科华V2.2核酸检测系统灵敏度验证
人脲原体核酸检测试剂盒国家参考品的制备
通讯作者：高尚先，E -mail ：gaoshangxian@人脲原体核酸检测试剂盒国家参考品的制备王玉梅1，李尔华2，曾灵风2，刘艳1，高尚先11.中国食品药品检定研究院体外诊断试剂室卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室，北京100050；2.中山大学达安基因股份有限公司，广东广州510665摘要：目的制备人脲原体核酸检测试剂盒国家参考品。
方法培养人脲原体两大生物群14个标准血清型菌株，培养液灭活后经颜色改变单位（color change unit ，CCU ）法与PCR 相结合的方法进行定值，组成能覆盖脲原体所有表型及基因型的14份阳性参考品P1-P14（浓度为106CCU ／ml ）及14份检测限参考品L1-L14（浓度为104CCU ／ml ）；选择6份能排除脲原体核酸检测试剂盒非特异性或交叉反应的样品组成阴性参考品N1-N6；选择生物群1的微小脲原体（ureaplasma parvum ，UP ）1和UP14作为重复性参考品R1、R2（浓度分别为105和104CCU ／ml ）。
用5家公司生产的脲原体核酸检测试剂盒对参考品进行验证，确定准确性、特异性、检测限、重复性、稀释线性的性能指标；并考察参考品在不同条件下（2～8℃放置7d ，37℃放置3、7、12d ，-20℃及常温反复冻融5次）的稳定性。
结果支原体各培养液经CCU 法测定，浓度均在106～107CCU ／ml 之间，以CCU 法测定浓度为靶值，绝对偏差均在±0.5个数量级以内。
4家公司生产的不同试剂盒检测参考品，在准确性、特异性、检测限及重复性上均符合要求；在稀释线性上，最低稀释浓度为102CCU ／ml 的样品只有2家可以检出，其他几家的稀释线性相关系数以103～1064个浓度计算，r 值均>0.9900；1家（RNA 检测）检测R2的重复性，CV 为5.5%。
经不同条件处理的参考品的稳定性有轻微变化，但均处于设定的可接受范围内。
匹基试剂与科华试剂在核酸(NAT)检测中的应用
表 ｌ 深圳 匹基 试 剂 与 上 海 科华 试 剂 的应 用
３ 讨 论
从 以上 的 试 验 总 结 出 ， 用 两 个 不 同 厂 家 的 试 剂 对 应 １ １ 标 本 进 行 了核酸 检 测 ， 测 结 果 虽 然 相 同 ， 是 匹 基 ０ ６份 检 但 利用核 酸提取柱单检 的方 法灵 敏度 虽高但耗 时长， Ｈ Ｖ灵 （Ｂ 敏度 ５０ ｏｉ ／ ｌ Ｈ Ｖ 灵 敏 度 ５０ ｏｉ ／ ｌ Ｈ Ｖ 灵 敏 度 ０ ｃｐ ｓｍ ， Ｃ ｅ ０ ｃｐ ｓｍ ， Ｉ ｅ ５０ｅｐｅ／ １） ０ ｏｉｓｍ 。血筛用试剂对 灵敏度要求很 高 ， 普通 临床 使 用 核 酸 检 测 试 剂 因 灵敏 度 低 （０ ５０一ｌ０ Ｉ／ １ ， 造 成漏 Ｏ０Ｕ ｍ ） 会 检 。此 前 国 内 较 多 关 于 Ｎ Ｔ筛 杏 的 研 究 结 果 差 异 较 大 ， Ａ 可 能 与 较 多 使 用 临 床 Ｎ Ｔ试 剂 有 关 ， 减 少 冈 灵 敏 度 问 题 造 Ａ 为
・
４ ６・
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匹基 试 剂 与科华 试剂 在核 酸 （ Ａ ） 测 中的应 用 Ｎ Ｔ检
孙秋 影 ， 卢长春 江 哈 尔滨 １０ ５ ） ５ ０ ６
［ 中图分类号】 Ｒ ７ ． ４２ ９
１ 材 料 与 方 法
１ １ 仪 器 设 备 ： ｉ ｔｙｌ ＠ ４ ０实 时 荧 光 定 量 Ｐ Ｒ 仪 、 ． Ｌｇ Ｃ ｃ ｒ ｈ ｅ ８ Ｃ ＢＯ Ａ Ｅ Ｂ Ｓ—Ｄ Ｃ ） 净 工 作 台 、Ｉ Ｂ Ｓ （ Ｓ ＩＢ Ｓ （ Ｂ Ｄ Ｏ洁 ＢＯ Ａ Ｅ Ｂ Ｃ一１０ Ｈ ５０ Ｂ Ｘ） 物 安 全柜 、 Ｗ 一８ Ａ、 一１ 涡 混 合 器 Ｚ ２ ４ Ａ ２一 生 Ｘ ０ Ｈ 旋 ５ 、２ 型医用低速离 心 机 、 Ｔ多 功能 干式恒 温 器 、 Ｃ一３ １Ｒ ＨＧ Ｈ ０８ 高速 冷冻 离 心 机 。 １２ 单 检 试 剂 ： 毒 核 酸 纯 化柱 试 剂 盒 （ ． 病 深圳 匹基 生 物 工 程 有 限 公 司 ） 号 ：０ ８０ Ｉ样 品裂 解 液 试 剂 盒 、 型肝 炎 病 批 ２０ １０ 、 乙 毒 （ Ｖ） 核 酸 扩 增 （ Ｃ 。 荧 光 定 量 检 测 试 剂 盒 批 号 ： ＨＢ 、 Ｐ Ｒ） ２ ０ ０Ｏ ／ ２ Ｈ Ｖ阳性 工作 标 准 品 试 剂 盒 批 号 ：０ ８ １ １、 ０ ８９ １０ 、 Ｂ ２０ １０ 丙型肝炎病毒 （ Ｃ 核酸定量检测试剂盒 （ Ｃ 荧光探针 Ｈ Ｖ） Ｐ Ｒ一 法 ） 号 ：０ ８６ ２ Ｈ Ｖ对 照 品 及 定 量 标 准 品 试 剂 盒 批 号 ： 批 ２０ ００ 、 Ｃ ２ ０ １０ 类 免疫 缺 陷 病 毒 （ Ｉ 一１ 核 酸 定 量 检 测 试 剂 ０ ８ １ ｌ人 ＨＶ ） 盒（ Ｔ—Ｐ Ｒ一 Ｒ Ｅ 荧光探针法） 批号 ：０ ８ １ １０ 、 Ｉ ２０ １０／ ３ Ｈ Ｖ阳性标 准 品 试 剂 盒批 号 ：０ ８５ １ ２０ ００ 。
新冠病毒核酸检测实验室全自动荧光定量PCR仪技术要求
新冠病毒核酸检测实验室全自动荧光定量PCR仪技术要求1、热循环系统：珀耳帖效应系统2、通道数：最少6 色激发光滤光片和6 色检测光滤光片可自由组合，最多可检测21 种不同的荧光光谱3、模块规格：可支持4 种模块，标准96 孔模块；快速96 孔模块；384 孔模块；微流体芯片模块。
4、反应体积：10-100μL（标准96 孔）；5-30μL（快速96 孔）；100uL/48 反应孔（微流体芯片）5、温控模块最高升降温速率：6.5℃/秒6、温控范围： 4℃–100℃7、温度精确度：±0.25℃，温度范围 35℃至 95℃8、温度一致性：±0.50 ℃，温度范围 35℃至 95℃9、高分辨熔解曲线分辨率：小至 0.04℃10、光学系统：卤钨灯、冷CCD 检测器11、安装时已校准染料： FAM™, SYBR®, SYTO®9 (MeltDoctor™), Fluorescein, SYPRO® Orange，VIC®, JOE™, TET™, HEX™，TAMRA™, NED ™, BODIPY® TMR-X，Texas Red®， LIZ™，Alexa Fluor®,Joda-4 12、荧光染料：能同时检测并区分VIC荧光和TAMRA荧光，以用于TaqMan 基因拷贝数(CNV)分析13、被动参照染料：软件支持Rox荧光校正去除移液误差14、数据同时采集：所有反应孔同时采集荧光数据，不同孔之间不存在时间差15、开放的 API：开放的应用程序界面（API）允许整合第三方系统，如 LIMS（实验室综合管理系统）或定制的自动化平台。
可选的符合FDA 21 CFR Part 11 法规的模块，以便数据的审查记录。
16、内置触摸屏电脑： LCD/ Full VGA (640x480)/32K色。
触摸屏电脑可备份还原超过100次的实验数据；提供一键式的实验方案，可快速地设置多种应用。
深圳市血液中心 血液筛查工作汇报(20150414烟台)
HBsAg测试结果
系统 NAT ELISA 阴性样本 2151 2144 阳性样本 2 19 ELISA VS NAT 总样本数 阴性符合率 符合样本数 阳性符合率 符合样本数 2153 99.40% 2138 0.00% 0 2163
系统 ELISA MR 系统
阴性样本 2144 2154
MR HBsAg化学发光 VS ELISA 阳性样本 总样本数 阴性符合率 符合样本数 阳性符合率 符合样本数 19 2163 100.00% 2144 47.37% 9 9 2163 MR HBsAg化学发光 VS NAT 阳性样本 总样本数 阴性符合率 符合样本数 阳性符合率 符合样本数 2 2153 99.86% 2148 0.00% 0 9 2163 MR HBsAg化学发光 VS 血站参考结果 阳性样本 总样本数 阴性符合率 符合样本数 阳性符合率 符合样本数 21 2163 99.95% 2141 42.86% 9 9 2163
工作流程
献血样本采集 样本离心处理 化学发光及血站测试 结果对比分析 样本重测与结果分析
HIV抗原抗体试剂盒测试结果
ELISA VS NAT(NAT 为参比试剂)
系统 NAT ELISA 阴性样本 2163 2160 阳性样本 0 3 总样本数 2163 2163 阴性符合率 符合样本数 阳性符合率 符合样本数 99.86% 2160 0.00% 0
深圳市血液中心
血液筛查工作情况汇报
深圳市血液中心 曾劲峰
报告内容
1
抗-HTLV血液筛查 献血者不规则抗体的检测 化学发光检测技术（CLIA）在血液筛查中的应用 输血安全相关科研工作汇报
2
3
4
一、抗-HTLV血液筛查
两种核酸检测技术检测血液HBVDNA的比较分析
类变量资料采用 Ｆ ｉ ｓ ｈ ｅ ｒ Ｓ ｅ ｘ ａ ｃ ｔ ｔ ｅ ｓ ｔ 。连 续 变 量 资 料 采 用 两 独 立 样 本 比较 的 Ｍａ ｎ ｎ － Ｗｈ ｉ ｔ ｎ ｅ ｙ Ｕ 检 验 。 所 有 的 统 计 检 验 均 采 用双侧检验 ， Ｐ ＜０ ． ０ ５ 为差异有统计学意义 。
・志 ２ ０ １ ３年 第 ３ ４卷增 刊
两 种核 酸 检 测 技 术检 测 血液 ＨＢ Ｖ Ｄ ＮＡ 的 比较分 析
马 兰 ， 叶 贤林 ， 古醒辉
（ 深 圳 市血 液 中心 ， 广 东深圳 ５ １ ８ ０ ３ ５ ）
摘 要： 目的 为 了进 一 步提 高 输 血 安 全 ， 采 用 核 酸检 测 技 术 降低 输 血 传 播 病 毒 的 残 余 风 险 。方 法 通 过 用 科 华 实 时 荧光 对９ ８ ９ ７ １人 份 酶 免 疫 检 测 结 果 阴性 标 本 进 行 核 酸检 测 ， 共
２ 结 果
１ ． １ 对象
收集 ２ ０ ０ ６ 年 １ 月至 ２ ０ １ １年 ６月 深 圳 血 液 中 心 无
２ ． １ 对 ９ ８ ９ ７ １人 份 酶 免 疫 检 测结 果 阴 性 标 本 进 行 核 酸 检 测 ， 共检 出 ３ ４例 不 相 同 ＨＢ Ｖ ＤＮ Ａ 阳性 献血 者 ， 总 比 率 为 ｉ：２
１ ． ４ 统计学方 法 用Ｓ ｔ ａ ｔ ａ （ １ １ ． Ｏ ） 统计 分析软 件处理数 据 ， 分
传染病检测方法 ， 可直接 检测病 毒核 酸 ， 显 著 缩 短 目前 酶 免 疫 检 测 方 法 的“ 窗 口期 ” ， 检 出 因病 毒 变 异 、 免 疫 静 默 感 染 等 造 成 的漏 检 感 染 病 毒 的血 液 ， 降低输 血感 染病毒 的的风险 ， 已 成 为 发 达 国家 的 血 液 筛 查 病 毒 的 必 要 手 段 ［ １ 。 ］ 。我 国 近 几 年 在 卫 生 部组 织下 多个 血 站 开 展 该 技 术 进 行 血 液 的 筛 查 及 科 研 工 作 ， 取 得 良好 成 效 ［ ３ ］ 。本 中心 ２ ０ ０ ４年 开 始 进 行 该 技 术 试 点 检 测 工 作， ２ ０ ０ ６ 年 正 式 进 行 将 不 同 的 核 酸 检测 技 术 应 用 于 常 规 检 测 ， 大大提高输血安全 ， 现 将 本 人 参 与 的 国产 核 酸 检 测 方 法 与进 口 核 酸 检 测 技 术 检 测 ＨＢ Ｖ Ｄ ＮＡ 的 结 果 报 道 如 下 。
核酸检测技术在血液筛查中的应用进展
（Ｆ Ａ）批准的可用于血站病毒 Ｎ Ｔ检测的试剂中 ＳＤ Ａ ｃｂｓ ａＳｒ ｎ Ｘ、 ｏａＴｇｃ ｅ ＭＰ 科华和浩源等试剂即为此原理。 ｅ Ｔ ＭＡ则是一种转录扩增的过程。 它使用Ｍｏｅ ｎｙ
鼠白血病病毒（ ＭＭＬ 逆转录酶和 Ｔ Ｒ Ａ多聚酶 Ｖ） ７Ｎ
通信作者 ： 张哲， 中国输血协会理事会理事， 浙江省输血协会 副理事长 ， 浙江省医学会检验 分会常务委员 ， 宁波市医学会检验分 会主任委 员。Ｅ ａ ： ｚａ ｇ ９ ９ ｙ ｈ ｏ ｏ ． ｍ ｉ ｚ ｈ ｎ １９ ＠ ａｏ ． ｒ ｃ ｌｈ ｃｎ ｎ
现代 实用 医学
２ １年 １ ０１ ０月 第 ２ ３卷 第 １ ０期
素的影响 ， 故两种检测技术存在 良 的互补性。卫 标本中是否存在相应的病原体。其基本步骤包括核 好
生部于 ２ １ 年 ３月在全 国范围开始推广血站 Ｎ Ｔ 酸提取、 ００ Ａ 扩增和检测。 Ａ Ｎ Ｔ技术中核酸提取的方法众 试点工作 ， 本文就近年来国内外Ｎ Ｔ Ａ 在血液筛查 中 多， 中 其 磁珠法提取核酸具有操作简便、 所需时间短、
永恒主题。根据我国现行法律法规要求， 采供血机
Ｐ Ｒ技术原理为： Ｃ 按照模板 Ｄ Ａ序列， Ｄ Ａ Ｎ 在 Ｎ
构对临床供血检测模式为： 用两种不同厂家的 Ｅ Ｉ 聚合酶的催化下， ４ Ｎ Ｐ Ｌ． 用 种ｄ Ｔ 来合成与模板Ｄ Ａ完 Ｎ
Ｓ Ａ检测试剂筛查 Ｈ ｓ ｇ 抗． Ｃ 抗一 Ｉ Ｂ Ａ 、 Ｈ Ｖ、 ＨＶ及梅毒 全相同的拷贝， 从而在多种 Ｄ Ａ分子混合物中特异 Ｎ 螺旋体抗体 （ Ｔ ） 抗一Ｐ 。这种筛查模式有效降低 了输 扩增某一特定的 Ｄ Ａ片段。 Ｎ 在实时荧光定量 Ｐ Ｒ反 Ｃ
核酸序列检测系统技术参数
核酸序列检测系统技术参数1*≤50um内径新型24道全自动毛细管电泳系统。
2*采用505nm固态长寿激光光源激发装置，无需散热。
3*检测系统采用低温CCD装置，无机械位移，同时采集所有通道信号4*光栅同步分光装置，更换染料不必更换硬件设备5*可同时进行≥6色荧光实时检测,以满足高通量片段分析应用；6*24小时测序量达984个样品以上,碱基数>492,000，DNA序列分析精度98.5％或以上，测序长度最长可达1000bp以上.7测序试剂可常规做≥8倍稀释，8*电泳操作温度：18℃-70℃，适合进行变性胶电泳的SSCP突变分析。
9数据分析所用软件: 基本的测序及片段分析软件。
10仪器操作和数据分析所用计算机工作站，保证结果质量。
11*一块板可同时进行测序和片段分析。
12可96孔和384孔板，96孔快速反应板，八连标准或者快速管兼容，一种管子一种胶可同时进行测序和片段分析，样品可直接从96或者384微孔反应板自动吸取并且上样。
13*可进行大规模STR研究，24小时可分析6万个以上STR基因型。
14*可进行大规模SNP的系列研究，24小时可进行9万个SNP分析。
15*可利用片段分析功能检测大于100bp以上的插入缺失。
可做微卫星不稳定检测（MSI）。
16有适用于全基因组连锁分析和疾病基因定位研究的配套试剂盒。
17*有适用于亲子鉴定和个体识别的法医配套软件和试剂盒。
18测序软件要求：每一碱基判读均有国际公认的质量评分系统（Phred Q20），精确度达98.5%；真实反映峰高比例，能精确自动辨认杂合子位置，不漏检采用Oracle数据库，满足高通量分析，24小时测序分析达84,000碱基数。
19序列比对、拼接软件：适合于不同生物种类基因组快速检测变异位置、全自动、高通量，无序列数量限制。
自动批处理，可后期编辑，直接兼容Genebank文件格式。
20片段分析软件要求：高速、高通量，每小时可处理5万以上的基因型、可自动剔除干扰峰，不需要人工修正，输出表格简单易懂、采用Oracle数据库，可以大规模搜索和管理数据、有现成六色荧光片段分析参数设置，可方便进行亲子鉴定，连锁分析，SNP分析。
核酸检测技术在无偿献血者血液筛查中的应用分析
核酸检测技术在无偿献血者血液筛查中的应用分析冯秀梅;王艳【摘要】目的探讨我国无偿献血者血液筛查采用核酸检测技术的必要性.方法采用Roche Cobas S201系统对血站常规ELISA 检测阴性的献血者18 751份标本进行HBV、HCV 和 HIV 3 项联合筛查,并对NAT 筛查阳性的标本做确证实验.结果 18 751份ELISA 检测阴性标本中,用NAT 检测共检出阳性15 例,阳性检出率为0.08%.结论 NAT 系统应用于无偿献血者血液筛查,有助于提高献血者的血液质量,保证输血安全.【期刊名称】《中国医药科学》【年(卷),期】2011(001)019【总页数】3页(P16-17,27)【关键词】核酸检测;无偿献血者;血液筛查;窗口期【作者】冯秀梅;王艳【作者单位】吉林省吉林市红十字中心血站,吉林吉林,132001;吉林省吉林市红十字中心血站,吉林吉林,132001【正文语种】中文【中图分类】R446.6近年来，国内已有部分血站使用NAT筛查献血者。
根据我国现行的法定要求，采供血机构对献血者病毒血清学检测项目主要为HBsAg、抗-HCV、抗-HIV和抗-TP，ELISA方法检测[1]的筛查模式已极大地降低了输血传播疾病的风险，但因输血而患传染病的情况仍然时有发生[2]，主要因为我国属于肝炎的高发区，人群中HBsAg携带率为9.09%，HBV流行率＞60%[3]，抗-HCV阳性率也达到了3.2%[4]，艾滋病也有快速发展的趋势。
现有的血清学方法避免不了对病毒感染“窗口期”的漏检，而近年来发展的高度敏感、特异的核酸扩增技术（NAT）可使HBV、 HCV和 HIV病毒的“窗口期”明显缩短[5]，大大提高了输血和血液制品的安全。
现将笔者所在血站2010年12月～2011年7月ELISA检测阴性献血者的标本进行NAT检测的情况报道如下。
1 材料与方法1.1 标本来源2010年12 月～2011年7月采集的无偿献血者全血标本中，经ELISA方法检测阴性的标本共18 751份，其中男10 230人，女8 521人。
PCR扩增仪校准报告
经校准该 PCR 扩增仪 符合 规程要求，判定为 合格 。
校准员：
核验员：
校准日期：2023/09/07
校准地点：362
技术依据及代号：JJF1527-2015 聚合酶链反应分析仪校准规范
标准器及配套设备：FLUKE 53-II B 双输入数字温度表（带温度探头）；计量科学研究院
外观检查记录：符合规程 5.3 要求
环境温度：23℃
环境湿度：60%
序号 设定温度/℃
实测温 度/℃
降温时 间/s
升温时 间/s
—
∆T=T-T1；∆t=Tmax-Tmin；∆H=TH-Th
30
30.1 29.6 29.8 -0.17 2.5 2.3 0.5
—
注：T1 为设定温度；T为实测平均温度；∆T 温度偏差；∆t 为温度均一性；Tmax 实测最大温度；Tmin 实测最
低温度；∆H 为热盖温度偏差，TH 为设置温度，Th 为实测温度。
标准要求：温度偏差：±0.5℃，±0.8℃（98℃）；温度均匀度≤1℃，≤1.5℃（98℃）；超调温度≤5℃；升降 温速率：≥1.5℃/s；热盖温度偏差：105℃，±3。
检定结果：
1、外观：符合规程 5.3 要求，合格； 2、温度偏差：不超过±0.5℃，合格； 3、温度均匀度：≤1℃，合格； 4、升温速率：≥1.5℃/s，合格； 5、降温速率：≥1.5℃/s，合格； 6、热盖温度偏差：105℃，不超过±3，合格； 7、超调温度：≤5℃，合格；
20 平均超调温度（℃）
3.2 2.8
1
29.6
19
-
温度均匀度（℃）
0.3 0.4
2
30
29.8
19
-
ELISA法和CLIA法检测HBsAg和梅毒抗体的对比分析
ELISA法和CLIA法检测HBsAg和梅毒抗体的对比分析LU Rong;WANG Yi-han;WANG Ling-ling【摘要】目的:对比分析酶联免疫吸附实验(ELISA)和化学发光免疫测定(CLIA)法检测乙肝表面抗原(HBsAg)和梅毒螺旋体(TP)抗体的结果.方法:分别采用ELISA法和CLIA法平行检测3060份无偿献血标本的HBsAg和TP抗体,其中ELISA法检测HBsAg阴性的标本进行核酸检测(NAT),分析比较两种方法检测结果,检测结果不一致的标本送临检中心进行确证试验.结果:HBsAg检测结果,ELISA、CLIA的灵敏度分别为90.00％、90.00％,特异度分别为99.87％、100.00％;4例ELISA反应性CLIA阴性标本经确认为阴性,1例NAT反应性标本确认为反应性.TP抗体检测结果,ELISA、CLIA检测的灵敏度分别为40.00％、90.00％,特异度分别为99.84％、99.97％;12例ELISA反应性CLIA阴性标本确认阴性11例,反应性1例;8例ELISA阴性CLIA反应性标本有6例确认为反应性,2例为阴性.结论:CLIA检测血液标本的HBsAg和TP抗体具有较高的灵敏度和特异度.【期刊名称】《承德医学院学报》【年(卷),期】2019(036)004【总页数】4页(P290-293)【关键词】化学发光免疫测定法;酶联免疫吸附实验;血液筛查【作者】LU Rong;WANG Yi-han;WANG Ling-ling【作者单位】;;【正文语种】中文【中图分类】R446.6酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA)操作简便，且成本较低，被各国血站应用于输血相关传染病的筛查[1-2]。
近年来化学发光免疫测定（chemiluminescence immunoassay，CLIA，简称：化学发光法)检测技术逐渐成熟，具有灵敏度高、特异性强及线性范围广的优点[3-4]，已广泛应用于医院临床，但尚未在血液筛查中应用。
核酸检测医院编码表
核酸检测（PCR ）（医疗机构）室间质评方法编码表核酸检测（PCR ）（医疗机构）室间质评仪器编码表编 码仪器名称编 码仪器名称208001 ABI 2400 PCR 仪 208026 Rotor Gene 208002 ABI 9600 PCR 仪 208027 Line-Gene208003 ABI 9700 PCR 仪 208028 MJ Research Opticon II 208004 PTC-200热循环仪 208029 FTC 2000208005 PTC-100热循环仪 208030 DA7600核酸扩增实时荧光检测系统 208011 ABI 5700 荧光定量PCR 仪 208031 科华FluoCycle 实时荧光定量PCR 仪 208012 ROCHE Lightcycler （毛细管） 208032 SLAN 荧光定量PCR 仪208013 Bio-Rad iCycle 208099 其它PCR 仪（请详述） 208014 ROCHE Lightcycler 480 208100 医用核酸分子快速杂交仪HHM-2 208019 ABI 7700 荧光定量PCR 仪 208105 Genelight 9800全自动医用PCR 分析系统208020 ABI 7000 荧光定量PCR 仪 208106 Genelight 2400全自动医用PCR 分析系统 208021 ABI 7900 荧光定量PCR 仪 208107 伯乐CFX96实时定量PCR 仪 208022 COBAS AMPLICOR 208108 天隆TL988荧光定量PCR 仪208023 COBAS TaqMan208109 厦门安普利荧光PCR 分析系Anadas9850 208024 ABI 7300荧光定量PCR 仪 209999 其它（请详细填写） 208025 ABI 7500荧光定量PCR 仪编 码方法名称编 码试剂名称20019 聚合酶链反应（PCR ）20001 上海实业科华生物技术有限公司 20020 逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR) 20078 达安基因诊断中心 20021 实时荧光PCR （定量） 20080上海复星医学科技发展有限公司(PCR)20022 实时荧光PCR （定性） 20081 北京万泰生物药业有限公司 20023 转录基于的放大系统（NASBA) 20082 罗氏（ROCHE ）投资有限公司 20024 连接酶链反应（LCR) 20083 厦门安普利生物工程公司 20025 链替代放大系统（SDA) 20086 上海申友生物技术有限责任公司 20026 QB 复制酶系统20097 深圳匹基生物技术有限公司 20027 bDNA 信号放大系统(bDNA) 20139 上海浩源生物科技有限公司 20028免疫印记(包括westernblot 和RIBA 等)20143 爱康生物技术（杭州）有限公司 20030 PCR ELISA 定量 20161 湖南圣湘生物科技有限公司 20031 PCR ELISA 定性 20167 亚能生物技术（深圳）有限公司 20033 PCR-反向定点杂交法 20168 港龙生物技术（深圳）有限公司 20034 导流杂交法 20169 潮州凯普生物化学有限公司 20035 流式荧光杂交法 20170 上海透景生命科技有限公司 20099 其它（请详细填写） 20171 苏州天隆生物科技有限公司20999 其它（请详细填写）。
科华生物抗原检测使用方法
科华生物抗原检测使用方法科华生物抗原检测使用方法：1、实验前准备：（1）本实验所使用的试剂：科华生物中和试剂一支（CN-HS-1）；科华生物显色试剂一支（CN-HS-2）；科华生物标准细胞表面抗原溶液一支（CN-St-Antigens）；科华生物标准细胞表面抗原盘（CN-St-wells）；科华生物检测抗原溶液及抗原溶解液（CN-R-Antigens）。
（2）实验室要有设备：酶标仪、微量称、显微镜、冰箱等。
2、实验步骤及内容：（1）将科华生物中和试剂CN-HS-1加入标准抗原溶液 CN-St-Antigens 中，混匀后在4℃储存备用；（2）将标准抗原溶液CN-St-Antigens滴定到科华生物标准细胞表面抗原盘（CN-St-wells）中，每个孔加入100μL；（3）将检测抗原溶液以及抗原相应的抗原溶解液分别加入到科华生物标准细胞表面抗原盘的11个孔中（1个标准孔及10个检测孔），每个孔加入100μL；（4）将科华生物标准细胞表面抗原盘与酶标仪固定底座上，将显色试剂CN-HS-2加入20ml数据记录管中，然后放入固定底座上；（5）将显色试剂CN-HS-2放入酶标仪的洗液槽中，进行自动分洗；（6）将科华生物标准细胞表面抗原盘从酶标仪固定底座上取出，根据标准孔及检测孔的大小，将其分别擦拭干净；（7）将酶标仪温度调节至37℃，调节pH值至7.0，启动仪器，系统将自动完成洗液、活性化处理；（8）将显色试剂CN-HS-2从酶标仪的洗液槽中取出，加入到科华生物标准细胞表面抗原盘对应的孔中，并放入酶标仪固定底座上，完成显色试剂的添加；（9）转换成标准光谱读数模式，放入定标曲线，将检测孔与标准孔相应的数据比较，从而形成抗原检测数据；（10）将科华生物标准细胞表面抗原盘从酶标仪固定底座上取出，放入实验室冰箱中，方便下次使用。
血站核酸检测实验室HBV DNA项目室内质量控制方法探讨
血站核酸检测实验室HBV DNA项目室内质量控制方法探讨文良雪，张澜艺，苏 丽，王明芬，刘永生（遵义市中心血站，贵州遵义 563000）摘要：目的探讨血站核酸检测实验室乙型肝炎病毒（HBV）DNA项目室内质量控制（IQC）方法。
方法以HBV DNA阳性质控品、试剂盒阳性对照为反应性，试剂盒阴性对照为阴性，且内标阳性为实验在控。
根据3个月的检测数据，分别计算阳性质控品循环域值（Ct）、阳性对照Ct值、内标Ct均值、内标Ct值标准差的均值和标准差，绘制Levey-Jenning质控图，使用Westgard多规则质控方法进行判断。
统计检测标本总数及混样反应性、拆分反应性次数，计算总体监控指标（混检阳性率、拆分阳性率、拆出率）。
结果所有批次实验均在控。
阳性质控品Ct值在第32天、内标Ct均值在第30天和第58天发生13s失控，内标Ct值标准差在第27天发生22s 失控、在第58天发生R4s失控。
共检测标本14 172份，其中HBV DNA混样反应性13次，拆分反应性8次，混检阳性率、拆分阳性率和拆出率分别为0.092%、0.056%、61.540%。
结论血站血液筛查日常检测时，在使用HBV DNA阳性质控品判定当批实验在控的基础上，结合阳性质控品Ct值、试剂盒阳性对照Ct值、内标Ct均值、内标Ct值标准差的Levey-Jenning质控图及总体监控指标进行回顾性分析，可以有效进行血站HBV DNA检测的IQC。
关键词：血站；室内质量控制；Levey-Jenning质控图；回顾性分析Internal quality control of HBV DNA determination in blood center nucleic acid laboratory WEN Liangxue，ZHANG Lanyi，SU Li，WANG Mingfen，LIU Yongsheng.（Zunyi Blood Center，Zunyi 563000，Guizhou，China）Abstract：Objective To investigate the internal quality control（IQC） of hepatitis B virus（HBV） DNA determination in blood center nucleic acid laboratory. Methods The experiment was effective when quality control （QC） and positive control（PC） were positive，and negative control（NC） was negative. The average value，standard deviation and coefficient of variation of QC cycle threshold（Ct），PC Ct，VIC Ct and VIC Ct SD were calculated. Draw Levey-Jenning QC chart was drawed. Westgard multi-rules were used. The total number of samples，mixed reactivity and split reactivity were evaluated. The general monitoring was performed（minipool nucleic acid test positive ratio，positive split ratio and effective split ratio）. Results Every experiment was effective in 3 months.QC Ct in day 32，VIC Ct in day 30 and 58 was out of control by rule 13s. VIC Ct SD was out of control in day 27 by 22s and day 58 by R4s. Total number of samples，mixed reactivity and split reactivity were 14 172，13 and 8，respectively. Minipool nucleic acid test positive ratio，positive split ratio and effective split ratio were 0.092%，0.056% and 61.54%，respectively. Conclusions It could be applied effectively for blood center to use QC as IQC and Levey-Jenning QC chart of QC Ct，PC Ct，VIC Ct and VIC Ct SD combined with general monitoring indicators.Key words：Internal quality control；Levey-Jenning quality control chart；Retrospective analysis文章编号：1673-8640（2021）04-0437-04 中图分类号：R446.1 文献标志码：A DOI：10.3969/j.issn.1673-8640.2021.04.018进行室内质量控制（internal quality control，IQC）是实验室有效运行的需要，也是《血站实验室质量管理规范》[1]等我国医疗卫生行业相关规定的强制要求。
科华生物抗原检测使用方法
科华生物抗原检测使用方法
科华是一家专业从事医药技术及产品研发的国际企业，在国际上占据着重要的地位。
它的生物抗原检测是一项科学技术，用于快速准确地评估物质的抗原特性。
它能够帮助我们更好地了解一种物质的抗原活性，以及其对免疫系统的影响，提供给我们一些重要的科学信息。
科华生物抗原检测包含用于测试抗原特性的四个步骤，即抗原测定，抗原反应类型分析，抗原抗体关系研究和抗原稳定性检测。
其中，抗原测定是检测样本抗原性的第一步，其目的是对样本的单纯性和组成进行分析，以便进行后续的抗原反应性和分析。
抗原反应类型分析主要用于分析样品中抗原的种类，以及它们之间的关系，以获得抗原的相互作用表现形式，从而更好地理解样品的抗原特性。
抗原抗体关系研究主要用于研究抗原与抗体之间的关系，以及它们之间的作用机制，并分析样品中特定抗体与抗原之间的相互作用情况，以推断抗原特性。
抗原稳定性检测用于分析抗原在不同条件下的稳定性，检查其结构的稳定性和功能的稳定性，以便更好地了解抗原的质量。
科华生物抗原检测的运用能够改善我们对抗原特性的理解与评估，从而实现安全有效的药物及其他相关产品的研发。
此外，该检测还可以用于检验药品质量，避免药品过量使用或使用不安全的药品，以及根据抗原检测结果筛选具有较高抗原性的抗体，从而更有效地应对市场潜力。
科华生物抗原检测技术的开发和应用将有助于实施更为完善的医药技术和产品研发，从而给医护人员带来更多的帮助，实现更高的医疗保健水平。
综上所述，科华生物抗原检测是一种有效而准确的技术，它通过对物质的抗原特性进行分析，有助于更好地评估药物的有效性和安全性，促进抗原产品的研发和使用，以及提高医疗保健水平。
两种检测技术在血液筛查中对乙肝病毒筛查的应用
西藏医药2021年第42卷第2期（总155期）22●基础医学●两种检测技术在血液筛查中对乙肝病毒筛查的应用德央 曲吉西藏自治区血液中心 西藏拉萨 850000摘要 目的 了解拉萨地区无偿献血者中的乙肝病毒感染情况，对比NAT 与ELISA 检测技术在乙肝病毒筛查中的临床意义。
方法 收集2019年~2020年5999份无偿献血者的血样标本，分别进行两遍酶联免疫检测技术及核酸病毒检测技术，对比两种技术检测出乙肝病毒样本数。
结果 2019~2020年西藏拉萨地区献血人群中HBV 检出率为1.08%（65/5999）；其中，NAT 检测的灵敏度为100%、特异性为96.92%，ELISA 的灵敏度为52.38%，特异性为50.77%；两种检测方法的灵敏度和特异性差异具有统计学意义（P<0.05）。
结论 NAT 能够更好的提高HBV 检测的灵敏度，在血液筛检中的诊断价值性更高。
关键词 核酸检测技术 酶联免疫技术 血液安全血液安全是目前全世界广泛关注的焦点，为了保证输血的安全可靠，世界卫生组织（WHO）建议对每一位献血者进行健康征询及血源性传染病的筛查[1]。
随着科学的进步发展，Busch 等科研人员通过研究证实核酸检测能将HBV、HCV 和HIV 血清学检测的窗口期缩短[2]。
本中心也于2019年开展核酸检测工作，本文以初步了解拉萨地区无偿献血者的乙肝病毒感染情况，对比了NAT 与ELISA 检测技术在乙肝病毒筛查中的临床意义，现报告如下。
1 资料与方法1.1 样本来源本中心于2019年1月~2020年9月采集的5999例无偿献血者标本，初筛合格，且符合《献血者健康检查要求》（GB18467-2011）。
每位无偿献血者共收集3管标本，第1管为分离胶促凝真空采血管用于EIA 检测及谷丙转氨酶检测；第2管为EDTA-K2抗凝真空采血管用于核酸检测；第3管同为EDTA-K2抗凝真空采血管，是核酸检测备用管（需要复检时使用）。
应用HBcAb检测进行献血者血液筛查的作用研究
表 1 45379例献血者一般资料及献血情况对比[（%）]
献血者
性别（男 /女）
年龄（岁）
重复献血者
计划免疫前组 计划免疫后组
合计
27329 18050 45379
18076（66.14）/9253（33.86） 10378（57.50）/7672（42.50） 28454（62.70）/16925（37.30）
.744.
实验与检验医学 !"!# 年 $! 月第 %$ 卷第 & 期 '()*+,-*./01 0.2 3045+0/5+6 7*2,8,.*9 :*8;!<!#9=51;%>9?5;&
·输血与检验·
应用 HBcAb检测进行献血者血液筛查的作用研究
刘春兰，刘鹏，王亚彬，周红英，陈红，王晖
!九江市中心血站检验科"江西 九江 ##!<<<#
摘要:目的 通过对计划免疫前后出生的献血者 @A= 感染标志物检测" 初步了解九江地区献血者 @A= 感染情况和乙 肝疫苗的实施效果以及 @A8B4 检测对降低经输血传播 @A= 风险的作用" 探讨应用 @A8B4 检测进行献血者血液筛查的可 行 性 ( 方法 采 用 ! 种 '3VPB 试 剂 对 献 血 者 血 液 标 本 进 行 @AIBJ 和 @A8B4 检 测 "以 及 > 种 '3VPB 试 剂 进 行 @AIB4 检 测 " @AIBJ 阴性标本进行 @A= :?B & 人份混样核酸检测%7LD?BR$"7LD?BRX和 7LY?BRYQ@A8B4X标本进行拆分单人份核酸 检测%V:Y?BR$"7LY?BRXQV:Y?BRYQ@A8B4X标本再进行 ! 次 V:Y?BR( 结果 献血者 @AIBJ&@A= :?B&@A8B4 和单独@AIB4 %@A8B4 为阴性$阳性率分别为 <;%<Z%>[<Q%F #\G$&<;>#Z%&<Q%F >GG$&>\;FGZ%!#!Q> #>G$和 %<;##Z%F#!Q> #>G$"其 中 计 划 免疫前后 出 生 的 献 血 者 @AIBJ 阳 性 率 分 别 为 <;F#Z%>%FQ!\ #!G$和 <;>GZ%#FQ>[ <F<$%<;<F$,@A= :?B 阳 性 %OAV$率分 别为 <;>GZ%F#Q!\ >[%$和 <;<%Z%\Q>[ <>F$%<;<F$,@A8B4 阳性率分别为 F<;
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制造商具有的权利：产品更新和变更设计规格，如无特别通知，以变更为准。
PD230用户手册NORTECH 国际公司版权© 1996文档号 : 301UM0004-02出版日期 : 1997年3月目录1. 引言 (1)2. 技术参数 (2)2.1 功能参数 (2)2.2 电气参数 (3)2.3 环境参数 (3)2.4 机械参数 (3)3. 操作说明 (4)3.1 硬件安装 (4)3.2 开关设置选择 (5)3.2.1 频率选择 (5)3.2.2 灵敏度 (5)3.2.3 自动灵敏度提高 (6)3.2.4 存在时间 (6)3.2.5 复位开关 (6)3.2.6 内部连接选择 (6)3.3 前面板指示 (7)4. 操作指南 (8)4.1 检测器调谐 (8)4.2 检测器灵敏度 (9)4.3 操作模式 (9)4.4 响应时间 (10)5. 安装指导 (11)5.1 操作影响 (11)5.2 线圈和馈线的规格 (12)5.3 感应线圈的几何尺寸 (12)5.4 线圈安装 (12)6. 配置 (15)6.1 PD231 检测器 (15)6.2 PD232 检测器 (15)6.3 PD234 检测器 (16)7. 应用 (17)8. 客户故障分析 (18)8.1 发现的故障 (18)8.2 DU100-检测器诊断仪 (19)8.3 功能测试 (20)1. 引言PD230是基于微处理器设计的用于停车场和车辆出入控制的双通道车辆检测器。
PD230的设计使用了许多最新技术来广泛地适应众多停车场的使用环境，以供客户选用。
对于用户，许多外部功能是有效的。
检测器的基本功能是：通过车辆经过埋在路面下的环行线圈所引起的电感变化，来检测车辆的存在。
该检测器根据当前流行的PD130系列单通道车辆检测器而设计的，易于安装、使用方便。
不同模式的选择可通过改变前面板开关的位置来实现。
上海科华HBsAg-ELISA两步法
1、检验申请单独检验项目申请：乙型肝炎病毒表面抗原（缩写HBsAg）测定；组合项目申请：肝炎标志物检查组合。
临床医生根据需要提出检验申请。
2、样本采集与处理2.1 样本采集2.1.1 常规静脉采血约2ml，不抗凝，置普通试管中，或采用含分离胶的真空采血管。
也可采集血浆，用肝素、EDTA或枸橼酸盐抗凝。
2.1.2 检验申请单和血样本试管标上统一且唯一的标识符。
2.1.3 急诊样本采集后，在检验申请单上填写样本采集时间。
2.1.4 样本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。
专人负责样本的接收并记录样本的状态，对不合格样本予以拒收。
2.1.5 下列样本为不合格样本2.1.5.1 样本量不足：少于0.3ml的全血样本，或少于0.1ml的血清或血浆。
2.1.5.2 对检测结果可能有干扰的样本，包括严重溶血、严重浑浊的样本。
2.1.5.3 无法确认样本与申请单对应关系的。
2.1.5.4 其他如标识涂改、样本试管破裂等。
2.2 样本保存2.2.1接收样本后放置1-2h后将样本离心分离出血清或血浆，避免溶血。
离心必须达到3000rpm 15min，离心后的血清中不能含有颗粒物和微量纤维蛋白。
2.2.2 样本保存时间：室温（15-25℃）下可稳定48h，普通冰箱中（2-8℃）稳定7d，在-20℃最多可保存4周。
避免反复冻融。
不可使用热灭活的样本。
2.2.3已完成测试的样本保持完整的识别号，置4-8℃冰箱内保存7d。
2.3 样本采集的注意事项采血前使受检者保持平静、松弛，避免剧烈活动。
3．检验原理本试剂盒采用抗-HBs包被反应板，加入待测样本，经孵育后，加入抗-HBs-HRP，当样本中存在HBsAg时，该HBsAg与包被抗-HBs结合并与抗-HBs-HRP 结合形成抗-HBs-HBsAg-抗-HBs-HRP复合物，加入TMB底物产生显色反应，反之则无显色反应。
4．试剂及其他用品4.1试剂：乙型肝炎病毒表面抗原诊断试剂盒（上海科华生物工程股份有限公司生产），试剂盒药品批准文号：国药准字S1*******(48人份)；国药准字S1*******(96人份)。
芜湖地区无偿献血者归队分析及探讨
芜湖地区无偿献血者归队分析及探讨潘洁【摘要】目的探讨反应性献血者归队的方法及可行性,寻求血源流失与血液安全的平衡.方法筛选符合本站归队条件的既往献血者重新采集标本(时间间隔≥6个月),先进行常规ELISA检测及NAT检测,若均无反应性,则送检省血液中心进行确证实验及补充实验.结果 2014年1月～2018年4月共计召回献血者166例,其中63例标本在本站常规检测不合格,不合格项目同既往屏蔽项.103例ELISA检测及NAT 检测均无反应性标本送检省血液中心,其中83例确证阴性,可以归队.83例中31例再次献血,13例多次献血.结论目前ELISA检测+NAT实验结合确证实验,很大程度保证血液安全,又使得部分假反应献血者,尤其是灰区及弱阳性的假反应献血者得以再次回归献血者队伍,对促进无偿献血发展有着重大意义.【期刊名称】《临床输血与检验》【年(卷),期】2019(021)002【总页数】5页(P146-149,165)【关键词】反应性献血者;假反应性;献血者归队;确证实验【作者】潘洁【作者单位】241000 安徽省芜湖市中心血站【正文语种】中文【中图分类】R193.2根据《血站技术操作规程2015版》要求血站实验室对无偿献血者血液试剂单反应性即判为不合格，献血者屏蔽；而因高灵敏度的试剂、操作、人员、献血者自身等因素造成的假反应性，则不可避免。
所以不管从献血者权益还是造成固定献血者流失的原因来说，献血者归队策略应运而生。
献血者归队是证明已被屏蔽的献血者符合献血者健康检查要求，准许其再次献血的程序。
该程序适用检测结果为假反应性，尤其是需要经过一段时间后做其他血清学实验和NAT实验以检出血清阳转的献血者[1]。
目前国内对归队策略并没有统一的标准，参照中国输血协会颁发的《反应性献血者屏蔽与归队指南》，结合实际工作，探讨本站无偿献血者归队方法及策略。
材料与方法1 研究对象本站以往血液检测传染性指标之一呈反应性并被屏蔽的献血者。
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方法 采用 ６份 样品合并（简称 ６混样）检测模式检测 系列浓度 ＨＢＶ ＤＮＡ、ＨＣＶ ＲＮＡ、ＨＩＶ ＲＮＡ标准 品，验证 Ｖ２．２系统 的灵
敏度 。用 Ｖ２．２系统与科华 Ｖ２．１核酸检 测 系统（８份样 品合 并检 测模 式，简称 Ｖ２．１系统 ）对 ＨＢＶ ＤＮＡ弱反应样 品 同时进行
０００），差异无统计 学意 义（ ＝０．６６７，Ｐ＞０．０５）。结论 Ｖ２．２系统检 测 ＨＣＶ ＲＮＡＺＨＩＶ ＲＮＡ的灵敏 度与厂 商提 供 的理论值
相符合 ，ＨＢＶ ＤＮＡ的灵敏度 与理论值存在一 定差距 。Ｖ２．２系统较 Ｖ２．１系统检 出 ＨＢＶ ＤＮＡ弱反应性样品 的能 力高。
关键词 ：病毒核酸 ；灵敏度 ；性能验证
中 图 分 类 号 ：Ｒ４４６
文 献 标 志 码 ：Ａ
１９９８年美 国血液 中心率先在献 血者血液筛 查 １．１．１ 病毒 核酸 标 准 品 依 据 科 华 病毒 核 酸 检 测
中开展输血相关传染病病毒核酸检测Ｈｊ，该策略也 系统 说 明书 ，单 人 份 的检 测 下 限 （ＬＯＤ）分 别 为 ：５
（２８／３０）；对 ＨＣＶ ＲＮＡ载量为 １５０、３００、４００ ＩＵ／ｍＬ标准品的检 出率分别为 ８３．３％ （２５／３０）、１００％ （３０／３０）、１００％ （３０／３０）；对
ＨＩＶ ＲＮＡ 载量 为 １５０、３００、４００ ＩＵ／ｍＬ标 准 品 的检 出率 分 别 为 ８３．３％ （２５／３０）、９６．７％ （２９／３０）、９６．７％ （２９／３０）。Ｖ２．２系统 对
混样检测 ，并进行卡方检验 。选取无偿献血者血浆样品 ３ ０００例 ，用两 系统平行检 测 ，并进行 卡方检验 。结 果 ｖ２．２系统 对
ＨＢＶ ＤＮＡ 载 量 为 １５、３０、４０、６０ ＩＵ／ｍＬ标 准 品 的 检 出 率 分 别 为 ５３．５％ （１６／３０）、７０％ （２１／３０）、９０．０％ （２７／３０）、９３．３％
· ７０·
临床检验杂志 ２０１８年 １月第 ３６卷第 １期 Ｃｈｉｎ Ｊ Ｃ］ｉｎ Ｌａｂ Ｓｅｉ，Ｊａｎ．２０１８，Ｖｏ１．３６，Ｎｏ．１
ＤＯＩ：１０．１３６ｏ２／ｊ．ｅｎｋｉ．ｊｃｌｓ．２０１８．０１．１９
科华 Ｖ２．２核酸 检测 系统灵 敏度 验 证
· 产 品 应 用 ｘＯＩ－究 ·
产 品之一 ，目前 多 数 血 站 采 用 ８份 样 品合 并 （下 文 原 浓度 为 ２ ０００ ＩＵ／ｍＬ的 ＨＣＶ ＲＮＡ标准 品 （北 京康
简称 ８混 样 ）检 测 模 式 ，分项 检测 ＨＢＶ ＤＮＡ、ＨＣＶ ＲＮＡ与 ＨＩＶ ＲＮＡ，具 有通 量大 、操作 简便 、成本低 等 特点 ，但其 分 析灵 敏度与进 口检 测 系统如 罗 氏 、盖 立 复等 比较 仍存 在一定 差距 ＿２ 。本 实验室 于 ２０１７年
２０１５年底 完成 了核 酸 检 测 在 血 液 筛 查 实 验 室 的 全 组 目 的 浓 度 ：６０ ＩＵ／ｍＬ（２ＬＯＤ）、４０ ＩＵ／ｍＬ（１．３
覆 盖 。科 华核 酸检测 系统 作为血 站应 用较 广泛 的 国 ＬＯＤ）、３０ ＩＵ／ｍＬ（１ＬＯＤ）、１５ ＩＵ／ｍＬ（０．５ＬＯＤ）；将
统 ），检测模式为 ６份样品合并 （下文简称 ６混样 ） 检 出 的 ＨＢＶ ＤＮＡ弱反应 即病 毒载 量 低 于 ８混 样检
检测，旨在通过增加合并检 ０时单份样 品的加样量 测 １ＬＯＤ（４０ ＩＵ／ｍＬ）的献 血 者 的冻 存血浆 样 品共 １４
从 而提 高 弱 反 应 样 品 的检 出率 。本 研 究 主 要 验 证 例 ，经 罗 氏 ＣＯＢＡＳ ｓ２０１荧 光 定 量 ＰＣＲ检 测 系 统 检
被视为降低输血相关传染病血清学窗 口期漏检风险 ＩＵ／ｍＬ（ＨＢＶ ＤＮＡ）、５０ ＩＵ／ｍＬ（ＨＣＶ ＲＮＡ／ＨＩＶ一１
的最 佳解 决 方 法 。２０１０年 我 国血 站 开 展 乙型 肝 炎 ＲＮＡ），故 ６混 样 的 ＬＯＤ理论 值分别 为 ３０ ＩＵ／ｍＬ
病毒 核 酸 （ＨＢＶ ＤＮＡ）、丙 型 肝 炎 病 毒 核 酸 （ＨＣＶ （ＨＢＶ ＤＮＡ）、３００ ＩＵ／ｍＬ（ＨＣＶ ＲＮＡＺＨＩＶ－１ ＲＮＡ）。
Ｖ２．２系统 的分析灵 敏 度 ，并 通 过 与 原检 测 系 统 （科 测 ，其 中 １Ｏ例样品的病毒载量均低于 ２０ ＩＵ／ｍＬ，其
ＨＢＶ ＤＮＡ弱反应标本的检 出率 为 ２７．８６％ （３９／１４０），Ｖ２．１系统 的检 出率为 １０．７１％ （１５／１４０），差异 有 统计 学 意 义（ ＝
１３．２１５，Ｐ＜０．０５）。平行试 验 中 ｖ２．２系统 的反应 性检 出率 为 ０．０７％ （２／３ ０００），Ｖ２．１系统 的反应 性检 出率为 ０．１％ （３／３
ＲＮＡ）与人类 免疫 缺 陷病 毒 核 酸 （ＨＩＶ ＲＮＡ）检 测 试 通 过倍 比稀 释将 原 浓 度 为 ２００ ＩＵ／ｍＬ的 ＨＢＶ ＤＮＡ
点工 作 ，应 国家 “十 二 五 ”规划 要 求 ，采 供 血 机 构 于 商 品化定 值 标 准 品 （北 京 康 彻 斯 坦 公 司 ）稀 释 至 ４
朱姗 姗 ，朱绍 汶 ，蒋 昵真 ，叶 霞艳 ，朱胜 江 ，朱瑞 ，王亚武 ，冯雅 颂 ，冯 涛 ，周彦君 （江 苏省血 液 中心检 验 科 ，南京 ２１００４２）
摘 要 ：目 的 验 证 血 液 筛查 实验 室科 华 Ｖ２．２核 酸检 测 系统 （简称 Ｖ２．２ 系统 ）的 灵 敏 度 ，观 察 其 检 出弱反 应 核 酸 样 品 的 能 力 。
彻 斯坦公 司 ）稀释 至 ３组 目的浓 度 ：４００ ＩＵ／ｍＬ（１．３ ＬＯＤ）、３００ ＩＵ／ｍＬ（１ＬＯＤ）、１５０ ＩＵ／ｍＬ（０．５ＬＯＤ）； ＨＩＶ．１ ＲＮＡ标 准品 的配制 同 ＨＣＶ ＲＮＡ；上 述 系列浓 度 的病毒 核 酸标准 品分别 分装 ３０份 。
引进 科 华 Ｖ２．２核 酸检 测 系统 （下 文 简 称 Ｖ２．２系 既往