Hg_2_在大鼠组织器官中的分布及其存在形态研究
SD大鼠生长发育指标和主要脏器正常参考值的探讨_项华
[ 摘要 ] 目的 :为掌握清洁级 SD大鼠体重等生长发育指标和主要脏器正常参考值并进行探讨 。 方法 :SD离乳大鼠 , 120 只 (雌雄各半 ), 正常喂养 4 ～ 8周 , 测定并计 算各项指标 。 结果 :每 周摄食量 与体重呈 线性正相 关 , 食物利 用率与体 重呈 线性负相关 ;雄性大鼠总增重和总食物利用率明显高于雌性大鼠 (P<0.01);雄性大鼠肝 、肾 、脾重量显著高于雌性大 鼠 , 其差异均有统计学意义 (P<0.01), 但雌雄大鼠脏体比之间 的性别 差异无 统计学 意义 (P>0.05)。 结 论 :不同的实 验动 物环境对大鼠的 正常值有一定的影响 , 本项实验的 SD大鼠正常参考值结果对毒理学研 究具有一定的实际应用价值 。 [ 关键词 ] SD大鼠 ;摄食量 ;体重 ;食物利用率 ;正常参考值 [ 中图分类号 ] R332 [ 文献标识码 ] A [ 文章编号 ] 1004 -8685(2008)02 -0299 -03
我国目前对 各类 健康 相关产 品的 安全 性毒 理学 评价 中 , SD大鼠是常用的实验动物 , 它具有对环境适应性强 , 生长发育 迅速 、繁殖率高 、遗 传学 背景 较为 一致 等优 点 , 并且 是人 类在 营养学方面了 解最多 的一 种实 验动物 [ 1, 2] , 常 用于药 理学 、毒 理学 、营养学 、传 染病 和遗 传疾 病的 研究 。 其中 , 亚 急性 毒性 试验中大鼠生长发育 及脏器系数方面 的正常 参考值的 研究虽 有一些报道 [ 3] , 但由于动物来源 、年龄 、营 养状况 、检测 条件等 因素的不同 , 可比性较差 , 所以 , 有必要建立 本实验室的 SD大 鼠各种正常参考值的 数据库 , 鉴 于此 , 对 6个 批次安全 性评价 试验阴性对照组的 120只 SD大鼠 (雌雄各半 )的摄食 量 、体重 增长 、食物利用率 、脏器 系数 等数 据进 行了 分析 和探 讨 , 以便 对检测结果进行质量 控制以及为参加 实验室 间比对工 作打下 基础 。
大鼠解剖图谱中英文
Source #5
Rat Dissection
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MUSCLES
Iliacus:髂肌 Pectineus:耻骨肌 Adductor longus:长收肌 Gluteus medius:臀中肌 Vastus lateralis:股外侧肌 Rectus femoris:股直肌 Vastus medialis:股内侧肌 Adductor magnus:大收肌 Gracilis:股薄肌 Flexor digitorum superficialis: 指(趾）浅屈肌
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DIGESTIVE ORGANS
diaphragm:膈 Liver：肝脏 Small intestine:小肠 Spleen：脾脏 Caecum:tion
DIGESTIVE ORGANS
Caudal side of diaphragm:膈 肌尾侧面 Median lobe of liver:肝脏中叶 Ligamentum teres hepatis:肝 静脉索 Left lobe of liver:肝脏左叶 Stomach:胃 Greater omentum:大网膜 Small intestines:小肠
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Review and Quiz Yourself
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THORACIC CAVITY
大鼠
1、F344／N (1)来源：1920年由哥伦比亚大学肿 瘤研究所Curtis培育。 （2）毛色：白化。 （3）主要特性： ①寿命31－29月 ②脾脏红细胞免疫反应性低。 ③生理学方面： • 旋转性能低； • 血清胰岛素低、脑垂体较大； • 乙烯雌酚吸收快且易引起死亡； • 巴比妥钠的LD50低，为70mg/kg； • 肾脏疾病发生率低； • 对血吸虫的囊尾蚴易感。
（二）封闭群
1、Wistar大鼠 （1）来源： 1907年由美国Wistar研究所育成，现已遍及世界 各国的实验室。
我国从日本及前苏联进，是引进最早、使用最广 泛、数量最多的大鼠品系之一。
（2）毛色：
白化
（3）主要特性： ① 头部较宽、耳朵较长、尾的长度小于身长。 ② 性周期稳定，繁殖力强，产仔多，平均每胎产仔在10只左 右，生长发育快。10周龄时雄鼠体重可达280-300g，雌鼠 达170-260g。
3、Long-evans大鼠
1915年用野生雄性褐家鼠与雌性白化大鼠杂 交培育而成。 体型比Wistar和SD大鼠为小，头颈部为黑色，
背部有一条黑线，尾部为黑白色或黑色毛。
（三）突变系
1、SHR／Ola大鼠（Spontaneously Hypertensive Rat ,SHR） （1）来源：是东京的江本（Okamoto）在1963年有自发性高 血压疾病的Wistar大鼠培育而成。 （2）主要用途： 高血压疾病的实验研究。（抗高血压药物有反应） 能够自发性产生高血压的突变系大鼠，还有新西兰高血压 大鼠（GHR）和米兰高血压大鼠（MHS）。 2、癫痫大鼠 用铃声刺激可旋转数秒钟，然后向一侧倒地发作癫痫，与人 的癫痫发作相似。
为全年多发情动物，其性周期4-5d。 大鼠妊娠期为19-23d，平均21d，每窝产仔6-12只； 一般情况下可在21d离乳。
SD雌性大鼠性发育早期性器官等脏器和性激素的动态变化
2009年7月第19卷 第7期中国比较医学杂志CHINESE JOURNA L OF COMPARATIVE ME DICINE July ,2009V ol.19 N o.7研究报告[作者简介]戴方伟(1978-),女,助理研究员,目前主要从事实验动物检测与科研工作。
E 2mail :fangweidai @[通讯作者]萨晓婴。
SD 雌性大鼠性发育早期性器官等脏器和性激素的动态变化戴方伟1,2,陈文文2,毛栋森2,楼 琦2,卢领群2,郭红刚2,萨晓婴2(1.浙江大学动物科学学院动物医学系,杭州 310029;2.浙江省医学科学院实验动物中心,浙江省实验动物与安全性研究重点实验室,杭州 310013) 【摘要】 目的 探讨正常S D 雌性大鼠性成熟前不同日龄段的脏器与促黄体生成素(LH )、促卵泡素(FSH )、雌二醇(E 2)等性激素的变化及其关系。
方法 从生产群中取出60窝密度状态一致的S D 大鼠,在不同日龄随机选取雌性大鼠,检测15、25、32、40日龄时大鼠体重、主要脏器指数,子宫、卵巢组织变化和15、25、32、40、60日龄大鼠血清LH 、FSH 、E 2水平。
结果 记录了S D 雌性大鼠性成熟前各脏器指数和卵巢、子宫组织变化,结果显示大鼠卵巢、子宫的增长速度大于体重的增长,而其他脏器增速大都小于体重的增长。
本研究还记录了血清LH 、FSH 、E 2水平在不同日龄段的变化规律,表明血清LH 、E 2浓度在32日龄时出现较为明显升高。
结论 不同日龄大鼠脏器指数的动态变化提示大鼠性器官在性发育早期得到机体的优先发育。
血清LH 、E 2水平在32日龄时有了明显升高,提示性腺轴功能已经激活。
60日龄大鼠血清性激素水平的波动类似于动情周期的规律性变化,推测大鼠在60日龄前即已进入性成熟,这些结果将为大鼠性发育的相关研究提供重要的参考数据。
【关键词】 S D 大鼠;性发育;器官指数;促黄体生成素;促卵泡素;雌二醇【中图分类号】R 233 【文献标识码】A 【文章编号】167127856(2009)0720033205Dynamic Development of Organs and Serum Sex H ormone Levels inN ormal Pre 2pubertal Female Sprague 2Da w ley R atsDAI Fang 2wei 1,2,CHE N Wen 2wen 2,M AO D ong 2sen 2,LOU Qi 2,LU Ling 2qun 2,G UO H ong 2gang 2,S A X iao 2ying 2(1.Department of Veterinary Medicine ,C ollege of Animal Sciences ,Zhejiang University ,Hangzhou 310029,China ;boratory Animal Center ,Zhejiang Academy of Medical Sciences ,Zhejiang Provincial Laboratory of ExperimentalAnimal and Safety Evaluation Research ,Hangzhou 310013,China )【Abstract 】 Objective T o investigate the organ coefficient and histophysiological changes and to com pare the levels of serum LH ,FSH and E 2in the early stage of pre 2pubertal S prague 2Dawley rats.Methods S D rats were randomly divided into 5groups with 30each.Rats from groups 1～5were sacrificed for measurement of body weight ,organ coefficient ,histophysiological changes of ovaries and uterus on 15,25,32and 402day 2old as well as serum LH ,FSH and E 2levels on 15,25,32,40and 602day 2old ,respectively.R esults the organ coefficient and histophysiological difference and levels of serum LH ,FSH and E 2were com pared at different ages of S D rats.Results indicated that the growing rate of ovary and uterus were much higher than that of body weight ,whereas ,the other organs were relatively lower than that of the body weight.Serum LH and E 2levels in 322day 2old rats were increased when com pared to the levels on 15and 252day 2old.Conclusions The dynamic development of organcoefficients on15,25,32and402day2old suggested that the sexual organs were given priority to development during early stage of pre2puberty in S D rats.High levels of LH and E2on322day2old recorded in the present manuscript indicated that hypothalamic2 pituitary2g onadal axis was activated in322day2old rats.Besides,serum sex horm one levels on602day2old were similar to the regular change in estrous cycle,suggesting the entrance of sex maturity.These results supply the reference data for further research on sex maturation in S D rats.【K ey w ords】 S prague2Dawley rat;Sex maturation;Organ coefficient;LH;FSH;E2 正常性发育过程受下丘脑-垂体-性腺轴(hypothalamic2pituitary2g onadal axis,HPG A)控制。
实验大鼠常见脏器形态学取材方法和注意事项
实验大鼠常见脏器形态学取材方法和注意事项[取材内容]大鼠肺组织、大鼠肝脏组织、大鼠胰腺组织、大鼠胃部组织、大鼠空场回肠组织、大鼠肾组织、门静脉血、淋巴组织、大鼠心脏。
[试剂及药品]戊巴比妥钠或10%水合氯醛、75%酒精、生理盐水、多聚甲醛或福尔马林液、3戊二醛磷酸盐缓冲液(PBS0.01mol/LP pH7.4)或4戊二醛、肝素钠、器械液器械清洗消毒液[器材]备皮刀、解剖台、弯盘、组织剪、眼科剪、手术刀柄、刀片、小号弯式血管钳、蚊式血管钳、眼科镊、无损伤血管夹、聚乙烯管、三通管、丝线、培养皿、天平、一次性离2ml、1.5ml 、冻存管、肝素锂真空采血管、微量移液器、高速离心机、注射器10ml、5ml、2ml、无菌手套、冰箱、冰盒、液氮罐[取材动物]大鼠[取材步骤]1. 取材前夜禁食，自由饮水。
2. 小鼠称重，按照50mg/kg的比例用5ml的注射器配合针头抽取戊巴比妥钠备用。
3. 正左手的小指和无名指抓住大鼠的尾巴，另外三个手指抓住大鼠的颈部，使大鼠头部向向下。
这样腹腔中的器官就会自然倒向胸部，防止注射器刺入时损伤大肠、小肠等器官。
右手持注射器，从腹部近腿根处刺入后再腹部皮下穿行深入，动作轻柔，缓慢注射。
注射完药物后，缓缓拔出针头，手指按住针口对小鼠腹部轻柔按摩，促进麻醉药物的吸收，掐小鼠尾部检测小鼠麻醉程度。
4.将小鼠四肢固定于解剖台上，暴露小鼠整个胸部和腹部，修剪去腹部毛发，75%酒精消毒。
5.沿腹侧正中线自阴茎上源由下而上剪开腹部皮肤直至剑突，向两侧钝性剥开皮肤与皮下组织，暴露腹壁浅肌层。
沿白线钝性分离腹壁肌肉，剪开腹膜，暴露腹腔，将肝脏向上翻起，显露肝门。
6.门静脉血采集：将剪成斜口的聚乙烯管尖端背向肝门方向插入门静脉，抽取门静脉血2ml，无创血管夹夹闭门静脉止血。
将抽取门静脉血加入一次性离心管低温静置过夜，4℃离心，3000-3500/min，10分钟，吸出上清液，分装，-80摄氏度保存备用。
形态学与形态计量学观察大豆异黄酮对前列腺增生大鼠的作用
Ｍ ｏ ｐｈ ｌ ｇ ｃ ｌａ ｏ ｐ ｍ ｅ ｒ ｃ Ｓ ｕｄ ｎ ｔ ｅ Ｅｆｅ ｔｏ ｏ ｂ ａ ｒ ｏ ｏ ｉ ａ ｎｄ Ｍ ｒ ｈｏ ｔ ｉ ｔ ｙ ｏ ｈ ｆ ｃ ｆ Ｓ ｙ ｅ ｎ
Ｉ ｏ ａ ｏ ｅ ｏ ｐ ｒ ｌ ｓｉ ｏ ｔ ｔ ｎ Ｒａ ｓ ｓ ｆ ｖ ｎ ｎ Ｈｙ ｅ ｐ ａ ｔｃ Ｐｒ ｓａ ｅ ｉ ｔ ｌ
ｈ ｐ ｒ ａｉ ｉ ｒｔ Ｍｅｈ ｄ Ｍ ｌ Ｓ ａ ｅｅｉ ｅ ｔ ｕ ｃｔ ｅ ｕｌ ｔ ｔ ｔ ｏ ｅｐｏ ｉ ａ ｒ ８ｄ ｔ ｉ ｕ ｅｐｏｔ ｉ ｙ ｅ ｌ ａ ｎ ａ ． ｔｏ ｓ ａ Ｄ ｒ ｓ ｒ ｎ ｃ ｄ ｓ ｂｕ ｎ ｏ ｓ ｅ ｏ ｅ ｎ ｒ ｏ ｔ ｆ ｄ ｃ ｒ ａ ｃ ｐ ｓ ｓ ｅ ｔｗ ｊ ｅ ａ ｙ ｓｓｒ ｐｎｅｏ２ ｏｎ ｓ ｔ
任 国峰 ， 泉 ， 爱 青 ， 凌 ， 忆 明 袁 杨 汤 黄
（ 南 大学 公 共 卫 生学 院营 养 与食 品卫 生 学 系 ， 沙 中 长 ４０ ７ ） １０ ８
【 摘要 】 目的
探讨不 同剂量大豆异黄酮（ Ｉ对 前列腺增生大鼠组织形态学和超微结构的影响。方法 应 ｓ）
比较佐太、朱砂与汞化合物对胎、幼、孕和老年鼠的肾脏毒性
比较佐太、朱砂与汞化合物对胎、幼、孕和老年鼠的肾脏毒性李文楷;侯玮钰;吴青;罗娅;岑语燕;陆远富;刘杰;魏立新【摘要】目的比较佐太、朱砂和汞化合物对胎、幼、孕和老年鼠的肾毒性.方法采用孕19d的胎鼠、母孕鼠、刚断奶的幼鼠和15月的老年鼠(均为SD大鼠),口服给于藏药佐太(30 mg/kg)、朱砂(HgS,30 mg/kg),以及等汞量的氯化汞(HgCl2,33.6 mg/kg)和1/10等汞量的甲基汞(MeHg,3.1 mg/kg),连续7d,观察动物的体重和一般情况,末次给药24h后取肾脏,观察肾病理改变、肾汞蓄积和肾脏中肾损伤因子Kim-1 mRNA的表达.结果连续给予佐太和朱砂7d后,大鼠未见明显异常,而氯化汞组体重明显下降(P＜0.05).氯化汞引起明显肾汞蓄积,甲基汞组大鼠也有所升高.而佐太组和朱砂组仅轻微增加.母孕鼠和老年鼠氯化汞组的肾损伤尤为明显,甲基汞组也出现肾损伤,而佐太和朱砂未见明显肾病理改变.肾脏毒性敏感基因Kim-1的表达表明,氯化汞组Kim-1的表达显著升高(P＜0.05),只有HgS 1/10等汞量的甲基汞也有所升高,而佐太和朱砂与对照组无明显差异.胎鼠对汞毒性不敏感,幼鼠轻度敏感,母孕鼠中度敏感,而老年鼠显著敏感.结论在等汞量的基础上,藏药佐太和朱砂的肾毒性远小于氯化汞和1/10等汞量的甲基汞;汞化合物的毒性随鼠年龄而异,胎鼠和幼鼠不敏感,成年孕鼠尤其老年鼠易受汞所致的肾毒性.【期刊名称】《遵义医学院学报》【年(卷),期】2016(039)002【总页数】5页(P129-133)【关键词】藏药佐太;HgS;HgCl2;MeHg;肾毒性;肾汞;肾损伤因子1(Kim-1)【作者】李文楷;侯玮钰;吴青;罗娅;岑语燕;陆远富;刘杰;魏立新【作者单位】遵义医学院基础药理省部共建教育部重点实验室,贵州遵义 563099;遵义医学院基础药理省部共建教育部重点实验室,贵州遵义 563099;遵义医学院药学院,贵州遵义 563099;遵义医学院公共卫生学院,贵州遵义 563099;遵义医学院公共卫生学院,贵州遵义 563099;遵义医学院基础药理省部共建教育部重点实验室,贵州遵义 563099;遵义医学院基础药理省部共建教育部重点实验室,贵州遵义563099;中国科学院西北高原生物研究所藏药研究重点实验室,青海西宁 810001【正文语种】中文【中图分类】R595.2;R961.1藏药佐太即“佐塔”, 也叫“甘露精王”, 具有一定的镇定安神、促进睡眠、抗惊厥、解热、抗炎、增强免疫、延长雌性果蝇寿命、抑菌等药理活性[1-2]。
汞-硒在生物体中的相互作用
汞-硒在生物体中的相互作用（作者:___________单位: ___________邮编: ___________）【关键词】汞汞（Hg）是一种重金属元素，汞及其化合物对环境、人和动物的健康危害极大。
硒（Se）是生物必需的微量元素，具有重要的生物化学功能，与人类和动物的健康及疾病密切相关。
研究发现硒对汞具有一定的拮抗作用，通过研究生物体内汞与硒的相互作用，可以进一步了解硒对汞毒性的拮抗机制，对防治汞中毒提供有用的信息。
1 汞、硒相互作用关系重金属与非金属元素间的相互作用可以表现为拮抗作用、相加作用与协同作用，微量元素硒对几乎所有重金属都能够产生拮抗作用。
这些作用的机理大多与硫蛋白的生物合成有关，也与形成金属配位体的结合态有关，后者可明显地呈现出金属与非金属间的拮抗作用。
一般而言，汞和硒的毒性作用能够相互拮抗、相互抵御。
1972年Koemen等[1]在对荷兰近海海豹的研究中发现，海豹肝脏中蓄积了大量汞，然而海豹却没有异常表现，进一步研究发现海豹体内硒含量也异常的高，从而认为硒可能对汞有拮抗作用。
Caurant F等[2]研究了大量海洋哺乳动物体内微量元素的含量，发现这些动物体内积蓄了很高浓度的汞和硒，但动物本身并没有表现出明显的中毒现象。
Falnoga等[3]对生活在汞暴露程度不同环境中的死者进行的尸体检查中发现，人体内各个脏器中汞与硒的摩尔比值随着汞含量的增加而趋近于1，有些更高，趋近于2，两者的相关性很好，这表明汞与硒在生物体内可能具有某种内在的联系。
硒和汞两种元素的同时补给能够减缓或抑制硒或汞单独元素中毒时大鼠的病理损害、体重降低、死亡率、染色体突变、代谢分布改变等不良现象。
李爱芬等[4-5]关于硒酵母对汞中毒小鼠全血谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)活性影响的研究结果表明，汞明显抑制了小鼠全血GSH-Px活性，其活性仅为对照组的60.4%，而同时给汞和硒酵母的小鼠全血GSH-Px活性不但没有降低，而且还比对照组提高了50%以上，说明硒酵母对汞中毒引起的GSH-Px活性下降有显著的拮抗作用，这种作用在小鼠的生长和行为等方面也有着同样的表现。
大鼠系统解剖简述【最新精选】
第一章皮肤一、皮肤由表皮、真皮和皮下组织构成。
二、皮肤腺有皮脂腺、汗腺和乳腺。
1、皮脂腺分布在毛囊周围。
口角部、肛门、包皮和乳头周围有特化的皮脂腺。
2、汗腺，大鼠的汗腺只局限于足垫的皮肤。
3、乳腺数量大鼠的乳腺共有6对，胸部3对，腹部1对，鼠蹊部2对。
个别的大鼠有5对或者7对。
大小和形态随大鼠的年龄和性周期有明显的变化。
部位包埋在皮下组织中，由结缔组织隔与胸壁和腹壁松松地相连。
第二章骨一．脊柱大鼠的脊柱由57－61块脊椎骨组成，包括颈椎7、胸椎13、腰椎6、荐锥4、尾锥27－31块。
锥式C7T13L6S4Cy27－31。
骨性标志为第二胸椎，其棘突最高，超过其它脊椎骨。
1、颈椎和其它哺乳动物一样，恒为7块，全无肋骨相连，横突上具有横突孔，供锥动脉通过。
2、胸椎13块，椎骨的长度由前向后逐渐增加（由2毫米增加到4毫米），锥管的直径平均为3.3毫米，较颈部的锥管为狭窄。
3、腰椎6块，每块锥体的长度比较一致，约6－7毫米。
锥管直径由前面的4毫米向后逐渐缩小至2毫米。
二、胸骨共分为6节，最前一节为胸骨柄，第二到第五节称为胸骨体，最后一节为剑突，棒状的剑突后面接一盘状的剑状软骨。
胸骨柄长约10毫米。
第三章肌肉系统（省略）第四章消化系统消化系统包括消化管及附属消化器官。
消化管可分为口腔、食管、胃、小肠和大肠等部。
附属消化器官有齿、舌、唾液腺、肝和胰。
第一节消化管一、口腔1、舌全长约30毫米，不具有正中系带，但是有两条侧系带。
一、食管分为颈、胸、腹三部。
成年大鼠食管的颈－胸段长度约75毫米，腹段通过膈的食管裂孔在膈后的长度约15毫米，食管外径约2毫米。
位置：食管主要是沿气管背侧走行，仅在颈部稍偏左侧。
一、胃位置：横位于腹腔的左前部，其壁面几乎完全为肝的左叶所覆盖。
大小：胃重为体重的0.5％，属单室胃。
形态：胃小弯朝向背前方，食管在其中部入胃。
胃大弯朝向腹后方，其边缘有双层的口袋状大网膜。
贲门部外观呈半透明状，内壁有粘液腺。
二甲双胍治疗Ⅱ型糖尿病大鼠的代谢组学研究
２型糖尿病（ｔｙｐｅ２ｄｉａｂｅｔｉｃｍｅｌｉｔｕห้องสมุดไป่ตู้，Ｔ２ＤＭ）是一 种经典的糖脂代谢性紊乱疾病，主要病因为胰岛素 相对缺乏，或者胰岛素敏感性下降引起的胰岛素抵 抗，症状表现为胰岛素代偿、高血糖以及高血脂，长 期发展将衍生危害性极大的并发症，如糖尿病肾病、
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中国药理学通报 ＣｈｉｎｅｓｅＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌＢｕｌｌｅｔｉｎ ２０１９Ｓｅｐ；３５（９）：１２１２～２０
网络出版时间：２０１９－８－２２１３：２９ 网络出版地址：ｈｔｔｐ：／／ｋｎｓ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ／ｋｃｍｓ／ｄｅｔａｉｌ／３４．１０８６．Ｒ．２０１９０８２１．１５０１．０１４．ｈｔｍｌ
◇论 著◇
二甲双胍治疗Ⅱ型糖尿病大鼠的代谢组学研究
曾晓会１，２，卓俊城１，２，３，谢凯枫１，２，３，李钰婷１，２，３，占心佾１，２，３，陈玉兴１，２，甘海宁１，２，黄雪君１，２，黄丹娥１，２
（１．广东省中医药工程技术研究院，广东 广州 ５１００９５；２．广东省中医药研究开发重点实验室， 广东 广州 ５１００９５；３．广州中医药大学第五临床医学院，广东 广州 ５１０４０５）
收稿日期：２０１９－０５－１６，修回日期：２０１９－０６－２７ 基金 项 目：国 家 科 技 部 “重 大 新 药 创 制 ”科 技 重 大 专 项 （Ｎｏ
２０１６ＺＸ０９１０１０７６，２０１８ＺＸ０９３０１０１１－００２） 作者简介：曾晓会（１９７８－），女，博 士，主 任 中 药 师，硕 士 生 导 师，研
ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００１－１９７８．２０１９．０９．００７ 文献标志码：Ａ 文章编号：１００１－１９７８（２０１９）０９－１２１２－０９ 中国图书分类号：Ｒ３３２；Ｒ３２２．４７；Ｒ３４３３；Ｒ３４７．８；Ｒ５８７．１； Ｒ５８９；Ｒ９７７．１５ 摘要：目的 研究二甲双胍治疗 ２型糖尿病（ｔｙｐｅ２ｄｉａｂｅｔｉｃ ｍｅｌｉｔｕｓ，Ｔ２ＤＭ）大鼠的机制。方法 将大鼠随机分为正常 组、模型 组 和 二 甲 双 胍 组，每 组 １０只。用 高 糖 高 脂 饲 料 （ＨＦＳＤ）诱导 ４周后，肌肉注射链脲佐菌素 （ＳＴＺ）３５ｍｇ· ｋｇ－１，给药 ８周 后 结 束 实 验。采 用 ＴｒｉｐｌｅＴＯＦ液 质 联 用 仪 （ＵＰＬＣ／ＥＳＩＴＯＦＭＳ），研究二甲双胍对 Ｔ２ＤＭ大鼠血清中代 谢物质的影响，并用 ｑＰＣＲ寻找其作用靶点。结果 与正常 组相比，Ｔ２ＤＭ 模型 组 大 鼠 的 体 质 量、胰 腺 指 数 和 胰 岛 素 水 平明显降低（Ｐ＜００５），肝脏指数、ＧＬＵ、ＴＣ、ＴＧ、ＦＦＡ水平均 升高（Ｐ＜００１），ＯＧＴＴ明 显 受 损。二 甲 双 胍 能 明 显 升 高 体 质量、胰腺指数和胰岛素水平 （Ｐ＜００５），降低肝脏指数、 ＧＬＵ、ＴＣ、ＴＧ和 ＦＦＡ水平（Ｐ＜００５），改善 ＯＧＴＴ。通过代谢 组学，获得 １７个生物标志物，验证后发现，二甲双胍对胆固 醇、脂肪酸、胆汁酸和磷脂的合成和代谢有调节作用。结论 二甲双胍能通过调节胆固醇、脂肪酸、胆汁酸和磷脂的合 成和代谢，改善 Ｔ２ＤＭ的脂质代谢紊乱。
重金属Hg2+对毛蚶的急性毒性及肝脏组织结构的影响
重金属Hg2+对毛蚶的急性毒性及肝脏组织结构的影响作者：张艳红，郭旭东，崔健斌，刘丽东来源：《河北渔业》 2016年第8期张艳红1，郭旭东2，崔健斌2，刘丽东3（1_河北中捷罗非鱼养殖有限公司，河北沧州061108；2．河北农业大学海洋学院，河北秦皇岛066003；3．河北省水产技术推广站，河北石家庄050035）摘要：在水温(12±0.5)℃、盐度27‰的环境下，研究了重金属Hg2+对毛蚶的急性毒性效应和肝脏组织结构的影响。
结果表明，Hg2+对毛蚶24、48、96 h LC50分别为9.23、5. 43和2.07 mg/L；安全浓度分别为0.09、0. 05和0.02 mg/L。
通过对Hgz+暴露在不同浓度96 h的毛蚶肝脏组织切片观察发现，Hg2+对毛蚶的肝脏组织结构有明显影响，肝脏的损伤程度随着Hg2+浓度的增加而加深，2. 91 mg/L为毛蚶肝脏解毒的阈值。
关键词：重金属；毛蚶；急性毒性；肝脏毛蚶(Sca pharca subcrenata)属软体动物门，双壳纲，列齿目，蚶科，是我国沿海地区一种重要的经济贝类，通常生活在含泥沙较多的潮间带，在我国南北沿海均有分布，因其肉质鲜美，营养价值高，深受国内外消费者的欢迎。
近几年，我国沿海地区的经济发展速度较快，随之而来的是大量工业废水和生活污水排人海洋，给海洋生态环境带来极大的负担，在诸多污染物中，重金属对海洋环境的影响尤为显著。
重金属随沿岸径流排人海中后，容易在沿海的底泥中沉积，而毛蚶为生活在泥沙中的底栖生物，又具有移动性差的特点，因而最易受到重金属的影响；重金属污染物可以在海洋生物体内或其某一组织中积累，通过生物富集和放大，直接或间接威胁人类的健康。
在利用生物间的共生互补原理、运用生态学原理创建环境友好型养殖模式中，底栖贝类是一个重要的混养组合，通过贝类消耗掉其它养殖动物所排出的N，可以优化养殖环境，同时增加养殖效益，例如海蜇、牙鲆和毛蚶的池塘立体生态混养。
高糖对线粒体乙醛脱氢酶2在大鼠心肌成纤维细胞中表达的影响
【基金项目】国家自然科学基金资助项目（８１５５００３６）；安徽省自然科学基金资助项目（１５０８０８５ＭＨ１６９，１５０８０８５ＭＨ１７０）；蚌埠医学院研究生科研创新计划项目（Ｂｙｙｃｘ１５４８）【收稿日期】２０１６ ０９ １３【修回日期】２０１７ ０１ ２５△【通讯作者】Ｔｅｌ：０５５２ ３０８６１９８；Ｅ ｍａｉｌ：ｃｘｙｂｂｍｃ＠１６３．ｃｏｍ高糖对线粒体乙醛脱氢酶２在大鼠心肌成纤维细胞中表达的影响谷小雨１，３，方婷婷３，高琴３，康品方２，李正红３，程向阳１△（１．蚌埠医学院第一附属医院麻醉科，２．心血管内科，安徽蚌埠２３３００４；３．蚌埠医学院生理学教研室，安徽蚌埠２３３０３０）【摘要】目的：观察心肌成纤维细胞是否存在线粒体乙醛脱氢酶２（ＡＬＤＨ２）的表达，探讨ＡＬＤＨ２在高糖诱导的心肌成纤维细胞引起纤维化发生中的作用。
方法：原代培养心肌成纤维细胞，分为正常对照组（５．５ｍｍｏｌ／Ｌ）、正常＋ＡＬＤＨ２激动剂Ａｌｄａ １（２０μｍｏｌ／Ｌ）组、高糖组（３０ｍｍｏｌ／Ｌ）、高糖＋Ａｌｄａ １组。
免疫荧光鉴定心肌成纤维细胞。
各组细胞分别培养４８ｈ后应用ＭＴＴ法检测成纤维细胞增殖活力，ＲＴ ＰＣＲ和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测ＡＬＤＨ２ｍＲＮＡ及蛋白的表达。
结果：ＲＴ ＰＣＲ和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ结果显示心肌成纤维细胞ＡＬＤＨ２ｍＲＮＡ和蛋白均有表达。
与正常对照组相比，高糖组心肌成纤维细胞增殖能力提高（Ｐ＜０．０１），ＡＬＤＨ２蛋白表达下降（Ｐ＜０．０５）；与高糖组相比，高糖＋Ａｌｄａ １组心肌成纤维细胞增殖能力降低（Ｐ＜０．０１），ＡＬＤＨ２的蛋白表达增加（Ｐ＜０．０５）。
结论：心肌成纤维细胞存在ＡＬＤＨ２的表达，ＡＬＤＨ２激动剂Ａｌｄａ １提高ＡＬＤＨ２的表达后可以抑制高糖引起的心肌成纤维细胞的增殖。
【关键词】心肌成纤维细胞；乙醛脱氢酶２；高糖；Ａｌｄａ １；大鼠【中图分类号】Ｒ３６３．２【文献标识码】Ａ【文章编号】１０００ ６８３４（２０１７）０３ ２６７ ０５【ＤＯＩ】１０．１２０４７／ｊ．ｃｊａｐ．５５１４．２０１７．０６５ＥｆｆｅｃｔｏｆｈｉｇｈｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｇｌｕｃｏｓｅｏｎｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＡＬＤＨ２ｉｎｃａｒｄｉａｃｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓｏｆｒａｔｓＧＵＸｉａｏ ｙｕ１，３，ＦＡＮＧＴｉｎｇ ｔｉｎｇ３，ＧＡＯＱｉｎ３，ＫＡＮＧＰｉｎ ｆａｎｇ２，ＬＩＺｈｅｎｇ ｈｏｎｇ３，ＣＨＥＮＧＸｉａｎｇ ｙａｎｇ１△（１．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＡｎｅｓｔｈｅｓｉｏｌｏｇｙ，２．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＣａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒＭｅｄｉｃｉｎｅ，ｔｈｅＦｉｒｓｔＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＢｅｎｇｂｕＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｌｅｇｅ，Ｂｅｎｇｂｕ２３３００４；３．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＰｈｙｓｉｏｌｏｇｙ，ＢｅｎｇｂｕＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｌｅｇｅ，Ｂｅｎｇｂｕ２３３０３０，Ｃｈｉｎａ）【ＡＢＳＴＲＡＣＴ】Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏｏｂｓｅｒｖｅｗｈｅｔｈｅｒａｃｅｔａｌｄｅｈｙｄｅｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ２（ＡＬＤＨ２）ｉｓｅｘｐｒｅｓｓｅｄｉｎｃａｒｄｉａｃｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓａｎｄｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｃｈａｎｇｅｏｆＡＬＤＨ２ｉｎｃａｒｄｉａｃｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓｗｈｅｎｃｕｌｔｕｒｅｄｗｉｔｈｈｉｇｈｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆｇｌｕｃｏｓｅ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｃｕｌｔｕｒｅｄｃａｒｄｉａｃｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓｗｅｒｅｒａｎｄｏｍｌｙｄｉｖｉｄｅｄｉｎｔｏｆｏｕｒｇｒｏｕｐｓ：ｎｏｒｍａｌｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ（５．５ｍｍｏｌ／Ｌｇｌｕｃｏｓｅ），Ａｌｄａ １（ｔｈｅａｇｏｎｉｓｔｏｆＡＬＤＨ２，２０μｍｏｌ／Ｌ）ｇｒｏｕｐ，ｈｉｇｈｇｌｕｃｏｓｅｇｒｏｕｐ（３０ｍｍｏｌ／Ｌｇｌｕｃｏｓｅ）ａｎｄｈｉｇｈｇｌｕｃｏｓｅ＋Ａｌｄａ １ｇｒｏｕｐ．Ｃａｒｄｉａｃｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓｗｅｒｅｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄｂｙｉｍｍｕｎｏｆｌｕｏｒｅ ｓｃｅｎｃｅｔｅｃｈｎｉｑｕｅ．Ｃｅｌｌｐｒｏｌｉｆｅｒａ ｔｉｏｎｗａｓｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙＭＴＴｍｅｔｈｏｄａｆｔｅｒｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈｄｒｕｇｓｆｏｒ４８ｈｏｕｒｓ．ｍＲＮＡａｎｄｐｒｏｔｅｉｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓｏｆＡＬＤＨ２ｗｅｒｅｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙＲＴ ＰＣＲａｎｄＷｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ，ａｉｍｅｄｔｏｅｎｓｕｒｅｗｈｅｔｈｅｒＡＬＤＨ２ｗａｓｅｘｐｒｅｓｓｅｄｉｎｃａｒｄｉａｃｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓ．ＴｈｅｃｈａｎｇｅｓｏｆＡＬＤＨ２ｐｒｏｔｅｉｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｎｃａｒｄｉａｃｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓｗｅｒｅｔｅｓｔｅｄｂｙＷｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：ＲＴ ＰＣＲａｎｄＷｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｒｅｓｕｌｔｓｒｅｖｅａｌｅｄｔｈａｔＡＬＤＨ２ｗａｓｅｘｐｒｅｓｓｅｄｉｎｃａｒｄｉａｃｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓ．Ｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｎｏｒｍａｌｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ，ｃａｒｄｉａｃｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｗａｓｉｎｃｒｅａｓｅｄ（Ｐ＜０．０５），ｗｈｉｌｅｔｈｅｐｒｏｔｅｉｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＡＬＤＨ２ｗａｓｒｅｄｕｃｅｄ（Ｐ＜０．０５）ｉｎｈｉｇｈｇｌｕｃｏｓｅｇｒｏｕｐ．ＷｈｅｎｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈＡｌｄａ １，ｔｈｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｏｆｃａｒｄｉａｃｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓｗａｓｄｅｃｒｅａｓｅｄ（Ｐ＜０．０１），ｗｈｉｌｅｔｈｅｐｒｏｔｅｉｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＡＬＤＨ２ｗａｓｉｎｃｒｅａｓｅｄ（Ｐ＜０．０５）ｉｎｈｉｇｈｇｌｕｃｏｓｅｇｒｏｕｐ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：ＡＬＤＨ２ｗａｓｅｘｐｒｅｓｓｅｄｉｎｃａｒｄｉａｃｆｉ ｂｒｏｂｌａｓｔｓ．Ａｌｄａ １，ｔｈｅａｇｏｎｉｓｔｏｆＡＬＤＨ２ｅｎｈａｎｃｅｄｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＡＬＤＨ２ａｎｄｉｎｈｉｂｉｔｅｄｔｈｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｏｆｃａｒｄｉａｃｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓｗｈｅｎｃｕｌｔｕｒｅｄｗｉｔｈｈｉｇｈｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆｇｌｕｃｏｓｅ．【ＫＥＹＷＯＲＤＳ】ｃａｒｄｉａｃｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓ；ａｃｅｔａｌｄｅｈｙｄｅｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ２；ｈｉｇｈｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆｇｌｕｃｏｓｅ；Ａｌｄａ １；ｒａｔ糖尿病是世界范围内常见的慢性疾病之一，其发病年龄日趋年轻化。
《2024年赤雹根总皂苷治疗大鼠T2DM的作用及单体成分研究》范文
《赤雹根总皂苷治疗大鼠T2DM的作用及单体成分研究》篇一一、引言糖尿病（Diabetes Mellitus, DM）是一种全球范围内广泛流行的慢性代谢性疾病，其中，2型糖尿病（Type 2 Diabetes Mellitus, T2DM）是最为常见的类型。
随着T2DM的发病率逐年上升，寻找有效的治疗方法成为医学研究的热点。
近年来，赤雹根总皂苷因其具有多种生物活性，被认为是一种潜在的治疗T2DM的药物。
本文旨在研究赤雹根总皂苷对大鼠T2DM的治疗作用及其单体成分的初步探索。
二、材料与方法1. 材料赤雹根总皂苷提取自赤雹根，大鼠T2DM模型采用高糖高脂饲料诱导法建立。
实验所用药品、试剂及仪器均符合实验要求。
2. 方法（1）建立大鼠T2DM模型：采用高糖高脂饲料喂养大鼠，诱导T2DM模型。
（2）分组与给药：将大鼠随机分为正常组、模型组、赤雹根总皂苷治疗组，给药方式为灌胃，连续给药4周。
（3）指标检测：检测各组大鼠的血糖、胰岛素、血脂等指标，观察赤雹根总皂苷对大鼠T2DM的治疗效果。
（4）单体成分研究：通过化学分析方法，对赤雹根总皂苷中的单体成分进行初步分析。
三、实验结果1. 赤雹根总皂苷对大鼠T2DM的治疗作用实验结果显示，赤雹根总皂苷治疗组的大鼠在给药4周后，血糖、血脂等指标均有显著改善，与模型组相比，差异有统计学意义（P<0.05）。
同时，赤雹根总皂苷治疗组的大鼠胰岛素水平也有所提高，表明赤雹根总皂苷对T2DM大鼠具有显著的降糖作用。
2. 赤雹根总皂苷的单体成分研究通过化学分析方法，初步确定了赤雹根总皂苷中的主要单体成分。
其中，主要成分为三萜类皂苷，包括多种皂苷单体。
这些单体成分可能为赤雹根总皂苷治疗T2DM的主要有效成分。
四、讨论本研究表明，赤雹根总皂苷对大鼠T2DM具有显著的降糖作用，能够改善大鼠的血糖、血脂等指标。
这可能与赤雹根总皂苷中的主要成分三萜类皂苷有关，这些成分可能通过调节胰岛素分泌、改善胰岛素抵抗等途径发挥降糖作用。
实验大鼠常见脏器形态学取材方法和注意事项
实验大鼠常见脏器形态学取材方法和注意事项实验大鼠常见脏器形态学取材方法和注意事项[取材内容]大鼠肺组织、大鼠肝脏组织、大鼠胰腺组织、大鼠胃部组织、大鼠空场回肠组织、大鼠肾组织、门静脉血、淋巴组织、大鼠心脏。
[试剂及药品]戊巴比妥钠或10%水合氯醛、75%酒精、生理盐水、多聚甲醛或福尔马林液、3戊二醛磷酸盐缓冲液(PBS0.01mol/LP pH7.4)或4戊二醛、肝素钠、器械液器械清洗消毒液[器材]备皮刀、解剖台、弯盘、组织剪、眼科剪、手术刀柄、刀片、小号弯式血管钳、蚊式血管钳、眼科镊、无损伤血管夹、聚乙烯管、三通管、丝线、培养皿、天平、一次性离2ml、1.5ml 、冻存管、肝素锂真空采血管、微量移液器、高速离心机、注射器10ml、5ml、2ml、无菌手套、冰箱、冰盒、液氮罐[取材动物]大鼠[取材步骤]1. 取材前夜禁食，自由饮水。
2. 小鼠称重，按照50mg/kg的比例用5ml的注射器配合针头抽取戊巴比妥钠备用。
3. 正左手的小指和无名指抓住大鼠的尾巴，另外三个手指抓住大鼠的颈部，使大鼠头部向向下。
这样腹腔中的器官就会自然倒向胸部，防止注射器刺入时损伤大肠、小肠等器官。
右手持注射器，从腹部近腿根处刺入后再腹部皮下穿行深入，动作轻柔，缓慢注射。
注射完药物后，缓缓拔出针头，手指按住针口对小鼠腹部轻柔按摩，促进麻醉药物的吸收，掐小鼠尾部检测小鼠麻醉程度。
4.将小鼠四肢固定于解剖台上，暴露小鼠整个胸部和腹部，修剪去腹部毛发，75%酒精消毒。
5.沿腹侧正中线自阴茎上源由下而上剪开腹部皮肤直至剑突，向两侧钝性剥开皮肤与皮下组织，暴露腹壁浅肌层。
沿白线钝性分离腹壁肌肉，剪开腹膜，暴露腹腔，将肝脏向上翻起，显露肝门。
6.门静脉血采集：将剪成斜口的聚乙烯管尖端背向肝门方向插入门静脉，抽取门静脉血2ml，无创血管夹夹闭门静脉止血。
将抽取门静脉血加入一次性离心管低温静置过夜，4℃离心，3000-3500/min，10分钟，吸出上清液，分装，-80摄氏度保存备用。
继发性甲状旁腺功能亢进症大鼠Gcm2的表达
1． 2． 1 甲状旁腺及血清标本采集 在 5 /6 肾切除术和高磷 饲养后的第 1、4、7、14、21、28 天分别处死 4 ～ 6 只模型组大鼠， 解剖显微镜下摘取双侧甲状旁腺，断颈取血 3 mL，离心收集血 清样本。假手术对照组大鼠喂养 1 周后相同方法摘取双侧甲 状旁腺、收集血清，作为第 0 天的样本。收集标本的时间均在 上午 9： 00 ～ 11： 00。收集好的甲状旁腺标本依据实验目的放于 － 80 ℃ 保存或 4% 多聚甲醛固定。 1． 2． 2 常规生化检测 血清中肌酐、总钙和无机磷由第三军 医大学西南医院检验科采用 AU5400 全自动生化分析仪检测。
［摘要］ 目的 研究继发性甲状旁腺功能亢进症大鼠在病程中 Gcm2 的表达变化以及与甲状旁腺细胞增殖变化之
间的关系。方法 5 /6 肾切除结合高磷饲养建立大鼠继发性甲状旁腺功能亢进症模型，第 1、4、7、14、21、28 天取甲状旁腺
和血清标本，ELISA 检测血清 i-PTH 浓度变化，Real-time PCR 和 Western blot 检测 Gcm2 mRNA 和蛋白表达的变化，免疫组
1 材料与方法
1． 1 动物模型的建立和分组
6 ～ 8 周龄雌性 SD 大鼠 42 只（ 第三军医大学大坪医院野 战外科研究所实验动物中心提供） ，体质量 180 ～ 220 g，按随机 数字表法分为 2 组： 甲 状 旁 腺 功 能 亢 进 症 模 型 组 （ 模 型 组， n = 36） ，假手术对照组（ n = 6） 用作采集时间原点数据。模型组 先在无菌条件下切除左肾的 2 /3 体积，1 周后切除全部右肾，然 后饲以高磷饲料（ 含磷 1． 2% ，含钙 1． 6% ，委托第三军医大学 大坪医院野战外科研究所实验动物中心饲料配置中心参照美 国营养学会 1993 年 AIN-93G 标准及高磷饲料配方［7］制作） ； 假 手术对照组仅剥离双肾包膜后常规饮食喂养 1 周。手术前后 环境相同（ 室温 15 ～ 25 ℃ ，正常昼夜节律，足够的饮水，无强 光、噪音刺激） 。存活的大鼠饲养至预定时间，经常规生化检测 和全段甲状旁腺激素（ intact parathyroid hormone，i-PTH） 检测， 以手术加高磷饲养后血清肌酐升高 2 倍以上和 i-PTH 升高 3 倍 以上为造模成功的标准［6］。
大鼠的解剖图谱
大鼠和小鼠解剖图谱(照片版)
大鼠和小鼠解剖图谱生物秀—专心做生物！ｗｗｗ．ｂｂｉｏｏ．ｃｏｍ易生物－领先的生物医药商务平台ｗｗｗ．ｅｂｉｏｅ．ｃｏｍ生物秀论坛－学术交流，资源共享，互助社区ｗｗｗ．ｂｂｉｏｏ．ｃｏｍ／ｂｂｓ／图Ⅷ-1整体骨骼侧面观The skeleton. Lateral View图Ⅷ-2整体骨骼左前面观The skeleton. Left anterior view1肋骨rib2胸椎thoracic vertebra3颈椎cervical vertebra4颅骨cranium5肩胛骨scapula6肱骨hiimeius7桡骨radius8尺骨ulna9掌骨metacarpal bone10指骨digital bone11腰椎lumbar vertebra12髂骨ilium13尾骨coccyx14股骨femur15髌骨patella16腓骨fubula17胫骨tibia18跖骨metatarsal bone19趾骨digital bone图Ⅷ-4头骨侧面The skull. Lateral aspect图Ⅷ-6下颌骨侧面The mandible. Lateral aspect1枕骨occipital bone2顶间骨interparietal bone3矢状缝sagittal suture4颧骨malar bone5上颌骨maxillary bone6前颌骨premaxillary bone7枕外嵴external occipital creat8顶骨parietal bone9额骨frontal bone10鼻骨nasal bone11鼻间缝internasal suture12前筛孔preethmoid pore13蝶腭孔sphenopalatine foramen 14门齿 incisor tooth15下颌骨mandible16视神经孔optic foramen17枕骨occipital bone18茎突styloid process19外耳道external acoustic meatus 20颞骨temporal bone21 腭裂patoschisis22臼齿molar tooth23腭骨palatine bone24翼孔pterygoid apertures25破裂孔foramen lacerum26枕大孔foramen magnum27腭后孔posterior palatine foramen 28鼻后孔posterior nasal apertures 29卵圆孔foramen ovale30鼓骨tympanic bone31舌下神经孔hypoglossal foramen 32下颌联合mandibular symphysis 33颏孔mental foramen34冠状突coronoid process35下颌支ramus of mandible36角状突process of horn37下颌孔mandibular foramen38翼肌窝pterygoid fossa39髁突condylar process图Ⅷ-7颈椎与胸椎背面The cervical 图Ⅷ-9前肢骨背面The bone of vertebra and thoracic vertebra.Dorsal aspect anterior 1imb.Dorsal aspect图Ⅷ-8前肢骨外侧面The bone of anteriorlimb. Lateral aspect1枢椎axis 2第4颈椎4th cervical vertebra3第6颈椎6th cervical vertebra 4第1胸椎1st thoracic vertebra5第4胸椎4th thoracic vertebra 6寰椎axis7第3颈椎3rd cervical vertebra 8第5颈椎5th cervical vertebra9第7颈椎7th cervical vertebra 10第3胸椎3rd thoracic vertebral1肱骨体shaft of humcrus 12桡骨radius13尺骨ulna 14尺骨茎突styloid process of ulna15掌骨metacarpal bone 16肱骨头head of hurnerusl7肘突cubital process 18腕骨carpal bone19指骨digital bone图Ⅷ-10股骨前面The femur. 图Ⅷ-11胫骨与腓骨前面The tibia Anterior aspect and fibula. Anterior aspect1大转子greater trochanter2股骨颈neck of femur3第三转子third trochanter4髌骨patella5股骨头femoral headG小转子lesser trochanter7股骨体shaft of femur8股骨内侧髁medial condyle of femur9外侧髁lateral condyle10腓骨fibula11外踝 lateral malleolus12跗骨tarsal bone13胫骨内侧髁medial condyle of tibia14径骨粗隆tibial tuberosity15胫骨tibiaI6内踝medial mallcolus17跖骨metatarsal bone18斜方肌trapezius muscle19臀浅肌glutoeus super(icialis muscle20股直肌rectus femoris muscle21腹外斜肌external oblique muscle of abdomen 22背阔肌latissimus dorsi muscle23肩斜方肌shoulder-trapezius muscle24大圆肌teres major muscle25肩三角肌shoulder-deltoid muscle26前锯肌serratus anterior muscle1锁骨提肌levator clavicle muscle 2肩三角肌shoulder-deltoid muscle 3肱三头肌triceps brachii muscle4臀浅肌gluteus suferficidlis muscle 5股直肌rectus femoris muscle6腓肠肌gastrocnemius muscle7夹肌splenius muscle8颈菱形肌rhomboideus cervicis muscle9胸菱形肌rhomboideus pectoralis muscle10背阔肌latissimus dorsi muscle11腹外斜肌external oblique muscle of abdomen 12股二头肌biceps femoris muscle13半腱肌semitendinosus muscle14二腹肌前腹anterior belly of digastric muscle 15二腹肌后腹posterior belly of digastric muscle 16胸骨舌骨肌sternohyoid muscle17肱二头肌biceps brachii muscle18腹直肌rectus abdominis muscle19股动、静脉femoral artery and femoral vein 20阴囊scrotum21咬肌masseter muscle22胸乳突肌sternomastoideus muscle23肩三角肌shoulder-deltoid muscle24桡侧腕伸肌extensor carpi radialis muscle25指总伸肌extensor digitorum communis muscle 26尺侧腕伸肌extensor carpi ulnaris muscle27胸浅肌pectoral superficialis muscle28前锯肌serratus anterior muscle29股内侧肌vastus medialis muscle30耻骨肌pectineus muscle31长收肌adductor longus muscle32股薄肌gracilis muscle图Ⅷ-15头、颈部侧面The head and neck. Lateral aspect上静脉supraorbitalveine 7颈外静脉external jugular vein 1颞浅动、静脉superficial temporal artery and vein 2眶3面横动、静脉transverse facial artery and vein 4下颌缘神经marginalmandibular nerv 5面后静脉posterior facial vein 6面前静脉anterior facial vein1颞浅动、静脉superficial temporal artery and vein 2眶上静脉supraorbitalvein3面横动、静脉transverse facial artery and vein 4下颌缘神经marginalmandibular nerve 5面后静脉posterior facial vein 6面前静脉anterior facial vein7颈外静脉external jugular vein 8硬腭褶fold of hard palate9臼齿molar tooth 10门齿incisor tooth11软腭soft palate 12舌根root of tongue13舌体body of tongue 14舌尖apex of tongue图Ⅷ-18脑与脊髓背面The brain and 图Ⅷ-19脑与脊髓腹面The brain and spinal cord.Dorsal aspect spinal cordVentral aspect1 喉口aperture of larynx 2舌根root of tongue 3舌尖apex of tongue 4硬腭褶fold of hard palate 5软腭soft palate 6会厌epiglottis 7臼齿molar tooth 8舌体body of tongue 9嗅球olfactory bulb 10中央纵裂central longitudinal fissue 1l 绒球flocculus 12颈膨大cervical enlargement 13腰膨大lumbar enlargement 14外侧纵沟lateral longitudinal sulcus15大脑cerebrum 16小脑（中央部）cerebellum (central part ） 17脊髓圆锥courts medullaris 18 脑垂体 pituitary gland 19脑桥pons 20延髓 myelencephalon 21嗅束olfactory tract 22视神经optic nerve 23三叉神经trigeminal nerve图Ⅷ-20磁共振冠状面定位像（1)The scout view of coronal images（1）图Ⅷ-21磁共振冠状面定位像（2）The scout view of coronal images（2)1眼球eyeball2嗅脑rhinencephalon3大脑皮层cerebral cortex4大脑镰cerebral faix5鼻旁窦paranasal sinus6纵裂longitudinal fissure冠状面T1加权像，颞颌关节线圈，SE序列，层厚3.0mm，无间隔，TR=500rns，TE=20ms。
2、第二篇.比较形态学-大鼠(2)-zy
采
饮 耗
食 量
水 氧 量 量
Food consumption
Water Consumption Oxygen use Erythrocytes Leukocytes Blood volume Serum protein
10 g/100g/day
10-12 ml/100g/day 0.68-1.10ml/g/hr 116（88～138）mmHg 8.9(7.2～9.6) ×106/mm3 14.8(12～17.5)g/100ml血 5000～15000×103/mm3/mm3 10～30×103/mm3 54-70mg/kg占体重的7.4% 5.6-7.6 g/dl
2、常用大鼠及特点
ACI AGUS BN F344
LEW系 M520系 LOU/C系
大鼠与小鼠一样也 有近交系，突变系、 杂交群和封闭群。 目前已知近交品系 100多种。我国未见 育成近交系大鼠报
道。
①ACI
起源1926年由哥伦比亚大学肿瘤研究所Curtis和 Dunning培育，1945年Heston繁殖30代， 1950年美国 国立卫生研究院NIH繁殖41代，最后由Dunning育成。 近交代数F>100。 毛色和毛色基因黑色，腹部和脚白色(a,h1)。
➢ ➢
➢ ➢ ➢
(2)解剖学特性
➢
右肾比左肾靠近头侧，肾为蚕豆形，右侧比左侧稍高 。单乳头肾，肾脏前端有一米粒大的肾上腺。 雄性腹股沟终生开放，30-40日龄时睾丸下降，有阴茎 软骨，生殖器突出，副性腺很发达。雌性生殖器呈圆 形，有凹沟，子宫为Y型双角子宫，胸部和腹部各有3 对乳头（共6对乳头）。
大鼠的心电图
豚鼠以上较大的动物均有明显的S-T段，在选择动物品种时应以注意。 大鼠的心率为475(370--580)次/分。
实验报告-大鼠
姓名：薛桂凤学号：132015200300实验报告（二）一、实验目的：1.掌握大鼠的抓取和固定。
2.掌握大鼠的编号与标记方法。
3.掌握大鼠的常用实验方法。
4.掌握大鼠的常用麻醉方法。
5.掌握大鼠的安死术。
6.掌握大鼠的釆血方法。
7.了解小鼠的采尿、粪的方法。
8.了解小鼠各种脏器标本的采集方法。
二、实验器材：SD大鼠、电子称、手套、实验托盘、固定板、烧杯、注射器（3支）、剪刀、镊子、灌胃针头、毛细管、酒精棉球、5%水合氯醛、生理盐水三、实验内容1.抓取：两种方法。
第一种方法：右手食指和中指夹住大鼠颈部，使其头部固定，右手拇指及无名指分别在大鼠前爪下抓住大鼠身体。
第二种方法类似单手抓取小鼠的方法，用右手拇指及其余四指并捏住大鼠颈部背部皮肤。
2.称重：小鼠放在烧杯中称重（去除烧杯重量），记录小鼠体重210g。
3.鉴别大鼠性别：观察生殖器雄性大鼠的阴囊非常明显。
4.编号：染色法：逆毛方向涂上有色斑点，顺序由左到右，由上向下，用两种颜色可标记99只动物。
5.给药：（1）皮下注射小于1ml/100g（俯卧固定，左手拇指和食指捏住皮肤提起，右手持针沿纵轴方向刺入皮肤，阻力消失后回抽无血注入药物，拔针）（2）皮内注射小于0.1ml （麻醉后进行，先备皮）（俯卧固定，与皮肤平行刺入捏起的皮肤，阻力大，注射药物局部有皮丘后停留片刻后拔针）（3）腹腔注射0.01-0.02ml/g（仰面固定，在腹正中线两侧腹股沟平行的位置30-45°进针，挑起皮肤和肌肉，回抽无血，注药）（4）灌胃1-2ml/100g （大鼠固定身体呈一条直线，灌胃针头顺着上颚插入咽部，先少量注药证明未入气管后继续给药）6.釆血：尾尖釆血法、眼眶静脉丛釆血法、心脏釆血法(麻醉后) 。
7.大鼠的采尿、粪的方法（1）少量采集：在抓取固定时受到刺激排出少量尿液和粪便（2）长期大量采集：使用代谢笼8.麻醉：根据大鼠体重计算麻醉药物用量5%水合氯醛按300mg/kg，给药，计算药量为 1.26ml，ip 麻醉小鼠，观察小鼠麻醉期。
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第25卷,第10期 光谱学与光谱分析Vol 125,No 110,pp1688216922005年10月 Spectroscopy and S pectral Analysis October ,2005 H g 2+在大鼠组织器官中的分布及其存在形态研究沈金灿1,黄志勇3,庄峙厦1,2,王小如1,23,Lee Frank S C 211厦门大学化学化工学院,现代分析科学教育部重点实验室,福建厦门 36100521国家海洋局第一海洋研究所,山东青岛 26606131集美大学生物工程学院,福建厦门 361021摘 要 汞是环境中重要的污染物之一,对人类的健康构成了巨大的威胁。
文章通过建立电感耦合等离子体质谱及凝胶排阻色谱分离法与紫外和电感耦合等离子体质谱在线检测的联用技术,研究大鼠灌喂HgCl 2后Hg 在大鼠中的分布累积规律和及其与蛋白的结合,实验结果表明肝脏和肾脏中在Hg 刺激下诱导产生大量硫蛋白,大量产生的金属硫蛋白可能因此而优先与通过胃肠吸收摄入的Hg 结合,减少了Hg 对其它蛋白的正常作用的干扰,从而大大降低了Hg 2+的毒性。
主题词 汞;SEC ;UV ;ICP 2MS ;金属硫蛋白中图分类号:O65713 文献标识码:A 文章编号:100020593(2005)1021688205收稿日期:2004203228,修订日期:2004206216 基金项目:国家自然科学基金(20175022)资助项目 作者简介:沈金灿,1978年生,厦门大学化学化工学院博士研究生 3通讯联系人 汞是环境中重要的污染物之一,同时也是一种可引发机体不可逆性损伤的高毒性重金属元素,汞与巯基的亲合性发生的特异反应,将使蛋白质的SH 基活性中心部位被封闭,蛋白质的空间构象发生变化,阻碍了蛋白质硫代二硫化物的循环,电子传递受到阻碍,从而失去蛋白质所应有的活性[1]。
对于汞的毒性作用机理研究,有助于人们对汞的毒性有更全面的认识,以便更有效地防范和治疗。
本文通过电感耦合等离子体质谱(inductively coupled plasma mass s pectrome 2try ,ICP 2MS )准确测定了灌喂HgCl 2后汞在大鼠体内各个组织器官(包括肝、肾、心、脑、睾丸)和血清中的Hg ,Cu ,Zn 的含量,研究Hg 在这些脏器中的分布累积规律;建立凝胶排阻色谱(size 2exclusion chromatography ,SEC )色谱分离法与紫外(ultraviolet ,UV )和ICP 2MS 在线检测的联用技术,对Hg 在大鼠不同组织器官及血清中的热稳定蛋白结合态进行分离检测,解析大鼠体内金属硫蛋白(metallothioneins ,M Ts )对汞的解毒作用及其与营养元素(Cu ,Zn )的作用机理。
1 材料与方法111 仪器和试剂高效液相色谱仪(HPLC ):Agilent 1100型,带有二极管阵列检测器(DAD );电感耦合等离子体质谱(ICP 2MS ,HP4500):美国安捷伦公司产品;凝胶柱(500mm ×719i 1d 1,5μm ):Shim 2pack DIOL 2300。
用国家一级标准物质头发G BW07601(地矿部物化探研究所)进行方法准确度和精密度验证;微量元素混合标准储备液(100μg ・mL -1),用于制作标准工作曲线的标准溶液浓度为0,10,20,50,100ng ・mL -1;所用化学试剂均为分析纯以上,实验用水为超纯水(由Milli 2Q50制备)。
用于校准SEC 柱的标准分子量物质为:甲状腺球蛋白(660,000Da )、牛血清蛋白(66,400Da )、溶菌酶(14,300Da )、和维生素B12(355Da )(Da :Dalton )。
SEC 流动相:用30mmol ・mL -1三羟甲基氨基甲烷(Tris (hydroxymethyl )a mi 2nomethane )(上海)配置,用6mol ・L -1优级纯HCl 调到p H 810。
HPLC 与ICP 2MS 系统的连接用一Teflon 小管(015mm ,ID ),经紫外检测后的流出液直接导入ICP 2MS 雾化装置的进样口中。
112 动物实验实验动物为体重为180～220g 的wistar 雄性大鼠:由中国医学院实验动物研究所提供(编号:SC4K1120020006)。
除正常喂食外,其中一组灌喂去离子水作为对照组;另一组灌喂HgCl 2作为HgCl 2组;HgCl 2组的灌喂剂量为每周每公斤大鼠灌喂0101g ,喂养时间为两周。
按照规定的时间灌喂后,分别从大鼠的腹动脉取血,并将血液分离为血浆和红细胞。
然后,处死大鼠,经解剖取出器肝、肾、心、脑和睾丸,这些脏器用生理盐水冲洗后于滤纸晾干,称重后保存于-80℃中。
113 金属元素的ICP 2MS 测定将冷却的脏器直接冷冻干燥24h ,称重后将其研磨。
准确称取013g 左右的粉末样品于消解罐中,用5mL 65%的HNO 3预消解过夜,然后微波消解5min ,再用1mL 浓H 2O 2微波消解2min 。
冷却后用5%的HNO 3定容至25mL ,置于4℃冰箱中备用。
按同样消解方法做空白实验,并用标准物质人发(G BW07601)验证方法的准确度。
为校正ICP 2MS 在测定过程中的误差,实验用40ng ・mL -1Tl 溶液作为内标元素对信号波动进行矫正。
ICP 2MS 在优化条件下工作,工作参数如表1所示。
T able 1 Operating parameters of ICP 2MS项目参数项目参数RF 功率1350W 样品提升速率110mL ・min -1采样深度616mm 分析模式定量,时间分辨等离子气体1610L ・min -1每质量数采集数据点1辅助气体1100L ・min -1数据采集模式跳峰载气1107L ・min -1驻留时间30ms 采样锥直径110mm 重复采集数据次数1,3截取锥直径018mm积分时间,采集时间011,1800s114 样品的制备与SEC 2UV 2ICP 2MS 测定大鼠各脏器经解冻、切碎后,与含有250mmol ・L -1葡萄糖的019%NaCl 提取液(p H 715)按1:3(W /V )的比例在玻璃均质器混合后均质,均质过程在Ar 保护气氛下进行。
均质物于4℃下离心(15000rpm )20min ,上清液经95℃加热10min ,在冰水中冷却5min ,再次于4℃下离心(15000rpm )10min ,取上清液贮存于-40℃中供SEC 分离使用。
取20μL 制备好的样品注入SEC 2UV 2ICP 2MS 联用系统,以30mmol ・L -1Tris 2HCl (p H 810)为流动相在流速为110mL ・min -1下洗脱,分别用UV 及ICP 2MS 记录流出组分的UV 色谱图及包括Hg ,Zn ,Cu 的信号。
2 结果与讨论211 ICP 2MS 测定H g 2+在大鼠各器官中的分布汞是环境中重要的污染物之一,它对动物体的毒性很大。
一旦发生汞中毒,将会对动物体各个系统造成不同程度的损害。
汞在动物体内的代谢速度非常缓慢,如汞在脑部的半减期为240d ,而在其他脏器中的半减期也要70d 左右。
因此,汞在动物体内的累积量是研究汞毒性的重要参考指标。
氯化汞组和对照组大鼠各脏器中的金属含量采用ICP 2MS 测量,测量结果如图1所示。
Fig 11 Distribution of H g ,Cu and Z n in different tissues of H gCl 2and control group rat(a ),Hg ;(b ),Cu ;(c ),Zn 图1为汞、铜和锌在HgCl 2和控制组大鼠各脏器中的分布,图1(a )的结果表明,灌喂HgCl 2后Hg 在大鼠各器官均有不同程度的累积,其中累积最严重的是肝和肾,它们的累积量是对照组相应器官的7939倍和567倍;其次是血清,其累积量为对照组的148倍;心脏、睾丸和大脑中汞的累积量相对较少,它们的累积量分别为对照组的1217,818和619倍。
显然,Hg 2+在大鼠体内的蓄积主要是肝脏和肾脏,即肝脏和肾脏是Hg 2+累积和代谢的主要场所。
实验同时考察了大鼠各脏器中铜和锌的含量变化,图1(b )和图1(c )的结果表明,Cu 和Zn 在大鼠的肝、肾和睾丸中的含量均显著高于其对照组,且在Hg 含量较高的脏器中,Cu 和Zn 在该器官中的含量也随之增加。
如肾脏中Cu 和Zn 含量分别是对照组的3105和1141倍;而肝脏中Cu 和Zn 含量分别是对照组的112和115倍。
汞离子属于典型的软酸,它与生物分子中的巯基有很强的亲合性。
由于巯基广泛地存在于蛋白质中,故几乎所有的蛋白质均可不同程度地与汞成键,所以进入各器官中的汞跟蛋白以结合态的形式存在。
金属硫蛋白是一类富含半胱氨酸的小分子量蛋白,广泛存在于动物组织器官中(特别是哺乳类动物的肝脏和肾脏中),它是体内能与金属(如Zn ,Cu ,Cd ,Hg )紧密结合并起解毒作用的最重要的蛋白质之一[224]。
Hg 的累积同时伴随着Cu 和Zn 的累积这一现象显示肌体组织对蓄积在该器官的汞进行解毒的功能与金属硫蛋白有关,因为Cu 和Zn 是肌体中固有的M Ts 结合金属,汞对肾或肝的污染刺激M Ts 在这两个器官中的大量诱导合成,大量产生的M Ts 与体内的Hg ,Cu 及Zn 结合。
为了进一步研究Hg 2+在大鼠中的存在形态,采用SEC 2UV 2ICP 2MS 研究Hg 在大鼠体内与蛋白的结合情况。
212 SEC 2UV 2ICP 2MS 测定H g 结合蛋白用已知分子量的标准物质对SEC 柱进行标定,若分子量以对数形式表示,将各分子量的对数值(lg M )与相应的保留时间(t ,min )作图,其线性方程为lg M =-01339t +91664回归系数(r 2)为019977。
在相同实验条件下对样品进行分离9861第10期 光谱学与光谱分析分析,通过该线性方程,可估算出色谱图上各分离组分的分子量大小。
灌喂HgCl2大鼠的各组织器官经匀浆,离心,上清液加热除去热敏感蛋白质后,注入SEC柱分离,依次经过UV和ICP2MS在线检测色谱流出组分。
图2为灌喂HgCl2组与对照组大鼠肾脏中汞、铜和锌结合蛋白的SEC2ICP2MS色谱图比较,由图可知,在保留时间为1811min处有一组分,其Hg,Cu,Zn的响应强度分别为对照组的574,8和5倍。
图3为225nm处的SEC2UV色谱图及保留时间为1719min组分的紫外吸收光谱图,SEC2ICP2MS色谱图上保留时间为1811 min的组分对应于SEC2UV色谱上的保留时间为1719min,由于生物样品复杂基质及光谱间的干扰,在ICP2MS上有很强的Hg响应信号在该保留时间仅能见到一小峰,该峰的紫外吸收光谱在220nm(Zn2S的吸收),270nm(Cu2S的吸收), 304nm(Hg2S的吸收)均有一定的吸收,符合Hg,Cu和Zn 结合M Ts分子结构的特征吸收[5]。