16第十五章 细胞工程多媒体

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细胞融合步骤
（1）制备具有遗传标记的细胞； （2）用促融合剂或电场诱导细胞融合 （3）杂种细胞的选择性培养； （4）杂种细胞的鉴定。
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细胞融合过程
A a+b融合剂 B a-b+
异核体
杂种细胞a+b+ 选择培养基 杂种细胞克隆 上页 下页 返回 结束
细胞融合用于基因定位
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克隆人即通过无性繁殖形成的人,由于克隆人 会带来一系列社会问题, 所以目前禁止进行。 克隆技术非常广泛，如分子克隆、细胞克隆、 细菌克隆、克隆动物等，具有巨大的经济效益。

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三、转基因技术


将供体细胞的ＤＮＡ直接注入受体细胞的 过程称为基因转移或转基因。 用这种方法培养的动物称为转基因动物。
第十五章 细胞工程及其在医学中的应用
第一节 细胞工程的基本原理和方法
第二节 细胞工程技术的应用
思考题
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工程 （engineering）


将自然科学的原理和生产实践中所 积累的经验应用到工业生产部门而 形成的各学科的总称。如冶金工程、 土木工程等。 指具体的基本建设项目。如三峡工 程、南水北调工程等。
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一项基本的“工程”必须是：

经过预先设计 可获得具体的结果 可为人类所利用ok
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细胞工程

细胞工程(cell engineering) 是人们 应用细胞生物学和分子生物学的理 论和技术，按照预先的设计，在细 胞水平上进行遗传操作，改变细胞 的遗传特性和生物学特性，以获得 具有特定生物学特性的细胞和生物 个体的技术。
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自然工程与细胞工程的比较
自然工程
原理 操作水平 结果 自然科学原理 宏观水平 改造了自然界
细胞工程
细胞和分子生物学原理 细胞水平 改造了细胞特性
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一、细胞融合工程
细胞融合工程是指用人工方法 使两种或两种以上的体细胞合 并在一起，不经过有性生殖过 程而得到杂种细胞的方法。
极限稀释 克隆化培养
单克隆抗体杂交瘤细胞株
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二、生化制药

胰岛素的生产过程
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三、基因治疗

所谓基因治疗就是以基因转移的方 法，将一种具有表达功能的基因导 入到人体细胞内，转录或翻译的产 物发挥治疗作用的一种方法。 基因治疗 基因疗法ok
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思考题：
1、何谓细胞工程？细胞工程包括哪些内容？ 2、举例说明细胞工程在医药学方面的应用。 3、什么是克隆？举例说明。 4、简述单克隆抗体的生产过程。
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四、基因工程

采用类似工程设计的方法，按照预 先的设计，将不同来源的目的基因 在体外切割、拼接形成重组基因， 然后将重组的基因通过运载体导入 宿主细胞，并使重组基因在宿主细 胞内复制和表达，以获得生物产品 或生物新品种的技术。
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基因工程的基本操作步骤
（1）目的基因的获得； （2）目的基因与载体重组； （3）重组DNA导入宿主细胞； （4）筛选鉴定重组子进行克隆； （5）目的基因的表达及产物鉴定。

如人-小鼠“杂种细胞”中，人染色体大部分丢 失，只留下17号染色体。该杂种细胞可在HAT培 养基中生长。已知鼠细胞是TK- (胸腺嘧啶激酶 )和HGPRT+ （次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移 酶） ，人细胞是(TK+ HGPRT-)，而只有 (TK+ HGPRT+)的细胞才能在HAT中生长，所以可将TK 定位于人的17号染色体上。
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五、染色体工程和染色体组工程

染色体工程是按照预先的设计，添 加、消除或替代同种或异种染色体 的全部或一部分，从而达到定向改 变生物遗传性状或选育新品种的目 的。
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六、干细胞工程

是利用干细胞的增殖特性、多分化 潜能及其增殖分化的高度有序性， 通过体外培养干细胞、诱导干细胞 定向分化或利用转基因技术处理干 细胞以改变其特性等方法，以达到 利用干细胞为人类服务的目的ok
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一、单克隆抗体的生产

每个Ｂ淋巴细胞只能针对一种抗原 决定部位而产生一种抗体抗体，由 这个细胞经有丝分裂而形成的细胞 群称为克隆，由这个克隆产生的抗 体称为单克隆抗体。
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单克隆抗体的生产过程
抗原→免疫小鼠→鼠脾 ↓ 鼠脾细胞 细胞融合 融合细胞的培养(HAT选择培养基) 抗体检测 骨髓瘤细胞
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基因定位图解
TK+ HGPRTTKHGPRT+
人
鼠
HAT
TK+ HGPRT+
染色体分析
17号染色体 上页 下页
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细胞融合用于单克隆抗体的生产
B细胞 （产生抗体 寿命短）
癌细胞 （寿命长 不能产生抗体）
杂种细胞 （能产生抗体 且寿命长） 培养，产生抗体 上页 下页 返回 结束
二、细胞拆合工程


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细胞拆合工程也称为细胞质工程，即进行细 胞组分的分离和融合，研究细胞质和细胞器 的添加和潜代。 如“爪蟾卵核移植实验” 克隆羊“多莉”的诞生
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细胞核的替代
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关于克隆、克隆人、克隆技术



克隆：由一个细胞或个体以无性方式重复分裂或 繁殖所形成的一群细胞或一群个体，在不发生突 变的情况下一个克隆内的所有成员具有完全相同 的遗传结构。 名词：含有目的基因的重组DNA分子常称分子克 隆； 一群相同的细胞或细菌称为细胞克隆或 细菌克隆； 动词：产生一个重组DNA分子； 一个细胞或一个细菌的分裂增殖。