衍生化-HPLC法测定人血清中丙戊酸浓度
柱前衍生化-HPLC法测定患者体内丙戊酸钠的血药浓度
２ １ 色谱条件 ．
色谱柱 ： ｔ ｓｓｍｍ ｔ ｌ（ ． Ｗａｅ ｙ ｅ Ｃ８ ４ ６ｍｍ× ５ ｒ ｙ ｒ ２０
ｍｍ， ｍ） 流动相为 甲醇一 （ ２： ８ ； ５ ； 水 ８ １ ） 检测波长 ：４ ｍ； ２ ８ｎ 流
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丙 戊 酸 钠 分 子 结 构 中 缺 乏 特 征 的 紫 外 吸 收 ， 法 用 无
涡旋振荡器 （ 上海医科大学仪器厂 ） 医用高纯度 氮气 ， Ｙ Ｌ ； Ｅ Ｅ— Ａ ．２０氮吹仪 （ 京 ＲＫ Ｋ Ｋ Ｉ 司 ） Ｈ ＭＧ２ ０ 东 ＩＡ ＩＡ 公 ， Ｈ数 显恒 温水 浴锅 （ 江苏金坛市金城 国胜实 验仪器 厂 ） Ｔ Ｌ１Ｈ 高速离 心 ，Ｇ 一 ６
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抗癫痫药的药物浓度检测原理及方法
抗癫痫药的药物浓度检测原理及方法癫痫是一种由多种原因引起的慢性反复发作性神经系统常见病，药物控制仍是当前主要治疗手段。
苯妥英钠、丙戊酸等为临床常用的抗癫痫药物，由于它们的药物动力学存在明显个体差异，有些药物的治疗窗较窄，容易发生不良反应，所以进行TDM十分必要。
一、苯妥英钠紫外分光光度法测定苯妥英钠血药浓度如下：1.原理用二氯甲烷提取血清中的苯妥英（phenytoin），苯妥英在碱性溶液中经高锰酸钾氧化生成二苯酮，再用环己烷提取二苯酮，二苯酮在（247±1）nm处有一最大吸收峰，以此波长测定其吸光度，可以进行定量分析。
2.主要试剂pH 6.8磷酸盐酸缓冲液，二氯甲烷，7mol/L NaOH溶液，高锰酸钾饱和溶液，环己烷。
3.操作（1）于各标准管分别加入0.5ml正常人混合血清和不同量苯妥英标准品；于另一试管中加入待测血清0.5ml。
各管均加入pH 6.8磷酸盐缓冲液2ml。
（2）用10ml二氯甲烷提取2次。
（3）合并二氯甲烷提取液，然后加入7mol/L NaOH 7ml，摇匀，离心分离，吸弃二氯甲烷，分离出的碱液加热除去残留二氯甲烷。
（4）加饱和KMnO4溶液2.5ml摇匀，置80℃水浴中加热20分钟，取出冷却至室温。
（5）加入2.5ml环己烷提取。
（6）将提取液置于波长247nm测定吸光度。
4.计算以标准管苯妥英浓度为纵轴，吸光度为横轴，绘制标准曲线，用样品的吸光值在标准曲线上查出对应浓度。
5.参考区间有效治疗浓度：癫痫和心律失常10～20μg/ml（游离药物浓度1～2μg/ml）。
最小中毒浓度：20μg/ml。
6.方法学评价（1）本法线性范围1～30μg/ml；最低检测限：0.5μg/ml；回收率：98.28%±2.94%；CV 2.99%。
苯巴比妥、乙琥胺、扑痫酮、卡马西平、地西泮及苯妥英代谢产物羟基苯妥英不干扰测定。
（2）紫外分光光度法所用仪器相对低廉，能被一般医疗单位尤其是基层医疗单位接受，而且其精密度、准确度、回收率能够满足治疗药物监测的要求。
柱前衍生-高效液相色谱法测定丙戊酸钠血药浓度
柱前衍生-高效液相色谱法测定丙戊酸钠血药浓度周春华;张志清;李飞高;亢泽坤;李敬瑄;张雪宁【摘要】目的建立柱前衍生-高效液相色谱法测定血清样品中丙戊酸钠的含量.方法以Diamonsil C18(4.6×250mm 5μm)为色谱柱,流动相为甲醇-水(87:13,V/V),检测波长为245nm;流速为1.0mL/min;柱温25℃.样品酸化提取后经α-溴代苯乙酮衍生化后分析,环己烷羧酸为内标.结果标准曲线线性相关系数R为0.999 3,线性范围15.0～180.0μg/mL,平均回收率为103.2%,日内、日间相对标准差均小于10%,最低检出浓度为0.3μg/mL.结论该方法简便、准确,适合于临床血药浓度监测.【期刊名称】《河北医科大学学报》【年(卷),期】2013(034)011【总页数】4页(P1422-1425)【关键词】丙戊酸;色谱法;高压液相;血药浓度【作者】周春华;张志清;李飞高;亢泽坤;李敬瑄;张雪宁【作者单位】河北医科大学第二医院药学部,河北,石家庄,050000;河北医科大学第二医院药学部,河北,石家庄,050000;河北医科大学第二医院药学部,河北,石家庄,050000;河北医科大学第二医院药学部,河北,石家庄,050000;河北医科大学第二医院药学部,河北,石家庄,050000;河北医科大学第二医院药学部,河北,石家庄,050000【正文语种】中文【中图分类】R969.11丙戊酸钠（sodium valproate，VPA）是临床上常用的抗癫痫药物［1］，当其血药浓度＞100μg/mL时，其不良反应增加而疗效无明显增加，是血药浓度监测的常检药物，有效血药浓度为50～100μg/mL，血药浓度与疗效及毒性反应密切相关，是需进行常规监测的药物之一［2-4］。
由于VPA在紫外区无特征吸收，不易直接检测，临床上常用气相色谱测定，但存在萃取过程药物挥发的问题。
近年来，采用柱前衍生-高效液相色谱（high performance liquid chromatography，HPLC）法衍生化测定VPA血药浓度的报道［5-6］也较多，但多采用的衍生化试剂、条件及方法各不相同。
高效液相色谱法测定丙戊酸血药浓度
高效液相色谱法测定丙戊酸血药浓度陈坚方维军吴芳张灯玲丁宗政!上海市松江区中心医院药剂科上海"#$%##&’摘要(目的)建立测定血浆中丙戊酸血药浓度的高效液相色谱法*方法)血浆用正己烷提取+经,-溴苯乙酮衍生后浓集进样+采用.//01234$5柱!$6#7789:%77+6;7&+以甲醇<水!5#<"#&为流动相+环己烷羧酸为内标物+在波长"95=7处测定*结果)丙戊酸的线性范围为$$:>$?$5$:##;@A7/+平均回收率大于B C D+日内和日间E F G H6D*结论)本法快速I简便I 准确+适用于丙戊酸血药浓度测定*’关键词(高效液相色谱法J丙戊酸J血药浓度’中图分类号(E B C$K:%J E B$C’文献标识码(.’文章编号($##C-99#%!"###-#"B%-#>L M N M O P Q R S N Q T RT U V S W X O T Q Y S Y Q Z Q R[M O\P]^_Q‘_X M O U T O P S R Y M W Q a\Q Z Y_O T P S N T‘b O S X_^431=c d e=+f e=@g1d h i=+gif e=@+j k l m!n j o l p k q j r k s tu v l p q l w x+y v l r z v l{y s r z|{l r z}j r k j p~s!o{-k l m+y v l r z v l{"#$%##&’"#$%&"’%("())*+,101-7d=1.e//-+d2e2d,d=01-i7123d@3/1-3+-7e=21/d4i d,23-+7e0+@-e/32 !5674&8)9%:;L$)422/+31<e=12e-1+<2/d2e2d,=e001/1201,e0e=d=01-=e/00e=,e-,8.>?,10120+-!"95=7&e=,4$52+/i7==e0i01,8F1-i70e7//1!#:$7/&=e01<0-e201,=d03"7/e210d2=-31<e=18?e/-/-+d2e2d,d=+-@e=d2/e21-=e0,1-d.1,12e,,d=@d=0+,-1-+7+e210+/31=+=18*31+-@e=d2/e21-=e01.e/+--e01,0+,-2=100i=,1-@"00-1e78&9$A B%$)*31/d=1e-d02+3.e//-+d2e2d,=e0$$:>$C$5$:#;@A7/8*31 -1/e0d.100e=,e-,,1.d e0d+=!E F G&+3d=01--,e2e=,d=0-e-,e23+-.e//-+d2e2d,=e0/10003e=6D8*311<-0-e20d+=-12+.1-2=e07+-103e=B C D8*31,10120d+=/d7d00d=01-i7=1-1#:6;@A7/3+-.e//-+d2e2d,8’;D’B A$(;D)*317103+,d0e22i-e01e=,01=0d0d.1+0i d0e1/13+-031-e/1i0d2,-i@7+=d0+-d=@!*G E&e=, /3e-7e2+F d=10d200i,2+3.e//-+d2e2d,8’G9HI;&L$(3d@3/1-3+-7e=21/d4i d,23-+7e0+@-e/32J.e//-+d2e2d,J01-i72+=21=0-e0d+=丙戊酸!.e//-+d2e2d,&在临床上常用于抗癫治疗+由于药物的剂量和血药浓度间的个体差异很大*因此+在长期用药或增减药物剂量时对体内血药浓度进行监测显得十分必要*由于丙戊酸在紫外区无特征性吸收+故有关丙戊酸的血药浓度测定方法多为气相色谱法或酶免疫法*虽有高效液相色谱法的报道+但都各有不同J$+"K*本法采用,-溴苯乙酮将丙戊酸衍生化+生成苯甲酰甲基丙戊酸+在紫外条件下+用5674法测定血清中丙戊酸的浓度*此法快速I简便I准确+适用于丙戊酸临床血药浓度监测* L材料与方法L:L仪器M N@*E N@>""型高效液相色谱仪J M N@*E N@>>"型可变紫外检测器J M N@*E N@ G96#数据处理系统J5#-"离心沉淀器!上海手术器械厂&J5-B"微型混合器!西巴斯生物技术开发公司&J电热恒温水浴锅!上海医疗器械厂&*L:O药品和试剂丙戊酸标准品!湖南湘中制药有限公司+纯度B B:6D以上&J环己烷羧酸!f/i F e2317d1.P&J,-溴苯乙酮I正己烷I乙腈I硫酸I三乙胺I氨水均为分析纯+甲醇为色谱纯*L:Q色谱条件.//01234$5柱!$6#7789:%77+ 6;7&+流动相为甲醇<水!5#<"#&+检测波长"95 =7+流速$:#7/A7d=+灵敏度#:#6.>f F+进样量"#;/*内标为环己烷羧酸*在本实验条件+两种物质R%B"R中国临床药学杂志45S@T F T c N>E@.7N f47S@S4.765.E E.4U"###年第B卷第6期医生在线的色谱峰分离良好!血浆内源性物质峰无干扰"内标保留时间为#$%&’()!苯甲酰甲基丙戊酸保留时间为*$*+’(),图%-"[#-e __f _g G )g,O J H ’E-h G i )_g G )g,O J H ’E -j f g G k f U lU m n f,o-j p q,o-%%$&%%%$F +rD $&D +N $N &rF $*D F $*D +D $#D N N $F +rD $*%+*$#K rD $*N D $N D %N %$D D%*+$%#r&$&++N $+N r%$N *%$N *表Q 丙戊酸的日内和日间精密度‘7a Q s ?847t >7c7?>0?8@4t >7c<4@=0A 05?59:7;<450=7=0>,d[#-e __f _g G )g ,O J H ’E -u )n U m B _m l h G i )_g G )g,O J H ’E -j p q,o-u )n f U B _m l h G i )_g G )g,O J H ’E -j p q,o-%%$&%%D $N N rD $M %&$*M %D $K #rD $&*&$M *+D $#D +%$N D rF $F &F $M &+%$D +rF $M D F $K M %N %$D D%*N $N D rF $N #%$#+%*N $&+r#$F +F $+KQ $Q 专一性考虑到临床检测及药物动力学研究的干扰情况!选择了几种可能合用的药物进样!结果扑米酮L 地西泮L 苯巴比妥L 苯妥英钠和卡马西平在该色谱条件下均不出峰!可见以上药物对本法测定无干扰"Q $v 临床应用w 病例%x 男!#*l !癫病史F D m "目前用药情况T 丙戊酸钠H 丙戊酸缓释片D $#J !y _!卡马西平片D $%J !n (_"于清晨服药前抽血!在本色谱条件下!测得丙戊酸的谷药浓度为F %$F +O J H ’E!未见有卡马西平的干扰!同时在另一色谱条件下!测得卡马西平的谷药浓度为K $K M O J H ’E "分析两药合用!卡马西平可增加肝脏代谢!导致丙戊酸的谷药浓度低于治疗范围!但由于卡马西平的谷药浓度在治疗范围内!故患者的症状仍得以控制"w 病例F x 女!*l !%m 前诊断为癫"目前用药情况T 丙戊酸钠片D $&J !z (_"于清晨服药前抽血!在本色谱条件下!测得丙戊酸的谷药浓度为M +$*+O JH {*+F {中国临床药学杂志|}u W ~p ~!"#j W e I "h|I u W u |e I $}e j %e |&F D D D 年第+卷第#期医生在线!"#接近治疗范围#经与临床医师沟通#测定结果与临床症状基本相符$%讨论有文献&’(报道血清样品用正戊烷提取#但实际操作中发现#当加入正戊烷进行振荡提取时#极易发生乳化凝固现象#经过反复测试#改用正己烷提取后#克服了上述的缺点#提高了分离效果$在衍生化试剂使用方面#有文献&)#*(报道#用对溴代苯酰甲基澳和+,溴,对,硝基苯乙酮#而本法采用的-,溴苯乙酮则具有价廉.易得的特点#并且为衍生化反应提供了多种选择$国内有报道&’(的检测波长为+/*和+0/1!#但经紫外扫描后我们发现苯甲酰甲基丙戊酸的紫外最大吸收波长应为+*21!$国内外所报道&’#/(的采用荧光检测的高效液相色谱法#虽然检测灵敏度高#但需有荧光检测器#检测条件要求较高#一般医院难以开展$而本法所采用的条件简便.价廉#并且灵敏度.精密度.准确性及专一性均符合测试要求#适用于丙戊酸的临床治疗药物浓度监测$3参考文献4&)(郝润喜#闫彩萍#刘玉玺5高效液相色谱,柱前衍生法测定丙戊酸镁血药浓度5药物分析杂志#)667#)78’9:)7+&+(郁健#王广基#杜春波#等5高效液相色谱法测定人血清中丙戊酸钠的含量5中国药科大学学报#)662#+68)9:*/&’(黄希顺#唐敦立5丙戊酸类药物的药理与临床5郑州:河南医科大学出版社#)667#)/*;)/0&*(胡纪原#谢晓梅#洪铭范5等5<=>=?法结合紫外吸收衍生法测定血清丙戊酸浓度5安徽医学#)667#)2809:00&/(<@A B#C@!D A@E#F1G D H C#I J K L5M H N H A!O1@N O G1G P Q@"R A G O S@S O T O1U D!@1V H A D!W X U O Y U,R H A P G A!@1S H"O Z D O T S U A G!@N G Y A@R U X [O N UP"D G A H V S H1S H T H N H S N O G15\O G"=U@A!\D""#)666#++869:67/8+]]],]/,)2收稿9;26+;中国临床药学杂志?<F<=B=>?@><d A?B?A F<F?d A=<d>Ed?C+]]]年第6卷第/期。
高效液相色谱法测定人血清中丙戊酸钠含量
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高效液相(HPLC)荧光法同时测定人血浆中4种硫醇物的浓度
高效液相(HPLC)荧光法同时测定人血浆中4种硫醇物的浓度杨涛;沈杰【摘要】目的建立同时测定人血浆中半胱氨酸(cysteine,Cys)、同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)、半胱氨酰甘氨酸(cysteinylglycine,CysGly)和谷胱甘肽(glutathione,GSH)等4种硫醇物的高效液相色谱法(highperformance liquid chromatography,HPLC).方法血浆经磷酸盐缓冲液(phosphate buffered saline,PBS)稀释后,用三(2羧乙基)膦盐酸盐[tris (2 carboxyethyl) phosphine hydrochloride,TCEP]还原,用三氯乙酸(trichloroacetic acid,TCA)溶液进行蛋白沉淀,再用7氟苯呋咱4硫酸铵盐(7 fluorobenzofurazan-4 sulfonic acidammonium salt,SBD F)进行衍生化反应,荧光检测器检测.色谱条件:色谱柱为Kromasil C18 (250 mm×4.6mm,5 μm),柱温29℃;流动相为甲醇:0.1 mol/L醋酸盐缓冲液(pH=4.5,3.5:96.5,V/V),流速为0.8 mL/min,等度洗脱.激发波长385 nm,发射波长515 nm.采用外标法定量.结果 Cys、Hcy、CysGly和GSH的线性范围分别为50～800 μmol/L、4～64 μmol/L、10～160 μmol/L和2.5～40μmol/L.Cys、Hcy、CysGly和GSH的最低检测浓度分别为2.5 μmol/L、1.0 μmol/L、1.0 μmol/L和1.0 μmol/L.各组分日内、日间精密度RSD均＜12％.平均回收率为95.01 ％～116.17％.结论该方法具有检测时间短、灵敏性高、精密度和准确度好的特点,适用于临床人血浆中硫醇物浓度的常规检测.【期刊名称】《复旦学报（医学版）》【年(卷),期】2014(041)005【总页数】6页(P679-684)【关键词】高效液相色谱法(HPLC);同型半胱氨酸(Hcy);半胱氨酰甘氨酸(CysGly);半胱氨酸(Cys);谷胱甘肽(GSH)【作者】杨涛;沈杰【作者单位】复旦大学附属华东医院药剂科上海200040;上海市老年医学研究所老年临床药理研究室上海200040;复旦大学附属华东医院药剂科上海200040;上海市老年医学研究所老年临床药理研究室上海200040【正文语种】中文【中图分类】O657.7+2生物硫醇，如半胱氨酸（cysteine，Cys）、同型半胱氨酸（homocysteine，Hcy）、半胱氨酰甘氨酸（cysteinylglycine，CysGly）和谷胱甘肽（glutathione，GSH），在生物组织和体液中广泛分布，并且在生物系统中起着非常重要的作用［1-2］。
HPLC
HPLC-FLU法测定人血浆样本中丙戊酸浓度一、摘要丙戊酸分子式为C8H16O2，分子量：144.21，CAS号：99-66-1。
丙戊酸为无色液体，沸点221℃，相对密度1.1，折光率1.425，闪点111℃，略溶于水。
双丙戊酸在肠道内分解为丙戊酸，其体内吸收与丙戊酸钠的吸收量相似，丙戊酸与血浆蛋白的结合率随药物浓度增加而减少，在4040mg/L时蛋白结合率为90%，丙戊酸主要经肝脏代谢，尿液中原型药物的排泄量仅占总给药量的3%左右。
双丙戊酸钠单次给药后的半衰期为9到16H，监床患者连续服用7天（250mg,Bid）后血浆中丙戊酸浓度在50-100mg/L范围内波动。
二、关键词丙戊酸庚酸双丙戊酸钠癫痫双丙戊酸钠HPLC三、引言丙戊酸（Valproic Acid）为一种不含氮的广谱抗癫痫药。
本品对多种方法引起的惊厥，均有不同程度的对抗作用。
对人的各型癫痫如对各型小发作、肌阵挛性癫痫、局限性发作、大发作和混合型癫痫均有效。
一般认为它对癫痫症疗效归因于增加脑部γ氨酪酸（GABA）的浓度。
亦用作心境稳定剂，有效控制躁狂或抑郁发作而不会引起转相、长期使用可有效预防躁狂或抑郁复发。
丙戊酸盐比锂盐具有更好的安全性，无须监测血药浓度，副作用与患者耐受性更好，近10年来已成为心境稳定剂中的主要用药，国内外医生接受程均较高。
四、仪器与设备Agilent1200型高效液相色谱仪；METTLER TOLEDO AB135-S型十万分之一天平；XW-80A涡旋混合器；TDZ4-WS低速台式离心机；TGL16M型冷冻离心机；DZG-303A型实验室纯水系统五、试药与检测条件庚酸对照品，三乙胺，1，2-丙二醇，乙醚：国药集团化学试剂有限公司甲醇，乙腈：美国Tedia公司，色谱纯Agilent C18色谱柱；流动相：乙腈：水（72：28v/v）流速：1ml/min；柱温：30℃；进样量：10μL。
荧光检测器激发波光长325nm，发射波长398nm。
HPLC法测定患者丙戊酸钠血药浓度_段自皞
丙戊酸钠（ Sodium valproate，VPA） 又名二丙基乙酸钠，是 治疗癫痫病全身性强直、阵挛性发作的首选药物，对失神发作 和肌阵挛性发作效果较好。VPA 主要通过神经系统发挥其 药理作用，由于 VPA 治疗窗较窄，其体内过程和疗效存在较 大的个体差异，给药剂量和血药浓度相关性不稳定，而毒性反 应与血药浓度相关，为控制癫痫发作，减少不良反应发生，进 行血药浓度监测，制定个体化给药方案非常必要。VPA 分子 结构中不含苯环不含氮原子，缺乏特征的紫外吸收，本文参照 有关文献的基础上〔1，2〕，根据本院自身条件，优选经正戊烷萃 取后丙戊酸钠与 α-溴代苯乙酮衍生化生成具有紫外特征光 谱的酯，使用反相 C18 色谱柱建立了柱前衍生 HPLC 法测定血 清中的 VPA 浓度。本方法灵敏度高、精密度好，适合临床常 规检测。 1 仪器和试剂 1. 1 仪器 Waters 高效液相色谱仪（ 美国 Waters 公司） ，C18 反相高效液相色谱柱，温箱，检测器，涡旋振荡器，水浴锅，离 心机，电子天平。 1. 2 试剂 丙戊酸钠（ Sigma 公司，纯度 ＞ 98% ） ； α-溴苯乙 酮（ 阿拉丁公司） ； 环己烷羧酸（ 阿拉丁公司） ； 甲醇（ TEDIA 色 谱纯） ； 乙腈（ TEDIA 色谱纯） ； 正戊烷（ TEDIA 色谱纯） ； 三乙 胺（ 分析纯） ； 浓硫酸； 健康人空白血清； 纯化水。 2 方法与结果 2. 1 色 谱 条 件 色 谱 柱： Symmetry C18 （ 250mm × 4. 6mm， 5μm） ； 流动相： 乙腈-水（ 75 ∶ 25） ； 检测波长： 248nm； 流速 1mL ·min － 1 ； 柱温： 35℃ ； 进样量： 20μL。杭州英谱 HS 色谱数据 工作站 V4. 0 + 。 2. 2 试剂的配制 2. 2. 1 丙戊酸钠储备液： 精密称取丙戊酸钠 20mg 至 10mL 容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，得 2mg·mL － 1 的丙戊酸钠储 备液。 2. 2. 2 内标液： 精密称取环己烷羧酸 3. 68mg 至 20mL 容量 瓶中，用乙腈稀释至刻度，得 0. 184mg·mL － 1 的内标溶液。 2. 2. 3 衍生化试剂： 称取 α-溴苯乙酮 24mg 至 20mL 容量瓶 中，用乙腈稀释至刻度，得 1. 2mg·mL － 1 的衍生化试剂，密封， 冷藏保存。 2. 2. 4 酸 化 液： 量 取 98% 浓 硫 酸 1mL，加 蒸 馏 水 稀 释 至 18. 4mL，即得 1mol·L － 1 H2 SO4 酸化液。 2. 3 标准曲线 分别取空白血清 100μL 置于 15mL 玻璃离 心管中，各加入适量的丙戊酸钠储备溶液，使其浓度分别相当 于 6. 25、12. 5、25、50、100、200μg·mL －1 的 VPA 血清标准液。 按 操 作 规 程 进 行 操 作，进 样 检 测，记 录 色 谱。以 上 述 浓 度 VPA 峰面积和内标峰面积之比（ Y） 对 VPA 血清浓度（ X） 作 回归，得回归方程为： Y = 0. 0069X + 0. 0676，Ｒ = 0. 9982。丙 戊酸钠在 6. 25 ～ 200μg·mL － 1 浓度范围内线性关系良好。在 所定实验条件下，样品及空白的色谱图（ 见图 1） 2. 4 精密度试验 分别配制丙戊酸钠的质控样品 3 份，使血 清中丙戊酸钠终浓度分别为 100μg · mL － 1 、50μg · mL － 1 和 25μg·mL － 1 。作为未知样品随机分散于每批待测血样和血 清标准样品进行测定，重复测定 5 次计算 ＲSD 值（ 见表 1） 。
丙戊酸钠实验
丙戊酸钠血药浓度测定（HPLC法）指定部门：治疗药物监测室关键词：丙戊酸血药浓度HPLC1.目的：患者丙戊酸血药浓度测定。
2.适用范围：丙戊酸血药浓度测定。
3. 职责：进行丙戊酸血药浓度测定的操作人。
4. 仪器和试剂4.1仪器设备高效液相色谱仪：Agilent1260配DAD-G1316A检测器；FA1104电子天平（上海良平仪器厂）；XW-80A 涡旋振荡器（上海医科大学仪器厂）；H-1850R 离心机（湖南湘仪仪器厂）；氮吹仪（BYDCY-24S），医用高纯度氮气；DK-420数显恒温水浴锅（上海三发科学仪器有限公司）预先调至55°C；移液枪1~10μL、200μL、100~1000μL；1.5mL离心管；10mL容量瓶1个、25mL容量瓶2个、100mL容量瓶3个。
4.2试剂丙戊酸钠（sigma 公司）（分析级）；2-溴苯乙酮（阿拉丁化学公司）（分析级）；环乙烷羧酸（阿拉丁化学公司）（分析级）；甲醇（色谱纯）、乙腈（色谱纯）；正戊烷（色谱纯）；三乙胺（分析纯）；浓氨水（分析纯）；浓硫酸（分析纯）；健康人空白血清；超纯水。
5.溶液配制5.1丙戊酸钠工作液精密称取丙戊酸钠1mg，至1mL离心管中，加甲醇至刻度混匀，得1mg/mL的丙戊酸工作液。
5.2内标液0.2mol/L的氨水：取浓氨水1.5mL至100mL的容量瓶中，加水至刻度混匀。
0.5mol/L的氨水甲醇：取浓氨水3.87mL至100mL的容量瓶中，加甲醇至刻度混匀。
环己烷羧酸内标液：取环己烷羧酸12.5mg至25mL容量瓶中，加0.2mol/L的氨水稀释至刻度混匀，再精密吸取该液7.5mL至25mL容量瓶中，加0.5mol/L的氨水甲醇稀释至刻度摇匀，得150μg/mL的环己烷羧酸内标液。
5.3衍生化试剂：1mol/L的硫酸溶液：精密称取浓硫酸9.81g，置100mL容量瓶中，加水稀释至刻度混匀，得1mol/L的硫酸溶液。
2-溴代苯乙酮溶液：精密称取10mg2-溴代苯乙酮至离心管中，加1mL乙腈混匀，得10mg/mL的2-溴代苯乙酮溶液。
丙戊酸测定注意事项
丙戊酸测定注意事项丙戊酸是一种有机化合物，广泛用于医学和化学领域。
进行丙戊酸测定时，需要注意以下几个方面。
首先，样品的制备非常重要。
通常情况下，我们会选择固体样品或液体样品进行测定。
对于固体样品，需要将其先研磨成粉末，确保样品的均匀性。
对于液体样品，要先进行适当的稀释，以确保样品的浓度在分析仪器的可检测范围内。
其次，测定方法的选择要根据具体情况来决定。
目前常用的测定方法有气相色谱法、液相色谱法和光谱法等。
气相色谱法适用于测定浓度低的样品，该方法需要使用气相色谱仪、色谱柱和检测器等设备。
液相色谱法适用于样品浓度较高的情况，该方法同样需要使用液相色谱仪、色谱柱和检测器等设备。
光谱法包括紫外-可见光谱法和红外光谱法等，可以通过样品的吸光特性来测定丙戊酸的浓度。
第三，设备和试剂的选择也是非常重要的。
在进行丙戊酸测定时，需要使用高质量的仪器设备和试剂。
仪器设备的选择要根据具体的测定方法来决定，确保仪器的准确性和灵敏度。
试剂的选择应有高纯度，并在使用前进行充分检验，避免潜在的干扰物对测定结果的影响。
第四，测定条件的控制是确保准确测定丙戊酸浓度的关键。
在进行测定时，要注意控制温度、pH值和反应时间等条件。
温度过高或过低都会影响反应速度和测定结果。
pH值的变化也可能导致反应性质的改变，进而影响测定结果。
反应时间也应根据具体方法进行控制，避免反应时间过长或过短。
最后，数据分析的准确性也是丙戊酸测定过程中需要注意的一点。
在测定过程中，应按照要求进行多次测定，计算平均值，并根据实验数据的统计学原理进行数据分析。
合理处理数据可以减小由于误差或实验条件变异引起的不确定性，提高测定结果的可靠性。
综上所述，进行丙戊酸测定时，我们需要注意样品的制备、测定方法的选择、设备和试剂的选择、测定条件的控制以及数据分析的准确性。
只有在这些方面都注意到位，才能够获得准确可靠的丙戊酸浓度测定结果。
体内药物分析第6章 色谱分析法
使用的N2一定要高纯度99.99%以上， 载气中微量的O2和H2O对检测器影响较大， 需净化处理。且进样量不宜过大，尤其是 高沸点物质，以防止污染检测器。平时不 用时要将检测器出口堵住，或一直低速度 通高纯氮，防止空气扩散进去。
电子捕获检测器只对含有卤素、硫、磷、 氮、氧等电负性强的元素的物质有响应， 化合物所含元素的电负性越强，灵敏度越 高。
R 2 t R2 t R1 W1 W2
3. 重复性
用对照溶液，连续进样5次，峰面 积RSD应≤2.0%；或配制相当于80%、 100%、120%的对照液，加入规定的内 标，分别进样3次，计算平均校正因子， RSD亦应≤2.0%。
4. 拖尾因子 峰高法定量时T应在0.95～1.05之间
T W0.05h 2d1
测定时要调节好检测器的温度，防止 水蒸汽的冷凝。另外，要注意安全，氢气 钢瓶一定要用专用钢瓶，氢气管路不能漏 气。
2. 氮-磷检测器 （nitrogen phosphorus detector，
NPD） 氮磷检测器（NPD）也称热离子检测
器（TID），是一种只对含氮或磷的有机 化合物具有高选择性和高灵敏度的检测器。
1.分流进样
2.顶空进样
（四）色谱柱
色谱柱为填充柱或毛细管柱。
（五）检测器
检测器是气相色谱仪的另一重要的组成部分， 其作用是把从色谱柱流出的各组分的含量变化转 变成可测量的电信号（电流或电压）变化，由记 录仪记录下来，进行定量和定性分析。
1. 氢焰离子化检测器 （flame ionization detector，FID）
对于含N或含P化合物的测定，NPD 比FID分别灵敏大约50倍和500倍。因此 适用于含氮或磷的药物及代谢产物等痕 量分析。
2种丙戊酸钠片剂在人体内的相对生物利用度研究
ｔｅｓｔ
ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ
ｗｅｒｅ
ｔ１／２
ｆｏｌｌｏｗｓ：Ｇ。ｗａｓ ３７．５２±９．８６ ａｎｄ ４０．５６±９．３６ ｍｇ・Ｌ一１；ｚ。。ｗａｓ（１．５２士０．７０）ａｎｄ（１．２５士０．５３）ｈ；
ｗａｓ（２０．２－＋６．７６）ａｎｄ（２０．０５±６．６５）ｈ；ＡＵＣｏ～２４ ｗａｓ（８１７．７９±３３３．９２）ａｎｄ（８７８．５６±３２６．６９）ｍｇ・ｈ・
方差分析表明，Ｔ与Ｒ经对数转换后的‰、
ＡＵｃ０、－２、ＡＵＧ…，之间无显著性差异，非参数检验未发现
Ｆ／％
１０４．０±２４．８
２制剂的‰之问有显著性差异，双单侧￡检验结果表明２
制剂为生物等效性制剂。９０％置信区问统计分析表明：Ｔ制 剂ＡＵＣ０～１２的９０％置信区间在Ｒ的９３．７％～１０９．９％，Ｇ。 在Ｒ的８７．８％～１１２．２％。
０．７０）、
（１．２５士０．５３）ｈ；ｔｌ／２分别为（２０．２土６．７６）、（２０．０５土６．６５）ｈ；ＡＵＣｏ～。分别为（８１７．７９±３３３．９２）、 受试制剂与参比制剂为
（８７８．５６士３２６．６９）ｍｇ・ｈ・Ｌ～。受试制荆的相对生物利用度为（１１０．４５＋２２．７）％。结论 生物等效制荆。 关键词：丙戊酸；药物动力学；生物利用度；高效液相色谱法 中图分类号：Ｒ９６９．１ 文献标识码：Ａ
ｔｅｓｔ
Ｌ一１．Ｔｈｅ ｒｅｌａｔｉｖｅ ｂｉｏａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙ ｏｆ ｔｈｅ
ｂｉｏｅｑｕｉｖａｌｅｎｔ． Ｋｅｙ
ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ ｗａｓ（１１０，４士２２．７）％．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ
Ｔｈｅ ２
ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎｓ
ａｒｅ
ｗｏｒｄｓ：ｓｏｄｉｕｍ ｖａｌｐｒｏａｔｅ；ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ；ｂｉｏａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙ；ＨＰＬＣ
丙戊酸钠HPLC检测方法
安捷伦1260丙戊酸钠母液配制：精密量取丙戊酸钠10 mg，加5 ml 甲醇溶解制得2mg/ml的丙戊酸钠储备溶液。
内标溶液：精密称取环己烷羧酸10mg至10ml溶量瓶中，用0.5mol/L氨水溶液稀释至刻度即得。
(10mg 环己烷羧酸+ 10ml 0.2mol/L氨水，去5ml用0.2mol/L氨水稀释至25ml，至0.2mg/ml。
)衍生化试剂：50mg 2溴苯乙酮+5ml乙腈溶解，得10mg/ml衍生化试剂。
血浆样品处理：取血浆1 ml，置具塞试管中，加1mg/ml入内标环己烷羧酸100μl，3mol/L硫酸0.5ml，混匀后，再加入正己烷6ml，涡旋混合5min，离心5min(4000r/min)。
精密吸取上层有机相5ml，加2-溴苯乙酮100μl，三乙胺100μl ，置55-60℃水浴中衍生化反应15min，氮气吹干有机相。
用1ml甲醇溶解残余物，取20μl进样。
岛津：丙戊酸钠标准溶液：准确称取丙戊酸钠对照品37.6mg，置于50 mL容量瓶中，用0.2 mol·L－1氨水稀释至刻度，摇匀，作为丙戊酸钠标准溶液（含丙戊酸钠0.752 mg·mL-1）。
内标溶液：准确称取环己烷羧酸50.0 mg，置于50 mL容量瓶中，用0.2 mol·L-1氨水溶解并稀释至刻度，再精密量取该溶液5 mL，置于25 mL容量瓶中，加0.2 mol·-1氨水稀释至刻度，摇匀，作为内标溶液（含环己烷羧酸0.2 mg·mL-1）。
衍生化试液：准确称取2-溴苯乙酮125.0 mg，置于25mL容量瓶中，用乙腈溶解并稀释至刻度，摇匀，作为衍生化试液（含2-溴苯乙酮5.0 mg·mL-1），放置于冰箱中保存。
血样的制备：取血浆200 μL，置空白采血管中，加入内标溶液30 μL 和丙戊酸钠标准溶液20 μL，再加入1 mol·L-1硫酸溶液200 μL，振摇混匀，然后加入正己烷4 mL振摇萃取3 min，静置5 min使之充分分层，分离出上清液2 mL于另一试管中，加入衍生化试液40 μL 和三乙胺20 μL，涡旋混匀，于61～65 ℃水浴衍生化适当时间，然后在空气/氮气流下蒸发至干，立即取出，用甲醇0.3 mL涡旋溶解，作为血清样品溶液。
HPLC法测定丙戊酸的血药浓度
HPLC法测定丙戊酸的血药浓度目的：建立快速柱前衍生-高效液相色谱法测定丙戊酸（VPA）血药浓度的方法。
方法：选择ω-溴苯乙酮为衍生试剂，环己烷羧酸为内标，Hypersil ODS-C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）为分析柱；流动相为甲醇-水（75∶25，V/V)，检测波长为248 nm，流速为1.0 ml/min。
血样经酸化后以二氯甲烷提取。
结果：内标环己烷羧酸和VPA的保留时间分别为8.0 min和12.8 min，线性范围为25～200 μg/ml，平均回收率为100.61%，日内、日间RSD均小于4.19%。
结论：本法快速、简便、准确，适合临床常规监测需要。
[Abstract] Objective: To establish a rapid pre-column derivatization-high-performance liquid chromatography determination of valproic acid (VPA) plasma method. Methods: ω-bromoacetophenone as a derivative reagent, cyclohexane carboxylic acid as the internal standard, Hypersil ODS-C18 column (250 mm×4.6 mm, 5μm) for the analytical column; mobile phase was methanol-water(75:25, V/V), detection wave length was 248 nm, flow rate was 1.0 ml/min. Blood extracted by dichloromethane after acidification. Results: The internal standard cyclohexane carboxylic acid and VPA respectively, the retention time of 8.0 min and 12.8 min, the linear range of 25-200 μg/ml, the average recovery was 100.61%, days, day RSD were less than 4.19%. Conclusion: The method is rapid, simple, accurate and suitable for routine monitoring of clinical need.[Key words] Pre-column derivatization; High-performance liquid chromatography; Sodium valproate; Blood drug concentration丙戊酸作為癫痫小发作、大发作和肌阵挛的首选药物之一，一直是临床医生常用的抗癫痫药物。
柱前衍生化-HPLC法测定患者体内丙戊酸钠的血药浓度
柱前衍生化-HPLC法测定患者体内丙戊酸钠的血药浓度杨春兰;方会慧;夏泉;许杜娟;周农【摘要】Aim To determine sodium valproate in patients ' serum by high performance liquid chromatography( HPLC) . Methods Serum sample was extracted with n-Hexane. Cyclohexanecarboxylic acid and 2-Bromoacetophenone were selected as an internal standard and derivative reagent respectively. The analytical column was Symmetry C18 (4. 6 mm × 250 mm ,5 μm) with the temperature at 30℃ . The detection wavelength was 248 nm and the flow rate was 1. 0 ml · min -1. Column temperature 30 ℃ . The mobile phase consisted of methanol-water (82 ∶ 18). Results The linear range of sodium valproate was 12. 5 ～150 mg · L-1 ,The mean recovery was 98. 74％ . The relative standard deviation( RSD) of inter-day for sodium valproate was less than 5％ . Conclusion The method is rapid , accurate.sensitive and suitable for clinical routine monitoring for sodium valproate.%目的建立反相高效液相色谱法测定人血清中丙戊酸钠血药浓度.方法血清用环己烷提取,以环已烷羧酸为内标,2-溴苯乙酮为衍生化试剂,用高效液相色谱法测定丙戊酸钠血药浓度.采用Symmetr y C18 (4.6 mm×250 mm,5 μm)色谱柱;流动相为甲醇-水(82:18);检测波长为248 nm;流速为1.0 ml·min-1;柱温:30℃.结果血清中丙戊酸钠线性范围为12.5～150 mg·L-1,平均回收率98.74%,日内RSD<5%.结论该法快速、灵敏、准确,适用于临床常规监测需要.【期刊名称】《安徽医药》【年(卷),期】2011(015)011【总页数】3页(P1352-1354)【关键词】丙戊酸钠;柱前衍生化;高效液相色谱法;血药浓度【作者】杨春兰;方会慧;夏泉;许杜娟;周农【作者单位】安徽医科大学第一附属医院药剂科,国家中医药管理局中药化学三级实验室;安徽医科大学第一附属医院药剂科,国家中医药管理局中药化学三级实验室;安徽医科大学第一附属医院药剂科,国家中医药管理局中药化学三级实验室;安徽医科大学第一附属医院药剂科,国家中医药管理局中药化学三级实验室;安徽医科大学第一附属医院神经内科,安徽,合肥,230022【正文语种】中文丙戊酸钠(sodium valproate，VPA)又名二丙基乙酸钠，是治疗癫痫病全身性强直、阵挛性发作的首选药物，对失神发作和肌阵挛性发作效果较好，也可用于治疗部分性发作［1］。
高效液相色谱法测定丙戊酸钠的血药浓度
高效液相色谱法测定丙戊酸钠的血药浓度胡琳【期刊名称】《中国药业》【年(卷),期】2013(22)12【摘要】Objectlve To establish the HPLC method for the serum concentration determination of valproic acid(VPA)and to guide the individualized medication regimen by analying the typical cases.Methods Serum was extracted with hexane.With α-bromoacetophenone as the derivative reagent and cyclohexane carboxylic acid as the internal standard,the Zorbbx SB-C18 column(250 mm×4.6 mm,5 μm) was adopted as the analytical column;the mobile phase was methanol-water(79:21,V/ V),the detection wave length was set at 248 nm,the flow rate was 1.0mL/min.The above mentioned method was used to determine the dozens of cases using sodium valproate.From them,3 typical cases were selected for discussing the influencing factors of the serum sodium valproate concentration and designing the individualized drug administration regimen.Results The retention time of internal standard cyclohexane carboxy acid and VPA was 6.3 min and 9.3 min respectively,the linear range was 12.5-200 μg/mL,the ratio of the sodium valproate peak height and the internal standard peak height showed good linear relation with the concentration(r=0.999 9).The average recovery rate was 99.98％,RSD of intra-day and inter-day was less than 5.66％.At the same time,during theprocess of the practical measurement of serum drug concentrations,it was founded that the same dosage of sodium valproate could produce a larger gap of the blood drug concentration in different individuals.Conclusion This method is rapid,simple,accurate and suitable for serum sodium valproate concentration monitoring.In order to adjust the individualized dosing regimen,the serum sodium valproate concentration monitoring is necessary.%目的建立测定血清中丙戊酸(VPA)血药浓度的高效液相色谱法.方法血清用正己烷提取,α-溴苯乙酮为衍生试剂,环己烷羧酸为内标,采用Zorbbx SBC18柱(250 mm×4.6 mm,5μm)为分析柱；流动相为甲醇-水(79∶21,V/V),检测波长为248 nm,流速为1.0 mL/min,设计个体化给药方案.结果内标环己烷羧酸和丙戊酸的保留时间分别为6.3 min和9.3 min,质量浓度线性范围为12.5 ～ 200μg/mL(r =0.999 9),平均回收率为99.98％,日内、日间RSD均小于5.66％.结论该法快速、简单、准确性好,适用于临床进行丙戊酸的血药浓度监测.【总页数】3页(P16-18)【作者】胡琳【作者单位】浙江省人民医院,浙江杭州 310014【正文语种】中文【中图分类】R969.1;R969.3;R971+.6【相关文献】1.HPLC法测定患者丙戊酸钠血药浓度 [J], 段自皞;王法财;沈炳香;聂松柳2.均相酶扩大免疫分析法与高效液相色谱法测定癫痫患儿丙戊酸钠血药浓度比较研究 [J], 杨艳;张婉婷;姚晓东;苟小艳3.柱前衍生-高效液相色谱法测定丙戊酸钠血药浓度 [J], 周春华;张志清;李飞高;亢泽坤;李敬瑄;张雪宁4.HPLC法测定丙戊酸钠血药浓度柱前衍生化条件的优化 [J], 胡雪飞;张永军;魏丽红;陈文5.高效液相色谱法同时测定癫痫患儿血清中丙戊酸钠和2-丙基-4-戊烯酸血药浓度[J], 李赛;苏凌璎因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
柱前衍生化高效液相色谱法测定人血浆中花生四烯酸乙醇胺浓度
柱前衍生化高效液相色谱法测定人血浆中花生四烯酸乙醇胺浓度李晶;董志;唐柏彬;乐乐乐【期刊名称】《激光杂志》【年(卷),期】2010()2【摘要】目的:建立血浆中花生四烯酸乙醇胺(Anandamide)的柱前衍生化高效液相色谱(HPLC)测定方法。
方法:取血浆样品1mL碳酸氢钠碱化,无水甲苯提取,衍生化试剂DBD-COCL衍生,进样HPLC测定,采用外标法。
色谱柱为AgilentC18(250×4.6mm,5μm),流动相为50mmol.L-1醋酸钠水溶液-乙腈,采用梯度洗脱,流速1.0ml.min-1,激发波长为336nm,发射波长为560nm。
结果:血浆中Anandamide线性关系良好,日内日间RSD<10%,范围1-30ng/ml,血浆中花生四烯酸乙醇胺最低检测限为0.50-0.85ng(S/N=3)。
结果:该方法样品处理过程简便,重复性好,符合生物样品测定要求,并适用于临床血样中anandamide浓度的测定。
【总页数】2页(P79-79)【关键词】花生四烯酸乙醇胺;高效液相色谱法;柱前衍生化;人血浆【作者】李晶;董志;唐柏彬;乐乐乐【作者单位】重庆医科大学药学院;重庆出入境检验检疫局技术中心【正文语种】中文【中图分类】TN248.1【相关文献】1.柱前衍生化高效液相色谱法测定人血清中丙戊酸钠的浓度 [J], 徐建敏2.柱前衍生高效液相色谱法测定人血浆中尿囊素浓度 [J], 刘蕾;付逸龙;殷琦;李可欣;孙春华3.OPA在线柱前衍生化HPLC-FLD法测定人血浆中硫酸阿米卡星的浓度 [J], 党宏万;魏世杰4.异硫氰酸苯酯柱前衍生化RP-HPLC法测定人血浆中10种氨基酸的浓度 [J], 杨智;阳利龙;祝文兵;曹靖;何周康因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
丙戊酸钠HPLC检测方法
安捷伦1260丙戊酸钠母液配制：精密量取丙戊酸钠10 mg，加5 ml 甲醇溶解制得2mg/ml的丙戊酸钠储备溶液。
内标溶液：精密称取环己烷羧酸10mg至10ml溶量瓶中，用0.5mol/L氨水溶液稀释至刻度即得。
(10mg 环己烷羧酸+ 10ml 0.2mol/L氨水，去5ml用0.2mol/L氨水稀释至25ml，至0.2mg/ml。
)衍生化试剂：50mg 2溴苯乙酮+5ml乙腈溶解，得10mg/ml衍生化试剂。
血浆样品处理：取血浆1 ml，置具塞试管中，加1mg/ml入内标环己烷羧酸100μl，3mol/L硫酸0.5ml，混匀后，再加入正己烷6ml，涡旋混合5min，离心5min(4000r/min)。
精密吸取上层有机相5ml，加2-溴苯乙酮100μl，三乙胺100μl ，置55-60℃水浴中衍生化反应15min，氮气吹干有机相。
用1ml甲醇溶解残余物，取20μl进样。
岛津：丙戊酸钠标准溶液：准确称取丙戊酸钠对照品37.6mg，置于50 mL容量瓶中，用0.2 mol·L－1氨水稀释至刻度，摇匀，作为丙戊酸钠标准溶液（含丙戊酸钠0.752 mg·mL-1）。
内标溶液：准确称取环己烷羧酸50.0 mg，置于50 mL容量瓶中，用0.2 mol·L-1氨水溶解并稀释至刻度，再精密量取该溶液5 mL，置于25 mL容量瓶中，加0.2 mol·-1氨水稀释至刻度，摇匀，作为内标溶液（含环己烷羧酸0.2 mg·mL-1）。
衍生化试液：准确称取2-溴苯乙酮125.0 mg，置于25mL容量瓶中，用乙腈溶解并稀释至刻度，摇匀，作为衍生化试液（含2-溴苯乙酮5.0 mg·mL-1），放置于冰箱中保存。
血样的制备：取血浆200 μL，置空白采血管中，加入内标溶液30 μL 和丙戊酸钠标准溶液20 μL，再加入1 mol·L-1硫酸溶液200 μL，振摇混匀，然后加入正己烷4 mL振摇萃取3 min，静置5 min使之充分分层，分离出上清液2 mL于另一试管中，加入衍生化试液40 μL 和三乙胺20 μL，涡旋混匀，于61～65 ℃水浴衍生化适当时间，然后在空气/氮气流下蒸发至干，立即取出，用甲醇0.3 mL涡旋溶解，作为血清样品溶液。
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醇一 （ ０８２ ） 流 速 ：． ｍＬｍｉ ； 温 ：５ ； 水 ７ ：： ； ２ １１ ／ ｎ 柱 ３ ℃ 紫外检 测 波 长 ：４ ｍ；结 果 血 清 中丙 戊 酸在 ５０ １ ０５Ｉ ／ ２ ８ｎ ．～ ５ ． ｚ ｍＬ浓 度 ｇ
范 围 内呈 良好线性 关 系 （ ＝０９ ９６ ， 收率 为 ９ ． １ １３ ， ｒ ．９ ） 回 ８２ ％～ ０ － 日内与 日问 Ｒ Ｄ≤５２ ％ Ｓ ． ％。 结论 本 法简 便 、 确 、 准 专
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［ 要 】目的 建立 ＨＰ Ｃ法 测定 丙戊 酸 血 清浓 度 。 方 法 以环 己基 丙酸 为 内标 ， 清样 品 经 乙 醚提 取 后 ， ２， 二 摘 Ｌ 血 经 ４一
溴 苯 乙酮 衍 生化 并 用 Ｈ Ｌ Ｐ Ｃ法 进 行 测定 。Ｓ ｉ ｐ ｃ Ｌ — ｈｍ— ａ ｋＣ Ｃ Ｃ．为色 谱 柱 （ ５ ｉｘ ． ｍｍ， ｍ） 流 动相 ： １ ０ｍ ４６ ｎ ５Ｉ ； ｘ 甲醇 一 乙
・
药 品鉴 定 ・
２２ ８第 ９ 第３ ０年 月 ｌ ２ １ 卷 期
衍 生化 一 Ｌ ＨＰ Ｃ法测 定人血清 中丙戊酸浓 度
邹小琴 ’ 毛桂 福 钟 小斌 黄 振 光 黄 晓 青 ５ ５ ０ ４０１ １广两 医科 大学 第一 附属 医院 ， ． 广西 南 宁 ５ ０ ２ ；． ３ ０ １２广西 壮族 自治 区柳 州市妇 幼 保健 院 ， 西柳 州 广
属 性强 ， 用 于临床 常 规监 测需 要 。 适 『 关键 词】丙戊酸 ； 生化 ； 效液相 色谱 法 ； 药浓度 衍 高 血 【 图分类 号】 ９ 中 Ｒ６ 【 文献 标识 码】 Ａ 【 文章 编 号】 ６ ４ ４ ２ （ ０ ２ ０ （ ） ０ ９ — ２ １ ７ — ７ １ ２ １ ）８ ｂ一 ０ ４ ０