b-葡聚糖酶 - 360文档中心

基因工程菌EGs2产β-葡聚糖酶条件优化及产酶特性

农业生物技术学报 Journal of Agricultural Biotechnology 2007,15(4):708~712*基金项目：国家自然科学基金（No.20276064）资助。

**通讯作者。

Author for correspondence.教授，博导，主要从事食品微生物相关的研究。

Email:<gqhe@>. 收稿日期：20061225 接受日期： 20070316 ·研究论文· 基因工程菌产茁葡聚糖酶条件优化及产酶特性 *李青青 1 , 陈启和 1 , 蒋孝燕 1, 张秀艳 2 , 李婷 1 , 何国庆 1 ** (1.浙江大学食品科学与营养系，杭州 310029； 2.华中农业大学食品安全与微生物学系，武汉 430070)摘要：用乳清粉作为主要培养基组成，采用正交试验对大肠杆菌（）重组菌的发酵条件进行了优化，并对粗酶液的酶学性质进行了研究。

重组菌的最佳发酵条件为：摇床转速 170r/min ，接种量 1%，发酵培养基初始 pH 6.0，种龄12h 。

重组菌茁葡聚糖酶的表达与菌体生长呈正相关，发酵 14h 后，菌体生物量最高可达1.71g/L ，茁葡聚糖酶活力最高可达 321.56U/mL 。

所得粗酶液的最适反应温度 60 ℃,pH 6.0，在 70 ℃以下保温20min 后，残余酶活力均在 80%以上。

在pH 5.0～9.0放置48h 后仍能保持均90%以上的残余酶活力。

关键词：茁葡聚糖酶；重组菌 EGs2；发酵条件；酶学性质中图分类号: S182 文献标识码:A 文章编号:10061304(2007)04070805Optimization of Recombinant Fermentation ConditionAffecting 茁glucanase Production and Its Characteristics of Enzyme LI Qingqing 1 ,CHEN Qihe 1 ,JIANG Xiaoyan 1 ,ZHANG Xiuyan 2 ,LI Ting 1 ,HE Guoqing 1**The fermentation conditions of mutant obtained from directed evolution for thermostable 茁glucanase for 茁glucanase production were investigated by orthogonal experiment.Fermentation was conducted in 250mL flask,each containing 30mL of medium contained whey 10g/L,yeast extract 5g/L,NaCl 10g/L,the temperature was 37 ℃.The optima culture conditions were as following:initial pH 6.0,shaking speed 170r/min,inoculation volume 1%and inoculation time 12h. 茁 glucanase production by mutantwas associated with cell growth and biomass. 茁glucanase activity was increased significantly when cells entered growth phase.The bacterium began the stable phase after cultured for 14h with the highest biomass 1.71g/L and 茁glucanase activity 321.56U/mL.When 茁 glucanase was used as a substrate,the optimum temperature and pH were 60 ℃ and 6.0,respectively. After 20min incubation at 40,50,55,60,65and 70 ℃ respectively,the residual activity remained at least 80%.After 48h conserva tion at pH 5.0~9.0,the residual activity remained at least 90%.The enzyme was stable below 70 ℃ and at pH 5.0~9.0.茁glucanase;mutant ;fermentation condition;enzyme characteristic茁1,31,4 葡聚糖酶是重要的工业用酶。

十种常见的酶制剂

十种常见的酶制剂（1）纤维素酶纤维素酶，是由多种水解酶组成的一个复杂酶系，自然界中很多真菌都能分泌纤维素酶。

习惯上，将纤维素酶分成三类：C1酶、Cx酶和β葡糖苷酶。

C1酶是对纤维素最初起作用的酶，破坏纤维素链的结晶结构。

Cx酶是作用于经C1酶活化的纤维素、分解β-1，4-糖苷键的纤维素酶。

β葡糖苷酶可以将纤维二糖、纤维三糖及其他低分子纤维糊精分解为葡萄糖。

自1906年Seilliere在蜗牛的消化液中发现纤维素酶至今已有一百余年了,随着在工业上的广泛应用,特别是在纺织工业、能源工业上的应用,纤维素酶已成为最近十几年酶工程研究的一个焦点。

近年来有关纤维素酶的基础研究,包括酶的氨基酸序列、基因的克隆与表达、酶蛋白的空间结构与功能,以及酶蛋白的基因调控等诸多方面都取得显著进展。

到目前为止,登记在Swiss2Protein数据库的纤维素酶的氨基酸序列有649条,基因序列有433条。

我国对纤维素酶的研究始于上世纪50年代,迄今已有50多年的历史。

在纤维素酶的菌种开发、发酵培养、基因的克隆与表达,以及纤维素酶在纺织、能源等方面的应用都取得较大进展. 进入21世纪,利用纤维素酶转化纤维素物质产生葡萄糖进而发酵获得生物乙醇,可以避免对粮食作物的大量损耗,引起了各国政府和研究机构的重视,这其中的关键是纤维素酶的成本问题。

由于纤维素酶发酵活力较低,因此其应用成本也较高。

同时纤维素酶相比其他糖苷水解酶类,比活力至少要低1～2个数量级,如滤纸酶的比活力为1IU/mg左右,CMC的比活力约为10IU/mg[7],从而造成酶的作用效率较低。

这是两个限制纤维素酶应用的瓶颈问题,也是纤维素酶研究的热点与难点。

目前通过传统的菌种诱变和基因工程技术可以较大幅度地提高目的蛋白的表达量,从而提高酶的发酵水平.还可以通过改善发酵条件和工艺,如采用固体发酵来大幅度降低发酵成本。

但是提高酶降解天然纤维素的效率则需要,深入研究纤维素酶的结构与功能以及作用方式,进而对其进行有效改造;或者通过筛选新的产酶菌种,发现具有开发潜力的新酶源.（2）脂肪酶脂肪酶即三酰基甘油酰基水解酶，它催化天然底物油脂水解，生成脂肪酸、甘油和甘油单酯或二酯。

著名科学家对β-葡聚糖的评价

著名科学家对β-葡聚糖的评价众所周知，舞茸D-fraction（舞茸地复仙）是舞茸中含有以β-(1-6)结合为主链β-(1-3)结合为侧链的葡聚糖和以β-(1-3)结合为主链β-(1-6)结合为侧链的葡聚糖。

那么，今天我们来看看世界著名的科学家对β-葡聚糖的评价。

“β-1,3/1,6-D-葡聚糖是巨噬细胞强有力的激活剂，有助于治疗细菌、病毒和真菌引起的疾病。

”------William Browder，医学博士，Tulane大学医学院外科与生理学系“可以推想一组由巨噬细胞调节因子引起的级联相互作用和反应的发生，其结果是使经过葡聚糖作用的宿主，产生级联防御反应。

”------Joyce K. Czop 哲学博士，哈佛医科大学风湿与免疫系“β-1,3/1,6-D-葡聚糖显示了它显著提高巨噬细胞的功能，并能增加宿主对各种细菌、病毒、真菌及寄生虫感染的非特异性抵抗力。

”------M.L.Patchen，哲学博士，陆军辐射研究所血液学与放射学实验室“由于舞茸D-fraction在小鼠实验中使乳腺肿瘤明显萎缩，现在临床试验中用于女性乳腺癌患者的治疗。

最初取得理想结果的研究部署随机对照试验。

就是这次研究显示，在15个同时采用标准化化疗加舞茸D-fraction的乳腺癌患者中，有11个出现症状明显改善和（或）肿瘤明显萎缩。

”------Susan.Love，医学博士“在一项前瞻随机双盲的研究中……在手术期间服用β-葡聚糖……能增加白细胞对微生物的杀灭活性，并减少患者在主要手术过程中感染并发症的概率……初步的结果是肯定的，这应该说是个好消息。

”------J.A.Norton ，外科教授，华盛顿大学医学院内分泌与肿瘤外科主任“某些临床实验报告，应用β-葡聚糖这一免疫激活剂提高患者的存活率。

”摘自Seljelid.R.A Water-soluble aminated betal-3-D-glucan derivative causes regression of solid tumors in mice .Biosci Rep,1986；6（9）：845-851“当肿瘤生长第7天，通过静脉注射或腹膜注射水溶性的胺化β-1,3-D-葡聚糖（AG），实验结果显示肿瘤完全消退”摘自Todd.R.F. The continuing saga of complement receptor type 3(CR3).J Clin Invest,1996;98:1-2“可溶性葡聚糖、一种β-1,3结合的吡喃型葡聚糖、生物免疫调节物，在实验中对肿瘤形成和感染性疾病以及免疫抑制有治疗效果。

酶法测定大麦提取物β-葡聚糖含量研究

ｅｚｍｅ５ｍＬ）ｒ０ｎｔｅｒｉｔ０ｍＬ，ｍＬ３Ｇｕｏｉａｅ２Ｕ／ｗｅｅａｄｄｉｎｙ（０Ｕ／ｆ；ｈｎｅｌｅ３ｏ６ｍｉｗｅｄｕｄ０ｌ－ｌｃｓｓ（ｍＬ）ｒｅｄｄｎ
０５ｍＬｈｄｏｙａｅｇｕｏｅｏｔｎｆｙｒｌａｅｒｍａｄｒ — ｌｃｄｓｍｐｅｓｅｅｍｉｅ．ｙｒｌｔ，ｌｃｓｎｅｔｄｏｙｔｆｓｃｏｈｓｏｓｎａｄＢｇｕａａｔｎｎａｌｗａｔｒｎｄｄ
维普资讯
ｌ２
粮食与油脂
２０年第５０６期
酶法测定大麦提取物ｐ一葡聚糖含量研究
连喜军１鲁晓翔１保松品科学学院，津１天天
２上海交通大学农业与生物学院，海．上
ｐｅｏ — ｕｐｕｒｃａｉｔｏｓｍａｎｌｅｎｏｏｎｔｗｉｉｏｏｃｕａｙ．ｈｎｌｓｌｈｉｃｄｍｅｈｄｗａｉｙｕｓｄｉｕｒｃｕｒｙｔｔｐｒａｃｃＴｈｅｄｅｅｉａｉｈｓｒｔｒｎｔｍｏｎｍｅｈｏｐｐｉａｅｔｕｏｎｒｗａｓａｌｓｅｔｂｓｆｅｚｍｅｍｅｈｄｗｉｈｎｅｏｆＬｉｈｎａｅｂｔｄａｌｃｂｌｏＯｃｕｔｙｓｅｔｂｉｈｄａａｅｏｎｙｔｏｔｃａｇｃｅｓｙｒｈ
３０３；０１４
２１０）０１１
摘要：目前国际认可Ｂ一葡聚糖含量测定方法是酶法，法测定成本高，国目前多采用苯酚一此我

粘性多糖及多糖酶的研究进展

粘性多糖及多糖酶的研究进展饲料中粘性多糖主要以阿拉伯木聚糖和β－葡聚糖为主，它们是麦类谷物及糠麸中的主要多糖，会阻碍畜禽的消化吸收，降低饲料利用率，同时给卫生和疾病控制带来困难。

因此，如何充分开发和利用我国资源丰富的麦类谷物及糠，是科研工作者目前需要解决的实际问题。

1 阿拉伯木聚糖和－β葡聚糖的结构阿拉伯木聚糖主要由戊糖（阿拉伯糖和木糖）组成，因此又常称为戊聚糖，由β－（１→4）－右旋－呋喃木糖基主链与一个或多个α－左旋阿拉伯喃前糖基取代而成（Annison 等，1992）。

β－葡聚糖是一类由右旋一葡萄糖以卜构型连接的同聚物，由糖基分子线性连结或葡聚糖直链。

支链连结而成，谷物细胞壁的β－葡聚糖结构简单，是由葡萄糖通过β－（l→3），（1→4）糖音链线性连接而成的聚合物（Fincher and Stone，1996； Pitson 等，1993）。

2 谷物中多糖含量谷物中戊聚糖和β-葡聚糖含量主要受基因型及环境的影响（Austrup，1979；Bourne and Wheeler，1984）。

一般雨量充沛的高湿环境下生长的谷物，多糖含量低于干燥条件下生的谷物。

常规大麦与裸大麦多糖含量也有差异，裸大麦中蜡质淀粉型与非蜡质淀粉型含量不同。

另外，收获时期，加工处也影响谷物多糖含量。

R.J.Henky（1987）分析了17种生长在3个不同区域的大麦，β－葡聚糖含量变化范围为3.4％～5.7％，戊聚糖含量为4.4％～7.8％；小麦中以戊聚糖为主，含量大致为6.6％，而β－葡聚糖为0。

6％（R．J．HenRy，1987）。

大麦、小麦等原料中，粘性多糖主要集中在糊粉层和胚乳中，加工后则主要在其副产品中，因此次粉及鼓皮中粘性多糖含量明显高于整粒谷物。

石永峰（1994）报道，全大麦、面粉、次粉、麸皮中β－葡聚糖分别含量为5.8％、 3.1％、10.0％和8.4％。

3 β一葡聚糖和阿拉伯木聚糖的抗营养特性粘性多糖的抗营养特性主要是由其高粘稠性和持水性引起的（T．Antoniou，1980），这种特性能显著改变消化物的物理特性和肠道的生理活性（G．Annison，1996），从而影响畜禽的生产性能。

日粮中添加β-葡聚糖酶对肉鸡生产性能的影响

加肉
文献标识码：Ｂ
文章编号：０４５９￣０００ — ０５０１０ — ００１）２００ — ２
Ｂ葡聚糖酶属于半纤维素酶类，采用枯草杆菌经过一液体深层发酵制得，一Ｂ葡聚糖酶是一类能降解谷物中Ｂ一
均以“ 均值± 平标准差 ” 表示
表１基础日粮组成及营养水平
此探讨Ｂ葡聚糖酶在肉鸡日粮中的使一
用价值，Ｂ葡聚糖酶的应用推广提供为一数据支持
１材料与方法
Ｂ葡聚糖酶由青岛康地恩生物集团山东六和农牧科一
人工控制光照、温度和湿度。自由采食和
饮水，自然通风。他饲养管理和免疫按其常规肉鸡饲养办法和免疫程序进行。
注：中数字右上角字母有相同字母或没有标注者者表示差异不显著（－．）字母不同表ｅｏ５．￣ｏ
表示差异显著（ ∞５，Ｔｇ￣。）ｅ．ｌ２
中
重提高５６Ｐ００）肉比降低０ｏ（＜．５，生产性能２￣１天期间比１２．％（＜．５，料．８ｐｏｏ）且２４－１天期问的效果更明显。关键词：一聚糖酶；Ｂ葡肉鸡；生产性能
中图分类号：８６７￥１．
添对
２２添加ＫＮ３葡聚糖酶对２～１日龄肉鸡生产性能．Ｄ－２４
的影响
试验期间分别记录ｌ３周龄、￣～４６周龄及１６周龄的￣各阶段增重、料量，在每周末按照５耗并％的比例随机抽样

β-葡聚糖酶

目前， β-葡聚糖酶的应用已经扩展到医药、
纺织、日用化工、食品发酵、废水处理、饲料等各个领域，其应用前景十分广阔。B一葡聚糖酶的研究、开发和利用对于解决工农业原料来源、能源危机、环境污染、动物饲料等问题具有重要意义。
在酿造行业中，大麦是一种普通的碳水化合物添加剂，但是它的使用引起制造过程中的一些问题，特别是麦芽汁粘性的增加，而粘性增加是由树胶状、高分子重量含有1-3，1-4葡萄糖苷键的D-葡萄糖聚合物（β-葡聚糖）引起的。谷物（例如小麦、大麦和黑麦）与动物饲料相结合是动物的主要能量来源。但是，由于非淀粉多糖（NSP）的存在导致动物肠胃黏度增加，从而干扰消化。选择性糖酶如β-葡聚糖酶水解NSP可以释放营养物质（能量和蛋白）以降低肠胃内容物的黏度。整个作用能够提高饲料的利用率。
β-1,3-葡聚糖酶参与了植物的多种生长发育过程，包括细胞分裂、小孢子发生、花粉萌发、育性、韧皮部胼胝质去除、受精、种子萌芽及植物生长调控等过程。20世纪70年代以前，对β-1,3-葡聚糖酶的研究主要集中于它对植物本身不同发育阶段的作用，随着分子生物学技术在植物抗病基因工程中的逐步应用，β-1,3-葡聚糖酶基因的抗病研究取得了快速发展。目前，β-1,3-葡聚糖酶基因在植物抗病基因工程研究中已被认为是最具吸引力的基因之一。
在啤酒生产中采用β-葡聚糖酶，可提高麦汁的过滤速度和得率，从而保证啤酒质量。也可用于饴糖、麦芽糖浆生产和用作饲料添加剂。功能降低麦汁粘度，改善麦汁和啤酒过滤性能，提高麦汁清亮度提高糖化麦芽浸出物量，促进可发酵性产物的提高提高啤酒的胶体稳定性，消除β-葡聚糖引起的冷混浊降解β-葡聚糖，提高纯生啤酒生产过程中滤膜的使用效率，延长膜的使用寿命。

β葡聚糖酶可以水解含有大量大麦、小麦、黑麦等其他谷物的家禽和猪的饲料中的葡聚糖，从而提高饲料利用率，提高营养物的摄取量，提高动物生长能力。该产品可以用于酿造工业以水解影响麦芽汁澄清和啤酒过滤的葡聚糖。较高的热稳定性的微生物β-葡聚糖酶能够使酿造者通过高温和缩短淀粉糖化时间来调节淀粉糖化过程，β-葡聚糖酶也可以添加到发酵罐中或成熟期从而处理影响麦芽汁澄清和啤酒过滤的葡聚糖。

β-葡聚糖酶

植物β－1，3－葡聚糖酶的研究进展β-1,3-葡聚糖酶参与了植物的多种生长发育过程，包括细胞分裂、小孢子发生、花粉萌发、育性、韧皮部胼胝质去除、受精、种子萌芽及植物生长调控等过程。

20世纪70年代以前，对β-1,3-葡聚糖酶的研究主要集中于它对植物本身不同发育阶段的作用，随着分子生物学技术在植物抗病基因工程中的逐步应用，β-1,3-葡聚糖酶基因的抗病研究取得了快速发展。

目前，β-1,3-葡聚糖酶基因在植物抗病基因工程研究中已被认为是最具吸引力的基因之一。

1 β-1,3-葡聚糖酶基本生物学特性和分类已知的β-1,3-葡聚糖酶均属于糖基水解酶第十七家族，其成员具有共同的氨基酸序列结构：(LIVM)一x一(LIVM-FVW)3一(STAG)-E-(ST)-G- W-P-(Srr)-X-G．(Lan等，1998)，β-1,3-葡聚糖酶分为外切酶和内切酶，目前主要研究的是内切酶。

它的分子量为32-37kD，等电点从酸性到碱性。

它的作用底物为以β-1,3-苷键连接起来的多聚糖，以随机作用方式将多聚糖分解成为糊精或寡聚糖。

各种类型的β-1,3-葡聚糖酶已从多种植物中分离出来。

根据其等电点、定位、mRNA表达模式及序列的同源性等特点可将其分为四种不同类型。

I类葡聚糖酶为碱性，主要存在于液泡中，体外具较强抑菌活性。

碱性β-1,3-葡聚糖酶通常具有1个液泡定位的羧基末端多肽(carboxyl terminal polypetide，CTPP)结构，CTPP中往往含有糖基化位点即CTPP切除信号氨基酸结构， CTPP的缺乏使得β-l,3-葡聚糖酶分泌到胞外，因此，CTPP存在与否成为β-1,3-葡聚糖酶分类的重要依据。

现已分离出三种编码I类葡聚糖酶的cDNA，它的前体蛋白含有N一端信号肽及C一端液泡导向肽序列。

在根及老叶中组成型表达．占可溶性蛋白的5％-10％，且主要分布在叶的表皮细胞层中。

受病源菌、乙烯、水杨酸、伤口、UV等因素诱导，但被auxin ／cytokine所抑制，并受发育的调节。

β-葡聚糖酶活性测定

β葡聚糖是由葡萄糖单体通过β，和β，糖苷键连接而成地型葡萄糖聚合物，它主要存在于单子叶禾本科谷实中地糊粉层和胚乳细胞壁中.β葡聚糖酶属于水解酶类，能有效地降解β葡聚糖分子中地β，和β，糖苷键，使之降解为小分子.由于在饲料中，大麦地β葡聚糖含量较高，难以被单胃动物消化利用，而且对饲料中各种养分地消化利用具有明显地干扰和抑制作用，成为麦类饲料中地抗营养因子.在饲料中添加β葡聚糖酶，能有效地消除β葡聚糖地抗营养作用，促进饲料中各种养分地消化和吸收利用，增进畜禽健康.在啤酒生产中，添加β葡聚糖酶可以加快麦汁和啤酒地过滤速度、提高麦汁得率、增加可发酵糖地含量.此外，β葡聚糖酶在造纸工业、日化工业等其它许多方面也有着广泛地应用，对β葡聚糖酶地研究将越来越受到人们地重视.β葡聚糖酶活力地测定方法主要有种：还原糖测定法（分光光度法）、粘度测定法和底物染色法.其中还原糖测定法简便实用，比较准确，而且结果重复性好，是广泛使用地一种酶活测定方法.其原理是：β葡聚糖酶能将β葡聚糖降解成寡糖和单糖，其具有地还原基团在沸水浴条件下可与试剂发生显色反应，显色地深浅与还原糖量成正比，而还原糖地生成量又与反应液中β葡聚糖酶地活力成正比，因此，可以利用比色测定反应液地吸光度值来计算还原糖地生成量，从而得出β葡聚糖酶地活力.但在该测定方法地具体操作中存在一些影响酶活力测定结果地因素，本文即对还原糖法测定β葡聚糖酶活力地几个重要影响因素进行研究，并得出最佳测定条件.材料与方法菌株与培养基发酵产酶菌株黑曲霉（）菌株，由本实验室保藏.固态发酵培养基麸皮、米糠、、微量元素液、蒸馏水，值，℃灭菌.微量元素液地组成为：溶液、、·、、、蒸馏水.发酵培养条件三角瓶装培养基（干料计），接种量为每瓶孢子悬液(×)，发酵温度℃，培养.试剂与溶液β葡聚糖溶液准确称取β葡聚糖()，加入无水乙醇润湿，再加入缓冲液，同时缓慢加热直至β葡聚糖完全溶解，冷却至室温，用缓冲液定容至，底物溶液℃保存，内用完.葡萄糖标准贮备溶液( )称取烘干至恒重地无水葡萄糖，精确至，用水溶解并定容至.葡萄糖标准溶液分别吸取葡萄糖标准贮备溶液、、、、、、于容量瓶中，用水定容至，盖塞，摇匀备用.试剂称取，二硝基水杨酸，置于约水中，逐渐加入氢氧化钠，在℃水浴中(磁力)搅拌溶解，再依次加入酒石酸钾钠、苯酚(重蒸) 和无水亚硫酸钠，待全部溶解并澄清后，冷却至室温，用水定容至，过滤.贮存于棕色试剂瓶中，于暗处放置后使用.粗酶液地制备取固体发酵曲于三角瓶中，加入缓冲液，振荡抽提，过滤离心去除孢子后，℃保存备用.缓冲液乙酸缓冲液、磷酸盐缓冲液、柠檬酸缓冲配制液见叶宝兴主编《生物科学基础实验》（）.标准曲线地制作方法按表规定地量，分别吸取葡萄糖标准溶液、缓冲溶液和试剂于各管中（每管做个平行样），混匀.将标准管同时置于沸水浴中，反应.取出，迅速冷却至室温，用水定容至，盖塞，混匀.在波长处测量吸光度.以葡萄糖量为横坐标，以吸光度为纵坐标，绘制标准曲线，获得线性回归方程.酶活力测定方法取支刻度具塞试管，分别加入β葡聚糖底物溶液（由值乙酸乙酸钠缓冲液配制），置℃水浴中保温.在其中一支试管中加入稀释酶样，混匀，置于℃水浴中准确反应，加入试剂至两支试管中，混匀.在另一支试管(空白管)中加入稀释酶样，同时将两支试管放入℃水浴中反应，取出置于冷水中冷却至室温，加水定容至，盖塞混匀，在处测量酶样对空白地吸光度，计算酶活力.酶活力计算标准曲线：.式中：——吸光度；——葡萄糖量()；——斜率；——截距.式中：——与μ之间地换算系数；——酶液稀释倍数；——葡萄糖分子量；——测定所取酶液量()；——反应时间（）.β葡聚糖酶活力单位定义：在测定条件下，每分钟水解β葡聚糖产生μ还原糖（以葡萄糖计）所需地酶量，定义为一个酶活力单位（）.结果与讨论最佳吸收波长地确定按照上述标准曲线地制作方法，分别测定在不同波长处地吸光度，制作标准曲线，见表、图.在分光比色测定时，波长地选择不仅需要考虑灵敏度，同时还要考虑数据地稳定性和重复性.试验测定了不同波长处地值制作标准曲线.由表、图可以看出，在相同地糖浓度时，随着波长地升高，值呈下降趋势.在波长为时，测得地值最大，灵敏度最高，但数据地稳定性较差;在波长为时，测得数据地稳定性较好，但是灵敏度偏低；在波长为时，测得地数据灵敏度较高，而且稳定性也较好.所以，最佳测定波长确定为.线性回归方程为：，.葡萄糖沸水浴显色反应时间地确定分别以种不同浓度地葡萄糖标准溶液与试剂经沸水浴显色反应发现，沸水浴时间不同对显色反应结果影响较大，如图所示，种糖浓度反应结果相似，均为在～之间，反应速度较快，值增加幅度较大；～之间，反应趋于平缓，值增加缓慢；以后，所测得地值基本保持不变，说明显色反应已经完全，因此，沸水浴显色时间确定为.酶活力测定底物浓度地确定底物浓度是决定酶解反应速度地重要因素.测定β葡聚糖酶活力时底物浓度一般配制在之间，这个浓度范围达到了酶活力测定时底物过量地要求，既可保证酶和底物地充分反应，又可降低底物中小分子低聚糖对测定结果地影响，试验选用底物浓度为.酶活力测定反应时间地确定（见图）不同种类地酶其线性反应时间地范围也不同，在酶地线性反应时间内测定地酶活力较为准确.在相同反应体系下，试验测定了酶解反应从～时产生地还原糖地量.由图可以看出，酶解产生地还原糖在前内线性关系较好，产物生成量与反应时间成正比，在～之间产物生成速率逐渐减慢，以后产物生成量几乎不再增加.因此在～时处于一级反应阶段，产物生成速度一致，是酶活力测定地最佳时间，但反应时间短产物含量低时测定酶活力，会受到粗酶液中其它水解酶作用或底物纯度等因素对酶活力测定带来地干扰，选择产物生成量在以上地时间比较好，因此应选择作为酶活力测定地反应时间.酶活力测定缓冲液种类地确定（见图）缓冲液地种类和值对酶地活性影响较大，同一种酶在不同缓冲液和不同值时测定地活性不同.只有在某种缓冲液和某种值范围内才表现出最大活性.一般认为酶分子处在最适值时，其活性基团地解离状态最易与底物结合，而处在其它值时，改变了活性基团地解离状态，酶和底物结合减弱，活性就降低.由图可知，试验测定了种不同缓冲液体系条件下地酶活，随着值地增大，种缓冲液体系测得地酶反应活性均呈现出先增加后下降地趋势，但乙酸乙酸钠缓冲液体系测得地酶活力明显高于其它两种缓冲液体系.因此，在β葡聚糖酶活力测定时应选用乙酸乙酸钠缓冲液体系.酶活力测定最佳值地确定选择乙酸乙酸钠缓冲液体系，其它反应条件不变，改变缓冲液体系值进行酶活力测定，如图所示，当值为时，测得地值最大，酶活力最高.因此，酶活力测定应在值时进行.酶活力测定反应温度地确定（见图）酶解反应时地温度对酶反应速度影响较大，当其它条件不变时，温度每改变℃，反应速度可相差以上.本文在乙酸乙酸钠缓冲液值时，测定了不同温度条件下酶解反应时地产物生成量，如图所示，随着温度地升高，测得地值呈现先升高后下降地趋势，在温度为℃时，测得地值最大，产物生成量最多，酶活力最高.因此，β葡聚糖酶活力测定应在℃下进行.结论通过以上对还原糖法β葡聚糖酶活力测定条件地研究，可以看出在进行酶活力测定时，测定波长、沸水浴显色时间、底物浓度、酶解反应时间、反应缓冲液种类以及反应值均对酶活力测定有较大影响.经试验确定β葡聚糖酶活力地最佳测定条件为：β葡聚糖底物浓度，值乙酸乙酸钠缓冲体系，酶解反应温度℃，酶解反应时间，沸水浴显色，测定波长.。

纺织用嗜热内切-1,4-β-葡聚糖酶在大肠杆菌中的重组表达、纯化与酶学性质

１．３引物设计
引物由生工生物工程（上海）有限公司合成（见表１ｏ
作者俺介：郑春阳（１９７６一），男，博士，副高级工程师，研究方向：极端工业酶制剂．基金项目：天津市滨海新区科技小巨人成长计划一科技型企业创新发展（科技创业）项目（２０１０－ＢＫ１３００７０），科技型中小企业技术创新基金项目
１．５ｐｈＥＧ— ｓｇｃ的诱导表达
ｐｈＥＧ — ｓｇｃ的表达菌株经ｆｌ３ｐＥＴ２１一ｐｈｌ１７１一ｓｇｃ — ｍｕｔ — ｓｄ转化大肠杆菌ＢＬ２１（ＤＥ３）获得，表达条件为３７℃，
２００ｒ／ｍｉｎ，ＬＢ培养基培养，接种时加入终浓度为１００￣ｇ／ｍＬ的氨苄青霉素，培养至＝０．６，再加人ＩＰＴＧ至终浓度０．１ｍｍｏ］］Ｌ诱导表达３ｈ。中间分别于诱导后１．５ｈ及３ｈ取样。４１６７ｒ／ｍｉｎ离心收集菌体，超声波破碎
杰能科，由于国外知识产权的保护及菌种构建的难度，到ห้องสมุดไป่ตู้目前为止，国内仍没有一家企业能够生产该类产品。而由于织物处理及生物抛光是一个高温处理过程，如能开发出嗜热只有单一内切纤维素酶活性的极端酶制剂，将能更适合用于纺织行业降解天然结晶纤维素过程。因此，本研究通过引物设计对来自于Ｐｙｍｃｏｃｃｕｓｈｏｚｉｋｏｓｈｉｚ￣？已知具有水解结晶纤维素的能力的内切一１，４一Ｂ一葡聚糖酶进行了基因克隆、重组表达、提取纯化等方面的研究，以实现极端耐热酶制剂国产化的目的。

β-葡聚糖酶活力测定

β-葡聚糖酶活力测定方法• 1 原理•β-葡聚糖酶(EC.3.2.1.6)水解1，3（4）-β-D-葡聚糖苷键，放出还原糖基团与3，5-二硝基水杨酸(DNS试剂)发生显色反应，其颜色的深浅与还原糖的含量成正比关系，在540nm测其光的吸收值，查标准曲线（以葡萄糖计），可得到还原糖的量，据此计算β-葡聚糖酶的活力。

• 2 仪器和设备• 2.1 分析天平：精度0.0001g• 2.2 恒温水浴：精度±0.2℃• 2.3 计时表• 2.4 分光光度计• 2.5 沸水浴器• 2.6 振荡混合器• 2.7 pH计: 精度0.01pH单位• 3 试剂和溶液• 3.1 0.1M乙酸－乙酸钠缓冲溶液（pH5.0）•溶液A:量取冰醋酸6ml，定容至1000ml，制成0.1M醋酸溶液。

•溶液B:称取8.2g醋酸钠，溶解定容至1000ml，制成0.1M醋酸钠溶液。

•使用时以A:B =3:7的比例混合，低温冷藏备用。

• 3.2 1%的β—葡聚糖溶液的配制•准确称取0.25gβ—葡聚糖放入100ml锥形瓶中，加2ml无水乙醇摇匀到无可见颗粒。

加20ml无离子水混合15分钟，盖紧塞子在沸水中煮5分钟，放置室温自然冷却，或用自来水流水降温。

将已冷却到室温的底物溶液倾入一只25ml容量瓶中，加入2.5ml1M醋酸缓冲液（pH5.0），并用无离子水定容到25ml。

• 3.3 3,5—二硝基水杨酸（DNS）溶液•溶液A:称分析纯的NaOH 104g溶于1300ml水中,加入30g分析纯3,5－二硝基水杨酸。

•溶液B:称分析纯酒石酸钾钠910g，溶于2500ml水中，再称取25g重蒸苯酚和25g无水亚硫酸钠加入酒石酸钾钠溶液。

•将A、B溶液混合，加入1200ml水，定容5000ml，贮存于棕色瓶中，暗处放置一星期后过滤使用。

• 3.4 0.1%苯甲酸• 0.1g苯甲酸加入大约80ml无离子水中溶解，用无离子水定容至100ml。

江南大学科技成果——耐热、高活性β-葡聚糖酶的构建及生产

江南大学科技成果——耐热、高活性β-葡聚糖酶的构建及生产项目简介β-葡聚糖酶是啤酒工业和饲料工业主要的酶制剂。

目前该酶制剂主要存在的问题是耐热性差和产酶水平不高的问题。

本项目通过基因工程和蛋白质工程手段，从酶分子结构着手，构建耐热、酸性条件下活性高的β-葡聚糖酶。

在不提高酶生产成本的前提下，酶的活性不低于50000U/g，在酸性55-80℃条件下孵育20min，酶活性大于80%。

达到国外同类产品的水平，但价格仅是国外同类产品的三分之一，具有广阔的市场前景。

项目获2009年获国家自然科学基金面上项目资助（30万元），项目编号：30972120；2009年获无锡市科技创业计划项目资助（15万元），项目编号：09132。

创新要点（1）采用基因融合、蛋白质分子改造技术从本质上提高酶分子的耐热性和表达水平；（2）β-葡聚糖酶的耐热性在80℃条件下处理30分钟，酶的残余活性大于90%，酶的活性不低于5000U/g。

效益分析（资金需求总额300万元）本项目可生产高效稳定的β-葡聚糖酶，主要技术性能指标优于国内外同类产品。

按照年产1000吨的β-葡聚糖酶计，每吨酶成本为1万元，销售价按国内同类产品每吨3万元计，年销售额达3000万，毛利润达2000万元，为国家上交税33万。

所以本产品是国内同类产品的升级换代产品，有较大的市场竞争优势和利润空间。

按照β-葡聚糖酶在饲料中0.1%的添加量计算，1000吨β-葡聚糖可添加到100万吨饲料中，按100%大麦、小麦替代玉米，可节约60万吨玉米；按大麦、小麦与玉米的平均差价每吨200元计，每吨饲料成本可降低120元，1000万吨饲料可节约成本12亿元。

所以本产品有明显的市场优势，为缓解我省玉米供需矛盾，开发大麦饲料资源、降低饲料成本，提升肉产品等级、扩大猪肉出口，促进饲料和养殖业健康发展具有重要意义。

推广情况本项目已规模试产，产品受到用户好评。

授权专利β-葡聚糖酶活性测定试剂盒，200910052355.4；饲料用β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因工程菌及其构建，200910031553.2。

β-葡聚糖的抗营养作用及其酶的作用机理

β-葡聚糖的抗营养作用及其酶的作用机理一β-葡聚糖的抗营养作用麦类（小麦、大麦、燕麦等）及其副产品中存在一种β-葡聚糖的抗营养因子，导致营养物质消化利用率下降，β-葡聚糖属于植物细胞壁中的结构性非淀粉多糖，一般分为水溶性（占大多数）和非水溶性两种。

大量的研究结果表明，β-葡聚糖的抗营养作用及其降低日粮养分消化吸收的机制作有以下几点：1葡聚糖的粘性，引起其围绕于淀粉和蛋白的周围，防碍养分（糖、氨基酸等）向肠粘膜的移动及同消化酶的接触，导致消化速度的减慢和营养物从日粮中溶出的速度，进而影响养分的吸收。

2葡聚糖的高亲水性使其与肠粘膜表面的多糖蛋白复合物相互作用，导致粘膜表面水层厚度（限制养分的吸收）的增加，从而降低养分的吸收。

3葡聚糖与消化酶、胆盐结合，可降低消化酶的活性，阻止消化酶与底物反应，并使胆酸呈束缚状态，导致胆固醇及其前体吸收减少，同时也影响脂类吸收微团的形成。

4降低食糜通过消化道速度及肠道菌群的移动，为细菌和生长繁殖提供稳定的环境，从而改变肠道菌群的数量，进而影响养分的吸收。

5经后肠发酵产生短链脂肪酸，改变了胆盐肠肝循环，从而抑制胆固醇的生物合成。

6此外，肠内细菌增多会刺激肠道，增厚肠道粘膜层，损害微绒毛，进而减少养分的吸收。

二β-葡聚糖酶的作用机理在饲料中添加β-葡聚糖酶来消除β-葡聚糖的抗营养作用是目前使用的最普遍的有效方法。

1降低消化道内容物粘度β-葡聚糖酶的促生长的关键作用在于其可以裂解β-葡聚糖分子中的β-1,3（β-1,4）糖苷键，使其失去粘性和亲水性，降低肠道的粘度，有利于消化酶和营养物质接触，提高营养物质的消化吸收。

2破坏细胞壁结构β-葡聚糖是植物性饲料（特别是麦类饲料）细胞壁的成分，β-葡聚糖酶可以打破细胞壁使其营养物质释放，从而被有效地消化利用。

3提高内源酶活性有研究表明，加β-葡聚糖酶能显著提高肉鸡肠道内容物中胰蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶活性。

王振来（1997）报道，在仔猪日粮中添加以β-葡聚糖酶为主的酶制剂，提高了肠内容物中总蛋白水解酶、淀粉酶和脂肪酶的活力。

内切酶外切酶β葡聚糖酶作用

内切酶外切酶β葡聚糖酶作用《内切酶、外切酶、β葡聚糖酶的神奇作用》嘿，朋友们！今天咱来聊聊那些听起来有点陌生，但却超级厉害的内切酶、外切酶和β葡聚糖酶！你可别小瞧了它们，它们就像是微观世界里的小魔法师，在各种生物过程中施展着神奇的魔法呢！先来说说内切酶吧！这玩意儿就像是一把精准的小剪刀，能在特定的位置剪开 DNA 分子。

哎呀呀，你能想象吗？那么复杂的 DNA 长链，它就能准确地找到地方下剪子，这得多厉害呀！这就好比是在一个巨大的拼图中，一下子就找到了关键的那一块，然后咔嚓一下给剪开了。

没有内切酶，很多基因工程的操作根本就没法进行呀！它不就是生物界的神奇小助手嘛！再讲讲外切酶，它呀，就像是一个细心的清洁工。

它能从 DNA 分子的末端开始，一点一点地把多余的部分切掉。

这就好像我们打扫房间，把那些不需要的杂物一点点清理掉，让一切都变得整洁有序。

如果没有外切酶帮忙清理，那 DNA 分子不就变得乱七八糟啦？然后就是β葡聚糖酶啦！这可是在很多领域都大显身手的角色呢！在食品工业中，它能帮助我们处理谷物，让食物变得更加美味和容易消化。

你说神奇不神奇？就好像是一个厨艺高超的大师，能把普通的食材变得格外诱人。

而且在一些生物研究中，β葡聚糖酶也是不可或缺的呀！你想想看，如果没有这些酶的存在，我们的生活将会变成什么样呢？很多疾病可能无法得到有效的治疗，我们吃的食物也许就没有现在这么丰富多样了。

它们虽然小小的，却有着大大的能量！这些内切酶、外切酶和β葡聚糖酶，不就是大自然赋予我们的奇妙礼物吗？它们默默地工作着，为我们的生活带来了那么多的改变和惊喜。

我们难道不应该对它们充满敬意和好奇吗？它们的作用真的是太重要啦！我们真的要好好珍惜和利用它们呀！这就是我对它们的看法，你们呢？是不是也和我一样觉得它们超级厉害呀！。

β-葡聚糖酶的作用

β-葡聚糖酶的作用
β-葡聚糖酶在许多领域都有重要作用。

在啤酒生产中，β-葡聚糖酶可以水解β-葡聚糖，从而提高麦汁的过滤速度和得率，进而保证啤酒质量。

此外，β-葡聚糖酶还被广泛应用于饴糖、麦芽糖浆的生产和作为饲料添加剂。

在健康领域，β-葡聚糖酶被发现可以促进关节健康，如减少关节内部炎症和疼痛，改善关节健康和活动能力。

此外，β-葡聚糖酶还可以改善免疫系统，促进免疫细胞的增长和分裂，提高身体自身的免疫力，并缓解过敏反应。

在食品领域，β-葡聚糖酶被广泛应用于面包制作中，可以改善面包的体积和纹理，并提高面包的保质期。

请注意，虽然β-葡聚糖酶在以上领域都有重要作用，但是具体的应用效果可能会根据不同的物质和条件有所不同。

如果您需要更详细的信息或者特定应用的效果，建议咨询专业的领域专家或者参考相关的科学文献。

葡聚糖内-1,3-β-葡糖酶

葡聚糖内-1,3-β-葡糖酶葡聚糖是一种多糖，由许多β-葡萄糖分子组合而成。

这种多糖在自然界广泛分布，包括植物、真菌、细菌和动物中。

葡聚糖在这些生物中具有多种重要功能，如提供结构支持、膜层保护、细胞间信号传递和免疫应答等。

葡聚糖内-1,3-β-葡糖酶（PG）是一种能够降解葡聚糖的酶类。

它可以催化葡聚糖的水解反应，将其分解成低聚糖和单糖。

目前，许多真菌中的PG已被分离和鉴定，其中以酵母菌的PG最为广泛研究。

PG对于细胞生长和分化、细胞壁合成和重组、藻类和真菌的招募、植物抵御病原菌的作用等有重要影响。

PG的生物学功能也被广泛研究和应用于医药和农业领域。

近年来，PG的研究是一个非常热门的课题。

研究人员通过分子生物学和基因工程技术得到了大量的PG基因序列。

同时，PG的表达也受到广泛关注，特别是在微生物发酵、细胞壁结构和医药领域。

在微生物发酵中，PG可以通过控制其基因表达来产生大量低聚糖和单糖。

这些产物对某些工业生产和食品添加剂有广泛的应用，比如说肉制品和面包。

在真菌和植物内，PG对于细胞壁合成和重组起着重要作用。

在细胞壁合成中，PG可以加速和协调细胞壁的合成。

在细胞壁重组中，PG的表达可以加快细胞壁的降解和合成，使细胞获得更好的结构和保护。

在医药领域，PG被广泛研究，用于治疗某些疾病。

例如，PG可以作为免疫调节剂，增强宿主对病原菌的抵御能力。

它也可以用作抗肿瘤药物，破坏肿瘤细胞壁，促进细胞凋亡。

总之，PG在生物界中是起着重要作用的酶类。

它拥有丰富的生物学功能和广泛的应用价值。

我们期待在未来的研究中能够更深入地了解PG的作用机制，扩大它的应用范围，并进一步应用于医药和农业领域。

三种多糖最初水解产物是二糖,最终水解产物是单糖.

三种多糖最初水解产物是二糖,最终水解产物是单糖.《三种多糖的水解产物探究：从二糖到单糖的转变》一、引言在生物化学中，多糖是由许多单糖分子通过糖苷键连接而成的大分子化合物。

其中，淀粉、葡聚糖和纤维素是三种非常重要的多糖。

在生物体内，这些多糖会被水解酶分解成二糖和最终的单糖，为生物提供能量和其他重要的营养物质。

本文将对三种多糖的水解过程进行深入探讨，探寻其水解产物的转变过程。

二、淀粉的水解过程1. 淀粉的结构和功能淀粉是植物细胞中的主要储能多糖，其分子由α-葡聚糖单元组成。

淀粉在生物体内起着储存能量的重要作用。

2. 水解酶对淀粉的作用β-淀粉酶和α-淀粉酶是淀粉水解的关键酶，它们可以将淀粉分解成麦芽糖和葡萄糖。

3. 淀粉的水解产物转变初步水解产物是麦芽糖，最终水解产物是葡萄糖。

三、葡聚糖的水解过程1. 葡聚糖的结构和功能葡聚糖是真菌和海藻细胞壁的主要组成部分，它也是一种重要的多糖。

2. 水解酶对葡聚糖的作用β-葡聚糖酶和α-葡聚糖酶是葡聚糖水解的关键酶，它们可以将葡聚糖分解成半乳糖和葡萄糖。

3. 葡聚糖的水解产物转变初步水解产物是半乳糖，最终水解产物是葡萄糖。

四、纤维素的水解过程1. 纤维素的结构和功能纤维素是植物细胞壁的主要组成部分，它是一种结构多糖，并提供了植物细胞的机械支撑。

2. 水解酶对纤维素的作用β-葡聚糖酶和纤维素酶是纤维素水解的关键酶，它们可以将纤维素分解成葡萄糖单糖。

3. 纤维素的水解产物转变初步水解产物和最终水解产物都是葡萄糖。

五、总结与展望通过对淀粉、葡聚糖和纤维素的水解过程进行全面探讨，我们可以清晰地看到三种多糖的水解产物由二糖转变为单糖的过程。

这一过程不仅提供了生物体所需的能量和营养物质，也为生物体的生长和发育提供了重要的基础。

在未来的研究中，我们可以进一步探索多糖的水解机制，为生物化学和生物技术领域的发展贡献新的思路和方法。

个人观点与理解：对于多糖水解过程，我深信深度和广度兼具的探讨是非常重要的。

德国AB酶制剂

德国AB酶制剂德国AB酶制剂公司是国内最主要的高浓度单酶（木聚糖酶、植酸酶等），其符合美产品也被广大用户所使用。

[产品规格]艾克拿斯酶是一种用Trichoderma reesei生产的酶制剂，主要活性是木聚糖酶，同时还含有B-葡聚糖酶、纤维素酶、蛋白酶和糖化酶活性。

艾克拿斯酶分为两类产品：固体艾克拿斯（ECONASE P）为黄褐色的粉状产品；液体艾克拿斯（ECONASE L）呈深褐色，易溶于水。

产品规格见表1：表1：艾克拿斯酶产品规格用进行测定的。

艾克拿斯酶可用于所有的畜禽日粮，对于小麦日粮（小麦用量可达70%以上）、杂粕日粮效果尤佳。

该酶可通过有效分解动物日粮中的木聚糖及其他纤维（参见表2），消除其抗营养性，维持动物的正常生产水平。

使日粮配方具有灵活性，并显著降低配方成本；降低日粮食糜粘度，提高消化水平，一般日粮可提高能量水平2-3%；提高动物生产水平，降低料肉比；降低排便量。

表2：常见饲料原料中非淀粉多糖的种类及含量（%）艾克拿斯酶可分解植物细胞壁艾克拿斯酶可加速各类植物性饲料细胞壁破裂，是细胞壁包裹的各种营养物质充份释放出来，与畜禽肠道内源消化酶充分接触，提高各种饲料养分的消化率。

固体艾克拿斯酶对动物生产性能的影响小麦用量达63-64%的肉鸡日粮添加不同水平的固体艾克拿斯酶可下户提高饲料转化率（见图3），0-21日龄阶段平均饲料转化率提高达3.7-6.0%，全期（0-24日龄阶段）平均饲料转化率提高达1.8-3.8%（Chris Belyavin Ltd, the UK, 1995）。

FCR 改善率（%）图3：艾克拿斯酶对饲料转化率的影响76 5 4 3 2 1 0 0 5 10 15 30 50 添加量（克/吨）艾克拿斯酶的添加方式添加水平固体艾克拿斯酶具有良好的流动性和混合均固体艾克拿斯酶：小匀性，按1：10的比例稀释后添加到预混料中；按麦日粮（小麦用量大 1：10的比例进行两级稀释后添加到全价料或浓缩于15%）每吨饲料添料中。

百科名片：纤维素酶

纤维素酶科技名词定义中文名称：纤维素酶英文名称：cellulase定义：编号：EC 3.2.1.4。

由多种水解酶组成的一个复杂酶系，自然界中很多真菌都能分泌纤维素酶。

习惯上，将纤维素酶分成三类：C1酶、Cx酶和β-葡糖苷酶。

C1酶是对纤维素最初起作用的酶，破坏纤维素链的结晶结构。

Cx酶是作用于经C1酶活化的纤维素、分解β-1，4-糖苷键的纤维素酶。

β-葡糖苷酶可以将纤维二糖、纤维三糖及其他低分子纤维糊精分解为葡萄糖。

所属学科：生物化学与分子生物学（一级学科）；酶（二级学科）百科名片纤维素酶是一种重要的酶产品，是一种复合酶，主要由外切β-葡聚糖酶、内切β-葡聚糖酶和β-葡萄糖苷酶等组成，还有很高活力的木聚糖酶活力。

由于纤维素酶在饲料、酒精、纺织和食品等领域具有巨大的市场潜力，已被国内外业内人士看好，将是继糖化酶、淀粉酶和蛋白酶之后的第四大工业酶种，甚至在中国完全有可能成为第一大酶种，因此纤维素酶是酶制剂工业中的一个新的增长点。

一、真菌纤维素酶的种类1.纤维素酶的组成与功能纤维素酶根据其催化反应功能的不同可分为内切葡聚糖酶（1,4-β-D-glucan glucanohydrolase或endo-1,4-β-D-glucanase，EC3.2.1.4），来自真菌的简称EG,来自细菌的简称Cen、外切葡聚糖酶（1,4-β-D-glucan cellobilhydrolase或exo-1,4-β-D-glucannase，EC.3.2.1.91），来自真菌的简称CBH，来自细菌的简称Cex）和β-葡聚糖苷酶（β-1,4- glucosidase，EC.3.2.1.21）简称BG。

内切葡聚糖酶随机切割纤维素多糖链内部的无定型区,产生不同长度的寡糖和新链的末端。

外切葡聚糖酶作用于这些还原性和非还原性的纤维素多糖链的末端,释放葡萄糖或纤维二糖。

β-葡萄糖苷酶水解纤维二糖产生两分子的葡萄糖。

真菌纤维素酶产量高、活性大，在畜牧业和饲料工作中主要应用真菌来源的纤维素酶。