生物化学实验

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生物化学实验

生物化学实验

⽣物化学实验实验⼀1、糖类的颜⾊反应1. α-萘酚反应糖在浓⽆机酸(硫酸或盐酸)作⽤下,脱⽔⽣成糠醛及糠醛衍⽣物,后者能与α-萘酚⽣成紫红⾊物质。

注意:因糠醛及糠醛衍⽣物对此反应均呈阳性,不是糖类的特异反应。

2. 间苯⼆酚反应在酸作⽤下,酮糖脱⽔⽣成羟甲基糠醛,后者再与间苯⼆酚作⽤⽣成红⾊物质。

此反应是酮糖的特异反应。

因为醛糖在同样条件下呈⾊反应缓慢,只有在糖浓度较⾼或煮沸时间较长时,才呈微弱的阳性反应。

2、还原作⽤许多糖类由于其分⼦中含有⾃由的或潜在的醛基或酮基,因此在碱性溶液中能将铜、铁、银等⾦属离⼦还原,同时糖类本⾝被氧化成糖酸及其他产物。

糖类这种性质常被利⽤于检测糖的还原性及还原糖的定量测定。

本实验所⽤的试剂为斐林试剂和本尼迪克特试剂。

它们都是Cu2+的碱性溶液,能使还原糖氧化⽽本⾝被还原成红⾊(颗粒⼤)或黄⾊(颗粒⼩)的Cu2O沉淀。

实验⼆脂肪碘值的测定碘值(价)是指100g脂肪在⼀定条件下吸收碘的克数。

碘值是鉴别脂肪的⼀个重要常数,可⽤以判断脂肪所含脂肪酸的不饱和程度。

脂肪中常含有不饱和脂肪酸,不饱和脂肪酸具有⼀个或多个双键,能与卤素起加成作⽤⽽吸收卤素。

常⽤碘与脂肪中不饱和脂肪酸的双键起加成作⽤。

脂肪的不饱和程度越⾼,所含的不饱和脂肪酸越多,与其双键起加成作⽤的碘量就越多,碘值就越⾼。

故可⽤碘值表⽰脂肪的不饱和度。

I2+-CH=CH--CHI-CHI-本实验⽤溴化碘(Hanus试剂)代替碘。

⽤⼀定量(必须过量)溴化碘和待测的脂肪作⽤后,⽤硫代硫酸钠滴定的⽅法测定溴化碘的剩余量,然后计算出待测脂肪吸收的碘量,求得脂肪的碘值。

加成作⽤:IBr+-CH=CH--CHI-CHBr-剩余溴化碘中碘的释放:IBr + KI KBr + I2再⽤硫代硫酸钠滴定释放出来的碘:I2 +2Na2S2O3 2Na2S4O6+2NaI思考题:何谓空⽩溶液和空⽩实验?空⽩实验有何意义?在各种分析⽅法中,为消除⼲扰,⽤与测定试样时完全⼀致的条件进⾏测定的溶液。

生物化学实验

生物化学实验

生物化学实验一、糖的颜色反应及还原作用实验一:糖的颜色反应实验1.1 莫氏实验一、目的掌握莫氏(molisch)实验鉴定糖的原理和方法。

二、原理糖经浓无机酸(浓硫酸、浓盐酸)脱水产生糠醛或糠醛衍生物,后者在浓无机酸作用下,能与α-萘酚生成紫红色缩合物,在糖液和浓硫酸的液面间形成紫环,因此又称“紫环反应”,其反应如下图:利用这一性质可以鉴定糖。

三、实验器材1、棉花或滤纸。

2、吸管1.0ml(*4)、2.0ml(*1)。

3、试管1.5*15cm(*4)。

四、实验试剂1、莫氏试剂:称取α-萘酚5g,溶于95%乙醇并稀释至100ml。

此试剂需新鲜配置,并贮于棕色试剂瓶中。

2、1%蔗糖溶液:称取蔗糖1g,溶于蒸馏水并定容至100ml。

3、1%葡萄糖溶液:称取葡萄糖1g,溶于蒸馏水并定容至100ml.4、1%淀粉溶液:讲1g可溶性淀粉与少量冷蒸馏水混合溶液合成薄浆状物,然后缓缓倾入沸蒸馏水中,边加边搅。

最后以沸蒸馏水稀释至100ml。

五、操作于4支试管中,分别加入1ml1%葡萄糖溶液、1%蔗糖溶液、1%淀粉溶液和少许纤维素(棉花或滤纸浸在1ml水中)。

然后各加莫氏试剂2滴1,摇匀,讲试管倾斜,沿管壁慢慢加入浓硫酸1.5ml(切勿振摇!)硫酸层沉于试管底部与糖溶液分成两层,观察液面交界处有无紫色环出现。

六、注意事项1、试管中加入各种糖后,应做好标记,浓硫酸加入的方式应保持一致。

2、莫氏反应非常灵敏,所用的试剂应洗净,不可再样品中混入纸屑等杂物。

3、当糖浓度过高时,由于浓硫酸对他的焦化作用,将呈现红色及褐色而不呈现紫色,需稀释后再做。

思考题:1、解释α-苯酚反应的原理。

2、用莫氏试验鉴定糖时需注意哪些?试验1.2 塞氏试验一、目的掌握塞氏(Seliwanoff)实验鉴定酮糖的原理和方法。

二、原理酮糖在浓酸的作用下,脱水生产5-羟甲基糠醛,后者与间苯二酚作用,呈红色反应,有时亦同时产生棕色沉淀,此沉淀溶于乙醇,呈鲜红色沉淀2,以果糖为例,其反应如下:三、实验器材1、吸管0.5ml(*3)、5.0ml(*1)。

生物化学实验

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2、氨基酸溶液0.5%的赖氨酸、脯氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸、亮氨酸溶液及它们的混合液(各组份浓度均为0.5%)。各5mL
3、显色剂50~100mL
1.1%水合茚三酮正丁醇溶液。
五、操作
1.将盛有平衡溶剂的小烧杯置于密闭的层析缸中。
2.取层析滤纸(长22cm、宽14 cm)一张。在纸的—端距边缘2~3cm处用用铅笔划一条直线,在此直线上每间隔2cm作一记号如图。
5.显色用喷雾器均匀喷上O.1%茚三酮正丁醇溶液,然后置烘箱中烘烤5分钟(100℃)或用热风吹干即可显出各层析斑点。
6.计算各种氨基酸的只Rf值。
思考题
1、何谓纸层析法?
2、何谓片Rf值?影响Rf值的主要因素是什么?
3、怎样制备扩展剂?
4、层析缸中平衡溶剂的作用是什么?
实验二小麦萌发前后淀粉酶活力的比较
实验一纸层析法分离鉴定氨基酸
一、目的
通过氨基酸的分离,学习纸层析法的基本原理及操作方法。
二、原理
纸层析法是用滤纸作为惰性支持物的分配层析法。
层析溶剂由有机溶剂和水组成。
物质被分离后在纸层析图谱上的位置是用Rf值(比移)来表示的:

在一定的条件下某种物质的只Rf值是常数。Rf值的大小与物质的结构、性质、溶剂系统、层析滤纸的质量和层析温度等因素有关。本实验利用纸层析法分离氨基酸。
休眠种子的淀粉酶活力很弱,种子吸胀萌动后,酶活力逐渐增强,并随着发芽天数增加而增加。
本实验观察小麦种子萌发前后淀粉酶活力的变化。
三、器材
1.25mL刻度试管 2. 吸管
3.离心管 4.乳钵
5.分光光度计 6.恒温水浴
7.离心机
四、试剂和材料
1、小麦种子
2、o.1%标准麦芽糖溶液

生物化学实验报告

生物化学实验报告

生物化学实验报告实验目的,通过本次实验,掌握生物化学实验的基本方法和技能,了解生物化学实验的原理和应用,提高实验操作能力和实验结果分析能力。

实验原理,生物化学实验是利用生物化学原理和方法,对生物体内的化学成分和代谢过程进行研究的实验。

其中包括蛋白质、核酸、酶、碳水化合物等生物分子的分离、鉴定和定量分析。

实验材料和仪器,本次实验所需材料包括,蛋白质、核酸、酶、碳水化合物等生物分子样品;试剂,酚酞、硫酸、氢氧化钠、蛋白质定性试剂、酶定性试剂等;仪器,分光光度计、离心机、电泳仪、显微镜等。

实验步骤:1. 蛋白质的定性实验,取少量蛋白质样品,加入蛋白质定性试剂,观察颜色变化并记录结果。

2. 核酸的定性实验,取少量核酸样品,加入核酸定性试剂,观察颜色变化并记录结果。

3. 酶的定性实验,取少量酶样品,加入酶定性试剂,观察反应情况并记录结果。

4. 碳水化合物的定性实验,取少量碳水化合物样品,加入酚酞试剂,观察颜色变化并记录结果。

5. 生物分子的定量分析,利用分光光度计、离心机、电泳仪等仪器,对生物分子进行定量分析。

实验结果分析,根据实验结果,可以对样品中的蛋白质、核酸、酶、碳水化合物等生物分子进行鉴定和定量分析,从而了解生物体内的化学成分和代谢过程。

实验结论,通过本次实验,掌握了生物化学实验的基本方法和技能,了解了生物分子的定性和定量分析方法,提高了实验操作能力和实验结果分析能力。

实验意义,生物化学实验是生物化学理论与实践相结合的重要环节,通过实验可以加深对生物化学原理和方法的理解,为今后的科研工作和实验教学提供了重要的基础。

在本次实验中,我们不仅学会了生物分子的定性和定量分析方法,还培养了实验操作能力和实验结果分析能力,为今后的科研工作和实验教学打下了良好的基础。

通过本次实验,我们对生物化学实验的原理和应用有了更深入的了解,提高了实验操作能力和实验结果分析能力,为今后的科研工作和实验教学打下了良好的基础。

生物化学实验

生物化学实验

生物化学实验一、糖的颜色反应及还原作用实验一:糖的颜色反应实验1.1 莫氏实验一、目的掌握莫氏(molisch)实验鉴定糖的原理和方法。

二、原理糖经浓无机酸(浓硫酸、浓盐酸)脱水产生糠醛或糠醛衍生物,后者在浓无机酸作用下,能与α-萘酚生成紫红色缩合物,在糖液和浓硫酸的液面间形成紫环,因此又称“紫环反应”,其反应如下图:利用这一性质可以鉴定糖。

三、实验器材1、棉花或滤纸。

2、吸管1.0ml(*4)、2.0ml(*1)。

3、试管1.5*15cm(*4)。

四、实验试剂1、莫氏试剂:称取α-萘酚5g,溶于95%乙醇并稀释至100ml。

此试剂需新鲜配置,并贮于棕色试剂瓶中。

2、1%蔗糖溶液:称取蔗糖1g,溶于蒸馏水并定容至100ml。

3、1%葡萄糖溶液:称取葡萄糖1g,溶于蒸馏水并定容至100ml.4、1%淀粉溶液:讲1g可溶性淀粉与少量冷蒸馏水混合溶液合成薄浆状物,然后缓缓倾入沸蒸馏水中,边加边搅。

最后以沸蒸馏水稀释至100ml。

五、操作于4支试管中,分别加入1ml1%葡萄糖溶液、1%蔗糖溶液、1%淀粉溶液和少许纤维素(棉花或滤纸浸在1ml水中)。

然后各加莫氏试剂2滴1,摇匀,讲试管倾斜,沿管壁慢慢加入浓硫酸1.5ml(切勿振摇!)硫酸层沉于试管底部与糖溶液分成两层,观察液面交界处有无紫色环出现。

六、注意事项1、试管中加入各种糖后,应做好标记,浓硫酸加入的方式应保持一致。

2、莫氏反应非常灵敏,所用的试剂应洗净,不可再样品中混入纸屑等杂物。

3、当糖浓度过高时,由于浓硫酸对他的焦化作用,将呈现红色及褐色而不呈现紫色,需稀释后再做。

思考题:1、解释α-苯酚反应的原理。

2、用莫氏试验鉴定糖时需注意哪些?试验1.2 塞氏试验一、目的掌握塞氏(Seliwanoff)实验鉴定酮糖的原理和方法。

二、原理酮糖在浓酸的作用下,脱水生产5-羟甲基糠醛,后者与间苯二酚作用,呈红色反应,有时亦同时产生棕色沉淀,此沉淀溶于乙醇,呈鲜红色沉淀2,以果糖为例,其反应如下:三、实验器材1、吸管0.5ml(*3)、5.0ml(*1)。

生物化学的实验技术有哪些

生物化学的实验技术有哪些

生物化学的实验技术有哪些生物化学是一门研究生物体化学组成和生命过程中化学变化的学科,实验技术在生物化学的研究中起着至关重要的作用。

以下为您介绍一些常见的生物化学实验技术。

一、分光光度法分光光度法是一种基于物质对光的吸收特性来定量分析物质浓度的方法。

在生物化学中,常用于测定蛋白质、核酸、酶等生物大分子的浓度。

例如,通过测量蛋白质在 280nm 处的吸光度,可以估算蛋白质的浓度。

分光光度法操作简便、快速,且灵敏度较高。

二、电泳技术电泳是指带电粒子在电场中向与其所带电荷相反的电极移动的现象。

在生物化学中,常用的电泳技术有琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳。

琼脂糖凝胶电泳常用于分离和分析 DNA 片段,根据 DNA 片段的大小不同,在凝胶中移动的速度不同,从而实现分离。

聚丙烯酰胺凝胶电泳则常用于分离蛋白质,能够分辨分子量差异较小的蛋白质。

三、层析技术层析技术是利用混合物中各组分在固定相和流动相之间的分配系数不同,从而实现分离的方法。

常见的层析技术有凝胶过滤层析、离子交换层析、亲和层析等。

凝胶过滤层析根据分子大小进行分离,大分子先流出,小分子后流出。

离子交换层析基于分子所带电荷的不同来分离物质。

亲和层析则利用生物分子之间的特异性亲和力进行分离,具有很高的选择性。

四、离心技术离心是利用离心机旋转产生的离心力,使不同密度、大小的颗粒分离的技术。

在生物化学实验中,常用于分离细胞器、细胞组分、蛋白质复合物等。

差速离心通过逐渐提高离心速度,分步沉淀不同大小的颗粒。

密度梯度离心则是在离心管中形成密度梯度,使不同密度的颗粒在相应的密度区带中沉降,从而实现分离。

五、PCR 技术(聚合酶链式反应)PCR 技术是一种用于扩增特定 DNA 片段的分子生物学技术。

通过高温变性、低温退火和适温延伸的循环过程,使 DNA 片段呈指数级扩增。

PCR 技术在基因诊断、基因克隆、基因突变检测等方面有着广泛的应用。

六、酶联免疫吸附测定(ELISA)ELISA 是一种利用抗原抗体特异性结合进行检测的技术。

常见的生物化学实验方法

常见的生物化学实验方法

常见的生物化学实验方法生物化学实验是研究生物分子结构、功能和相互作用的重要手段,广泛应用于生物医学研究、药物开发和环境保护等领域。

本文将介绍一些常见的生物化学实验方法。

一、色谱技术色谱技术是一种分离和分析物质的方法,根据分子的化学性质和大小差异,将混合物分离成各个组分。

常见的色谱技术包括气相色谱(GC)、液相色谱(LC)和薄层色谱(TLC)等。

在生物化学实验中,色谱技术常用于对生物样品中的分子进行纯化和分析。

例如,气相色谱可用于分析氨基酸和脂肪酸等小分子化合物,液相色谱则可以用于分离蛋白质、核酸和多糖等生物大分子。

二、电泳技术电泳技术是利用电场作用下物质的电荷和大小差异,将混合物分离成各个组分的方法。

常见的电泳技术包括聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)、聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和凝胶过滤电泳等。

在生物化学实验中,电泳技术常用于分离和检测蛋白质和核酸等生物大分子。

例如,聚丙烯酰胺凝胶电泳可用于分离和测定蛋白质分子量,SDS-PAGE则可以用于检测蛋白质的纯度。

三、质谱技术质谱技术是利用质量分析仪器对物质的质量和结构进行分析的方法。

常见的质谱技术包括质谱仪、飞行时间质谱(TOF-MS)和液相色谱质谱联用(LC-MS)等。

在生物化学实验中,质谱技术常用于鉴定和定量生物分子。

例如,利用质谱仪可以对蛋白质进行鉴定,通过测定样品中蛋白质的质量和碎片离子的质量谱图,确定蛋白质的氨基酸序列。

四、核酸杂交技术核酸杂交技术是利用互补的DNA或RNA序列进行结合,从而检测目标序列的方法。

常见的核酸杂交技术包括Southern blot、Northernblot和in situ hybridization等。

在生物化学实验中,核酸杂交技术常用于检测和定量特定DNA或RNA序列的存在。

例如,Southern blot可用于检测DNA片段在基因组中的分布和拷贝数,Northern blot则可用于检测特定mRNA的表达水平。

生物化学实验

生物化学实验
(1)温度对α-淀粉酶活性的影响 取3支试管,编号,各加入0.5%可溶性淀粉溶液3mL,分别置于冰水浴,37℃水浴及沸水浴中,保温5min,各缓缓加入1mLα-淀粉酶稀释液(试管勿从水浴中取出)继续保温5min,取出37℃水浴及沸水浴中试管置于冰水浴中冷却后,各加入碘—碘化钾溶液约1mL,比较各管颜色,并解释之。
(二)样品蛋白质浓度的测定 待测样品必须进行适当的稀释,使每毫升中含有0.5mg左右的蛋白质,才能进行测定。 该过程至少重复两次或平行测定两次。
7200分光光度计的使用
四、结果处理
固体样品中蛋白质含量=m’×Vm/Vn×1/m×10-3×100% 式中m′——由标准曲线查到的样品的蛋白质含量(mg) Vn ——用于显色的样品体积(ml) Vm —— 样品稀释后的体积(ml) m ——样品的质量(g)
三、操作方法
1. 样品制备 称取粉碎过40目筛的(玉米)样品2.50 g(精确至0.01 g)放入100 mL锥形瓶中; 沿器壁缓慢加入50 mL l%的盐酸溶液,并轻轻摇动使全部样品润湿; 将锥形瓶放入沸水浴中,预热3min,在沸水中准确加热15min; 立即取出,迅速冷却至室温。
2.样品测定 先加1 mL30%的硫酸锌溶液,充分混匀; 再加入1 mL亚铁氰化钾溶液,摇匀并全部转 移至 100 mL容量瓶中,用少量蒸馏水将锥形瓶冲洗几次; 若泡沫过多,加几滴无水乙醇消泡; 用蒸馏水定容至刻度; 混匀后过滤,弃去初始滤液15 mL,收集其余滤液 充分混匀; 进行旋光测定。
四、结果处理 皂化值=
式中 VA—空白瓶盐酸用量(mL); VB—样品瓶盐酸用量(mL); m—油脂的质量(g)。
五、思考题
1. 上式中(VA - VB )的含义是什么? 2. 试列出由皂化值计算油脂相对分子质量的公式。

生物化学实验

生物化学实验
1. 定糖法 DNA 和二苯胺试剂加热反应,有蓝色物质生成, 595nm检测含量;RNA与地衣酚试剂加热反应,有绿色物质 生成,670nm检测含量 2. 定磷法 各种含磷有机物经水解消化成为无机磷。在酸性条件 下,与钼酸盐(常用钼酸铵或钼酸钠)反应生成磷钼酸盐络 合物。用还原剂处理,磷钼酸盐络合物被还原生成钼蓝,在 660nm处有最大光吸收峰。在一定浓度范围内,颜色的深浅 与 磷 含 量 成 正 比 关 系 。 ( 纯 RNA 含 磷 质 量 分 数 9.0% ; DNA9.2%) 3. 紫外吸收法 嘌呤环和嘧啶环的共轭双键系统具有光学特性, 最大吸收峰在260nm,因此DNA和RNA都具有紫外光吸收能 力。蛋白质含有芳香族氨基酸,也能吸收紫外光(280nm), 纯净 RNA 在 260nm 和 280nm 处吸收值的比值在 2.0 以上,纯 净的DNA在260nm和280nm吸收值的比值在1.8左右。
Q3:在测酶活力时应注意哪些反应条件?为什么?
A3: (1)保持最适温度。因为随着温度的升高,酶促反应速率 加快;但当温度过高时,又会使酶变性失活,酶促反应速率 反而会下降。只有在最适温度时反应速率最大。 ( 2 )选择最适 pH 。在此 pH 时酶活性最大,过高或过低, 酶活力会降低。 (3)底物浓度应足够大,保证酶可以完全被底物饱和结合。 (4)酶量应小于底物浓度,否则反应体系底物不足,发生 有的酶分子尚不能发挥作用,酶浓度与酶促反应速率不成正 比。 (5)添加激活剂。有些酶需要激活剂,有激活剂条件下酶 才体现有活力。 (6)去除抑制剂。抑制剂会抑制酶活性,使酶活力偏低。
Q5:举例说明为什么一般不用质量单位表示酶量? A5:催化活性是酶的一个独特属性,酶蛋白质再多,纯度 再高,如果没有活性,则是毫无意义的。因此在表示酶量 时,一般不用质量单位,而是用活力单位表示。如有一种 酶制剂,在最适条件下,每分钟能催化1微摩尔底物转化为 产物所需要的酶量是 0.5 微克那么 5 微克酶制剂含有 10U , 用“10U/5微克酶”比用5微克酶更能反映酶量。

生物化学实验3篇

生物化学实验3篇

生物化学实验第一篇:分离和纯化酶酶是一种具有催化作用的蛋白质,在生物化学研究中具有重要意义。

为了研究酶的性质和机制,需要对酶进行分离和纯化。

一、酶的分离方法1.分离基于酶的物理性质的方法,包括沉淀法、沉降法、过滤法和电泳法等。

2.基于酶的化学性质进行分离的方法,包括离子交换色谱法、凝胶过滤法、亲和层析法和扩散法等。

二、酶的纯化方法酶纯化的目的是通过不同的技术方法消除干扰因素,获得特异性高和纯度高的酶。

酶纯化一般通过以下步骤完成:1.初步分离:选择一种合适的分离方法(如沉淀法、凝胶过滤法或离子交换色谱法等),使酶从细胞或组织中分离出来。

2.活性测定:确定所分离出的物质是否为酶。

3.酶的纯化:经过不断的纯化步骤(如扩散法、凝胶层析法、电泳法、亲和层析法等),获得特异性高和纯度高的酶。

4.酶的结构与功能分析:对纯化后的酶进行结构与功能分析,探索其催化机理和调控机制。

三、酶的应用酶在生命科学和工业生产中应用广泛,主要应用包括:1.生命科学领域:用于疾病诊断、药物设计、基因工程、蛋白质工程和代谢组学等研究。

2.工业生产领域:用于食品加工、医药生产、纺织印染、制浆造纸、环境治理和能源生产等领域。

总之,酶的分离和纯化为酶的结构与功能分析和应用提供了基础。

随着生命科学和工业生产的不断发展,酶的应用前景日益广阔。

第二篇:酶催化反应酶是一种生物催化剂,能够加速生物化学反应,提高反应速率和效率。

酶催化反应的基本原理是:酶与底物结合,形成酶底物复合物,通过降低反应的活化能,促进反应速率,使底物转化成产物,最终释放出酶和产物。

具体而言,酶催化反应通常包括以下步骤:1.酶与底物的结合:酶与底物之间形成酶底物复合物,通常通过酶和底物之间的亲和性实现。

2.转化过渡态形成:酶催化的反应需要一定的能量(活化能)才能进行。

酶通过与底物结合,改变底物的构象,使底物转化成具有更高自由能的过渡态。

3.过渡态降解:在过渡态中,酶通过结构变化(催化中心的变化)降低了催化反应的活化能,促进了底物的转化,并释放出产物和酶。

生物化学实验内容(一)

生物化学实验内容(一)

生物化学实验内容(一)引言概述:生物化学实验是在生物化学领域中进行的实验研究,主要涉及生物分子的结构和功能、生物代谢、生物反应等方面的内容。

本文将介绍生物化学实验的一些基本内容。

正文:一、生物分子结构1. 研究生物大分子(如蛋白质、核酸、多糖)的结构与功能。

2. 分析生物分子的化学组成、序列和空间结构。

3. 制备和纯化生物分子样品,如蛋白质表达与纯化。

4. 应用分子生物学技术(如基因工程)对生物分子进行改造。

5. 测定生物分子在生物系统中的定位和互作关系。

二、生物代谢1. 研究生物的能量转换过程,如糖酵解、脂肪酸代谢等。

2. 测定生物体内代谢产物的生成量及速率。

3. 研究酶的活性、底物特异性及反应机制。

4. 探索代谢途径的调控机制,如信号转导通路等。

5. 应用同位素示踪技术研究代谢途径和产物的动力学变化。

三、生物反应1. 研究生物反应的动力学和热力学特性。

2. 研究酶促反应的速率与底物浓度、酶浓度等之间的关系。

3. 利用酶反应测定生物样品中特定分子的含量。

4. 研究药物与生物分子的相互作用。

5. 测定酶的抑制剂和激活剂对酶反应速率的影响。

四、生物分析技术1. 应用色谱技术对生物化学分子进行分离与分析。

2. 应用质谱技术鉴定和定量生物分子。

3. 应用光谱技术探究生物分子的结构和功能。

4. 应用电泳技术测定生物分子的大小、电荷和形态。

5. 应用生物传感器技术检测生物分子的存在和浓度。

五、生物化学实验安全与伦理1. 遵守实验室安全操作规范,保证实验人员的安全。

2. 尊重生物材料的来源和使用权益,遵守伦理规范。

3. 危险试剂的储存、处理和废物处理。

4. 生物实验的风险评估与危害控制。

5. 遵守相关法律法规,保护实验对象和环境安全与健康。

总结:生物化学实验内容涵盖了生物分子结构、生物代谢、生物反应、生物分析技术以及实验安全与伦理等方面的研究。

这些实验内容不仅促进了对生物化学领域的深入理解,还为疾病治疗、药物研发等方面的应用提供了重要的基础。

化学生物学的实验技术

化学生物学的实验技术

化学生物学的实验技术化学生物学是一门融合了化学和生物学知识的交叉学科,通过研究生物体内化学反应的规律性和机制,揭示生物现象背后的化学过程。

在化学生物学研究中,实验技术是至关重要的工具。

本文将介绍化学生物学领域常用的实验技术,包括分子生物学实验技术、生物化学实验技术和细胞生物学实验技术。

一、分子生物学实验技术1. PCR技术PCR(Polymerase Chain Reaction)是一种在体外复制DNA片段的技术。

通过PCR技术,可以快速扩增DNA序列,用于基因克隆、DNA测序、基因变异分析等领域。

PCR技术是分子生物学实验中常用的方法之一。

2. 基因克隆技术基因克隆是将DNA片段插入载体DNA中,并在细胞中复制的过程。

通过基因克隆技术,科研人员可以研究基因的功能、调控机制以及相关疾病的发生机制。

3. 基因编辑技术基因编辑技术是指通过特定的工具,如CRISPR/Cas9系统,对目标基因进行精准编辑。

这项技术在分子生物学研究和基因治疗领域有着广泛的应用。

二、生物化学实验技术1. 蛋白质纯化技术蛋白质纯化是生物化学实验中的重要环节,通过不同的分离方法,如柱层析、电泳等,可以获得高纯度的蛋白质样品,用于研究蛋白质的结构和功能。

2. 激酶活性测定技术激酶是生物体内的一类重要酶类,参与调控细胞信号传导。

通过测定激酶的活性,可以了解其在细胞信号通路中的功能和作用机制,为药物研发和疾病治疗提供依据。

三、细胞生物学实验技术1. 细胞培养技术细胞培养是细胞生物学的基础实验技术之一,通过在细胞培养基中培养细胞系,可以进行各种细胞学实验,如细胞增殖、细胞凋亡等研究。

2. 免疫荧光染色技术免疫荧光染色技术是在细胞或组织中标记特定蛋白质或细胞器的方法,通过荧光显微镜观察,可以了解细胞内蛋白的定位和表达水平,为细胞功能研究提供依据。

综上所述,化学生物学的实验技术覆盖了分子生物学、生物化学和细胞生物学等多个学科领域,这些实验技术的发展与应用推动了化学生物学的研究进展,为新药研发、疾病治疗和生命科学领域的发展做出重要贡献。

生物化学实验内容

生物化学实验内容

生物化学实验内容生物化学是生物学和化学的交叉学科,研究生物体内化学物质的结构、组成和功能。

生物化学实验是在实验室中进行的一系列实验操作,旨在探索和研究生物分子的性质和功能。

本文将介绍一些常见的生物化学实验内容。

一、酶活性测定实验酶是生物体内的重要催化剂,参与体内的各种代谢过程。

酶活性测定实验通常使用底物和酶反应,通过测定产物的生成量或者底物消失量来评估酶活性。

例如,可以通过测定过氧化氢酶催化过氧化氢脱氢生成水和氧气的速率来评估过氧化氢酶的活性。

二、蛋白质定性与定量实验蛋白质是生物体内重要的生物大分子,参与体内的结构、功能和代谢过程。

蛋白质定性实验通常使用染色剂或者化学试剂与蛋白质反应,形成有色或者可见的沉淀或者出现其他特征。

例如,可以使用布鲁法试剂与蛋白质反应形成布鲁法蓝沉淀来定性蛋白质。

蛋白质定量实验常用的方法包括比色法、光谱法和比浊法等。

其中,比色法通常利用Bradford试剂与蛋白质反应生成紫色复合物,通过测定紫色复合物的吸光度来定量蛋白质的含量。

三、核酸提取与分析实验核酸是生物体内携带遗传信息的重要分子,参与遗传物质的复制和传递。

核酸提取和分析实验是研究基因组和遗传变异的重要手段。

核酸提取通常使用有机溶剂或者商用提取试剂盒进行,提取得到的核酸可以用于后续的PCR扩增、酶切、测序等实验。

四、酶电泳实验酶电泳是通过电场作用下的蛋白质的迁移速率差异来分离和鉴定酶的一种方法。

它常用于研究酶的同工酶谱、判定酶的活性、分析酶催化作用等。

常用的酶电泳方法包括聚丙烯酰胺凝胶电泳、聚丙烯酰胺-SDS凝胶电泳等。

五、免疫检测实验免疫检测实验是通过体外检测抗原-抗体特异性相互作用来检测抗原或者抗体的存在和数量的一种方法。

常见的免疫检测实验包括酶联免疫吸附实验(ELISA)、西方印迹、免疫荧光等。

这些实验方法广泛应用于生物医学研究、临床诊断等领域。

以上仅是生物化学实验中的一部分内容,实际的生物化学实验还包括分子生物学、细胞生物学、代谢物分析等多个领域。

生物化学实验内容3篇

生物化学实验内容3篇

生物化学实验内容实验一:糖类的定性和定量分析糖类是重要的生物分子之一,无论是在生物体内还是在工业领域都有着重要的应用。

本实验旨在通过定性和定量分析糖类的实验,让学生了解糖类的性质和分析方法。

实验一、糖类的定性实验材料:葡萄糖、果糖、麦芽糖、蔗糖、淀粉、碘液、硝酸银、硫酸、苯酚、NaOH、酚酞指示剂步骤:1.将葡萄糖、果糖、麦芽糖、蔗糖、淀粉各取一份,用水溶解。

2.取5ml的各种糖溶液于试管中,加入2滴苯酚,再加入1ml NaOH溶液和1滴酚酞指示剂,观察是否变色。

3.将1ml的碘液加入每种糖溶液中,观察反应结果。

4.将1ml的硝酸银溶液加入每种糖溶液中,放置后观察反应结果。

结果分析:1.苯酚试剂可以检测出葡萄糖和果糖的存在,经反应产物为红褐色。

2.加入碘液后,葡萄糖和淀粉溶液会呈现出蓝色复合物;果糖溶液则无反应;麦芽糖和蔗糖溶液则会出现棕色沉淀。

3.加入硝酸银溶液后,蔗糖会产生白色沉淀,而麦芽糖和淀粉则无明显反应。

实验二、糖类的定量实验材料:葡萄糖溶液、NaOH溶液、硫酸、费林试剂步骤:1.将试样称取10mg,加入5ml的NaOH溶液,在沸水浴中加热10min,冷却后将pH值调节至7-8。

2.将所有试剂进行融合,称取0.1g的硫酸和0.5g的费林试剂,放入10ml的水中混合均匀。

3.加入数滴试样到试剂溶液中,混合均匀后沸腾2min,冷却后去除浮渣并将溶液转移到5ml容量瓶中。

4.在溶液中加入几滴酚酞指示剂,并用2.5%NaOH溶液滴加,直至出现红色,记录加滴量。

结果分析:1.根据加入NaOH溶液的体积和试样的含量,可以计算出糖类物质的浓度。

2.费林试剂可以与糖类发生反应,生成物质的深度颜色与糖的含量成正比。

实验三、酵母的发酵过程酵母是一类单细胞真菌,可以通过发酵过程产生乙醇和二氧化碳。

本实验旨在观察酵母在不同条件下的发酵过程,了解发酵原理和条件对发酵有何影响。

材料:酵母、果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、发酵管、氢氧化钠溶液、氢氧化钠的饱和的饱和的水解液、试剂瓶、称瓶步骤:1.称取3g酵母溶解在50ml水中。

生物化学实验

生物化学实验

(3)磷酸 取一支试管,加入2mL水解液, 然后加入5滴硝酸银和1mL钼酸 铵溶液后,在沸水浴中加热, 观察有无黄色磷钼酸铵沉淀
实验现象及结果分析
取新鲜橘子皮2g制作样液 标准液滴定:2,6-二氯酚靛1.8ml,滴定终点 样液滴定:第一次1.4ml,第二次1.6ml
1. 用铅笔将层析色谱轮廓和 中心点描出来; 2. 测量原点至色谱中心和至 溶剂前沿的距离,计算各种已 知氨基酸和未知氨基酸的Rf值。 3. 分析混合样品中未知氨基 酸的组分。
探究温度对淀粉酶活性的影响 放置于0度、室温、沸 水中的试管,分别呈 淡紫色、无色、深紫 色。
探究ph对淀粉酶活性的影响
pH 5.0、 5.8 、6.8 、8.0
1. 盐析:取一支试管加入3ml蛋白质氯化钠溶液和3m1饱和硫酸铵溶液,混匀,静置 约10 min,球蛋白则沉淀析出,倒出少量混浊沉淀,加少量水。观察现象,加水前后 如图1,2所示
图1
图2
2. 重金属离子沉淀蛋白质:取1支试管,加入蛋白质溶液2ml,再加3%硝酸银溶液12滴,振荡管,有沉淀产生。放置片刻,倾去上清液,沉淀中加入少量的水,观察现 象,加水前后如图3,4所示
卵磷脂的提取与纯化: 黄色油状物加入3~5 mL氯仿搅
拌使其完全溶解,然后搅拌下慢 慢加入10 mL丙酮,搅动使卵磷脂 尽量析出,抽滤,得固体物质卵 磷脂
三甲胺试验:
取制得的卵磷脂一部分放
入试管中加入10%氢氧化钠 2ml,在100℃水浴上加热 闻到鱼腥味
钼酸铵试验: 取干净试管一支,加入
10滴上述滤液,加入10滴 95%乙醇,摇匀,再加入10 滴钼酸铵试剂,观察现象; 最后将试管放入热水浴中 加热5~10min,有刺激性 气味产生。
图3

常用的生物化学实验方法

常用的生物化学实验方法

常用的生物化学实验方法
一、蛋白质实验:
1、放射免疫分析:是一种应用放射性标记物,用易位法来研究物质在生物体中的含量或位置的分析技术。

2、免疫结合的沉淀反应:通过将靶蛋白质与抗原特异性抗体结合并沉淀,在溶解液中分离和定量靶蛋白质的重要方法。

3、Blood-Brain Barriers Permeability:使用半乳糖或单糖的报告系统检测血脑屏障的渗透性,可以预测视网膜色素上皮毛细血管的渗透性调节作用。

4、 Western blotting:通过将细胞中表达的蛋白质组分整合到一起,电泳后标记抗原,并通过免疫检测来检测其表达情况和定量的技术。

5、 Northern blotting:使用报告物和抗体来检测RNA分子在细胞中分布,并用于检测RNA的表达水平及分析调控机制的重要技术。

二、细胞实验:
1、细胞培养:将活细胞从器官细胞中分离,学习细胞的结构、功能及调控原理的一种重要实验方法。

2、细胞归性实验:通过把特定细胞分离并重新植入到胚胎中,分析器官结构中各细胞归性状态,研究细胞及组织的发育调控机制的实验。

3、生物因子实验:一种研究因子介导的细胞凋亡和细胞分化、细胞迁移的行为的生物实验技术。

4、细胞膜荧光素酶报告系统:结合细胞膜转运蛋白的荧光素酶报告系统,可以在实验条件下测定细胞的膜质电位和其余两类离子通道。

5、FACS 实验:通过测定细胞表面抗原,进行一个抗原一个细胞的分类,从而对细胞作出正确评估和定位,分析细胞状态变化及其相关表型的技术。

高中生物化学实验大全

高中生物化学实验大全

高中生物化学实验大全实验1:酶的活性测定实验目的:通过测定不同条件下酶的活性来了解酶的特性和作用机制。

实验原理:利用酶对底物的催化作用产生的颜色变化来测定酶的活性。

酶活性与酶分子的浓度、底物浓度、温度等因素有关。

实验步骤:1. 准备好不同底物和酶的浓度。

2. 将不同条件下的底物和酶混合,并在适当的温度下反应一定的时间。

3. 根据反应后产生的颜色变化,利用分光光度计测定吸光度。

4. 分析吸光度数据,计算酶的活性。

实验结果与讨论:根据测定的吸光度数据,可以得出不同条件下酶的活性。

通过对结果的分析,可以得出酶浓度、底物浓度、温度等因素对酶活性的影响。

实验2:酵母发酵产生二氧化碳实验目的:观察酵母在发酵过程中产生的二氧化碳气泡。

实验原理:酵母菌能利用底物中的糖类产生能量,在发酵过程中产生二氧化碳气泡。

实验步骤:1. 取一烧杯,加入适量的温水和砂糖,搅拌均匀溶解。

2. 将酵母粉加入烧杯中,并轻轻搅拌均匀。

3. 在烧杯口上盖上气球,并等待几分钟。

4. 观察气球是否膨胀,记录观察结果。

实验结果与讨论:根据观察结果,可以看到酵母在发酵过程中产生了二氧化碳气泡。

这是因为酵母能利用糖类底物产生能量,并产生二氧化碳气体作为副产品。

......(继续编写更多生物化学实验)......以上是一份高中生物化学实验大全的简介,其中包含了酶的活性测定和酵母发酵产生二氧化碳等实验内容。

这些实验可以帮助学生深入了解生物化学的基本原理和实验技巧。

希望对您有所帮助!。

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生物化学实验(二)绪论▪随着生物化学的发展和生物化学教学内容的不断丰富,生物化学实验也在不断更新和提高。

▪本门课程在以往教学工作的基础上,结合生物化学实验教学,力求使学生能够更加深刻地学习生物化学课程。

本实验课实验项目覆盖了当今生物化学研究中常用的技术和方法。

绪论一、实验目的▪掌握蛋白质、酶、核酸、糖等重要物质的分离、纯化和测定技术的原理及方法;▪掌握生物化学的基本知识、基本理论及基本实验技能;▪培养分析和解决问题能力以及严谨细致的科学作风、创新能力等综合素质。

▪二、通过生物化学实验应该做到▪学习设计一个实验的基本思路,掌握各个实验的基本原理,学会严密地组织自己的实验,合理地安排实验步骤和时间。

▪训练实验的动手能力,学会熟练地使用各种生物化学实验仪器。

▪学会准确翔实地记录实验现象和数据的技能,提高实验报告的写作能力,能够整齐清洁地进行所有的实验。

▪掌握生物化学的各种基本实验方法和实验技术,尤其是各种电泳技术和层析枝术,为今后参加科研工作打下坚实的基础。

▪三、实验室规则▪1、自觉遵守学习纪律,保持实验室肃静,不得喧哗吵闹、迟到早退。

▪2、爱护仪器,厉行节约。

试剂、药品、蒸馏水等应节约使用,不得浪费。

如不慎损坏仪器,应及时报告老师,说明原因;贵重、精密仪器,应先熟悉使用方法,在老师的指导下,严格按操作规程操作;发现故障,应立即报告老师,不得擅自处理。

仪器使用完毕后,一定要填写使用记录。

绪论▪3、取用试剂时,应仔细辨明标签,以免取错。

取完试剂后,应及时将瓶盖盖好,放回原处,切忌乱拿乱放。

▪4、注意安全。

对于有毒、腐蚀的试剂应避免其直接接触人体及衣物;乙醚、丙酮等易燃试剂应远离火源,以免发生意外。

▪5、注意实验室卫生、整洁。

废弃液体应倒入水槽,实验用过的和棉花、废纸、沉淀废渣及其他废弃物品等均应放入指定容器,不得随意乱扔。

实验结束后应将实验台整理好,并清扫、整理实验室。

关好水、电、门、窗,方可离开实验室。

绪论▪四、实验须知▪1、实验前应作好预习,认真阅读实验指导。

明确学习目标,能简述实验内容及主要的操作步骤。

▪2、实验过程中,应根据实验指导及老师的要求,认真操作,细心观察,如实记录。

严禁捏造实验数据,提倡实事求是的科学态度,杜绝弄虚作假。

▪3、实验结束后,将实验原始数据填写到实验报告册中的原始数据栏,并当场交给老师批阅。

回去后要认真书写实验报告,及时交老师批阅。

绪论—五实验记录与实验报告1、实验记录实验前写好实验预习报告(钢笔和园珠笔)。

实验中应及时准确地记录所观察到的现象和测量的数据。

(直接填写到实验报告册的原始数据栏) 实验记录要注意有效数字,如吸光度值应为“0.050”,而不能记成“0.05”。

所有数据都应如实记录,不得随意涂改。

实验中要详细记录实验条件,如使用的仪器型号、编号、生产厂等;生物材料的来源、试剂的规格、试剂的浓度等。

杜绝一切抄袭和弄虚作假现象,一旦发现后果自负。

绪论—五实验记录与实验报告▪2、实验报告▪实验预习报告包括如下内容:①实验项目名称;②详细实验目的、原理;③实验操作步骤;④注意事项。

▪实验报告包括如下内容:①实验项目名称;②简写实验目的、原理;③实验结果;④分析与讨论;⑤注意事项等。

实验一激活剂和抑制剂对酶活力的影响▪一、目的▪了解激活剂和抑制剂对酶活力的影响,掌握淀粉酶活性鉴定的方法。

实验一激活剂和抑制剂对酶活力的影响▪二、原理▪酶的活性受某些物质的影响,有些物质能增加酶的活性,称为激活剂;而另一些物质则降低酶的活性,称为抑制剂。

▪Cl-是唾液淀粉酶的激活剂。

而Cu+为抑制剂。

将淀粉与酶相混,作用一段时间后,淀粉被水解,遇碘不显蓝色,酶活力强,需时短,酶活力弱,需时长,故可用反应时间表示酶活力的强弱。

实验一激活剂和抑制剂对酶活力的影响▪四、实验器材▪1、0.1%淀粉液:称取可溶性淀粉0.1克,先用少量水加热调成糊状,再加热水稀释至100ml.▪2、1%的氯化钠溶液:1gNaCl溶于100ml 蒸馏水▪3、1%硫酸铜溶液:1gCuSo4溶于100ml 蒸馏水▪4、稀碘液:于2%碘化钾溶液中加入碘至淡黄色。

实验一激活剂和抑制剂对酶活力的影响▪五、操作▪取试管3支,按表1编号并加入试剂。

加毕,摇匀,同时置40℃水浴保温,每隔2min 取液体1滴置白瓷板上用碘液试之,哪支管液最先不呈现蓝色,哪支管次之,说明原因。

0.1%淀粉液/ml 1%的氯化钠溶液/ml 1%硫酸铜溶液/ml H2O/ml 1:30唾液/ml 1 2.0 1.0------ 1.02 2.0---- 1.0-- 1.03 2.0-------- 1.01.0管号试剂实验一激活剂和抑制剂对酶活力的影响▪六、实验注意事项▪1、实验过程中试剂取量一定要保证一致性,同时一定要认真观察实验现象,不能漏过实验颜色的变化点。

▪2、要正确找到反应终点,并记下相应反应时间。

▪3、要在预热2min后加入唾液,并在加入唾液后马上记时。

实验二、可溶性糖的薄层层析分离与定量鉴定▪一、目的和要求▪1.了解并初步掌握吸附层析的原理。

▪2.学习薄层层析的一般操作及定性与定量鉴定的方法。

▪3.学习提取植物材料中可溶性糖的一般方法,并学会简易薄板的制作实验二、可溶性糖的薄层层析分离与定量鉴定▪二、原理▪1、植物组织中的可溶性糖可用一定浓度的乙醇提取出来,经除去杂质,即可获得较纯的可溶性糖混合物。

▪▪二、原理▪2、薄层层析是层析法的一种,层析法是利用被分离样品混合物中各组分的物理,化学差别,使各组分以不同程度分布在两个“相”中,这两个相通常使一个被固定在一定的支持物上的,称为固定相;另一个是移动的,称为流动相;▪当流动相流过固定相时,在移动过程中由于各组分在两相中的分配情况不同,或吸附性质不同,或电荷分布不同,或离子亲和力不同等,而以不同速度前进,从而达到分离的目的。

▪二、原理▪3、薄层层析是一种快速而微量的层析方法,它是将一种固定支持物均匀地涂在薄板上,对物质进行层析的方法。

▪本实验只讨论吸附薄层层析,即所有支持物是吸附剂(如硅胶粉),层析时,主要是根据吸附剂对样品中各组分的吸附能力不同,因此个组分的移动速度不同,从而达到分离混合物的目的。

▪二、原理▪4、糖为多羟基化合物,具有较强的极性,在硅胶G薄板上展层时,糖与硅胶分子有一定的吸附力。

▪硅胶分子与糖的吸附能力大小取决于糖的分子量和羟基数目,造成各种糖分子在展层过程中移动的距离不同,从而将各种糖分离出来。

▪一般吸附力的大小为:三糖>双糖>己糖>戊糖。

其中各种糖移动的速率可用Rf值表示。

通过与标准糖的Rf值比较。

即可鉴定出植物组织提取液中糖的种类。

实验二、、可溶性糖的薄层层析分离与定量鉴定▪二、原理▪5、R f计算公式:▪溶质斑点中心到样点的距离▪R f(值)=溶剂前沿到点样点的距离▪▪三、实验材料、仪器和试剂▪1.材料:苹果或其他植物材料▪2.仪器:(1)离心机及离心管(2)天平(3)研钵(4)量筒25ml(5)移液管10ml(6)恒温水浴(7)毛细管(8)层析缸(9)吹风机(10)玻璃板:7×15cm(11)烘箱(12)喷雾器(13)烧杯50ml,100ml铅笔、尺子▪三、实验材料、仪器和试剂▪3.试剂▪(1)无水酒精▪(2)氯仿:冰醋酸:水,配比为30:35:5▪(3)1%标准糖溶液(10mg/ml):木糖、葡萄糖、果糖、蔗糖等。

▪(4)苯胺-二苯胺-磷酸显色剂:2克二苯胺,加2ml苯胺,10ml85%磷酸,1ml浓HCl,100ml 丙酮,溶后摇匀。

▪(5)0.1M硼酸溶液▪四、操作▪1.水果中可溶性糖提取液的制备▪1.1取洗净的苹果(或其他水果)削去果皮,称8g果肉在研钵中研成匀浆后,倒在四层洗净的纱布上。

包起臵于漏斗,用干净玻璃棒将果汁压出。

▪1.2取果汁2ml于离心管中,加无水乙醇6ml,充分混匀后,在3000转/分下离心20分钟,上清夜即为可溶性糖提取液。

实验二、、可溶性糖的薄层层析分离与定量鉴定▪四、操作▪2.苹果提取液中可溶性糖的分离鉴定▪2.1点样取活化后的硅胶G板一块,距底边1.5厘米水平线上确定4个点,相互间隔1厘米,其中3个点,分别点上5%的木糖、葡萄糖、蔗糖标准溶液数滴,另一点点上苹果提取液数滴,一般点4次。

▪2.2展层以氯仿:冰醋酸:水展层剂上行展层,当展层前沿达距薄板顶端1.0厘米左右处,取出玻板用吹风机吹干。

▪2.3染色以苯胺-二苯胺-磷酸显色剂喷雾,于85℃烘箱中10分钟,各种糖即显示出不同色斑与标准糖比较,观察各点的颜色。

▪2.4计算根据斑点颜色及Rf值即可初步鉴定出苹果提取液中所存在的可溶性糖的种类。

▪四、操作▪3.板的制备:▪3.1 玻璃板须表面平整、光滑、清洁。

用洗涤液浸泡,洗净,晾干,否则吸附剂容易剥落。

▪3.2 取硅胶G粉2克,加0.1M硼酸溶液4.5ml于研钵中充分研磨成糊状时,倾倒在薄板上,然后用手轻轻倾斜玻璃板,使糊状吸附剂在整块板上分布均匀,表面平坦光滑。

▪3.3 将制好的薄板臵于水平台上自然晾干后,用前于110℃烘箱中活化一小时使用。

▪五、实验注意事项▪1、薄板制备过程中,一定要保证玻璃板干净、干燥且无油渍▪2、薄板制备过程中,加硼酸搅拌及研磨一定要快,要研磨均匀,一般研磨到发出如脂肪光泽时,且要有一定的流动性,立即涂匀为最好▪3、铺好板后,要在水平台上自然晾干,用前于110℃烘箱中活化一小时(时间计算从达110℃开始),但活化时要在低温(60℃左右)时就将板放进烘箱,防止因骤然升温导致硅胶板脱落。

▪五、实验注意事项▪4、在用毛细管点样时,毛细管应垂直于硅胶G板的方向点样,而且毛细管接触G板的时间应尽量短,点样斑点直径一般不宜超过3mm。

▪5、在确定点样位臵时,只需在板上轻轻一点,决不能点得过深,且不能用油笔或钢笔点。

样点位臵一定要高于展层剂层面。

▪6、点样时,要等前一次的样点干燥后,再点下一次,一般每个样点点4次。

▪五、实验注意事项▪7、在进行展层前,要先在层析缸中加入一些层析剂,使整个缸内充满层析剂,以使样品能在一个稳定的环境中进行展层。

▪8、在展层好后,立即用尺量出溶剂前沿距离,不要等到吹干后再量。

▪9、在用吹风机吹干时要注意用小风吹,或者将吹风机离板较远点吹。

▪五、实验注意事项▪10、染色完成后,放臵于烘箱85℃烘时,若烘了10min后有些点还是不显色,可以在记录已显色点的颜色和距离后,继续烘,直至显色为止。

▪11、为了使实验现象明显,提取糖时,宜使糖的浓度高一些。

实验三离子交换柱层析分离氨基酸▪一、目的▪通过实验要求学会装柱、洗脱、收集等离子交换层析技术实验三离子交换柱层析分离氨基酸▪二、原理▪树脂(惰性支持物)结合了阳离子或阴离子后,可与阳离子或阴离子结合。

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