1061)【关键词】阿维链霉菌;阿维菌素;化学合成培养基;响应面法;设计优化【作者】胡栋;柯灵超;张敬宇;谭高翼;张立新;高强【作者单位】工业发酵微生物教育部重点实验室,天津科技大学生物工程学院,天津300457;工业发酵微生物教育部重点实验室,天津科技大学生物工程学院,天津300457;生物反应器工程国家重点实验室,华东理工大学,上海200237;生物反应器工程国家重点实验室,华东理工大学,上海200237;生物反应器工程国家重点实验室,华东理工大学,上海200237;工业发酵微生物教育部重点实验室,天津科技大学生物工程学院,天津300457【正文语种】中文【中图分类】R978.1阿维菌素(avermectins, AVMs)是由阿维链霉菌(Streptomyces avermitilis)代谢产生的一种效果极佳的大环内酯类杀螨杀虫剂和潜在的抗生素药物[1],阿维链霉菌发酵液中通常含有8种阿维菌素组分,既A1a/A1b、A2a/A2b、B1a/B1b和B2a/B2b,其中,B1组分,尤其是B1a组分的杀虫效果最佳,目前B1a组分也是商品化的阿维菌素产品中的主要成分[2-3]。

响应面法优化恩拉霉素发酵培养基

响应面法优化恩拉霉素发酵培养基
Technology 科技 分析与检测
响应面法优化恩拉霉素发酵培养基
□ 许铭玉 王小琴 冯疆涛 罗文伟 李 虎 邢雪岩 新疆阿克苏地区疾病预防控制中心
摘 要:本试验通过 Box-Behnken Design 中心组合试验对出发培养基 X24 进行优化,选取玉米粉、黄豆粉、硫酸铵、 葡萄糖 4 个因素建立模型,对菌株 TCCC 21101 进行发酵测活并进行验证试验,最终得到优化后的培养基配方,即玉米粉 7.88%、黄豆粉 2.82%、硫酸铵 0.4%、葡萄糖 0.6%、硫酸亚铁 0.01%、L- 乳酸 0.2%、碳酸钙 0.5%、耐高温 α- 淀粉酶 0.07% 和豆油 0.05%。该培养基发酵测活得出抑菌圈直径的大小约为 19.35 mm,其效价约为 4 147 U/g,对比工业发酵培养基, 该培养基配制简单,成分廉价易得,较适合实验室研究用。
1.1.1 试验菌株 产恩拉霉素的杀真菌链霉菌 TCCC 21101;生物测定指示菌枯草芽孢杆菌 CMCC(B)63501, 以 上 两 株 菌 均 由 应 用微生物与酶工程实验室保藏。 1.1.2 主要试剂和仪器 参见文献 [8]。 1.1.3 培养基和溶液 GYT 培养基,参见文献 [8];种子 培 养 基, 参 见 文 献 [8]; 发 酵 培 养 基 X24: 玉 米 粉 8%, 葡 萄 糖 0.5%, 黄 豆粉 3%,硫酸铵 0.4%,玉米浆粉 2%, 碳酸钙 0.5%,豆油 0.05%,耐高温 α淀粉酶 0.07%,灭菌前 pH 为 7.0 ~ 7.2; 抗生素检定培养基:25 g/L。以上培 养基灭菌条件均为湿灭法。121 ℃、
关键词:恩拉霉素;响应面;发酵培养基;抑菌圈;效价
恩 拉 霉 素, 是 1966 年 自 日 本 兵 库县土壤中分离得到的一株杀真菌素 链 霉 菌(Streptomyces fungicidicus No. B5477)发酵获得的次级代谢产物 。 [1-3] 恩拉霉素对革兰氏阳性菌特别是有害 梭状芽孢杆菌具有较强的抑制作用。

响应曲面法优化罗伊氏乳杆菌发酵培养基

响应曲面法优化罗伊氏乳杆菌发酵培养基

响应曲面法优化罗伊氏乳杆菌发酵培养基秦鹏;谢鹏;刘广宇;梁宏基;梁淑娃;黄葵英【摘要】[目的]优化罗伊氏乳杆菌发酵培养基,提高该菌发酵活菌数.[方法]采用Plackett-Burman以及响应曲面法对罗伊氏乳杆菌发酵培养基进行研究,确定罗伊氏乳杆菌发酵培养基中显著影响发酵活菌数的因素,并通过响应曲面法进行优化,以确定最优发酵培养基组分.[结果]试验表明,所得二次回归模型达到极显著水平,无失拟因素存在.优化后的罗伊氏乳杆菌发酵培养基组成为:葡萄糖3.09%、酵母粉4.19%、果蔬汁10.03%,在此条件下发酵液活菌数可以达到8.25×109CFU/mL.[结论]研究证实了响应曲面法可用于优化提高罗伊氏乳杆菌发酵活菌数,为其工业化生产奠定了基础.【期刊名称】《安徽农业科学》【年(卷),期】2016(000)006【总页数】4页(P91-93,183)【关键词】罗伊氏乳酸菌;Plackett-Burman设计;响应曲面法【作者】秦鹏;谢鹏;刘广宇;梁宏基;梁淑娃;黄葵英【作者单位】广州市微生物研究所,广东广州510663;广州市微生物研究所,广东广州510663;广州市微生物研究所,广东广州510663;广州市微生物研究所,广东广州510663;广州市微生物研究所,广东广州510663;广州市微生物研究所,广东广州510663【正文语种】中文【中图分类】S188+.4罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)是普遍存在于人类和大部分动物肠道中的益生菌,它可以代谢产生有机酸、双乙酰、过氧化氢、细菌素及类细菌素等物质[1-2],不仅能够调节胃肠道健康,还具有增强免疫力、抗肿瘤、抗癌变及抗衰老等多种功能[3-4]。

然而目前,较低的发酵水平制约了罗伊氏乳杆菌的进一步扩大应用。

响应面分析法(response surface methodology,RSM)是一种优化工艺条件的有效方法,中心组合设计(CCD)可用于确定试验因素及其交互作用对指标响应值的影响,精确表述因素和响应值之间的关系[5]。

响应面法优化植物乳杆菌发酵产胆盐水解酶的培养基成分

响应面法优化植物乳杆菌发酵产胆盐水解酶的培养基成分

响应面法优化植物乳杆菌发酵产胆盐水解酶的培养基成分李秀凉;王继超【期刊名称】《中国酿造》【年(卷),期】2013(032)005【摘要】以胆盐水解酶的活性为响应值,采用响应面设计分析法对植物乳杆菌发酵产胆盐水解酶培养基的成分进行优化.获得最佳培养基组成(g/L):葡萄糖19.40、蛋白胨17.05、大豆蛋白胨14.00、乙酸钠1.82、K2HPO4 2.00、酵母浸粉6.00、柠檬酸氢二铵1.00、MgSO40.87、MnSO40.45、L-半胱氨酸0.5、吐温-80 2.2mL/L.在该优化条件下,胆盐水解酶产量为(7.02±0.28) U/mL,较单因素优化前提高了6.44倍.所得数学模型的预测值与实验观察值相符,能够预测不同培养条件下植物乳杆菌发酵产胆盐水解酶产量的变化.【总页数】5页(P47-51)【作者】李秀凉;王继超【作者单位】黑龙江大学生命科学学院,黑龙江哈尔滨150080;微生物黑龙江省高校重点实验室,黑龙江哈尔滨150080;农业微生物技术教育部工程研究中心,黑龙江哈尔滨150080;黑龙江大学生命科学学院,黑龙江哈尔滨150080;微生物黑龙江省高校重点实验室,黑龙江哈尔滨150080;农业微生物技术教育部工程研究中心,黑龙江哈尔滨150080【正文语种】中文【中图分类】Q815【相关文献】1.产胆盐水解酶植物乳杆菌降胆固醇作用的研究 [J], 汤慧勤;姚晓敏;徐一涵;张建华2.响应面法优化植物乳杆菌代谢产细菌素的发酵条件 [J], 陈琳;孟祥晨3.响应面法优化植物乳杆菌产β-半乳糖苷酶发酵培养基 [J], 高晓峰;周颖;李柏良;周晶;霍贵成4.响应面法优化植物乳杆菌LPL-1产细菌素发酵条件及细菌素理化性质分析 [J], 王瑶;李琪;李平兰5.藏灵菇源干酪乳杆菌KL1高产胆盐水解酶发酵条件的优化研究 [J], 刘慧;熊利霞;李金锭;程雪;张红星因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

响应面法优化阿维菌素产生菌培养基成分

响应面法优化阿维菌素产生菌培养基成分

响应面法优化阿维菌素产生菌培养基成分作者:王伊佳俞晨涛王月平来源:《安徽农学通报》2019年第21期摘要:以阿维菌素浓度为响应值,采用响应面法对阿维菌素产生菌培养基成分进行了优化。

在单因素试验的基础上,选取玉米淀粉浓度、硫酸铵浓度和丙酸钠浓度等3个因素进行了Box-Behnken试验。

结果表明,3个因素对阿维菌素浓度的影响显著,最佳培养基组成为:玉米淀粉35.45g/L,硫酸铵16.27g/L,丙酸钠1.56g/L。

在此条件下,阿维菌素的浓度达4.492g/L。

关键词:培养基;优化;响应面法;阿维菌素中图分类号 TQ920.6 文献标识码 A 文章编号 1007-7731(2019)21-0036-04Abstract:Taking the Avermectin concentration as the response value,the medium composition for producing strain of Avermectin was optimized by response surface methodology. Study three factors such as corn starch concentration,ammonium sulfate concentration,and sodium propionate concentration by the Box-Behnken response surface test,based on the single factor experiment. Results showed that three factors had all significant effect on the Avermectin concentration,corn starch concentration was 35.45g/L,ammonium sulfate concentration was 16.27g/L,sodium propionate concentration was 1.56g/L. Under the above conditions,the Avermectin concentration was 4.492g/L.Key words:Medium;Optimization;Response surface methodology;Avermectin阿维菌素(Avermectins,AVM)是由阿维链霉菌产生的十六元大环内酯类化合物[1],具有高效、低毒、安全的特点[2],已成为了一种广泛应用于农、林和养殖业的生物源杀虫、杀螨剂[3]。

响应面法优化谷胱甘肽发酵生产培养基的研究

响应面法优化谷胱甘肽发酵生产培养基的研究

响应面法优化谷胱甘肽发酵生产培养基的研究
郑丽雪;林霄;朱益波;齐斌
【期刊名称】《食品科学》
【年(卷),期】2008(029)008
【摘要】本研究以酿酒酵母变异株为出发菌株,利用Box-Benhnken中心组合设
计和响应面法对该菌株产谷胱甘肽的培养基组成进行优化.实验结果表明:在10°Bc'麦芽汁中添加38g/L葡萄糖、6.3g/L(NH4)2SO4及1.9g/L L-半胱氨酸盐酸盐时,谷胱甘肽产量达到120mg/L,生物量达到11.02g/L,比优化前分别提高了71.36%、39.67%.
【总页数】4页(P456-459)
【作者】郑丽雪;林霄;朱益波;齐斌
【作者单位】常熟理工学院生物与食品工程系,江苏,常熟,215500;长春中医药大学
第一附属医院,吉林,长春,130021;常熟理工学院生物与食品工程系,江苏,常
熟,215500;常熟理工学院生物与食品工程系,江苏,常熟,215500
【正文语种】中文
【中图分类】Q815
【相关文献】
1.响应面法优化谷胱甘肽发酵培养基的研究 [J], 周铭锋;黄瑶;张为巍;王常高;林建国;蔡俊
2.响应面法优化重组大肠杆菌发酵生产藻蓝蛋白培养基的关键介质组分 [J], 于平;
徐超超;朱鹏志
3.响应面法优化内切型菊粉酶发酵生产培养基 [J], 曹泽虹;秦卫东;李超;董玉玮;商学兵;王卫东;杨万根
4.酵母发酵生产谷胱甘肽的培养基优化 [J], 卞芙蓉;劳兴珍;郑珩;吴梧桐
5.响应面法优化黄原胶发酵生产培养基 [J], 严伟;李群良;杨克迪;龙云飞;文衍宣因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

利用响应面分析法进行氨肽酶发酵培养基的优化

利用响应面分析法进行氨肽酶发酵培养基的优化

利用响应面分析法进行氨肽酶发酵培养基的优化杨玉兰;杨萍;姜文侠;刘琦;周贺;梅保良【期刊名称】《食品研究与开发》【年(卷),期】2012(033)011【摘要】利用Minitab软件中的Plackett-Burman设计和响应面的Box-Behnken中心组合设计,对发酵生产甲硫氨酸氨肽酶的培养基进行优化.在培养基成分单因素优化的基础上,利用Plackett-Burman实验,确定麦芽糊精、酵母粉及硫酸镁为甲硫氨酸氨肽酶发酵生产的3个显著因素.进一步用最陡爬坡法实验将显著因素的水平逼近最优区域.最后用Box-Behnken建立这3个显著因素的二次回归模型,通过对响应面曲面进行分析,得出麦芽糊精、酵母粉和硫酸镁的最佳浓度分别为:26.00、5.3、0.204g/L.在优化培养基中,甲硫氧酸氨肽酶生产菌的发酵水平增加约1.11倍,达到50.84 U/mL,实验值与预期值基本相符.【总页数】5页(P176-180)【作者】杨玉兰;杨萍;姜文侠;刘琦;周贺;梅保良【作者单位】天津科技大学,天津300457;天津市工业生物系统与过程工程重点实验室,中国科学院系统微生物工程重点实验室,中国科学院天津工业生物技术研究所,天津300308;天津市工业生物系统与过程工程重点实验室,中国科学院系统微生物工程重点实验室,中国科学院天津工业生物技术研究所,天津300308;天津市工业生物系统与过程工程重点实验室,中国科学院系统微生物工程重点实验室,中国科学院天津工业生物技术研究所,天津300308;天津市工业生物系统与过程工程重点实验室,中国科学院系统微生物工程重点实验室,中国科学院天津工业生物技术研究所,天津300308;天津科技大学,天津300457;天津市工业生物系统与过程工程重点实验室,中国科学院系统微生物工程重点实验室,中国科学院天津工业生物技术研究所,天津300308;天津科技大学,天津300457;天津市工业生物系统与过程工程重点实验室,中国科学院系统微生物工程重点实验室,中国科学院天津工业生物技术研究所,天津300308【正文语种】中文【相关文献】1.利用响应面分析法优化γ-氨基丁酸发酵培养基 [J], 钟环宇;许建军;江波2.基于PB试验和响应面分析法对谷氨酸棒杆菌CN1021发酵培养基优化 [J], 李志华3.响应面分析法优化一株窖泥源酪丁酸梭菌(Clostridium tyrobutyricum)RL1菌株产丁酸发酵培养基 [J], 彭志云; 赵东; 胡晓龙; 何培新; 张勇; 郑燕; 牛广杰4.响应面分析法优化凝结芽孢杆菌发酵培养基 [J], 陈胜杰; 高翔; 袁戎宇5.利用响应面分析法优化鸟苷发酵培养基 [J], 盛翠;张一平;陆茂林因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

响应面法优化黑木耳胞外多糖液体培养基组成的研究

响应面法优化黑木耳胞外多糖液体培养基组成的研究

响应面法优化黑木耳胞外多糖液体培养基组成的研究
刘芳茗;胡耀辉;隋新
【期刊名称】《吉林化工学院学报》
【年(卷),期】2015(032)004
【摘要】研究了碳源、氮源、无机盐、维生素B2对于黑木耳液态深层发酵胞外多糖产量的影响.在单因素试验的基础上,以胞外多糖的产量为衡量指标,采用响应面法优化了培养基的组成.最终确定最适宜的培养基组成为玉米粉36.78 g/L,酵母浸粉11.23 g/L,无机盐6.10 g/L,维生素B286.06m g/L.在此条件下胞外多糖产量最大,预测值为6.074 g/L,实际值为5.905 g/L.
【总页数】5页(P72-75,80)
【作者】刘芳茗;胡耀辉;隋新
【作者单位】吉林农业大学食品科学与工程学院,吉林长春130118;吉林农业大学食品科学与工程学院,吉林长春130118;吉林化工学院生物与食品工程学院,吉林吉林132022
【正文语种】中文
【中图分类】TS201.3
【相关文献】
1.响应面法优化黑木耳菌液体发酵胞外多糖条件 [J], 李洋;宗希明;袁寰;史伟国;李野;王丽红;杜娟;周彤
2.黑木耳胞外多糖深层发酵培养基组成的优化 [J], 肖彩霞;章克昌
3.响应面法优化假单胞菌产胞外多糖发酵培养基 [J], 王晓霞;赵晨;赵祥颖;刘建军;张家祥
4.香魏蘑胞外多糖液体培养基的优化 [J], 暴增海;邱传庆;孙文博;王增池;马桂珍
5.舞茸菌丝体与胞外多糖液体培养基的优化 [J], 刘晓柱;李银凤;赵晓伟;刘晓辉;于志海;黄名正;张振;赵燕
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响应面法优化黑根霉胞外多糖脱蛋白工艺研究

响应面法优化黑根霉胞外多糖脱蛋白工艺研究

响应面法优化黑根霉胞外多糖脱蛋白工艺研究秦国正;琚勇;张明芮;李萍;柳春燕;唐保露;薛信磊;王国栋【摘要】The effects of papain concentration,enzymolysis temperature and time on the deproteinization of extracellular polysaccharide from Rhizopusnigricans in Enzyme-Sevag process were investigated by single-factor experiment combining with central composite design method ofBox-Behnken.The optimal process parameters were determined based on the deproteinization rate and comprehensive index.After optimizing by response surface methodology,the optimal process parameters were confirmed as follows:papain concentration of 425 U/mL,enzymolysis temperature of 62 ℃ and time of 90 min.Following repeated experiments three times,the average deproteinization rateand comprehensive index were determined as 54.08 % and 2.07,respectively.%采用单因素实验结合Box-Behnken中心组合设计方法,以蛋白质脱除率和综合指数为指标,考察木瓜蛋白酶浓度、酶解温度和酶解时间对黑根霉胞外多糖酶-Sevag法脱蛋白工艺的影响.经过响应面实验优化,确定最优条件为木瓜蛋白酶浓度425 U/mL、酶解温度62℃、酶解时间90 min,经三次重复实验验证,蛋白质脱除率与综合指数均值分别为54.08%和2.07.【期刊名称】《天然产物研究与开发》【年(卷),期】2017(029)010【总页数】7页(P1773-1778,1784)【关键词】黑根霉;胞外多糖;脱蛋白;酶-Sevag法;响应面法【作者】秦国正;琚勇;张明芮;李萍;柳春燕;唐保露;薛信磊;王国栋【作者单位】皖南医学院药学院;安徽省多糖药物工程技术研究中心;活性生物大分子研究安徽省重点实验室,芜湖241002;皖南医学院药学院;皖南医学院药学院;皖南医学院药学院;安徽省多糖药物工程技术研究中心;活性生物大分子研究安徽省重点实验室,芜湖241002;安徽省多糖药物工程技术研究中心;活性生物大分子研究安徽省重点实验室,芜湖241002;皖南医学院药学院;皖南医学院药学院;皖南医学院药学院;安徽省多糖药物工程技术研究中心;活性生物大分子研究安徽省重点实验室,芜湖241002【正文语种】中文【中图分类】R284.2黑根霉(Rhizopusnigricans)是一种接合菌类丝状真菌。

响应面法优化恩拉霉素发酵培养基

响应面法优化恩拉霉素发酵培养基

响应面法优化恩拉霉素发酵培养基唐慧慧;杨淑慎;郭伟利;李清黎【摘要】Plackett-Burman experiment was used to evaluate the optimal level of 8 factors in Streptomyces fungicidious ERS42-101108 Enramycin initial fermentation medium production , results showed that cottonseed meal , gluten meal and KH 2 PO4 had significantly effect on enramycin production .Steepest ascent was used to approach the key factors of the maximum response region , and by central composite design and response surface , optimum fermentation medium was established .Following the above optimization process , fermentation unit Enramycin increased from 8300 u/mL to 10250 u/mL.%通过Plackett-Burman实验对杀真菌链霉菌Streptomyces fungicidious ERS42-101108产恩拉霉素初始发酵培养基中的8个因素的最佳水平进行评价,表明棉籽饼粉、麸质粉和磷酸二氢钾对恩拉霉素产量影响显著。

用最陡爬坡实验逼近关键因素的最大响应区域,通过中心组合实验和和响应面分析,确定了最佳发酵培养基。

经上述优化,恩拉霉素发酵单位从8300 u /mL提高到10250 u/mL。

响应面法优化芽孢杆菌CJPE209产角蛋白酶发酵培养基的研究

响应面法优化芽孢杆菌CJPE209产角蛋白酶发酵培养基的研究

响应面法优化芽孢杆菌CJPE209产角蛋白酶发酵培养基的研究蒋彪;王常高;杜馨;林建国;蔡俊【摘要】采用响应面法对芽孢杆菌(Bacillus sp.) CJPE209产角蛋白酶的发酵培养基组分进行优化.在前期单因素优化的基础上利用Plackea-Burman试验设计筛选出影响产酶的2个显著性因素:羽毛粉、蔗糖.在此基础上,采用最陡爬坡试验确定中心复合试验的中心点,然后对其他不显著因素进行最低添加量试验以降低生产成本和简化培养基组分.利用中心复合试验,得到预测最佳培养基组成为羽毛粉5.6 g/L、蔗糖13.6 g/L、尿素5.0g/L、KH2PO40.4 g/L、MgSO41.44 g/L、CaC12 1.1g/L、NaC1 5.0g/L,预测角蛋白酶酶活为501.9 U/mL.用预测最佳培养基来进行发酵验证试验,结果实际角蛋白酶酶活为503.5 U/mL,表明模型能较好的预测发酵后酶活.%The formula of fermentation medium for keratinase production by Bacillus sp.CJPE209 was optimized by response surfacemethodology.Based on single factor experiments,two significant factors (feather meal,sucrose) that affected enzyme activity were screened by Plackett-Burman experiments.On that basis,the steepest ascent experiment was used to determine the center point of central composite design (CCD),and the minimum addition experiments were applied to confirm the minimum addition of other non-significant factors for reducing the cost and simplifying the medium components.Then the optimal medium formula was forecasted by CCD as follows:feather meal 5.6 g/L,sucrose 13.6 g/L,urea 5.0 g/L,KH2PO4 0.4 g/L,MgSO4 1.44 g/L,CaCl2 1.1 g/L,NaC1 5.0 g/L,and the forecasted keratinase activity was 501.9 U/ml.The actualkeratinase activity in verification tests reached 503.5 U/ml,which showed that the model could be used to predict keratinase activity after fermentation.【期刊名称】《中国酿造》【年(卷),期】2017(036)005【总页数】5页(P76-80)【关键词】芽孢杆菌;角蛋白酶;响应面法;培养基优化【作者】蒋彪;王常高;杜馨;林建国;蔡俊【作者单位】湖北工业大学发酵工程教育部重点试验室工业发酵湖北省协同创新中心,湖北武汉430068;湖北工业大学发酵工程教育部重点试验室工业发酵湖北省协同创新中心,湖北武汉430068;湖北工业大学发酵工程教育部重点试验室工业发酵湖北省协同创新中心,湖北武汉430068;湖北工业大学发酵工程教育部重点试验室工业发酵湖北省协同创新中心,湖北武汉430068;湖北工业大学发酵工程教育部重点试验室工业发酵湖北省协同创新中心,湖北武汉430068【正文语种】中文【中图分类】Q815The formula of fermentation medium for keratinase production byBacillussp.CJPE209 was optimized by response surface methodology. Based on single factor experiments,two significant factors(feather meal,sucrose)that affected enzyme activity were screened by Plackett-Burman experiments.On that basis,the steepest ascent experiment wasused to determine the center point of central composite design(CCD),and the minimum addition experiments were applied to confirm the minimum addition of other non-significant factors for reducing the cost and simplifying the mediumcomponents.Then the optimal medium formula was forecasted by CCD as follows:feather meal 5.6 g/L,sucrose 13.6g/L,urea 5.0 g/L, KH2PO40.4 g/L,MgSO41.44 g/L,CaCl21.1 g/L,NaCl 5.0g/L,and the forecasted keratinase activity was 501.9 U/ml.The actual keratinase activity in verification tests reached 503.5 U/ml,which showed that the model could be used to predict keratinase activity after fermentation.Bacillussp.;keratinase;response surface methodology;medium optimization 角蛋白是一种不溶于水、盐、稀酸或稀碱,自然界中广泛存在的硬质蛋白,其蛋白结构中的多肽多由二硫键、氢键和疏水作用的其他化学键高度交联形成较为稳定的空间结构[1]。

响应面法优化乳酸链球菌素发酵培养基成分

响应面法优化乳酸链球菌素发酵培养基成分

响应面法优化乳酸链球菌素发酵培养基成分周斌;陈立业;王甜;刘亚丽;谭之磊【期刊名称】《中国酿造》【年(卷),期】2012(031)010【摘要】乳酸链球菌素由于对革兰氏阳性腐败和致病菌的广谱抗菌活性而作为天然防腐剂在食品工业中广泛使用.为提高乳酸链球菌素发酵水平,以乳酸乳球菌(Lactococcus lactis ctis) TCCC12001为生产菌株,采用响应面法对发酵培养基进行了优化,确定了该菌发酵的最佳培养基配方(g/L):蔗糖20、酵母粉10、蛋白胨9、牛肉膏5、K2HPO4·12H2O 10、NaCl2、MgSO4·7H2O 0.2.最适发酵条件为:培养基初始pH值7.0,发酵温度30c,种龄10h,接种量3%,培养10h.在此条件下乳酸链球菌素的效价最高达1436IU/mL,比初始效价提高了69%.【总页数】3页(P150-152)【作者】周斌;陈立业;王甜;刘亚丽;谭之磊【作者单位】浙江新银象生物工程有限公司,浙江天台317200;工业发酵微生物教育部重点实验室,天津科技大学生物工程学院,天津300457;工业发酵微生物教育部重点实验室,天津科技大学生物工程学院,天津300457;工业发酵微生物教育部重点实验室,天津科技大学生物工程学院,天津300457;工业发酵微生物教育部重点实验室,天津科技大学生物工程学院,天津300457【正文语种】中文【中图分类】TQ920.6【相关文献】1.响应面法优化植物乳杆菌发酵产胆盐水解酶的培养基成分 [J], 李秀凉;王继超2.响应面法优化Streptomyces albus B-215菌发酵产ε-PL的培养基成分 [J], 杨玉红;刘芳;康宗利;段玉玺3.响应面法优化阿维菌素产生菌培养基成分 [J], 王伊佳; 俞晨涛; 王月平; 徐冉; 张奕婷; 于波4.响应面法优化乳酸乳球菌KLDS4.0325产叶酸的培养基成分及发酵条件 [J], 焦雯姝;关嘉琦;史佳鹭;李柏良;陆婧婧;闫芬芬;李娜;占萌;霍贵成5.响应面法优化富硒粗毛纤孔菌菌丝生长培养基成分 [J], 宋飞飞;沈丽宫;尤洁;王翠;曹晓;王倩雯因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

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第37卷 第7期2009年7月西北农林科技大学学报(自然科学版)Journal of Northwest A&F University(Nat.Sci.Ed.)Vol.37No.7J ul.2009响应面法优化Xenor habdus nematop hil a发酵培养基的研究3王永宏,张 强,张 兴(西北农林科技大学无公害农药研究服务中心,陕西杨凌712100)[摘 要] 【目的】提高Xenorhabdus nematop hila Y L001的抗菌活性,为该菌株杀菌活性成分的提取分离及生物农药的开发应用奠定基础。

【方法】以YSG培养基为基础,采用单因子试验方法,对最佳碳源和氮源进行筛选,并采用全因子中心组合试验设计和响应面法对其最佳配比进行优化。

【结果】Y L001菌株的最佳碳源为玉米粉,氮源为豆饼粉,培养基的最佳组成为:玉米粉9.69g/L,豆饼粉76.50g/L,MgSO41.07g/L,(N H4)2SO41.79g/L,KH2PO40.63g/L,K2HPO40.80g/L,Na2SO41.25g/L,在此条件下,Y L001菌株抗菌活性达268.9U/mL。

【结论】培养基优化后Y L001菌株的抗菌活性与试验的预测值接近,表明响应面法在培养基优化中十分有效,相对简单,且节省时间和材料。

[关键词] Xenorhabdus nematop hila;抗菌活性;响应面法;发酵培养基[中图分类号] S476+.15[文献标识码] A[文章编号] 167129387(2009)0720140207Enhanced antibiotic activity of Xenorhabdus nematophila by fermentation medium optimization with re sponse surface methodologyWAN G Y ong2hong,ZHAN G Qiang,ZHAN G Xing(B iorational Pestici des Research and Service Center,N ort hwest A&F Universit y,Yangli ng,S haanx i712100,China)Abstract:【Objective】The st udy enhanced t he antibiotics activity of X enorhabd us nem atop hil a YL001,and laid foundation for antibacterial active constit utent s separation of Y L001st rain,develop ment and application of such biological resource.【Met hod】YSG was employed as an original medium,and t he best carbo n and nit rogen sources were identified using one2factor2at2a2time app roach.A f ull factorial com2 posite experimental design and response surface met hodology were used in t he design of experiment s and in t he analysis of result s.【Result】Corn flour and bean cake powder were identified as t he best carbon.The optimal levels of medium component s were:corn flour9.69g/L,bean cake powder76.50g/L,MgSO41.07 g/L,(N H4)2SO41.79g/L,KH2PO40.63g/L,K2H PO40.80g/L,Na2SO41.25g/L.【Conclusion】The re2 sult s st rongly support t he use of RSM for medium optimization.The chosen met hod of optimization of me2 dium compo sition was efficient,relatively simple and time and material saving.K ey w ords:X enorhabd us nem atop hil a;antibiotic activity;response surface met hodology;fermention medium 嗜线虫致病杆菌(X enorhabd us nem atop hil a)是一种革兰氏阴性细菌,属肠杆菌科,其与斯氏线虫(S tei nernem a)共生,存在于侵染期线虫肠腔内,侵染期线虫通过一些自然孔口进入寄主昆虫体内,将3[收稿日期] 2008209222[基金项目] 国家“863”计划项目(2003AA241140);西北农林科技大学青年学术骨干项目(52211241);西北农林科技大学科研专项[作者简介] 王永宏(1968-),男,陕西凤翔人,副教授,博士,主要从事生物农药及发酵技术研究。

E2mail:yhwang@共生菌释放到寄主昆虫血淋巴中,共生菌在血淋巴中大量繁殖,使寄主昆虫患败血症死亡[1]。

嗜线虫致病杆菌(X.nem atop hil a)能产生多种代谢产物,如Xenocoumacins[2]、Nematop hin[3]和Xenemati2 de[4]等,这些代谢产物不仅具有多种化学结构,而且在医药和农业上具有抗菌、杀虫、杀线虫、抗溃疡、抗肿瘤和抗病毒活性[5],应用前景和商业潜力较大。

培养基是微生物生长、代谢的物质基础,其成分和配比对产物的发酵单位、发酵周期及提取分离工艺等都会产生很大影响[6],因而发酵培养基的优化在发酵工业中具有十分重要的作用。

培养基优化时最常用的策略是单次单因子(one2variable2at2a2 time)法。

但在考察的因素较多时,需要太多的试验次数和较长的试验周期,而且不能考察各因素间的交互作用,使得该方法的应用受到一定的影响。

为了弥补单次单因子法的缺陷,数理统计优化法,如全因子试验法、正交设计法、Plackett2Burman设计法、响应面优化设计法、均匀设计法等已成功地运用于微生物发酵培养基的优化[7]。

目前,采用全因子中心组合试验设计和响应面法优化嗜线虫致病杆菌(X.nem atop hil a)发酵培养基的研究,国内外尚未见文献报道。

因此,本试验在前期研究的基础上,采用全因子中心组合试验设计和响应面法,对从陕西杨凌筛选的具有较高杀菌活性的共生菌X.nem ato2 p hil a Y L001[8211]的发酵培养基进行了优化,以期为该菌株杀菌活性成分的提取分离及生物农药的开发提供依据。

1 材料与方法1.1 试验材料1.1.1 供试菌株 X.nem atop hil a Y L001(以下简称YL001),由西北农林科技大学无公害农药研究服务中心从采自陕西杨凌的线虫S tei nernem a sp. YL001中分离鉴定获得。

1.1.2 供试碳源、氮源 碳源:葡萄糖、果糖、蔗糖、乳糖、麦芽糖、淀粉、甘油、玉米粉、麸糠;氮源:胰蛋白胨、眎蛋白胨、大豆胨、蛋白胨、牛肉膏、豆饼粉、酵母提取物、棉饼粉、鱼粉及尿素,均由西北农林科技大学无公害农药研究服务中心提供。

1.1.3 培养基 斜面及平板培养基:NA培养基,牛肉膏3.0g,蛋白胨5.0g,营养琼脂20g,水1000 mL,p H7.2~7.4。

共生菌鉴别培养基:NB TA培养基,NA+氯化三苯基四氮唑(T TC)0.04g+溴麝香草酚蓝(B TB)0.025g。

基础培养基:YSG培养基,甘油5g,酵母提取物15g,1mol/L MgSO45mL,(N H4)2SO42g,1 mol/L KH2PO45mL,1mol/L K2HPO45mL,1 mol/L Na2SO410mL,水1000mL,p H7.2~7.4。

1.2 方 法1.2.1 共生菌发酵液及无菌滤液的制备 取保种管保存的Y L001菌株,划线接种于NA培养基平板上,28℃培养24~48h。

挑取单菌落,划线接种于NB TA培养基平板上,28℃培养48h。

挑取蓝色初生型单菌落,接种于摇瓶YSG培养基中,28℃、180 r/min振荡培养16h后,取培养物,以体积分数5%的接种量转接于相同的发酵培养基中,28℃、180 r/min培养72h,得共生菌发酵液。

将发酵液在14000r/min、4℃离心10min,取上清液用0.22μm 滤膜过滤除菌,得发酵液无菌滤液。

1.2.2 发酵液无菌滤液抗菌活性的测定 采用琼脂扩散法测定YL001菌株发酵液无菌滤液的抗菌活性。

将熔化的NA培养基冷却至45~50℃,按体积分数1.5%加入指示菌摇匀,倒入培养皿,每皿(d=9.0cm)15mL,制好平板后,用打孔器(直径7.5mm)在平板上均匀打3个孔,每孔内加入100μL共生菌发酵液无菌滤液,以YSG培养基为对照,在28℃培养24h,从孔边缘测量抗菌圈直径。

Y L001菌株抗菌活性单位的定义:在上述测定条件下,1.0mm的抗菌圈定义为1个活性单位(U),即此发酵液无菌滤液活性为10U/mL或10000U/L。

1.2.3 最佳碳源、氮源的选择 以不同的碳源、氮源分别代替YSG培养基中相应的碳源(甘油)或氮源(酵母提取物),其他成分及含量不变,按1.2.1的方法培养72h,研究不同碳源、氮源对Y L001菌株发酵液无菌滤液抗菌活性的影响。

1.2.4 试验设计及响应面优化 采用全因子中心组合试验设计(CCD)和响应面法(RSM)优化Y L001菌株发酵培养基。

以抗菌活性为响应值(Y),碳源(X1)、氮源(X2)和无机盐(X3)分别为自变量,其中碳源、氮源由1.2.3筛选获得,无机盐为YSG培养基中无机盐含量的总和(各成分间的比例不变)。

发酵培养基优化试验的因素、水平设计见表1。

141第7期王永宏等:响应面法优化Xenorhabdus nematophila发酵培养基的研究表1 Y L001菌株发酵培养基优化试验的因素和水平Table 1 Experimental range and levels of the independent variables水平Level因素/(g ・L -1)Variable 碳源X 1Carbon source氮源X 2Nitrogen source无机盐X 3Mineral步长Step chang3.020.0 2.0-1.682 5.011.0 3.0-17.024.5 4.2010.044.5 6.2113.064.58.21.68215.078.09.4 各因素质量浓度与其对应自变量的编码转化公式:x i =(X i - X i )/ΔX i ,i =1,2,3,…,k 。

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