台盼兰染色肿瘤细胞化学药物敏感实验的临床应用价值
台盼蓝染色实验原理和步骤
台盼蓝染色实验原理
台盼蓝(Ｔrypan Blｕe) 就是细胞活性染料,常用于检测细胞膜的完整性,还常用于检测细胞就是否存活。
活细胞不会被染成蓝色,而死细胞会被染成淡蓝色。
分子式:C34H24N6O１４S４Na4,分子量: 960、82,可溶于水(10mg/ml)。
实验原理:正常的活细胞,胞膜结构完整,能够排斥台盼蓝,使之不能够进入胞内;而丧失活性或细胞膜不完整的细胞,胞膜的通透性增加,可被台盼蓝染成蓝色。
通常认为细胞膜完整性丧失,即可认为细胞已经死亡。
因此,借助台盼蓝染色可以非常简便、快速地区分活细胞与死细胞。
台盼蓝就是组织与细胞培养中最常用的死细胞鉴定染色方法之一。
注意凋亡小体也有台盼蓝拒染现象。
台盼蓝染色后,通过显微镜下直接计数或显微镜下拍照后计数,就可以对细胞存活率进行比较精确的定量。
台盼蓝染色只需3-5分钟即可完成,并且操作非常简单。
实验步骤:
1、配制4％台盼蓝母液:称取4ｇ台盼蓝,加少量蒸馏水研磨,加双蒸水至１０0ml,用滤纸过滤,4℃保存。
使用时用PＢS稀释至0、
4 %。
２、胰酶消化贴壁细胞,制备单细胞悬液,并作适当稀释。
3、染色:细胞悬液与０、4％台盼蓝溶液以9:1混合混匀。
(终浓度0、04%)
4、计数:在3分钟内,分别计数活细胞与死细胞。
5、镜下观察,死细胞被染成明显的蓝色,而活细胞拒染呈无色透明状。
6、统计细胞活力:活细胞率(%)= 活细胞总数/(活细胞总数+死细胞总数)×100%
注意:
1、保存条件:室温保存。
２、有潜在致癌危险,实验时穿实验服并戴一次性手套与口罩操作。
台盼蓝染色实验原理和顺序
台盼蓝染色实验原理和顺序一、原理：台盼蓝（Trypan Blue）是一种生物染色剂，能与细胞核酸结合，使染色细胞呈现出蓝色。
它在生物学实验中被广泛应用于细胞计数、活死细胞鉴定和细胞凋亡检测等方面。
台盼蓝染色实验的原理是：台盼蓝能穿透细胞膜和胞吞体膜，进入胞内与细胞的核酸结合，使细胞呈现出蓝色。
对于活细胞而言，由于细胞膜的完整性，台盼蓝无法穿透细胞膜，因此保持细胞的透明度。
而对于死细胞而言，细胞膜已破损，台盼蓝可以进入细胞内与核酸结合，导致细胞呈现出蓝色。
通过台盼蓝染色可以直观地区分出活细胞和死细胞。
二、顺序：1.收集细胞：将待染色的细胞收集到离心管中，可以是细胞培养物、悬液中的细胞或组织样本。
2.离心：将离心管放入离心机，以适当的离心速度离心，使细胞沉淀在离心管底部。
3.丢弃上清液：将上清液倒掉，留下细胞沉淀。
4.加入台盼蓝溶液：加入适量的台盼蓝溶液（通常浓度为0.4%），使其覆盖细胞沉淀。
5.培养：将离心管放入孵化箱或培养箱中，使细胞与台盼蓝溶液接触，并保持一定的温度和湿度条件下培养。
6.等待染色：根据实验需要，可以选择不同的染色时间，通常为5-15分钟。
7.停止染色：在所选择的染色时间结束后，取出离心管，加入一定量的细胞培养基或缓冲液，停止台盼蓝的作用。
8.离心洗涤：将细胞沉淀洗涤2-3次，去除细胞外的台盼蓝。
9.准备载玻片：在载玻片上涂一层细胞培养基或缓冲液，并将细胞沉淀悬浮于上述液体中。
10.制备覆盖片：取一块覆盖玻片，用镊子夹持，并将玻片的一角轻轻接触到液体表面，由一端缓慢地将玻片放置于载玻片上，使两者尽量平行，避免产生气泡。
11.固定载玻片：将载玻片倒置在平板上，待其干燥。
12.定焦观察：将载玻片放置在显微镜载玻片夹上，利用显微镜观察细胞的染色情况。
通过以上步骤，我们可以成功地进行台盼蓝染色实验，观察细胞的活死情况，并进行细胞计数、活死细胞鉴定等相关研究。
台盼蓝染色细胞存活率检测试剂盒说明书
台盼蓝染色细胞存活率检测试剂盒产品编号 产品名称包装 C0011台盼蓝染色细胞存活率检测试剂盒100次产品简介：碧云天生产的台盼蓝染色细胞存活率检测试剂盒(Trypan Blue Staining Cell Viability Assay Kit ），是利用正常的健康细胞能够排斥台盼蓝，而丧失细胞膜完整性的细胞可以被台盼蓝染色研制而成。
严格来说，台盼蓝染色检测的是细胞膜的完整性，通常认为细胞膜丧失完整性，即可认为细胞已经死亡。
台盼蓝染色后，通过显微镜下直接计数或显微镜下拍照后计数，就可以对细胞存活率进行比较精确的定量。
台盼蓝染色后的HeLa 细胞请参考图1。
图1. 细胞台盼蓝染色效果图。
胰酶消化下来的HeLa 细胞，1000g 离心1分钟，弃上清，用适量细胞重悬液重悬后，用等体积台盼蓝染色液(2X)染色。
箭头所示为台盼蓝染色的死亡细胞。
注：本HeLa 细胞经过一定的细胞坏死诱导处理。
台盼蓝染色只需3-5分钟即可完成，并且操作非常简单。
本试剂盒足够检测100个细胞样品。
包装清单：产品编号 产品名称 包装 C0011-1 台盼蓝染色液(2X) 10ml C0011-2细胞重悬液 100ml —说明书1份保存条件：4ºC 保存，一年有效。
注意事项：本试剂盒提供的两种溶液都是无菌的，使用时最好在超净台内进行，避免细菌污染。
本产品长时间存放可能会出现少量颗粒状沉淀，可在37ºC 水浴约10分钟以充分溶解沉淀。
沉淀完全溶解后即可正常使用。
台盼蓝对人体有毒，操作时请特别小心，并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明：1. 收集细胞：对于贴壁细胞先用胰酶和/或EDTA 消化下细胞。
对于悬浮细胞，则可以直接收集细胞。
把收集的细胞在1000-2000g 离心1分钟，弃上清，用1毫升或根据细胞的量用适当细胞重悬液重新悬起细胞。
用台盼蓝染色法对C96—3菌丝发酵液体对外抗肿瘤作用的探索
１２ 实验 方 法 取 各 种 瘤 细 胞 系 生 长 繁 殖 最 佳 期 ．
ｌ ｅｉａ ｉ ｅ … １ｉ ห้องสมุดไป่ตู้ｈ ｔ Ｆ ｔｒ ｌ １ｄ ｌ ｔ ｏｗ ｅ ｄ ｒ ｃ ｔ ｏ ｃｆ ｏ ｉ ｅ ｎ ｕ ０ｒｃ ］ｓ ｄ ［ｅ ｔｃｉｏｔ ｘｉｉｖ ｔ ｆｖ ｋｌｄｓ ｏｆｔ ｍ ｅ ｌ
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的 细 胞 ， ＲＰ ４ 用 ＭＩ １ ０全 培 养 基 配 制 成 ５× １ ｍｌ ６ ０／ 的细胞 悬 液备用 。取 ２ ４孔 无 菌 细 胞 培 养 板 ５块 ． 每 块 加 入 一种 瘤 细 胞 ， 孔 ｌｍｌ 标 记 。每 块 板 取 ｌ 每 并 ２
台盼蓝染色实验原理和步骤
台盼蓝染色实验原理和步骤LEKIBM standardization office【IBM5AB- LEKIBMK08- LEKIBM2C】台盼蓝染色实验原理台盼蓝（Trypan Blue) 是细胞活性染料，常用于检测细胞膜的完整性，还常用于检测细胞是否存活。
活细胞不会被染成蓝色，而死细胞会被染成淡蓝色。
分子式：C34H24N6O14S4Na4，分子量: ，可溶于水（10mg/ml)。
实验原理：正常的活细胞，胞膜结构完整，能够排斥台盼蓝，使之不能够进入胞内；而丧失活性或细胞膜不完整的细胞，胞膜的通透性增加，可被台盼蓝染成蓝色。
通常认为细胞膜完整性丧失，即可认为细胞已经死亡。
因此，借助台盼蓝染色可以非常简便、快速地区分活细胞和。
台盼蓝是组织和中最常用的死细胞鉴定染色方法之一。
注意也有台盼蓝拒染现象。
台盼蓝染色后，通过显微镜下或显微镜下拍照后计数，就可以对细胞进行比较精确的定量。
台盼蓝染色只需3-5分钟即可完成，并且操作非常简单。
实验步骤：1、配制4%台盼蓝：称取4g台盼蓝，加少量蒸馏水研磨，加至100ml，用滤纸过滤，4℃保存。
使用时用PBS稀释至 %。
2、胰酶消化贴壁细胞，制备单细胞悬液，并作适当稀释。
3、染色：细胞悬液与%台盼蓝溶液以9:1混合混匀。
（终浓度%）4、计数：在3分钟内，分别计数活细胞和死细胞。
5、镜下观察，死细胞被染成明显的蓝色，而拒染呈无色透明状。
6、统计细胞活力：活细胞率（%）= 活细胞总数/（活细胞总数+死细胞总数）×100%注意：1.保存条件：室温保存。
2.有潜在致癌危险，实验时穿实验服并戴一次性手套和口罩操作。
台盼蓝染色鉴别死活细胞的原理
台盼蓝染色鉴别死活细胞的原理台盼蓝染色鉴别死活细胞的原理通常认为细胞膜丧失完整性，细胞即可被认为已经死亡。
台盼蓝(Trypan Blue)是检测细胞膜完整性最常用的生物染色试剂。
健康的正常细胞能够排斥台盼蓝，而死亡的细胞，膜的完整性丧失，通透性增加，细胞可被台盼蓝染成蓝色。
依据此原理，细胞经台盼蓝染色后，可通过显微镜，直接镜下计数或拍照后计数，实现对细胞存活率比较精确的定量分析。
染色原理:正常的活细胞，胞膜结构完整，能够排斥台盼蓝，使之不能够进入胞内；而丧失活性或细胞膜不完整的细胞，胞膜的通透性增加，可被台盼蓝染成蓝色。
通常认为细胞膜完整性丧失，即可认为细胞已经死亡。
因此，借助台盼蓝染色可以非常简便、快速地区分活细胞和死细胞。
台盼蓝拒染法台盼蓝拒染法是利用台盼蓝只能将死细胞染成蓝色而活细胞不能被染上的方法检测细胞存活率的一种快速简便的方法。
染色原理:正常细胞具有完整的细胞膜结构，而死亡的细胞其细胞膜结构被破坏。
台盼蓝无法通过正常的细胞膜因而正常的细胞不被台盼蓝染上，而死细胞则可被台盼蓝染成蓝色。
流程:（1）将对数生长期的细胞浓度调整为1~10×10细胞/ml，按10~10个细胞接种于96孔板，每孔100 μl；（2）培养细胞24小时后，对其进行不同处理，每个处理设三个平行对照；（3）收集细胞，经台盼蓝染色，在倒置显微镜下计数蓝染及不染色细胞，计算细胞存活率；（4）结果统计：镜下观察，死细胞被染成淡蓝色，而活细胞拒染。
根据下式求细胞活力：活细胞率（%）= 活细胞总数/（活细胞总数+死细胞总数）×100注意事项:台盼蓝染细胞时，时间不宜过长。
否则，部分活细胞也会着色，会干扰计数。
科研试剂，广泛应用于分子生物学，药理学等科研方面，严禁用于人体。
本品为生物染色剂，在细胞毒性试验中用于检测死亡细胞和垂死细胞，也可用于细胞活性的常规评估。
如病毒检验，注入循环系统可使肾小管着色，哺乳动物、低等脊椎动物和昆虫的各种组织活体染色。
台盼蓝染色实验原理和步骤
台盼蓝染色实验原理和步骤LG GROUP system office room 【LGA16H-LGYY-LGUA8Q8-LGA162】台盼蓝染色实验原理台盼蓝（Trypan Blue) 是细胞活性染料，常用于检测细胞膜的完整性，还常用于检测细胞是否存活。
活细胞不会被染成蓝色，而死细胞会被染成淡蓝色。
分子式：C34H24N6O14S4Na4，分子量: ，可溶于水（10mg/ml)。
实验原理：正常的活细胞，胞膜结构完整，能够排斥台盼蓝，使之不能够进入胞内；而丧失活性或细胞膜不完整的细胞，胞膜的通透性增加，可被台盼蓝染成蓝色。
通常认为细胞膜完整性丧失，即可认为细胞已经死亡。
因此，借助台盼蓝染色可以非常简便、快速地区分活细胞和死细胞。
台盼蓝是组织和细胞培养中最常用的死细胞鉴定染色方法之一。
注意凋亡小体也有台盼蓝拒染现象。
台盼蓝染色后，通过显微镜下直接计数或显微镜下拍照后计数，就可以对细胞存活率进行比较精确的定量。
台盼蓝染色只需3-5分钟即可完成，并且操作非常简单。
实验步骤：1、配制4%台盼蓝母液：称取4g台盼蓝，加少量蒸馏水研磨，加双蒸水至100ml，用滤纸过滤，4℃保存。
使用时用PBS稀释至 %。
2、胰酶消化贴壁细胞，制备单细胞悬液，并作适当稀释。
3、染色：细胞悬液与%台盼蓝溶液以9:1混合混匀。
（终浓度%）4、计数：在3分钟内，分别计数活细胞和死细胞。
5、镜下观察，死细胞被染成明显的蓝色，而活细胞拒染呈无色透明状。
6、统计细胞活力：活细胞率（%）= 活细胞总数/（活细胞总数+死细胞总数）×100%注意：1.保存条件：室温保存。
2.有潜在致癌危险，实验时穿实验服并戴一次性手套和口罩操作。
临床医学检验考试技术(士)(习题卷67)
临床医学检验考试技术(士)(习题卷67)说明：答案和解析在试卷最后第1部分：单项选择题，共100题，每题只有一个正确答案,多选或少选均不得分。
1.[单选题]以下哪一类型的急性非淋巴细胞白血病容易浸润组织A)M1B)M3C)M4D)M2E)M52.[单选题]鲍曼不动杆菌的培养特性有A)在血平板上产生清晰的β-溶血环B)42℃可生长C)在血平板上菌落较小D)产生色素E)形成边缘不整齐的菌落3.[单选题]不是自身免疫性疾病特征的是A)多数病因不明B)男性居多C)有遗传倾向D)疾病有重叠现象E)女性发病率较高4.[单选题]不属于Ⅳ型变态反应的是A)结核菌素实验B)麻风患者皮肤的肉芽肿形成C)接触性皮炎D)重症肌无力E)同种异体间的移植排斥反应5.[单选题]独特型与抗独特型网络调节的最终效应是A)抑制抗体产生B)维持抗体产生C)促进抗体产生D)产生循环免疫复合物E)产生免疫效应6.[单选题]红细胞膜结构及变形与何者有关（ ）A)G-6-PDB)PKE)以上都是7.[单选题]筛查急性心肌梗死的蛋白标志物是A)cTnlB)cTnTC)MbD)LDH4E)CK8.[单选题]关于尿蛋白干化学法测定，可能导致假阴性的原因为A)患者服用奎宁药物B)患者服用嘧啶药物C)尿中含有大量聚乙烯D)尿中含有大量磷酸盐E)滴注大量青霉素9.[单选题]原发性血小板减少性紫癜的特征，下列哪项是正确的A)临床出血症状常见于皮肤和粘膜B)外周血血小板减少C)血小板表面结合有抗血小板抗体D)血小板寿命缩短E)以上都是10.[单选题]MCV↑、RDW↑，常见的疾病是A)再生障碍性贫血B)轻型地中海性贫血C)缺铁性贫血D)巨幼细胞性贫血E)骨髓增生异常综合征11.[单选题]下列关于医学模式的说法，哪一项是错误的( )A)20世纪下半叶开始，医学模式由生物医学模式逐渐转变为生物-心理-社会医学模式B)生物医学模式认为任何一种疾病都可在器官、细胞或生物大分子上找到可测量的、形态的或化学的改变C)医学模式向生物-心理-社会医学模式的转变在本质上反映了医学道德的进步D)生物医学模式是建立在近代生物学、化学、物理学和社会实践基础之上的医学模式E)生物医学模式对人类健康、疾病的认识是片面的，没有对医学起推动作用12.[单选题]HBV感染后第一个出现的血清学标志物是A)HBeAgB)HBeAbC)HBsAgD)HBsAbE)HBcAb13.[单选题]关于台盼蓝染色方法说法不正确的是A)细胞活力测定最简便常用的方法是台盼蓝染色法B)台盼蓝是一种阳离子型染料C)活细胞不着色D)死细胞着蓝色14.[单选题]在某凝血功能障碍患者血浆中加入足量组织因子和Ca后血浆凝固时间明显较正常人延长，该患者可能缺乏下列哪种物质（ ）A)CaB)因子ⅫC)因子ⅧD)血小板E)因子Ⅴ15.[单选题]为保证培养结果的准确性，尿菌定量培养应注意A)在应用抗菌药物之后立即取尿标本B)停用抗菌药物2天后再取尿标本C)24小时尿液均可采用D)留取尿液前先清洗尿道外口，再取前段尿E)宜取清晨第一次尿标本，并在1小时内接种培养16.[单选题]衣原体与其他微生物的不同点是A)有由黏肽组成的细胞壁B)严格的细胞内寄生C)有独特的发育周期D)对抗生素敏感E)能通过细菌滤器17.[单选题]1分子葡萄糖无氧酵解时净生成几分子三磷酸腺苷（ATP）A)1B)2C)3D)4E)518.[单选题]关于免疫性血小板减少性紫癜的说法错误的是A)血小板会减少B)骨髓中巨核细胞正常或增多C)血清中存在抗血小板抗体D)继发性免疫性血小板减少性紫癜无明显诱因E)特发性免疫性血小板减少性紫癜无明显诱因19.[单选题]成熟红细胞的平均寿命为A)120天B)60天C)80天D)100天E)50天20.[单选题]肾移植排斥反应时试带法检测白细胞的结果多为阴性，其原因是A)尿液中白细胞以中性粒细胞增高为主C)尿液中白细胞以巨噬细胞增高为主D)尿液中白细胞以淋巴细胞增高为主E)尿液中白细胞以嗜酸性粒细胞增高为主21.[单选题]抗原抗体形成明显沉淀物的条件是A)抗体多于抗原B)抗原多于抗体C)抗原抗体的质量D)抗原抗体比例合适E)增浊剂的浓度22.[单选题]核质比的正确定义是A)胞核的直径与细胞的直径之比B)胞核的半径与细胞的半径之比C)胞核的半径与细胞质幅缘之比D)胞核的直径与细胞质幅缘之比E)胞核的直径与细胞的半径之比23.[单选题]使血红素在微粒体中转变为胆绿素的酶是A)过氧化物酶B)加单氧酶C)细胞色素氧化酶D)胆绿素氧化酶E)胆绿素还原酶24.[单选题]绦虫的节片是从A)成节长出来的B)从卵生长出来C)孕节长出来的D)头节的颈部长出来的E)幼节长出来的25.[单选题]分离结合态与游离态放射性标记抗原不完全时会增加A)精确度B)反应速率C)特异性结合量D)敏感度E)非特异性结合量26.[单选题]不常用于细菌研究的动物是A)小白鼠B)豚鼠C)恒河猴D)家兔E)大白鼠27.[单选题]不属于自身免疫性溶血性贫血特点的是A)体内出现抗红细胞自身抗体B)抗人球蛋白试验阳性C)红细胞寿命缩短E)多继发于淋巴系统恶性病、结缔组织病、感染和药物应用后28.[单选题]急性病毒性肝炎时最敏感的酶学指标是A)ASTB)ALTC)CHED)TBAE)m-AST29.[单选题]初步鉴别肠杆菌种致病菌及非致病菌的试验是A)葡萄糖发酵试验B)吲哚试验C)甲基红试验D)乳糖发酵试验E)枸橼酸盐利用试验30.[单选题]下列均为钩虫引起宿主贫血的原因，除外的是A)虫体活动造成的组织或血管损伤B)钩虫吸血时分泌抗凝血物质C)宿主脾功能亢进D)频繁更换咬附部位，使伤口慢性失血E)钩虫吸血后血液又迅速经其消化道排出31.[单选题]关于氰化高铁血红蛋白转化液的毒性问题，以下哪项是错误的A)有一定毒性，因含氰化钾B)集中处理可用漂白粉除毒C)在农村中特别要注意不可倒入鱼池D)废液不能与酸性溶液混合E)上述浓度100ml即可致死32.[单选题]下列哪种尿经加热后浑浊可消失A)脓尿B)菌尿C)乳糜尿D)尿酸盐结晶尿E)碳酸盐结晶尿33.[单选题]在正常人肠道中数量最多的细菌是A)大肠埃希菌B)结核分枝杆菌C)百日咳杆菌D)无芽胞厌氧菌E)肺炎链球菌34.[单选题]经肝细胞加工后的胆红素称A)非结合胆红素B)胆汁酸C)结合胆红素D)胆汁E)总胆红素35.[单选题]关于机会致病菌引起医院感染率上升原因的叙述，错误的是A)抗生素的广泛使用B)免疫抑制剂的广泛使用C)侵入性检查和治疗操作的增多D)诊疗技术增多E)缺乏理想疫苗36.[单选题]贫血患者血片示红细胞大小不等、中心淡染；血清铁饱和度16%。
细胞染色专题之一：台盼蓝
细胞染色专题之一：台盼蓝台盼蓝（Trypan Blue，也称Direct blue 14）：一种死细胞染色用色素化学名：3,3'-{[3,3'-Dimethyl(1,1'-biphenyl)-4,4'-diyl]bis(azo)}bis(5-amin o-4-hydroxy-2,7-naphthalenedisulfonic acid), tetrasodium salt3,3’-{[3,3’-二甲基-(1,1’-二苯基)-4,4’-二基]双(偶氮)}-双(5-氨基-4-羟基-2,7-萘二磺酸)，四钠盐分子式：C34H24N6Na4O14S4分子量：960.81CAS Number： 72-57-1外观：黑褐色结晶粉末摩尔吸光度：>69,000(在606nm附近)染色原理：细胞损伤或死亡时，台盼蓝可穿透变性的细胞膜，与解体的DNA 结合，使其着色。
而活细胞能阻止染料进入细胞内。
故可以鉴别死细胞与活细胞。
严格来说，台盼蓝染色检测的是细胞膜的完整性，通常认为细胞膜丧失完整性，即可认为细胞已经死亡。
这被称为染料排除测试（dye exclusion），Erythrosin B(红色)、negrosine、eosin Y、AO和EB也用于此目的。
通过显微镜很容易就能识别出死亡的被台盼蓝染色的细胞，并可使用细胞计数器进行计数。
溶于水，可以配制成10mg/ml的水溶液，水溶液呈深蓝色。
台盼蓝主要用来鉴定原代培养细胞时,细胞分离后的存活情况，用0.4%台盼蓝直接染色5-10分钟，在显微镜下观察即可。
应用于细胞凋亡：如果细胞膜不完整、破裂，台盼蓝染料进入细胞，细胞变蓝，即为坏死。
如果细胞膜完整，细胞不为台盼蓝染色，则为正常细胞或凋亡细胞。
尽管在凋亡的早期到中期检测是很困难的，此方法对反映细胞膜的完整性，区别坏死细胞有一定的帮助。
储存条件：常温保存注意事项：1. 台盼蓝对人体有毒2. 台盼蓝染细胞时，时间不宜过长。
台盼蓝染色实验原理和步骤
台盼蓝染色实验原理
台盼蓝（Trypan Blue) 是细胞活性染料，常用于检测细胞膜的完整性，还常用于检测细胞是否存活。
活细胞不会被染成蓝色，而死细胞会被染成淡蓝色。
分子式：C34H24N6O14S4Na4，分子量: 960.82，可溶于水（10mg/ml)。
实验原理：正常的活细胞，胞膜结构完整，能够排斥台盼蓝，使之不能够进入胞内；而丧失活性或细胞膜不完整的细胞，胞膜的通透性增加，可被台盼蓝染成蓝色。
通常认为细胞膜完整性丧失，即可认为细胞已经死亡。
因此，借助台盼蓝染色可以非常简便、快速地区分活细胞和死细胞。
台盼蓝是组织和细胞培养中最常用的死细胞鉴定染色方法之一。
注意凋亡小体也有台盼蓝拒染现象。
台盼蓝染色后，通过显微镜下直接计数或显微镜下拍照后计数，就可以对细胞存活率进行比较精确的定量。
台盼蓝染色只需3-5分钟即可完成，并且操作非常简单。
实验步骤：
1、配制4%台盼蓝母液：称取4g台盼蓝，加少量蒸馏水研磨，加双蒸水至100ml，用滤纸过滤，4℃保存。
使用时用PBS稀释至
0.4 %。
2、胰酶消化贴壁细胞，制备单细胞悬液，并作适当稀释。
3、染色：细胞悬液与0.4%台盼蓝溶液以9:1混合混匀。
（终浓度0.04%）
4、计数：在3分钟内，分别计数活细胞和死细胞。
5、镜下观察，死细胞被染成明显的蓝色，而活细胞拒染呈无色透明状。
6、统计细胞活力：活细胞率（%）= 活细胞总数/（活细胞总数+死细胞总数）×100%
注意：
1.保存条件：室温保存。
2.有潜在致癌危险，实验时穿实验服并戴一次性手套和口罩操作。
台盼兰染色肿瘤细胞化学药物敏感实验的临床应用价值
台盼兰染色肿瘤细胞化学药物敏感实验的临床应用价值杨伟雄;钟华;李定明;林翠芬;谢静誉;张奕文;邱泽成【期刊名称】《河北医学》【年(卷),期】2008(014)001【摘要】目的:寻找一种简便、易行、费用低廉的肿瘤细胞化疗药物敏感实验方法,并用于指导临床用药.方法:对60例大肠癌患者的癌细胞进行体外有药培养,然后通过台盼兰染色检测细胞活动性的有关指标,确定最佳药物及组合,对病人进行化疗.追踪病人的生存率.结果:实验组的1、2、3、5年生存率分别为96%,83%,70%,43%.对照组的1、2、3、5年生存率分别为93%,73%,60%,33%.具有显著的差异.结论:①该法是一种简便、易行、费用低廉的肿瘤化疗药物敏感实验方法.②该法是具有临床指导价值的方法.【总页数】3页(P1-3)【作者】杨伟雄;钟华;李定明;林翠芬;谢静誉;张奕文;邱泽成【作者单位】广东省茂名市人民医院,广东,茂名,525000;广东省茂名市人民医院,广东,茂名,525000;广东省茂名市人民医院,广东,茂名,525000;广东省茂名市人民医院,广东,茂名,525000;广东省茂名市人民医院,广东,茂名,525000;广东省茂名市人民医院,广东,茂名,525000;广东省茂名市人民医院,广东,茂名,525000【正文语种】中文【中图分类】R730.5【相关文献】1.台盼兰染色小鼠胚泡着床点的观察研究 [J], 谭毅;韦克;顾美礼;王智彪2.小鼠胚胎生活力台盼兰染色鉴定的研究 [J], 李碧春;李厚达3.应用台盼兰行膜染色的PVR性视网膜脱离手术 [J], Nawrocki J;Michalewska Z;Michalewski J;王永强4.用台盼兰—姬姆萨染色检测家畜精子顶导反应的研究 [J], 张嘉保;董伟5.应用台盼兰拒染法与MTT法判断Cr(Ⅵ)细胞毒性的比较 [J], 贾光;刘世杰因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
台盼蓝染色实验原理和步骤
台盼蓝染色实验原理之勘阻及广创作台盼蓝（Trypan Blue) 是细胞活性染料，经常使用于检测细胞膜的完整性，还经常使用于检测细胞是否存活。
活细胞不会被染成蓝色，而死细胞会被染成淡蓝色。
分子式：C34H24N6O14S4Na4，分子量: 960.82，可溶于水（10mg/ml)。
实验原理：正常的活细胞，胞膜结构完整，能够排斥台盼蓝，使之不克不及够进入胞内；而丧失活性或细胞膜不完整的细胞，胞膜的通透性增加，可被台盼蓝染成蓝色。
通常认为细胞膜完整性丧失，即可认为细胞已经死亡。
因此，借助台盼蓝染色可以非常简便、快速地区分活细胞和死细胞。
台盼蓝是组织和细胞培养中最经常使用的死细胞鉴定染色方法之一。
注意凋亡小体也有台盼蓝拒染现象。
台盼蓝染色后，通过显微镜下直接计数或显微镜下拍照后计数，就可以对细胞存活率进行比较精确的定量。
台盼蓝染色只需3-5分钟即可完成，而且操纵非常简单。
实验步调：1、配制4%台盼蓝母液：称取4g台盼蓝，加少量蒸馏水研磨，加双蒸水至100ml，用滤纸过滤，4℃保管。
使用时用PBS稀释至0.4%。
2、胰酶消化贴壁细胞，制备单细胞悬液，并作适当稀释。
3、染色：细胞悬液与0.4%台盼蓝溶液以9:1混合混匀。
（终浓度0.04%）4、计数：在3分钟内，分别计数活细胞和死细胞。
5、镜下观察，死细胞被染成明显的蓝色，而活细胞拒染呈无色透明状。
6、统计细胞活力：活细胞率（%）= 活细胞总数/（活细胞总数+死细胞总数）×100%注意：1.保管条件：室温保管。
2.有潜在致癌危险，实验时穿实验服并戴一次性手套和口罩操纵。
抗肿瘤药物体内筛选试验标准操作规程(SOP)之欧阳与创编
抗肿瘤药物体内筛选标准操作规程概述：抗肿瘤药物是指能够直接杀伤或抑制肿瘤细胞生长或增殖的一类药物，作用机制包括抑制肿瘤细胞核酸或蛋白质的合成、干扰大分子物质代谢、干扰微管系统、抑制拓扑异构酶等。
本操作规程包括与抗肿瘤药物申请临床试验和申请上市有关的非临床有效性和安全性研究的内容，其中着力强调非临床有效性和安全性之间的关联性，以及非临床研究和临床试验之间的关联性。
旨在一方面为抗肿瘤药物的非临床研究提供技术参考；另一方面，通过技术要求引导科学有序的研发过程，使国内此类药物的研发更趋规范和合理。
本操作规程仅代表目前对抗肿瘤药物非临床研究的一般性认识。
具体药物的非临床研究应在本指导原则的基础上，根据药物的自身特点制订研究方案。
研究目的：建立一套包括抗肿瘤药物体内作用的药效学研究和评价体系及相应的标准操作规程以及抗肿瘤药物安全性和作用新机制的研究。
①有效性研究抗肿瘤药物有效性研究的目的主要在于探索受试物的作用机制、作用强度、抗瘤谱等，为之后的安全性评价以及临床试验中适应症、给药方案的选择提参考信息。
②安全性评价安全性评价的目的主要包括：（1）估算 I 期临床试验的起始剂量；（2）预测药物的毒性靶器官或靶组织；（3）预测药物毒性的性质、程度和可逆性；（4）为临床试验方案的制订提供参考。
研究计划：(a)小鼠急性毒性测试按照急性毒性测试的常规方法，选用昆明种小鼠，通过腹腔注射方式给药，测定体外抗肿瘤活性突出的化合物的半数致死量（LD50），参考给药小鼠体重变化情况，评价化合物的急性毒性，并确定小鼠体内抗肿瘤活性测试的给药剂量。
(b)小鼠体内抗肿瘤活性测试根据动物体内抗肿瘤活性测试的标准方法，选用昆明种小鼠，皮下接种肉瘤S180或肺癌H22瘤株，选择体外活性突出且急性毒性较低的化合物，设定合适的剂量通过腹腔注射方式给药，以临床常用抗肿瘤药物环磷酰胺作为阳性对照药物，测定肿瘤生长抑制作为体内活性评价指标。
(c)专利保护范围内的化合物的继续合成申请保护范围较大的专利，合成部分可能具有良好活性的新的化合物，拓展研究范围，发现活性更强的化合物，并申请新的发明专利。
台盼蓝染色实验原理和步骤
台盼蓝染色实验原理
台盼蓝Trypan Blue 是细胞活性染料,常用于检测细胞膜的完整性,还常用于
检测细胞是否存活;活细胞不会被染成蓝色,而死细胞会被染成淡蓝色;分子式：C34H24N6O14S4Na4,分子量: ,可溶于水10mg/ml;
实验原理：正常的活细胞,胞膜结构完整,能够排斥台盼蓝,使之不能够进入胞内；而丧失活性或细胞膜不完整的细胞,胞膜的通透性增加,可被台盼蓝染成
蓝色;通常认为细胞膜完整性丧失,即可认为细胞已经死亡;因此,借助台盼蓝
染色可以非常简便、快速地区分活细胞和;台盼蓝是组织和中最常用的死细胞
鉴定染色方法之一;注意也有台盼蓝拒染现象;台盼蓝染色后,通过显微镜下或
显微镜下拍照后计数,就可以对细胞进行比较精确的定量;台盼蓝染色只需3-5分钟即可完成,并且操作非常简单;
实验步骤：
1、配制4%台盼蓝：称取4g台盼蓝,加少量蒸馏水研磨,加至100ml,用滤纸过滤,4℃保存;使用时用PBS稀释至 %;
2、胰酶消化贴壁细胞,制备单细胞悬液,并作适当稀释;
3、染色：细胞悬液与%台盼蓝溶液以9:1混合混匀;终浓度%
4、计数：在3分钟内,分别计数活细胞和死细胞;
5、镜下观察,死细胞被染成明显的蓝色,而拒染呈无色透明状;
6、统计细胞活力：活细胞率%= 活细胞总数/活细胞总数+死细胞总数×100%注意：
1.保存条件：室温保存;
2.有潜在致癌危险,实验时穿实验服并戴一次性手套和口罩操作;。
台盼兰染色法在30株皮肤真菌药敏试验中的应用效果分析
台盼兰染色法在30株皮肤真菌药敏试验中的应用效果分析发表时间：2014-07-24T10:52:25.700Z 来源：《中外健康文摘》2014年第20期供稿作者：石德柱[导读] 抗真菌药物的体外药敏试验是测定药物对致病真菌的敏感程度、及杀灭效力。
实验结果对指导临床用药有重要价值。
石德柱（江苏省赣榆县金山镇卫生院检验科 222115）【摘要】目的：验证台盼兰染色法在真菌药物敏感试验中的应用效果。
方法：分别测定特比萘芬和伊曲康唑对30株临床常见皮肤癣菌的最低抑菌浓度和最低杀菌浓度值。
其中最低杀菌浓度值的测定用台盼兰染色法与常规培养法进行比较。
结果: 特比萘芬对皮肤藓菌的最低抑菌浓度值与最低杀菌浓度值相同，为0.001—0.004ug/ml。
结论：特比萘芬有抑菌和杀菌的双重作用。
台盼兰染色法具有方便、快捷的特点，对于判断真菌的活性及评价抗真菌药物的MBC较常规方法更为优越，值得进一步推广应用。
【关键词】台盼兰染色真菌药敏感试验 MIC(最低抑菌浓度) MBC(最低杀菌浓度)【中图分类号】R75 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085（2014）20-0180-02 抗真菌药物的体外药敏试验是测定药物对致病真菌的敏感程度、及杀灭效力。
实验结果对指导临床用药有重要价值。
体外药敏实验用来常规测定最低抑菌浓度和最低杀菌浓度。
但常规方法实验时间较长。
由于台盼兰染色法只能使丧失活性的真菌着色，因此用台盼兰染色法与常规最低杀菌浓度值测定进行对照:一方面用来验证台盼兰染色在药敏中的应用及测定药物的最低杀菌浓度值可行性，另一方面用来比较此法测定抗真菌药物的最低抑菌浓度和最低杀菌浓度值的浓度有无差别来测试抗真菌药物的效力。
１材料与方法1.1.1 药品来源：(1)特比萘芬（纯品），山东齐鲁药厂提供。
（2）伊曲康唑（纯品）西安扬森药厂提供。
1.1.2 菌株来源：江苏省赣榆县人民医院检验科真菌实验分离致病菌株共30株皮肤癣菌。
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台盼 兰 染 色 肿 瘤 细 胞 化 学 药 物敏 感 实 验 的 Ｉ 临床 应 用 价 值
杨 伟 雄 ， 钟 华 ， 李 定 明 ， 林 翠 芬 ， 谢 静 誉 ， 张 奕 文 ， 邱 泽 成
（ 东 省 茂 名 市 人 民 医 院 ， 广 东 茂 名 ５ ５ ０ 广 ２ ０ ０） 摘 要 ： 目的 ： 寻找 一种 简便 、 易行 、 费用低廉 的肿 瘤细胞化 疗药物敏 感 实验方 法 ， 用于指 导临 并
床 用 药。方 法 ： ６ 对 Ｏ例 大 肠 癌 患 者 的 癌 细 胞 进 行 体 外 有 药 培 养 ， 后 通 过 台 盼 兰 染 色检 测 细 胞 活 动 然
性 的 有 关 指 标 ， 定 最 佳 药 物 及 组 合 ， 病 人 进 行 化 疗 。 追 踪 病 人 的 生 存 率 。 结 果 ： 验 组 的 １ ２、 、 确 对 实 、 ３５
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第ｌ卷 第 １ ４ 期 ２０ ０ ８年 １月
河 北 医 学
ＨＥＢ ＩＭＥ Ｉ Ｉ Ｅ Ｄ Ｃ ＮＥ
Ｖｏ ． ４， ． １ １ Ｎｏ １
Ｊ ｎ．，０ ８ ａ ２０
文 章 编 号 ：０ ６－ ２ ３ ２ｏ ）ｌ－ ０ —０ １０ ６ ３ （ｏ ８ ｏ ｏ １ ３
Ａ ｓｒｃ ： ｊｃｉｅ Ｔ ｅｐ ｒｏｅｏ ｉ ａｔ ｌ ｉ ｔ ｆ ｄ ａｓ ｌ，ｅｓ ｎ ｏ —ｃｓ ｔ ｒｃｌ ｂ ｔａ ｔ Ｏｂｅｔ ： ｈ ｕｐｓ ｆｔ ｓ ｒｃｅ ｓ ｏｉ ｉ ｅ ａｙａ ｄｌ ｖ ｈ ｉ ｎ ｍｐ ｗ ｏｔ ｕ ｅ ｍｏ ｌ
ｃ ｅ ｓ ｎ ｉ ｖｔ ｓ ａ ，ｔ ｅ ｕ ｄｎ ｈ ｓ ｆ ｌ ｉ ａ ｄ ｃ ｎ ｓ ｈ ｍｏ ｅ ｓｔ ｉ ａ ｓ ｙ ｈ ｎ ｇ ｉ ｉ ｇ ｔ ｅ ｕ ｅ ｏ ｉ ｃ ｌ ｉ ｙ ｃｎ ｍｅ ｉ ｉ ｅ ．Ｍ ｅ ｈ ｄ：Ｔ ｅ ｃ ｎ ｅ ｅｌ ｆ ０ ｃ ｓ ｓｏ ｔｏ ｈ ａ ｃ ｒｃ９ ％ ， ３ ，０ ， ３ 。 对 照 组 的 １ ２ ３ ５年 生 存 率 分 别 为 ９ ％ ， ３ ，０ ， ３ 。 ６ ８％ ７％ ４ ％ 、、 、 ３ ７ ％ ６ ％ ３％ 具 有 显 著 的 差 异 。 结 论 ： 该 法 是 一 种 简便 、 ① 易行 、 用 低 廉 的 肿 瘤 化 疗 药 物 敏 感 实 验 方 法 。 ② 该 法 费
是 具 有临床 指 导价值 的 方法 。
关 键 词 ： 台盼 兰 ； 肿瘤 细胞 ； 化 疗 药物 ； 药敏 试 验 ； 临床 应 用
中图 分 类 号 ： Ｒ７０ ５ ３ ． 文献标识码 ： Ａ
Ｃｌ ｉ ａ ｌ ｅ ｏ ｙ ａ ｕ ｌ ｒｎ ｅ ｈ ｄ ｉ ｍ ｏ ｌ ｉ ｃ ｌＶａ ｕ ｆ Ｔｒ ｐ ｎ Ｂｌ ｅ Ｃｏ ｏ ｉ ｇ Ｍ ｔ ｏ ｎ Ｔｕ ｎ ｒ Ｃｅ ｌ Ｃｈ ｍ ｏ ｅ ｓｔｖ ｔ ｓ ｙ ｅ ｓ ｎ ｉ ｉｙ Ａｓ ａ ｉ
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